Studie o neuroprotektivním mechanismu Cistanche a Fomitopsis Pinicola na dopaminergních neuronech meziencefalu indukovaných MPP plus

Studie neuroprotektivního mechanismu Cistanche a Fomitopsis Pinicola na dopaminergních neuronech mesencephala indukovaných MPP plus

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Zvýraznění

Fomitopsis Pinicola se vyznačuje antioxidačními, protizánětlivými a imunostimulačními vlastnostmi. V této studii byly ke stanoveníneuroprotektivníúčinky a potenciální mechanismy vodního extraktu Fomitopsis Pinicola na degeneraci dopaminergních neuronů indukovanou MPP plus. Výsledky ukázaly, že vodní extrakt z Fomitopsis Pinicola chránil dopaminové neurony proti MPP plus. Vodní extrakt z Fomitopsis Pinicola vykazoval antioxidační a protizánětlivé účinky. Mechanismusneuroprotektivníúčinek vodního extraktu z Fomitopsis Pinicola může souviset s inhibicí mitochondriálního oxidačního stresu. Nedávné studie ukázaly, ženeuroprotektivníúčinekCistanchedělá z něj „ideálního kandidáta“ pro zlepšení neurologických onemocnění.Cistancheje bohatý na echinakosidy. Výtažek zcistanchebylo prokázáno, že indukuje syntézu nervových růstových faktorů in vivo a in vitro experimenty, podporuje sekreci příbuzných faktorů v mozku a zlepšuje řadu mozkových funkcí souvisejících s pamětí.

Cistanchemáneuroprotektivníefekty

Abstraktní

Cíl: Pozorovatneuroprotektivnímechanismus vodního extraktu Fomitopsis Pinicola na MPP'indukovanou apoptózu mesencefalických dopaminergních buněk in vitro.Metody: Antioxidační aktivita hub byla stanovena metodou FRAP. Protizánětlivá aktivita hub byla detekována metodou uvolňování NO indukovaného LPS. Mesencefalické dopaminergníneuronybyly označeny barvením TH, aby se pozorovalo přežití THirneuronyVýsledky: V testu antioxidační aktivity byla Trolox ekvivalentní antioxidační kapacita (TEAC) vodního extraktu Fomitonsis Pinicola stanovena na (165,80±7,13) umol Trolox/g extrakt Vodní extrakty ošetření Fomitopsis Pimicola (100,50,25 12,5 ug/ml) významně snížilo tvorbu NO. MPP* vyvolal významnou kondenzaci chromatinu v jádrech mezencefalického dopaminergníhoneuronys jadernou lýzou se potenciál mitochondriální membrány výrazně snížil a produkce ROS se významně zvýšila. Ve srovnání s kontrolní skupinou MPPt byly morfologické změny buněčných jader po apoptóze zvráceny vodním extraktem Fomtitonsis Pinicola. Vodní extrakt z léčby Fomitopsis Pinicola (50, 25, 12,5 ug/ml) dramaticky zvýšil relativní mitochondriální membránový potenciál ve srovnání s MPP' kontrolou. Ve srovnání s kontrolou MPPt, vodní extrakt z léčby Fomitonsis Pimicola （50, 25 ug/ml） významně snížil relativní tvorbu ROS, v tomto pořadí, Závěry∶Vodní extrakt Fomitopsis Pinicola vykázal významnouneuroprotektivníúčinek na mesencefalické dopaminergní buňky indukované MPpt, Vodní extrakt z Fomitopsis Pinicola vykazoval antioxidační a protizánětlivé aktivity. Mechanismusneuroprotektivníúčinek vodního extraktu Fomitopsis Pimicola může souviset s inhibicí mitochondriálního oxidačního stresu.Cistancheglykosidy mohou zlepšit úroveň učení a paměti pacientů s Alzheimerovou chorobou, snížit obsah malondialdehydu (MDA) v mozkové tkáni a zvýšit glutathionperoxidázu (GSH). -Px), aktivitu superoxiddismutázy (superoxiddismutázy, SOD), snížení aktivity acetylcholinesterázy (acetylcholinesterázy, TChE), rychlost apoptózy mozkových buněk a snížení akumulace vápníku v mozkové tkáni.

Klíčová slova: Fomitopsis Pimicola, dopaminergníneuronyapoptóza, antioxidant, mitochondriální membránový potenciál, tvorba ROS,Cistanche, Neuroprotektivní

Pozadí

Parkinsonova chorobaje neurodegenerativní onemocnění u lidí, které vážně postihuje zdraví více než 6,5 milionů lidí na celém světě. Prevalence starších osob nad 65 let je asi 1 2 procenta [1, 2]. I když přesná etiologie a patogenezeParkinsonova chorobazůstává nejasné, bylo prokázáno, že oxidační stres je klíčovým faktorem při selektivní degeneraci dopaminergních látekneuronyv nigrostriatálním striatu [3, 4]. Studie ukázaly, že nadměrná produkce Reactive Oxygen Species (ROS) indukuje mitochondriální dysfunkci, včetně sníženého potenciálu mitochondriální membrány (△Ψm) a aktivity enzymů komplexu dýchacího řetězce Ⅰ, stejně jako abnormální mitochondriální DNA [5, 6]. Kromě toho může citlivost a selektivita nigrostriatální dráhy k oxidativnímu stresu také vést k poškození DNA dopaminergníchneuronyu pacientů sParkinsonova choroba [7].

Fenylethanoidní glykosidový extrakt vCistanchedeserticola může významně zlepšit složení 1-methyl-4-fenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridinu, MPTP)-indukovaného PD modelem C57 myší behaviorální charakteristiky, zvýšit podstatu nigra tyrosinhydroxyláza (tyrosinhydroxyláza, TH) až obsah DA ve striatu u pacientů sParkinsonova choroba.Kromě toho,cistanchefenylethanolglykosidový extrakt má dobrý inhibiční účinek na pokles životaschopnosti cerebelárních granulárních buněk u pacientů sParkinsonova chorobaa zabraňuje MPP plus indukované buněčné apoptóze cerebelárních granulíneuronyinhibicí aktivace kaspázy-3 a kaspázy-8. Smrti, využij svůj antiapoptotický účinek.

Fomitopsis Pinicola je léčivá houba, která patří mezi Polyporaceae a Pseudomonas. Má plochou, mírně nahořklou chuť a má farmakologické účinky, jako jsou antioxidační, antibakteriální, protinádorové a imunitní posílení [8, 9]. Naše předchozí studie potvrdily, že vodné extrakty Fomitopsis Pinicola mají ochranný účinek na apoptózu fetálních dopaminergních buněk středního mozku indukovanou MPP plus, což může významně zvýšit počet dopaminergních buněk.neuronya axonální délky, a Zvýšit aktivitu enzymu komplexu mitochondriálního dýchacího řetězce I[10].

V této studii použijeme metodu Ferric reduction antioxidant power method (FRAP) ke sledování antioxidační kapacity vodných extraktů Fomitopsis Pinicola a ke sledování protizánětlivého účinku uvolňování NO indukovaného lipopolysacharidem (LPS) v mikrogliích BV2. Účinky kultivovaného dopaminergního středního mozkuneuronyna jadernou morfologii, mitochondriální membránový potenciál a produkce ROS byly pozorovány in vitro, aby se odhalil ochranný mechanismus endomycet na dopaminergníneurony.

Materiál

Zvíře

14-Denně březí myši, OF1/SPF, z Rakouského institutu pro laboratorní zvířata a veterinární genetiku, experimentovaly s experimentálními zvířaty v souladu se směrnicí Evropské komise 86/609/EU.

Testovací vzorek

Fomitopsis Pinicola byl vyroben v Rakousku a byl identifikován profesorem Wolf-Dieter Rauschem jako Footmitopsis Pinicola. Po rozmělnění Fomitopsis Pinicola byl vodní extrakt získán extrakcí horkou vodou a obsah surového polysacharidu byl 8,95 procenta.

buněčná linie

Myší mikrogliomová buněčná linie BV2, z Ústavu biochemie, Vídeňská veterinární univerzita, v médiu DMEM (Sigma) obsahujícím 10 procent fetálního hovězího séra, 2 procenta B27 (Gibco), 2 procenta glutaminu, 37 stupňů 5 procent CO2 kultury.

buněčné kultivační médium

Médium BM (základní médium), do kterého bylo médium DMEM doplněno 10 procentem fetálního hovězího séra, 30 mM glukózy, 2 mM glutaminu, 1 procenta streptomycinu a 0,5 procenta amfotericinu.

hlavní činidla a nástroje

MPP plus je sigma produkt, čistota větší nebo rovna 98 procentům; primární a sekundární protilátky proti tyrosinhydroxyláze (TH) jsou všechny produkty společnosti American Vectastain.TPTZ(2.4.6-terpyridin triazin), FeCl3·6H2O, FeSO4·7H2O jsou produkty amerického sušícího roztoku sigma-Aldrich.DAPI. Barvicí roztok JC-1 a barvicí roztok C-DCDHF-DA jsou všechny produkty společnosti Invitrogen Molecular Probes. Původní koncentrace roztoku byla 1 mg/ml, Img/ml a 1M, v daném pořadí. Fluorescenční mikroskop, vyrobený společností Nikon v Japonsku, model TS-100-F. Spektrofotometr pro Německo Produkty Pharmacia Biotech, modely pro Novaspec ⅡI.

Cistanchemůže zabránitParkinsonova choroba

metoda

Stanovení antioxidační kapacity extraktů metodou FRAP

Po přípravě 30 ml pracovní tekutiny FRAP (300 mmol/L acetátového pufru, 10 mmol/L roztoku TPTZ, 20 mmol/L roztoků FeCly smíchaných rovnoměrně v objemovém poměru 10:1:1), 450 μl FRAP pracovní byla přidána kapalina s různými koncentracemi 60 ul vodných extraktů Fomitopsis Pinicola a 45 ul dvojitě odpařené vody. Míchání při 37 °C zabrání světelné reakci po 30 minutách, poté se stanoví jeho hodnoty absorbance při 593 nm. Celková antioxidační kapacita každého extraktu byla kvantifikována pomocí Troloxu jako standardu. Pro každý vzorek byly provedeny tři paralelní testy. Výsledky byly vyjádřeny jako ekvivalent Troloxu (TEAC) (mol TEAC/g) na gram extraktu.

K detekci protizánětlivého účinku extraktu byl použit test uvolňování NO

Buňky BV2 z logaritmické fáze byly naočkovány do 48-jamkových destiček v koncentraci 1 x 10 stupeň buněk/ml. Po inkubaci při 37 stupních a 5 procentech CO2 byl pro stimulaci přidán lipopolysacharid (LPS), konečná koncentrace byla 1 ug/ml. Poté byly přidány různé koncentrace extraktu a buňky byly kultivovány při 37 stupních pod 5 procenty CO po dobu 48 hodin, poté byla změřena koncentrace NO. Před soudem. Griessova činidla A a B byla vyjmuta z lednice při teplotě 4 °C a ponechána 30 minut ekvilibrovat pokojovou teplotu. Dusitanové standardy byly sériově zředěny (20, 10, 5, 2,1 a 0,5 uM), aby se vytvořily standardní křivky. Přidejte 50 μl naředěného standardu a supernatant vzorku, který má být testován (4 replikáty pro každou koncentraci), přidejte do 96-jamkové destičky a poté přidejte 50

ul roztoku A, inkubujte při teplotě místnosti po dobu 10 minut ve tmě a přidejte 50 ul roztoku B. Po inkubaci po dobu 10 minut při pokojové teplotě ve tmě byla během 30 minut měřena absorbance při 550 nm čtečkou mikrodestiček a podle standardní křivky bylo vypočteno uvolňování NO v supernatantu [11]. Ve stejnou dobu bylo do každé jamky destičky s buňkami přidáno 10 ul MTT (5 mg/ml v roztoku PBS) a kultivováno při 37 stupních pro 5 procent CO po dobu 4 hodin. Poté, co byl supernatant odstraněn, bylo do každé jamky přidáno 100 ul DMSO a absorbance byla měřena při 570 nm po úplném rozpuštění, aby se pozorovala míra přežití buněk.

Kultivace a identifikace primárních dopaminergních buněk středního mozku a medikamentózní léčba

Březí myši byly usmrceny a přeneseny na Petriho misku obsahující DPBS pufr, myší embrya byla vypreparována, střední mozek byl izolován, nakrájen na malé kousky a sebrán do DPBS pufru obsahujícího 2 ml 0 1 procent trypsinu a 2 ml {{ 3}}.02 procenta DNázy L Inkubujte 7 minut ve vodní lázni o teplotě 37 stupňů a poté přidejte 2 ml inhibitoru trypsinu o koncentraci 0,125 mg/ml, odstřeďte tkáně při 10}0 xg po dobu 4 minut a supernatant zlikvidujte. Poté bylo přidáno médium DMEM obsahující 0,02 procenta DNázy I a separované buňky byly resuspendovány v kultivačním médiu buněk BM, nasazeny na polylysinem ošetřené buněčné plotny a kultivovány při 37 stupních, 5 procentech CO. 10. den kultivace, 10 μM MPP* byl přidán ke kultivovaným buňkám primárních neuronů za účelem ošetření a poté bylo přidáno 50,25,12,5 ug/ml vodného extraktu Fomitopsis Pinicola pro ošetření při 37 stupních, 5 procent CO, kultivován po dobu 48 hodin. 12. den kultivace byly některé buňky použity k identifikaci dopaminergních neuronů a buňky byly fixovány 4% paraformaldehydem při 4 stupních po dobu 30 minut a poté permeabilní po dobu 30 minut při pokojové teplotě pomocí 0,4% Tritonu X{{ 33}}. Po trojnásobném propláchnutí pufrem PBS byl blokován blokovacím roztokem koňského séra po dobu 90 minut, poté byla přes noc přidána primární protilátka anti-TH, poté byla přidána biotinylovaná sekundární protilátka při pokojové teplotě po dobu 90 minut a nakonec 3,3 Byl vyvinut '-diaminobenzidin (DAB, 5 mg/ml). Buňky pozitivní na TH barvu byly pozorovány pod mikroskopem jako dopaminergní neurony.

Pozorování jaderné morfologie

MPP plus a buňky ošetřené léčivem byly fixovány 4% paraformaldehydem po dobu 30 min, poté roztrhány 0,4% Tritonem X-100 po dobu 30 min a poté přidány DAPI barvicím roztokem v konečné koncentraci 1 ug/ml po dobu 5 minut při teplotě místnosti. Morfologie jádra byla pozorována pod fluorescenčním mikroskopem. Excitační vlnová délka byla 340 nm a pro každou jamku byla náhodně vybrána 4 pole.

Detekce mitochondriálního membránového potenciálu

MPP plus a buňky ošetřené léčivem byly přidány do JC-1 dve v konečné koncentraci 10 ug/ml a inkubovány při 37 stupních po dobu 15 minut. Změny intenzity fluorescence byly pozorovány fluorescenční mikroskopií při 488 nm a 568 nm excitačním světle. Změna potenciálu mitochondriální membrány byla měřena poměrem intenzity fluorescence při 568 nm k intenzitě fluorescence při 488 nm.

Test výroby ROS

MPP plus a buňky ošetřené léčivem byly přidány do C-DCDHF-DA dve v konečné koncentraci 10 mM a po inkubaci při 37 stupních po dobu 30 minut byl kultivační roztok odstraněn a buňky byly dvakrát promyty bezbarvým médiem DMEM. . K pozorování změny intenzity fluorescence byla použita fluorescenční mikroskopie. Excitační vlnová délka byla 488 nm a pro každou jamku byla náhodně vybrána 4 zorná pole. Doba expozice buněk excitačnímu světlu nebyla delší než 5s.

Výsledek

Antioxidační schopnost Fomitopsis Pinicola

Fomitopsis Pinicola má zjevný antioxidační účinek a jeho vodní extrakt má antioxidační kapacitu （165,80±7,13）μmol extraktu TEACh.

Protizánětlivý účinek Fomitopsis Pinicola

Po LPS indukovaných BV2 buňkách bylo uvolňování NO významně zvýšeno, což bylo významně odlišné od uvolňování u normální kontrolní skupiny. Po vodném extraktu z Fomitopsis Pinicola bylo uvolňování NO významně sníženo, mezi 100, 50, 25, byl významný rozdíl mezi skupinou s dávkou 12,5 ug/ml a skupinou s LPS (obr. 1). Po LPS indukovaných BV2 buňkách byla míra přežití buněk významně nižší než u normální kontrolní skupiny. Po působení vodného extraktu Fomitopsis Pimicola měla skupina s dávkou 100 ug/ml významné snížení životaschopnosti buněk a byl zde významný rozdíl ve srovnání se skupinou s LPS. Skupina s dávkou 50, 25, 12,5 ug/ml neměla žádný významný účinek na životaschopnost buněk (obrázek 1, obrázek 2).

Identifikace dopaminergních neuronů středního mozku u fetálních potkanů

Po specifickém TH barvení kultivovaných fetálních krysích středních mozkových neuronů vykazovaly dopaminergní neurony jasnou hnědožlutou barvu a barvení buněčných těl a axonů bylo jasně viditelné, což prokázalo, že dopaminergní neurony byly úspěšně kultivovány (obrázek 3). .

Obrázek 1 Účinky vodních extraktů Fomitopsis Pinicola na uvolňování NO v buňkách BV2

indukované LPS

Poznámka: ve srovnání s normální kontrolní skupinou, **p < {{0}}.01;="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" lps,="" ##p="">< 0,01,="" #p=""><>

Obrázek 2: vliv vodního extraktu z Fomitopsis Pinicola na míru přežití buněk BV2

Poznámka: ve srovnání s normální kontrolní skupinou, **p < 0.01;="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" lps,=""><>

Obrázek 3 Barvení TH - značeného mesencephalon DA neuronu

Vliv Fomitopsis Pinicola na jadernou morfologii DAPI,4',6-diamidino-2-fenylindol, je fluorescenční ponor, který proniká buněčnou membránou a podivně se váže na DNA. Výsledky tohoto experimentu ukázaly, že jádra dopaminergních neuronů v normální kontrolní skupině zůstala téměř intaktní a chromatin byl jednotný. Kontrolní skupina MPP plus vykazovala významnou kondenzaci chromatinu, lýzu jaderné membrány a lýzu jádra. Po působení vodného extraktu Fomitopsis Pinicola byla morfologie jádra relativně intaktní a charakteristiky apoptózy byly sníženy (obrázek 4).

Vliv Fomitopsis Pinicola na potenciál mitochondriální membrány

Po MPP plus indukci se mitochondriální membránový potenciál dopaminergních neuronů významně snížil, což se významně lišilo od normální kontrolní skupiny (P<0.01). after="" the="" action="" of="" the="" aqueous="" extract="" of="" fomitopsis="" pinicola,="" the="" mitochondrial="" membrane="" potential="" decreased="" after="" mpp+="" induction.="" there="" was="" a="" significant="" increase="" in="" mitochondrial="" membrane="" potential="" in="" the="" 50,="" 25,="" and="" 12.5ug/ml="" dose="" groups="" compared="" with="" the="" mpp+="" control="" group=""><0.01,><0.05)(figure>

Vliv Pseudomonas Sinensis na produkci ROS

Po MPP plus indukci byla produkce ROS dopaminergních neuronů významně zvýšena. který byl významně odlišný od normální kontrolní skupiny (P<0.01). after="" the="" action="" of="" the="" aqueous="" extract="" of="" fomitopsis="" pinicola,="" the="" ros="" increased="" after="" mpp+induction.="" the="" reduction="" of="" ros="" production="" in="" the="" 50="" and="" 25="" ug/ml="" dose="" groups="" was="" significantly="" different="" from="" the="" mpp+control="" group=""><0.01)(figure 6,="" figure="">

Obrázek 4. DAPI fluorescenční barvení DA neuronů v mezencefaliku

Obrázek 5 Účinek vodního extraktu z Fomitopsis Pinicola na mitochondriální indukci MPP plus

membránový potenciál mesencefalických DA neuronů

Poznámka: Ve srovnání s normální kontrolní skupinou, **P < {{0}}.01;="" ve="" srovnání="" s="" kontrolní="" skupinou="" mpp="" plus,="" #="" #="" p="">< 0,01,="" #="">

0.05.

Obrázek 6. C-DCDHF-DA fluorescenční barvení DA neuronů v mezencefaliku

Obrázek 7 Účinky vodních extraktů Fomitopsis Pinicola na mezencefalickou DA indukovanou MPP plus

produkce neuronů ROS

Poznámka: ve srovnání s normální kontrolní skupinou, **P < {{0}}.01;="" ve="" srovnání="" s="" kontrolní="" skupinou="" mpp="" plus,="" #="" #="" p=""><>

Závěr

Degenerace dopaminergních neuronů (DA neuronů) ve středním mozku je ztracena a Lewyho tělísko v cytoplazmě reziduálních neuronů je hlavním rysemParkinsonova choroba.Mezi klinické příznaky patří především statický třes, bradykineze, hypermyotonie, nestabilita držení těla aj. V současné době léčbaParkinsonova chorobastále dominuje substituční léčba dopaminem. Může sice zlepšit symptomy pacientů, ale nezabrání rozvoji onemocnění. Dlouhodobá aplikace způsobí mnoho nežádoucích reakcí [12], proto je nezbytné studium nových terapeutických přístupů. Studie ukázaly, že oxidační stres a oxidované hladiny dopaminu jsou důležitými příčinami selektivního poškození dopaminergních neuronů [13] a u některých přírodních antioxidantů, jako je kvercetin, kurkumin, čajové polyfenoly a spol., bylo potvrzeno, že jsou dopaminem způsobeným nervovými látkami. Poškození neuronů má zjevné ochranné účinky [14-16], takže je slibné prověřovat léky k léčběParkinsonova chorobaz tradiční čínské medicíny s antioxidačními farmakologickými účinky.

V této studii byl FRAP použit k detekci antioxidační kapacity vodných extraktů Fomitopsis Trolox Pinicola pomocí (6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchromanu)2- karboxylová kyselina) má významné antioxidační účinky. Zjištěný protizánětlivý účinek vodných extraktů je metodou Pinicolawas Fomitopsis dby metodou NO uvolňující mikroglie BV2 indukované lipopolysacharidy a nebyl zjištěn žádný významný účinek na životaschopnost buněk při koncentracích pod 100 ug/ml, což naznačuje, že v gliových buňkách mají významné anti- zánětlivé účinky a nemají významný vliv na přežití buněk.

Oxidační stres označuje nerovnováhu mezi produkcí a eliminací volných kyslíkových radikálů v těle. Je to časná událost v procesu neuronální degenerace-apoptózy. Studie ukázaly, že mozková tkáň je bohatá na fosfolipidy a nenasycené mastné kyseliny, které jsou obě náchylné k oxidativnímu stresu. U pacientů sParkinsonova choroba, Malondialdehyd, index peroxidace lipidů, ve striatu je výrazně zvýšen, zatímco koncentrace polynenasycených. výrazně poklesly mastné kyseliny [17], snížil se obsah glutathionu (GSH) a byla narušena funkce enzymu I mitochondriálního komplexu dýchacího řetězce[18,19]. MPP plus je metabolit neurotoxické látky MPTP v těle, který může v těle vytvářet volné radikály, inhibovat mitochondriální funkce, ničit DA neurony v substantia nigra a rozvinout příznakyParkinsonova chorobave zvířecích modelech. NO se také účastní mechanismu poškození MPP plus. Nadměrný NO difunduje do DA neuronů, které mohou nitrosovat sulfhydrylovým místem enzymu a inhibovat aktivitu enzymu I komplexu mitochondriálního dýchacího řetězce [20,21].

Výsledky této studie ukázaly, že poté, co MPP plus indukoval primárně kultivované DA neurony, jádro vykazovalo zjevnou apoptózu, mitochondriální membránový potenciál se snížil a produkce ROS se významně zvýšila, což naznačuje, že MPP plus může indukovat apoptózu DA neuronů inhibicí mitochondriálního oxidačního stresu. vodný extrakt z Fomitopsis Pinicola a může zlepšit morfologii dopaminergních neuronů po MPP plus indukci, zvýšit potenciál mitochondriální membrány a snížit produkci ROS, což naznačuje, že vodní extrakt z Fomitopsis Pinicola inhibuje poškození DA neuronů středního mozku poškozených nervovými látkami, což může být souvisí s jeho antioxidací a inhibicí produkce NO a chrání neurony inhibicí mitochondriálního oxidačního stresu.

Reference

1. Khan AU, Akram M, Daniyal M, et al. Povědomí a současné znalosti o Parkinsonově nemoci: Neurodegenerativní porucha. Int J Neurosci 2018, 8: 1-64.

2. Klingelhoefer L, Reichmann H. Parkinsonova nemoc jako multisystémová porucha. J Neural Transm (Vídeň) 2017, 124: 709-713.

3. Choi DH, Cristóvão AC, Guhathakurta S, a kol. Oxidační stres zprostředkovaný NADPH oxidázou 1- vede k smrti dopaminových neuronů u Parkinsonovy choroby. Antioxid Redox Signal 2012, 16: 1033-1045.

4. Asaithambi A, Ay M, Jin H, et al. Fosforylace proteinkinázy D1 (PKD1) podporuje dopaminergní přežití neuronů během 6-OHDA-indukovaného oxidačního stresu. PLoS One, 2014, 9: e96947.

5. Berndt N, Bulík S, Holzhütter HG. Kinetické modelování mitochondriálního energetického metabolismu neuronových buněk: Vliv redukovaných aktivit -ketoglutarátdehydrogenázy na produkci ATP a tvorbu reaktivních druhů kyslíku. Int J Cell Biol 2012, 2012: 757594.

6. Yan MH, Wang X, Zhu X. Mitochondriální defekty a oxidační stres u Alzheimerovy choroby a Parkinsonovy choroby. Free Radic Biol Med 2013, 62: 90-101.

7. Guo C, Sun L, Chen X, Zhang D. Oxidační stres, poškození mitochondrií a neurodegenerativní onemocnění. Neural Regen Res 2013, 8: 2003-2014.

8. Hao L, Sheng Z, Lu J a kol. Charakterizace a antioxidační aktivity extracelulárních a intracelulárních polysacharidů z Fomitopsis Pinicola. Carbohydr Polym, 2016, 141: 54-59.

9. Shah F, Mali T, Lundell TK. Polyporales Brown Rot Species Fomitopsis Pinicola: Profily enzymové aktivity, produkce kyseliny šťavelové a Fe3 plus - Redukující sekreci metabolitů. Appl Environ Microbiol, 2018, 84: e02662-17.

10. Guo SS, Wolf D. Studie neuroprotektivních účinků vodního extraktu Fomitopsis Pinicola na dopaminergní neurony in vitro. Chin J Pharmacovigil 2018, 15: 582-586.

11. Khaled Radad, Rudolf Moldzio, Wolf-Dieter Rausch. Toxicita Minocyklin chrání dopaminergní neurony před dlouhodobým rotenonem. Can J Neurol Sci 2010, 37: 81-85.

12. Rizek P, Kumar N, Jog MS. Aktualizace diagnózy a léčby Parkinsonovy choroby. MAJ 2016, 188: 1157-1165.

13. Crotty GF, Ascherio A, Schwarzschild MA. Zaměření urátů ke snížení oxidačního stresu u Parkinsonovy choroby. Exp Neurol 2017, 298: 210-224.

14. Ay M, Luo J, Langley M, et al. Molekulární mechanismy, které jsou základem ochranných účinků kvercetinu proti mitochondriální dysfunkci a progresivní dopaminergní neurodegeneraci v buněčné kultuře a MitoPark transgenních myších modelech Parkinsonovy choroby. J Neurochem 2017, 141: 766-782.

15. Wang MS, Boddapati S, Emadi S, et al. Kurkumin snižuje cytotoxicitu indukovanou alfa-synukleinem v buněčném modelu Parkinsonovy choroby. BMC Neurosci 2010, 11: 57.

16. Weinreb O, Amit T, Mandel S, a kol. Neuroprotektivní molekulární mechanismy (-)-epigalokatechin-3-galátu: reflexní výsledek jeho antioxidačních, chelatačních a neuritogenních vlastností. Genes Nutr 2009, 4: 283-296.

17. Dawson TM, Ko HS, Dawson VL. Genetické zvířecí modely Parkinsonovy choroby. Neuron 2010, 66:646-61.

18. Bodis-Wollner. Retinopatie u Parkinsonovy choroby. J Neural Transm (Vídeň) 2009, 116: 1493-1501.

19. Hisahara S, Shimohama S. Toxiny indukované a genetické zvířecí modely Parkinsonovy nemoci. Parkinsonova choroba. 2010, 2011: 951709.

20. Yang S, Liu T, Li S, a kol. Srovnávací proteomická analýza mozků přirozeně stárnoucích myší. Neuroscience 2008, 154: 1107-1120.

21. Gautier CA, Corti O, Brice A. Mitochondriální dysfunkce u Parkinsonovy choroby. Rev Neurol (Paříž) 2014, 170:339-343.