Propagační účinek Cistanche Deserticola na sexuální funkce

Li Gu, Wen Ting Xiong, Yan Lei Zhuang, Jian Shuang Zhang a Xin Liu*

Výzkumné centrum potravinářského a zdravotnického inženýrství státního ministerstva školství, Sun Yat-sen University, Guangzhou, Čína

Abstraktní:Cistanchedeserticola(CD) je po tisíce let považován za posilující činidlo na reprodukční funkci. ÚčinkyCDV této studii byly zkoumány extrakty na erektilní odpověď penisu. Po kastraci byly krysy intragastricky ošetřenyCDextrakt ({{0}},45, 0,90 a 1,8 g/kg) denně po dobu čtyř týdnů. Byla měřena erektilní odpověď penisu a sérumhormonybyly testovány na konci experimentu. Bylo vyhodnoceno, že erektilní latence se prodloužila a doba erekce významně zkrátila u kastrovaných potkanů ​​ve srovnání s falešně operovanými kontrolami. Nicméně,CDextrakt zkrátil erektilní latenci a prodloužil dobu erekce, aby se minimalizovaly negativní účinky kastrace. Při dávce 0,9 g/kgCDextrakt reguloval luteinizaci sérahormonkoncentrace se blíží normální úrovni u kastrovaných potkanů. Tato zjištění tomu nasvědčovalaCDusnadnil erektilní odpověď penisu a do určité míry moduloval hladinu hormonů v séru.

klíčová slova:Cistanchedeserticola; erektilní odezva; kastrace;hormon.

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanche má mnoho účinků, klikněte sem a dozvíte se více

ÚVOD

CistancheHoffmg. Et Link, jeden z rodů čeledi Orobanchaceae, je rozšířen především ve vyprahlých zemích a pouštích na severní polokouli, jako je Vnitřní Mongolsko, Xinjiang, autonomní oblasti Ningxia v Číně, Írán, Indie, Mongolsko atd.Cistanchedruhy patří k vytrvalým parazitickým bylinám, které se běžně uchycují na kořenech rostlin fixujících písek, jako je Haloxylox ammodendron, H. persicum, Kalidium listnatý a Tamarix atd. (Jiang a Tu 2009).

HerbaCistanche, stonekCistanchedruh, byl považován za vynikající tonikum a vysloužil si čest "Ženšen pouští". MeziCistanchedruh,Cistanchedeserticola YC MA byl označen jako primární zdrojový materiál Cistanche (Stefanova et al. 2011). V důsledku nadměrné sklizně v posledních letech je však nedostatek přírodních zdrojů divoké C. deserticola (CD), která byla sbírána jako jedna z rostlin třídy II, která potřebuje ochranu v Číně, takže jiné druhy tohoto rodu, jako např. C. salsa a C. Sinensis se v některých oblastech používají také jako náhražky. Od prvního zaznamenaného v Shen Nong's Chinese Material Medica (starověkém farmakologickém kompendiu) se CD považovalo za tonizaci ledvin a povzbuzení "Yang" v klinické praxi podle teorie tradiční čínské medicíny, která je údajně účinná pro reprodukci, vývoj a funkce plodnosti. Mezitím se CD také vařilo se skopovým masem, bramborem nebo rýží, aby se vyrobilo tonikum k léčbě poškození způsobeného přepětím po stovky let, což naznačuje, že je bezpečné ho užívat perorálně (Xiong et al. 2013). Tato neoficiální použití však existují hlavně v čínských prvotiskách, s omezenými vědeckými informacemi diskutovanými z hlediska moderních farmakologických konceptů.

Erektilní dysfunkce (ED) je stav charakterizovaný buď neadekvátní erekcí penisu, nebo erekcí, která u dospělých mužů netrvá dostatečně dlouho (Cohan a Korenman 2000). V reakci na moderní, sofistikované chemické látky se znovu objevil zájem o hledání účinných a bezpečných léků z rostlin pro léčbu ED (Adimoelja 2000). Předchozí studie (Liu et al. 2009) naznačila, že CD elektuary urychlilo erekci penisu u normálních potkanů, nicméně nebyly k dispozici žádné údaje týkající se účinku CD na erektilní dysfunkci.

U zvířat byla chirurgická kastrace s bilaterální orchiektomií považována za standard kastrace pro vyšetřování ED (Tombal 2005). Proto byla tato studie provedena za účelem vyhodnocení potenciálních účinků CD proti ED zkoumáním erektilní latence a trvání u kastrovaných potkanů.

MATERIÁLY A METODY

Chemikálie a materiály

Echinacoside (purity >98%) and acteoside (purity >98 procent) byly zakoupeny od Národního institutu pro kontrolu potravin a léčiv (Peking, Čína). Methanol čistoty pro HPLC byl zakoupen od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Čištěná voda byla vyrobena pomocí systému Millipore Milli-Q Integral 3 System a Q-POD Milli-Q System (Bedford, MA, USA). Stonky C. deserticola byly zakoupeny od Shenzhen GURU Biology Co., Ltd (Guangdong, Čína) a rozemlety na jemný prášek pomocí rozmělňovače, který prošel sítem 60 mesh.

HPLC analýza a příprava rostlinného materiálu Obsahy echinakosidu a akteosidů v CD prášku byly stanoveny podle naší předchozí metody (Zhao et al. 2011). Poté se každých 100 g sušeného prášku vařilo v 1,5 l vody po dobu 1,5 hodiny. Po ochlazení na teplotu místnosti byla směsná kapalina odstřeďována při 2000 otáčkách za minutu po dobu 10 minut (Eppendorf 5810R, Německo) a sraženina byla dvakrát reextrahována za stejných podmínek. Spojené supernatanty byly zakoncentrovány na vakuové rotační odparce (Heidolph laborota 4001-efektivní, Německo) při 60 stupních a poté lyofilizovány a poskytly asi 42 procent sušeného extraktového prášku. Při provádění následného experimentu na zvířatech byl vysušený extrakt rozpuštěn v čištěné vodě při teplotě místnosti.

Pokusná zvířata

Dospělí samci potkanů ​​Sprague-Dawley (200-220g) byli získáni z Medicine Experimental Animal Center of Guangdong Province (Guangzhou, PR Čína), chováni v ubikacích s řízenou teplotou s 12-hodinovými cykly světlo/tma v místnosti teplota (22-24 stupně) a konstantní vlhkost (40-70 procent) v laboratoři SPF (bez specifických patogenů) a krmené ad libitum. Experimentální postupy byly v souladu s National Institute of Health Guide for Care and Use of Laboratory Animals.

experimentální procedura

Jeden týden před podáním bylo padesát samců potkanů ​​SD anestetizováno pentobarbitalem sodným intraperitoneálně (40 mg/kg) (Jung et al. 1999) a náhodně rozděleno do pěti skupin: kromě potkanů ​​ve skupině s falešnou operací (Sham) , zbytek byl bilaterálně kastrován šourkovým přístupem (Anderes 2003, Schlatt et al. 2002). Mezitím bylo skupinám léčeným CD podáváno intragastricky 0,45 g/kg (nízká dávka CD extraktu, LCD plus Cas), 0,9 g/kg (střední dávka CD extraktu, MCD plus Cas) a 1,8 g/kg (vysoká dávka CD extraktu, HCD plus Cas) CD extraktu, v tomto pořadí, zatímco simulovaným a kastrovaným skupinám bylo podáváno pouze odpovídající množství vody. Měření tělesné hmotnosti bylo prováděno na začátku procedury a poté každý týden. Všechny krysy byly ihned po smrti podrobeny laparotomii pro odstranění a zadní zvážení následujících orgánů: předkožkové žlázy, semenný váček, prostata a sval levator ani.

Měření erektilní odezvy penisu

Erektilní funkce potkanů ​​v každé skupině byla hodnocena podle předchozích metod (Ji et al. 2009, Luo et al. 2006). Stručně řečeno, bipolární elektroda z nerezové oceli (BL- 420F Data Acquisition & Analysis System, Time Technology Co., Ltd, Chengdu, PR China) byla opatrně umístěna na penis, dokud nebyl vztyčen pulzem elektrického stimulace (5 V) 0,2 s. Doba od stimulace do erekce byla zaznamenána jako latence erekce penisu. Když byla pozorována erektilní odezva penisu, elektroda mohla být vytažena z penisu a doba, po kterou penis udržoval erekci, byla zaznamenána jako doba erekce.

Odběr krve a analýza sérových hormonů.

Krysy byly anestetizovány pentobarbitalem sodným intraperitoneálně (40mg/kg) (Jung et al. 1999). Vzorky krve byly odebrány a sraženy při 4 stupních po dobu 4 hodin, z nichž bylo sérum odebráno centrifugací při 4000 ot./min po dobu 5 minut při 4 stupních (Eppendorf 5810 R, Německo) a okamžitě skladováno v mrazáku -20 stupňů do další analýzy. . Celkové hladiny LH a FSH byly měřeny za použití komerčních souprav pro radioimunoanalýzu (RIA) (Beijing North Institute of Biological Technology, Peking, Čína) podle pokynů výrobce (Matsumoto et al. 1986). Na základě kompetitivní radioaktivní imunitní techniky byl v testu použit I125-značený LH (nebo FSH). Stručně, 100 ul I125-značeného LH (nebo FSH) činidla bylo přidáno do 100 ul vzorku séra a inkubováno se 100 ul purifikované králičí protilátky při 4 stupních (nebo 37 stupních) přes noc. Poté bylo do komplexu antigen-protilátka přidáno oslí-anti-králičí imunitní separační činidlo a centrifugováno (3500 ot./min, 15 minut), aby se oddělil volný a na protilátku navázaný125I-LH (nebo FSH). Poté byla radioaktivita sraženiny měřena na počítači radioimunitního testu (DMF-96, Zhongcheng electric technology development Co., Ltd., Hefei, Čína). Limity citlivosti testu LH a FSH byly oba 1,0 mIU/ml.

STATISTICKÁ ANALÝZA

Analýza dat byla provedena pomocí softwaru SPSS verze 16.0. Hodnoty byly vyjádřeny jako průměr ± standardní odchylka (SD). Parametrická data byla analyzována pomocí analýzy jednosměrné analýzy rozptylu (ANOVA) následované post hoc testy LSD. Neparametrická data byla analyzována Kruskal-Wallisovým testem. Rozdíly byly považovány za statisticky významné, pokud byla pravděpodobnost odchylky menší než 0,05.

VÝSLEDEK

Kvantitativní stanovení obsahu echinakosidu a akteosidu v CD prášku

Obsah echinakosidu a akteosidu v CD prášku byl 1,27±0.01 procento a 0,52±0,003 procenta, což odpovídalo požadavku čínského lékopisu. HPLC chromatogram CD prášku je znázorněn na Obr. 1.

Obr. 1HPLC chromatografický profilCistanchedeserticola prášek. Vrchol 1, echinakosid; Vrchol 2, akteosid. osa X, retenční čas; Osa Y, jednotka absorbance. Podmínky HPLC: systém Waters HPLC (binární HPLC pumpa 1525, detektor indexu lomu 2414, detektor fotodiodového pole 2996); stacionární fáze: Symmetry C18 (4,6 mm × 25 {{10}} mm, 5 um, Waters, Milford, MA, USA); mobilní fáze: 0,5% (V/V) vodný roztok kyseliny octové (A) a methanol (B) jako složka (0 min, A: B=25:75; 10- 30 min, A: B{{16 }}: 60; 30 min, A: B=0: 100); průtok: 1 ml/min; detektivní vlnová délka: 330 nm; teplota: 30 C.

Tělesné hmotnosti a relativní hmotnosti přídatných orgánů Jak je uvedeno v tabulce 1, všechny krysy měly podobnou počáteční tělesnou hmotnost se zvýšením ode dne 1 do dne 28. Průměrné hodnoty v kastrované skupině se však zvýšily z 216,8±9,2 g na 251,4±12,7, 283,3 ± 15,1, 306,8 ± 15,4 a 322,2 ± 18,4 g, přibývající na váze ve srovnání s falešně ovládanými protějšky (str.<0.05). there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" sham="" group="" and="" cd="" treated="">

Dále, průměrné relativní hmotnosti prepuciální žlázy, prostaty a semenného váčku a svalu levator ani u kastrovaných potkanů ​​byly významně nižší (p<0.05) than="" those="" of="" normal="" controls,="" respectively.="" compared="" with="" the="" rats="" castrated="" only,="" the="" relative="" values="" of="" these="" organs'="" weight="" tended="" to="" be="" higher="" under="" the="" treatment="" of="" cd="">

Hodnocení erektilní odezvy

Na rozdíl od falešné skupiny kastrace způsobila, že krysy strávily více času získáním erekce penisu při elektrické stimulaci (p<0.01). however,="" the="" erectile="" latency="" was="" shortened="" by="" cd="" extract,="" exhibiting="" a="" significant="" decrease="" of="" 52.7%="" in="" the="" lcd="" +cas="" group=""><0.01), 73.5%="" in="">

plus skupina Cas (str<0.01) and="" 74.5%="" in="" hcd="" +cas="" group=""><0.01), respectively.="" furthermore,="" castration="" shortened="" the="" erectile="" duration="" with="" the="" mean="" value="" of="" 37.2±17.3="" s="" compared="" to="" the="" sham-operated="" group=""><0.01). however,="" the="" erectile="" duration="" in="" rats="" was="" significantly="" prolonged="" approximately="" by="" 2.6-fold="" in="" the="" mcd="" +cas="" group=""><0.01) and="" 2.1-fold="" in="" the="" hcd="" +cas="" group=""><0.01). it="" showed="" no="" strict="" dose-related="" correlation.="" (fig.="">

Hladiny hormonů v séru

Analyzována testem RIA byla průměrná sérová koncentrace LH u kastrovaných potkanů ​​2,50±0,34 mIU/ml, což ukazuje zvýšení ve srovnání s falešně operovanou kontrolou (p<0.05). however,="" the="" value="" descended="" about="" 49.2%="" in="" mcd="" +cas="" group="" relative="" to="" that="" in="" castrated="" control=""><0.05) (fig.="" 3).="" as="" shown="" in="" fig.="" 4,="" no="" statistical="" differences="" were="" observed="" among="" all="" groups="" on="" fsh="">

DISKUSE

Naše výsledky ukázaly, že kastrace významně prodloužila erektilní latenci penisu a zkrátila dobu erekce s pozoruhodnou atrofií přídatných orgánů. CD extrakt však usnadnil erektilní odpověď penisu a do určité míry moduloval hladinu LH v séru u kastrovaných potkanů.

Spontánní erekce je stimulována a udržována hlavně androgeny prostřednictvím buněčných, molekulárních a fyziologických mechanismů, včetně relaxace kavernózního hladkého svalstva (Traish et al. 2007, Talha et al. 2007) . Nedostatečná hladina testosteronu vede ke snížení jeho relaxace (McClure 1988), což má za následek impotenci u mužů (Bivalacqua et al. 2000). Zejména u potkanů ​​je udržován širokým rozsahem systémových koncentrací testosteronu jako 10-12 procenta, pod nimiž je erektilní odpověď oslabena v závislosti na dávce (Armagan et al. 2006). V této studii byla koncentrace testosteronu v oběhu příliš nízká na to, aby splnila limit citlivosti (0,02 ng/ml) u všech kastrovaných potkanů ​​(data nebyla ve výsledcích uvedena). CD extrakt však významně zkrátil erektilní latenci penisu při třech dávkách a prodloužil dobu erekce při 0,90 g/kg a 1,8 g/kg. Byl to pravděpodobně důsledek androgenního efektu CD zmíněného v některých předchozích studiích (He et al. 1996a, He et al. 1996b).

Některé přídatné orgány, jako je prostata a semenný váček, jsou androgen-dependentní, takže změny hmotnosti mohou odrážet změny endokrinního stavu (Trisomboon et al. 2007, Jang et al. 2011). Existovala prahová hladina testosteronu, pod kterou byl metabolismus těchto orgánů inhibován (Trachtenberg 1985). V naší studii bylo potvrzeno, že kastrace indukovala snížení hmotnosti přídatných reprodukčních orgánů v důsledku nedostatku testosteronu.

Testosteron je primárně vylučován Leydigovými buňkami varlete a regulován hypofyzálními hormony, jako je luteinizační hormon (LH) a folikuly stimulující hormon (FSH), které hrají důležitou roli při udržování funkce penisu u kastrovaných zvířat (Robert et al. 2004). Vzhledem k tomu, že osa hypotalamus-hypofýza-gonáda (HPG) je regulačním mechanismem zpětné vazby s uzavřenou smyčkou, nízké hladiny gonadálních hormonů mohou regulovat sekreci LH a FSH (Morales et al. 2004). Naše studie zjistila, že hladina LH v séru byla významně zvýšena u kastrovaných potkanů ​​a poté klesla na normální hladiny CD extraktem v dávce 0,90 g/kg, což bylo v souladu s předchozím závěrem, že zvýšená hladina LH byla spojena s vyšším rizikem erektilní dysfunkce (Kupelian et al. 2006). Ve varlatech stimuluje LH syntézu a uvolňování testosteronu, jehož zpětná vazba je relativně konzistentní, zatímco FSH přímo působí na Sertoliho buňky pro výživu pomocí zpětnovazebního kontrolního komplexu (Hellqvist et al. 2008). Tato zjištění poskytla větší podporu pro domněnku, že CD exprimuje účinek podobný androgenům, který může být hlavně odpovědný za snížení sérového LH více než FSH.

V současném pozorování byl vliv kastrace na vývoj tělesné hmotnosti u samců potkanů ​​podobný zjištěním v předchozí studii (Christoffersen et al. 2006), zatímco v rozporu s výsledky u samic potkanů ​​(Pantaleão et al. 2010). CD extrakt nedokázal výrazně zlepšit tělesnou hmotnost, což bylo pravděpodobně způsobeno nedostatečnou délkou léčby nebo komplexními dopady na celkový zdravotní stav.

Závěrem lze říci, že kastrace prodloužila erektilní latenci penisu a významně zkrátila dobu trvání, se zvýšením sérového LH a atrofií přídatných pohlavních orgánů. CD extrakt však usnadnil erektilní odpověď penisu zkrácením erektilní latence a prodloužením doby erekce u kastrovaných potkanů. Tyto účinky byly pravděpodobně způsobeny účinkem podobným androgenům, což bylo podpořeno pozorováním, že CD extrakt normalizoval sérové ​​koncentrace LH, zejména při dávce 0,90 g/kg. K prokázání účinku CD extraktu proti ED na hypotalamické a limbické úrovni jsou však zapotřebí další důkazy a této cenné tradiční medicíně v moderním světě by bylo možné věnovat více pozornosti.

PODĚKOVÁNÍ

Tato práce byla podpořena granty z projektu Science and Technology Support by Project v Ujgurské autonomní oblasti Sin-ťiang (PR Čína) (200840102-15).

REFERENCE

Adimoelja A (2000). Fytochemikálie a průlom tradičních bylin v léčbě sexuálních dysfunkcí. Int. J. Androl., 23: 82-84.

Anderes KL (2003). Biologická charakterizace nového, perorálně aktivního antagonisty hormonu uvolňujícího gonadotropin (GnRH) s malou molekulou na kastrovaných a intaktních potkanech. J. Pharmacol. Exp. Ther., 305: 688-695. Armagan A, Kim NN, Goldstein I a Traish AM (2006). Vztah dávka-odpověď mezi testosteronem a erektilní funkcí: Důkaz pro existenci a

kritický práh. J. Androl., 27: 517-526.

Bivalacqua TJ, šampion HC, Hellstrom WJ a Kadowitz PJ (2000). Farmakoterapie erektilní dysfunkce. Trendy. Pharmacol. Sci., 7: 524-540.

Christoffersen B, Raun K, Svendsen O, Fledelius C a Golozoubova V (2006). Hodnocení kastrovaného samce potkana Sprague-Dawley jako modelu metabolického syndromu a diabetu typu 2-. Int. J. Obes., 30: 1288- 1297.

Cohan P a Korenman SG (2000). Pokrok v erektilní dysfunkci a hormonální funkci. J. Anti-aging Med., 3: 169-175.

Feldman HA, Goldstein I, Hatzichristou DG, Krane RJ a McKinlay JB (1994). Impotence a její lékařské a psychosociální souvislosti: Výsledky studie stárnutí mužů v Massachusetts. J. Urol., 151: 54-61.

He W, Shu XF, Zong GZ, Shi ML, Xiong YL a Chen MH (1996b). Studie na posílení ledvin a Yang podporující působení Cistanche deserticola YC Ma před a po přípravě. Brada. J. Chin. Mater. Med., 9: 534-537.

He W, Zong GZ, Wu GL a Chen MH (1996a). Průzkum aktivních složek Cistanche na účinek podobný androgenům. Brada. J. Chin. Mater. Med., 9: 564-565.

Hellqvist A, Schmitz M a Borg B (2008). Účinky kastrace a androgenní léčby na expresi FSH- a LH- u lipnice se třemi trny, Gasterosteus aculeatus Rozdíly ve zpětné vazbě zprostředkovávající fotoperiodickou reakci zrání? Gen. Comp. Endocr., 158: 178-182.

Jang M, Min JW, In JG a Yang DC (2011). Účinky extraktu z červeného ženšenu na motilitu epididymálních spermií myší vystavených ethanolu. Int. J. Toxicol., 30: 435-442.

Ji DB, Ye J, Li CL, Wang YH a Zhao J (2009). Antiaging efekt extraktu Cordyceps Sinensis. Phytother. Res., 23: 116-122.

Jiang Y a Tu PF (2009). Analýza chemických složek u druhů Cistanche. J. Chromatogr. A., 1216: 1970-1979.

Jung GW, Kwak JY, Kim IH, Koo MY, Park JI, Yoon S, Jung DG, Jung SI, Kwon HY a Yoon JH (1999). Úloha růstového faktoru na regeneraci nervů obsahujících oxid dusnatý (NOS) po kavernózní neurotomii u potkanů. Int. J. Impot. Res., 11: 227-235.

Kupelian V, Shabsigh R, Travison TG, Page ST, Araujo AB a McKinlay JB (2006). Existuje vztah mezi pohlavními hormony a erektilní dysfunkcí? Výsledky studie stárnutí mužů v Massachusetts. J. Urology, 176: 2584-2588.

Liu ZR, Zhang D, Wu HJ, Li YL, Chen SP a Yang YM (2009). Účinek lektvaru Cistanche na syntázu oxidu dusnatého a výživu ledvin Yang. J. Med. & Pharm. Brada. Min., 5: 33-34.

Luo Q, Li Z, Huang X, Yan J, Zhang S a Cai YZ (2006). Polysacharidy Lycium barbarum: Ochranné účinky proti tepelnému poškození varlat krys a poškození DNA v buňkách myších varlat H2O2-indukovaném a příznivý účinek na sexuální chování a reprodukční funkce Hemi kastrovaných krys. Life Sci., 79: 613-621.

Matsumoto AM, Karpas AE a Bremner WJ (1986). Chronické podávání lidského choriového gonadotropinu u normálních mužů: důkaz, že folikuly stimulující hormon je nezbytný pro udržení kvantitativně normální spermatogeneze u člověka. J. Clin. Endocrinol. Metab., 62: 1184-1192.

McClure RD (1988). Endokrinní hodnocení a terapie erektilní dysfunkce. Urol. Clin. N. Am., 15: 53-64.

Morales A, Buvat J, Gooren LJ, Guay AT, Kaufman JM, Tan HM a Torres LO (2004). Endokrinní aspekty sexuální dysfunkce u mužů. J. Sex Med., 1: 69-81.

Pantaleão TU, Mousovich F, Rosenthal D, Padrón ÁS, Carvalho DP a Costa VMCd (2010). Vliv hladin sérového estradiolu a leptinu na funkci štítné žlázy, příjem potravy a přírůstek tělesné hmotnosti u samic potkanů ​​Wistar. Steroidy, 75: 638-642.

Robert WH a Robert EB (2004). Hormonální regulace spermatogeneze. Int. J. Androl., 27: 335-342.

Schlatt S, Kim SS a Gosden R (2002). Spermatogeneze a steroidogeneze v tkáni varlat myší, křečků a opic po kryokonzervaci a heterotopickém roubování kastrovaným hostitelům. Reprodukce, 124: 339-346. Stefanova NA, Fursova AZ, Sarsenbaev KN a Kolosova NG (2011). Účinky Cistanche deserticola na chování a známky katarakty a retinopatie u potkanů ​​OXYS s akcelerací stárnutí. J. Ethnopharmacol., 138: 624-632.

Talha M, Bilal G, Gökhan T, Arı Z a Coşkun B (2007). Vztah hladin pohlavních hormonů a erektilní dysfunkce: Které testy by se měly provádět běžně? Yonsei. Med. J., 48:1015.

Tombal B (2005). Vhodná kastrace s agonisty hormonu uvolňujícího luteinizační hormon (LHRH): Jaká je optimální hladina testosteronu? Eur. Urol. Suppl., 4: 14-19.

Trachtenberg J (1985). Optimální koncentrace testosteronu pro léčbu rakoviny prostaty. J. Urology, 133: 888-890.

Traish AM, Goldstein I a Kim NN (2007). Testosteron a erektilní funkce: od základního výzkumu k novému klinickému paradigmatu pro léčbu mužů s androgenní insuficiencí a erektilní dysfunkcí. Eur. Urol., 52: 54-70.

Trisomboon H, Watanabe G, Wetchasit P a Taya K (2007). Účinek denní léčby thajskou bylinkou Kaempferia parviflora v Hershbergerově testu s použitím kastrovaných nedospělých potkanů. J. Reprod. Develop, 53: 351- 356.

Xiong WT, Gu L, Wang C, Sun HX a Liu X (2013). Antihyperglykemické a hypolipidemické účinky Cistanche tubulosa u diabetických db/db myší typu 2. J. Ethnopharmacol., 150: 935-945.

Zhao SY, He XY, Jia BG, Peng QY a Liu X (2011). Produkce akteosidu z Cistanche tubulosa beta-glukosidázou. Pak. J. Pharm. Sci., 24: 135-141.