Studie o optimalizaci technologie extrakce a antioxidační aktivity polysacharidů z květů Yunnan Coffea Arabica

Abstrakt: Optimalizovat technologii těžby a studovatantioxidantčinnostpolysacharidyz kávového květu (ACP), ultrazvuková teplota, ultrazvukový čas, poměr kapalina-pevná látka, výkon ultrazvuku, doba ponoření vzorku a objemové procento ethanolu byly zkoumány s použitím výtěžku extrakce polysacharidů jako indikátoru. Poté byly jako hlavní ovlivňující faktory použity ultrazvuková teplota, ultrazvukový čas a ultrazvukový výkon, technologie extrakce byla optimalizována metodou odezvy povrchu.Antioxidantaktivita ACP byla zkoumána pomocí DPPH· a ABTS plus · scavenging efektů a FRAP testů. Výsledky ukázaly, že optimální technologické podmínky ultrazvukové extrakce byly: teplota ultrazvuku 69,5 stupně, doba působení ultrazvuku 93 min, výkon ultrazvuku 175 W, poměr kapalina-pevná látka 10:1 ml/g, doba ponoření vzorku 3{{ 17}} min a objemové procento etanolu 80 procent. Výtěžek polysacharidů byl 2,292 procenta. Výsledky ukázaly, že hodnota IC50 na základě DPPH· vychytávacího účinku ACP byla 3,844 mg·mL-1, vychytávací aktivita ABTS plus · byla 0,921 mmol Trolox/g ACP. Hodnoty FRAP ACP podle testu FRAP byly 0,0565 mmol Fe2 plus /g ACP, což ukázalo, že ACP měl slabýantioxidantaktivita. Tato studie by poskytla teoretický základ pro komplexní využití a vývoj vedlejších kávových produktů.

Klíčová slova:kávové květypolysacharid;extrakce;antioxidační aktivitu

Kávaje rostlina z rodu Rubiaceae (Coffea), rozšířená především v zemích jako Jižní Amerika, Střední Amerika, Afrika a Asie, a pěstuje se ve více než 80 zemích světa [1]. Káva má podle „čínské Materia Medica“ osvěžující, močopudné a žaludeční účinky a používá se především při psychické únavě a nechutenství. Často se používá jako osvěžující, diuretikum a žaludeční léčivo. Moderní výzkumy ukázaly, že káva obsahuje různé aktivní složky, jako jsou alkaloidy, fenolové kyseliny, flavonoidy a terpeny, které mají různé farmakologické aktivity, jako je ochrana jater, neuroprotekce,antioxidanta antidiabetika [2-3]. mé zeměkávapěstování dominuje malozrnná káva a více než 99 procent z ní je distribuováno v Yunnanu. Malozrnná káva Yunnan je bohatá na látky, kromě kofeinu, kyseliny chlorogenové, trigonelinu a dalších složek obsahuje také ascarosidy

I~II[4], panikulosid VI[4], kofarylosid I[4], villanovane I[4], kaffarolidy A~H[5], caffruenol AB[6], kafruony AD[6] a caffruolid AB[7] a některé nové terpenoidy. Mezi nimi byla potvrzena jistá aktivita kafarolidů C, D a F, která aktivovala agregaci krevních destiček in vitro [5]; caffruenol AB a caffruolid AB mají účinek na inhibici lipopolysacharidem indukované produkce NO u 264,7 makrofágů [7]. S hloubkovým studiem kávy se přidaná hodnota kávy stále zvyšuje. V posledních letech jsou kávové vedlejší produkty bohaté na fenolové kyseliny, flavonoidy, terpeny, alkaloidy a další biologické

Aktivní látky, které lze využít jako přírodní a udržitelné zdroje aktivních látek jako napřantioxidanty, ochrana jater a ochrana nervů, přiměly výzkumníky k výzkumu vedlejších kávových produktů stále více [8−10]. Campa a kol. uvedl, že kávové listy obsahují fenolické sloučeniny [11]; Chen zhodnotil bohaté chemické složky alkaloidů, flavonoidů, fenolových kyselin, terpenů atd. v kávových listech a jejich farmakologické aktivity, jako jsou antioxidační, protizánětlivé a antibakteriální účinky. [12] a studovali vliv metod zpracování kávových listů a stáří listů na jeho chemické složení a aktivitu [13].

Kromě toho Fu Xiaoping a spol. [14−15] zjistili, že surový extrakt z malé kávové kůry Yunnan má určitý ochranný a regenerační účinek na poškozené endoteliální buňky lidské pupeční žíly a má také potenciálantioxidantúčinky a zjistili, že hlavní květina Kyanidy jsou kyanid-3-glukosid a kyandin-3-rutinosid.

Kávové květy jsou často vyřazeny jako hlavní vedlejší produkt v odvětví pěstování kávy. Stávající studie však zjistily, že květy kávy jsou bohaté na chemické složky. Stashenko a spol. [16] pomocí GC-MS analyzovali těkavé a polotěkavé složky v malých květech kávy a výsledky určily celkem 150 sloučenin s obsahem n-pentadekanu. Nejvyšší, následovaný geraniolem. Kromě toho Nguyen a spol. [17] studovali účinné látky v kávových květech a zjistili, že kávové květy mají vysoký obsah fenolických sloučenin, takže kávové květy mohou být použity jako suroviny pro získávání přírodníchantioxidantúčinné látky. Kávové květy navíc obsahují i ​​kofein a trigonellin. Kofein je spojován se sníženým rizikem neurodegenerativních onemocnění [18–19]

Trigonellin může zabránit cukrovce a poškození ledvin a má také účinek na léčbu neurodegenerativních onemocnění [20-21]. Pinheiro a kol. [22] analyzovali obsah čtyř aktivních složek trigonelinu, kyseliny chlorogenové, kyseliny gallové a kofeinu v kávových květech různými metodami sušení a extrakce pomocí HPLC, z nichž nejvyšší obsah měly kofein a trigonelin; Antioxidační aktivita byla hodnocena experimenty ABTS a DPPH, které potvrdily, že kávový květ má antioxidační aktivitu a může být použit jako potenciální surovina pro výrobu čajových nápojů. V současné době existuje jen málo výzkumných zpráv o kávových květech, ale ze stávajících zpráv lze vidět, že kávové květy mají široké uplatnění jako potenciální zdroj bioaktivních sloučenin.

Polysacharidyjsou makromolekulární sloučeniny složené z více než 10 monosacharidů vázaných glykosidickými vazbami a široce se vyskytují u zvířat, rostlin a mikroorganismů. Polysacharidy jsou strukturně složité, s různými konformacemi a relativními molekulovými hmotnostmi, stejně jako se sekundárními strukturami vnitrořetězcových a meziřetězcových vodíkových vazeb. Moderní studie ukázaly, že polysacharidy mají farmakologické účinky, jako jsou antioxidační [23-24], anti-aging [25], imunitní regulace [26], protizánětlivé [27] a protinádorové [28]. Biologická aktivita polysacharidů souvisí s jejich čistotou, chemickou strukturou, rozpustností atd. Biologická aktivita polysacharidů se v posledních letech stala ohniskem výzkumu přírodních léčiv a je také kanálem pro objevování nových léků a vývoj funkčních potravin . Proto hrají polysacharidy důležitou roli v oblasti medicíny a potravin. Yunnan v mé zemi je hlavní oblastí pro pěstování kávy a kávové květy mají potenciální hodnotu pro rozvoj, ale existuje jen málo výzkumů o vývoji květů kávy Yunnan a potenciální hodnota kávových květů nebyla využita. Proto tento dokument bere květy malozrnné kávy Yunnan jako výzkumný objekt k provedení výzkumu jejích aktivních polysacharidů s cílem hluboce prozkoumat komplexní hodnotu využití malozrnné kávy Yunnan.

V tomto dokumentu,polysacharidvýtěžek byl použit jako hodnotící index k optimalizaci procesu extrakce polysacharidů a antioxidační kapacity kávových květů odebraných z města Baoshan v provincii Yunnan, aby poskytl základní údaje pro další vývoj biologicky aktivních polysacharidů. A poskytnout reference pro studium malozrnné kávy Yunnan a zlepšení její přidané hodnoty.

1 Materiály a metody

1.1 Materiály a nástroje

Kávakvětina Baoshan City, provincie Yunnan; Bezvodý alkohol Tianjin Chemical Reagent Co., Ltd.; Anthronová čistota 98.0 procent, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.; koncentrovaná kyselina sírová, kyselina chlorovodíková Chongqing Chuandong Chemical Co., Ltd.; 1,1-difenyl-2- trinitrofenylhydrazin (DPPH), 2,2'-diaza-bis-3-ethylbenzothiazolin{{10}}}sulfonová kyselina (ABTS), 2, 4,6-tripyridyltriazin (TPTZ), rutinní čistota 98.0 procent, Shanghai Ruiyong Biotechnology Co., Ltd.; ve vodě rozpustný vitamín E čistota 98,0 procent, Hefei Bomei Biotechnology Co., Ltd.; hexahydrát chloridu železitého analyticky čistý, západní

Long Science Co., Ltd.; Analytická kvalita persíranu draselného, ​​Tianjin Damao Chemical Reagent Factory; Pufr PBS, pufr octan sodný Xiamen Haibiao Technology Co., Ltd.

Kliknutím sem se dozvíte více informací o Rich inpolysacharid

Výrobek instantní kávy Cistanche

Elektronická váha FA2104N, 722-spektrofotometr Shanghai Qinghua Technology Co., Ltd.; KQ-250DB Ultrasonic Instrument, SHZ-D (Ⅲ) Circulating Water Vacuum Pump Gongyi Yuhua Instrument Co., Ltd.; Xuman 1000Y multifunkční bruska Yongkang City Boou Hardware Products Co., Ltd.; 800 elektrická odstředivka Jintan Fuhua Instrument Co., Ltd.; VFD-3000 Vakuová vymrazovací sušička Beijing Bo Yikang Experimental Instrument Co., Ltd.

1.2 Experimentální metoda

1.2.1 Extrakce kávového květupolysacharidyViz metoda Zheng Tingting et al. [29] s úpravami. Kávové květy sesbírané z města Baoshan v provincii Yunnan byly vysušeny ve stínu při pokojové teplotě, rozdrceny v drtiči a protlačeny přes 80-síto. Odvažte 2.0 g prášku z kávových květů, přidejte 20,0 ml čisté vody, namočte na 30 minut,

Ultrazvuk při 100 W po dobu 30 minut při 40 stupních, ochlazen na teplotu místnosti a filtrát byl zadržen po vakuové filtraci. K filtrátu byl přidán ethanol do koncentrace 80 procent pro vysrážení a ponechán stát po dobu 12 hodin. Po centrifugaci při 4000 ot./min po dobu 10 minut byl supernatant odstraněn a sraženina byla rozpuštěna ve vodě a lyofilizována při -80 stupních, aby se získal surový polysacharid.

Připravte 5 mg·mL−1 roztok polysacharidu z kávových květů a odložte stranou.

1.2.2 Příprava standardní křivky polysacharidů a stanovení obsahu polysacharidů v květech kávy Standardní křivka glukózy byla nakreslena s odkazem na metodu anthron-kyselina sírová [30]. Připravte 0.0, 25.{{10}}, 50.0, 100.{{23} }, 150,0 a 2 00,0 ug/ml standardních roztoků glukózy, v daném pořadí. Přesně napipetujte 1,00 ml výše uvedeného standardního roztoku glukózy s různými koncentracemi, přidejte 1,00 ml čisté vody a vložte do 25ml uzavřené zkumavky. Přidejte 5,0 ml 2,1 mg·ml-1 roztoku anthron-kyselina sírová, dobře protřepejte, ochlaďte v lázni led-voda, zahřívejte ve vroucí vodní lázni po dobu 7 minut a rychle ochlaďte na pokojovou teplotu v lázni led-voda. Použití deionizované vody jako slepé kontroly,

Absorbance A byla měřena kolorimetricky při 625 nm. Vezmeme obsah bezvodé glukózy jako úsečku (0.0, 25.0, 50.0, 1{{1{{12} ( R2=0.9970) (kde: Y je hodnota absorbance, X je množství glukózy, ug).

Do 25ml zkumavky se zátkou přesně napipetujte určitý objem 5 mg/ml roztoku polysacharidu z kávových květů připraveného výše a přidejte čistou vodu do objemu 2.00 ml. Přidejte 5.0 ml 2,1 mg·ml-1 roztoku anthron-kyselina sírová, dobře protřepejte, ochlaďte v lázni s ledovou vodou, zahřívejte ve vroucí vodní lázni po dobu 7 minut a rychle ochlaďte na pokojovou teplotu v lázeň s ledovou vodou. Absorbance A byla měřena kolorimetricky při 625 nm za použití deionizované vody jako slepé kontroly. Výtěžek polysacharidu kávového květu byl vypočten podle rovnice standardní křivky glukózy a každý vzorek byl třikrát opakován. Výsledky byly vyjádřeny jako průměrná hodnota a vzorec pro výpočet byl následující:

Výtěžek polysacharidu z kávových květů (v procentech) =X×m1×10−35×V×ms×100

Ve vzorci: X je obsah polysacharidu v objemu V roztoku polysacharidu kávového květu, ug; V je naměřený objem roztoku polysacharidu, ml; 5 je koncentrace připraveného roztoku polysacharidu z kávových květů, 5 mg·mL−1; m1 je lyofilizovaný kávový květ Celková hmotnost polysacharidu, g; ms je hmotnost vzorku kávového květu, g.

1.2.3 Jednofaktorový experiment

V procesu ultrazvukové extrakce polysacharidu kávového květu patří mezi důležité faktory ovlivňující výtěžnost polysacharidu především teplota ultrazvuku, doba ultrazvuku, poměr kapalina-materiál, výkon ultrazvuku, doba namáčení a koncentrace srážení alkoholu. Bylo vybráno pět úrovní ultrazvukové teploty: 40, 50, 60, 70 a 80 stupňů; bylo vybráno pět úrovní ultrazvukového času: 30, 60, 90, 120 a 150 minut; : 1, 30: 1 ml/g pět úrovní; ultrazvukový výkon volí pět úrovní 100, 125, 150, 175, 200 W; doba ponoření volí pět úrovní 30, 60, 90, 120, 150 min; koncentrace etanolu vybírá pět úrovní 75 procent, 80 procent, 85 procent, 90 procent, 95 procent pět úrovní, respektive experiment s jedním faktorem. Při filtrování pro jeden z parametrů

, další faktory jsou: teplota ultrazvuku 40 stupňů, doba ultrazvuku 30 minut,

Poměr kapaliny k materiálu 10:1 ml/g, výkon ultrazvuku 100 W, doba namáčení 30 min

a koncentrace srážení alkoholu 80 procent .

1.2.4 Experiment optimalizace povrchu odezvy Podle Box-Benhnkenova principu experimentálního designu, s výtěžností polysacharidu z kávových květů jako proměnnou odezvy, byly z jednofaktoru vybrány tři faktory, které mají největší vliv na výtěžnost polysacharidu kávových květů. výsledky testů, jak je uvedeno v tabulce 1. Optimalizace ultrazvukové teploty s výtěžkem polysacharidu kávového květu jako stupně indexu, ultrazvukového času a ultrazvukového výkonu.

1.2.5 Test antioxidační schopnosti

1.2.5.1 Experimenty s pohlcováním volných radikálů DPPH Experimenty s vychytáváním volných radikálů DPPH byly provedeny tak, jak je popsáno v Ref. [31]. Vezměte 3,9 ml 0.075 mmol/l reakčního roztoku DPPH a smíchejte jej s 100 μl polysacharidových roztoků různých koncentrací. Reakce byla prováděna při teplotě místnosti po dobu 30 minut ve tmě a hodnoty absorbance byly měřeny při 515 nm. S použitím rutinu jako pozitivní kontroly byla rychlost vychytávání volných radikálů DPPH vypočtena jako: I procento =[(A0–As)/A0]×100 (kde : As je absorbance roztoku vzorku; A0 je absorbance roztoku bez vzorku) a antioxidační aktivita je vyjádřena jako 50% míra inhibice (IC50).

1.2.5.2 Experiment ABTS plus pohlcování volných radikálů

Experimenty ABTS plus zachycování radikálů byly provedeny za použití metody popsané v Ref. [32]. Vezměte 2 ml roztoku polysacharidu a přidejte je do 2 ml roztoku ABTS plus volné radikály, po rovnoměrném promíchání, nechte reagovat při teplotě místnosti po dobu 6 minut a změřte absorpci UV při 734 nm a rutin je pozitivní kontrola. Vzorec pro výpočet ABTS plus schopnosti pohlcovat volné radikály je následující: I( procento )=[(A0–As)/A0]×10{ {12}} (kde As je absorbance roztoku vzorku; A0 je absorbance roztoku bez vzorku) Standardní křivka se stanoví měřením Kreslení standardních roztoků Trolox s různými koncentracemi (I procento =0.0247C −0,0046, R2=0,9937), ABTS anti-

Oxidační aktivita je vyjádřena jako mmol Trolox/g.

1.2.5.3 Metoda FRAP

Metoda popsaná v Ref. [33] byla použita pro stanovení antioxidační kapacity FRAP. Vezměte 5.0 ml TPTZ, 5.0 ml 20 mmol/l FeCl3 a 50 ml tlumivého roztoku octanu sodného (300

mmol/l, pH 3,6) k přípravě pracovního roztoku FRAP; 100 μl vzorek byl smíchán s 300 μl vody a 3,0 ml pracovního roztoku FRAP, umístěn do vodní lázně o teplotě 37 stupňů po dobu 30 minut; absorbance byla měřena při 595 nm. Byla připravena standardní křivka s FeSO4 jako standardní látkou (A=0.572C0.008, R2=0.9974) a jako pozitivní kontrola byl použit rutin podle standardní křivky

Vypočítejte redukční sílu v mmol FeSO4/g polysacharidu.

1.3 Zpracování údajů

Všechny experimenty byly opakovány třikrát a byla vzata průměrná hodnota. Pro návrh a analýzu experimentů s povrchem odezvy byl použit software DesignExpert 8.{1}}.6.

2 Výsledky a analýza

2.1 Jednofaktorové experimentální výsledky

Výsledky jednofaktorového experimentu jsou znázorněny na obr. Vliv teploty ultrazvuku na výtěžnost polysacharidu kávových květů: teplota ultrazvuku byla 40-80 stupně a výtěžnost polysacharidu byla 1,0048 procenta -1,7982 procent . V rozmezí 40-70 stupňů se výtěžnost polysacharidu kávových květů postupně zvyšovala se zvyšováním teploty ultrazvuku, maxima dosáhla při 70 stupních a po 70 stupních začala klesat. To může být způsobeno sníženým výtěžkem polysacharidů v důsledku destrukce struktury polysacharidů kávových květů za podmínek vysoké teploty, což bylo podobně popsáno v literatuře [29,34−35]. Teplota sonikace byla zvolena na 70 stupňů.

Vliv ultrazvukového času na výtěžek polysacharidu z kávových květů: ultrazvukový čas byl 30-150 min, výtěžek polysacharidu byl 1,0369 procenta -1,5853 procenta, výtěžek polysacharidu se zvýšil se zvýšením ultrazvukového času, a dosáhl maxima v 90 minutách, výtěžek začal klesat se zvyšující se dobou sonikace. Je tomu tak proto, že krátkodobá ultrazvuková extrakce nevede k úplnému rozpuštění polysacharidů, zatímco dlouhodobá ultrazvuková extrakce polysacharidy degraduje a vede ke snížení výtěžku, což je také uváděno v literatuře [29,34−35]. Proto byla doba sonikace zvolena na 90 minut.

Vliv poměru kapalina-pevná látka na výtěžek polysacharidu kávových květů: vliv poměru pevná látka-kapalina na výtěžek polysacharidu je malý. Výtěžek polysacharidu se zvyšoval se zvyšováním poměru kapaliny k pevné látce a dosáhl maxima při 25:1 ml/g. Po 25:1 ml/g se výtěžek snižoval se zvyšováním poměru kapaliny k pevné látce. Méně rozpouštědla povede k nedostatečnému rozpuštění polysacharidu, což má za následek nižší výtěžek polysacharidu; více rozpouštědla rozpouští polysacharid a ztěžuje jeho vysrážení a současně se výtěžek sníží v důsledku absorpce ultrazvukového záření rozpouštědlem. 29,34−35] mají také podobné zprávy. Vzhledem k tomu, že poměr kapaliny k materiálu má malý vliv na výtěžek, za účelem úspory množství činidel byl poměr kapaliny k materiálu zvolen jako 10:1 ml/g.

Vliv výkonu ultrazvuku na výtěžek polysacharidu kávových květů: výkon ultrazvuku byl vybrán jako 100-200 W a výtěžek polysacharidu byl 1,1185 procenta -1,8583 procenta. Po W se výtěžnost snižovala se zvyšováním výkonu ultrazvuku. Zvýšení výkonu ultrazvuku může účinně zničit buňky a tkáně, aby se rozpustily polysacharidy v rozpouštědle, takže zvýšení výkonu ultrazvuku je prospěšné pro srážení polysacharidů; fragmentační efekt a tepelný efekt produkovaný většími ultrazvukovými vlnami však také zvýší rozpouštění nečistot v květech kávy. tepelný efekt zničí polysacharidové složky a způsobí pokles výtěžku polysacharidu, což je také uváděno v literatuře [36−37]. Proto byl zvolen výkon ultrazvuku 175 W.

Vliv doby máčení na výtěžek polysacharidu kávových květů: vliv doby máčení na výtěžek polysacharidu byl malý, doba máčení byla 30-150 min a výtěžek polysacharidu byl 1,1827 procent -1. 4609 procent. V rozsahu 30-90 min se výtěžek polysacharidu zvyšoval se zvyšující se dobou namáčení a dosáhl maxima v 90 min. Po 90 minutách se s prodlužující se dobou namáčení výtěžek mírně snížil a měl tendenci být plochý. Prodloužení doby namáčení může usnadnit srážení polysacharidů během ultrazvuku a snížit spotřebu energie. Příliš dlouhé máčení však nemůže přinést vyšší výtěžek a příliš dlouhé máčení také způsobí uvolnění dalších složek a ovlivní výtěžek polysacharidu. To je podobné tomu, které je uvedeno v [38]. Vzhledem k tomu, že vliv doby namáčení je malý, byla z důvodu úspory času zvolena doba namáčení 30 minut.

Vliv koncentrace srážení alkoholu na výtěžek polysacharidů kávových květů: koncentrace srážení alkoholu má malý vliv na výtěžek polysacharidů, koncentrace srážení alkoholu je 75 procent ~ 95 procent, výtěžek polysacharidů je 0,9703 procent ~1,2806 procent. Výtěžek polysacharidu se zvyšoval se zvyšující se koncentrací ethanolu a dosáhl maxima 85 procent. Po 85 procentech se výtěžek snižoval se zvyšováním koncentrace ethanolu. Extrakce vodou a srážení alkoholem je použití polysacharidu nerozpustného v alkoholu, aby se vysrážel. Když se množství přidaného ethanolu zvýší, polysacharid je nerozpustný v ethanolu a vysráží se a výtěžek se zvýší. Když koncentrace srážení alkoholu překročí 85 procent, nelze výtěžek polysacharidu zlepšit, ale činidla jsou plýtvána. To je podobné tomu, které je uvedeno v [38]. Aby se zjednodušila operace, tento dokument používá metodu přímého přidávání ethanolu pro úpravu koncentrace alkoholu pro srážení. Zároveň, protože výtěžek 80 procent a 85 procent polysacharidu se příliš neliší, může ušetřit činidla a snížit odpad. Proto byla koncentrace srážení alkoholu zvolena na 80 procent.

2.2 Výsledky testu odezvy povrchu

2.2.1 Výsledky testu odezvy povrchu Ultrazvuková teplota, doba působení ultrazvuku a výkon ultrazvuku mají velký vliv. Proto je na základě výše uvedených jednofaktorových experimentů metoda povrchu odezvy optimalizována pro tři podmínky ultrazvukové teploty, ultrazvukového času a ultrazvukového výkonu. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2.

Vezmeme-li polysacharidový výtěžek (Y) jako index odezvy, byl vytvořen regresní model se třemi faktory ultrazvukové teploty, ultrazvukového času a ultrazvukového výkonu a byla získána kvadratická regresní rovnice:

Y{{0}}.29−0.067A plus 0.{{10}}54B−0. 019C plus 0,34AB plus 0,083AC plus 0,011BC-0,40A2

−0.19B2−0.27C2

2.2.2 Test významnosti rozptylu

Výsledky testu jsou uvedeny v tabulce 3.

Podle výsledků analýzy rozptylu v tabulce 3 byl celkový model významný (P<0.0001), and the model reached a very significant level, indicating that the difference between different factors was significant; according to the absolute value of the linear coefficient of the regression equation, it can be seen that each factor has a significant effect on the total polysaccharide yield. The order of influence is: A>B>C, that is, ultrasonic temperature> ultrasonic time> ultrasonic power. Lack of fit item P=0.5764>0.05, test chybějící vhodné položky není významný, což naznačuje, že neznámé faktory mají malý vliv na výsledky testu a zbytková položka je způsobena hlavně náhodnými chybami, což naznačuje, že výběr modelu je vhodný a správný . Vliv AB byl významný (P<0.05), and the influence of A2, B2, and C2 was extremely significant (P<0.01). In the whole model, the adjustment coefficient R2Adj=0.9277 in the model, indicating that 92.77% of the response value changes can be carried out through the model. Explanation, the coefficient of determination R2 = 0.9684, indicating that the model is highly reliable, and the model fits well with the experiment, and this model can be used for analysis and prediction [39−42].

2.2.3 Reakce povrchů a obrysů

Diagram povrchu odezvy interakce různých faktorů na výtěžku polysacharidu kávových květů je znázorněn na obrázku 2. Interakce mezi teplotou ultrazvuku a dobou ultrazvuku ukázala, že interakce mezi těmito dvěma faktory byla významná; když teplota ultrazvuku zůstala nezměněna, výtěžek polysacharidů kávových květů se nejprve zvýšil a poté se snížil s prodlužujícím se časem ultrazvuku; když doba ultrazvuku zůstala nezměněna, káva Výtěžek květového polysacharidu se nejprve zvyšoval a pak se zvyšováním teploty ultrazvuku klesal. Z interakce mezi teplotou ultrazvuku a výkonem ultrazvuku je vidět, že když je teplota ultrazvuku konstantní, výtěžek polysacharidu kávových květů se nejprve zvyšuje a pak se zvyšováním výkonu ultrazvuku klesá; když ultrazvukový výkon zůstává nezměněn, výtěžek polysacharidu kávových květů se zvyšuje s ultrazvukovou vlnou. Nárůst teploty se nejprve zvyšuje a poté snižuje. Z interakce mezi ultrazvukovým časem a ultrazvukovým výkonem lze vidět, že když je ultrazvukový čas konstantní, výtěžek polysacharidu kávových květů nejprve roste a poté klesá se zvyšováním ultrazvukového výkonu; když je ultrazvukový výkon konstantní, výtěžek polysacharidu kávových květů se zvyšuje se zvyšováním ultrazvukového výkonu. Nárůst času se nejprve prodlužuje a poté snižuje.

Proto při použití výtěžku polysacharidů jako standardu hodnocení jsou výsledky optimalizace metody povrchu odezvy pro tři podmínky ultrazvukového času, ultrazvukové teploty a ultrazvukového výkonu: teplota ultrazvuku 69,56 stupňů, doba ultrazvuku 92,99 min a výkon ultrazvuku 174,01 W, to se předpovídá, že za této podmínky 2,290 procenta. Podle aktuální situace, teplota ultrazvuku 69,5 stupně , doba ultrazvuku 93.{11}} min, výkon ultrazvuku 175 W, doba ponoření 30 minut, poměr kapaliny k materiálu 10: 1 ml/g a koncentrace ethanolu 80 procent byly vybrány pro 4 paralelní testy.

Průměrný výnos byl 2,292 procenta ±0,061 procenta. V zásadě se blíží teoretické hodnotě získané testem, což naznačuje, že mezi předpokládanou hodnotou a skutečnou hodnotou existuje dobrá shoda, takže optimalizované parametry procesu získané povrchem odezvy v této studii jsou přesné a spolehlivé [43].

2.3 Experimentální výsledky antioxidační kapacity

DPPH test je účinný a citlivý model hodnocení antioxidační kapacity rostlin. Schopnost zachycovat volné radikály testovaného vzorku souvisí s jeho potenciální schopností dávat protony; ABTS test je široce používán pro odhad antioxidační kapacity rostlinných vzorků, který může testovat vzorky Antioxidační aktivita lipofilních a hydrofilních složek v metodě FRAP; redukční schopnost přírodních produktů byla hodnocena redukcí Fe3 plus -TPTZ na Fe2 plus -TPTZ [44−45]. Výsledky antioxidačních experimentů polysacharidů kávových květů jsou uvedeny v tabulce 4. Polysacharidy kávových květů mají určité antioxidační aktivity proti volným radikálům DPPH a ABTS plus volným radikálům, ale jejich antioxidační aktivita je nižší než u rutinu.

3 Závěr

V tomto experimentu byl jako surovina použit květ malozrnné kávy YunnanpolysacharidYunnan malozrnnýkávakvět byl extrahován ultrazvukem. Bylo zjištěno, že ultrazvukový čas, ultrazvuková teplota a ultrazvukový výkon mají důležité účinky na extrakci polysacharidů kávových květů. Poté byly ultrazvukový čas, ultrazvuková teplota a ultrazvukový výkon optimalizovány povrchem odezvy a optimální procesní podmínky polysacharidu kávového květu byly stanoveny následovně: teplota ultrazvuku 69,5 stupně, doba ultrazvuku 93 min, výkon ultrazvuku 175 W, poměr kapalina-materiál 10:1 ml/g, doba namáčení byla 30 minut a koncentrace ethanolu byla 80 procent. Za těchto podmínek byl výtěžek polysacharidu 2,292 procenta ± 0,061 procenta. Metoda může účinně zlepšit výnos kávového květupolysacharid, při zkrácení doby extrakce a snížení množství použitého etanolu. Výsledky antioxidačních experimentů ukázaly, že polysacharidy kávových květů vykazovaly slabou antioxidační kapacitu. Tato studie poskytne referenci pro další separaci a čištění kávového květupolysacharida výzkum její činnosti a funkce a zároveň poskytne teoretický základ a podporu pro další rozvoj a využití kávy.

Podpěra, podpora:

wallence.suen@wecistanche.com 0015292862950