4. Materiály a metody

4.1. Přírodní materiál

Semena afrických S. aurea použitá pro tuto studii byla získána ze specializovaného obchodu v Itálii. Sazenice byly vypěstovány v Laboratoři rostlinné biologie a farmaceutické botaniky Univerzity v Cagliari (UNICA). Po 5 týdnech byly umístěny do skleníku "Planta Medica" podle ekofyziologických potřeb druhu. Rostliny byly poté shromážděny po dvou letech růstu v období květu. Nadzemní díly byly ihned umístěny do vzduchové ventilační pece (FD 115, BINDER) až do úplného vysušení (když dosáhly konstantní hmotnosti). Vzor voucheru byl uložen v Herbarium Karalitanum (CAG) Univerzity v Cagliari v Itálii s číslem voucheru (6/23.8/V1).

Glykosid cistanche může také zvýšit aktivitu SOD v srdeční a jaterní tkáni a významně snížit obsah lipofuscinu a MDA v každé tkáni, účinně zachycovat různé reaktivní kyslíkové radikály (OH-, H₂O₂ atd.) a chránit před způsobeným poškozením DNA. OH-radikály. Cystanche fenylethanoidové glykosidy mají silnou schopnost vychytávání volných radikálů, vyšší redukční schopnost než vitamín C, zlepšují aktivitu SOD v suspenzi spermií, snižují obsah MDA a mají určitý ochranný účinek na funkci membrány spermií. Polysacharidy Cistanche mohou zvýšit aktivitu SOD a GSH-Px v erytrocytech a plicních tkáních experimentálně senescentních myší způsobených D-galaktózou, stejně jako snížit obsah MDA a kolagenu v plicích a plazmě a zvýšit obsah elastinu. dobrý čisticí účinek na DPPH, prodlužuje dobu hypoxie u senescentních myší, zlepšuje aktivitu SOD v séru a oddaluje fyziologickou degeneraci plic u experimentálně senescentních myší Experimenty prokázaly, že Cistanche má dobrou antioxidační schopnost s buněčnou morfologickou degenerací a má potenciál být lékem k prevenci a léčbě nemocí stárnutí kůže. Zároveň má echinakosid v Cistanche významnou schopnost vychytávat volné radikály DPPH a má schopnost vychytávat reaktivní formy kyslíku a bránit volnými radikály indukované degradaci kolagenu a má také dobrý opravný účinek na poškození aniontů volnými radikály thyminu.

Klikněte na doplněk Cistanche Tubulosa

【Další informace: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】

4.2. Analýza esenciálních olejů

Esenciální olej byl získán 3 hodinovou hydrodestilací za použití přístroje Clevengerova typu podle pokynů European Pharmacopoeia [89]. Následná analýza plynovou chromatografií s plamenoionizační detekcí (GC-FID) a plynovou chromatografií/hmotnostní spektrometrií (GC-MS) byla provedena podle [13]. Stručně řečeno, pro GC analýzu byla použita kapilární kolona HP 5 s experimentálním postupem 82 minut při různých teplotách, respektive od 60 ◦C do 246 ◦C při rychlosti 3 ◦C/min, která byla poté udržována na 246 ◦C po dobu 20 min. Jako nosný plyn bylo použito helium (čistota větší nebo rovna 99,9999 procentům) při průtoku 1 ml/min. Celkem 1 ul naředěného vzorku (1:100 v n-hexanu, w/w) byl vstříknut autosamplerem s dělicím poměrem 1:20. Pokud jde o podmínky MS, byla použita přenosová linka 240 ◦C, iontový zdroj EI 200 ◦C a kvadrupólová teplota 150 ◦C s ionizační energií 70 eV a 3,2 skenu s-1 při m/z skenu rozsah (od 30 do 480). Software MSD ChemStation (Agilent, rev. E.01.00.237, Santa Clara, CA, USA) byl použit pro správu a zpracování chromatogramů a hmotnostních spekter. Nakonec byly získané sloučeniny identifikovány porovnáním knihoven NIST02 a Adams [37,38]. Výsledky byly dále křížově zkontrolovány porovnáním experimentálního retenčního indexu (RI) sloučenin se semipolárními fázemi, které RI uvádí v literatuře. Experimentální RI byly stanoveny pomocí dvou standardních směsí n-alkanů jako referenčních (C8–C20 a C21–C40) s lineární interpolací [90]. Procenta uváděných složek byla vypočtena na plochách píku GC bez korekce faktoru odezvy FID.

4.3. Antifungální aktivita

Sedm kmenů dermatofytů bylo testováno na antifungální aktivitu S. aurea EO. Z izolace nehtů a kůže byly získány tři klinické kmeny: Epidermophyton floccosum FF9, Trichophyton mentagrophytes FF7 a Microsporum canis FF1. Zatímco zbývající čtyři kmeny dermatofytů patřily do Colección Espanõla de Cultivos Tipo (CECT): T. mentagrophytes var. interdigitální CECT 2958, T. rubrum CECT 2794, T. verrucosum CECT 2992 a M. gypseum CECT 2908. Všechny kmeny byly před každým testem kultivovány v Sabouraud dextrózovém agaru (SDA) nebo bramborovém dextrózovém agaru (PDA), aby byla zajištěna čistota a viabilita.

Minimální inhibiční koncentrace (MIC) a minimální letální koncentrace (MLC) EO byly stanoveny podle modifikací navržených protokolem CLSI pro mikroředění [91]. Stručně, EO byl zředěn v DMSO (5–0,32 µL/ml) a poté přidán do sterilních zkumavek. Inokulum bylo připraveno úpravou zákalu na 0,5 McFarland a poté naředěno v RPMI-1640 bez glutaminu a s 3-(N-morfolino)propansulfonovou kyselinou (MOPS) pH 7.{101} {10}} na koncentraci 1–2 × 104 CFU/ml, která byla poté přidána do zkumavek obsahujících EO. Zkumavky byly poté inkubovány po dobu 7 dnů při 30 °C. Poté byly zkumavky hodnoceny na růst plísní a nejnižší koncentrace, kde nebyl pozorován žádný růst, byla považována za minimální inhibiční koncentraci (MIC). Nejnižší koncentrace, kde nebyl pozorován žádný růst po nanesení negativních zkumavek v SDA po dobu 7 dnů při 30 °C, byla považována za minimální letální koncentraci (MLC). Ke kontrole citlivosti testovaných mikroorganismů byla použita referenční antifungální sloučenina, flukonazol (Pfizer). Výsledky byly získány ze tří nezávislých experimentů provedených v duplikátech a výsledky byly vyjádřeny jako průměr. Byly také zahrnuty negativní a pozitivní kontroly, reprezentované neočkovaným médiem a inokulovaným médiem s maximální koncentrací DMSO (1 procento), v daném pořadí.

4.4. Protizánětlivá aktivita

4.4.1. Buněčná kultura

Buněčná linie myších leukemických makrofágů RAW 264.7, která patřila do American Type Culture Collection (ATCC TIB-71), byla kultivována, jak již dříve naše skupina uvedla [92].

4.4.2. Výroba oxidu dusnatého

Produkce NO byla hodnocena hodnocením koncentrace dusičnanů v kultivačních supernatantech pomocí Griessova činidla [93]. Buňky (0,6 × 106 buněk/jamka) byly kultivovány v 48-jamkových kultivačních destičkách. Makrofágy byly stabilizovány přes noc, poté byly po dobu 1 hodiny předem ošetřeny EO (0,08–1,25 µL/ml) zředěným v DMSO a následně aktivovány 50 ng/ml LPS po dobu 24 hodin. LPS-stimulované makrofágy a neošetřené makrofágy byly použity jako pozitivní a negativní kontroly, v daném pořadí. Griessova reakce byla provedena tak, jak bylo dříve popsáno v naší skupině [92]. Naše skupina již prokázala, že DMSO v nejvyšší použité koncentraci (0,4 procenta) nemá protizánětlivou nebo cytotoxickou aktivitu (data neuvedena).

4.4.3. Exprese prozánětlivých proteinů, iNOS a COX-2 

Buňky RAW 264.7 (1,2 x 106 buněk/jamka) byly kultivovány v 6-jamkových destičkách a stabilizovány přes noc. Poté byly tyto buňky podrobeny 1 hodinové inkubaci s EO v koncentraci 1,25 ul/ml, následované 24 hodinovou aktivací LPS (50 ng/ml). Negativní kontrola byla tvořena neošetřenými buňkami a pozitivní kontrola byla tvořena pouze buňkami ošetřenými LPS. Příprava buněčných lyzátů se řídila protokolem, který dříve provedli Zuzarte et al. [92]

Obsah indukovatelné syntázy oxidu dusnatého (iNOS) a cyklooxygenázy {{0}} (COX-2) byl hodnocen analýzou Western blot, jak bylo popsáno dříve [13]. Pro separaci proteinů byl proveden elektroforetický běh s 10% (v/v) SDS-polyakrylamidovými gely při 130 V po dobu 1,5 hodiny. Proteinové linie byly následně blotovány na polyvinylidenfluoridové membrány (předtím aktivované methanolem) při 400 mA po dobu 3 hodin. Membrány byly poté inkubovány po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti s nespecifickými IgG s 5 procenty (w/v) odstředěného mléka v TBS-T. Dále byly inkubovány přes noc při 4 ◦C se specifickými protilátkami anti-iNOS (1:500; R & D Systems) nebo anti-COX-2 (1:5000; Abcam, Cambridge, UK) . Nakonec byly promyty po dobu 30 minut pomocí TBS-T (10 minut, 3krát) a inkubovány po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti se sekundárními protilátkami (1:40,000; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA ) konjugovaný s křenovou peroxidázou. Detekce imunokomplexů byla provedena pomocí chemiluminiscenčního skeneru (Image Quant LAS 500, GE, Boston, MA, USA). Protilátky proti tubulinu (1:20 000; Sigma, St. Louis, MO, USA) byly použity jako kontrola nanášení. Pro kvantifikaci proteinů byl použit software ImageLab verze 6.1.0 (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, USA).

4.5. Buněčná migrace

Buněčná linie myších embryonálních fibroblastů NIH 3T3 (ATCC CRL-1658) byla kultivována, jak bylo dříve popsáno v [6].

4.5.2. Test buněčné migrace

Buněčná migrace byla prováděna za použití testu na škrábnutí podle Martinotti et al. [94] s mírnými úpravami, jak bylo uvedeno dříve [13]. Stručně, NIH 3T3 fibroblasty byly naočkovány v množství 2,5 x 105 buněk/ml a ponechány, aby dosáhly konfluence. Poté byla rána zasažena špičkou pipety o objemu 200 ul a neadherentní buňky byly odstraněny promytím PBS pH 7,4. DMEM s 2 procenty FBS s nebo bez přidání EO (1,25 ul/ml). Snímky byly pořízeny 0, 12 a 18 hodin po poškrábání pomocí mikroskopu s fázovým kontrastem a oblast poranění byla měřena pomocí softwaru ImageJ/Fiji. Prezentované výsledky byly získány pomocí následující rovnice:

4.6. Životaschopnost buněk

Účinek různých koncentrací EO na životaschopnost makrofágů a fibroblastů byl hodnocen pomocí testu redukce resazurinu, jak bylo dříve popsáno [6].

4.7. Senescence indukovaná etoposidy

Senescence byla hodnocena pomocí etoposidu jako induktoru stárnutí, jak je uvedeno jinde [95], s určitými modifikacemi. Stručně, po 24 hodinách etoposidu byly buňky dále inkubovány po dobu 72 hodin v přítomnosti nebo nepřítomnosti (CT) S. aurea EO. Beta-galaktosidáza byla hodnocena pomocí komerčně dostupné soupravy podle protokolu výrobce (#9860, Cell Signaling Technology Inc., Danvers, MA, USA). Zřetelné modré zbarvení indikuje aktivitu beta-galaktosidázy. Po vyvolání barev byly jamky vyfotografovány pro následnou obrazovou analýzu. Software ImageJ byl použit pro kvantitativní analýzu stanovením procenta senescentních buněk.

4.8. Statistická analýza 

Experimenty byly provedeny alespoň v duplikátech pro tři nezávislé experimenty. Průměrné hodnoty ± SEM (standardní chyba průměru) jsou uvedeny ve výsledcích. Statistická významnost pro protizánětlivé testy, testy buněčné životaschopnosti a stárnutí byly hodnoceny jednosměrnou analýzou rozptylu (ANOVA) a Dunnettovým post hoc testem pomocí GraphPad Prism verze 9.3.0 (GraphPad Software, San Diego, CA , USA). Zatímco statistická významnost pro testy buněčné migrace byla hodnocena pomocí dvoucestné ANOVA následované Sydákovým vícenásobným srovnávacím testem, hodnoty p < 0,05 byly akceptovány jako statisticky významné.

5. Závěry

Tato práce posiluje příznivé účinky obvykle připisované Salvia spp. potvrzením některých tradičních použití připisovaných S. aurea. Kromě toho bylo popsáno jedinečné chemické složení s 1,8 cineolem, -pinenem, cis-thujonem, kafrem, (E)-karyofylenem, trans-thujonem, -pinenem, kamfenem a -humulenem jako hlavními sloučeninami. Zde uvádíme, že EO má antifungální, protizánětlivé účinky a účinky na hojení ran, čímž potvrzujeme tradiční použití spojená s tímto druhem pro léčbu kožních infekcí, onemocnění souvisejících se zánětem a ran.

Kromě toho tato studie poprvé uvádí, že tento druh byl schopen vykazovat antisenescenční účinky, čímž dále podpořil zájem o tento druh. Tyto výsledky proto zdůrazňují úlohu S. aurea při zmírňování zánětu a infekcí souvisejících s kůží, čímž posilují zájem o dermokosmetiku. I když tato studie ukázala, že produkci vysoce hodnotných metabolitů s relevantními biologickými aktivitami lze podpořit kultivací, je nezbytná přesná chemická analýza pěstované rostliny s ohledem na extrémní variabilitu chemického profilu v důsledku genetických a environmentálních faktorů. (stres, vlastnosti půdy, období sklizně).

Příspěvky autora:LS a AM; validace, DM, EC, MJG, MTC a SP; formální analýza, JMA-S., MJG a AP; vyšetřování, JMA-S., AM a AP; zdroje, AM, MTC a LS; správa dat, AP; psaní – příprava původního návrhu, EC, DM, JMA-S., AP a AM; psaní – recenze a editace, EC, DM, MTC, LS a AM; vizualizace, JMA-S.; supervize, LS a AM; administrace projektu, LS; získávání finančních prostředků, LS a MTC Všichni autoři si přečetli publikovanou verzi rukopisu a souhlasili s ní.

Financování: Tato práce byla financována z operačního programu COMPETE 2020 – Operační program pro konkurenceschopnost a internacionalizaci a portugalských národních fondů prostřednictvím FCT – Fundação para a Ciência ea Tecnologia v rámci projektů UIDB/04539/2020, UIDP/04539/2020 a LA/P 2020.

Poděkování: Autoři vděčně oceňují cenný příspěvek Daniely Standen, The International Study and Language Institute (The University of Reading, UK, d.standen@reading.ac.uk) za technickou podporu.

Reference

1. Kaur, N.; Ahmed, T. Bioaktivní sekundární metabolity léčivých a aromatických rostlin a jejich vlastnosti v boji proti chorobám. V léčivých a aromatických rostlinách; Springer Nature: Basingstoke, Spojené království, 2021; s. 113–142. ISBN 978-3-030-58974-5.

2. Pinto, E.; Pina-Vaz, C.; Salgueiro, L.; Gonçalves, MJ; Costa-De-Oliveira, S.; Cavaleiro, C.; Palmeira, A.; Rodrigues, A.; Martinez-De-Oliveira, J. Antifungální aktivita esenciálního oleje Thymus pulegioides na druhy Candida, Aspergillus a dermatofyty. J. Med. Microbiol. 2006, 55, 1367–1373. [CrossRef]

3. Santos, EL; Freitas, PR; Araújo, ACJ; Almeida, RS; Tintino, SR; Paulo, CLR; Silva, ACA; Silva, LE; do Amaral, W.; Deschamps, C.; a kol. Zvýšený antibakteriální účinek antibiotik esenciálním olejem z Aloysia gratissima (Gillies & Hook.) Tronc. a jeho hlavní složkou beta-karyofylen. Phytomedicine Plus 2021, 1, 100100. [CrossRef]

4. Edris, AE Farmaceutický a terapeutický potenciál esenciálních olejů a jejich těkavých složek: Přehled. Phytother. Res. 2007, 21, 308–323. [CrossRef]

5. Ghorbani, A.; Esmaeilizadeh, M. Farmakologické vlastnosti Salvia Officinalis a jejích složek. J. Tradit. Doplněk. Med. 2017, 7, 433–440. [CrossRef]

6. Piras, A.; Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Silva, A.; Cruz, MT; Salgueiro, L.; Maxia, A. Chemické složení a biologická aktivita silice Teucrium sodium L. subsp. kardioidy (Schreb.) Arcang. (Lamiaceae) z ostrova Sardinie (Itálie). Nat. Prod. Res. 2022, 36, 5828–5835. [CrossRef]

7. Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Salgueiro, L.; Maxia, A. Antifungální aktivita a chemické složení silice z nadzemních částí dvou nových chemotypů Teucrium capitatum L. z ostrova Sardinie, Itálie. Nat. Prod. Res. 2020, 35, 6007–6013. [CrossRef]

8. Piras, A.; Porcedda, S.; Falconieri, D.; Maxia, A.; Gonçalves, M.; Cavaleiro, C.; Gonc¸alves, MJ; Salgueiro, L. Antifungální aktivita esenciálního oleje z Mentha spicata L. a Mentha pulegium L. rostoucí volně na ostrově Sardinie (Itálie). Nat. Prod. Res. 2021, 35, 993–999. [CrossRef]

9. Walker, JB; Sytsma, KJ Staminální evoluce v rodu Salvia (Lamiaceae): Molekulární fylogenetický důkaz pro mnohočetný původ staminální páky. Ann. Bot. 2007, 100, 375–391. [CrossRef]

10. Waller, SB; Cleff, MB; Serra, EF; Silva, AL; dos Reis Gomes, A.; de Mello, JRB; de Faria, RO; Meireles, MCA Rostliny z čeledi Lamiaceae jako zdroj antifungálních molekul v humánní a veterinární medicíně. Microb. Patog. 2017, 104, 232–237. [CrossRef]

11. Cocco, E.; Maccioni, D.; Sanjust, E.; Falconieri, D.; Farris, E.; Maxia, A. Etnofarmakobotanika a diverzita středomořských endemických rostlin v podoblasti Marmilla, Sardinie, Itálie. Rostliny 2022, 11, 3165. [CrossRef]

12. Afonso, AF; Pereira, OR; Fernandes, A.; Calhelha, RC; Silva, AMS; Ferreira, RCF; Cardoso, SM Fytochemické složení a bioaktivní účinky vodních extraktů Salvia africana, Salvia Officinalis "Icterina" a Salvia mexicana. Molekuly 2019, 24, 4327. [CrossRef]

13. Alves-Silva, JM; Cocco, E.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Silva, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Cruz, MT; Maxia, A.; Salgueiro, L. Odhalení chemického složení a biologických vlastností Salvia cacaliifolia Benth. esenciální olej. Rostliny 2023, 12, 359. [CrossRef]

14. Nkomo, MM; Katerere, DD; Vismer, HH; Cruz, TT; Balayssac, SS; Malet-Martino, MM; Makunga, NN Inhibice Fusarium divokými populacemi léčivé rostliny Salvia africana-lutea L. spojená s metabolomickým profilováním. Doplněk BMC. Alternativní. Med. 2014, 14, 99. [CrossRef]

15. Codd, LE Flóra jižní Afriky: Část. 4 Lamiaceae; Botanický výzkumný ústav: Pretoria, Jižní Afrika, 1985; Svazek 28, ISBN 0621082686.

16. Makunga, NP; Van Staden, J. Účinný systém pro produkci klonálních rostlinek lékařsky významné aromatické rostliny: Salvia africana-lutea L. Plant Cell Tissue Organ Cult. 2007, 92, 63–72. [CrossRef]

17. Aston Philander, L. Etnobotanika keřové medicíny Rasta Western Cape. J. Ethnopharmacol. 2011, 138, 578–594. [CrossRef]

18. Watt, JM; Breyer-Brandwijk, MG Léčivé a jedovaté rostliny jižní a východní Afriky: vysvětlení jejich léčebného a jiného využití, chemického složení, farmakologických účinků a toxikologie u člověka a zvířat; E. & S. Livingstone: Edinburgh, Spojené království, 1962.

19. Gupta, AK; Cooper, EA Aktualizace v antimykotické léčbě dermatofytózy. Mycopathologia 2008, 166, 353–367. [CrossRef]

20. Matiz, C.; Friedlander, SF Infekce podkožní tkáně a abscesy. In Principy a praxe dětských infekčních nemocí; Elsevier: Amsterdam, Nizozemsko, 2012; s. 454–462.e2. [CrossRef]

21. De Oliveira, CB; Vasconcellos, C.; Sakai-Valente, NY; Sotto, MN; Luiz, FG; Belda Júnior, W.; Sousa, M. da GT de; Benard, G.; Criado, PR Toll-like receptors (TLR) 2 a 4 exprese keratinocytů od pacientů s lokalizovanou a diseminovanou dermatofytózou. Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo 2015, 57, 57–61. [CrossRef]

22. Celestrino, GA; Reis, APC; Criado, PR; Benard, G.; Sousa, MGT Trichophyton rubrum vyvolává fagocytární a prozánětlivé reakce v lidských monocytech prostřednictvím Toll-like receptoru 2. Přední strana. Microbiol. 2019, 10, 2589. [CrossRef]

23. Sun, S.-C. Nekanonická dráha NF-B v imunitě a zánětu. Nat. Rev. Immunol. 2017, 17, 545–558. [CrossRef]

24. Rao, KMK Molekulární mechanismy regulující expresi inos v různých typech buněk. J. Toxicol. Environ. Zdraví část B 2000, 3, 27–58. [CrossRef]

25. Minghetti, L. Cyklooxygenáza-2 (COX-2) u zánětlivých a degenerativních onemocnění mozku. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 2004, 63, 901–910. [CrossRef]

26. Sharma, A.; Gupta, S. Ochranný projev herbonanoceutik jako antimykotik: Možný lékový kandidát na dermatofytickou infekci. Health Sci. Rep. 2022, 5, e775. [CrossRef]

27. Guo, S.; DiPietro, LA Faktory ovlivňující hojení ran. J. Dent. Res. 2010, 89, 219–229. [CrossRef]

28. Zuzarte, M.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Canhoto, J.; Vale-Silva, L.; Silva, MJ; Pinto, E.; Salgueiro, L. Chemické složení a protiplísňová aktivita esenciálních olejů Lavandula viridis LHér. J. Med. Microbiol. 2011, 60, 612–618. [CrossRef]

29. Martinez-Rossi, NM; Bitencourt, TA; Peres, NTA; Lang, EAS; Gomes, EV; Quaresemin, NR; Martins, poslanec; Lopes, L.; Rossi, A. Rezistence dermatofytů k antimykotikům: Mechanismy a prospekt. Přední. Microbiol. 2018, 9, 1108. [CrossRef]

30. Mourad, A.; Perfektní, JR Válka proti kryptokokóze: Přehled antifungálního arzenálu. Mem. Inst. Oswaldo Cruz 2018, 113, 7. [CrossRef]

31. Vonkeman, ON; van de Laar, MAFJ Nesteroidní protizánětlivé léky: Nežádoucí účinky a jejich prevence. Semin. Arthritis Rheum. 2010, 39, 294–312. [CrossRef]

32. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Viljoen, AM Sezónní variace ve složení esenciálních olejů, toxicitě oleje a biologické aktivitě rozpouštědlových extraktů tří druhů šalvěje jihoafrické. S. Afr. J. Bot. 2008, 74, 230–237. [CrossRef]

33. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Viljoen, AM; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Tilney, PM; Barroso, JG Chemické složení, typy listových trichomů a biologické aktivity esenciálních olejů čtyř příbuzných druhů šalvěje pocházejících z jižní Afriky. J. Essent. Oil Res. 2006, 18, 72–79. [CrossRef]

34. Najar, B.; Mecacci, G.; Nardi, V.; Cervelli, C.; Nardoni, S.; Mancini, F.; Ebani, VV; Giannecchini, S.; Pistelli, L. Těkavé látky a antifungální-antibakteriální-antivirová aktivita jihoafrické Salvia spp. esenciální oleje pěstované v jednotných podmínkách. Molekuly 2021, 26, 2826. [CrossRef]

35. Cowling, RM; Rundel, PW; Lamont, BB; Arroyo, MK; Arianoutsou, M. Rostlinná diverzita ve středomořských klimatických oblastech. Trends Ecol. Evol. 1996, 11, 362–366. [CrossRef]

36. Médail, F. Ekosystémy: Středomoří. In Encyklopedie ekologie, svazek 3; Elservier Inc.: Oxford, Spojené království, 2008; Svazek 5, s. 2296–2308.

37. Adams, RP Identification of Essential Oil Components by Gas Chromatography/Quadrupol Mass Spectrometry, 4. vydání; Allured Publishing Corporation: Carol Stream, IL, USA, 2007.

38. Národní institut pro standardy a technologii Mass Spectral Library (NIST/EPA/NIH).

39. Guijarro-Muñoz, I.; Compte, M.; Álvarez-Cienfuegos, A.; Álvarez-Vallina, L.; Sanz, L. Lipopolysacharid aktivuje signální dráhu NF-KB zprostředkovanou Toll-like Receptor 4 (TLR4) a prozánětlivou odpověď v lidských pericytech. J. Biol. Chem. 2014, 289, 2457–2468. [CrossRef]

40. Manning, J.; Goldblatt, P. Rostliny floristické oblasti Velkého Kapska. 1: The Core Cape Flora; Jihoafrický národní institut biologické rozmanitosti: Pretoria, Jižní Afrika, 2012; ISBN 1919976744.

41. Lim Ah Tock, MJ; Kamatou, GPP; Combrinck, S.; Sandasi, M.; Viljoen, AM Chemometrické hodnocení variace esenciálního oleje tří druhů Salvia pocházejících z Jižní Afriky. Fytochemie 2020, 172, 112249. [CrossRef]

42. Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF; Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF Chemické složení a farmakologické vlastnosti esenciálního oleje. In Esenciální oleje—Oils of Nature; El-Shemy, H., Ed.; IntechOpen: Londýn, Spojené království, 2020; s. 13–36. ISBN 978-1-78984-641-6.

43. Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Scheffer, JJC Faktory ovlivňující produkci sekundárních metabolitů v rostlinách: Těkavé složky a esenciální oleje. Příchuť. Fragr. J. 2008, 23, 213–226. [CrossRef]

44. van Vuuren, S.; Ramburrun, S.; Kamatou, G.; Viljoen, A. Domorodé jihoafrické esenciální oleje jako potenciální antimikrobiální látky k léčbě zápachu nohou (bromodóza). S. Afr. J. Bot. 2019, 126, 354–361. [CrossRef]

45. Scott, G.; Springfield, EP; Coldrey, N. Farmakognostická studie 26 jihoafrických rostlinných druhů používaných jako tradiční léky. Pharm Biol. 2004, 42, 186–213. [CrossRef]

46. ​​Oosthuizen, CB; Gasa, N.; Hamilton, CJ; Lall, N. Inhibice mykothiol disulfid reduktázy a mykobakteriálního biofilmu vybranými jihoafrickými rostlinami. S. Afr. J. Bot. 2019, 120, 291–297. [CrossRef]

47. Alves, M.; Gonçalves, MJ; Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Cavaleiro, C.; Cruz, MT; Salgueiro, L. Odhalení antifungálního potenciálu dvou esenciálních olejů tymiánu iberského: Účinek na zárodečnou trubici C. albicans a provedené biofilmy. Přední. Pharmacol. 2019, 10, 446. [CrossRef]

48. Shukla, R.; Singh, P.; Prakash, B.; Dubey, NK Antifungální, aflatoxinová inhibice a antioxidační aktivita esenciálního oleje Callistemon lanceolatus (Sm.) Sweet a jeho hlavní složka 1,8-cineol proti houbovým izolátům ze semen cizrny. Kontrola potravin 2012, 25, 27–33. [CrossRef]

49. Yu, D.; Wang, J.; Shao, X.; Xu, F.; Wang, H. Antifungální způsoby účinku oleje z čajovníku a jeho dvou charakteristických složek proti Botrytis cinerea. J. Appl. Microbiol. 2015, 119, 1253–1262. [CrossRef]

50. Morcia, C.; Malnati, M.; Terzi, V. In vitro antifungální aktivita terpinen{1}}olu, eugenolu, karvonu, 1,{3}}cineolu (eukalyptolu) a thymolu proti mykotoxigenním rostlinným patogenům. Potravinový doplněk. Contam. Část A 2011, 29, 415–422. [CrossRef]

51. Kim, H.-M.; Kwon, H.; Kim, K.; Lee, S.-E. Antifungální a anti-aflatoxigenní aktivity 1,8-cineolu a t-cinnamaldehydu na Aspergillus afflatus. Appl. Sci. 2018, 8, 1655. [CrossRef]

52. da Silva, AČR; Lopes, PM; de Azevedo, MMB; Costa, DCM; Alviano, CS; Alviano, DS Biologické aktivity a-pinenových a -pinenových enantiomerů. Molekuly 2012, 17, 6305–6316. [CrossRef]

53. Jang, S.-K.; Lee, S.-Y.; Kim, S.-H.; Hong, C.-Y.; Park, M.-J.; Choi, I.-G. Antifungální aktivity esenciálních olejů ze šesti jehličnanů proti Aspergillus fumigatus. J. Korean Wood Sci. Technol. 2012, 40, 133–140. [CrossRef]

54. de Macêdo Andrade, AC; Rosalen, PL; Freires, IA; Scotti, L.; Scotti, MT; Aquino, SG; de Castro, RD Antifungální aktivita, způsob účinku, předpověď dokování a antibiofilmové účinky (plus)- -pinenových enantiomerů proti Candida spp. Curr. Horní. Med. Chem. 2018, 18, 2481–2490. [CrossRef]

55. Shin, S. Antifungální aktivity esenciálních olejů z Glehnia littoralis samostatně a v kombinaci s ketokonazolem. Nat. Prod. Sci. 2005, 11, 92–96.

56. Iraji, A.; Yazdanpanah, S.; Alizadeh, F.; Mirzamohammadi, S.; Ghasemi, Y.; Pakshir, K.; Yang, Y.; Zomorodian, K. Screening antifungálních aktivit monoterpenů a jejich izomerů proti druhům Candida. J. Appl. Microbiol. 2020, 129, 1541–1551. [CrossRef]

57. Jaafar, M.; Mitri, S.; Na'was, T. Inhibice růstu gramnegativních bakterií a tvorby biofilmu pomocí alfa thujonu. IOSR J. Pharm. Biol. Sci. 2018, 13, 2. [CrossRef]

58. Teker, T.; Sefer, Ö.; Gazda ˘glı, A.; Yörük, E.; Varol, G.˙I.; Albayrak, G. -thujon vykazuje antifungální aktivitu proti F. graminearum indukcí oxidačního stresu, apoptózy, epigenetických změn a snížené syntézy toxinů. Eur. J. Plant Pathol. 2021, 160, 611–622. [CrossRef]

59. Huo, H.; Gu, Y.; Cao, Y.; Liu, N.; Jia, P.; Kong, W. Antifungální aktivita kafru proti čtyřem fytopatogenům Fusarium. S. Afr. J. Bot. 2022, 148, 437–445. [CrossRef]

60. Wu, K.; Lin, Y.; Chai, X.; Duan, X.; Zhao, X.; Chun, C. Mechanismy antibakteriálního působení esenciálního oleje z Cinnamomum camphora var. linaloofera Fujita proti Escherichia coli. Food Sci. Nutr. 2019, 7, 2546–2555. [CrossRef]

61. Magiatis, P.; Skaltsounis, A.-L.; Chinou, I.; Haroutounian, SA Chemické složení a in vitro antimikrobiální aktivita esenciálních olejů tří řeckých druhů Achillea. Z. Für Nat. C 2002, 57, 287–290. [CrossRef] [PubMed]

62. Dahham, S.; Tabana, Y.; Iqbal, M.; Ahamed, M.; Ezzat, M.; Majid, A.; Majid, A. Protirakovinné, antioxidační a antimikrobiální vlastnosti seskviterpenu-karyofylenu z esenciálního oleje Aquilaria crassna. Molekuly 2015, 20, 11808–11829. [CrossRef]

63. Pieri, FA; de Castro Souza, MC; Vermelho, LLR; Vermelho, MLR; Perciano, PG; Vargas, FS; Borges, APB; da Veiga-Junior, VF; Moreira, MAS Použití -karyofylenu k boji proti tvorbě bakteriálního zubního plaku u psů. BMC Vet. Res. 2016, 12, 216. [CrossRef]

64. Goren, AC; Piozzi, F.; Akceček, E.; Kılıç, T.; Çarıkçı, S.; Mozio ˘glu, E.; Setzer, WN Složení esenciálních olejů dvaceti dvou druhů Stachys (horský čaj) a jejich biologické aktivity. Phytochem. Lett. 2011, 4, 448–453. [CrossRef]

65. Yadav, N.; Chandra, H. Potlačení zánětlivých a infekčních reakcí v plicních makrofázích eukalyptovým olejem a jeho složkou 1,8-cineol: Role receptorů pro rozpoznávání vzorů TREM-1 a NLRP3, regulátor MAP kinázy MKP{{5 }} a NFκB. PLoS ONE 2017, 12, e0188232. [CrossRef]

66. Pivo, AM; Zagorčev, P.; Filipová, DM; Lukanov, J. Účinky 1,8-cineolu na aktivitu cyklooxygenázy a izoforem cyklooxygenázy 1 a cyklooxygenázy 2. Nat. Prod. Chem. Res. 2017, 5, 1000253. [CrossRef]

67. Bastos, VPD; Gomes, AS; Lima, FJB; Brito, TS; Soares, PMG; Pinho, JPM; Silva, CS; Santos, AA; Souza, MHLP; Magalhães, PJC inhaloval 1,8-cineol snižuje zánětlivé parametry v dýchacích cestách u morčat infikovaných ovalbuminem. Základní. Clin. Pharmacol. Toxicol. 2011, 108, 34–39. [CrossRef]

68. Juergens, LJ; Racké, K.; Tuleta, I.; Stoeber, M.; Juergens, UR Protizánětlivé účinky 1,8-cineolu (eukalyptolu) zlepšují účinky glukokortikoidů in vitro: Nový přístup k doplňkové léčbě CHOPN a astmatu šetřící steroidy? Synergie 2017, 5, 1–8. [CrossRef]

69. Santos, FA; Rao, VSN Protizánětlivé a antinociceptivní účinky 1,8-cineolu, terpenoidního oxidu přítomného v mnoha rostlinných esenciálních olejích. Phytother. Res. 2000, 14, 240–244. [CrossRef]

70. Mohammed, HA; Mohammed, SAA; Khan, O.; Ali, HM Topická eukalyptolová mast urychluje hojení ran a má antioxidační a protizánětlivé účinky u modelu popálení kůže u potkanů. J. Oleo Sci. 2022, 71, ess22214. [CrossRef]

71. Juergens, UR; Dethlefsen, U.; Steinkamp, ​​G.; Gillissen, A.; Regges, R.; Vetter, H. Protizánětlivá aktivita 1.8-cineolu (eukalyptolu) u bronchiálního astmatu: dvojitě zaslepená placebem kontrolovaná studie. Respir. Med. 2003, 97, 250–256. [CrossRef]

72. Lima, PR; de Melo, TS; Carvalho, KMMB; de Oliveira, Í.B.; Arruda, BR; de Castro Brito, GA; Rao, VS; Santos, FA 1,8-cineol (eukalyptol) zlepšuje ceruleinem indukovanou akutní pankreatitidu prostřednictvím modulace cytokinů, oxidačního stresu a aktivity NF-κB u myší. Life Sci. 2013, 92, 1195–1201. [CrossRef]

73. Coté, H.; Boucher, M.-A.; Pichette, A.; Legault, J. Protizánětlivé, antioxidační, antibiotické a cytotoxické aktivity Tanacetum vulgare l. esenciální olej a jeho složky. Léky 2017, 4, 34. [CrossRef]

74. Rufino, AT; Ribeiro, M.; Jidáš, F.; Salgueiro, L.; Lopes, MC; Cavaleiro, C.; Mendes, AF Protizánětlivá a chondroprotektivní aktivita (plus)- -pinenu: Strukturní a enantiomerní selektivita. J. Nat. Prod. 2014, 77, 264–269. [CrossRef]

75. Schepetkin, IA; Kushnarenko, SV; Özek, G.; Kirpotina, LN; Utegenová, GA; Kotukhov, YA; Danilová, AN; Özek, T.; Bašer, KHC; Quinn, MT Inhibice reakcí lidských neutrofilů esenciálním olejem z Artemisia kotuchovii a jeho složkami. J. Agric. Food Chem. 2015, 63, 4999–5007. [CrossRef]

76. dos Santos, E.; Leitão, MM; Aguero Ito, CN; Silva-Filho, SE; Arena, AC; de Souza Silva-Comar, FM; Nakamura Cuman, RK; Oliveira, RJ; Nazari Formagio, AS; Leite Kassuya, CA Analgetické a protizánětlivé kloubní účinky esenciálního oleje a kafru izolovaného z listů Ocimum kilimandscharicum Gürke. J. Ethnopharmacol. 2021, 269, 113697. [CrossRef]

77. Adhikari, A.; Bhandari, S.; Pandey, DP Protizánětlivé sloučeniny kafr a methylsalicylát z tradičně používané rostliny na léčbu bolesti Equisetum arvense LJ Nepal Chem. Soc. 2019, 40, 1–4. [CrossRef]

78. Silva-Filho, S.; de Souza Silva-Comar, F.; Wiirzler, L.; do Pinho, R.; Greenspan, R.; Bersani-Amado, C.; Cuman, R. Vliv kafru na chování leukocytů in vitro a in vivo při akutní zánětlivé reakci. Trop. J. Pharm. Res. 2015, 13, 2031. [CrossRef]

79. Cho, JY; Chang, H.-J.; Lee, S.-K.; Kim, H.-J.; Hwang, J.-K.; Chun, HS Zlepšení kolitidy vyvolané dextransulfátem sodným u myší perorálním podáním -karyofylenu, seskviterpenu. Life Sci. 2007, 80, 932–939. [CrossRef]

80. Gushiken, LFS; Beserra, FP; Hussní, MF; Gonzaga, MT; Ribeiro, VP; de Souza, PF; Campos, JCL; Massaro, TNC; Hussni, CA; Takahira, RK; a kol. Beta-karyofylen jako antioxidant, protizánětlivá a reepitelizační aktivita v modelu excize rány krysy. Oxid. Med. Cell Longev. 2022, 2022, 1.–21. [CrossRef]

81. Brito, LF; Oliveira, HBM; Neves Selis, N.; Souza, CLS; Júnior, MNS; Souza, EP; da Silva, LSC; Souza Nascimento, F.; Amorim, AT; Campos, GB; a kol. Protizánětlivá aktivita -karyofylenu kombinovaného s kyselinou dokosahexaenovou v modelu sepse vyvolané Staphylococcus aureus u myší. J. Sci. Food Agric. 2019, 99, 5870–5880. [CrossRef]

82. Sousa, LFB; Oliveira, HBM; das Neves Selis, N.; Morbeck, LLB; Santos, TC; da Silva, LSC; Viana, JCS; Reis, MM; Sam patio, BA; Campos, GB; a kol. -karyofylen a kyselina dokosahexaenová, izolované nebo spojené, mají potenciální antinociceptivní a protizánětlivé účinky in vitro a in vivo. Sci. Rep. 2022, 12, 19199. [CrossRef]

83. Scandiffio, R.; Geddo, F.; Cottone, E.; Querio, G.; Antoniotti, S.; Gallo, MP; Maffei, ME; Bovolin, P. Ochranné účinky (e)- -karyofylenu (bcp) při chronickém zánětu. Živiny 2020, 12, 3273. [CrossRef]

84. Salas-Oropeza, J.; Jimenez-Estrada, M.; Perez-Torres, A.; Castell-Rodriguez, AE; Becerril-Millan, R.; Rodriguez-Monroy, MA; Jarquin-Yañez, K.; Canales-Martinez, MM Aktivita -pinenu a -felandrenu při hojení ran. Molekuly 2021, 26, 2488. [CrossRef]

85. Rocha Caldas, GF; da Silva Oliveira, AR; Araújo, AV; Lafayette, SSL; Albuquerque, GS; da Costa Silva-Neto, J.; Costa-Silva, JH; Ferreira, F.; da Costa, JGM; Wanderley, AG Gastroprotektivní mechanismy monoterpenu 1,8-cineolu (eukalyptolu). PLoS ONE 2015, 10, e0134558. [CrossRef]

86. Chabane, S.; Boudjelal, A.; Napoli, E.; Benkhaled, A.; Ruberto, G. Fytochemické složení, antioxidační a hojení ran Teucrium polium subsp. capitatum (L.) Briq. esenciální olej. J. Essent. Oil Res. 2021, 33, 143–151. [CrossRef]

87. Tran, TA; Ho, MT; Píseň, YW; Cho, M.; Cho, SK Camphor indukuje proliferační a anti-senescenční aktivity v lidských primárních dermálních fibroblastech a inhibuje tvorbu vrásek vyvolanou UV zářením v kůži myší. Phytother. Res. 2015, 29, 1917–1925. [CrossRef]

88. Rodenak-Kladniew, B.; Castro, A.; Stärkel, P.; Galle, M.; Crespo, R. 1,8-Cineole podporuje zastavení buněčného cyklu G0/G1 a stárnutí vyvolané oxidačním stresem u buněk HepG2 a senzibilizuje buňky na léky proti stárnutí. Life Sci. 2020, 243, 117271. [CrossRef]

89. Ředitelství pro kvalitu léčiv a zdravotní péče Rady Evropy. Evropský lékopis; EDQM: Štrasburk, Francie, 2010; ISBN 978-92-871-6700-2.

90. Van den Dool, H.; Kratz, PD Zobecnění systému retenčního indexu včetně lineární teplotně programované rozdělovací chromatografie plyn-kapalina. J. Chromatogr. 1963, 11, 463–471. [CrossRef]

91. Ústav klinických a laboratorních standardů CLSI. Referenční metoda pro testování antifungální citlivosti vláknitých hub na ředění bujónu. CLSI dokument M38-A2, schválený standard, 2. vydání; Institut pro klinické a laboratorní standardy: Wayne, PA, USA, 2008; Svazek 28, ISBN 1-56238-668-9.

92. Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Alves, M.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L.; Cruz, MT Nové poznatky o protizánětlivém potenciálu a bezpečnostním profilu esenciálních olejů Thymus carnosus a Thymus camphoratus a jejich hlavních sloučenin. J. Ethnopharmacol. 2018, 225, 10–17. [CrossRef]

93. Green, LC; Wagner, DA; Glogowski, J.; Kapitán, PL; Wishnok, JS; Tannenbaum, SR Analýza dusičnanů, dusitanů a [15N] dusičnanů v biologických tekutinách. Anální. Biochem. 1982, 126, 131–138. [CrossRef]

94. Martinotti, S.; Ranzato, E. Test hojení ran po poškrábání. In Epidermal Cells: Methods in Molecular Biology; Turksen, K., Ed.; Humana: New York, NY, USA, 2019; Ročník 2109, s. 225–229. [CrossRef]

95. Moreira, P.; Sousa, FJ; Matoš, P.; Brites, GS; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Figueirinha, A.; Salgueiro, L.; Batista, MT; Branco, PC; a kol. Chemické složení a účinek proti kožním alteracím bioaktivních extraktů získaných hydrodestilací listů Eucalyptus globulus. Pharmaceutics 2022, 14, 561. [CrossRef]

【Další informace: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】