Část 3: Rozdílné role deacetylázové domény HDAC3 v hippocampu a mediálním prefrontálním kortexu při vytváření a zániku paměti

další informace:ali.ma@wecistanche.com

Pls klikněte zde zpět na část 2

KlikněteCistanches a Cistanche pro zlepšení paměti

Poděkování

Zvláštní poděkování patří Dr. Norbertu J. Fortinovi za jeho pomoc se statistickou analýzou.

Zdroje financování: Tato práce byla podpořena granty National Institute on Drug Abuse a National Institute of Mental Health (DA025922, DA036984, MH101491) pro MAW a NIDA a National Institute on Aging (NIA) granty (F32 DA043998 a T32 AG{{ 6}}) do YA.

Reference

Alenghat T, Meyers K, Mullican SE, Leitner K, Adeniji-Adele A, Avila J, Bucan M, Ahima RS, Kaestner KH, Lazar MA. Korepresor jaderného receptoru a histondeacetyláza 3 řídí cirkadiánní metabolickou fyziologii. Příroda. 2008; 456:997–1000. [PubMed: 19037247]

Balderas I, Rodriguez-Ortiz CJ, Salgado-Tonda P, Chavez-Hurtado J, McGaugh JL, Bermudez-Rattoni F. Konsolidace rozpoznávání objektů a kontextuPaměťzahrnují různé oblasti temporálního laloku. Naučte se Mem. 2008; 15:618–624. [PubMed: 18723431]

Baltan S, Bachleda A, Morrison RS, Murphy SP. Exprese histonových deacetyláz v buněčných kompartmentech myšího mozku a účinky ischemie. Transl Stroke Res. 2011; 2:411–423. [PubMed: 21966324]

Barrett RM, Malvaez M, Kramar E, Matheos DP, Arrizon A, Cabrera SM, Lynch G, Greene RW, Wood MA. Hippokampální fokální knockout CBP ovlivňuje specifické modifikace histonů, dlouhodobou potenciaci a dlouhodobéPaměť. Neuropsychofarmakologie. 2011; 36:1545–1556. [PubMed: 21508930]

Bowers ME, Xia B, Carreiro S, Ressler KJ. Inhibitor HDAC I. třídy RGFP963 zvyšuje konsolidaci vymírání vyvolaného strachu. Naučte se Mem. 2015; 22:225–231. [PubMed: 25776040]

Broide RS, Redwine JM, Aftahi N, Young W, Bloom FE, Winrow CJ. Distribuce histonových deacetyláz 1–11 v mozku potkana. J Mol Neurosci. 2007; 31:47–58. [PubMed: 17416969]

Burger C, Gorbatyuk OS, Velardo MJ, Peden CS, Williams P, Zolotukhin S, Reier PJ, Mandel RJ, Muzyczka N. Rekombinantní virové vektory AAV pseudotypizované virovými kapsidami ze sérotypů 1, 2 a 5 vykazují rozdílnou účinnost a buněčný tropismus po dodávání do různých oblastí centrálního nervového systému. Mol Ther. 2004; 10:302–317. [PubMed: 15294177]

Dere E, Huston JP, De Souza Silva MA. Farmakologie, neuroanatomie a neurogenetika jednozkouškového rozpoznávání objektů u hlodavců. Neurosci Biobehav Rev. 2007; 31:673–704. [PubMed: 17368764]

Ennaceur A. Rozpoznávání objektů na jeden pokus u krys a myší: metodologické a teoretické problémy. Behav Brain Res. 2010; 215:244–254. [PubMed: 20060020]

Fanselow MS, Dong HW. Jsou dorzální a ventrální hipokampus funkčně odlišné struktury? Neuron. 2010; 65:7–19. [PubMed: 20152109]

Fischle W, Dequiedt F, Hendzel MJ, Guenther MG, Lazar MA, Voelter W, Verdin E. Enzymatická aktivita spojená s HDAC třídy II je závislá na multiproteinovém komplexu obsahujícím HDAC3 a SMRT/N-CoR. Mol Cell. 2002; 9:45–57. [PubMed: 11804585]

Fuchs RA, Evans KA, Ledford CC, Parker MP, Case JM, Mehta RH, viz RE. Role dorsomediálního prefrontálního kortexu, bazolaterální amygdaly a dorzálního hipokampu v kontextuálním obnovení hledání kokainu u potkanů. Neuropsychofarmakologie. 2005; 30:296–309. [PubMed: 15483559]

Fuchs RA, Eaddy JL, Su ZI, Bell GH. Interakce bazolaterální amygdaly s dorzálním hipokampem a dorzomediálním prefrontálním kortexem regulují v kontextu drog vyvolané obnovení hledání kokainu u potkanů. Eur J Neurosci. 2007; 26:487–498. [PubMed: 17650119]

Gräff J, Tsai LH. Acetylace histonů: molekulární mnemotechnické pomůcky na chromatinu. Nat Rev Neurosci. 2013; 14:97–111. [PubMed: 23324667]

Guenther MG, Barak O, Lazar MA. Korepresory SMRT a N-CoR jsou aktivační kofaktory pro histondeacetylázu 3. Mol Cell Biol. 2001; 21:6091–6101. [PubMed: 11509652]

Guenther MG, Yu J, Kao GD, Yen TJ, Lazar MA. Sestavení represního komplexu SMRT-histondeacetyláza 3 vyžaduje kruhový komplex TCP-1. Genes Dev. 2002; 16:3130–3135. [PubMed: 12502735]

Haberland M, Montgomery RL, Olson EN. Mnoho rolí histonových deacetyláz ve vývoji a fyziologii: důsledky pro onemocnění a terapii. Nat Rev Genet. 2009; 10:32–42. [PubMed: 19065135]

Hartig J, Stefanko DP, Multani ML, Figueroa DX, McQuown SC, Wood MA. Inhibice HDAC moduluje dlouhodobě závislý na hippocampuPaměťpro umístění objektu způsobem závislým na CBP. Naučte se Mem. 2011; 18:71–79. [PubMed: 21224411]

Haettig J, Sun Y, Wood MA, Xu X. Buněčně specifická inaktivace hipokampálního CA1 narušuje rozpoznávání objektů v myši závislé na poloze. Naučte se Mem. 2013; 20:139–146. [PubMed: 23418393]

Isaac WL, Nonneman AJ, Neisewander J, Landers T, Bardo MT. Prefrontální kortexové léze odlišně narušují kokainem zesílenou podmíněnou preferenci místa, ale ne podmíněnou chuťovou averzi. Behav Neurosci. 1989; 103:345–355. [PubMed: 2706078]

Jenuwein T, Allis CD. Překlad histonového kódu. Věda. 2001; 293:1074–1080. [PubMed: 11498575]

Kalivas PW, McFarland K. Obvody mozku a obnovení chování při vyhledávání kokainu. Psychofarmakologie (Berl). 2003; 168:44–56. [PubMed: 12652346]

Kojima N, Wang J, Mansuy IM, Grant SG, Mayford M, Kandel ER. Záchrana poškození dlouhodobé potenciace u myší s deficitem fyn zavedením transgenu Fyn. Proč Natl Acad Sci US A. 1997; 94:4761–4765. [PubMed: 9114065]

Kouzarides T. Modifikace chromatinu a jejich funkce. Buňka. 2007; 128:693–705. [PubMed: 17320507]

Krasnova IN, Li SM, Wood WH, McCoy MT, Prabhu VV, Becker KG, Katz JL, Cadet JL. Transkripční reakce na posilující účinky kokainu v potkaním hipokampu a kortexu. Genes Brain Behav. 2008; 7:193–202. [PubMed: 17640290]

Kwapis JL, Alaghband Y, López AJ, White AO, Campbell RR, Dang RT, Rhee D, Tran AV, Carl AE, Matheos DP, Wood MA. Kontext a sluchový strach jsou odlišně regulovány aktivitou HDAC3 v laterálních a bazálních subjádrech amygdaly. Neuropsychofarmakologie. 2017; 42:1284–1294. [PubMed: 27924874]

Lahm A, Paolini C, Pallaoro M, Nardi MC, Jones P, Neddermann P, Sambucini S, Bottomley MJ, Lo Surdo P, Carfi A, Koch U, De Francesco R, Steinkuhler C, Gallinari P. Odhalení skryté katalytické aktivity histondeacetylázy obratlovců třídy IIa. Proč Natl Acad Sci USA A. 2007; 104:17335–17340. [PubMed: 17956988]

LaLumiere RT, Niehoff KE, Kalivas PW. Infralimbická kůra reguluje konsolidaci extinkce po samoaplikaci kokainu. Naučte se Mem. 2010; 17:168–175. [PubMed: 20332188]

Laurent V, Westbrook RF. Inaktivace infralimbické, ale nikoli prelimbické kůry, narušuje konsolidaci a znovuzískání zániku strachu. Naučte se Mem. 2009; 16:520–529. [PubMed: 19706835]

Lebrón K, Milad MR, Quirk GJ. Zpožděné vzpomínání na vyhynutí strachu u potkanů ​​s lézemi ventrálního mediálního prefrontálního kortexu. Naučte se Mem. 2004; 11:544–548. [PubMed: 15466306]

Levenson JM, Sweatt JD. Epigenetické mechanismy: společné téma u obratlovců a bezobratlýchPaměťformace. Cell Mol Life Sci. 2006; 63:1009–1016. [PubMed: 16596331]

López AJ, Kramar E, Matheos DP, White AO, Kwapis J, Vogel-Ciernia A, Sakata K, Espinoza M, Wood MA. Promotorově specifické účinky modulace DREADD na hipokampální synaptickou plasticitu aFormování paměti. J Neurosci. 2016; 36:3588–3599. [PubMed: 27013687]

Malvaez M, Sanchis-Segura C, Vo D, Lattal KM, Wood MA. Modulace modifikace chromatinu usnadňuje vyhynutí kokainem vyvolané preference místa. Biol Psychiatry. 2010; 67:36–43. [PubMed: 19765687]

Malvaez M, Mhillaj E, Matheos DP, Palmery M, Wood MA. CBP v nucleus accumbens reguluje acetylaci histonů vyvolanou kokainem a je rozhodující pro chování související s kokainem. J Neurosci. 2011; 31:16941–16948. [PubMed: 22114264]

Narvaez M, McQuown SC, Rogge GA, Astarabadi M, Jacques V, Carreiro S, Rusche JR, Wood MA. Selektivní inhibitor HDAC3-umožňuje trvalé vyhubení chování při vyhledávání kokainu. Proč Natl Acad Sci USA A. 2013; 110:2647–2652. [PubMed: 23297220]

Maren S. Neurobiologie pavloviánského strachu k podmínce. Annu Rev Neurosci. 2001; 24:897-931. [PubMed: 11520922]

Marie-Claire C, Laurendeau I, Canestrelli C, Courtin C, Vidaud M, Roques B, Noble F. Fos, ale ne Cart (přepis regulovaný kokainem a amfetaminem) je nadměrně exprimován několika návykovými látkami: srovnávací studie využívající v reálném čase kvantitativní polymerázová řetězová reakce v mozku potkana. Neurosci Lett. 2003; 345:77–80. [PubMed: 12821175]

McQuown SC, Wood MA. HDAC3 a hypotéza molekulárních brzdových destiček. Neurobiol Learn Mem. 2011; 96:27–34. [PubMed: 21521655]

McQuown SC, Barrett RM, Matheos DP, Post RJ, Rogge GA, Alenghat T, Mullican SE, Jones S, Rusche JR, Lazar MA, Wood MA. HDAC3 je kritický negativní regulátortvorba dlouhodobé paměti. J Neurosci. 2011; 31:764–774. [PubMed: 21228185]

Meyers RA, Zavala AR, Neisewander JL. Dorzální, ale ne ventrální, hipokampální léze narušují kondicionování kokainového místa. Neuroreport. 2003; 14:2127–2131. [PubMed: 14600510]

Mullican SE, Gaddis CA, Alenghat T, Nair MG, Giacomin PR, Everett LJ, Feng D, Steger DJ, Schug J, Artis D, Lazar MA. Histondeacetyláza 3 je epigenomická brzda v alternativní aktivaci makrofágů. Genes Dev. 2011; 25:2480–2488. [PubMed: 22156208]

Mumby DG. Perspektivy paměti rozpoznávání objektů po poškození hipokampu: poučení ze studií na potkanech. Behav Brain Res. 2001; 127:159–181. [PubMed: 11718890]

Parkinson JA, Olmstead MC, Burns LH, Robbins TW, Everitt BJ. Disociace v účincích lézí jádra a slupky nucleus accumbens na chování apetitivního pavlovovského přístupu a potenciaci podmíněného posílení a lokomotorické aktivity D-amfetaminem. J Neurosci. 1999; 19:2401–2411. [PubMed: 10066290]

Peixoto L, Abel T. Role acetylace histonů při tvorbě paměti a kognitivních poruchách. Neuropsychofarmakologie. 2013; 38:62–76. [PubMed: 22669172]

Penney J, Tsai LH. Histonové deacetylázy v paměti a poznání. Sci Signál. 2014; 7:re12. [PubMed: 25492968]

Peters J, LaLumiere RT, Kalivas PW. Infralimbický prefrontální kortex je zodpovědný za inhibici hledání kokainu u uhynulých krys. J Neurosci. 2008; 28:6046–6053. [PubMed: 18524910]

Peters J, Kalivas PW, Quirk GJ. Extinkční okruhy pro strach a závislost se v prefrontální kůře překrývají. Naučte se Mem. 2009; 16:279–288. [PubMed: 19380710]

Pfaffl MW. Nový matematický model pro relativní kvantifikaci v reálném čase RT-PCR. Nucleic Acids Res. 2001; 29:e45. [PubMed: 11328886]

Pfaffl MW, Georgieva TM, Georgiev IP, Ontsouka E, Hageleit M, Blum JW. Kvantifikace RT-PCR v reálném čase inzulínu podobného růstového faktoru (IGF)-1, IGF-1 receptoru, IGF-2, IGF-2 receptoru, inzulínového receptoru, růstového hormonu IGF-vazebné proteiny 1, 2 a 3 u hovězího dobytka. Domest Anim Endocrinol. 2002; 22:91–102. [PubMed: 11900967]

Quirk GJ, Russo GK, Barron JL, Lebron K. Role ventromediálního prefrontálního kortexu při obnově uhaseného strachu. J Neurosci. 2000; 20:6225–6231. [PubMed: 10934272]

Quirk GJ, Garcia R, Gonzalez-Lima F. Prefrontální mechanismy při zániku podmíněného strachu. Biol Psychiatry. 2006; 60:337–343. [PubMed: 16712801]

Rescorla RA. Porovnání rychlostí asociativní změny při akvizici a zániku. J Exp Psychol Anim Behav Process. 2002; 28:406–415. [PubMed: 12395498]

Rogge GA, Singh H, Dang R, Wood MA. HDAC3 je negativní regulátor tvorby paměti související s kokainem. J Neurosci. 2013; 33:6623–6632. [PubMed: 23575859]

Roozendaal B, Hernandez A, Cabrera SM, Hagewoud R, Malvaez M, Stefanko DP, Haettig J, Wood MA. Glukokortikoidní aktivita spojená s membránou je nezbytná pro modulaci dlouhodobé paměti prostřednictvím modifikace chromatinu. J Neurosci. 2010; 30:5037–5046. [PubMed: 20371824]

Rumbaugh G, Sillivan SE, Ozkan ED, Rojas CS, Hubbs ČR, Aceti M, Kilgore M, Kudugunti S, Puthanveettil SV, Sweatt JD, Rusche J, Miller CA. Farmakologická selektivita v rámci histonových deacetyláz třídy I předpovídá účinky na synaptickou funkci a záchranu paměti. Neuropsychofarmakologie. 2015; 40:2307–2316. [PubMed: 25837283]

Sando R 3rd, Gounko N, Pieraut S, Liao L, Yates J 3rd, Maximov A. HDAC4 řídí transkripční program nezbytný pro synaptickou plasticitu a paměť. Buňka. 2012; 151:821–834. [PubMed: 23141539]

Sierra-Mercado D Jr., Corcoran KA, Lebron-Milad K, Quirk GJ. Inaktivace ventromediálního prefrontálního kortexu snižuje projev podmíněného strachu a narušuje následné vzpomínání na extinkci. Eur J Neurosci. 2006; 24:1751–1758. [PubMed: 17004939]

Stafford JM, Raybuck JD, Ryabinin AE, Lattal KM. Zvýšení acetylace histonů v hippocampu-infralimbické síti zvyšuje vymírání strachu. Biol Psychiatry. 2012; 72:25–33. [PubMed: 22290116]

Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Modulace dlouhodobé paměti pro rozpoznávání objektů prostřednictvím inhibice HDAC. Proč Natl Acad Sci USA A. 2009; 106:9447–9452. [PubMed: 19470462]

Sun Z, Feng D, Fang B, Mullican SE, You SH, Lim HW, Everett LJ, Nabel CS, Li Y, Selvakumaran V, Won KJ, Lazar MA. Funkce HDAC3 v transkripci a metabolismu nezávislá na deacetyláze vyžaduje korepresor jaderného receptoru. Mol Cell. 2013; 52:769–782. [PubMed: 24268577]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Diskrétní léze kyseliny chinolinové v prelimbickém mediálním prefrontálním kortexu potkana ovlivňují kokainem a MK-801-, ale ne morfinem a amfetaminem indukovanou odměnu a psychomotorickou aktivaci, jak bylo měřeno pomocí paradigmatu podmiňování preference místa. Behav Brain Res. 1998; 97:115–127. [PubMed: 9867237]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Funkční heterogenita mediálního prefrontálního kortexu potkana: účinky diskrétních lézí specifických pro podoblasti na drogově indukovanou preferenci podmíněného místa a behaviorální senzibilizaci. Eur J Neurosci. 1999; 11:4099–4109. [PubMed: 10583498]

Vogel-Ciernia A, Matheos DP, Barrett RM, Kramar EA, Azzawi S, Chen Y, Magnan CN, Zeller M, Sylvain A, Haettig J, Jia Y, Tran A, Dang R, Post RJ, Chabrier M, Babayan AH, Wu JI, Crabtree GR, Baldi P, Baram TZ, Lynch G, Wood MA. Neuronově specifická regulační podjednotka chromatinu BAF53b je nezbytná pro synaptickou plasticitu a paměť. Nat Neurosci. 2013; 16:552–561. [PubMed: 23525042]

Vogel-Ciernia A, Wood MA. Remodelace chromatinu specifická pro neurony: chybějící článek v epigenetických mechanismech, které jsou základem synaptické plasticity, paměti a poruch intelektuálního postižení. Neurofarmakologie. 2014; 80:18–27. [PubMed: 24140580]

White AO, Kramar EA, López AJ, Kwapis JL, Doan J, Saldana D, Davatolhagh MF, Alaghband Y, Blurton-Jones M, Matheos DP, Wood MA. BDNF zachraňuje synaptickou plasticitu závislou na BAF53b a paměť spojenou s kokainem v nucleus accumbens. Nat Commun. 2016; 7:11725. [PubMed: 27226355]

Winters BD, Saksida LM, Bussey TJ. Paměť rozpoznávání objektů: neurobiologické mechanismy kódování, konsolidace a vyhledávání. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32:1055–1070. [PubMed: 18499253]

Zhang J, Kalkum M, Chait BT, Roeder RG. Korepresorový komplex jaderného receptoru N-CoR-HDAC3 inhibuje dráhu JNK přes integrální podjednotku GPS2. Mol Cell. 2002; 9:611–623. [PubMed: 11931768]

Zvýraznění

► Blokování aktivity HDAC3 deacetylázy v dorzálním hipokampu zlepšilo dlouhodobou paměť umístění objektu, ale nemělo žádný vliv na tvorbu paměti související s kokainem. ► Poškození domény deacetylázy HDAC3 v prelimbické kůře nemělo žádný vliv na tvorbu paměti související s kokainem. ► Blokování aktivity HDAC3 deacetylázy v infralimbické kůře nemělo žádný vliv na extinkci. ► Narušení aktivity HDAC3 deacetylázy v dorzálním hipokampu vedlo k usnadnění extinkce.

Obrázek 1.

Dominantní negativní bodový mutantní virus (HDAC3(Y298H)-v5 se účinně exprimuje v dorzálním hippocampu. (A) Epitop V5 byl přidán k viru bodové mutanty. (B) Reprezentativní imunofluorescenční obrázek ukazující expresi značky epitopu V5 (zelená) v dorzální hippocampus (DH) po infuzi AAV-HDAC3(Y298H)-v5. Nebylo pozorováno žádné barvení V5 kontrolním virem AAV-EV. Buňky byly kontrastně obarveny DAPI (modrá). (C) mRNA V5 byla významně zvýšena v DH of myší infuzí AAV-HDAC3(Y298H)-v5, AAV-EV n {{20}}, HDAC3(Y298H)-v5 n=4. (D) HDAC3 byl také významně zvýšen v DH of myší s infuzí AAV-HDAC(Y298H)-v5 ve srovnání s kontrolami AAV-EV, AV-EV n=6, HDAC3(Y298H)-v5 n=6. *p < 0,05.

Obrázek 2

Blokování aktivity HDAC3 v rozšířené paměti DH pro umístění objektu (OLM), ale ne pro rozpoznávání objektů (ORM). (A) Myši absolvovaly podprahový trénink (3 min) v prostředí se dvěma identickými objekty a o 24 hodin později dostaly retenční test, ve kterém byl jeden objekt přemístěn na nové místo. Schéma popisuje metody pro B a C. (B) Myši, kterým byl podáván AAV-HDAC3(Y298H)-v5, vykazovaly významnou preferenci pro umístění nového objektu 24 hodin po tréninku ve srovnání s kontrolami EV, AAV-EV n {{10 }}, HDAC3(Y298H)-v5 n=6. (C) Skupiny se nelišily v celkové době průzkumu dvou objektů. (D) Myši absolvovaly podprahový trénink (3 minuty) v prostředí se dvěma identickými objekty a o 24 hodin později absolvovaly retenční test, ve kterém byl jeden objekt nahrazen novým (ORM), AAV-EV n=9, HDAC3(Y298H)-v5 n=7. Schéma popisuje způsoby pro E a F. (E) Ani AAV-EV kontrola ani AAV-HDAC3(Y298H)-v5 myši nevykazovaly významnou preferenci pro nový objekt. (F) Skupiny se nelišily v celkové době průzkumu dvou objektů. *p <>

Obrázek 3

Blokování aktivity HDAC3 v dorzálním hipokampu nemá žádný vliv na tvorbu paměti CPP vyvolané kokainem. (A) Schéma postupu kokain-CPP. (B) Exprese kokain-CPP indikovaná průměrným skóre CPP (čas strávený v páru s kokainem (CS plus ) mínus párovaný s fyziologickým roztokem (CS-) ± sem). Při kondicionační dávce 5 mg/kg kokainu vykazovaly myši AAV-HDAC3(Y298H)-v5 během posttestu podobné skóre CPP jako kontroly EV, AAV-EV n=15, HDAC3(Y298H)-v5 n {{ 19}}.

Obrázek 4.

Fokální homozygotní genová delece Hdac3 v dorzálním hipokampu nemá žádný vliv na tvorbu paměti CPP vyvolané kokainem. (A) Schéma postupu kokain-CPP. (B) Exprese kokain-CPP indikovaná průměrným skóre CPP (čas strávený v páru s kokainem (CS plus ) mínus párovaný s fyziologickým roztokem (CS-) ± sem). Při kondicionační dávce 5 mg/kg kokainu vykazovaly myši Hdac3flox/flox podobné skóre CPP jako kontroly Hdac3 plus/plus během post-testu. (C) Reprezentativní imunofluorescenční snímek ukazující expresi HDAC3 (zelená) v dorzálním hipokampu po infuzi AAV2.1 Cre infundovaného do myší Hdac3 plus/plus a Hdac3flox/flox. Buňky byly kontrastně obarveny DAPI (modrá). (D) Kvantifikace imunobarvení potvrdila, že HDAC3 byl významně snížen u myší Hdac3flox/flox ve srovnání s kontrolami Hdac3 plus / plus, Hdac3 plus / plus n=12, Hdac3flox/flox n=11. *p <>

Obrázek 5.

Blokování aktivity HDAC3 v prelimbické kůře (PrL) nemá žádný vliv na tvorbu paměti CPP vyvolané kokainem. (A) Schéma postupu kokain-CPP. (B) Exprese kokain-CPP indikovaná průměrným skóre CPP (čas strávený v páru s kokainem (CS plus ) mínus párovaný s fyziologickým roztokem (CS-) ± sem). Při kondicionační dávce 5 mg/kg kokainu vykazovaly myši AAV-HDAC3(Y298H)-v5 během posttestu podobné skóre CPP jako kontroly EV, AAV-EV n=12, HDAC3(Y298H)-v5 n {{ 19}}. (C) Reprezentativní imunofluorescenční snímek ukazující expresi značky epitopu V5 (zelená) po infuzi AAV-HDAC3(Y298H)-v5 zacílené na PrL. U kontrolního viru AAV-EV nebylo pozorováno žádné barvení V5. Buňky byly kontrastně obarveny DAPI (modrá) a neurony byly kontrastně obarveny NeuroTrace (červená). Exprese V5 byla z velké části omezena na prelimbickou oblast mediálního prefrontálního kortexu. (D) Cílená virová infuze v PrL. Stínované oblasti snímků atlasu myší ilustrují reprezentativní rozsah virové infuze.

Obrázek 6.

Blokování aktivity HDAC3 v infralimbické kůře (IL) nemá žádný vliv na zánik paměti CPP vyvolané kokainem. (A) Schéma postupu kokain-CPP. (B) Exprese kokain-CPP indikovaná průměrným skóre CPP (čas strávený v páru s kokainem (CS plus ) mínus párovaný s fyziologickým roztokem (CS-) ± sem). Zvířata byla zpočátku trénována na 20 mg/kg kokainu. Následně zvířata dostala intra-IL AAV-EV nebo AAV-HDAC3(Y298H)-v5 virové infuze a byla zkoumána extinkční paměť. Myši AAV-HDAC3(Y298H)-v5 vykazovaly podobné skóre CPP jako kontroly EV během post-testů 2–5, AAV-EV n=17, HDAC3(Y298H)- v5 n=16. (C) Reprezentativní imunofluorescenční snímek ukazující expresi značky epitopu V5 (zelená) po infuzi AAV-HDAC3(Y298H)-v5 zacílené na IL. U kontrolního viru AAV-EV nebylo pozorováno žádné barvení V5. Buňky byly kontrastně obarveny DAPI (modrá) a neurony byly kontrastně obarveny NeuroTrace (červená). Exprese V5 byla z velké části omezena na infralimbickou oblast mediálního prefrontálního kortexu. (D) Cílená virová infuze v IL. Stínované oblasti snímků atlasu myší ilustrují reprezentativní rozsah virové infuze.