Část 3: Kalpastatin zabraňuje poškození podocytů zprostředkovaného angiotensinem II prostřednictvím udržování autofagie

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Pls klikněte sem pro část 2

cistancheumí léčitakutní renální selhání

Obrázek 8| Nadměrná exprese calpastatinu zabraňuje autofagické downregulaci v podocytech indukované angiotensinem II (Angel) plus dietou s vysokým obsahem soli (HSD). (a,b) Reprezentativní imunofluorescenční snímky exprese P62 (zelená) a Podokalyxinu (PODXL; červená) v glomerulech z myší GFP-LC3 se zeleným fluorescenčním proteinem (GFP)-LC3 a CST'9 (transgenní calpastatin) po 6 týdnech od Angel plus HSD. Dílčí části obrázku s prvočíslem označují vyšší zvětšení. Jádra byla obarvena Hoechst (modrá). Bars{10}} um. (c,d) Kvantifikace P62 plus plocha na glomerulární řez.n=9 myši divokého typu (WT) a n=7 myší CST'9 v (c) a n=16 GFP-LC3 myši a n=16 CST'9 GFP-LC3 myší v (d). Hodnoty jsou uvedeny jako jednotlivé grafy a průměr ± SEM. Mann-Whitney test:**P=0.0033 v (c),**P=0.0011 v (d),(e,f) Zástupce

imunofluorescenční snímky exprese GFP (zelená) a P62 (červená) v glomerulech od myší GFP-LC3 a CST'9GFP-LC3 po 6 týdnech Angel plus HSD. Dílčí části obrázku s prvočíslem označují vyšší zvětšení. Šipky označují GFP plus P62 plus autofagozomy. (g) Kvantifikace počtu LC3 plus P62 plus teček na podocyt. n =11 myší GFP-LC3 a n =16 myší CST19 GFP-LC3. Hodnoty jsou uvedeny jako jednotlivé grafy a průměr ± SEM. Nepárový t-test se stejnou SD: P=0.1014. Chcete-li optimalizovat zobrazení tohoto obrázku, podívejte se na online verzi tohoto článku na adrese www. ledvina-mezinárodní org.

potvrdili účinek úhlu na poškození podocytů a cílení genu AT1 specifického pro podocyty prokázali, že aktivace receptorů AT1 v glomerulu u experimentální lupusové nefritidy je dostatečná k urychlení poškození ledvin v nepřítomnosti hypertenze. Autofagická dysregulace zprostředkovaná Calpainem v našem modelu by mohla být spojena s přímou signalizací AngLI-AT1 na podocytech nebo by mohla být důsledkem hypertenze. Na tuto otázku můžeme poskytnout brzkou odpověď. V modelu DOCA-sůl jsme také našli akumulaci P62 v podocytech hypertenzních myší (doplňkový obrázek S3). To naznačuje, že v tomto modelu dochází v podocytech k autofagické blokádě, která má být nezávislá na úhlu. Další studie hodnotící poškození podocytů týkající se aktivity calpainu a autofagického toku u myší s deficitem AT1 v podocytech selektivně by byly nutné k vymezení, zda taková regulace autofagie podocytů závisí na přímých nebo nepřímých účincích Angi.

Calpain-1 a calpain-2 jsou všudypřítomné prozánětlivé proteázy, jejichž aktivita je řízena calpastatinem, jejich specifickým inhibitorem. Kalpastatin skutečně selektivně inhibuje bolesti cal a dosud žádné jiné proteázy. Aktivace calpainu byla nedávno spojena s poškozením ledvin v několika patologických souvislostech." Bylo zjištěno, že přenašeč vápníkového kanálu přechodného receptoru potenciálního kanálu C6 aktivuje calpain-1 v podocytech prostřednictvím aktivace Ca²f/kalcineurinu. Ledviny pacientů s fokální a segmentální glomerulosklerózou měl zvýšenou expresi přechodného receptorového potenciálu kanálu C6, zvýšenou aktivitu calpainu a kalcineurinu a sníženou expresi cílového talinu calpainu-1, který je kritický pro cytoskeletální stabilitu podocytů.' Přechodný receptorový potenciální kanál C6 se také přímo váže na calpain-1 a calpain-2. Tato interakce je klíčová pro regulaci štěpení talinu{11}} a kontrolu motility podocytů.2

Transgenní myši nadměrně exprimující calpastatin jsou chráněny proti vaskulární remodelaci a zánětu závislému na AngII; proti zánětu v modelech glomerulonefritidy, sepse nebo odmítnutí aloštěpu; a proti zánětu souvisejícímu s věkem./"Poškození podocytů u těchto myší nebylo prozkoumáno. Peltier et al. ukázali, že nadměrná exprese calpastatinu zabránila Angl-dependentnímu perivaskulárnímu zánětu v ledvinách. Ochrana ledvin u CST myší by tedy mohla být zprostředkována alespoň částečně, protizánětlivým mechanismem. Hodnotíme infiltraci makrofágů a lymfocytů v našem modelu a nezjistili jsme žádný významný rozdíl v zánětu ledvin mezi CST a kontrolními myšmi při analýze globální infiltrace ledvinových leukocytů (doplňkový obrázek S6).

Cistancheumětzmírnit onemocnění ledvin

Calpain se nedávno podílel na regulaci autofagie (přezkoumaný nedávno ve Weber et al.) se zajímavými endo-ateroprotektivními vlastnostmi inhibice calpainu v diabetickém kontextu prostřednictvím obnovení autofagie. Tady, my

Obrázek 9] Stres glomerulárního endoplazmatického retikula (ER) a oxidační stres. (a) Kvantitativní polymerázová řetězová analýza exprese mRNA genů ER stresu, oxidačního stresu a apoptózy pomocí Qiagen kvantitativního pole polymerázové řetězové reakce v glomerulech divokého typu (WT), Nphs2.cre Atg5 a CST'9 myši po 6 týdnech angiotensinu II (Angel) plus diety s vysokým obsahem soli (HSD). Data jsou prezentována jako teplotní mapa Log2 násobné změny v genové expresi.n=5 myší na genotyp. (b) Reprezentace genů významně upregulovaná nebo downregulovaná u Nphs2.cre Atg5 oproti WT myším. (c) Zastoupení genů významně upregulováno nebo downregulováno u CST19 oproti WT myším. (b,c) Nepárový t-test se stejnou SD: P<>

cistancheumětléčit akutní selhání ledvin

uvedli, že inhibice calpainu prostřednictvím nadměrné exprese calpastatinu (i) zabránila poškození podocytů během hypertenze a (ii) obnovila autofagii v podocytech, čímž zdůraznila novou škodlivou roli aktivace calpainu během hypertenze prostřednictvím inhibice autofagie.

Bylo prokázáno, že téměř všechny ATG proteiny jsou štěpeny calpainy in vitro. Zde jsme předpokládali, že udržování autofagie u hypertenzních CST'8 myší bylo zprostředkováno inhibicí calpainu. Abychom podpořili naši hypotézu, ukázali jsme, že podocyty z CSTTg mají sníženou aktivitu calpainu, když jsou infikovány AngLI

in vitro (obrázek 3c). Zjistili jsme zvýšenou hladinu proteinu ATG5 v podocytech z CST'号 mic, což naznačuje, že nadměrná exprese kalpastatinu v tomto kontextu zabránila štěpení ATG5 zprostředkovanému kalpainem (obrázek 5a). Na rozdíl od toho bylo prokázáno, že inhibice kalpainu zprostředkovaná calpastatinem by mohla být nezávislá na inhibici jejich proteázové aktivity; nemohli jsme tedy vyloučit regulaci autofagie calpastatinem nezávisle na enzymatické aktivitě calpainu.

Stručně řečeno, tato zjištění odhalila dříve nepoznanou roli calpastatinu v regulaci autofagie podocytů a poskytla vodítko pro výzkum nových terapeutických strategií pro zvýšení přežití podocytů během hypertenzních nefropatií.

ZVEŘEJNĚNÍ

Všichni autoři deklarovali žádné konkurenční zájmy.

PODĚKOVÁNÍ

Tato práce byla podpořena Institut National de la Santé Et de la Recherche Médicale (Inserm) a Université de Paris.IB byla

podporovaný postgraduálním stipendiem na Ministere de IEducation Nationale, de la Recherche et de la Technologie. OL byla financována prostřednictvím ceny Evropské nadace pro studium diabetu (EFSD) podpořené programem EFSD/Novo Nordisk pro výzkum diabetu v Evropě a grantem od Société Francophone du Diabetes (SFD).BR a CH byly financovány ze Starting Grant 107037 od Evropské výzkumné rady a Evropské unie (P-LT). YS byl podpořen absolventským stipendiem z Fondation de France.

Děkujeme Elizabeth Huc, Nicolasovi Perezovi, Corině Suldac a týmu ERI U970 (Université de Paris, PARCC, Inserm, Paříž, Francie) za pomoc při péči o zvířata a manipulaci, Nicolasi Sorhaindovi za biochemická měření (ICB-IFR2, Laboratoire de Biochimie , Hopital Bichat, Paříž, Francie) a Alain Schmitt a Jean-Marc Masse pro transmisní elektronovou mikroskopii (Institut Cochin, Paříž, Francie). Děkujeme Morgane Le Gall (Cochin proteomické zařízení 3P5, Paříž, Francie) za pomoc s analýzou silico. Děkujeme za administrativní podporu od Véronique Oberweis, Bruno Pillard a Cyrille Mahieux (Université de Paris, PARCC, Inserm, Paříž, Francie).

DOPLŇKOVÝ MATERIÁL

Doplňkový soubor (PDF)

Obrázek S1. Primární podocytární kultura exprimuje podocytové markery. Western blot analýza exprese podocytových markerů NPHS1 a NPHS2 v primární kultuře podocytů z WT a CST myší. Tubulin (TUBA) slouží jako kontrola plnění. Zástupce n =4 myší na genotyp.

Obrázek S2. Vysoká bazální hladina autofagie podocytů. (A, B)

Reprezentativní imunofluorescenční snímky exprese GFP (zelená) a NPHS1 (červená) v glomerulech od GFP-LG myší léčených nebo neléčených CQ (80 mg/kg) 4 hodiny před usmrcením. Šipky ukazují GFP plus autofagozomy. (C, D) Reprezentativní imunofluorescenční snímky exprese GFP (zelená) a P62 (červená) v glomerulech z myší GFP-LC3 léčených nebo neléčených CQ (80 mg/kg) 4 hodiny před zabitím. Šipky ukazují GFP plus P62 plus autofagozomy. (AD)()představují větší zvětšení. Jádra byla obarvena Hoechst （modrá）. Bar=50 μm. N=4 myší na stav (EH) Reprezentativní imunofluorescenční snímky exprese GFP (zelená) a P62 (červená) v primárním podocytu od myší GFP-LC3 léčených (F, H) nebo neléčených (E, G) Bafilomycin A1 (100 nM) po dobu 4 hodin. N=5 myší na stav.

Obrázek S3.P62 se akumuluje v podocytech v DOCA-solném modelu hypertenze. (AC) Reprezentativní imunofluorescenční snímky exprese P62 (zelená) a PODXL (červená) v glomerulech od myší WT po 2 až 6 týdnech modelu DOCA-sůl. (')představují větší zvětšení. Jádra byla obarvena Hoechst （modrá）.Bar= 50 μm. (D) Kvantifikace plochy P62 na plochu podocytů (procento). N=5-6 myší na stav. Jednosměrná analýza rozptylu: čas P= 0.0059, Sidakův test vícenásobného srovnání: D42 versus D14* P=0.0055, D28 versus D14P=0.8590.

Obrázek S4. Autofagie podocytů je pro vývoj podocytů nezbytná. (A)Systolický krevní tlak, (B) poměr albuminu ke kreatininu v moči a (C) hladiny dusíku močoviny v krvi u myší Atgsloxlbx a Nphs2.cre Atg5oxloxmy. N =5-6 myší na genotyp. Hodnoty jsou uvedeny jako jednotlivé grafy a průměry ± SEM. Mann-Whitney test: P=0.7273(A),P=0.4286(B) a P=0.6623(C). (DE) Reprezentativní snímky Massonových trichromem obarvených řezů glomerulů z myší Atg5oxlox a Nphs2.cre Atgsloxlbx. (FG) Reprezentativní imunofluorescenční snímky exprese PODXL (zelená) a WT1 (červená) u myší Atg5bxlox a Nphs2.cre Atgsboxlo. Jádra byla obarvena Hoechst (modrá). (DG)Bar=50 um.N=6 myši na genotyp. (HI) Reprezentativní mikrofotografie řezů glomerulů z transmisní elektronové mikroskopie z myší Atgslox/ox a Nphs2.cre Atgsox/o. Pruh=1 um. N=3 myší na genotyp. Obrázek S5. Nadměrná exprese kalpastatinu neovlivňuje funkci ledvin ve výchozím stavu. (A)hladiny dusíku močoviny v krvi a (B) plazmatického albuminu u 12-týdenních myší GFP-LC3 a CST'9 GFP-LC3.N=5 GFP-LC3 a N=6CST9 GFP -LC3. Hodnoty jsou uvedeny jako jednotlivé grafy a průměry ± SEM. Mann-Whitney test: P=0.6623 (A) a P=0.9307(B). (C,D) Reprezentativní snímky Massonových trichromem obarvených řezů glomerulů z myší GFP-LC3 a CST19 GFP-LC3. (EH) Reprezentativní imunofluorescenční snímky exprese PODXL(E, F) a NPHS1(G, H) v GFP-LC3 a CSr9 GFP-LC3 myši. (CH)Bar =50 um. (UJ) Přidružená kvantifikace plochy PODXL a NPHS1 na glomerulární řez. N=5 GFP-LG3 a N=6 CST19 GFP-LC3. Hodnoty jsou uvedeny jako jednotlivé grafy a průměry ± SEM. Mann-Whitney test: P=0.1898(A) a P= 0.8413 (B).

Obrázek S6. Nadměrná exprese kalpastatinu neovlivňuje globální zánět ledvin. Reprezentativní imunohistochemie exprese F4/80(A, B) a CD3 (DE) u myší GFP-LG3 a CS79 GFP-LC3 po 6 týdnech podávání Angiotensinu I plus HSD.Bar=200 um. (C, F) Přidružená kvantifikace oblasti F4/80 a CD3 na řez ledviny. Myši N=7 CST19 GFP-LG3 a N{19}} GFP-LC3. Hodnoty jsou prezentovány jako jednotlivé grafy a průměry ± SEM. Mann-Whitney test: P=0.3969 (C) P=0.3357(F).

Figure S7.Podocyte autophagy deficiency does not induce ER stress or oxidative stress in young adults at baseline.qPCR analysis of the mRNA expression of genes of the ER stress, oxidative stress, and apoptosis pathway by Qiagen qPCR array in glomeruli from WT and Nphs2.cre Atgsoxlomice (A) and WT and CSr9 mice (B).N=4 mice per genotype. For Nox3, Ct >33.

Tabulka S1. In silico previze calpainových štěpných míst. Calpainová štěpná místa byla předpovězena v proteinech souvisejících s podocyty a autofagií pomocí GPS-CCD (http://ccdbiocuckoo.org), CaMPDB (http://calpain.org) a DeepCalpain Predict (http://deepcalpain.cancerbio info/help.php).

Doplňkový soubor (Excel)

Doplňková tabulka S2. Úplný soubor in silico prevision míst štěpení calpainem. Calpainová štěpná místa byla předpovězena v proteinech souvisejících s podocyty a autofagií pomocí GPS-CCD (http://ccd. biocuckoo.org), CaMPDB (http://calpain.org) a DeepCalpain Predict (http://deepcalpain .cancerbio.info/help.php). Předpovědní místa štěpení jsou obnovena pro každý protein pro GPS-CCD a DeepCalpain Predict.

Cistanchemůže ulevitnemoc ledvin

REFERENCE

1. Coresh J, Selvin E, Stevens LA a kol. Prevalence chronického onemocnění ledvin ve Spojených státech. JAMA.2007;298:2038-2047.

2. Collins A, Vassalotti JA, Wang C, a kol. Na koho by se mělo zaměřit CKD 27. Riser BL, Cortes P, Heilig C a kol., selektivní up-screening cyklické natahovací síly? Vliv diabetu, hypertenze a kardiovaskulárních onemocnění. Am J Kidney Dis.2009;53:S71-S77.reguluje transformující izoformy růstového faktoru-beta v kultivovaných krysích mezangiálních buňkách. Am J Pathol. 1996;148:{10}}.

3. Chang TL, Liz, Chen SC, et al. Rizikové faktory pro ESRD u jedinců s 28. Kretzler M, Koeppen-Hagemann I, Kriz W. Poškození podocytů je kriticky zachovaná odhadovaná GFR s albuminurií a bez ní: výsledky z včasného hodnocení ledvin Program (KEEP).Am JKidney Dis.201361:S4-S11.

4. Hsu CY, McCulloch CE, DarbinianJ, et al. Zvýšený krevní tlak a riziko konečného onemocnění ledvin u subjektů bez výchozího onemocnění ledvin. Arch Intern Med. 2005;165:923-928.

5. Nagase M, Shibata S, Yoshida S, a kol. Poškození podocytů je základem glomerulopatie Dahlových krys s hypertenzí solí a je zvráceno blokátorem aldosteronu, Hypertension.2006:47;1084-1093.

6. Garovič VD. Wagner SJ, Turner ST a kol., Vylučování podocytů močí jako marker preeklampsie. Am J Obstet Gynecol. 2007;196,320.e321-e327. 7. Craici IM, Wagner SJ, Bailey KR, et al. Podocyturie předchází proteinurii

a klinické rysy preeklampsie: longitudinální prospektivní studie. Hypertenze. 2013; 61:1289-1296.

8. Wang G, Lai FM, Kwan BC, a kol. Ztráta podocytů u lidské hypertenzní nefrosklerózy. Am J Hypertens. 2009:22:300-306.

9. Wangi.Kwan BC, Lai FM.et al.Intrarenální exprese miRNAsin pacientů s hypertenzní nefrosklerózou. Jsem JHypertens. 2010; 23:78-84. 10.Ruggenenti P, Perna A, Gherardi G, et al. Chronická proteinurie

nefropatie: výsledky a odpověď na léčbu v prospektivní kohortě 352 pacientů s různými typy poškození ledvin. Am JKidney Dis. 2000;35:1155-1165.

11. Fukuda A. Wickman LT, Venkatareddy MP a kol. Trvalý úbytek podocytů z destabilizovaných glomerulů závislý na angiotenzinu l způsobuje progresi konečného onemocnění ledvin. Kidney Int. 2012:81:40-55.

12. Tuncdemir M, Ozturk M. Účinky blokátorů receptoru pro angiotensin-II na poškození podocytů a glomerulární apoptózu u potkaního modelu experimentální diabetické nefropatie vyvolané streptozotocinem. Acta Histochem. 2011:113:826-832.

13. Nijenhuis T, Sloan AJ, Hoenderop JG, et al. Angiotenzin Ⅱl přispívá k poškození podocytů zvýšením exprese TRPC6 prostřednictvím signální dráhy pozitivní zpětné vazby zprostředkované NFAT. J Pathol.2011;179:1719-1732.

14. The EUCLID Study Group. Randomizovaná placebem kontrolovaná studie lisinoprilu u normotenzních pacientů s inzulín-dependentním diabetem a normoalbuminurií nebo mikroalbuminurií. Lancet.1997;349:1787-1792.

15.de Zeeuw D.Remuzi G.Parving HH, et al, Proteinurie, cíl pro renoprotekci u pacientů s diabetickou nefropatií typu 2: lekce z RENTAL. Kidney Int.2004;65:2309-2320.

16. Benigni A, Gagliardini E, Remuzzi G. Změny v glomerulární permselektivitě indukované angiotensinem II implikují dysfunkci podocytů a přeuspořádání proteinu štěrbinové diafragmy. Semin Nephrol, 2004;24:131-140. 17. Wang L Flannery PJ, Spurney RF. Charakterizace subtypů receptoru angiotenzinu II v podocytech. JLab Clin Med. 2003:142:313-321.

18. Langham RG, Kelly DJ, Cox A a kol. Proteinurie a exprese proteinu diafragmy štěrbiny podocytů, nefrinu, u diabetické nefropatie: účinky inhibice angiotenzin-konvertujícího enzymu. Diabetologie. 2002;45:1572-1576.

19. Nakamura T, Ushiyama C, Suzuki S, a kol. Účinky inhibitoru angiotenzin-konvertujícího enzymu, antagonisty receptoru angiotensinu Ⅱ a antagonisty vápníku na močové podocyty u pacientů s nefropatií IgA. Am J Nephrol. 2000; 20:373-379.

20. Henger A, Huber T, Fischer KG a kol. Angiotensin II zvyšuje aktivitu cytosolového vápníku v podocytech potkana v kultuře. Kidney Int. 199752:687-693.

21. Praga M, Hernandez E, Montoyo C, a kol. Dlouhodobé příznivé účinky inhibice angiotenzin-konvertujícího enzymu u pacientů s nefrotickou proteinurií. Am J Kidney Dis. 1992:20:240-248.

22. Nitschke R, Henger A. Ricken S, et al Angiotensin Ⅱl zvyšuje aktivitu intracelulárního vápníku v podocytech intaktního glomerulu. Kidney Int, 200057:41-49.

23. Gloy J, Henger A. Fischer KG, et al Angiotensin II moduluje buněčné funkce podocytů. Kidney Int Suppl. 1998:67S168-S170.

24. Micelil, Burt D, Taraba E, et al. Stretch snižuje expresi nefrinu prostřednictvím mechanismu závislého na angiotenzinu IL-AT(1) v lidských podocytech: účinek rosiglitazonu. Am J Physiol Renal Physiol.2010;298:F381-F390. 25. Endlich N, Endlich K. Natažení, napětí a adheze – adaptivní mechanismy aktinového cytoskeletu v podocytech. Eur j Cell Biol. 2006;85:{11}}.

krok ve vývoji glomerulosklerózy u uninefrektomovaných-desoxykortikosteronových hypertenzních potkanů. Archiv Vircows. 1994;425:181-193.

29. Jung HS, Chung KW, Won Kim J, et al. Ztráta autofagie snižuje hmotu a funkci pankreatických beta-buněk s výslednou hyperglykémií. Cell Metab.2008;8:318-324.

30. Ebato C, Uchida T, Arakawa M, et al. Autofagie je důležitá při homeostáze ostrůvků a kompenzačním zvýšení hmoty beta-buněk v reakci na dietu s vysokým obsahem tuků, Cell Metab.2008;8:325-332. 31, L

Lenoir O, Jasiek M, Henrique C a kol. Autofagie endoteliálních buněk a podocytů synergicky chrání před glomerulosklerózou vyvolanou cukrovkou. Autofagie. 2015;11:1130-1145.

32. Hartleben B, Godel M, Meyer-Schwesinger C, et al. Autofagie ovlivňuje vnímavost glomerulárních onemocnění a udržuje homeostázu podocytů u stárnoucích myší. J Gin Invest. 2010;120:1084-1096.

33. Sato S, Kitamura H, Adachi A, et al. Dva typy autofagie v podocytech ve vzorcích renální biopsie: ultrastrukturální studie. J Submiarosc Cytol Pathol, 2006;38:167-174,

34. Asanuma K. Tanida 1., Shirato 1. a kol. MAP-LC3, slibný autofagozomální marker, je zpracováván během diferenciace a obnovy podocytů z nefrózy PAN. FASEBJ.2003;17:1165-1167. 35. Mizushima N, Levine B, Cuervo AM, et al. Autofagie bojuje s nemocí prostřednictvím buněčného samotrávení. Nature.2008;451:{10}}.

36. Yang LLP, Fu S, et al. Defektní jaterní autofagie u obezity podporuje ER stres a způsobuje inzulínovou rezistenci. Cell Metab.2010;11:467-478. 37.Xie Z, Klionsky DJ. Tvorba autofagosomů: jádro a adaptace. Nat Cell Biol.2007;9:1102-1109.

38. Kume S, Thomas MC, Koya D. Snímání živin, autofagie a diabetická nefropatie. Diabetes. 2012;61:23-29.

39. Kume S, Uzu T, Maegawa H, et al. Autofagie: nový terapeutický cíl pro onemocnění ledvin. Clin Exp Nephrol.2012;16:827-832.

40. Huber TB. Edelstein CL, Hartleben B, et al. Vznikající role autofagie ve funkci ledvin, onemocnění a stárnutí, Autofagie. 2012: 8:1009-1031.

41. Weide T, Huber TB. Důsledky autofagie pro glomerulární stárnutí a onemocnění. Cell Tissue Res. 2011;343:467-473.

42. Bork T, Liang W, Yamahara K, et al. Podocyty si udržují vysoké bazální hladiny autofagie nezávislé na signalizaci mTOR.Autofagie.2020;16:1932-1948.

43. Peltier J, Bellocg A, Perez a kol. Aktivace a sekrece calpainu podporují glomerulární poškození u experimentální glomerulonefritidy: důkazy od calpastatin-transgenních myší. JAm Soc Nephrol, 2006:17:3415-3423. 44. Moeller M, Sanden SK, Soofi A, et al. Podocytově specifická exprese Cre-rekombinázy u transgenních myší. Genesis.2003;35:{10}}.

45. Hara T, Nakamura K, Matsui M, et al. Potlačení bazální autofagie v nervových buňkách způsobuje neurodegenerativní onemocnění u myší. Nature.2006;441:885-889.

46. ​​Lazareth H, Henrique C, Lenoir O, et al. Tetraspanin CD9 řídí migraci a proliferaci parietálních epiteliálních buněk a progresi glomerulárního onemocnění. Nat Commun. 2019:10:3303.

47. Bolle G, Flamant M, Schordan S, a kol. Receptor epidermálního růstového faktoru podporuje glomerulární poškození a selhání ledvin u rychle progresivní srpkovité glomerulonefritidy. Nat Med. 2011;17:1242-1250.

48. Lenoir O, Milon M, Virsolvy A, et al. Přímé působení endotelinu-1 na podocyty podporuje diabetickou glomerulosklerózu. J Am Soc Nephrol. 2014; 25:1050-1062.

49. Henrique C, Bollee G, Lenoir O, a kol. Erytroidní faktor 2 související s jaderným faktorem 2- řídí podocytově specifickou expresi receptoru Y aktivovaného peroxisomovým proliferátorem, který je nezbytný pro rezistenci vůči srpkovitému GN.J Am Soc Nephrol,. 2016:27:172-188.

50. Perez, Dansou B, Herve R. et al. Calpainy uvolněné T lymfocyty štěpí TLR2 za účelem kontroly exprese IL-17. J Immunol. 2016;196;168-181. 51. Raimbourg Q, Perez J, Vandermeersch S, et al. Calpain/calpastatin

systém má protichůdné role v růstu a metastatickém šíření melanomu. PLoS One.2013:8;e60469.

52. Letavernier B, Zafrani L, Nassar D, et al. Calpainy přispívají k vaskulární reparaci u rychle progresivní formy glomerulonefritidy: potenciální role jejich externalizace. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2012:32:335-342.

26.Durvasula RV, Petermann AT, Hiromura K, et al. Aktivace lokálky

53. Weber J, Pereira Sena P, Singer E, a kol. Zabíjení dvou rozhněvaných ptáků s jedním tkáňovým angiotensinovým systémem v podocytech mechanickým namáháním. Kidney Int. 2004;65:30-39.stone: aktivace autofagie inhibicí calpainů u neurodegenerativních onemocnění a mimo ně.Biomed Res Int. 2019;2019:4741252.