Vliv antidiabetik na ledviny krys

Kontakt: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

R Mary Sujin a kol

Abstraktní

Optimalizace této studie jeproti-diabetikúčinek vledvinaalbínských potkanů ​​Wistar pomocí Gymnema Sylvestre (Retz) R.Br. bylinný prášek. Histopatologické a biochemické testy byly provedeny v orgánu a krevním séruledvina. Různé koncentrace prášku ošetřené jako 5, 10, 15, 20/g/25 dní. Účinek surových léků u potkanů ​​snížil tělesnou hmotnost a rozsahdiabetikůbyl hodnocen vledvinaměřením hladin vybraných krevních parametrů bílkovin, glukózy, cholesterolu, inzulinu a triglyceridů a vlivu histopatologie. Surové léky snížily tělesnou hmotnost a hmotnost ledvin zvířat a snížily významné hladiny inzulínu, bílkovin, triglyceridů, cholesterolu a glukózy. Data byla analyzována pomocí matematických výpočtů, hodnoty byly vyjádřeny jako významné.

klíčová slova:Proti-diabetikefekt, Gymnema Sylvestre, Histopatologický a biochemický test vledviny.

Cistanche tubulosa zabraňuje onemocnění ledvin, kliknutím sem získáte vzorek

Úvod

Bylinkářství je tradiční léčivá nebo lidová medicína založená na používání rostlin a rostlinných extraktů. Bylinné léky jsou na trhu snadno dostupné v obchodech se zdravou výživou bez lékařského předpisu a jsou široce používány v Indii, Číně, USA a po celém světě. Podle nedávného průzkumu většina lidí, kteří užívají bylinné léky, neinformuje své lékaře o jejich konzumaci, což může způsobit abnormální výsledky testů a zmatek ve správné diagnóze. Interakce léčivých rostlin mohou vést k neočekávaným koncentracím terapeutických léčiv. Některé rostlinné produkty interferují s imunotesty používanými pro monitorování koncentrací terapeutických léčiv. Nežádoucí účinky mohou způsobit i bylinné léky. Proto obecný názor, že vše přirozené je bezpečné, není správné.

Gymnema Sylvestre je velká dřevitá šplhavka. Jeho hlavní složkou je kyselina gymnemová, která máproti-diabetika vlastnosti hyperglykémie. Odstraňuje chuť cukru a má se za to, že neutralizuje nadměrný cukr přítomný v těle při diabetes mellitus¹.

Celá rostlina je žaludeční, povzbuzující, laxativní a diuretická. Je dobrý při kašli, žluči a bolestech očí. Pokud se listy rostliny žvýkají, chuť na sladké a hořké látky je potlačena.

Kyselina germánská je tvořena molekulami, jejichž uspořádání atomů je podobné jako u molekul glukózy. Tyto molekuly naplní receptorová místa na chuťových pohárcích po dobu jedné až dvou hodin, čímž zabrání aktivaci chuťových pohárků molekulami cukru přítomnými v potravině. Podobně molekuly podobné glukóze v kyselině gymnemové vyplňují receptorová místa v absorpčních vnějších vrstvách střeva, čímž brání střevu absorbovat molekuly cukru.

Bezpochyby dva z nejvíce přehlížených, pokud jde o detoxikaci, jsou játra a ledviny. Když jsou játra přetížená, ledviny se snaží ochabnout. Ledviny jsou dva orgány ve tvaru fazole, každý o velikosti vašeho prvního. Přestože jsou ledviny hmotnostně malé orgány, přijímají obrovské množství (přibližně 20 procent) krve čerpané srdcem. Každý den ledviny zpracují asi 200 litrů krve, aby vysily 2 litry odpadních produktů a přebytečné vody. Bez ledvin by se odpadní látky a toxiny hromadily v krvi na nebezpečnou úroveň a následně by poškozovaly tělo. V důsledku nahromadění toxických látek nebo zanedbávání stravy se tyto důležité orgány filtrující toxiny mohou zanítit, infikovat a vytvořit ledvinové kameny nebo úplně selhat.

Stejně jako prakticky všechny tělesné orgány podléhají ledviny řadě poruch a onemocnění. Poškození ledvin obvykle probíhá postupně a bez příznaků a až po letech onemocnění ledvin se funkce ledvin znatelně sníží. Při onemocnění ledvin lze obecně ztratit až 75 procent funkcí ledvin, než se účinky stanou akutně zřejmými. Pokud se onemocnění ledvin neléčí, může se stát nevratným a může být významnou hrozbou pro vaše zdraví. Lidé s cukrovkou, vysokým krevním tlakem nebo s onemocněním ledvin v rodinné anamnéze také potřebují aktivně předcházet onemocnění ledvin a udržovat orgány v optimálním stavu.

Onemocnění ledvin spojené s kyselinou aristolochovou (nazývané čínská bylinná nefropatie) může poměrně rychle vést k selhání ledvin v konečném stádiu. Čínská bylinková nefropatie byla poprvé identifikována v Belgii v 90. letech 20. století. Bylo zjištěno, že asi 100 pacientů se selháním ledvin přijalo „režim hubnutí“, který byl později identifikován jako kyselina aristolochová. Biopsie ledvin u těchto pacientů byly velmi podobné a vykazovaly rozsáhlé a těžké zjizvení ledvin. Nejméně 70 z těchto pacientů vyžadovalo dialýzu nebo transplantaci ledvin. Další případy čínské bylinné nefropatie byly později identifikovány ve Francii, Spojeném království a Spojených státech. V důsledku toho v roce 2001 vydala americká FDA přísné varování a zákaz dovozu doplňků stravy obsahujících tuto sloučeninu.

V této studii účinky různých koncentrací G. Sylvestre u albínských potkanů ​​Wistar prostřednictvím histopatologické a biochemické reakce u potkanů.

Materiály a metody

Sběr a příprava surových drog

Rostlina byla shromážděna a spojena s herbářem Holy Cross College v Nagercoil, Kanyakumari District, Tamilnadu-Indie. Vzorky byly vysušeny ve stínu a hrubě práškované.

Pokusná zvířata

Potkani Albino Wister obou pohlaví o hmotnosti 180-210g byli drženi v oddělených klecích za standardních podmínek prostředí s teplotou 20 až 30 °C a vlhkostí byla zajištěna standardní potrava pro potkany a voda ad libitum. Experimentální postupy byly prováděny v přísném souladu s předpisy institucionální etické komise pro zvířata.

Studijní protokol

Byla provedena pilotní studie ke studiu vztahu dávka-odpověď rostlinného prášku Gymnema, dávka 5, 10, 15, 20, 25 g s rýží a mlékem po dobu 25 dnů.

Léčebný protokol

Zvířata byla rozdělena do 5 skupin po 5 zvířatech a ošetřena podle protokolu uvedeného níže.

Kontrolní skupina (G1):

Léčebná skupina (G2): Léčebná skupina (G3): Léčebná skupina (G4): Léčebná skupina (G5):

Zvířatům byla podávána normální strava rýže a mléka po dobu 25 dnů.

Zvířatům bylo podáno 5 g prášku s rýží a mlékem.

Zvířatům bylo podáno 10 g prášku s rýží a mlékem.

Zvířatům bylo podáno 15 g prášku s rýží a mlékem.

Zvířatům bylo podáno 20 g prášku s rýží a mlékem.

Snížení tělesné hmotnosti u krys bylo provedeno tak, že po experimentálním období přes noc hladověly. Byli usmrceni anestezií za použití par chloroformu a krev byla odebrána krvácením z srdeční tepny a okamžitě přenesena do zkumavky ošetřené EDTA. Krev byla poté centrifugována při 4000 otáčkách za minutu po dobu 10 minut, aby se odstranily červené krvinky a získala se plazma. Ledvina byla vypreparována, zvážena a uchována pro histopatologické studie. Ledviny z různých skupin byly zváženy a byly zaznamenány rozdíly v hmotnosti.

Histopatologické studie

Řezy žaludku byly konzervovány v 10% formalínu. Byly obarveny hematoxylinem a eosinem, obarvené řezy byly pozorovány pod mikroskopem, aby se odhadl rozsah diabetického Mellitu.

Biochemické testy

Odhad glukózy:Směs činidel (Phosfátový pufr pH 7,5:250 mmol/1, Fenol 5 mmol/1, 4- Aminoantipyrin 0,5 mmol/1, Glukózaoxidáza (GOD) Větší nebo rovno 10 KU/1 Peroxidáza (POD), větší nebo rovna 1 KU/1) byla odebrána do tří zkumavek, každá 1000 ul standard (S), test (T) a slepý pokus (B). Do (T) bylo přidáno 10 ul séra. Standardní roztok 10 ul/100 mg/dl byl přidán do (S) a 10 ul destilované vody bylo přidáno do (B). Obsah byl dobře promíchán a inkubován

po dobu 10 minut při 37 °C. Absorbance (S) a (T) byla odečtena proti reakčnímu činidlu

(B) spektrofotometricky. Intenzita byla měřena při 505 nm.
Odhad bílkovin:Směs biuretových činidel Hydroxid sodný 500 mmol/1, vínan sodno-draselný 35 mmol/1, jodid draselný 30 mmol/1, síran měďnatý 10 mmol/1) byla odebrána do tří zkumavek, každá 1000 ul standard (S) a testovací (T) slepý pokus (B) a bylo přidáno 10 ul séra (T). Standardní roztok 10 ul/6 g/dl byl přidán do standardu (S) a 10 ul destilované vody bylo přidáno do (B). Obsah byl dobře promíchán a inkubován po dobu 10 minut při 37 °C. Absorbance (S) a (T) byla odečtena proti činidlu (B) spektrofotometricky. Intenzita byla měřena při 546 nm.

Odhad cholesterolu:Směs činidel (Goodův pufr pH 6,7:50 mmol/1, Fenol5 mmol/1, 4-Aminoantipyrin 0,3 mmol/1, Cholesterol esteráza (CHE) Větší nebo rovno 200 U/1, Cholesteroloxidáza (CHOD) Větší nebo rovna 50 U/1, Peroxidáza (POD) Větší nebo rovna 3 kU/1) byly odebrány ve třech zkumavkách, každá 1000 ul standardní (S) a testovací (T) slepý pokus (B) a bylo přidáno 10 ul séra (T). Standardní roztok 10 ul/200 mg/dl byl přidán do (S) a 10 ul destilované vody bylo přidáno do (B). Obsah byl dobře promíchán a inkubován po dobu 10 minut při 37 °C. Absorbance (S) a (T) byla odečtena proti činidlu (B) spektrofotometricky. Intenzita byla měřena při 505 nm.

Odhad triglyceridů:Směs činidel Goodův pufr pH 7,2:50 mmol/1, 4-chlorofenol 4 mmol/1, ATP 2 mmol/1, Mg2 plus 15 mmol/1, glycerokináza (GK) větší nebo rovno až {{20}},4 kU/1, peroxid (POD) větší nebo rovný 2 kU/1, lipoproteinová lipáza (LPL) větší nebo rovný 2 kU/1, 4- Aminoantipyrin 0,5 mmol/1, Glycerol-3-fosfát-oxidáza Větší nebo rovno 0,5 kU/1) ) byly odebrány do tří zkumavek, každá 1000 ul standardní (S) a testovací (T) slepý pokus (B) a 10 ul séra bylo přidáno (T). Standardní roztok 10 ul/200 mg/dl byl přidán do (S) a 10 ul destilované vody bylo přidáno do (B). Obsah byl dobře promíchán a inkubován po dobu 10 minut při 37 °C. Absorbance (S) a (T) byla odečtena proti činidlu (B) spektrofotometricky. Intenzita byla měřena při 546 nm.

Odhad inzulinu:Kvantitativní měření inzulínu bylo provedeno kompetitivním enzymovým imunosorbentním testem na pevné fázi (ELISA). Inzulín byl odhadnut v laboratořích Vivek, Nagercoil.

Statistická analýza

Všechny hodnoty byly vyjádřeny jako průměr ± SD. Data byla analyzována pomocí matematických výpočtů, hodnoty byly vyjádřeny jako významné.

Výsledky a diskuse

Biochemické parametry

V tomto výzkumu potkani krmení G. Sylvestre na G2 vykazovali pokles tělesné hmotnosti ze 178.0 ± 17,6 na 156 ± 12,2 g. Podobně u zvířat krmených G3, G4 a G5 vykázaly významný pokles ve srovnání s počátečním dnem na konci 25. dne (tabulka 1).

V G2 došlo k mírnému nárůstu (0.20 ± 0.05) ve srovnání s G1 (0.13 ± 0.02). Ale G4 a G5 vykazovaly pokles hladiny inzulínu ve srovnání s G1. G. Sylvestre významně ovlivnil plazmatický inzulínový profil normálních samců albínských potkanů ​​ve skupinách s vyšší koncentrací G4 a G5 (tabulka 2).

Hladina glukózy vykazovala normální hodnotu 88,98 ± 4,6, 84,87 ± 4,3 a 83,70 ± 4,2 v G1, G2 a G3, v daném pořadí. Avšak ve skupině s vyššími koncentracemi G4 a G5 obsah glukózy stabilně klesal s maximálním poklesem v G5. Ve skupinách s vyšší koncentrací G4 a G5 obsah glukózy stabilně klesal s maximálním poklesem v G5 (tabulka 3).

G2 a G3 nedokázaly vytvořit statisticky významné snížení. Ale G4 a G5 (7,94 ± 0,4 a 8,12 ± {{10}},1 mg/dl) vykázaly mírný nárůst ve srovnání s G1 (7,16 ± 0,3 g/dl). G. Sylvestre významně neovlivňuje profil plazmatických proteinů normálních potkaních samců albínů ani do vyšší koncentrace G5 (tabulka 4).

Hladina triglyceridů vykazovala normální hodnotu 51,47 ± 3,8, 44,75 ± 2,7 a 42,30 ± 3,7 gm/dl v G1, G2 a G3, v daném pořadí. U skupin s vyšší koncentrací G4 a G5 však hodnota trvale klesala s maximálním poklesem v G5 (tabulka 5.).

Rozdíl v hladině cholesterolu 72.{3}}5 ± 4,0 a 49,40 ± 5,9 mg/dl byl zaznamenán u potkanů ​​krmených přípravkem Gymnema až G4 a G5 ve srovnání s hodnotou G1 87,15 ± 3,6 mg/dl. Skupina s nízkou dávkou G2 a G3 byla podobná normální (tabulka 6).

Histopatologické studie

Výsledky histopatologických studií jsou uvedeny na destičce 1. Řezy z G1 vykazovaly normální histologii ledvin krys. Proximální stočené tubuly, distální stočené tubuly a renální tělíska s glomerulem a glomerulárním pouzdrem jsou velmi jasné a výrazné. Renální tělísko s viscerální vrstvou, parietální vrstvou a kapsulárním prostorem je jasně pozorováno. Zvířata ošetřená práškem na G2 a G3 nebyla příliš ovlivněna. Léčba G (4) a (5) ledvin u zvířat krmených práškem vykazuje nekrózu, vakuolizaci a narušení glomerulárních tubulů. U obou vysokých dávek (15 a 20 g/kg tělesné hmotnosti) bylinného prášku došlo ke středně těžkým degenerativním změnám a nekróze epitelu ledvinových tubulů a glomerulů. Vakuolizace byla také zaznamenána u obou dávek G4 a G5; toto však nebylo pozorováno u skupin s nízkou dávkou tělesné hmotnosti G2 a G3.

Významné změny byly pozorovány v hladinách sérového cholesterolu a hladin triglyceridů u zvířat krmených nízkou dávkou G. Sylvestre, což může být způsobeno normální stravou a normálními potkany, jak bylo pozorováno. Při vyšší koncentraci tělesné hmotnosti G4 a G5 došlo ke snížení cholesterolu, což může být způsobeno tím, že gymnemagenin a gymnemové kyseliny interagovaly se steroidy, zejména cholesterolem a žlučovými kyselinami odvozenými od CA ve střevním traktu potkanů. Snížení cholesterolu tedy může být způsobeno fekálním vylučováním cholesterolu, což může být způsobeno přerušením tvorby micel obsahujících cholesterol a žlučové kyseliny ve střevě a následnou interferencí s absorpcí cholesterolu. Snížení hladiny cholesterolu, triglyceridů a volných mastných kyselin v plazmě bylo pozorováno ve dvou studiích u pacientů s diabetem, kteří kromě obvyklé antidiabetické léčby (např. inzulín, glibenklamid nebo tolbutamid) dostávali doplňky Gymnemy; tyto hladiny se postupně zvyšovaly od výchozí hodnoty u pacientů v kontrolní skupině, kteří neužívali léky. Je třeba poznamenat, že v těchto studiích, které byly navrženy tak, aby prokázaly antidiabetické účinky přípravku Gymnema, bylo snížení lipidů sekundárním cílem.

Tradiční zkušenosti mohou být jen malou pomocí při rozpoznání škodlivých interakcí s konvenčními léky^9,10. Mortalita a změny chování jsou považovány za základní parametry pro posouzení toxicity jakéhokoli rostlinného produktu. Listy G. Sylvestre byly široce používány jako zdravé potraviny, protože uživatelé často očekávají snížení hmotnosti a zlepšení diabetu kvůli jejich schopnosti potlačit chuť na sladkosti a inhibovat absorpci glukózy8.

V této studii se přírůstek tělesné hmotnosti a příjem potravy snížily v závislosti na dávce u potkanů, kterým byl podáván G. Sylvestre. Snížení tělesné hmotnosti mohlo být způsobeno snížením příjmu potravy. Kromě toho je známo, že tento rostlinný prášek potlačuje receptor chuti na sladké na jazyku, což může být další příčinou.

Změny závislé na dávce byly pozorovány také u semen pískavice řeckého sena. V tomto pozorování nebyla pozorována žádná významná mortalita. Možným důvodem může být to, že Gymnema nezasahuje do různých vitálních funkcí zvířete, a proto nepředstavuje závažnou toxicitu, která může vést ke smrti zvířete. Listy zvyšují hladinu inzulínu, podle výzkumu na zdravých dobrovolnících2, pravděpodobně kvůli regeneraci buněk slinivky břišní³.

Toxické látky mohou ovlivnit ledviny a narušit jejich fyziologické funkce. Tyto účinky jsou zjistitelné a/nebo kvantifikovatelné křížovou kontrolou normálně očekávaných funkcí ledvin při vylučování bezprahových dusíkatých odpadních produktů metabolismu, jako je močovina a kreatinin. Také stanovením schopnosti ledvin filtrovat a reabsorbovat prahové látky, které tělo potřebuje, jako jsou elektrolyty, lze zjistit toxicitu pro ledviny7. Někteří autoři prokázali, že odhad hladin močoviny a kreatininu není dostatečně citlivý pro detekci nízké úrovně renální toxicity nebo poškození. Jiní pozorovali, že absolutní hmotnost ledvin je relativně citlivým indikátorem nefrotoxicity pro známé nefrotoxické látky. Nefrotoxicita byla proto definována jako zvýšená hmotnost ledvin (buď absolutní nebo relativní) spojená s významnou změnou alespoň jednoho sérového parametru ⁶.

Histopatologické studie byly provedeny v játrech krys. Jaterní fibróza byla indukována CCL4 a rozsah onemocnění byl hodnocen měřením hladiny HP a TBL pomocí Trigonella foenumgraecum¹¹Léčba zvířat pomocí G2 a G3 nebyla G. Sylvestrem příliš ovlivněna. Řezy ledvin u zvířat krmených práškem do G4 a G5 vykazují nekrózu, vakuolizaci a narušení glomerulárních tubulů. U obou vysokých dávek (15 a 20 g/kg tělesné hmotnosti) bylinného prášku došlo ke středně těžkým degenerativním změnám a nekróze epitelu ledvinových tubulů a glomerulů. U obou dávek byla také zaznamenána vakuolizace; toto však nebylo pozorováno ve skupinách s nízkou dávkou G2 a G3. Nekróza a buněčná infiltrace byly zaznamenány v některých glomerulech a renálních tubulech potkanů ​​ve skupině s vysokou dávkou.

Glomeruly, protože přijímají čtvrtinu srdečního výdeje a jsou perfundovány nejvyšším tlakem ze všech kapilárních řečišť v těle, jsou náchylné k poranění řadou léků a jiných toxických látek. Tyto látky mohou vést k poškození jedním ze dvou základních mechanismů: 1) přímé toxické poškození závislé na dávce; 2) nepřímé, imunologicky zprostředkované poškození, do značné míry závislé na dávce. Ledviny z kontrolních zvířat vykazovaly normální renální morfologii. Vzhledem k tomu, že léčivé byliny si spotřebitelé obvykle sami předepisují, chybí doporučení pro užívání předepsaných léků, jako je dávka, způsob a frekvence podávání, které jsou kontrolovány a kontrolovány předepisujícím lékařem. Tyto faktory zvyšují riziko toxicity Gymnemy, protože konzumenti užívají extrakt tak dlouho, dokud jim stav trvá, a to i ve zvýšených dávkách. Extrakt z listů Gymnema Sylvestre: 52-týdenní studie dietní toxicity u potkanů ​​Wistar⁵.

V ledvinách byly histopatologické změny jako akutní tubulární nekróza s difuzním intersticiálním a glomerulárním krvácením. To naznačuje, že došlo k ireverzibilnímu buněčnému poškození ovlivňujícímu epiteliální parenchym a endoteliální buňky. Histologie ledvin léčených potkanů ​​vykazovala rysy konzistentní s poškozením ledvinového epitelu toxiny. Bylo zjištěno, že mnoho rostlinných přípravků vykazuje renální tubulární nekrózu vykazující rozsáhlou intersticiální fibrózu a závažnou tubulární ztrátu, která je nejvýraznější ve zevním kortexu4 (plocha 1).

Závěr

G. Sylvestre nepředstavuje závažné ohrožení pro diabetiky v koncentracích do 10 g/kg tělesné hmotnosti. Vyšší koncentrace 15 a 20 g/kg tělesné hmotnosti způsobují histopatologické změny, jejich závažnost je velmi snížena a dávka do 10 g/kg tělesné hmotnosti neovlivňuje bílkoviny, glukózu, inzulín, cholesterol nebo triglyceridy. G. Sylvestre lze na doporučení lékaře použít v omezeném dávkování při různých onemocněních.

Reference

1. Shanmugasundaram KR, Panneerselvam C, Sumudram P a Shanmugasundaram ER, 1983. Změny enzymů a využití glukózy u diabetických králíků účinekGymnema Sylvestre, J. Ethnopharmacol 2: 205-34.

2. Beckles GLA, American Diab AK, Mathur KK, Datta SK, Tandon a Dikshith TSS, 1998. Centrum pro výzkum průmyslové toxikologie,Diabetes Péče 21:1432-1438.

3. Mhasker KS a Caius JF, 1930. Studium indických léčivých rostlin. II.Gymnema SyvestreR.Br,,Indický. J. Med. Res. Paměti 16: 72-75.

4. Vanherweghem JL, Depierreux M, Tielemans C, Abramowicz D, Dratwa M, Jadoul M, Richard C, Vandervelde D, Verbeelen D a Vanhaelen-Fastre R, 1993. Rychle progresivní intersticiální renální fibróza u mladých žen,čínština Byliny Lanceta 341 : 387–391.

5. Ogawa Y, Sekita K, Umemura T, Saito M, Ono A, Kawasaki Y, Uchida O, Matsushima Y, Inoue T a Kanno J,2004. Gymnema Sylvestreextrakt z listů: 52-týdenní studie dietní toxicity u potkanů ​​Wistar,Shokuhin Eiseigaku zasshi, 45(1): 8-18.

6. Srivasta S, Srivastava AK, Patnaik GK a Dhawan BN. 1996. Vliv picrolivu na regeneraci jater u potkanů,Fitoterapie, 67: 252-256.

7. Barzaghi N, Creama F, Gatti G, Pifferi G a Perucca E, 1990. Farmakokinetické studie komplexu silybin-fosfatidylcholin u zdravých lidských subjektů,Eur. J. Lék Meta Farmakokinet 15: 333-338.

8. Ueno G, 1997. AplikaceGymnema sylvestrevýtažky v potravinách,Shokuhin na Kagaku 1 : 100-103.

9. De Smet PAGM, 1993.Úvod do bylinné farmakoepidemiologie.J. Ethnopharmacol 38: 197-208.

10. Atherton DJ. 1994, Směrem k bezpečnějšímu používání tradičních léků je zapotřebí větší povědomí o toxicitě.BMJ, 308: 673-674.

11. Santha Rani Thakur, Saraswathy GR, Maheswari E, Sunil Kumar N, Hazarathiah T, Sowmya K, Dwarakanadha Reddy P a Ramesh Kumar B, 2007. Inhibice jaterní fibrózy vyvolané CCl4Trigonella foenumgraecum L, Přírodní Produkt Záře 6(1): 11-17.