Potenciál petrželových polyfenolů a jejich antioxidační schopnosti pomoci při léčbě deprese a úzkosti: Subakutní studie in vivo

Pro více informací Kontakttina.xiang@wecistanche.com

Abstraktní: Deprese a úzkost jsou hlavními problémy duševního zdraví ve všech částech světa. Tato onemocnění jsou spojena s řadou rizikových faktorů, včetně oxidačního stresu. Psychofarmaka chemické povahy prokázala několik vedlejších účinků, které zvýšily dopad těchto onemocnění. Tváří v tvář této situaci se přírodní produkty jeví jako slibná alternativa. Cílem této studie bylo zhodnotit anxiolytické a antidepresivní účinky Petroselinum sativumpolyfenolyin vivo, stejně jako její korelaceantioxidant vlastnosti in vitro.Anxiolytikumaktivita extraktu (50 a 100 mg/kg) byla hodnocena pomocí testu v otevřeném poli a ve světle a tmě, zatímco antidepresivní aktivita byla hodnocena pomocí testu nuceného plavání. Antioxidační aktivita extraktu byla hodnocena testem volných radikálů 2,2-difenyl-1-pikrylhydrazyl(DPPH) a testem FRAP (iron-redukující kapacita). Fenolický extrakt vykazoval velmi silné anxiolytické a antidepresivní účinky, zejména v dávce 100 mg/kg, snížení depresivního chování u myší (snížení doby imobility) a také anxiolytického chování (tendenci k objevování ve středu a osvětlených oblastech ) ještě lepší než u paroxetinu a bromazepamu (klasické léky) a současně s těmito výsledky extrakt také prokázal významnou antioxidační kapacitu. Tyto předběžné výsledky naznačují, že Petroselinum satioum vykazuje anxiolytický a antidepresivní potenciál pro použití jako doplněk nebo nezávislá fytomedicína k léčbě deprese a úzkosti.

Klíčová slova: Petroselinum sativum; polyfenol; anxiolytikum; podobný antidepresivu; antioxidant; farmakologie; bylinková medicína; přírodní produkty

1. Úvod

Deprese a úzkostné poruchy byly dlouho považovány za problémy duševního zdraví a představují velkou zátěž pro každou společnost, ve které je stres všudypřítomný. Světová zdravotnická organizace (WHO) předpovídá, že do roku 2030 bude deprese jako potenciálně smrtelná nemoc celosvětově druhou hlavní příčinou invalidity [1]. Podle posledních odhadů WHO trpí depresí na celém světě více než 300 milionů lidí, z nichž více než 260 milionů má také úzkostné poruchy [2].

Diagnostický a statistický manuál duševních poruch (DSM-V) definoval velkou depresivní poruchu nejen jako příležitostný smutek nebo záchvat deprese, ale spíše jako depresivní náladu nebo ztrátu zájmu nebo potěšení po dobu nejméně dvou po sobě jdoucích týdnů, jejichž epizody jsou často recidivující [3]. WHO také definuje depresi jako „různé psychologické a biologické příznaky, jako je celkový pocit smutku, ztráta potěšení a zájmu, pocit viny, narušený spánek (nespavost nebo ospalost) a chuť k jídlu, pocity únavy (psychomotorická retardace). ), a nedostatek koncentrace“.V nejzávažnějších případech může deprese vést až k sebevraždě [4].

Úzkost, jak ji definuje WHO, je „pocit neurčitého bezprostředního nebezpečí doprovázený stavem malátnosti, rozrušení, bezmoci nebo dokonce zničení“. Lze jej také popsat jako stav anticipačního strachu vyvolaného potenciálním a nejistým nebezpečím, ačkoli jeho příčina nemusí být nutně vědomá, na rozdíl od strachu, který vzniká tváří v tvář skutečnému nebezpečí. Tyto dvě emoce se však vyznačují podobnými fyziologickými (zvýšený krevní tlak, pocení, tachykardie atd.) a behaviorálními (zvýšená bdělost a vyhýbavost) reakcemi [5].

Deprese a úzkost se obecně léčí psychotropními léky, včetně antidepresiv aanxiolytika(trankvilizéry), často chemické povahy, jako je paroxetin a benzodiazepiny. Užívání těchto léků má však určité limity a mohou způsobit nežádoucí vedlejší účinky. Bromazepam se předepisuje k léčbě úzkosti. Jeho konzumace však přichází s řadou negativních vedlejších účinků, včetně ospalosti, sedace a ztráty paměti [6]. Potíže se spánkem, ztráta chuti k jídlu, ospalost a sexuální dysfunkce jsou také typickými vedlejšími účinky paroxetinu, antidepresiva ze skupiny inhibitorů zpětného vychytávání serotoninu (SSRI) používaného k léčbě velkých depresivních poruch [7]. V důsledku této omezené účinnosti je vysoce ceněno zkoumání nových, účinnějších a netoxických terapeutických prostředků.

Léčivé rostliny mohou být adekvátním zdrojem nových, bezpečných a účinných terapeutik, zvláště když je známo, že mnohé vykazují méně vedlejších účinků [8]. Při výše uvedených poruchách bylo testováno mnoho léčivých rostlin a přinesly velmi příjemné výsledky, které povzbudily další studie k objevení antidepresivních a anxiolytických vlastností dalších rostlin [9].

Petroselinum satioum Hoffm., běžně známý jako "petržel" ("maadnous" v arabštině), je členem čeledi Apiaceae. Apium crispum Mill, Apium Petroselinum L., Petroselinum Hortense Hoffm a Petroselinum crispum (Mill) Fuss. jsou také synonyma pro Petroselinum sativum Hoffm.[10. Petržel jako kulinářská bylina pocházející z oblasti Středomoří se v moderní době stala celosvětově běžnou bylinkou [11]. P. sativum má řadu prospěšných vlastností, včetněantioxidantanalgetické, spasmolytické, antidiabetické, imunomodulační a gastrointestinální účinky [12]. Tyto různé výhody lze připsat základním složkám rostliny, jako jsou polyfenoly (apigenin, kvercetin, luteolin a kempferol), vitamíny, karotenoidy, kumarin a taniny [13]. Čeleď Apiaceae zahrnuje několik rostlin známých pro své antidepresivní a anxiolytické účinky jako Coriandrum satioum L.[14], Pimpinella anisum L.[15], Carum carvi L.[16] pro koncentraci v rozmezí 50 až 200 mg/kg.

V této studii potenciální antidepresivní a anxiolytické aktivity petrželepolyfenolybyly vyhodnoceny poprvé spolu s jehoantioxidační aktivitu, abychom zjistili, zda existuje korelace.

2. Výsledky

2.1. Hodnocení antioxidační aktivity

2.1.1. Zkouška DPPH

Obrázek 1 ukazuje procento antioxidační aktivity jako funkci různých hladin PSPE a BHT. Získané výsledky ukazují, že náš extrakt a BHT vykazují antiradikálovou aktivitu závislou na koncentraci. To znamená, že procento inhibice radikálu DPPH se zvyšuje s koncentrací fenolického extraktu P. sativum a BHT. BHIT vykazoval nejvyšší aktivitu ve srovnání s naším extraktem. Pro 0,5 ug/ml dosáhl BHT maximální procento inhibice 90 procent, které zůstalo konstantní pro koncentraci 1 ug/ml. Při stejné koncentraci produkoval fenolický extrakt maximální inhibici 58 procent

Syntetický antioxidant BHT vykazoval velmi silnou antiradikálovou aktivitu s IC50 asi 0,024 ug/ml, vyšší než u fenolického extraktu P sativum （asi 0,184 ug/ml） .

2.1.2.Zkouška FRAP

Obrázek 2 ukazuje změnu optické hustoty (OD) jako funkci různých koncentrací PSPE a BHT (pozitivní kontrola). Je vidět, že procenta redukce jsou úměrná koncentraci jak extraktu, tak BHT. Ten vykazoval vyšší procento redukce ve srovnání s extraktem.

Abychom porovnali účinnost polyfenolické frakce P. sativou (PSPE) s účinností BHT, stanovili jsme koncentraci, která snížila 50 procent FRAP (IC50).

BHT (syntetický antioxidant BHT) vykázal vysoce silnou antioxidační aktivitu s IC50 přibližně 0,09 ug/ml, vyšší než u fenolického extraktu z P. sativum （asi 0,38 ug/ml ).

2.2. Vyhodnocení testu nuceného plavání s antidepresivní aktivitou

Změna doby prostoje v testu nuceného plavání během tří týdnů experimentu je znázorněna na obrázku 3. Doba imobility během testu byla významně kratší u myší léčených PSPE (PSPE 50 mg/kg(34 s±3,286), PSPE 100 mg/kg (33,8s±2,653)) ve srovnání s kontrolami (Paroxetin (100,8s±6,837), vehikulum (176s±6,550).

Tyto výsledky ukazují, že antidepresivní účinek fenolového extraktu P. sativum je větší než účinek paroxetinu.

2.3. Hodnocení anxiolytické aktivity

2.3.1. Úzkostné chování v otevřeném poli

Obrázek 4 ukazuje změnu v čase stráveném ve středu testu na otevřeném poli během tří týdnů ošetření extraktem. Je vidět, že myši ošetřené PSPE (50 a 100 mg/kg) strávily více času v centrální oblasti ve srovnání s kontrolními skupinami. Toto výrazné zvýšení je úměrné nejen délce léčby, ale také koncentraci extraktu. Optimální hodnota byla získána s koncentrací 100 mg/kg (37,4 s± 1,778, ve srovnání s 33,4 s±1,208 sat dávkou 50 mg/kg). To znamená ananxiolytikumúčinek této rostliny.

Rozdíly v počtu dlaždic zkřížených během třítýdenního experimentu jsou znázorněny na obrázku 5. Analýza ukázala pozoruhodný nárůst počtu dlaždic, které přešly myši ošetřené PSPE (50 mg/kg (161,2 ± 5,490), 100 mg/ kg (173±10,104)) ve srovnání se skupinami léčenými bromazepamem 1 mg/kg (115,8±1,393) a vehikulem (147,4±1,568). Tyto výsledky naznačují větší anxiolytický účinek FPPS dokonce než bromazepam v dávce 1 mg/kg.

2.3.2. Úzkostné chování ve světlé a tmavé místnosti

Obrázek 6 představuje výsledky změn v čase stráveném v osvětlené komoře během období studie. Výsledky ukazují progresivní nárůst času stráveného v osvětlené komoře v průběhu času u myší léčených PSPE. Toto zvýšení je zvláště patrné v den 21. V tomto testu strávily myši léčené bromazepamem a PSPE významně více času v osvětleném prostoru (bromazepam 1 mg/kg (146,8 s ± 1,068), PSPE 50 mg/kg (199,6 s ± 6,838), PSPE 100 mg/kg (213,6s±9,331) ve srovnání s kontrolními myšmi (vehikulum (75,8s±4,352)). To bylo vykládáno jako důkaz anxiolytického účinku polyfenolického extraktu P. sativum.

Obrázek 7 ukazuje změny v počtu přechodů mezi světlými a tmavými komorami během tohoto testu. Pozoruhodný rozdíl byl nalezen během 21 dnů mezi myšmi léčenými PSPE (50 mg/kg (16±{{10}},548), 100 mg/kg kg (12,4±0,510)) a kontrolní myši (vehikulum (10±0,837), bromazepam 1 mg/kg (12±0,949). Tyto výsledky jsou v souladu s výsledky doby strávené v osvětlené komoře, protože tyto dva parametry jsou nepřímo úměrné úrovni úzkosti, kterou myši projevovaly.

3. Diskuse

V této studii jsme prokázali, že fenolový extrakt P. satium vykazuje antioxidační aktivitu in vitro a anxiolytickou a antidepresivní aktivitu in vivo.

V některých studiích bylo zjištěno, že kyselina ferulová a kyselina skořicová mají antidepresivní účinky [17,18], zatímco kvercetin a hydroxytyrosol prokázaly schválený anxiolytický účinek [19,20]. Tyto sloučeniny by mohly stát za pozorovaným účinkem.

Účinnost antioxidantu lze uplatnit v různých formách, jako je vychytávání volných radikálů, rozklad volných radikálů a také chelace kovových iontů [17]. Tato aktivita může být hodnocena pomocí testů FRAP a DPPH, z nichž druhý se díky své rychlosti často používá ke screeningu molekul přítomných v rostlinných extraktech [18]. Naše výsledky ukázaly antioxidační aktivitu ve fenolickém extraktu z petržele. Předchozí práce Hinneburga et al.[21]ukázala, že vodný extrakt z petržele vykazoval slabou inhibiční aktivitu radikálu DPPH, s IC50 v řádu 12.0±{{8} },10 mg/ml (ve srovnání s polyfenolickým extraktem v naší studii, 0,184 ug/ml). Chelatační účinek tohoto extraktu byl naopak účinnější ve srovnání s jinými extrakty použitými ve stejné studii.

Nedávné studie také nalezly souvislost mezi poruchami nálady a oxidačním stresem [22,23] a psychickým stresem [24,25], čímž se otevřely nové cesty k prevenci a/nebo zvládání úzkosti a deprese, pokud jde o potenciální aplikaci antioxidantů. Desrumaux a kol. [26]všimli si, že deficit vitamínu E v myších mozcích zvýšil hladiny klíčových příznaků oxidačního stresu a chování vyvolávajícího úzkost. Podobně myši, kterým byl podáván vitamín C, nedávno odhalily, že tato sloučenina má antidepresivní roli na základě výsledků testu zavěšení ocasu [27]. Polyfenoly, včetně flavonoidů a fenolových kyselin, jsou dobře známé pro své silné antioxidační účinky [28,29]. Slibnou strategií může být použití těchto sekundárních fytochemických metabolitů jako způsobu předcházení a zvládání úzkosti a deprese [9]. Studie provedená Akinci et al. [30] prokázali, že petržel je úspěšná při minimalizaci poškození žaludku způsobeného stresem, když je užívána perorálně podporou antioxidačního obranného systému buněk, což se odráží ve zvýšení průměrné hladiny glutathionu ve tkáni (53,31 ± 9,50) a aktivitě superoxiddismutázy( 15,18 ± 1,05) a kataláza (16,68 ± 2,29).

Experiment na otevřeném poli se používá k hodnocení emočního stavu zvířete. Zvířata, která byla oddělena od své domovské klece a umístěna do jiného prostředí, často projevují úzkost a úzkost tím, že vykazují změny ve všech nebo některých parametrech, jako je snížení ambulantní aktivity, průzkumu a imobilizace, ale zvýšení péče o srst. chování [31]. Extrakt P. sativum v dávce 100 mg/kg vyvolal velmi významný anxiolytický účinek, který se projevil významným zvýšením času stráveného ve středu pole a celkové ambulantní aktivity. Toto zvýšení bylo větší než zvýšení pozorované u myší léčených bromazepamem v dávce 1 mg/kg.

Experiment světlo-tmavá místnost je také užitečný při predikci anxiolytického účinku léků. Za účelem měření stupně úzkosti u myší během tohoto testu jsou zaznamenány dva parametry: (1) Nižší procento času, které zvíře strávilo v temné komoře, souvisí s jeho úrovní úzkosti. Jinými slovy, když je procento času stráveného v osvětleném oddělení minimální, úzkost je považována za vysokou a(2) počet přechodů, tj. počet průchodů mezi dvěma odděleními, nepřímo souvisí s úrovní úzkosti. (nižší počet přechodů znamená vysokou úroveň úzkosti)[32]. Výsledky této studie ukázaly, že polyfenolický extrakt P. sativum v dávce 100 mg/kg vykazoval optimální anxiolytický účinek na základě delší doby strávené zvířetem v osvětlené komoře a počtu přechodů ve srovnání s kontrolami během sledovaného období.

Experiment nuceného plavání byl vyvinut v 70. letech 20. století. Je také známý pod jménem svého vynálezce jako Porsoltův test [33]. Naše zjištění ukazuje, že doba imobility léčených myší byla kratší než u kontrolních myší, což ukazuje na antidepresivní účinek fenolového extraktu P. sativum. Toto snížení doby nehybnosti však mohlo být ve prospěch buď zvýšení doby plavání nebo doby lezení. Tento rozdíl je velmi důležitý z neurofarmakologického hlediska, protože teoreticky, během nuceného plavání, antidepresiva produkující převážně noradrenergní nebo dopaminergní vzestup snižují imobilitu prodloužením doby eskalace [34], zatímco ta, která aktivují 5HT, místo toho snižují nehybnost prodloužením doby plavání. [35]. Pokud jde o funkci CNS, většina polyfenolů interaguje přímo s neurotransmiterovými systémy [36]. Studie provedené na petržele ukazují převahu flavonoidů 37]. Uvádí se, že široká škála flavonoidů nalezených v konvenčních tradičních léčivých extraktech má sedativní/anxiolytické účinky přímou vazbou na receptory GABAA [38].

Studie provedená Priprem et al. [39]uvádí, že polyfenol kvercetin vykazuje anxiolytickou aktivitu po týdnu opakovaného podávání v dávce 300 mg/kg, což není tak účinné jako diazepam, který projevuje svůj účinek hodinu po podání v nižších dávkách. Pereira a kol. [40] prokázali, že kyselina rozmarinová vykazuje anxiolytický účinek ve velmi nízkých dávkách (2 až 4 mg/kg). Dalším příkladem je apigenin, který vykazuje selektivní a nízkou afinitu k benzodiazepinovým receptorům a má anxiolytickou aktivitu téměř bez vedlejších účinků[41]. Flavonoidy také hrají roli při depresi prostřednictvím inhibice monoaminooxidázy a výsledného zvýšení hladin 5-HT, DA a norepinefrinu v určitých oblastech mozku [42].

Excitační aminokyseliny, jako je aspartát, glutamát, homocystein a cystein, stimulují postsynaptické buňky, zatímco inhibiční aminokyseliny, jako je alanin, glycin, GABA a taurin, potlačují vývoj postsynaptických buněk 43]. Enzym nazývaný dekarboxyláza aromatické L-aminokyseliny, také nazývaný DOPA dekarboxyláza, tryptofan dekarboxyláza, 5-hydroxytryptofan dekarboxyláza nebo AAAD, který katalyzuje příslušnou dekarboxylaci L-dopa a 5-hydroxytryptofanu na dopamin a {{ Svou roli může hrát také hydroxytryptamin. Petržel může způsobit nadměrnou expresi tohoto enzymu, což přispívá k jeho antidepresivnímu účinku. Studie provedená na Centella Asiatica, rostlině patřící do stejné čeledi Apiaceae, ukázala, že antidepresivní účinek celkových triterpenů byl způsoben zlepšením funkce osy hypotalamus-hypofýza-adrenokortikální a zvýšením obsahu monoaminových neurotransmiterů. [44]. Tyto studie naznačují přítomnost anxiolytické a antidepresivní aktivity fenolického extraktu P. sativum.

4. Materiály a metody

4.1. Přírodní materiál

Petroselinum sativum Hoffm. vzdušné části byly shromážděny během předkvětové fáze (jaro 2018) z oblasti Tanounate v severním Maroku (34 stupeň 32'9"N 4 stupeň 38'24"W). Klasifikace, identifikace a botanický název této rostliny byly ověřeny kvalifikovaným botanikem Pr. Bari Amina. Vzorek rostliny je uložen v herbáři Přírodovědecké fakulty Dhar El Mahrez Fez (vzorový exemplář: 18TA5001).

4.2. Extrakce

Extrakce byla provedena tak, jak je popsáno v Slighoua et al. [11]. Stručně řečeno, 10 g sušených nadzemních částí jemného prášku P. sativum bylo smícháno s methanolem (100 ml) a macerováno po dobu 3 hodin při teplotě 50 stupňů. Poté se filtrát koncentroval na rotační odparce do sucha, aby se zajistilo úplné odpaření rozpouštědla. Výsledný extrakt byl znovu rozpuštěn v destilované vodě (200 ml) a promyt třikrát hexanem a chloroformem (200 ml třikrát), aby se zbavily pigmentů a jiných nečistot. Konečná vodná fáze byla extrahována ethylacetátem (200 ml třikrát). Organická fáze (ethylacetát) byla zahuštěna, čímž byl získán polyfenolový extrakt. Výtěžek extrakce je 10,52 procenta.

Již dříve jsme publikovali práci na stejném extraktu, který pomocí analýzy HPLC-DAD ukázal, že se skládá z následujících polyfenolů: (1) kyselina ferulová, (2) kyselina skořicová, (3) kyselina galová, (4) kvercetin, (5) Myricetin, (6) Naringenin, (7) Hydrox-tyrosol [11].

4.3. Studujte zvířata

V této studii byly myši (švýcarští albíni) poskytnuty Animal House přírodovědecké fakulty Dhar el Mahraz Fez. Před zařazením do experimentů byly umístěny do skupin po šesti do konvenčních klecí a bylo jim umožněno dvoutýdenní adaptační období s volným přístupem k potravě a vodě a kontrolovanou teplotou 22 ± 2 stupně a v cyklu světlo/tma. 12 h/12 ​​h.

Experimenty byly prováděny v souladu s mezinárodními standardy pro léčbu a používání experimentálních zvířat [16] a Interní etický výbor pro zvířata (#09-12/2019/LBEAS).

4.4. Hodnocení antioxidační aktivity

4.4.1.2, 2-difenyl-1-pikrylhydrazyl (DPPH) test

DPPH je jednou z nejběžnějších chemických sloučenin používaných pro hodnocení antioxidační aktivity fenolických sloučenin |45. DPPH má nepárový elektron na můstkovém atomu dusíku. Princip tohoto testu je shrnut ve schopnosti extraktu redukovat tmavě fialový volný radikál DPPH na žlutavě zbarvenou redukci měřitelnou spektrofotometrií [28]. Série koncentrací extraktu byla připravena v methanolu, 10}0 μl každého z nich bylo přidáno do 750 μl methanolického roztoku DPPH (0,004 procenta). Po inkubační době 30 minut při 25 stupních byla měřena absorbance při 517 nm. Pro negativní kontrolu byl vzorek nahrazen methanolem. Procento DPPH bylo určeno podle následující rovnice:

(1)I=[(prázdný vzorek)/prázdný]×100

V procentech antiradikálové aktivity je Vzorek absorbance vzorku a Blank je absorbance negativní kontroly.

4.4.2. Test FRAP (Ferous Reduction Power).

Redukční síla železa (Fe3 plus) ve studovaném extraktu byla stanovena podle metody popsané v Mechchate et al. 【28】. Stručně, 100 μL extraktu v různých koncentracích byl smíchán s 500 μL fosfátem pufrovaného roztoku （PBS, 0,2 M, pH 6,6 ）a 500 μl 1% roztoku ferrikyanidu draselného K, Fe（CN）. Ty byly inkubovány ve vodní lázni při 50 stupních po dobu 20 minut. Poté bylo k reakční směsi přidáno 500 ul 10% vodného roztoku kyseliny trichloroctové (TCA), 100 ul 0,1% roztoku chloridu železitého FeCl3 a 0,5 ml destilované vody. Odečet absorbance této směsi byl proveden při 700 nm proti slepému pokusu obsahujícímu všechna činidla média kromě rostlinného extraktu. Výsledky jsou vyjádřeny jako 50procentní účinná koncentrace (EC50), která představuje koncentraci antioxidantů potřebnou k získání absorbance 0,5. Zvýšení absorbance odpovídá zvýšení redukční síly testovaného extraktu.

4.5. Test nuceného plavání s antidepresivní aktivitou (FST)

Porsoltův model neboli test nuceného plavání je prediktivní test aktivity antidepresivního typu. Myši jsou jednotlivě nuceny plavat ve válcové nádobě naplněné do výšky 12 cm vodou. Test trvá 6 minut, ale analyzují se pouze poslední 4 minuty testu. Zvíře je považováno za nehybné, když plave ve vzpřímené poloze a dělá jen několik pohybů, aby si udrželo rovnováhu ve vodě (doba nehybnosti).

Pro tento test byly použity celkem čtyři šarže po pěti myších. Všechny rostlinné extrakty byly podávány žaludeční sondou po dobu 21 dnů a test byl prováděn 1 hodinu po podání extraktů 21 dnů. Skupina A, negativní kontrola, dostala fyziologický roztok jako vehikulum. Skupina B, pozitivní kontrolní skupina, dostávala paroxetin v dávce 11 mg/kg. Skupiny C a D dostávaly PSPE v dávce 50 a 100 mg/kg, v daném pořadí.

Jednu hodinu po podání rostlinného extraktu byla počítána doba imobility po dobu 6 minut. První dvě minuty umožnily myši přizpůsobit se stresu a poté se myš časem unavila a znehybnila. Doba imobility byla počítána v sekundách a poté byla porovnána s dobou imobility myší v pozitivní kontrolní skupině (paroxetin) pro referenci [33].

4.6. Anxiolytická aktivita

4.6.1.Otevřené pole

Test otevřeného pole (OF) se používá k predikci anxiolytické aktivity, protože zvířata vykazují vysoký stupeň vyhýbání se centrální oblasti vzhledem k periferii. Používá se také jako průzkumný a lokomoční test. Plochu tvořily čtyři dřevěné stěny vysoké 40 cm rozmístěné na ploše 50×50 cm, rozdělené na 25 stejně velkých dlaždic označených černými čarami.

Pro tento test byly použity celkem čtyři šarže po pěti myších. Všechny rostlinné extrakty byly podávány žaludeční sondou po dobu 21 dnů. Dále byl test proveden 1 hodinu po podání rostlinného extraktu ve dnech 1, 7, 14 a skupina A, negativní kontrola, dostala fyziologický roztok jako vehikulum Skupina B, pozitivní kontrola, dostala bromazepam v dávce 1 mg/kg . Skupiny C a D dostávaly PSPE v dávce 50 a 100 mg/kg, v daném pořadí.

Po 60 minutách byl test proveden tak, že každá myš byla umístěna do centrálního čtverce, aby se prozkoumala aréna, aby se změřila celková ambulantní aktivita myší (počet celkových dlaždic, které myši překročily, tj. počet okrajových dlaždic a počet centrálních dlaždic, které myši překřížily všemi čtyřmi nohami) a čas strávený ve středu otevřeného pole [3146].

4.6.2. Test světlé a tmavé místnosti

Test světla a tmy se také používá k predikci anxiolytické aktivity, protože umožňuje snadné vyhodnocení chování zvířat souvisejících s úzkostí analýzou pohybů zvířete mezi dvěma oddíly různých barev a osvětlení. Úzkostlivější zvířata mají tendenci trávit méně času v osvětlené místnosti. Dřevěná světlo-tmavá krabice o rozměrech 44 × 21 × 21 cm se skládala ze dvou černobílých přihrádek, spojených průchodem (uprostřed otvor 7 × 7 cm, oddělující dvě přihrádky a umožňující přístup do jedné nebo druhé přihrádek). Osvětlený oddíl byl osvětlen lampou.

Pro tento test byly použity celkem čtyři šarže po pěti myších. Všechny rostlinné extrakty byly podávány žaludeční sondou po dobu 21 dnů. Test byl proveden 1 hodinu po podání rostlinného extraktu ve dnech 1, 7, 14 a 21. Skupina A, negativní kontrola, dostala fyziologický roztok jako vehikulum. Skupina B, pozitivní kontrola, dostávala bromazepam v dávce 1 mg/kg. Skupiny C a D dostávaly PSPE v dávce 50 a 100 mg/kg, v daném pořadí.

Po 60 minutách byl proveden pětiminutový test umístěním každé myši čelem k otvoru spojujícímu tmavý oddíl [47]. Po každém testu byla krabice vyčištěna alkoholem. Měřenými parametry byla doba strávená v osvětlené komoře a počet přechodů komory [48].

5. Závěry

Petržel, celosvětově denně používaná kulinářská bylina, představuje obrovské zdravotní přínosy a prostřednictvím této studie bylo prokázáno, že má pozoruhodnou antidepresivní a anxiolytickou aktivitu, dokonce lepší než klasické léky, zejména v dávce 100 mg/kg. Při hledání účinného léku s méně nebo téměř žádnými vedlejšími účinky by tato rostlina mohla být vhodnou alternativou. Tato práce podněcuje jeho každodenní konzumaci a také jeho vývoj na osvědčenou fytomedicínu.

K dokončení této práce je zapotřebí další výzkum, včetně provedení dalších behaviorálních testů se stejným extraktem, aby se potvrdila jeho účinnost. Proto je plánována biologicky řízená frakcionace fenolického extraktu P. satium za účelem identifikace klíčové složky odpovědné za pozorované anxiolytické a antidepresivní aktivity a stanovení jejich přesného mechanismu účinku.

Reference
1. Friedrich, MJ Deprese je hlavní příčinou invalidity po celém světě. JAMA 2017, 317, 1517. [CrossRef] [PubMed]
2. Lim, GY; Tam, WW; Lu, Y.; Ho, CS; Zhang, MW; Ho, RC Prevalence deprese v komunitě ze 30 zemí v letech 1994 až 2014. Sci. Rep. 2018, 8, 2861. [CrossRef]
3. Americká psychiatrická asociace. Diagnostický a statistický manuál duševních poruch (DSM-5®); Americká psychiatrická asociace: Washington, DC, USA, 2013; ISBN 0-89042-557-4.

4. Dinga, R.; Marquand, AF; Veltman, DJ; Beekman, AT; Schoevers, RA; van Hemert, AM; Penninx, BW; Schmaal, L. Předpovídání přirozeného průběhu deprese ze široké škály klinických, psychologických a biologických dat: Přístup strojového učení. Přel. Psychiatrie 2018, 8, 1–11. [CrossRef]
5. Daviu, N.; Bruchas, MR; Moghaddam, B.; Sandi, C.; Beyeler, A. Neurobiologické vazby mezi stresem a úzkostí. Neurobiol. Stres 2019, 11, 100191. [CrossRef]
6. Sanabria, E.; Cuenca, RE; Esteso, M.Á.; Maldonado, M. Benzodiazepiny: Jejich použití buď jako základní léky nebo jako toxické látky. Toxics 2021, 9, 25. [CrossRef] [PubMed]
7. Kanekar, S.; Sheth, CS; Ombach, HJ; Olson, PR; Bogdanova, OV; Petersen, M.; Renshaw, CE; Sung, Y.-H.; D'Anci, KE; Renshaw, PF Expozice hypobarické hypoxii u potkanů ​​rozdílně mění antidepresivní účinnost selektivních inhibitorů zpětného vychytávání serotoninu fluoxetinu, paroxetinu, escitalopramu a sertralinu. Pharmacol. Biochem. Chovej se. 2018, 170, 25–35. [CrossRef]
8. Es-Safifi, I.; Mechchate, H.; Amagnouje, A.; Jawhari, FZ; Bari, A.; Cerruti, P.; Avella, M.; Andriy, A.; Andriy, D. Léčivé rostliny používané k léčbě akutních problémů trávicího systému v regionu Fez-Meknes v Maroku: Etnofarmakologický průzkum. Etnobotanika. Res. Appl. 2020, 20. [CrossRef]
9. Amaghnouje, A.; Mechchate, H.; Es-Safifi, I.; Boukhira, S.; Aliqahtani, AS; Noman, OM; Nasr, FA; Conte, R.; Calarco, A.; Bousta, D. Subakutní hodnocení toxicity a antidepresivních účinků polyfenolů Origanum Majorana L. u myší švýcarských albínů. Molekuly 2020, 25, 5653. [CrossRef]
10. Agyare, C.; Appiah, T.; Boakye, YD; Apenteng, JA Petroselinum crispum: Recenze. Med. Koření Veg. Afr. 2017, 527–547. [CrossRef]
11. Slighoua, M.; Mahdi, I.; Di Cristo, F.; Amagnouje, A.; Grafov, A.; Boucetta, N.; Bari, A.; Bousta, D. Hodnocení in vivo estrogenních a protizánětlivých aktivit hydro-ethanolického extraktu a polyfenolické frakce petržele (Petroselinum sativum Hoffm.). J. Ethnopharmacol. 2020, 265, 113290. [CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei, MH; Abbasabadi, Z.; Ardekani, PANÍ; Rahimi, R.; Farzaei, F. Petržel: Přehled etnofarmakologie, fytochemie a biologických aktivit. J. Tradit. Brada. Med. 2013, 33, 815–826. [CrossRef]
13. Chaves, DS; Frattini, FS; Assafifim, M.; de Almeida, AP; Zingali, RB; Costa, SS Fenolické chemické složení extraktu Petroselinum Crispum a jeho účinek na hemostázu. Nat. Prod. Commun. 2011, 6, 1934578X1100600709. [CrossRef]
14. Mahendra, P.; Bisht, S. Anti-úzkostná aktivita Coriandru m Sativum hodnocená pomocí různých experimentálních modelů úzkosti. Indian J. Pharmacol. 2011, 43, 574. [CrossRef]
15. Shahamat, Z.; Abbasi-Maleki, S.; Mohammadi Motamed, S. Hodnocení antidepresivních účinků vodných a ethanolických extraktů z ovoce Pimpinella Anisum u myší. Avicenna J. Phytomed. 2016, 6, 322–328. [PubMed]
16. Es-Safi, I.; Mechchate, H.; Amagnouje, A.; Jawhari, FZ; Al Kamaly, OM; Imtara, H.; Grafov, A.; Bari, A.; Bousta, D. Pohled do anxiolytik a antidepresiv podobných vlastností Carum carvi L. a jejich spojení s jeho antioxidační aktivitou. Life 2021, 11, 207. [CrossRef]
17. Zheng, X.; Cheng, Y.; Chen, Y.; Yue, Y.; Li, Y.; Xia, S.; Li, Y.; Deng, H.; Zhang, J.; Cao, Y. Ferulic Acid zlepšuje depresivní chování u prenatálně stresovaných potomků potkanů ​​prostřednictvím protizánětlivé aktivity a osy HPA. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 493. [CrossRef]
18. Diniz, LRL; de Souza, MTS; Barboza, JN; de Almeida, RN; de Sousa, DP Antidepresivní potenciál skořicových kyselin: Mechanismy účinku a perspektivy ve vývoji léků. Molekuly 2019, 24, 4469. [CrossRef]
19. Lee, B.; Yeom, M.; Shim, I.; Lee, H.; Hahm, D.-H. Ochranné účinky kvercetinu na symptomy podobné úzkosti a neurozánět indukovaný lipopolysacharidem u potkanů. Evid. Založený doplněk. Alternativní. Med. 2020, 2020, 4892415. [CrossRef]
20. Karkovič Markovič, A.; Tori's, J.; Barbaric, M.; Jakobuši´c Brala, C. Hydroxytyrosol, tyrosol a deriváty a jejich potenciální účinky na lidské zdraví. Molekuly 2019, 24, 2001. [CrossRef]
21. Hinneburg, I.; Dorman, HD; Hiltunen, R. Antioxidační aktivity extraktů z vybraných kulinářských bylin a koření. Food Chem. 2006, 97, 122–129. [CrossRef]
22. Nunes, CS; Maes, M.; Roomruangwong, C.; Moraes, JB; Bonifacio, KL; Vargas, HO; Barbosa, DS; Anderson, G.; de Melo, LGP; Drozdstoj, S. Snížená kvalita života u poruch nálady je spojena se zvýšeným neurooxidačním stresem a hladinami bazálních hormonů stimulujících štítnou žlázu a užíváním antikonvulzivních stabilizátorů nálady. J. Eval. Clin. Praxe. 2018, 24, 869–878. [CrossRef] [PubMed]
23. Bonifácio, KL; Barbosa, DS; Moreira, EG; Coneglian, CF; Vargas, HO; Nunes, SOV; Moraes, JB; Maes, M. Zvýšená toxicita nitro-oxidačního stresu jako hlavní determinant zvýšeného krevního tlaku u poruch nálady. J. Afekt. Porucha. 2021, 278, 226–238. [CrossRef] [PubMed]
24. Eick, SM; Barrett, ES; van 't Erve, TJ; Nguyen, RH; Bush, NR; Milne, G.; Swan, SH; Ferguson, KK Asociace mezi prenatálním psychologickým stresem a oxidačním stresem během těhotenství. Pediatr. Perinat. Epidemiol. 2018, 32, 318–326. [CrossRef]
25. McAllister, MJ; Basham, SA; Waldman, HS; Smith, JW; Mettler, JA; Butawan, MB; Bloomer, RJ Účinky psychického stresu během cvičení na markery oxidačního stresu u mladých zdravých, trénovaných mužů. Physiol. Chovej se. 2019, 198, 90–95. [CrossRef] [PubMed]
26. Desrumaux, C.; Risold, P.-Y.; Schroeder, H.; Deckert, V.; Masson, D.; Athias, A.; Laplanche, H.; Le Guern, N.; Blache, D.; Jiang, X.-C. Nedostatek fosfolipidového transferového proteinu (PLTP) snižuje obsah vitaminu E v mozku a zvyšuje úzkost u myší. FASEB J. 2005, 19, 1–16. [CrossRef]