Část 2 Chronické onemocnění ledvin a stárnutí rozdílně snižují kostní materiál a mikroarchitekturu u myší C57Bl/6
Mar 15, 2022
Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Cistanche může velmi dobře pomoci při onemocnění ledvin
3. Výsledky
3.1 Potvrzení onemocnění ledvin
V cílovém bodě studie tři měsíce po operaci měly myši s 5/6 Nx významně zvýšenou sérovou močovinu a sníženou močovinu v moči, což je v souladu s poruchou funkce ledvin (tabulka 1). Sérový PTH a fosfát byly významně zvýšeny jako hlavní účinky CKD. Sérový vápník nebyl významně ovlivněn CKD. U všech měření v séru a moči nebyl věk významným hlavním účinkem.
3.2 Stárnutí a CKD snižují kortikální a trabekulární mikroarchitekturu
Stárnutía CKD negativně ovlivnily kortikální geometrii a trabekulární mikroarchitekturu (tabulky 2 – 3, obrázek 1).Stárnutíod 6 měs. do 24 měs. výrazně zvýšené kortikálníkostrozměry příčného řezu (zvýšený polární moment setrvačnosti, PMI), porozita (Ct. Po) a hustota tkáňových minerálů (TMD) a snížená tloušťka kortikální kosti (Ct. Th), kortikálníkostobjem (snížená frakce objemu kosti (BV/TV),kostplošný zlomek (BA/TA). Stárnutí také snížilo počet trabekulárních kostí (Tb. N) a tloušťku (Tb. Th), objemovou frakci trabekulární kosti (BV/TV) a objemovou hustotu kostních minerálů (vBMD). Stejně jako u stárnutí mělo CKD také významný negativní hlavní vliv nakostobjem přes sníženou BV/TV, Tb. N, BA/TA, Ct. Th, a zvýšil Ct.Po. Tyto účinky byly aditivní, takže nejhorší objem kostí byl pozorován u starých myší s CKD. Na rozdíl od stárnutí CKD významně snížilo BMI a TMD. Stárnutí a CKD neměly významnou interakci pro žádné kortikální nebo trabekulární mikroarchitekturní opatření.
3.3 Stárnutí a CKD různě snižují mechanické a materiálové vlastnosti celé kosti
Na úrovni celé kosti byly materiálové a mechanické vlastnosti sníženy stárnutím a CKD (tabulka 4, doplňková tabulka 1).Stárnutíod 6 měs. do 24 měs. významně snížilo většinu vlastností celokostního materiálu (např. modul, mez kluzu, maximální napětí), ale neovlivnilo houževnatost. CKD významně snížilo práci do lomu, ale většina ostatních materiálových a mechanických parametrů nebyla ovlivněna CKD jako hlavním účinkem. Houževnatost, geometrie nezávislá analogie práce a zlomeniny, měla významnou interakci mezi stárnutím a CKD (p=0,011). Z post-hoc testování bylo po 18 měsících vidět, že CKD může snížit houževnatost (-47,9 procenta, p=0,023) (obrázek 2d).
3.4 Stárnutí a CKD snižují strukturální tuhost FEA v proximální tibii
Použili jsme FEA k vyhodnocení toho, jak stárnutí a CKD ovlivňují mechanické vlastnosti prostřednictvím změn trabekulární a kortikální struktury. Strukturální tuhost FEA v proximální tibii významně klesala se stárnutím a CKD (tabulka 4). Mezi nimi nebyla významná interakcestárnutía CKD. Tuhost FEA pozitivně korelovala s tuhostí stehenní kosti z tříbodového ohybu (r2=0.67).
3.5 Stárnutí snižuje tuhost kostí v mikroměřítku, zatímco CKD snižuje prostorové variace kostní tkáně v mikroměřítku
K posouzení jakstárnutía CKD ovlivňují tkáňové materiálové vlastnosti kortikálukost, použili jsme nanoindentaci a Ramanovu spektroskopii na odpovídajících místech k vyhodnocení mikroměřítkukostmodul a složení tkáně (tabulka 5). Heterogenita kostní tkáně byla hodnocena prostřednictvím hodnocení prostorové variability těchto vlastností. Průměrný redukovaný modul (Er) a směrodatná odchylka Er byly s věkem významně sníženy a naopak zvýšeny. CKD signifikantně snížila směrodatnou odchylku, ale ne průměr Er. Mikroškálové složení kostní tkáně hodnocené Ramanovou spektroskopií (tj. střední minerál: matrice, uhličitan: fosfát, krystalinita) se významně nezměnilo ani s věkem, ani s CKD. Směrodatná odchylka krystalinity však byla významně snížena s CKD.
3.6 Stárnutí a CKD různě ovlivňují nanomechaniku kolagenních fibril
Hodnotili jsme, zda CKD a stárnutí ovlivňují kolagenní nanomechaniku prostřednictvím maloúhlového rozptylu rentgenového záření (SAXS) současně s tahovým zatížením. Ve shodě s výsledky z ohybu měření tahu prokázala, že stárnutí významně snížilo meze kluzu tkáně a maximální napětí. Kolagenová nanomechanika byla ovlivněna rozdílně věkem a CKD (tabulka 6, obrázek 2).Stárnutísnížila kmen kolagenu měřený při maximálním namáhání tkáně, ale neovlivňoval procento kmene kolagenu (napětí kolagenu / celkové namáhání tkáně, procento ColMax). Naproti tomu CKD významně zvýšilo procento ColMax.
3.7 Kolagenové příčné vazby se nelišily se stárnutím a CKD
Snažili jsme se pochopit, zda by změněná kolagenová nanomechanika pozorovaná u CKD mohla být připsána změnám ve skeletálních příčných vazbách. Proto jsme charakterizovali enzymatické (hydroxylysylpyridinolin, HP a lysylpyridinolin, LP) a neenzymatické síťování (pentosidin) pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC). Křížové vazby HP, LP a pentosidin měly vyšší průměrné koncentrace s rostoucím věkem, ale tyto změny nebyly významné (tabulka 7). Podobně byl trend nižšího LP u CKD, ale tento efekt nebyl významný. Dále jsme kvantifikovali celkové fluorescenční konečné produkty pokročilé glykace (AGE) a zjistili jsme, že celkové fluorescenční AGE se neliší se stárnutím nebo CKD.
3.8 S věkem související změny lakunární geometrie osteocytů nejsou pozorovány u stárnoucích myší s CKD
Osteocytová perilakunární/kanalikulární remodelace (PLR) reaguje na změny v minerální homeostáze a je důležitá při určováníkostodolnost proti lomu. Hodnotili jsme lakunární geometrii osteocytů, abychom zjistili, zdastárnutís CKD mění PLR (tabulka 8). Účinky samotného stárnutí (bez CKD) pro tyto falešné myši byly popsány dříve (21). Stručně řečeno, u myší Sham se mezery se zvyšujícím se věkem zmenšovaly, byly kulovitější a méně početné. Když byly stárnutí a CKD analyzovány společně pro tuto studii, stárnutí významně snížilo hustotu lakunárního čísla, objem a plochu povrchu a zvýšilo kulovitost, zploštělost a rozpětí theta. U žádného opatření nebyl zjištěn významný účinek CKD. U sféricity však existovala významná interakce mezi věkem a CKD. Zatímco sféricita se zvyšovala s věkem u myší Sham, toto měření bylo největší u myší středního věku s CKD a poté se snížilo u starých myší na hodnotu podobnou té, která byla pozorována u mladých myší. Jinými slovy, mezery se zmenšily a zakulatily pouze dovnitřstárnutíFalešné myši, a ne u stárnoucích myší s CKD. Tento vzorec byl také pozorován u CKD pro hustotu lakunárního čísla, objem a plochu povrchu, ačkoli interakce mezi stárnutím a CKD nebyla významná.
Velikost lakuny osteocytů se u myší s CKD nezvyšovala s věkem, ale místo toho se zvyšovala s fosfátovou dysregulací. Konkrétně u myší s CKD, lakunární objem osteocytů (Spearman ρ {{0}} plus 0.584, p=0.017), plocha povrchu (ρ=plus 0,603 p=0,013) a sféricita (ρ=- 0,500, p=0,048) korelovaly se sérovým fosfátem hodnoceným na konci studie. Naproti tomu měření související s prevalencí a orientací lakun (tj. hustota počtu osteocytů, nejbližší centrum hmoty, rozpětí theta) významně nekorelují s cirkulujícím fosfátem. Žádná měření lakunárních osteocytů významně nekorelovala se sérovým vápníkem, sérovou močovinou nebo močovinou v moči. U Sham myší hustota lakunárního počtu osteocytů pozitivně korelovala se sérovým vápníkem (ρ=plus 0,681, p=0,004). Všechna ostatní měření lakunárních osteocytů jen slabě korelovala s chemií séra a moči.
Vztah mezi velikostí lakuny osteocytů a sérovým fosfátem u myší s CKD nebyl přímo způsoben zvýšeným PTH. Když uvažujeme společně myši Sham a CKD, fosfát významně koreluje se zvýšeným PTH (Spearman ρ {{0}} plus 0.562, p=0.001). Nicméně, ačkoli fosfát a PTH byly oba zvýšeny jako hlavní účinek CKD, tato měření spolu u CKD myší významně nekorelovala (p > 0,05). Žádná měření lakunární geometrie osteocytů významně nekorelovala s PTH u myší Sham nebo CKD.
3.9 Regresní analýza ukazuje, že změněná kolagenová nanomechanika ovlivňuje houževnatost
Snažili jsme se zjistit, jak změny houževnatosti celé kosti způsobené ohybem souvisely se změnami v nano-až mikroměřítku měřeníkostkvalita pro myši Sham a CKD. Provedli jsme regresi houževnatosti celé kosti jako měření kvality kosti na menších délkových škálách u myší Sham a CKD s použitím věku jako kovariátu. U myší Sham nebyla žádná měření kvality kostí významnými vysvětlujícími proměnnými pro tuhost. Pro CKD byl jediným významným prediktorem houževnatosti (T) procento ColMax (ln(T)=2,437 – 0.00371* procento ColMax; r2=49 0,4 procenta, p < 0,05).="" síla="" regrese="" se="" nezlepšila="" úpravou="" podle="">
3.10 Změny kvality kostí nejsou vysvětleny variacemi PTH
Hodnotili jsme Spearmanovy korelace mezi měřeními kvality kostí a PTH, abychom pochopili, zda se myši s vyšším PTH zhoršilykostkvalitní. Ačkoli PTH byl významně vyšší s 5/6 Nx, nebyly žádné významné korelace mezi PTH a mikrokvalitou kostí.
4. Diskuze
Účelem této studie bylo prozkoumat, jak 5/6 Nx indukovalo CKD astárnutíkaždý snižuje kvalitu kostí, včetněkostmikroarchitektura a také vlastnosti materiálu kostní tkáně. CKD snížilo kvalitu kosti, včetně mikroarchitektury a materiálu, z mikrometrové délky na stupnici celé kosti. V naší studii bylo pozorováno snížení kvality kostí v několika modalitách a délkových škálách. Účinek CKD spočíval ve zmenšení kortikální a trabekulární mikroarchitektury, změně prostorových variací ve vlastnostech materiálu v mikroměřítku a také ve změně nanomechaniky kolagenu. Navíc, CKD a stárnutí měly an
interaktivní účinek na tuhost, která byla největší u myší středního věku. Naše výsledky zdůrazňují, že u CKD je narušeno několik klíčových složek kvality kostí. Tato pozorování podporují rostoucí množství důkazů z hlodavců a klinických studií, že kvalita kostí je u CKD snížena a pravděpodobně přispívá ke ztrátě odolnosti proti zlomeninám.
Ztrátakostmikroarchitektura s CKD se objevila kromě škodlivých účinkůstárnutía přispěla ke ztrátě celéhokostsíla. V této studii jsme to zjistilistárnutía CKD významně zmenšily kortikální a trabekulární mikroarchitekturu. Stárnutí a CKD měly za následek tenčí, poréznější kortikální kost a méně a tenčí trabekuly. Jedinou výjimkou byl kostní minerál hodnocený pomocí microCT (tj. TMD), který se s věkem zvyšoval a u CKD se snižoval. Pro všechny kortikální a trabekulární metriky byla nejhorší kostní mikroarchitektura patrná u starých myší s CKD. Ztrátakostmikroarchitektura ovlivnila strukturální integritu celé kosti. Z FEA bylo zjištěno, že stárnutí snižuje kostní mikroarchitekturu v proximální tibii, zatímco CKD snižuje strukturální tuhost.
Pro opatření týkající sekostkvalita materiálu, stáří a CKD měly různé účinky (obrázek 2). Se zvyšujícím se věkem se snížil modul celé kosti a maximální napětí, stejně jako modul tkáně v mikrometrovém měřítku. Výtěžnost a maximální napětí z tahové zkoušky ulnaradia také klesaly s věkem. Dále, v souladu s lidskými vzorky studovanými pomocí SAXS,stárnutíbyl spojen se zvýšeným namáháním kolagenu při maximálním namáhání, což implikovalo ztuhnutí kolagenových vláken (26). CKD neovlivnilo modul nebo pevnost celé kosti, ale místo toho významně snížilo práci až do zlomeniny a změnilo prostorovou variabilitu materiálu v tkáňovém měřítku. Dále může CKD snižovat houževnatost u myší středního věku, protože u tohoto onemocnění se zátěž tahového napětí přesunula na kolagenová vlákna. Zvýšené procento kolagenu při maximální zátěži bylo jedinou významnou vysvětlující proměnnou pro sníženou houževnatost u CKD, což naznačuje, že ztrátu houževnatosti celé kosti lze alespoň částečně vysvětlit změněnou mechanikou kolagenu.
Původ změněného mechanického chování kolagenu v nanoměřítku je nejistý. Byl zde trend nižších skeletálních příčných vazeb s CKD. HP a LP měřené z humeru však nekorelovaly s mechanickými vlastnostmi kolagenu ze SAXS měřenými v komplexu ulna/radius, možná kvůli různým místům analýzy. Tento posun v napětí může také vyplývat ze změněného obsahu nebo distribuce minerálů nebo změn vazby mezi kolagenem a minerálem. Zvýšené procento ColMax nemusí být přímo odpovědné za ztrátu houževnatosti u CKD, ale může být příznakem souvisejícím se změněným obratem a nedostatky v organizaci minerálů. Například změněná mineralizace by mohla učinit kolagen mobilnějším nebo může rozptýlit méně energie prostřednictvím mikrotrhlin. Tyto změny by mohly způsobit pozorovanou ztrátu houževnatosti u CKD a také zvýšenou zátěž kolagenových vláken. V budoucích studiích bude důležité identifikovat, proč CKD přesouvá napětí na kolagenová vlákna, ale zde poznamenáváme, že tato změna v chování kolagenu hraje důležitou roli v tom, jak CKD snižuje vlastnosti celokostního materiálu.
Protože při CKD dochází ke změnám vlastností kostního materiálu a je známo, že osteocyty modulují tkáňové měřítkokostkvality prostřednictvím perilakunární/kanalikulární remodelace (PLR), jsme se také zaměřili na pochopení, zda byly u CKD modifikovány 3D lakunární morfologie osteocytů (15, 16). Zatímco lakuny osteocytů se staly menšími, řidšími a méně v souladu se zvyšujícím se věkem u myší Sham, lakuny zůstaly převládající a velké u starých myší s CKD.
Místo toho u myší s CKD sérový fosfát významně a pozitivně koreloval s velikostí lakuny osteocytů. Ačkoli fosfát i PTH byly významně zvýšené
s CKD, myši s vyšším PTH neměly vyšší fosfát. Tyto výsledky nemusí být nutně rozporuplné. Sérový fosfát je čistým výsledkem fosfátu přidaného ze střevní absorpce akostresorpce méně fosfátů odstraněných renální exkrecí a tvorbou kostí. Ačkoliv tedy naše CKD myši měly obecně zvýšený PTH, ty s vyšším fosfátem mohly vyčerpat jiné systémové kompenzační mechanismy.
Osteocyty exprimují vyšší FGF23 v souvislosti se zhoršenou mineralizací (např. knockout DMP1, hypofosfatemie vázaná na x) (20,48,49) a také u chronického onemocnění ledvin (14,48,50). Nedávné důkazy naznačují, že kromě této endokrinní role se může osteocyt přímo podílet na homeostáze fosfátových minerálů viaPLR (20). Bylo zjištěno, že objemy lakun osteocytů se zvyšují s hypofosfatémií vázanou na x. Léčba buď protilátkami blokujícími FGF23 nebo 1,25 dihydroxyvitamin D obnovila objemy lakunárních osteocytů na hodnoty blíže srovnáním divokého typu (20). U CKD je minerální dysregulace zpočátku urychlena sníženou filtrací fosfátů v nemocné ledvině. Zvýšenýkostobrat je maladaptivní reakce, která naznačuje, že systémové kompenzační mechanismy pro udržení kontroly fosfátů jsou zahlceny [6,7]. V tomto případě vztah mezi zvýšeným fosfátem a zvýšeným lakunárním objemem osteocytů naznačuje, že PLR by mohla být další strategií regulace minerální homeostázy. Je zapotřebí další studie, aby se zjistilo, jak souvisí lakunární geometrie osteocytů a PLR se změněným kostním obratem, kvalitou materiálu kostní tkáně a odolností proti zlomeninám u CKD.
Naše zjištění naznačují, že procesy ovlivňujíkostmateriál se lišístárnutíoproti CKD. U stárnoucích lidí, stejně jako u myší,kostobrat (tj. osteoklastická resorpce a tvorba osteoblastů) se zpomaluje a tkáňová zralost se zvyšuje. V této studii 5/6 Nx produkovalo zřetelné defekty kvality kosti způsobené stárnutím, jako je nižší hustota kostí z mikroCT, změněná variabilita vlastností materiálu v tkáňovém měřítku a větší podíl kolagenu na tahovém zatížení. Ačkoli PTH byl významně vyšší u CKD, myši s vyšším PTH neměly nižší kvalitu kostí. Toto zjištění může vysvětlit několik důvodů. Za prvé, myši v naší studii měly mnohem nižší PTH než ve studiích s těžkou CKD a souběžnou sekundární hyperparatyreózou (9, 12). Je možné, že změny kostního obratu byly v naší studii relativně mírné. Přímo jsme však neposuzovali kostní obrat, takže tato možnost je spekulativní. Za druhé, CKD, bez ohledu na stav obratu, bylo experimentálně spojeno se změněnou kvalitou kostí. Iwasaki a spolupracovníci uvedli, že CKD s vysokým obratem z 5/6 Nx stejně jako CKD s nízkým obratem z 5/6 Nx a tyreopathyroidektomie měly za následek podobně změněnou kostní mechaniku a připisovaly tyto změny uremii (11). Je možné, že ztráta kvality kosti není podmíněna pouze sekundární hyperfosfatemií, ale je ovlivněna i mírnějšími změnami kostního obratu a akumulací uremických toxinů.
Očekávali jsme, že několikkostmetriky kvality, včetně celkukosthouževnatost, pentosidin, minerál: matrice a uhličitan:fosfát by se změnily z 6 na 24 měsíců (25,26,30,51,52). Zatímco každá z těchto metrik se s rostoucím věkem měnila očekávaným směrem, vliv věku nebyl statisticky významný. Post-hoc analýza síly pomocí G*Power (53) naznačuje, že houževnatost, pentosidin a minerální: matrice byly nedostatečné pro detekci účinkustárnutí, zatímco uhličitan:fosfát nebyl v této studii pravděpodobně ovlivněn věkem. Kromě toho, kolagen zesíťovaný LP byl poddimenzovaný pro detekci účinku CKD (doplňková tabulka 2). Existuje několik možností, proč byla některá měření kvality kostí v této studii nakonec podhodnocena. Nejprve jsme použili vlastní Ramanův nanoindentační nástroj s jedinečnou výhodou společně lokalizovaných měření. Intenzita signálu je na tomto zakázkovém nástroji nižší než na samostatných Ramanových nástrojích, a proto je možné, že náš poměr signál:šum nebyl dostatečný k rozeznání změn souvisejících s věkem. Houževnatost (počítáno od práce po zlomeninu) je mírou náchylnou k vysoké variabilitě (54) a variabilita mechanických vlastností se u geriatrických myší dále zvyšuje (25). Větší variabilita pentosidinu byla také pozorována se zvyšujícím se věkem ve studiích na lidech a hlodavcích (52,55,56). Je tedy pravděpodobné, že vysoký rozptyl v těchto měřeních zastíral rozdíly mezi hodnocenými skupinami.
Výsledky této studie ovlivnilo několik omezení. Dynamická kvantitativní histomorfometrie nebyla provedena, ale budoucí studie by umožnily hodnocení aktivit osteoblastů, osteoklastů a osteocytů.kostobrat. I když jsme identifikovali několik poruch kvality kostí, které se objevují s CKD a škodlivě ovlivňují houževnatost celé kosti, je zapotřebí další práce, aby se potvrdil původ těchto poškození a také úloha osteocytů v jejich výskytu. Analýza genové a proteinové exprese by byla užitečná při identifikaci původu narušené nanomechaniky kolagenu, protože toto poškození nebylo ovlivněno změnami v příčných vazbách kolagenu. Navíc naše interpretace toho, jak se osteocyt může podílet na regulaci minerální homeostázy a udržování kvality kosti u CKD, vyžaduje další globální (tj. genová exprese) a lokální měření (tj. histologické hodnocení kostní resorpce a tvorby).
V souhrnu jsme zjistili, že CKD kromě účinků CKD snižuje kvalitu kostístárnutísám. CKD a stárnutí podobně snižují kortikální a trabekulárníkostmikroarchitektury tak, že nejhlubší ztráta mikroarchitektury byla pozorována u starých myší snemoc ledvin. CKD také snížilo vlastnosti kostního materiálu, což mělo za následek kost se sníženou zjevnou tkáňovou zralostí se změněnou kolagenovou nanomechanikou. Tato snížení vkostkvalita, včetně mikroarchitektury a vlastností kostního materiálu, poskytují pohled na to, jak se u CKD ztrácí odolnost proti zlomeninám. Dále kombinované účinkystárnutía CKD na kvalitu kostí pomáhají vysvětlit, proč mají starší jedinci s CKD nejvyšší riziko zlomenin.
Doplňkový materiál
Doplňkový materiál naleznete ve webové verzi na PubMed Central.
Poděkování:
Rádi bychom poděkovali Williamu Schroederovi za jejich vynikající péči o studovaná zvířata a Williamu Schroederovi a Ryanu Clarkovi za sérové chemické analýzy. Podpora byla poskytována pro CMH prostřednictvím NIHT32 AG000279. Financování této práce bylo také poskytnuto KBK a VLF od NIH/NCATS Colorado CTSA Grant číslo UL1 TR001082, Co-Pilot Team Science Award. Financování TA poskytlo R01 DE019284. Kombinovaná analýza pomocí nanoindentace a Ramanovy spektroskopie byla možná díky použití vlastního přístroje financovaného cenou NSF Major Research Instrumentation #1338154. Rozptyl rentgenového záření na Beamline 7.3.3 pokročilého světelného zdroje byl podporován Ministerstvem energetiky USA pro základní energetické vědy na základě smlouvy č. DE-AC02– 05CH11231. Děkujeme také skupině AZ Weber v LBL za poskytnutí jejich tahové fáze, kterou podpořilo DOE EERE Fuel-Cell Performance and Durability Consortium (FC-PAD).
Reference
1. Nickolas TL, McMahon DJ, Shane E. Vztah mezi středně těžkým a těžkýmnemoc ledvina zlomeniny kyčle ve Spojených státech. J Am Soc Nephrol 2006 11;17(11):3223–32. [PubMed: 17005938]
2. Nitsch D, Mylne A, Roderick PJ, Smeeth L, Hubbard R, Fletcher A.Chronické onemocnění ledvina úmrtnost související se zlomeninou kyčle u starších lidí ve Spojeném království. Transplantace nefrolového číselníku 2009 5;24(5):1539–
44. [PubMed: 19075194]
3. Yenchek RH, Ix JH, Shlipak MG, Bauer DC, Rianon NJ, Kritchevsky SB, et al. Minerální hustota kostí a riziko zlomenin u starších jedinců s CKD. Clin J Am Soc Nephrol 2012; 7 (březen 1997).
4. Naylor KL, Mcarthur E, Leslie WD, Fraser L, Jamal SA, Cadarette SM a kol. Tříletý výskyt zlomenin vchronické onemocnění ledvin. Kidney Int 2014;86(4):810–8. [PubMed: 24429401]
5. Kim SM, Long J, Montez-rath M, Leonard M, Chertow GM. J BMR zlomenina kyčle u pacientů bez nutnosti dialýzyChronické onemocnění ledvin
6. Moe S, Drüeke T, Cunningham J, Goodman W, Martin K, Olgaard K, et al. Definice, hodnocení a klasifikace renální osteodystrofie: stanovisko zNemoc ledvin: Zlepšení globálních výsledků (KDIGO). Kidney Int 2006 6;69(11):1945–53. [PubMed: 16641930]
7. Hruška K, Teitelbaum S. Renální osteodystrofie. N Engl J Med 1999;30(3):773–773.
8. Doplňky KI. KDIGO 2017 AKTUALIZACE SMĚRNICE KLINICKÉ PRAXE PRO DIAGNOSTIKU, HODNOCENÍ, PREVENCI A LÉČBUCHRONICKÉ ONEMOCNĚNÍ LEDVIN– MINERÁLNÍ A 2017;1–59.
9. Moe SM, Chen NX, Newman CL, Gattone VH, Organ JM, Chen X, et al. Srovnání vápníku a kyseliny zoledronové pro zlepšení kortikální kosti na zvířecím modelu CKD. J Bone Miner Res 2014;29(4):902–10. [PubMed: 24038306]
10. Heveran CM, Ortega AM, Cureton A, Clark R, Livingston EW, Bateman TA a kol. Mírnýchronické onemocnění ledvinzhoršuje kvalitu kostí u myší C57Bl/6J. Kost 2016;86:1–9. [PubMed: 26860048]
11. Iwasaki Y, Kazama JJ, Yamato H, Matsuzaki A, Nakano T, Fukagawa M. Změněné vlastnosti materiálu jsou zodpovědné za křehkost kostí u potkanů s chronickým poškozením ledvin. Kost 2015;81:247–54. [PubMed: 26187196]
12. Allen MR, Newman CL, Chen N, Granke M, Nyman JS, Moe SM. Změny v příčných vazbách kosterního kolagenu a hydrataci matrice při vysokém a nízkém obratuchronické onemocnění ledvin. Osteoporos Int 2015 3;26(3):977–85. [PubMed: 25466530]
13. Kadokawa S, Matsumoto T, Naito H, Tanaka M. Původní hodnocení architektury trabekulární kosti a vnitřní vlastnosti kortikálníkostTkáň v modelu myšiChronické onemocnění ledvin. J Hard Tissue Biol 2011;20(2):79–86.
14. Stubbs JR, He N, Idiculla A, Gillihan R, Liu S, David V, et al. Longitudinální hodnocení změn FGF23 a abnormalit metabolismu minerálů na myším modelu chronickénemoc ledvin. J Bone Miner Res 2012;27(1):38–46. [PubMed: 22031097]
15. Tang SY, Herber RP, Ho SP, Alliston T. Matrixová metaloproteináza-13 je nezbytná pro osteocytickou perilakunární remodelaci a udržuje odolnost vůči zlomeninám kostí. J Bone Miner Res 2012;27(9): 1936–50. [PubMed: 22549931]
16. Dole NS, Mazur CM, Acevedo C, Lopez JP, Monteiro DA, Fowler TW a kol. Osteocyte-Intrinsic TGF-RQP c/c RR 2017;21(9):2585–96.
17. Alliston T Biologická regulace kvality kostí. Curr Osteoporos Rep 2014;12(3):366–75. [PubMed: 24894149]
18. Kaya S, Basta-Pljakic J, Seref-Ferlengez Z, Majeska RJ, Cardoso L, Bromage T, et al. Laktací indukované změny v objemu lakunárně-kanalikulárního prostoru osteocytů mění mechanické vlastnosti v kortikální kostní tkáni. J Bone Miner Res 2017;32(4):688–97. [PubMed: 27859586]
19. Bonewald LF. Úžasný osteocyt. JKostMiner Res 2011;26(2):229–38. [PubMed: 21254230]
20. Tokarz D, Martins JS, Petit ET, Lin CP, Liu ES, Program M, et al. Hormonální regulace perilakunární a kanalikulární remodelace osteocytů v hyp myším modelu x-vázané hypofosfatémie. J Bone Miner Res 2018;33(3):499–509. [PubMed: 29083055]
21. Heveran CM, Rauff A, King KB, Carpenter RD, Ferguson VL. Nový nástroj s otevřeným zdrojovým kódem pro měření 3D geometrie lakunárních osteocytů z konfokální laserové skenovací mikroskopie odhaluje změny velikosti a tvaru lakunárů v kortikální myší kosti související s věkem. Kost 2018;110.
22. Lewis LMT, Xie Y, Hulbert MA, Campos R, Dallas MR, Bonewald LF a kol. Degenerace sítě osteocytů v modelu stárnutí myší C57Bl/6.Stárnutí(Albany NY) 2017; 9 (10): 2190–
208. [PubMed: 29074822]
23. Hemmatian H, Laurent MR, Bakker AD, Vanderschueren D, Klein-Nulend J, van Lenthe GH. Změny v mikroporozitě kortikální kosti samic myší.Kost2018;113(duben):1–8. [PubMed: 29738854]
24. Hemmatian H, Bakker AD, Klein-Nulend J, van Lenthe GH.StárnutíOsteocyty a Mechanotransdukce. Curr Osteoporos Rep 2017;15(5):401–11. [PubMed: 28891009]
25. Ferguson VL, Ayers RA, Bateman TA, Simske SJ. Vývoj kostí a ztráta kostní hmoty související s věkem u samců myší C57BL/6J. Kost 2003;33(3):387–98. [PubMed: 13678781]
26. Zimmerman EA, Schaible E, Bale H, Barth HD, Tang SY, Reichert P a kol. Změny plasticity a houževnatosti lidské kortikální kosti související s věkem ve více délkových měřítcích. Proč Natl Acad Sci 2011;108(35):14416–21. [PubMed: 21873221]
27. Seeman E, Delmas PD. Kvalita kostí – materiál a strukturální základ jedné síly a křehkosti. N Engl J Med 2006;354:2250–61. [PubMed: 16723616]
28. Halloran BP, Ferguson VL, Simske SJ, Burghardt A, Venton LL, Majumdar S. Změny kostní struktury a hmoty s postupujícím věkem u samců myši C57BL/6J. J Bone Miner Res 2002;17(6):1044–50. [PubMed: 12054159]
29. Lauretani F, Bandinelli S, Griswold ME, Maggio M, Semba R, Guralnik JM, et al. Podélné změny BMD akostgeometrie v populační studii. J Bone Miner Res 2008;23(3): 400–8. [PubMed: 17997708]
30. Yerramshetty JS, Lind C, Akkus O. Kompoziční a fyzikálně-chemická homogenita mužského femorálního kortexu se zvyšuje po šesté dekádě. Kost 2006 12;39(6):1236–43. [PubMed: 16860007]
31. Currey JD. Vztah mezi tuhostí a obsahem minerálů v kosti. J Biomech 1969;2:477-80. [PubMed: 16335147]
32. Szulc P, Seeman E. Myšlení uvnitř a vně obálek kosti: Dedicated to PDD Osteoporos Int 2009;20(8):1281–8. [PubMed: 19590836]
33. Miyazaki-Anzai S, Levi M, Kratzer A, Ting TC, Lewis LB, Miyazaki M. Aktivace farnesoidního × receptoru brání rozvoji vaskulární kalcifikace u myší ApoE−/− s chronickým onemocněním ledvin. Circ Res 2010;106(12):1807–17. [PubMed: 20431060]
34. Bouxsein ML, Boyd SK, Christiansen BA, Guldberg RE, Jepsen KJ, Müller R. Pokyny pro hodnocení mikrostruktury kostí u hlodavců pomocí mikropočítačové tomografie. J Bone Miner Res 2010;25(7):1468–86. [PubMed: 20533309]
35. Turner CH, Burr DB. Základní biomechanická měření kosti: Tutoriál.Kost1993;14(4): 595–608. [PubMed: 8274302]
36. Lau AG, Kindig MW, Kent RW. Morfologie, distribuce, minerální hustota a objemový zlomek lidské kalcifikované žeberní chrupavky. Acta Biomater 2011;7(3):1202–9. [PubMed: 20974298]
37. Lau AG, Kindig MW, Salzar RS, Kent RW. Mikromechanické modelování kalcifikující lidské kostální chrupavky pomocí generalizované metody buněk. Acta Biomater 2015;18:226–35. [PubMed: 25712387]
38. Hexemer A, Bras W, Glossinger J, Schaible E, Gann E, Kirian R, a kol. Paprsek SAXS/WAXS/GISAXS s vícevrstvým monochromátorem. J Phys Conf Ser 2010;247.
39. Barth HD, Zimmermann EA, Schaible E, Tang SY, Alliston T, Ritchie RO. Charakterizace účinků paprskového ozáření na hierarchickou strukturu a mechanické vlastnosti lidské kortikální kosti. Biomateriály 2011;32(34):8892–904. [PubMed: 21885114]
40. Acevedo C, Bale H, Gludovatz B, Wat A, Tang SY, Wang M a kol. Léčba alendronátem mění kostní tkáň na různých strukturálních úrovních u zdravé kortikální kosti psa.Kost2015;81:352–63. [PubMed: 26253333]
41. Abramoff MD, Magalhães PJ, Ram SJ. Biofotonika mezinárodní. Biophotonics Int 2004;11(7): 36–42.
42. Oliver WC, Pharr GM. Vylepšená technika pro stanovení tvrdosti a modulu pružnosti pomocí experimentů se snímáním zatížení a posunu. sv. 7, Journal of Materials Research 1992
p. 1564–83.
43. Bushby a. J, Ferguson VL, Boyde A. Nanoindentace kosti: Porovnání vzorků testovaných v kapalině a zalitých v polymethylmethakrylátu. J Mater Res 2004 3;19(01):249–59.
44. Bank RA, Beekman B, Verzijl N, De Roos JADM, Nico Sakkee A, Tekoppele JM. Citlivá fluorimetrická kvantifikace pyridiniových a pentosidinových příčných vazeb v biologických vzorcích v jediném vysoce výkonném kapalinovém chromatografickém běhu. J Chromatogr B Biomed Appl 1997;703(1–2):37–44.
45. Oren TW, Botolin S, Williams A, Bucknell A, King KB. Artroplastika u veteránů: Analýza chrupavky, kosti, séra a synoviální tekutiny odhaluje rozdíly a podobnosti u osteoartrózy s komorbidním diabetem a bez něj. J Rehab Res Dev 2015;48(10):1195–210.
46. Bank RA, Jansen EJ, Beekman B, Te Koppele JM. Analýza aminokyselin pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s reverzní fází: Vylepšené podmínky derivatizace a detekce s 9- fluorenylmethylchlorformiátem. Anal Biochem 1996;240(2):167–76. [PubMed: 8811901]
47. Burr DB, Hooser M. Změny en bloc základního protokolu barvení fuchsinem pro demonstraci mikropoškození produkovaného in vivo.Kost1995;17(4):431–3. [PubMed: 8573418]
48. Feng JQ, Ye L, Schiavi S. Přispívají osteocyty k homeostáze fosfátů? Curr Opin Nephrol Hypertens 2009;18(4):285–91. [PubMed: 19448536]
49. Feng JQ, Ward JM, Liu S, Lu Y, Xie Y, Yuan B a kol. Ztráta DMP1 způsobuje křivici a osteomalacii a identifikuje úlohu osteocytů v metabolismu minerálů. Nat Genet 2006;38(11): 1310–5. [PubMed: 17033621]
50. Komaba H, Fukagawa M. FGF23-interakce příštítných tělísek: implikace u chronického onemocnění ledvin. Kidney Int 2010;77(4):292–8. [PubMed: 20010546]
51. Boskey A, Coleman R. Stárnutí a kost. J Dent Res 2010 12;89(12):1333–48. [PubMed: 20924069]
52. Wang X, Shen X, Li X, Mauli Agrawal C. Změny kolagenové sítě a houževnatosti kostí související s věkem.Kost2002;31(1):1–7. [PubMed: 12110404]
53. Faul F, Erdfelder E, Lang AG, Buchner A. G*Power 3: Flexibilní program statistické analýzy síly pro sociální, behaviorální a biomedicínské vědy. IEEE Int Symp Inf Theory – Proc 2007;39(2):175–91.
54. Ritchie RO, Koester KJ, Ionova S, Yao W, Lane NE, Ager JW. Měření houževnatosti kosti: Výukový program se zvláštním ohledem na studie na malých zvířatech. Kost 2008;43(5):798–812. [PubMed: 18647665]
55. Nyman JS, Roy A, Acuna RL, Gayle HJ, Reyes MJ, Tyler JH a kol. Vliv související s věkem na koncentraci příčných vazeb kolagenu v lidské osteonální a intersticiální kostní tkáni.Kost2006;39(6):1210–7. [PubMed: 16962838]
56. Saito M, Fujii K, Mori Y, Marumo K. Role kolagenových enzymatických a glykací indukovaných příčných vazeb jako determinant kvality kosti u spontánně diabetických potkanů WBN / Kob 2006;1514–23.
