Střevní propustnost a deprese u pacientů se zánětlivým onemocněním střevⅠ
Dec 20, 2023
Abstrakt: Deprese je globální zdravotní problém, který vyžaduje včasnou a přesnou diagnózu, aby byl zajištěn rychlý přístup k vhodné léčbě. Recentattention se zaměřil na analýzu osy mozek-střevo-mikrobiota mezi více psychopatologickými cestami. Střevní bariéra hraje klíčovou roli a dysfunkce vyskytující se na této úrovni mají důsledky pro duševní zdraví. Cílem této studie bylo prozkoumat roli biomarkerů střevní permeability, tj. kalprotektinu, zoulinu, proteinu vázajícího lipopolysacharidy (LBP) a proteinu vázajícího střevní mastné kyseliny (I-FAB), při depresi u pacientů se zánětlivým onemocněním střev (IBD). ).
Jedná se o první studii tohoto druhu probíhající v Rumunsku ve východní Evropě s důrazem na pacienty s Crohnovou chorobou a ulcerózní kolitidou. Zjištěné korelace mezi depresí a kalprotektinem a depresí a LBP mají potenciál osvětlit proces rychlé diagnostiky deprese pomocí biomarkerů. Protože deprese koreluje se snížením kvality života hospitalizovaných pacientů s IBD, musí být naléhavá potřeba přístupu k odpovídající léčbě.
1. Úvod
Deprese je individuální, profesní a sociální postižení spojené se somatickými nemocemi [1,2] a s vysokým rizikem úmrtnosti na sebevraždu [3]. Přístup ke specialistům, správná diagnóza a účinná léčba jsou však omezené [4]. Včasná a přesná diagnóza [5,6] a také personalizovaný výběr léčby [7] jsou nezbytné pro snížení utrpení a finanční zátěže onemocnění [3]. Podle diagnostických kritérií v Diagnostickém a statistickém manuálu duševních poruch (DSM V) [8], deprese je afektivní porucha s heterogenní skupinou symptomů. K diagnóze je nutná přítomnost pěti z devíti následujících příznaků: depresivní nálada, nedostatek potěšení, potíže se spánkem a chutí k jídlu, nízká hladina energie, kognitivní změny, pocity viny a viny a sebevražedné myšlenky. patofyziologické mechanismy pro prospěch z účinné léčby nejsou známy. Několik mechanismů bylo zpochybněno, ale teorie se stále vyvíjejí.
Byly tedy zkoumány dysfunkce na ose hypotalamus–hypofýza, neurotransmitery, nervus vagus, metabolity mastných kyselin s krátkým řetězcem, tryptofan, zánětlivé faktory a osa mozek–střevo–mikrobiota [9–12]. Bylo prokázáno, že nejen poruchy související se stresem přinášejí změny ve složení střevní mikrobioty přes osu hypotalamus–hypofýza–nadledviny, ale také střevo ovlivňuje
centrálního nervového systému prostřednictvím vagové stimulace, střevní permeability a uvolňování zánětlivých a protizánětlivých sloučenin a změn v cirkulujících agens v krvi [13]. V posledních dvou desetiletích nabralo na obrátkách studium osy mozek – střevo – mikrobiota u duševních poruch [9,14]. V této souvislosti je více pozornosti věnována roli syndromu prosakujícího střeva [15,16].
Střevní bariéra má hlavní roli při trávení a vstřebávání živin, druhotně přísně kontroluje transport antigenů z lumen do submukózy a udržuje rovnováhu mezi tolerancí a imunitní odpovědí, která způsobuje zánět. Integrita střevní bariéry může být ovlivněna stravou, dysbiózou střevní mikrobioty nebo jinými faktory. Ty mají potenciál způsobit imunitní aktivaci translokací mikrobiálních antigenů a metabolitů. V současné době byly jako střevní permeabilita analyzovány sérový zoulin, střevní protein vázající mastné kyseliny (IFABP/FABP2) a LBP, stejně jako fekální albumin, kalprotektin a zolin. markery [17].Kalprotektin je protein, který váže vápník a zinek, původně izolovaný z leukocytů;je užitečný při odlišení zánětlivého onemocnění střev od syndromu dráždivého tračníku.Hraje hlavní roli při zánětu a je považován za protein akutní fáze [18 ].
Normální hodnoty jsou mezi 10 a 50 nebo 60 (ug/g). Hodnoty nad 200 (ug/g) mohou indikovat zánětlivé onemocnění a hodnoty nad 500–600 (ug/g) jistě indikují existenci střevního onemocnění [19]. Lipopolysaccharide-binding protein (LBP) je základní lipidová složka vnější membrány gramnegativních bakterií [20], které způsobují endotoxémii [21]. LBPis produkovaný hepatocyty, tukovou tkání a střevními buňkami funguje jako protein akutní fáze I a hraje důležitou roli v imunitní odpovědi [22]. LBP je přítomen v séru v koncentracích 5–15 mg/ml a během akutní fáze se zvyšuje 10 až 50krát. Bariérovou funkci udržuje zoulin, známý jako jediný fyziologický modulátor blízkých intracelulárních spojení (TJ) [15,23, 24]. Zonulin reverzibilně otevírá TJ a působí na proteázou aktivovaný receptor 2 umístěný v intracelulárním prostoru junkčního komplexu [25]. Medián hodnoty zoulinu je 34 ng/ml [26].
Intestinální protein vázající mastné kyseliny (I-FABP/FABP2) je jedním z devíti různých identifikovaných FABP, které patří do nadrodiny proteinů, které vážou lipidy. Hlavní úlohou je intracelulární transport a regulace absorpce mastných kyselin [27]. Při poškození epiteliální střevní bariéry se I-FABP uvolňuje do oběhu a jeho plazmatická koncentrace se zvyšuje [28]. Prahová hodnota pro I-FAPB je považována za 2 ng/ml. V této souvislosti jsme se zaměřili na prozkoumání role biomarkerů střevní permeability v depresi u pacientů se zánětlivým onemocněním střev (IBD) (i) zkoumáním vztahu mezi kalprotektinem, zoulinem, LBP , IFABP/FABP2 a deprese a (ii) vyhodnocením vlivu deprese na kvalitu života.
2. Materiály a metody
2.1. Studijní skupina
Počáteční skupina zahrnovala 60 pacientů z gastroenterologické kliniky klinické nemocnice v okrese Constanta v období od dubna do června 2021. Kritéria pro zařazení byla diagnóza IBD, věk 18 let a více, znalost čtení a psaní a souhlas s účastí ve studii. Vylučovacími kritérii bylo odmítnutí souhlasu, těžká deprese nebo jiné závažné duševní poruchy, kvůli kterým byli nasměrováni na specializovanou psychiatrickou službu. Po informovaném souhlasu byli pacienti telefonicky kontaktováni výzkumníkem, aby aplikovali sociodemografický dotazník o depresi a dotazník o kvalitě Do studie bylo zahrnuto 30 pacientů, kteří prošli všemi fázemi studie.
2.2. Použité dotazníky
Účastníkům byl aplikován dotazník o zdraví pacienta-9 (PHQ-9) [29], aby se zhodnotila úroveň deprese, kterou byli postiženi. Tento standardní dotazník obsahuje devět položek, na které je třeba odpovědět na základě symptomů, které pacient měl během posledních 14 dnů. Skóre jsou klasifikovány takto: 1–4 minimální deprese, 5–9 mírná deprese, 10–14 středně těžká deprese, 15–19 středně těžká deprese a 20–27 těžká deprese Podobně jsme použili dotazník pro kvalitu života (EQ{{ 14}}D) [30,31] shromažďovat údaje týkající se kvality života. Položky obsažené v tomto nástroji jsou mobilita pacienta, sebeobsluha, zapojení do běžných činností, bolest nebo nepohodlí a prožívaná úzkost nebo deprese. Položky jsou zodpovězeny na pětistupňové škále.
2.3. Odběr vzorků a laboratorní analýza
Sérologické vzorky pro zoulin, IFABP/FABP2, LBP a vzorky stolice pro kalprotektin byly odebrány podle protokolu pro odběr a transport potenciálně infekčních biologických vzorků. Vzorky séra byly odebrány žilní punkcí, nalačno a ve vakuátoru s aktivační látkou. Vzorky stolice byly odebírány ze spontánně emitovaných stolic do nádob bez nosného média. Sérum bylo testováno na zoulin pomocí MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, USA). a IFABP/FABP2 a LBP se sadou Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. (Wuhan, Čína). Vzorky byly testovány na kalprotektin pomocí sady EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG. Všechny testy byly provedeny enzymovým imunosorbentním testem (ELISA) na ADALTIS Analyzer GEN-4 a Victor X4 podle pokynů výrobce soupravy.
Rozsah normálních hodnot byl definován výrobcem soupravy pouze pro kalprotektin takto: menší nebo rovno 50.0 mcg/g jako normální, 50,1– 120,0 mcg/g jako limitní hodnota a větší nebo rovno 120,1 mcg/g jako pozitivní na střevní onemocnění. Pro zoulin výrobce reakční soupravy nespecifikoval žádné spodní limity detekce. Spodní limit detekce pro soupravu IFABP/FABP2 byl 0,156 ng/ml, 3,125 ng/ml pro LBP a 3,125 ng/ml pro kalprotektin. Pro zoulin, I-FABP/FABP2 a LBS/LBP výrobce soupravy nesdělil rozsah normálních hodnot a byly použity hodnoty použité jinými autory ve svých studiích. Sérum bylo extrahováno z každého vzorku krve centrifugací při 3000 × g po dobu 30 minut pomocí centrifugy Thermo Scientific SL16R.
Všechna získaná séra byla udržována zmrazená při -200 ◦C až do provedení analýz. Pro IFABP/FABP2 a LBP byly vzorky před testováním zředěny na 1/2 pufrem pro ředění vzorků. Vzorky stolice byly až do dne testování uchovávány při -20 ◦C. Extrakce vzorku stolice byla provedena pomocí 980 iuextrakčního pufru spolu s 20 mg stolice, míchána po dobu 30 s a poté centrifugována při 2000 x g po dobu 10 minut pomocí centrifugy Thermo Scientific SL16R. Ředění vzorků bylo provedeno pomocí 980 iu vzorkového pufru a 20 iu extrakčního supernatantu.
Pro čtyři markery byly použity mikrodestičky s 96 jamkami potaženými záchytnými protilátkami: anti-kalprotektinové protilátky, anti-IFABP/FABP2 protilátky, anti-LBP protilátky nebo antizonulinové protilátky. Principy testu byly stejné na základě technologie imunologického testování souvisejícího s enzymem (ELISA). Do jamek byly později přidány standardní vzorky, testovací vzorky a detekční protilátky konjugované s biotinem. K vizualizaci enzymatické reakce HRP (křenová peroxidáza) byly použity substráty TMB (3,30,5,50-tetramethylbenzidin). HRP katalyzovala TMB za vzniku modrého produktu, který se po přidání roztoku pro zastavení kyselosti změnil na žlutý.
Hustota žluté skvrny byla úměrná množství vzorku zachyceného na destičce. Intenzita barvy byla měřena při 450 nm ve čtečce mikrodestiček a poté byla vypočtena cílová koncentrace.
2.4. Statistická analýza
Statistická analýza byla provedena pomocí statistického softwaru IBM SPSS verze 23 (Armonk, NY, USA: IBM Corp.). Data jsou prezentována jako medián a IQR (interkvartilrozsah P75–P25) pro spojité proměnné v případě zkreslených rozdělení nebo jako procenta pro kategorické proměnné.
Vzhledem k tomu, že Shapiro–Wilkův test normality ukázal v případě analyzovaných spojitých proměnných statistické hodnoty testu, jejichž pravděpodobnost (p) byla nižší než hladina významnosti {{0}}.05, podmínka normalita nebyla splněna, kromě proměnných LBP a PHQ 9, pro které p >=0.05. Považovali jsme za vhodnější neparametrický přístup ke studiu korelace mezi dotyčnými proměnnými s uvedením Spearmanova rho korelačního koeficientu (ρ) a pravděpodobnosti (p) s ním spojené. Hladina významnosti byla stanovena na 0,05.
Přírodní bylinná medicína pro zmírnění zácpy-Cistanche
Cistanche je rod parazitických rostlin, který patří do čeledi Orobanchaceae. Tyto rostliny jsou známé pro své léčivé vlastnosti a po staletí se používají v tradiční čínské medicíně (TCM). Druhy Cistanche se vyskytují převážně v suchých a pouštních oblastech Číny, Mongolska a dalších částí Střední Asie. Rostliny cistanche jsou charakteristické svými masitými, nažloutlými stonky a jsou vysoce ceněny pro své potenciální zdravotní přínosy. V TCM se věří, že Cistanche má tonizující vlastnosti a běžně se používá k výživě ledvin, zvýšení vitality a podpoře sexuálních funkcí. Používá se také k řešení problémů souvisejících se stárnutím, únavou a celkovou pohodou. Zatímco Cistanche má dlouhou historii používání v tradiční medicíně, vědecký výzkum jeho účinnosti a bezpečnosti stále probíhá a je omezený. Je však známo, že obsahuje různé bioaktivní sloučeniny, jako jsou fenylethanoidní glykosidy, iridoidy, lignany a polysacharidy, které mohou přispívat k jeho léčivým účinkům.
Wecistanche'scistanche prášek, cistanche tablety, cistanche kapslea další produkty jsou vyvíjeny pomocípoušťcistanchejako suroviny, z nichž všechny mají dobrý vliv na zmírnění zácpy. Specifický mechanismus je následující: Předpokládá se, že Cistanche má potenciální přínos pro zmírnění zácpy na základě jeho tradičního použití a určitých sloučenin, které obsahuje. Zatímco vědecký výzkum konkrétně o účinku Cistanche na zácpu je omezený, předpokládá se, že má více mechanismů, které mohou přispět k jeho potenciálu zmírnit zácpu. Laxativní účinek:Cistanchese již dlouho používá v tradiční čínské medicíně jako lék na zácpu. Předpokládá se, že má mírný projímavý účinek, který může pomoci podpořit pohyby střev a vyvolat zácpu. Tento účinek lze přičíst různým sloučeninám v Cistanche, jako jsou fenylethanoidní glykosidy a polysacharidy. Zvlhčení střev: Na základě tradičního použití se má za to, že Cistanche má zvlhčující vlastnosti, konkrétně zaměřené na střeva. Podpora hydratace a lubrikace střev může pomoci změkčit nástroje a usnadnit průchod, a tím zmírnit zácpu. Protizánětlivý účinek: Zácpa může být někdy spojena se zánětem v trávicím traktu. Cistanche obsahuje určité sloučeniny, včetně fenylethanoidových glykosidů a lignanů, o kterých se předpokládá, že mají protizánětlivé vlastnosti. Snížením zánětu ve střevech může pomoci zlepšit pravidelnost stolice a zmírnit zácpu.