Ultrazvuková extrakce polysacharidů z Cistanche Tubulosa: Optimalizace procesu, izolace frakcí, strukturní charakterizace a účinky proti únavě

 

Abstraktní:Cílem této studie bylo optimalizovat proces extrakce polysacharidů (CP) Cistanche tubulosa a prozkoumat jejich strukturální vlastnosti a účinky proti únavě. Na základě jednofaktorových experimentů a optimalizovaných pomocí metodologie povrchu odezvy byly optimální podmínky 20minutové působení ultrazvuku, poměr rozpouštědla k materiálu 20:1 a výkon ultrazvuku 220 W, což dává 8,55 % CP. Celulózová kolonová chromatografie následně poskytla jednu neutrální frakci (CPN) a tři kyselé frakce (CPA‑1, CPA‑2, CPA‑3). Mezi nimi vykazoval CPN nejvyšší výtěžnost (40,3 %), nejvyšší obsah sacharidů (39,5 %) a silnou antioxidační aktivitu srovnatelnou s CPA‑2; proto byl pro hloubkovou charakterizaci vybrán CPN. Strukturální analýzy odhalily charakteristické polysacharidové funkční skupiny, převahu glukózy a manózy a důkazy pro dvě složky s výrazně odlišnými molekulovými hmotnostmi. In vivo CPN významně prodloužil dobu plavání s nosností u myší, snížil sérový močovinový dusík a laktát v krvi a zvýšil jaterní glykogen, což potvrzuje aktivitu proti únavě. Tato zjištění poskytují vědecký základ pro vývoj polysacharidů Cistanche tubulosa do produktů působících proti únavě a souvisejících komerčních aplikací.

Klíčová slova: Polysacharidy Cistanche tubulosa; metodologie reakčního povrchu; extrakční proces; strukturní charakterizace; proti únavě; nové výhody pro CP ve funkčních potravinách a nutraceutikách

 

Zavedení

Cistanche tubulosa (Schenk) Wight,ceněná léčivá a jedlá homologní rostlina známá jako „ženšen pouště“ má v Číně dlouhou historii používání [1]. Jeho hlavní bioaktivní složky zahrnují polysacharidy, fenylethanoidní glykosidy a iridoidy; z nich polysacharidy vykazují důležité fyziologické funkce, jako jsou imunomodulační [2], antioxidační [3], protiúnavové [4] a hypoglykemické účinky [5], které vykazují široké vyhlídky na uplatnění ve farmacii, zdravotnických produktech a funkčních potravinách [6]. Tradiční metody extrakce polysacharidů (např. ponoření do horké vody a reflux) často trpí dlouhou dobou trvání, nízkou účinností, vysokou spotřebou energie a potenciálním poškozením struktury a aktivity polysacharidů [7–9]. Kromě extrakce horkou vodou [10] a refluxu [11] Teng et al. [12] porovnávali extrakci ultrazvukem, mikrovlnnou troubou a kombinovanou extrakcí ultrazvukem a mikrovlnami, přičemž zjistili, že synergická metoda ultrazvuk–mikrovlnná poskytuje nejlepší výtěžek (11,00 %), o 1,28 % vyšší než extrakce horkou vodou, následovaná mikrovlnami a samotným ultrazvukem.

Separace a čištění polysacharidů má za cíl získat vysoce čisté, strukturně definované a bioaktivní monolátky nebo specifické frakce ze surových polysacharidů obsahujících proteiny, nukleové kyseliny, lipidy a další nečistoty. Ailadan Maimaitiaili [11] odbarvil a deproteinoval surové polysacharidy Cistanche makroporézní pryskyřicí AB‑8, poté je oddělil celulózou DEAE‑650M za použití deionizované vody a gradientu NaCl, čímž se získal jeden neutrální a pět kyselých polysacharidů; in vitro neutrální frakce vykazovala vynikající antioxidační aktivitu. V současné době se studie bioaktivity polysacharidů Cistanche zaměřují hlavně na antioxidační, protizánětlivé účinky a účinky proti stárnutí [13], zatímco výzkumy proti únavě jsou relativně omezené.

Jako novější technika extrakce přírodních produktů nabízí ultrasonická extrakce (UAE) krátkou dobu extrakce, vysokou účinnost, provozní jednoduchost a žádné nebo nízké zahřívání, čímž se zabrání tepelné degradaci komponent citlivých na teplo a zlepší se výtěžek a čistota; je široce používán pro rostlinné polysacharidy [14]. Podmínky SAE pro extrakci polysacharidů (CP) Cistanche tubulosa však vyžadují další optimalizaci pro maximalizaci účinnosti. Metodologie povrchu odezvy (RSM), efektivní přístup k návrhu a optimalizaci založený na matematickém modelování, umožňuje komplexní analýzu více faktorů a jejich interakcí k určení optimálních parametrů.

V této studii jsme použili RSM k optimalizaci procesu v UAE pro CP, separovali a identifikovali výsledné surové polysacharidy, porovnali in vitro antioxidační aktivity frakcí a na základě nejsilnějších antioxidačních účinků hodnocených proti únavě in vivo. Cílem je poskytnout vědeckou a technickou podporu pro využití zdrojů Cistanche tubulosa s přidanou hodnotou a urychlit převedení do funkčních produktů pro wellness průmysl.

Polysacharidy Cistanche tubulosa: Výhody

 

 

 

Seznam výhod Cistanche

 

 

Získejte vysoký obsah polysacharidů Cistanche tubulosa

 

 

1 Materiály a metody

1.1 Materiály a nástroje

Cistanche tubulosa was purchased from the Urumqi dried fruit market; polysaccharides were prepared in-house at Xinjiang Agricultural University. Absolute ethanol, acetone, and ether were analytical grade (Tianjin Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd.). DPPH was from Shanghai Ruji Biotechnology Development Co., Ltd. ABTS and shiitake polysaccharide (purity >98 %) bylo ze Solarbio (Peking).

Hlavní vybavení: bruska XL‑02A (Yechang Machinery Co., Ltd.); HH‑S digitální vodní lázeň s konstantní teplotou (Jiangsu Jintan Medical Instrument Factory); JBT/C‑YCL400T/3P(D) ultrazvukový farmaceutický procesor (Jining Jinbait Special Engineering Machinery Co., Ltd.); vakuová filtrační jednotka VP50 (Beijing Labtech); Rotační výparník RE‑52B (Shanghai Yarong Biochemical Instrument Factory); centrifuga 80‑1 (Jintan Hengfeng Instrument Factory); Spektrofotometr UV-2550 (Shimadzu, Šanghaj).

Zvířata: Padesát samců myší SPF Kunming, tělesná hmotnost 20,00±2,00 g, stáří 3–4 týdny, zakoupených od Xinjiang Medical University Laboratory Animal Center (licence SYXK‑Xin 2024‑0001).

 

Polysacharidy Cistanche tubulosa: Výhody

 

 

1.2 Metody

1.2.1 Proces extrakce polysacharidů

Plátky Cistanche byly rozdrceny a protlačeny sítem o velikosti ok 50 mesh. Prášek byl umístěn do baňky s kulatým dnem, smíchán s 8 objemy 80% ethanolu, refluxován při 90 stupních po dobu 2 hodin a přefiltrován. Zbytek byl sušen na vzduchu. K vysušenému zbytku byla přidána destilovaná voda a extrahována pod ultrazvukem; extrakt se zfiltruje, filtrát se zadrží a zbytek se jednou znovu extrahuje. Dva filtráty byly spojeny a zakoncentrovány na jednu čtvrtinu původního objemu. Ke koncentrátu byly přidány tři objemy absolutního ethanolu, ponechány stát při 4 stupních po dobu 12 hodin a vakuově filtrovány, aby se shromáždila sraženina. Sraženina byla postupně promyta absolutním ethanolem, acetonem a etherem, vysušena a zvážena, čímž byl získán surový CP.

 

Polysacharidy Cistanche tubulosa: Výhody

 

1.2.2 Jednofaktorové experimenty

1.2.2.1 Vliv poměru rozpouštědla k materiálu na výtěžek CP

Bylo připraveno pět porcí prášku Cistanche (každá 4 g). Doba extrakce a výkon ultrazvuku byly stanoveny na 20 minut a 175 W. Byly testovány poměry rozpouštědla k materiálu 10:1, 15:1, 20:1, 25:1 a 30:1 (ml:g) na jejich vliv na výtěžek CP. Každý experiment byl proveden trojmo.

 

1.2.2.2 Vliv výkonu ultrazvuku na výtěžek CP

Pět porcí prášku (každá 4 g) bylo extrahováno při optimálním poměru rozpouštědla k materiálu stanovenému v 1.2.2.1, s dobou extrakce stanovenou na 20 minut. Byly testovány úrovně ultrazvukového výkonu 125, 150, 175, 200 a 225 W. Byly provedeny trojité experimenty.

 

1.2.2.3 Vliv ultrazvukového času na výtěžnost CP

Bylo extrahováno pět porcí prášku (každá 4 g) při optimálním poměru rozpouštědla k materiálu (od 1.2.2.1) a optimálním ultrazvukovém výkonu (od 1.2.2.2). Byly testovány ultrazvukové časy 10, 15, 20, 25 a 30 minut. Každá podmínka byla provedena trojmo.

 

1.2.3 Metodika povrchu odezvy (RSM)

Na základě jednofaktorových výsledků byl použit Box-Behnkenův návrh s výtěžkem CP jako odezvou a dobou působení ultrazvuku, poměrem rozpouštědla k materiálu a výkonem ultrazvuku jako faktory. Optimalizace RSM byla provedena v Design-Expert 8 s třífaktorovým tříúrovňovým návrhem (viz Tabulka 1). Experimenty byly provedeny trojmo.

 

Polysacharidy Cistanche tubulosa: Výhody

 

1.2.4 Stanovení obsahu polysacharidů

Obsah polysacharidů byl měřen kolorimetrickou metodou kyselina sírová-antron [15]. Anthron (20 g) byl rozpuštěn v koncentrované kyselině sírové a doplněn na 100 ml pro přípravu roztoku 0,2 g/ml. Vhodné množství CP bylo rozpuštěno a zředěno na 100 ml. 1 ml alikvot byl smíchán s 5 ml 0,2 g/ml kyseliny antron-sírové, promíchán, ponechán při pokojové teplotě po dobu 5 minut, zahříván ve vodní lázni o teplotě 90 stupňů po dobu 15 minut, ochlazen a absorbance byla změřena při 585 nm. Glukóza byla použita k přípravě standardní křivky: Y=0.0081X + 0.0176 (R²=0.9991). Absorbance vzorku byla dosazena do křivky pro výpočet obsahu polysacharidu.

 

1.2.5 Výpočet výtěžku polysacharidu

Výtěžek polysacharidu byl vypočten podle standardního vzorce (hmotnost získaného polysacharidu vzhledem k hmotnosti surového materiálu) s použitím naměřeného obsahu polysacharidu.

 

1.2.6 Purifikace polysacharidů

Crude CP extract was prepared under the optimized conditions. Following Wang et al. [16], Sevag reagent (chloroform:n‑butanol = 4:1, v/v) was used for deproteinization with vigorous shaking for 10 min, followed by centrifugation; the supernatant was collected and the process repeated three times. Eight volumes of 95% ethanol were added to the filtrate and left at 4 °C for 24 h. After centrifugation (8000 r/min, 10 min), the precipitate was collected and freeze‑dried to obtain crude CP. A 10 mg/mL solution was prepared by dissolving 100 mg crude CP in 10 mL distilled water, centrifuged at 7000 r/min for 10 min to remove insolubles, and filtered through a 0.45 μm membrane. The solution was loaded onto a DEAE‑52 cellulose column and eluted stepwise with distilled water and 0.1, 0.3, and 0.5 mol/L NaCl. Eluates were monitored by anthrone–sulfuric acid assay; fractions with absorbance >1,0 byly spojeny, koncentrovány, dialyzovány, lyofilizovány a zváženy, aby se získaly různé polysacharidové frakce. Výtěžek (Y) byl vypočten takto:
Y = (C × V × D) / (m × P)
kde C je koncentrace polysacharidu (mg/ml) purifikovaného cílového roztoku, V je objem (ml), D je faktor ředění, m je hmotnost surového CP (g) a P je obsah polysacharidu v surovém CP.

 

1.2.7 Porovnání antioxidačních aktivit frakcí

1.2.7.1 Vychytávání radikálů DPPH

Po Jiang et al. [17] s úpravami byl čerstvě připraven pracovní roztok DPPH 0,2 mmol/l. Frakční roztoky o 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 a 1,0 mg/ml (každý 1 ml) byly smíchány s 2 ml DPPH, vortexovány a inkubovány ve tmě při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Absorbance byla měřena při 517 nm (Ai). Každý test byl triplikován a vitamin C (Vc) v odpovídajících koncentracích sloužil jako pozitivní kontrola. Rychlost zachycování byla vynesena proti koncentraci a vypočtena pomocí:
Čištění DPPH (%)=[1 − (Ai − Aj) / (A0)] × 100
kde Ai je A (2 ml DPPH + 1 ml vzorek/Vc), Aj je A (2 ml ethanolu + 1 ml vzorek/Vc) a A0 je A (1 ml vody + 2 ml DPPH).

 

1.2.7.2 Vychytávání radikálů ABTS

Po Xu a kol. [18] s úpravami byl 1 ml vzorku o koncentraci 0,2–1,0 mg/ml smíchán se 4 ml roztoku ABTS, promíchán na vortexu a inkubován ve tmě po dobu 6 minut při pokojové teplotě. Absorbance byla měřena při 734 nm, třikrát. Vc při odpovídajících koncentracích byla pozitivní kontrola. Rychlost zachycování byla vynesena proti koncentraci a vypočtena pomocí:
Čištění ABTS (%)=[1 − (Ai − Aj) / (A0)] × 100
kde Ai je A(1 ml vzorek/Vc + 4 ml ABTS), Aj je A(1 ml vzorek/Vc + 4 ml vody) a A0 je A(1 ml vody + 4 ml ABTS).

 

1.2.8 Strukturální analýza polysacharidových frakcí

1.2.8.1 Infračervená spektroskopie s Fourierovou transformací (FTIR)

Po Zhang WenChao a kol. [19] s modifikacemi byly 2 mg předem upraveného polysacharidu smíchány s 200 mg sušeného KBr, rozemlety a slisovány do pelet. Spektra byla shromážděna od 400 do 4000 cm⁻¹ při rozlišení 4 cm⁻¹ s 32 skeny.

 

1.2.8.2 Stanovení molekulové hmotnosti

Po Zhang Jiayuan [20] s modifikacemi bylo 5 mg vzorku rozpuštěno v 0,05 mol/L NaCl na 5 mg/ml, centrifugováno a filtrováno přes 0,22 μm membránu. Molekulová hmotnost byla stanovena pomocí HPGPC se dvěma ve vodě rozpustnými SEC kolonami na bázi polymeru (8 mm x 300 mm) v sérii, detektor: Waters RI; mobilní fáze: 0,05 M NaCl; průtok: 0,50 ml/min; teplota kolony: 40 stupňů; injekce: 30 μl. Kalibrační křivky byly:
Lg Mp–RT: y=−0,1359x + 9.4523 (R²=0.9974)
Lg Mw–RT: y=−0,1375x + 9.5035 (R²=0.9976)
Lg Mn–RT: y=−0,1368x + 9.4749 (R²=0.9971)
Podle toho byly vypočteny molekulové hmotnosti.

 

1.2.8.3 Monosacharidové složení

Po Naxin S et al. [21] byly vzorky zpracovány a analyzovány pomocí iontové chromatografie/HPLC. Standardy (po 5 mg rhamnózy, arabinózy, galaktózy, glukózy, xylózy, manózy, kyseliny galakturonové, kyseliny glukuronové, glukosamin HCl, galaktosamin HCl; 10 mg fukózy) byly rozpuštěny a upraveny na 10 ml, poté zředěny na řadu koncentrací. Chromatografie používala systém Thermo U3000 s kolonou Agilent ZORBAX Eclipse XDB‑C18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μm); mobilní fáze: acetonitril:fosfátový pufr (12 g/l KH2P04, pH upraveno na 6,8 pomocí 2 M NaOH)=17:83 (obj./obj.), isokratické; průtok 0,8 ml/min; sloupec 30 stupňů; detekce 250 nm; injekce 10 μl.

 

1.2.9 Protiúnavové experimenty polysacharidových frakcí

1.2.9.1 Seskupování a podávání zvířat

Etické schválení Ne. 2023048. Po 3 dnech aklimatizace bylo 50 myší náhodně rozděleno do pěti skupin (n=10): slepá kontrola; pozitivní kontrola (shiitake polysacharid 300 mg/kg); frakce s nízkou dávkou (150 mg/kg); středně dávková frakce (300 mg/kg); frakce s vysokou dávkou (600 mg/kg). Frakce a kontroly byly podávány žaludeční sondou po dobu 15 dnů; myši měly volný přístup k potravě a vodě.

 

1.2.9.2 Zkouška plavání se zátěží

Pět hodin po posledním žaludeční sondě bylo ke každému myšímu ocasu připojeno olovo o hmotnosti 7 % tělesné hmotnosti. Myši plavaly v nádrži 60 cm hluboké při 30±2 stupních. Doba od ponoření do doby, kdy hlava zůstala ponořená po dobu 10 s bez opětovného vynoření, byla zaznamenána jako vyčerpávající doba plavání.

 

1.2.9.3 Dusík močoviny v krvi (BUN)

Po plavání byla krev odebírána přes orbitální sinus do heparinizovaných zkumavek a centrifugována při 3000 ot./min. po dobu 10 minut. BUN byl měřen přesně podle instrukcí sady.

 

1.2.9.4 Laktát v krvi

Sérum (20 ul) bylo zpracováno podle instrukcí sady. Absorbance byla odečítána při 530 nm (1 cm délka dráhy) s dvakrát destilovanou vodou jako nula a byla vypočtena koncentrace laktátu.

 

1.2.9.5 Jaterní glykogen

Ihned po odběru krve byly myši usmrceny cervikální dislokací. Játra byla vyříznuta, opláchnuta fyziologickým roztokem, osušena a 80 mg tkáně bylo umístěno do zkumavky se 3 objemy alkálie (pH 8,0). Vzorky byly vařeny po dobu 20 minut, ochlazeny a glykogen byl kvantifikován podle instrukcí sady.

 

1.2.10 Analýza dat

Data byla analyzována pomocí SPSS 17.1 a uvedena jako průměr ± SD (X±S). Byla použita jednocestná ANOVA s testováním homogenity rozptylu; P < 0,05 bylo považováno za statisticky významné. Obrázky byly připraveny v Origin 2021 a GraphPad Prism 9.

Komerční překlady a aplikace

Umístění nových výhod: Optimalizovaný neutrální polysacharid Cistanche (CPN) prokázal dvojí antioxidační a protiúnavové účinky – prodlouženou výdrž, snížený BUN a laktát a zvýšené nároky na podporu jaterního glykogenu, jako je „podporuje vytrvalost“, „pomáhá snižovat únavu způsobenou cvičením“ a „podpora antioxidantů“.

Formáty produktů: Vytrvalostní nápoje připravené k mixování, gelové injekce, funkční gumy a kapsle. Kombinujte CPN s elektrolyty, vitamíny B a sacharidy s nízkým GI pro sportovní přípravky; nebo s tradičními fenylethanoidovými glykosidy Cistanche pro synergické SKU „energie + obnova“.

Pokyny pro zpracování: Podmínky SAE (20 min, poměr rozpouštědel 20:1, 220 W) jsou škálovatelné a energeticky účinné; Frakcionace DEAE‑52 poskytuje olovnatou neutrální frakci (CPN) s vyšším obsahem sacharidů a aktivitou, což umožňuje konzistentní standardizaci (např. větší nebo rovno 39 % sacharidů, HPGPC fingerprint s bimodální Mw).

Soulad a zdůvodnění: Použijte současné výsledky in vivo k doložení tvrzení o struktuře/funkci; rozšířit o pilotní testy na lidech měřící dobu do vyčerpání, kinetiku laktátu a vnímanou námahu. Použijte čisté označení extrakce a prohlášení o rozpouštědlech.

Kontrola kvality: Přijměte FTIR markerové pásy, poměry monosacharidů (převládající glukóza/manóza) a profil molekulové hmotnosti HPGPC jako kritéria uvolňování. Antioxidační testy (DPPH/ABTS) jako kontroly aktivity během procesu.

 

Afiliace a reference autora (autoritativní zdroj)

DUAN Jihua1, HAN Haixia2,+, ZHAO Wenyan3, JIA Mingxi2, SUN Jingjing2, ZHOU Jixiang2, SONG Suqin4, ZHU Dongliang3*, BAO Xiaowei2*
(1. Xinjiang Sikai Food R&D Center (Co., Ltd.), Changji, Xinjiang 831100; 2. College of Food Science and Pharmacy, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, Čína; 3. Pharmaceutical and Instrument Testing Institute, Logistics Department of Xinjiang Jiang, Xinjiang Military Region, Urumqi 3.8 Komplexní experimentální stanice Urumqi, Xinjiang Academy of Agricultural Sciences, Xinjiang, Urumqi 830052)

Reference
[1] ZHAO Hongting, XIN Guoxiong, GUO Yuan. Pokrok ve výzkumu Cistanchis sinensis, tradiční čínské medicíny se stejným zdrojem potravy a léků. Čínská bylinná medicína, 2025, 56(09): 3316–3329.
[2] YANG MH, CHEN RH, ZHOU X, a kol. Pokrok ve výzkumu farmakologických účinků a mechanismu polysacharidů. Starch-Stärke, 2024, 76(9–10): 2300168.
[3] MU S, YANG WJ, HUANG G L. Antioxidační aktivity a mechanismy polysacharidů. Chem Biol Drug Des, 2021, 97(3): 628–632.
[4] ZHANG SS, LIU B, YAN GY a kol. Chemické vlastnosti a protiúnavový účinek polysacharidu. J Food Biochem, 2022, 46(1): e14015.
[5] FU Y, WANG LW, JIANG GCA a kol. Antidiabetická aktivita polysacharidů z var. Li. Potraviny, 2022, 11(10): 1464.
[6] CHEN Changmao, GAZANG Zhaxi, WANG Jie a kol. Pokrok ve výzkumu aktivních složek a farmakologického mechanismu Cistanchiakis. Čínská bylinná medicína, 2025, 56(12): 4464–4477.
[7] WANG Wenli, ZHANG Jinling, WEI Yaning a kol. Pokrok přírodní extrakce, čištění a bioaktivity polysacharidů. Food Industry Science and Technology, 2022, 43(22): 470–480.
[8] GONG P, WANG SY, LIU M a kol. Extrakční metody, chemické charakterizace a biologické aktivity houbových polysacharidů: Minirecenze. Carbohydr Res, 2020, 494: 108037.
[9] CHEN X, LIU YB, DENG Y a kol. Primární studie vlivu extrakčních metod na vlastnosti a aktivity polysacharidů. Molekuly, 2025, 30(1): 148.
[10] JIANG Huabin, LIU Lisha, ZHANG Qing a kol. Simultánní separace a čištění tubulárních fenylethanoidových glykosidů a polysacharidů Cistanche technologií membránové separace. Food Science and Technology, 2019, 44(07): 229–234.
[11] MAIMAITIAILI Ailadan. Studium extrakce, separace a purifikace polysacharidů z Herba Cistanche a jejich imunologické aktivity in vitro. Urumqi: Lékařská univerzita Xinjiang, 2021.
[12] TENG Liping, MU Long, LUO Feng, et al. Metoda extrakce surových polysacharidů z Cistanche tubulosa a její vliv na vychytávání difenylového radikálu. Guizhou Agricultural Sciences, 2011, 39(01): 66–68.
[13] BAI Dongwen. Účinky extraktů z květu Pedicularis a Cistanche na hippocampus a střevní mikroflóru při vysokohorské hypoxii. Urumqi: Zemědělská univerzita Xinjiang, 2023.
[14] JING YS, ZHANG SL, LI MS, a kol. Extrakce, struktura a bioaktivita polysacharidů. Potraviny, 2022, 11(14): 2126.
[15] GUO Xiaolei, ZHU Sichao, ZHAI Xufeng a kol. Srovnání antronsulfátových a fenolsulfátových metod pro stanovení polysacharidů Ganodermy. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2010, 28(09): 2000–2002.
[16] WANG Senzheng, SUN Yongfang, ZHOU Ye a kol. Optimalizace extrakce, strukturní charakterizace a účinky na funkční zácpu polysacharidu Wen Curcuma. Výzkum a vývoj přírodních produktů: 1–17.
[17] JIANG Zhixuan, CAI Zifu, DONG Sisi a kol. Chemická modifikace polysacharidů opuncie a analýza antioxidační a hypoglykemické aktivity. Věda a technologie potravinářského průmyslu: 1–20. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025020006.
[18] XU Qing, YANG Jiang, LI Anding. Porovnání hlavních funkčních složek a antioxidačních aktivit mučenky různého původu. Moderní potravinářská věda a technologie, 2023, 39(08): 94–102.
[19] ZHANG CW, ZOU YF, ZOU Y a kol. Ultrazvuková extrakce polysacharidu z Paeoniae Radix alba: optimalizace extrakce, strukturní charakterizace a antioxidační mechanismus in vitro. Int J Biol Macromol, 2024, 268: 131816.
[20] ZHANG Jiayuan. Izolace a purifikace kopřivových polysacharidů, strukturní identifikace a hypoglykemická aktivita. Xi'an: Shaanxi University of Science and Technology, 2021.
[21] SUN NX, ZHAO YN, YIN M Y. Extrakce, čištění, struktura a bioaktivity polysacharidů z maitake: Přehled. J Food Meas Charact, 2023, 17(6): 6200–6213.
[22] WAN Yue, QI Jiying, ZENG Hong a kol. Optimalizace ultrazvukem asistované extrakce polysacharidů shiitake metodou odezvy povrchu. Biotechnology Bulletin, 2015, 31(01): 79–85.
[23] LI Li, ZHANG Sai, HE Qiang a kol. Aplikace metodologie povrchu odezvy v experimentálním návrhu a optimalizaci. Laboratorní výzkum a průzkum, 2015, 34(08): 41–45.
[24] MA Qvhuan, SHI Xiaofeng, SHEN Wei a kol. Optimalizace extrakce polysacharidů z jehlice cedrové borovice pomocí analýzy povrchu odezvy. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 33(03): 1106–1110.
[25] ZHAO Jinsong, PENG Jingjing, ZHANG Liang a kol. Srovnávací studie o zlepšení nežádoucích příchutí v baijiu pomocí různých aktivních uhlíků. China Brewing, 2025, 44(09): 179–186.
[26] WU Huiqiong, WU Hailian, XIAO Nan a kol. Pickeringové emulze těkavého oleje Mosla chinensis synergicky stabilizované kompozitními částicemi nanokrystalická celulóza/kukuřičný škrob. Věda a technologie potravinářského průmyslu: 1–27. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025060255.
[27] WU Shuang. Vliv fukoidanu na stabilitu Pickeringových emulzí na bázi proteinů. Dalian: Polytechnická univerzita Dalian, 2022.
[28] LIN Ying, ZHENG Meixia, CHEN Changmei a kol. Ultrazvukem podporovaná dvoufázová extrakce polysacharidů z jasmínového černého čaje a antioxidační aktivita. Chemie a bioinženýrství, 2025, 42 (09): 35–42.
[29] WANG Yihan, XIE Qingyun, TENG Jianwen a kol. Účinky izolace a čištění na strukturu polysacharidu Tremella a in vitro aktivitu snižující lipidy. Technologie potravinářského průmyslu, 2025, 46(05): 81–90.
[30] BAN Shidong, ZONG Chunyang, WANG Xiaodan a kol. Optimalizace fermentace Lactobacillus plantarum Polygonatum pro zvýšení výtěžku polysacharidů a in vitro prebiotickou aktivitu. Věda a technologie potravinářského průmyslu: 1–18. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025030047.
[31] MO Yunfeng, CHEN Zixuan, PENG Junying a kol. Vliv sušení na vlastnosti dýňového prášku a antioxidační kapacitu. Věda a technologie potravinářského průmyslu: 1–19. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025040072.