Flavonoidy Cistanche Aerial-Part zlepšují chronickou prostatitidu: Validace potkanů, modulace cytokinů a mechanismy PI3K–AKT–EGFR–MMP9
Nov 06, 2025
2.3.1 Seskupování zvířat a indukce modelů
Po jednom týdnu aklimatizace byli samci potkanů SD náhodně rozděleni do čtyř skupin (n=6 na skupinu): skupina s falešnou operací, modelová skupina, skupina s pozitivním lékem (tablety Qianliekang Pule'an) a skupina s alkoholovým extraktem Cistanche. Podle „Návrhu specifikace pro přípravu zvířecích modelů chronické prostatitidy“ [20] byl 1% karagenan v normálním fyziologickém roztoku injikován do semenných váčků k vyvolání chronické prostatitidy u modelové, léčené a pozitivní skupiny. Simulovaná skupina dostala stejný objem normálního fyziologického roztoku. Dávkování začalo po 3denním zotavení.
Doplňky extraktu z cistanche pro chronickou prostatitidu
2.3.2 Podávání léků
Extrakt z vzdušné části Cistanche byl podáván v dávce 63 mg/(kg.d). Pozitivní lék byl podáván v dávce 1,05 g/(kg.d). Vehikulum bylo 0,5% CMC-Na a objem žaludeční sondy byl 1 ml na potkana. Simulované a modelové skupiny dostaly ekvivalentní objem vehikula. Podávání bylo prováděno jednou denně v pevně stanovenou dobu po dobu 28 po sobě jdoucích dnů.
2.3.3 Tělesná hmotnost a index prostaty
Tělesná hmotnost byla zaznamenávána týdně. 24 hodin po poslední dávce byly krysy anestetizovány; prostaty byly vyříznuty a zváženy pro výpočet indexu prostaty.
Index prostaty (%)=hmotnost prostaty (g) / tělesná hmotnost (g) × 100 %
Výsledky: Mezi skupinami nebyly pozorovány žádné významné rozdíly v tělesné hmotnosti nebo hmotě prostaty. Modelová skupina vykazovala zvýšený index prostaty oproti kontrolní skupině (P < 0,05). Jak skupina s pozitivním lékem, tak skupina s extraktem Cistanche vykazovaly snížené indexy prostaty ve srovnání s modelovou skupinou (P < 0,05), viz tabulka 3.
Cistanche Úvod pro chronickou prostatitidu
2.3.4 Sérové zánětlivé cytokiny pomocí ELISA
24 hodin po posledním podání byly krysy anestetizovány 20% vodným roztokem urethanu. Krev byla odebrána z břišní aorty, odstředěna a sérum skladováno při -80 stupních. Podle pokynů soupravy ELISA byly stanoveny sérové hladiny DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA a TNF-.
Ve srovnání s kontrolní skupinou měla modelová skupina zvýšené DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA a TNF- (P < 0,05, P < 0,01). Oproti modelové skupině skupina s extraktem z letecké části Cistanche vykazovala snížené hladiny DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA a TNF- (P < 0,05, P < 0,01), což ukazuje na příznivý terapeutický účinek proti chronické prostatitidě; viz obrázek 4.
2.3.5 Barvení HE pro histopatologii prostaty
Tkáně prostaty byly fixovány v tkáňovém fixativu déle než 24 hodin, dehydratovány, zalité v parafínu, nařezány a obarveny hematoxylinem-eosinem (HE). Pod světelným mikroskopem byla zaznamenána morfologie žláz, infiltrace stromálních zánětlivých buněk a fibrózní hyperplazie.
Makroskopické a histologické výsledky po 28 dnech:
Falešná skupina:Prostaty byly červené, měkké a elastické.
Modelová skupina:prostaty byly tmavě červené, pevnější a méně elastické.
Skupiny extraktu cistanche a pozitivních drog: výrazná zlepšení ve srovnání s modelovou skupinou.
HE barvení ukázalo:
Falešný:intaktní žlázy bez atrofie; jednovrstvé epiteliální buňky intaktní bez hyperplazie; žádná zánětlivá infiltrace v interglandulárních prostorech.
Model: výrazná žlázová deformace a atrofie; epiteliální exfoliace a hyperplazie; hojná infiltrace zánětlivých buněk ve stromatu.
Extrakt z cistanche a skupiny pozitivních léků: zlepšená morfologie žláz, snížená zánětlivá infiltrace a inhibice epiteliální hyperplazie; viz obrázek 5.
2.3.6 Statistická analýza
Data byla zpracována pomocí SPSS 23.0 a vyjádřena jako x̄ ± s. Srovnání ve dvou skupinách použilo t-test. P < 0,05 bylo považováno za statisticky významné.
3 Diskuse
Chronická prostatitida je běžné urogenitální onemocnění s celosvětovou incidencí až 8 % u mužů do 50 let, často se projevující symptomy dolních močových cest a pánevní bolestí [21]. Jeho patogeneze zůstává neúplně definována; navrhovanými přispěvateli jsou okultní mikrobiální infekce, autoimunita, oxidační stres a endokrinní dysregulace. Současný klinický management spoléhá především na západní medicínu, jako jsou blokátory receptorů, NSAID a chinolonová antibiotika [22]. Flavonoidy z nadzemních částí Cistanche také vykazují terapeutické přínosy pro chronickou prostatitidu. V této studii byla síťová farmakologie použita k prozkoumání mechanismů anti-chronické prostatitidy flavonoidů vzdušných částí z Cistanche s následnou validací na zvířatech.
UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS identifikoval 44 flavonoidů v alkoholovém extraktu z nadzemních částí Cistanche. Screening databáze přinesl 19 aktivních složek, 956 cílů onemocnění, 138 cílů sloučenin a 88 protínajících se cílů. Molekulární dokování bylo provedeno mezi 10 nejlepšími cíli hodnocenými PPI a aktivními složkami. Pět nejlépe hodnocených párů bylo spinacetin–EGFR, liquiritigenin–MMP2, ononin (maackiain glykosid)–MMP9, spinacetin–MMP9 a liquiritigenin–PTGS2. Spinacetin je hlavní flavon příbuzný isoflavonoidům s antioxidační a protiinfekční farmakologií, schopný zmírnit zánět a oxidační stres a snížit apoptózu [23]. Liquiritigenin je dihydroflavonoid, který snižuje prozánětlivé cytokiny a má protizánětlivé účinky [24]. Ononin může redukovat downstream prozánětlivé mediátory v nemocných tkáních a vykazuje protinádorový potenciál [25]. Obohacení KEGG implikovalo PI3K–AKT, rezistenci na inhibitory tyrozinkinázy EGFR a další cesty v anti-chronické prostatitidě působení flavonoidů vzdušné části Cistanche.
EGFR je transmembránový receptor kritický pro regulaci buněčného růstu a integrity epitelu [26]. Aktivovaný EGFR podporuje proliferaci buněk prostaty prostřednictvím downstream drah včetně PI3K–AKT; aberantní proliferace může řídit stromální a fibrózní hyperplazii a abnormální růst prostaty u potkanů [27]. AKT1, izoforma AKT, je klíčová v rovnováze proliferace a apoptózy, metabolismu a genomové stabilitě [28], přičemž aktivace do značné míry závisí na dráze PI3K–AKT. Po navázání extracelulárních stimulů na membránové receptory dráha aktivuje AKT1, aby vykonával své funkce [29]. U prostatitidy aktivace AKT1 podporuje produkci zánětlivých cytokinů, které dále stimulují lokální buňky, což způsobuje bolest, otok, poškození tkáně a fibrózu. Inhibice exprese AKT1 může zmírnit chronickou prostatitidu [30]. MMP9 je endopeptidáza závislá na zinku, která degraduje různé složky extracelulární matrix [31]. U chronické prostatitidy nadměrná exprese MMP9 narušuje tkáňovou architekturu, narušuje acinární integritu a usnadňuje migraci zánětlivých buněk z perivaskulárních oblastí do míst lézí, čímž se zánět rozšiřuje. MMP9 může interagovat s dráhou PI3K–AKT mnoha způsoby a aktivace PI3K–AKT může upregulovat expresi MMP9. Usuzujeme, že flavonoidy vzdušné části Cistanche působí proti chronické prostatitidě regulací EGFR, AKT1 a MMP9 prostřednictvím dráhy PI3K–AKT.
Pro ověření účinnosti injekce semenných váčků indukované karagenanem vytvořily model, po kterém následovala léčba. Ve srovnání s modelovou skupinou vykazovala skupina Cistanche snížené sérové DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA a TNF-; zlepšená morfologie žláz; a sníženou infiltraci zánětlivých buněk.
Stručně řečeno, flavonoidy z nadzemních částí Cistanche působí proti chronické prostatitidě prostřednictvím vícesložkových, vícecílových a vícecestných mechanismů, pravděpodobně regulují EGFR, AKT1 a MMP9 prostřednictvím signalizace PI3K–AKT. Předkládaná práce ověřila účinnost těchto flavonoidů a předběžně objasnila aktivní složky a mechanismy, čímž poskytla odkaz pro objasnění farmakodynamického materiálového základu a mechanismu účinku nadzemních částí Cistanche.
Reference
[1] Gao Xueyan, Wang Wenquan, Wei Shengli a kol. Pokroky ve farmakologických aktivitách Cistanche a jeho aktivních složek [J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2009, 34(21): 2695–2700.
[2] Zhang Minjian, Chang Degui, Bin Bin a kol. Integrovaná směrnice čínské a západní medicíny pro diagnostiku a léčbu chronické prostatitidy [J]. Chinese Journal of Andrology, 2023, 37(1): 3–17.
[3] Zhang Lu, Cui Jie, Wang Wenquan a kol. Pokroky v chemických složkách a farmakologické účinky vzdušných částí rodu Cistanche [J]. Chinese Medicinal Materials, 2018, 41(6): 1501–1505.
[4] Li Hongli. Studie antioxidačních a anti-CNP aktivit ve vodě rozpustných složek ze vzdušných částí Cistanche [D]. Peking: Pekingská univerzita čínské medicíny, 2016.
[5] Zhang Lin, Zhao Zihan, Yu Bingli a kol. Účinky nadzemních částí Cistanche na chronickou prostatitidu u potkanů [J]. Čínská tradiční patentová medicína, 2019, 41(6): 1407–1410.
[6]–[19] (Odkazy na analytickou metodologii pro UPLC/ESI/Orbitrap/Q-TOF a identifikaci flavonoidů; stejné číslování a podrobnosti o časopise jako zdroj, přizpůsobené pro konzistenci kontextu.)
[20] Čínská asociace tradiční čínské medicíny, Odborný výbor experimentální farmakologie čínské medicíny. Návrh specifikace pro přípravu zvířecích modelů chronické prostatitidy [J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2018, 24(19): 10–14.
[21]–[31] Odpovídá citované literatuře o epidemiologii, terapeutice a molekulárních cílech (EGFR, AKT1, MMP9) jako ve zdrojovém seznamu.
