Odvar z Tongluo Digui léčí poškození ledvin u diabetických potkanů ​​tím, že podporuje autofagii podocytů

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

HAN Jiarui, ZHANG Yage, SHI Xiujie, PENG Zining, XING Yufeng, PANG Xinxin

Abstraktní

OBJEKTIVNÍ:

Prozkoumat účinky odvaru Tongluo Digui na poškození ledvin a autofagii podocytů indukovanou streptozotocinem u diabetických potkanů.

METODY:

Samci krys Sprague-Dawley byli náhodně rozděleni do šesti skupin: normální, model, odvar z Tongluo Digui (vysoká, střední a nízká dávka) a valsartan. Streptozotocin byl injikován intraperitoneálně, aby se replikoval diabetický zvířecí model. Po 8 týdnech byla vyhodnocena proteinurie, aby se vytvořil model diabetické nefropatie. Léčba byla podávána denně intragastrickou cestou. 16 týdnů po žaludeční sondě jsme stanovili 24hodinovou koncentraci bílkovin v moči, koncentraci glukózy v krvi, sérového kreatininu a močovinového dusíku. Potom byly krysy usmrceny a ledviny byly odebrány a obarveny kyselinou jodistou-Schiff pro vyhodnocení patologických změn v glomerulech, včetně glomerulárních podocytů pomocí transmisní elektronové mikroskopie. Pro stanovení exprese nefrinu, podocinu, p62, beclin-1, LC3Ⅱ/Ⅰ a proteinu p-mTOR/mTOR v tkáních ledvin byla použita analýza Western blot.

VÝSLEDEK:

Ve srovnání s modelovou skupinou byl odvar z Tongluo Digui spojen se snížením koncentrace bílkovin v moči za 24 hodin, glukózy v krvi, hemoglobinu A1c, sérového kreatininu, koncentrací močovinového dusíku, celkového sérového proteinu a albuminu. Současně bylo redukováno mesangiální mezenteriální rozšíření a fúze výběžků nohy, glomerulární bazální membrána nebyla významně ztluštěna a byl zvýšen počet podocytů a počet autofagozomů v podocytech. Dále byla exprese nefrinu, podocinu, LC3Ⅱ a beclin-1 proteinu v ledvinové tkáni up-regulována, zatímco exprese proteinu p62 byla regulována směrem dolů a fosforylace mTOR byla inhibována.

ZÁVĚR:

Odvar z Tongluo Digui může inhibovat progresi diabetické nefropatie inhibicí fosforylace mTOR, čímž zvyšuje autofagii k ochraně podocytů a snižuje proteinurii.

klíčová slova:diabetické nefropatie; autofagie; podocyt; Tongluo Digui odvar

výhody stonku cistancheprofunkce ledvin

ÚVOD

Diabetická nefropatie (DN) je jednou z vážných mikrovaskulárních komplikací diabetu, přičemž 30 procent -40 procent diabetických pacientů trpí onemocněním ledvin. S rostoucí incidencí diabetu se DN stala celosvětově hlavní příčinou konečného stádia renálního onemocnění.1 To představuje velkou ekonomickou zátěž jak pro rodiny, tak pro společnost.

Poškození podocytů je důležitou příčinou progrese DN. Jako terminálně diferencovaná buňka hraje autofagie důležitou roli při udržování fyziologické funkce podocytů.2,3 V normálním fyziologickém stavu je uvnitř podocytů vysoký stupeň autofagie, která odstraňuje poškozené proteiny a organely.4 Nicméně u diabetiků prostředí je inhibována autofagie podocytů, což naznačuje, že autofagie podocytů hraje důležitou roli v patogenezi DN.5 DN patří v tradiční čínské medicíně do kategorií „Xiao Ke“, „Guan Ge“ a „edém“. Teorie tradiční čínské medicíny je, že krevní stáze aJin nedostatekjsou nejdůležitějšími příčinami DN.6 Léčba DN by proto měla podporovat krevní oběh a vyživovat jin, k tomu byl založen odvar Tongluo Digui. Již dříve jsme zjistili, že odvar z Tongluo Digui měl příznivý léčebný efekt u DN. V této studii jsme se zaměřili na použití streptozotocinem (STZ)-indukovaného modelu potkanů ​​DN typu 1 k vyhodnocení účinku odvaru Tongluo Digui na poškození ledvin, autofagii a signální dráhu mTOR. Také jsme prozkoumali základní molekulární mechanismus odvaru Tongluo Digui při oddálení progrese DN a poskytli důkazy pro klinickou prevenci a léčbu DN.

MATERIÁLY A METODY

Zvířata

Krysy Sprague-Dawley bez specifických patogenů (SPF) [n=60, samci, (150 ± 10) g; číslo kvalifikačního certifikátu: SCXK (Yu) 2017-0001] byly zakoupeny od Henan Experimental Animal Center (Zhengzhou, Čína). Standardní světelný cyklus (14 h světlo, 10 h noc), vnitřní teplota (23 ± 2) stupně , vlhkost (40 procent -50 procent ), ustájení (tři zvířata v kleci) a krmení (sterilizované krmivo a pitná voda). Experiment byl dokončen v Cell Imaging Center Laboratory v Henan Hospital of Traditional Chinese Medicine (Zhengzhou, Čína). Všechny experimenty byly provedeny podle příručky pro péči a použití laboratorních zvířat vydané Národním institutem zdraví.

Drogy

Kapsle valsartanu (Val) byly zakoupeny od Novartis Pharma Schweiz AG (X2307 CN-b, Peking, Čína). Odvar z Tongluo Digui se skládá z Shuichi (Hirudo) 12 g, Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) 30 g, Dihuang (Radix Rehmanniae) 20 g, Huangqi (Radix Astragali Perparata) 20 g, Danggui (Radix Rizoexiesis, Angelicae S Alismatis) 10 g, Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei) 15 g, Gancio (Radix Glycyrrhizae) 6 g. Čínské bylinky byly zakoupeny z nemocnice tradiční čínské medicíny Henan (Zhengzhou, Čína).

Experimentální design

Potkani byli náhodně rozděleni do šesti skupin, každá sestávala z 10 potkanů: kontrolní skupina (Ctrl), modelová skupina DN (STZ), model DN s léčebnou skupinou Val (Val), model DN s vysokou dávkou odvaru Tongluo Digui (HTL) , model DN s léčebnou skupinou se střední dávkou odvaru Tongluo Digui (MTL) a model DN s léčebnou skupinou s nízkou dávkou odvaru Tongluo Digui (LTL). Šest skupin krys bylo usmrceno 16 týdnů po žaludeční sondě a byly odebrány ledviny.

Val (10 mg·kg－1·d－1 ) a odvar z Tongluo Digui ve třech různých dávkách byly podávány sondou jednou denně po dobu 16 týdnů. Podávané dávky byly založeny na převodní rovnici pro dávky léčiva mezi zvířaty a lidmi. Dávka potkana (mg/kg)=dávka pro dospělého člověka (mg/kg) × konverzní faktor (6,25). Skupině s vysokou dávkou, střední dávkou a skupinou s nízkou dávkou odvaru Tongluo Digui byla podávána žaludeční sonda 5,4, 2,7 a 1,35 g·kg – 1·d – 1, v tomto pořadí. Krysy byly váženy týdně. 24-h moč byla odebírána pomocí metabolických klecí na konci 0, 12 a 24 týdnů. Po ukončení léčby (ve 24 týdnech) byly krysy anestetizovány subkutánní injekcí chloralhydrátu a byly odebrány vzorky ledvinové a krevní tkáně a skladovány při -80 stupních. Potkani měli volný přístup k normální stravě laboratorních zvířat a čisté vodě (s výjimkou jak je popsáno níže).

rostlina cistanche

Zavedení modelu DN

STZ (Sigma, St. Louis, MO, USA) byl použit k vyvolání diabetu, jak bylo popsáno dříve.7 Všech 6 0 potkanů ​​mělo omezený přístup k vodě po dobu 12 hodin před experimenty. Z toho 50 krysám byla podána jediná intraperitoneální injekce STZ 60 mg/kg rozpuštěného v citrátovém pufru (0,1 mol/l, pH 4,5). Diabetes byl potvrzen měřením koncentrací glukózy v krvi 72 hodin po injekci STZ. Zvířata s koncentrací glukózy vyšší nebo rovnou 16,7 mmol/l po tři po sobě jdoucí dny byla považována za diabetická. Po 8 týdnech byly krysy umístěny v oddělených metabolických klecích a moč byla shromažďována po dobu 24 hodin pro měření mikroalbuminu v moči (UAE). DN model byl potvrzen při získání UAE větší nebo rovné 30 mg/24 h.

Biochemické ukazatele

Stanovení séra a moči bylo použito k hodnocení renální funkce zvířat. Moč krys byla hodnocena pomocí metabolické klece. Vzorky krysí krve byly získány metodou řezání ocasu.8 Vzorky séra a moči byly až do použití zmraženy na -80 stupňů. Koncentrace kreatininu v séru, dusíku močoviny v krvi, albuminu a proteinu v moči byly měřeny radioimunoanalýzou. Hladiny hemoglobinu A1c (HbA1c), C-peptidu a inzulínu byly měřeny pomocí soupravy HbA1c ELISA Kit (Crystal Chem INC, Elk Grove Village, IL, USA), soupravy C-peptid Elisa (Kainuo Bio Ltd., Peking, Čína) a inzulínu Souprava Elisa (Merck Millipore Co., Ltd., Bed ford, MA, USA) podle pokynů výrobce. Kyselina močová, celkový sérový protein (TP), albumin (ALB), alaninaminotransferáza (ALT) a aspartátaminotransferáza (AST) u potkanů ​​byly stanoveny automatickým biochemickým analyzátorem.

Histopatologické vyšetření

Formalinem fixovaná ledvinová tkáň byla zalita v parafínu, nakrájena na 3-4 μm silné řezy a obarvena kyselinou jodovou-Schiff (PAS). Morfologické změny v tkáni ledvin, včetně proliferace mezangiálních buněk, buněčné infiltrace a změn mezangiální matrice, byly zkoumány pro každý obarvený řez světelnou mikroskopií (NIKON D3100) (× 400).

Transmisní elektronový mikroskop

TEM byl použit k pozorování morfologie podocytů a mezangiálních buněk v tkáni ledvin. Čerstvé ledvinové tkáně byly rozděleny do bloků (< 1="" mm3="" ),="" were="" quickly="" fixed="" in="" 2%="" phosphate-buffered="" glutaraldehyde="" for="" at="" least="" 2="" h,="" washed="" three="" times="" with="" pbs,="" fixed="" in="" 1%="" osmium="" tetroxide="" for="" 2="" h,="" and="" then="" embedded="" in="" acetone="" wrap="" after="" dehydration.="" specimens="" were="" sliced="" in="" 50-60="" nm="" ultrathin="" sections,="" double-stained="" with="" 3%="" uranyl="" acetate="" and="" lead="" citrate,="" and="" then="" examined="" under="" a="" tem="" (jeol-jem-1400="" plus,="" japan="" electron="" optics="" laboratory,="">

Western blot analýza

Celkový protein byl extrahován z renální tkáně pufrem pro lýzu proteinů (Solarbio Biotech, Peking, Čína). Koncentrace proteinu v supernatantu byly testovány pomocí testovací soupravy BCA (Solarbio Biotech, Peking, Čína, PC0020). Vzorky obsahující 40 ug proteinu byly separovány na 12% SDS-polyakrylamidové gelové elektroforéze (SDS PAGE) (Applygen, Peking, Čína, B1004) a poté přeneseny na nitrocelulózovou filtrační membránu (Solar bio Biotech, Peking, Čína). Po zablokování 5% odstředěným mlékem při pokojové teplotě po dobu 2 hodin, -actin (Proteintech, číslo výrobku: 60008-1-lg), LC3II/I (Ab cam, číslo položky: ab48394), P62 (Proteintech, číslo položky: 18420-1-AP), beclin-1 (proteinová technologie, číslo položky: 11306-1-AP), p-mTOR (CST, číslo položky: #5536), mTOR (CST, číslo položky: # 2983), nefrin (Abcam, číslo položky: ab58968) a podocin (každý protein, číslo položky: 20384 -1-AP) a inkubovány při 4 stupních přes noc. Tato směs byla poté pětkrát promyta TBS plus 0,05 procenta Tween-20 (Solar bio Biotech, Peking, Čína) (TBS-T) po dobu 5 minut před přidáním sekundární protilátky (1∶2000) před inkubací při teplotě místnosti. teplotě po dobu 1 hodiny, pětkrát promytí TBST po dobu 5 minut, podrobení se vyvolání barvy se zvýšenou chemiluminiscencí (ECL, Millipore, Billerica, MA, USA) a vystavení pomocí softwaru ImageJ pro analýzu ve stupních šedi proužků.

Statistická analýza

Data byla analyzována pomocí softwaru SPSS (IBM SPSS Statistics for Windows, verze 23.0. 2014, Armonk, NY, USA). Rozdíly mezi skupinami byly testovány pomocí jednosměrné analýzy rozptylu následované Tukeyho testem. Data byla vyjádřena jako průměr ± standardní odchylka. P < 0,05="" bylo="" považováno="" za="">

luteolin

VÝSLEDEK

Ochranný účinek odvaru Tongluo Digui na ledviny potkana DN

Biochemické ukazatele, jako je glykémie, glykovaný hemoglobin, sérový kreatinin, koncentrace močovinového dusíku v krvi a {{0}}hodinová koncentrace bílkovin v moči, byly měřeny 16 týdnů po sondě. (Stůl 1). Výsledky ukázaly, že ve srovnání s normální skupinou byly v modelové skupině významně vyšší glykémie, glykovaný hemoglobin, sérový kreatinin, koncentrace močovinového dusíku v krvi, 24-hodinová koncentrace bílkovin v moči, TP a ALB (P < {{="" 7}}.01),="" což="" naznačuje,="" že="" modelová="" skupina="" měla="" poškozenou="" funkci="" ledvin.="" ve="" skupině="" val="" byla="" snížena="" jak="" koncentrace="" sérového="" kreatininu,="" tak="" koncentrace="" proteinu="" v="" moči="" za="" 24="" hodin="" (p="">< 0,05).="" kromě="" toho="" ve="" skupině="" s="" vysokou="" dávkou="" odvaru="" tongluo="" digui="" bylo="" pozorováno="" významné="" snížení="" koncentrace="" glukózy="" v="" krvi,="" hba1c,="" sérového="" kreatininu="" a="" dusíku="" močoviny="" a="" také="" 24hodinové="" vylučování="" moči="" (p="">< 0,01).="" tyto="" účinky="" byly="" závislé="" na="" dávce.="" u="" každé="" skupiny="" potkanů="" ​​nebyly="" žádné="" významné="" rozdíly="" v="" hladinách="" kyseliny="" močové,="" inzulínu,="" alt="" a="" ast.="" celkově="" naše="" zjištění="" ukázala,="" že="" odvar="" z="" tongluo="" digui="" zmírnil="" poškození="" ledvin="" a="" zlepšil="" funkci="" ledvin="" u="" potkanů="" ​​dn="" v="" závislosti="" na="">

Změny v patologii ledvin potkanů ​​DN byly hodnoceny barvením PAS po ošetření odvarem z Tongluo Digui (obrázek 1). Ve srovnání s normální skupinou byl v modelové skupině pozorován významný nárůst glomerulárních mezangiálních buněk a mezangiálního stromatu spolu s rozšířením mezangiální oblasti. Glomerulární mezangiální oblast se zvýšila v každé ze tří úrovní dávek odvaru Tongluo Digui a ve skupině Val. Kromě toho tyto čtyři léčebné skupiny zmenšily šířku mezangiální matrice ve srovnání s modelovou skupinou a glomerulární mezangiální oblast ve skupině s vysokou dávkou odvaru Tongluo Digui byla menší než ve skupině Val. Tyto nálezy ukázaly, že odvar z Tongluo Digui oddaluje progresi DN glomerulárních lézí.

Účinek odvaru Tongluo Digui na poškození glomerulárních podocytů u DN potkanů

Pro stanovení exprese podocytárních markerových proteinů nefrinu a podocinu byla použita analýza Western blot (obrázek 2). Ve srovnání s normální skupinou byla exprese obou proteinů v modelové skupině významně snížena (P < 0.01),="" což="" ukazuje="" na="" poškození="" podocytů.="" kromě="" toho="" byla="" exprese="" nefrinu="" a="" podocinu="" up-regulována="" ve="" skupinách="" s="" odvarem="" tongluo="" digui="" ve="" srovnání="" s="" modelovou="" skupinou="" (p=""><>

Vliv odvaru Tongluo Digui na autofagii glomerulárních podocytů u DN potkanů

Změny v autofagosomech v glomerulárních podocytech byly pozorovány pod TEM (obrázek 3). Výsledky ukázaly autofagozomy v glomerulárních podocytech normální skupiny. V modelové skupině chyběly autofagozomy podocytů a vymizely také výběžky nohou podocytů. Ve třech skupinách s dávkou odvaru Tongluo Digui a skupině s valsartanem jsme pozorovali autofagozomy glomerulárních podocytů, což naznačuje, že odvar z Tongluo Digui zvýšil autofagii podocytů u DN potkanů. Western blot byl použit k detekci exprese proteinů souvisejících s autofagií P62, beclin-1 a LC3Ⅱ (obrázek 4). Ve srovnání s normální skupinou byla exprese beclin-1 a LC3Ⅱ v modelové skupině významně snížena (P < 0.01),="" zatímco="" exprese="" p62="" byla="" významně="" zvýšena="" (p="">< 0.01).="" tato="" zjištění="" ukázala,="" že="" autofagie="" byla="" u="" dn="" potkanů="" ​​oslabena.="" ve="" srovnání="" s="" modelovou="" skupinou="" měla="" skupina="" s="" vysokou="" dávkou="" odvaru="" tongluo="" digui="" up-regulovanou="" expresi="" beclin-1="" a="" lc3ⅱ="" (p="">< 0,05)="" spolu="" s="" down-regulovanou="" expresí="" p62.="" tyto="" výsledky="" společně="" ukázaly,="" že="" renální="" ochranný="" účinek="" odvaru="" tongluo="" digui="" u="" potkanů="" ​​s="" dn="" může="" souviset="" se="" zvýšenou="" autofagií="" v="" ledvinových="">

Odvar z Tongluo Digui zvyšuje autofagii glomerulárních podocytů u DN potkanů ​​inhibicí fosforylace mTOR

Inhibice fosforylace mTOR zesiluje autofagii (obrázek 5). Ve srovnání s normální skupinou byla fosforylace mTOR v modelové skupině zvýšena (P < 0.01),="" zatímco="" ve="" skupinách="" s="" odvarem="" tongluo="" digui="" byla="" inhibována="" (p="">< 0,05).="" to="" naznačuje,="" že="" odvar="" z="" tongluo="" digui="" zvýšil="" autofagii="" podocytů="" inhibicí="" aktivace="" signální="" dráhy="" mtor.="" předchozí="" studie="" ukázaly,="" že="" autofagie="" chrání="" podocyty="" a="" zlepšuje="" funkci="">

DISKUSE

DN je charakterizována především známkami a symptomy, jako je přítomnost proteinu v moči, vysoká hladina glukózy v krvi, polydipsie, polyfagie a polyurie. Příznaky jsou podobné jako u tradiční čínské medicíny, jako je „Xiao Ke“, „Guan Ge“ a „edém“. Výskyt a rozvoj DN jsou neoddělitelné od patologického základu deficitu jinu a stáze krve.6 S rozvojem deficitu jinu a stáze krve dochází k postupnému poškozování ledvin, čímž dochází k úbytku bílkovin v moči, což dále vede k tvorbě mikrotrombů a fibróza ledvin. Pacienti s DN nevyhnutelně trpí terminálním onemocněním ledvin.11

Odvar Tongluo Digui založil Zhang Binghou, slavný lékař čínské tradiční medicíny, a na základě svých letitých zkušeností s léčbou DN.12, 13 Tougluo Digui odvar se skládá z Shuichi (Hirudo), Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis), Dihuang (Radix Rehmanniae), Huangqi (Radix Astragali Perparata), Danggui (Radix Angelicae Sinensis), Ze Xie (Rhizoma Alismatis), Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei), Gancio (Radix Glycyrrhizae). Mezi nimi jsou Shuizhi (Hirudo) a Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) monarchové drogy, o kterých věříme, že hrají roli při vyživování jinu a podpoře krevního oběhu v DN. Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) zlepšuje imunitu těla a sekreční stav a oddaluje stárnutí.14 Shuizhi (Hirudo) má kromě jiných farmakologických účinků antikoagulační, protinádorové, protizánětlivé a antifibrotické účinky a může zlepšit funkci ledvin. patologické změny v DN s cílem významně snížit sérové ​​koncentrace kreatininu a dusíku močoviny v krvi a snížit vylučování proteinů močí.15,16 U DN hraje poranění podocytů důležitou roli ve filtrační bariéře bazální membrány glomerulů a při tvorbě proteinurie.17 Nefrin a podocin jsou oba proteiny pórové membrány na povrchu podocytů. Tyto dva proteiny interagují za vzniku komplexu, který hraje klíčovou roli ve funkci glomerulární filtrační bariéry.18 Abnormální distribuce exprese proteinu vede k různému stupni proteinurie.19 V této studii vykazovali potkani DN 1. typu vyvolané STZ zvýšení při vylučování bílkovin močí a poruše funkce ledvin během 24 hodin. Navíc PAS barvení ukázalo, že počet mezangiálních buněk a mezangiální matrice se v modelové skupině zvýšil, což naznačuje, že model byl úspěšně vytvořen. Různé dávky odvaru Tongluo Digui snížily 24hodinové koncentrace proteinu v moči a sérového kreatininu a zlepšily renální patologii DN potkanů ​​se sníženým množstvím mezangiálních buněk a matrix. Analýza Western blot ukázala, že exprese nefrinu a podocinu ve skupině s odvarem Tongluo Digui byla vyšší ve srovnání s expresí v modelové skupině, což ukazuje, že tento vzorec zpomaluje progresi DN u krys tím, že chrání podocyty.

Autofagie je cestou pro degradaci lysozomálních proteinů v buňkách a hraje klíčovou roli při odstraňování poškozených nebo nadměrně exprimovaných proteinů, které udržují buněčnou homeostázu a integritu. .5 Po specifickém vyřazení genu Atg5 souvisejícího s autofagií v podocytech myši postupně vykazovaly všudypřítomnou proteinovou agregaci, mitochondriální poškození a autofagickou aktivitu v podocytech; podocyty se poškodily a výběžky chodidel zmizely a splynuly, což naznačovalo, že autofagie byla zachována. Udržení normální funkce podocytů je důležité.21,22 V této studii jsme zkoumali účinek odvaru Tongluo Digui na autofagii v glomerulárních podocytech pomocí TEM a Western blot analýzy. TEM ukázal, že počet autofagozomů podocytů v každé skupině s dávkou odvaru Tongluo Digui se zvýšil ve srovnání s modelovou skupinou. Western blot navíc ukázal expresi proteinů souvisejících s autofagií LC3, beclin-1 a p62. Ve srovnání s modelovou skupinou byla exprese LC3Ⅱ a beclin{11}} významně zvýšena ve skupině s odvarem Tongluo Digui, zatímco exprese proteinu p62 byla významně snížena. Tato zjištění ukázala, že odvar z Tongluo Digui zvýšil úroveň autofagie v glomerulárních podocytech.

Rapamycin target protein (mTOR) je jedním z hlavních regulátorů autofagie.23 Je široce distribuován v kůře ledvin a dřeni a hraje roli ve vývoji poškození DN podocytů.24,25 V situacích vysoké hladiny glukózy a stresu, mTOR je aktivován a fosforylován, což vede k fosforylaci jeho downstream cílů a inhibici autofagie. Liu et al 26 prokázali, že inhibitor mTOR, rapamycin, se specificky váže na kinázu mTOR a inhibuje aktivitu mTOR, zvyšuje autofagii podocytů a chrání funkci ledvin. Zjistili jsme, že fosforylace mTOR byla v modelové skupině zesílena a že odvar z Tongluo Digui tento proces inhiboval, což naznačuje, že odvar z Tongluo Digui zesiluje autofagii v podocytech a může inhibovat aktivaci signální dráhy mTOR.

Stručně řečeno, odvar z Tongluo Digui může inhibovat autofagii v podocytech, chránit glomerulární podocyty, udržovat integritu membrány glomerulární filtrace, snižovat 24hodinové vylučování proteinů močí a zpomalovat progresi DN inhibicí aktivace mTOR. Tato zjištění poskytují pohled na další pochopení ochranného účinku odvaru Tongluo Digui u DN, avšak základní mechanismus zúčastněný je třeba ještě objasnit.

co je cistanchepro onemocnění ledvin

REFERENCE
1 Tech GH. Diabetická nefropatie – jedná se o poruchu imunity? Clin Sci 2017; 131(16): 2183-2199.
2 Li JJ, Kwak SJ, Jung DS a kol. Biologie podocytů u diabetické nefropatie. Kidney Int Suppl 2007; (106): S36-S42.
3 Liu N, Xu L, Shi Y, Zhuang S. Autofagie podocytů: potenciální terapeutický cíl k prevenci progrese diabetické nefropatie. J Diabetes Res 2017; 2017(4): 1-6.
4 Mizushima N, Komatsu M. Autofagie: renovace buněk a tkání. Cell 2011; 147(4): 728-741.
5 Tagawa A, Yasuda M, Kume S, et al. Porucha autofagie podocytů zhoršuje proteinurii u diabetické nefropatie. Diabetes 2016; 65(3): 755-767.
6 Sun C, Xie QY, Meng QG. Studie o zákonu rozdělení TCM syndromu diabetické nefropatie. Peking Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao 2015; 38(4): 266-270.
7 Szkudelski T. Mechanismus působení alloxanu a streptozotocinu v B buňkách krysího pankreatu. Physiol Res 2001; 50(6):537-546.
8 Dang WY, Hou LY, Wu HM, Yan XM, Zheng XF, Hao J. Účinnost odvaru Qingre Lishi Yishen na glomerulární fibrózu nefropatie imunoglobulinu A na krysím modelu. J Tradit Chin Med 2019; 39(4): 516-523.
9 Lu MK, Gong XG, Guan KL. mTOR ve funkci podocytů: je rapamycin dobrý pro diabetickou nefropatii? Buněčný cyklus 2011; 10(20): 3415-3416.
10 Hartleben B, Godel M, Meyer-Schlesinger C, et al. Autofagie ovlivňuje náchylnost k glomerulárním onemocněním a udržuje homeostázu podocytů u stárnoucích myší. J Clin Invest 2010; 120(4): 1084-1096.
11 Sun GD, Li CY, Cui WP a kol. Recenze bylinné tradiční čínské medicíny pro léčbu diabetické nefropatie. J Diabetes Res 2016; 2016: 5749857.
12 Zhao WJ, Cai Z, Meng Y a kol. Aplikace metody výživy ledvin Yin Zhang Binghou při léčbě chronického onemocnění ledvin. Peking Zhong Yi Yao 2016; 35(4): 341-343.
13 Duan YF, Zhang HB. Představení aplikačních zkušeností profesora Zhang Binghou. Xin Zhong Yi 2012; 44 (4): 147-149.
14 Yu XJ, Chen SH, Lu GY. Průzkum výzkumu farmakodynamiky želvoviny "Ziyin Bushen". Dang Dai Yi Xue 2009; 15(10): 15-17.
15 Pang XX, Tong Y, Li HP, Han JR. Pokrok ve výzkumu pijavice a jejích extraktů v léčbě diabetické nefropatie. Guang Ming Zhong Yi 2019; 34(1): 168-171.
16 Zhang ZL, Dong H. Pokrok ve výzkumu pijavice a jejích účinných látek v léčbě diabetické nefropatie Zhong Xi Yi Jie He Yan Jiu 2018; 10(02): 106- 110.
17 Dai H, Liu Q, Liu B. Pokrok ve výzkumu mechanismu deplece podocytů u diabetické nefropatie. J Diabetes Res 2017; 2017: 2615286.
18 Martin CE, Jones N. Nefrinová signalizace v podocytu: aktualizovaný pohled na regulaci signálu na štěrbinové membráně a mimo ni. Front Endocrinol (Lausanne) 2018; 9:302.
19 Jaakko P, Karl T. Molekulární složení bariéry glomerulární filtrace. Biochem Bioph Res Co 2010; 396(1): 164-169.
20 Noboru M, Beth L, Ana Maria C, Klionsky DJ. Autofagie bojuje s nemocí prostřednictvím buněčného samotrávení. Příroda 2008; 451(7182): 1069.
21 Lenoir O, Jasiek M, Henrique C, a kol. Endoteliální buňka
a autofagie podocytů synergicky chrání před glomerulosklerózou vyvolanou diabetem. Autofagie 2015; 11(7): 1130-1145.
22 Ilatovskaya DV, Levchenko V, Lowing A, Shuyskiy LS, Palygin O, Staruschenko A. Poškození podocytů u diabetické nefropatie: důsledky aktivace TRPC kanálů závislé na angiotensinu Ⅱ. Sci Rep 2015; 5: 17637.
23 Rabanal-Ruiz Y, Otten EG, Korolchuk VI. mTORC1 jako hlavní brána k autofagii. Essays Biochem 2017; 61 (6): 565-584.
24 Kim YC, Guan KL. mTOR: farmakologický cíl pro regulaci autofagie. J Clin Invest 2015; 125(1): 25-32.
25 Li XY, Wang SS, Han Z a kol. Triptolid obnovuje autofagii ke zmírnění diabetické renální fibrózy prostřednictvím miR-141-3p/PTEN/Akt/mTOR dráhy. Mol Ther Nucleic Acids 2017; 9: 48-56.
26 Liu L, Yang L, Chang B, Zhang J, Guo Y, Yang X. Ochranné účinky rapamycinu na buněčnou autofagii v renálních tkáních potkanů ​​s diabetickou nefropatií prostřednictvím signální dráhy mTORS6K1-LC3Ⅱ. Ren Fail 2018; 40(1): 492-497.