Studie neuroendokrinně-imunitní funkce fenylethanoidních glykosidů byliny Cistanche žijící v poušti na modelu perimenopauzálních potkanů

další informace:ali.ma@wecistanche.com

Shuo Tiana a kol

Abstraktní

Etnofarmakologický význam:

Pouštní životCistanchebylinabyla poprvé zaznamenána v "Shen Nong'Herbal Classic" a uvedena jako nejlepší rostlinná medicína v ní.fenylethanoidglykosidyjsou indikativní komponenty pro identifikaci a určení obsahu života v pouštiCistanchebylinav čínském lékopisu, který je také jednou z hlavních účinných složek. V tomto výzkumu jsme zkoumali mechanismusfenylethanoidglykosidyživota v pouštiCistanchebylinana perimenopauzální model krys.

Cíl:

Účelem této studie je zkoumat účinkyfenylethanoidglykosidyDesertliving Cistancheherb (PGC) naneuroendokrinní-imunnífunkce perimenopauzálního syndromu u perimenopauzálních modelových potkanů.

Materiály a metody:

Byly vybrány krysí samice Wistar. Levé vaječníky u všech potkanů ​​kromě slepé kontrolní skupiny (BC) byly odstraněny a pravé vaječníky byly odstraněny z 80 procent. Vaginální stěr ukázal nepravidelné změny estrálního cyklu u perimenopauzálního modelu potkanů. A perimenopauzálním modelovým krysám byl podán gengnian'an,fenylethanoidGlykosidyz DesertlivinguCistanchebylinavysoká, střední, nízká suspenze, která je 450 mg/(kg den), 133,33 mg/(kg den), 66,67 mg/(kg den), 33,33 mg/(kg den); skupině BC a modelové skupině (MC) byla podávána destilovaná voda ve stejném objemu jako skupině léčiv po dobu 30 po sobě jdoucích dnů. Skóre horizontální vertikální zátěže bylo měřeno po 29 dnech podávání. Po posledním podání byla odebrána krev z břišní aorty a byly měřeny hladiny E2, LH, FSH, GnRH, BGP v séru a hladiny -EP v plazmě. Byly vypočteny orgánové indexy brzlíku, sleziny a dělohy. Byl měřen obsah estrogenových receptorů (ER) v tkáni hypotalamu, hypofýzy a dělohy a obsah androgenního receptoru (AR) v homogenátu hypotalamu. Pomocí HE barvení byly pozorovány patologické změny brzlíku, sleziny, dělohy, vaječníků.

Výsledek:

Ve srovnání s MC zvyšuje PGC aktivitu, orgánový index (brzlík, slezina, děloha), E2, T, hladinu BGP v séru, hladinu -EP v plazmě, hladinu AR v hypotalamu, hladinu ER v hypotalamu, hypofýze, děloze u perimenopauzálních modelových krys. A také snížila hladiny FSH, LH, GnRH v séru a zlepšila děložní a vaječníkové léze u perimenopauzálních krys.

Závěr:

Každá dávka PCG by mohla působit proti poruše pohlavního hormonu u perimenopauzálních krys, napravit nerovnováhu hladin ER a AR, posílit a obnovit účinek dělohy a nervových buněk hypotalamu a zlepšitimunnífunkce.

klíčová slova:fenylethanoidglykosidyživota v poušti,Cistanchebylina, Perimenopauzální model potkanů,Neuroendokrinní-imunnífunkce

fenylethanoidglykosidyzCistancheBylinamáNeuroendokrinní-imunnífunkce

Klikněte na představec Cistanche

1. Úvod

Se stárnutím populace stoupá výskyt perimenopauzálního syndromu. Některé studie zjistily, že věk nástupu perimenopauzálního syndromu mezinárodně klesá a snížil se z 65 na 35 let. Moderní medicína se domnívá, že perimenopauzální syndrom označuje symptomy způsobené poklesem funkce vaječníků (Miao et al., 2017a,b). Hladina estrogenu je nízká, což způsobuje abnormální funkce, jako jsou endokrinní, nervové aimunnífunkcí. Hlavními klinickými projevy jsou návaly horka, pocení, bušení srdce, nespavost, podrážděnost, nepravidelná menstruace, osteoporóza a výskyt kardiovaskulárních onemocnění (Lobo et al., 2014; Alvarado-García et al., 2015), které vážně ovlivňují životy. perimenopauzálních žen. Hlavní metodou léčby tohoto syndromu je hormonální substituční terapie (HRT), ale dlouhodobá terapie substitucí estrogenů může způsobit nežádoucí účinky, jako je koprofagie, distenční bolest prsu, karcinom endometria, rakovina prsu a zvýšený výskyt kardiovaskulární a cerebrovaskulární onemocnění a je náchylný k recidivám (Perrone et al., 2013). Tyto příznaky omezují jejich klinickou aplikaci, proto lidé věnují problémům tohoto zvláštního stadia menopauzy stále větší pozornost.

Charakteristiky syndromů, jako jsou „vnitřnosti“, „stará srážlivost krve“, „nemoc lilie“, „syndrom deprese“ a „neposlušnost“, zaznamenané v tradiční čínské medicíně, jsou podobné jako u moderního lékařského menopauzálního syndromu. Patří do kategorie různých příznaků před a po menopauze. "Suwen: Shanggu Tianzhen Lun," řekl: "Kanál Ren je slabý, když bylo lidem 49 let, a průchozí plavidlo se má snížit, esence stimulující sex je vyčerpaná a další jevy, proto žena ztrácí funkci plod." A esence stimulující sex je transformována ledvinovou esencí, takže Tradiční čínská medicína (TCM) věří, že hlavním patogenem onemocnění je renální deficit (Peng, 2014). Studie také ukázaly, že pokles funkce vaječníků je v terminologii TCM příčinou syndromu ledvinové astenie. Snížení hladin E2, LH, FSH je výrazem renální astenie (Liu et al., 2010) a studie zjistila, že většina léků doplňujících jang ledvin má lepší léčebný účinek na perimenopauzální syndrom (Zhang a Miao, 2011; Cao a kol., 2016; Wang a kol., 2016; Tian a kol., 2017a,b), takže musíme pevně uchopit roli „nedostatku ledvin“ v terminologii TCM jako hlavní patogeneze v klinické léčby a zdůraznění hlavního cíle doplnění ledvin. Studie ukázaly, že doplňováním ledvin může čínská medicína regulovat dysfunkci osy HPO, oddálit stárnutí vaječníků, regulovatnervová endokrinní-imunnísystém, zlepšuje imunitu a zabraňuje osteoporóze (Shi et al., 2007), mimo jiné účinky. Pouštní životCistanchebylinaje suchá, šupinatá masitá nať Cistanche deserticoLa YCMa nebo Cistanche tubulosa (Schenk) Wight, je to vytrvalá parazitická léčivka. Působí na doplnění ledvin, doplnění esence a krve, uvolnění střev pro zmírnění zácpy a dalších účinků. Pouštní životCistanchebylinase běžně používá v tradiční čínské medicíně pro povzbuzení ledvin a posílení jangu, kterému se říká „pouštní ženšen“. Moderní výzkumy prokázaly, že má mimo jiné účinky proti stárnutí, posiluje obranyschopnost organismu, zlepšuje schopnost učení a paměti, působí protizánětlivě a proti únavě (Li et al., 2010). Chemické složení Desertliving byliny Cistanche je složité a obsahfenylethanoidglykosidyje nejvyšší v původních léčivých materiálech. Je to také jedna z hlavních aktivních složek DesertlivingCistanchebylinavykazovat účinek podobný androgenům a imunomodulační vlastnosti (Zhao a Pan, 2013). A PGC by mohla zlepšit poruchu sexuálního hormonu (E2, T, FSH, LH) u perimenopauzálních myší a má dobrý terapeutický účinek na perimenopauzální myši, viz související studie (Tian et al., 2017a,b).

V současné době se výzkum perimenopauzálního syndromu zaměřuje na endokrinní systém, nervový systém,imunnífunkce atd., ale porucha endokrinníhoimunníregulace je hlavní příčinou perimenopauzálního syndromu (Wang et al., 1999; Zhang a Wang, 2001). Tato studie zkoumala účinek PGC na perimenopauzálním modelu potkanů ​​z pohledu endokrinníhoimunnífunkce.

2. Materiály a metody

2.1. Pokusná zvířata

Krysí samice Wistar (210–230 g) byly zakoupeny od společnosti ShandongLukang Pharmaceutical Co., Ltd., číslo povolení pro zvířata: 0017216, laboratorní certifikát č. SYXK (Henan) 2010–001. Všechny krysy byly drženy s volným přístupem k potravě a vodě v plastových klecích při teplotě 22 ± 2 stupně a relativní vlhkosti 50 až 60 procent. Zvířata byla před experimenty umístěna po dobu jednoho týdne.

2.2. Materiály a činidla

Sodium Carboxymethyl Cellulose, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., číslo šarže: 20120418; Benzylpenicilin draselný pro injekci, Huabei China Pharmaceutical Co., Ltd., Specifikace: 4 miliony jednotek, číslo výrobní šarže: c1206807; Formaldehydový roztok (Analytical Pure), Yantai Shuangshuang Chemical Co., Ltd., výrobní šarže č.: 20130902; chloralhydrát, Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute, číslo šarže 20120827; krysa E2, T, FSH, LH, GnRH, AR, ER, BGP, krabice s detekčním činidlem -EP ELISA, R&D, číslo šarže: 20140101A.

2.3. Experimentální léky

Byla publikována specifická metoda přípravy a detekce obsahu PGC. Viz literatura a obsah je 66,47 procenta (Tian et al., 2017a,b). Gengnian Capsule, složení: Rehmannia, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicas, Scrophulariaceae, Cortex Moutan, Poria, Pearl of Pearl, Curculigo, Schisandra, Magnet, Shouwu Vine, Uncaria, Pšenice plovoucí, Polygonum multiflorum. Indikace: vyživuje jin a jang, zbavuje se potíží a zklidňuje mysl a používá se při menopauze s návaly pocení, závratěmi v uších, podrážděností a nespavostí. Specifikace: 0,3 g na kapsli. Použití a dávkování: Perorálně, 3 kapsle najednou, 3x denně. Výrobní podnik: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Číslo výrobní šarže: 121104. Číslo schválení: National Medicine Zhunzi Z14021848.

fenylethanoidglykosidyzCistancheBylinamáNeuroendokrinní-imunnífunkce

2.4. Experimentální nástroj

Otevření zkušební komory, Chengdu Taimeng Software Co., Ltd., model OFT-100; motorizovaný mikroskop, japonská společnost OLYMPUS, model: BX61; čtečka mikrodestiček, americká společnost BIO-RAD, model: 680; Vysokorychlostní chlazená odstředivka X3R, USA Mercury Technology Co., Ltd.

2.5. Příprava a seskupování zvířecích modelů

Odebraných osmdesát krys o hmotnosti 210–230 g a 12 krys bylo náhodně vybráno jako skupina BC a zbývající krysy byly použity pro perimenopauzální zvířecí modely. Metoda přípravy perimenopauzálních modelových potkanů, metoda referenční literatury (Miao et al., 2015), zcela odstranila levý vaječník, odstranilo se 80 procent vaječníku na pravé straně. Pečlivě chovaný po operaci a pro prevenci infekce injekčním podáním penicilinu 20 U/kg (0,1 ml) intramuskulárně až po 3 po sobě jdoucí dny jednou denně. Po 5 dnech chirurgického zákroku bylo jedno po druhém prováděno vyšetření vaginálních nátěrů potkanů, jednou denně a po dobu 5 dnů. Krysy s reakcemi říje byly vyřazeny. Šedesát ovariektomizovaných krys bylo náhodně a rovnoměrně rozděleno do 5 skupin pro experimentální použití. Byli to modelová skupina (MC), skupina Gengnian'an (GC),fenylethanoidGlykosidyz DesertlivinguCistanchebylinaskupina s vysokou (PGC-HD), střední (PGC-MD), s nízkou dávkou (PGC-LD).

2.6. Metoda konfigurace léku

(1) Dávky PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD jsou 133,33 mg/kg, 66,67 mg/kg a 33,33 mg/kg (objem podání 1 ml/100 g). Metoda konfigurace: Navažte PGC 1333,3 mg, 666,7 mg, 333,3 mg, nejprve rozpuštěné v malém množství destilované vody a poté přidání destilované vody do 100 ml a dobře promíchejte, což je požadovaný PGC-HD, PGC-MD, PGC - LD zavěšení.

(2) Dávka GC je 450 mg/kg a objem podání je stejný jako výše, což odpovídá 10násobku klinické dávky. Způsob konfigurace: Vezměte 15 kapslí GengnianCapsule, rozpusťte ji nejprve v malém množství destilované vody a poté ji nastavte na 100 ml a promíchejte. Toto je požadovaná GC suspenze.

2.7. Způsob podání

Každá skupina zvířat dostala odpovídající lék 10. den po operaci. Skupině GC bylo podáváno 450 mg/kg suspenze Gengnian Capsule a PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD byly v tomto pořadí podávány suspenze PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD, což je 133,33 mg/kg, 66,67 mg /kg, 33,33 mg/kg. BC a MC skupině byly podávány se stejným objemem destilované vody, jednou denně po dobu 30 dnů.

2.8. Test v otevřeném poli

Krysy v každé skupině byly testovány na skóre horizontální-vertikální zátěže po 29 dnech podávání. Experimentálním zařízením je krychlový otevřený box o výšce 40 cm a délce 80 cm a šířce 80 cm. Obvodová stěna a spodní plocha jsou černé a spodní plocha je složena z 25 bloků stejné plochy, které jsou rozděleny bílými čarami. Během experimentu byly krysy umístěny do čtverce otevřeného boxu a bylo pozorováno skóre horizontální aktivity paprsků procházejících spodním povrchem během 5 minut (čtverce, do kterých byly vloženy všechny čtyři drápy) a vertikální aktivita skóre počtu zadních nohou bylo vztyčeno (dvě přední tlapky byly uvolněny nebo šplhali po zdi). Výkaly musí být zcela odstraněny po každém experimentu a měřeny jednou po 2 hodinách podávání. Tento experiment byl proveden v tiché místnosti.

2.9. Stanovení hladiny E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP v séru a hladin -EP v plazmě

Potkani v každé skupině po posledním podání 2 h (lačno po dobu 12 h), abdominální anestezie, krev byla odebrána z břišní aorty, bylo odděleno sérum a plazma (4 stupně, 3500 ot./min., 10 min.), skladovány v chladničce při -80 stupňů. Pomocí enzyme-linked immunosorbent assay měřili hladinu E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP v séru a hladinu -EP v plazmě. Konkrétní způsob operace byl proveden podle návodu.

2.10. Stanovení ER a AR v homogenátech hypotalamu, hypofýzy a dělohy

Po odebrání krve z břišní aorty byly krysy usmrceny. Z těla byl odebrán hypotalamus, hypofýza a děloha. Hypotalamus, hypofýza a 1/2 dělohy byly homogenizovány. Metoda homogenizace byla následující:

Tkáňový blok byl opláchnut v ledově studeném 0,9% chloridu sodném, byla odebrána krev a pomocí filtračního papíru byla tkáň vysušena, tkáň byla zvážena a nařezána do skleněných homogenátových zkumavek a homogenizována přidáním předchlazeného 0,9 procenta chloridu sodného (Poměr tkáně a 0,9 procenta chloridu sodného je 1:9). Levá ruční homogenizační trubice se vloží do nádoby obsahující směs ledu a vody. Pravá ruka se vloží do pouzdra vertikálně a několikrát se otočí nahoru a dolů (6–8 minut), zcela rozemele, zhomogenizuje tkáň, odstředí (4 stupně, 3500 ot./min, 10 minut) a skladuje při teplotě -80 stupňů v chladničce .
Obsah ER v homogenátech hypotalamu, hypofýzy a děložní tkáně a obsah AR v homogenátech hypotalamu byly stanoveny enzymatickým imunosorbentním testem (ELISA) podle pokynů.

fenylethanoidglykosidyzCistancheBylinamáNeuroendokrinní-imunnífunkce

2.11. Výpočet orgánového indexu

Potkani v každé skupině po posledním podání 2 h (lačno po dobu 12 h) byly krysy usmrceny a byl jim odebrán brzlík, slezina, děloha a zbývajících 20 procent ovariální tkáně, zváženy vlhké váhy a orgán byl vypočten index brzlíku, sleziny, dělohy. Vzorec je následující:

Orgánový index=Hmotnost vlhkého orgánu (mg)/ Tělesná hmotnost potkana (g)

2.12. Pozorování morfologie dělohy, vaječníků, brzlíku, sleziny a měření tloušťky kůry brzlíku a uzlů sleziny

Brzlík, slezina, děloha a vaječník byly fixovány v 10% roztoku formaldehydu, zality v parafínu, nařezány, obarveny HE a pod světelným mikroskopem byly pozorovány histomorfologické změny. Pomocí mikrometru byla měřena tloušťka kůry brzlíku v nejtlustších a nejužších bodech každé krysy v každé experimentální skupině. Průměr je tloušťka kůry brzlíku. Základní linie mikrometru byla umístěna na uzliny sleziny do středu. Stanovení tloušťky sleziny na obou stranách s centrální tepnou jako středem a průměrem je tloušťka sleziny.

2.13. Statistická analýza

Analýza dat používá balíček SPSS21.0 k provádění statistického zpracování dat a metrologická data jsou vyjádřena jako průměr ± směrodatná odchylka (x(-) ± s), porovnání mezi skupinami používá jeden faktor rozptylová analýza. Pro homogenitu testu rozptylu byla použita metoda LSD, pro test rozptylu nerovnoměrná metoda Games-Howell a pro klasifikační data Ridit test.

3. Experimentální výsledky

3.1. Účinky chování na perimenopauzálních modelových krysách

Z obr. 1 (A a B). Je vidět, že ve srovnání s BC bylo skóre horizontálního a vertikálního pohybu u potkanů ​​skupiny MC významně sníženo (P < 0.01),="" což="" odráželo="" zvědavost="" potkanů="" ​​na="" neznámé="" životní="" prostředí.="" ve="" srovnání="" s="" mc="" mohla="" každá="" skupina="" významně="" zvýšit="" skóre="" horizontálního="" cvičení="" u="" potkanů="" ​​(p="">< 0,01)="" a="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld="" významně="" zvýšilo="" skóre="" vertikálního="" pohybu="" potkanů="" ​​(p="">< 0,05).="" skupina="" pgc-ld="" měla="" tendenci="" zvyšovat="" integrál="" vertikálního="" pohybu="" u="">

3.2. Vliv příbuzného indexu orgánů na perimenopauzální model potkanů

Z obr. 2 (A, B, C) jsme mohli vidět, že ve srovnání s BG byl orgánový index brzlíku, sleziny a dělohy u potkanů ​​skupiny MC významně snížen (P < 0.{{3}="" }1),="" což="" ukazuje,="" že="" se="" zdálo,="" že="" se="" brzlík,="" slezina="" a="" děloha="" zmenšily="" u="" perimenopauzálních="" modelových="" krys="" způsobených="" neúplným="" odstraněním="" vaječníků.="" ve="" srovnání="" s="" mc="" byl="" orgánový="" index="" brzlíku="" a="" sleziny="" u="" perimenopauzálního="" modelu="" potkanů="" ​​významně="" zvýšen="" v="" každé="" lékové="" skupině="" (p="">< 0.01).="" skupiny="" pgc-hd,="" pgc-md="" a="" gc="" významně="" zvýšily="" děložní="" index="" u="" potkanů="" ​​v="" perimenopauzálním="" modelu="" (p="">< 0,01).="" pgc-md="" významně="" zvýšil="" děložní="" index="" perimenopauzálních="" modelových="" potkanů="" ​​(p=""><>

3.3. Vliv biochemických indikátorů u perimenopauzálních modelových potkanů

Jak ukazuje obr. 3. (A, B, C, D), ve srovnání se skupinou BC byly hladiny E2 a T v séru ve skupině MC významně sníženy (P < 0.{{4="" }}1)="" a="" hladiny="" lh="" a="" fsh="" byly="" významně="" zvýšeny="" (p="">< 0.{{10}}1),="" což="" naznačuje,="" že="" neúplné="" odstranění="" vaječníků="" u="" perimenopauzálních="" modelových="" potkanů="" ​​vede="" k="" poruše="" pohlavních="" hormonů="" byl="" perimenopauzální="" model="" potkanů="" ​​úspěšně="" replikován.="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" mc="" mohla="" každá="" léková="" skupina="" významně="" zvýšit="" hladiny="" e2,="" t="" v="" séru="" a="" snížit="" hladiny="" fsh="" (p="">< 0,01);="" pgc-md,="" gc="" skupina="" mohla="" významně="" snížit="" zvýšené="" hladiny="" lh="" (p="">< 0,01),="" pgc-hd="" mohla="" významně="" snížit="" hladinu="" lh="" (p="">< 0,05);="" pgc-ld="" by="" mohl="" snížit="" hladinu="">

Z obr. 3 (E, F) ve srovnání s BC skupinou byla hladina GnRH u skupiny MC v séru významně zvýšena a hladina - EP v plazmě byla významně snížena (P < 0).="" 01),="" je="" naznačeno,="" že="" neúplná="" ablace="" vaječníků="" vede="" k="" poruše="" pohlavních="" hormonů="" u="" perimenopauzálního="" modelu="" potkanů="" ​​a="" související="" hormony="" vylučované="" hypotalamem="" byly="" také="" narušeny="" v="" důsledku="" negativní="" zpětné="" vazby.="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" mc="" byla="" hladina="" gnrh="" v="" každé="" lékové="" skupině="" významně="" snížena="" (p="">< 0.01);="" hladina="" -ep="" byla="" signifikantně="" zvýšená="" ve="" skupině="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" (p="">< 0,01),="" hladina="" -ep="" v="" plazmě="" byla="" signifikantně="" zvýšená="" u="" pgc-ld="" (p=""><>

3.4. Vliv hladin BGP v séru u perimenopauzálních modelových krys

Z obr. 4 je vidět, že hladina BGP v séru ve skupině MC byla významně nižší než ve skupině BC (P < 0.01),="" což="" naznačuje,="" že="" hladina="" bgp="" v="" perimenopauzální="" model="" potkanů="" ​​s="" neúplnými="" vaječníky="" byl="" snížen.="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" mc="" byly="" hladiny="" bgp="" ve="" skupině="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld,="" gc="" významně="" zvýšeny="" (p=""><>

3.5. Účinek ER, AR u perimenopauzálních modelových potkanů

Z obr. 5 je vidět, že ve srovnání se skupinou BC byly hladiny ER a AR u perimenopauzálního modelu potkanů ​​významně sníženy (P < 0.01),="" což="" naznačuje,="" že="" hormon="" receptory="" v="" tělních="" tkáních="" perimenopauzálního="" modelu="" potkanů="" ​​způsobené="" neúplnou="" ovariektomií="" byly="" sníženy,="" což="" snížilo="" biologické="" účinky="" estrogenu="" a="" androgenu.="" jak="" je="" znázorněno="" na="" obr.="" 5="" (a,="" b,="" c),="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" mc="" mohla="" každá="" léková="" skupina="" významně="" zvýšit="" hladinu="" er="" v="" hypotalamu,="" hypofýze="" a="" děloze="" (p="">< 0.01);="" z="" obr.="" 5(d)="" byly="" hladiny="" ar="" v="" hypotalamu="" ve="" skupině="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" významně="" zvýšeny="" (p=""><>

3.6. Vliv patologické morfologie dělohy u perimenopauzálních modelových krys

Podle změn v endometriu, žlázách a svalových vrstvách krys v každé skupině byla použita semikvantitativní kritéria pro klasifikaci histopatologie do čtyř úrovní "-, plus, plus plus, plus plus plus". Z Riditova testu je z obr. 6 a tabulky .1 vidět, že ve srovnání s BC vykazovala děloha MC významné patologické změny (P < 0.01).="" ve="" srovnání="" s="" mc="" mohla="" každá="" léková="" skupina="" významně="" zlepšit="" patologické="" tkáňové="" léze="" dělohy="" (p=""><>

3.7. Vliv patologické morfologie na ovariální tkáň u perimenopauzálních krys

Na základě změn ovariálních folikulů, žlutého tělíska, granulózních buněk a krevních cév na různých úrovních v experimentálních skupinách byla přijata semikvantitativní kritéria pro klasifikaci patologické morfologie tkáně do čtyř úrovní: „-, plus plus plus, plus plus plus ". Na základě Riditova testu je z obr. 7 a tabulky .2 vidět, že ve srovnání se skupinou BC vykazovaly vaječníky skupiny MC významné patologické léze (P < 0.01="" ).="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" mc="" mohla="" každá="" léková="" skupina="" významně="" zlepšit="" patologické="" změny="" ovariální="" tkáně="" (p=""><>

3.8. Vliv morfologie tkáně brzlíku u perimenopauzálních modelových krys

Z obr. 8 je vidět, že tloušťka kůry brzlíku ve skupině MC byla významně snížena ve srovnání se skupinou BC (P < 0.01),="" což="" naznačuje,="" že="" brzlík="" atrofuje="" byl="" pozorován="" u="" perimenopauzálního="" modelu="" potkanů.="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" mc="" mohly="" všechny="" skupiny="" významně="" zvýšit="" tloušťku="" kortikální="" brzlíku="" (p=""><>

Obr. 8. Vliv patologické morfologie tkáně brzlíku u perimenopauzálních modelových krys. (A): Patologické změny brzlíku (HE × 200); (B): Thymickortikální tloušťka (μm); V B, "a" znamená, že existuje významný rozdíl mezi MC skupinou a BC skupinou (P < 0,01);="" "b"="" znamená,="" že="" existuje="" významný="" rozdíl="" mezi="" různými="" skupinami="" podávání="" a="" skupinou="" mc="" (p="">< 0,01),="" n="" ​​="12">

3.9. Účinky morfologie tkáně sleziny na perimenopauzálním modelu potkanů

Z obr. 9 je vidět, že ve srovnání s BC byl objem slezinových uzlin u skupiny MC významně snížen (P < 0.01),="" což="" ukazuje,="" že="" atrofie="" sleziny="" byla="" pozorována="" v="" perimenopauzální="" model="" krys.="" ve="" srovnání="" s="" mc="" byla="" hladina="" objemu="" slezinných="" uzlin="" významně="" zvýšena="" ve="" skupině="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" (p=""><>

Obr. 9. Vliv patologické morfologie sleziny perimenopauzálních modelových krys. (A): Histopatologie sleziny(HE × 200); (B): Tloušťka slezinných uzlů (μm); V B, "a" znamená, že existuje významný rozdíl mezi skupinou MC a skupinou BC (P < 0,01);="" "b"="" znamená,="" že="" existuje="" významný="" rozdíl="" mezi="" různými="" skupinami="" pro="" podávání="" a="" skupinou="" mc="" (p="">< 0,01),="" n="" ​​="">

4. Diskuze

4.1. Výběr zvířecích modelů

S rozvojem výzkumu perimenopauzálního syndromu se průběžně objevují i ​​metody přípravy různých perimenopauzálních zvířecích modelů, jako jsou kastrační zvířecí modely, destrukce ovariálního zvířecího modelu rentgenovým zářením (Li et al., 2012), {{ 2}}vinylový kroužek Zvířecí model deplece etylenových folikulů (Brooks et al., 2016), zvířecí model alkoholem vyvolaného poškození vaječníků (Huang et al., 2007), zvířecí model perimenopauzální deprese (Miao et al., 2017a,b), zvířecí model perimenopauzálního syndromu s návaly horka (Zhang et al., 2010), přirozený perimenopauzální zvířecí model (Cai et al., 2007) atd. Různé zvířecí modely mají své vlastní aplikace a jejich vlastnosti. Tato studie je založena na analýze charakteristik klinických příznaků perimenopauzálního syndromu na zvířecím modelu (Tian et al., 2015) podle nové metody hodnocení zvířecího modelu tradiční čínské medicíny zavedeného v rané fázi naší laboratoře (Tian et al., 2015) al., 2017a,b) a návrh zvířecího modelu pro perimenopauzální syndrom (Draft) (Miao et al., 2018). V této studii byl použit perimenopauzální model potkanů ​​s neúplnou kastrací a tento zvířecí model je široce používán pro studium perimenopauzálních žen s osteoporózou, obezitou, aterosklerózou a dalšími stavy a také použil studie faktorů souvisejících s působením estrogenů, jako je např. vztah mezi estrogenem a autoimunitou, rakovinou (Sun a Jin, 2005) a model má vysokou úspěšnost, vyzrálý a stabilní a je široce používán výzkumníky. Kromě toho vaječník nejen syntetizuje estrogen, ale také se podílí na těleimunnífunkce, sekrece a syntéza dalších hormonů. A funkce lidských perimenopauzálních vaječníků není zcela ztracena, zvířecí model neúplné kastrace se blíží lidské perimenopauze. Více odpovídá charakteristikám klinických příznaků.

4.2. Výběr pozitivní kontroly

Tato studie použila kapsli Gengnian'an jako pozitivní kontrolní lék, kapsle Gengnian'an je klinicky uznávaný lék pro léčbu perimenopauzálního syndromu, může účinně zlepšit klinické příznaky perimenopauzálního syndromu, jako je přílivová horečka s pocením, závratěmi a tinnitem, bdělost, neklid a další. A klinické a experimentální studie ukázaly, že kapsle Gengnian'an reguluje endokrinní aimunnífunkce perimenopauzálních pacientek jako celku a mohly by různými způsoby zlepšit klinické příznaky perimenopauzálních žen. Má dobrý terapeutický účinek na perimenopauzální syndrom (Ou et al., 2011; Wang et al., 2010; Yu et al., 2010; Li a Liu, 2011; Xie, 2003).

fenylethanoidglykosidyzCistancheBylinamáNeuroendokrinní-imunnífunkce

4.3. Účinky na neuroendokrinní systém

Lidská osa HPO je koordinovaný neuroendokrinní systém a je řízen centrálním nervovým systémem. Za normálních okolností hypotalamus vylučuje GnRH a podporuje syntézu a uvolňování FSH a LH v hypofýze, čímž podporuje sekreci pohlavních hormonů a růst a vývoj folikulů. Interakce HPO udržuje ženský reprodukční endokrinní systém relativně stabilní. Když ženy vstoupí do perimenopauzálního období, funkce vaječníků klesá, sekrece estrogenu se snižuje a negativní zpětná vazba do hypotalamu a hypofýzy je oslabena, hypofýza vylučuje velké množství FSH a LH, což vede k nerovnováze HPO, což je porucha endokrinního systému, a tak doprovázejí příznaky návalů horka, pocení, osteoporózy a dalších souvisejících příznaků.

Změny v obsahu FSH a LH jsou přímým vyjádřením funkce sekrece hypofýzy. Změny obsahu GnRH a -EP přímo odrážejí stav sekrece hypotalamu v ose HPO. Sekrece E2 a T je určena funkčním stavem vaječníku. Hypotalamus, hypofýza, děloha a další tkáně mají distribuci ER, AR je široce distribuován v centrálním nervovém systému a mozkové kůře, takže může představovat funkci osy HPO a odrážet stav neuroendokrinního systému, který detekce FSH , LH, GnRH, - EP, E2, T, ER, AR v příslušných tkáních, séru a plazmě. Kromě toho může hladina BGP přímo odrážet aktivitu osteoblastů (Xun a Wang, 2017), estrogen může inhibovat počet a aktivitu osteoklastů, má vliv na kostní metabolismus, stanovení tohoto indexu může odrážet perimenopauzální krysu případ osteoporózy. Proto tento experiment testoval výše uvedené biochemické ukazatele a sledoval patologické změny dělohy a vaječníků u perimenopauzálních potkanů, aby bylo možné lépe určit účinekfenylethanoidglykosidyna neuroendokrinní systém perimenopauzálních potkanů.

4.4. Účinky na imunitní funkce

Brzlík je důležitou centrálouimunníorgán (Han a Lu, 2017) a je to také orgán endokrinní. Během perimenopauzy může být v důsledku nedostatku fyziologické estrogenní stimulace a snížení intracelulárních estrogenových receptorů snížena struktura brzlíku a může být snížena sekrece thymosinu, atrofie brzlíku nevyhnutelně přímo ovlivní buněčnouimunnía má nepřímý vliv na humorální imunitu. Imunitně aktivní buňky brzlíku mohou uvolňovat polypeptidové faktory a předávat informace do neuroendokrinního systému, produkovat relevantní fyziologické nebo patofyziologické reakce, jako je snížení hladiny estrogenu, může snížit produkci IL-2 , -EP, a další imunomodulační látky vimunníbuňky. Slezina je největší periferieimunníorgán a je to také místo pro příjem antigenní stimulace a imunitní reakce. Slezina a brzlík jsou důležitými složkami imunitního systému těla. Proto těloimunnífunkce může nepřímo reagovat s indexem brzlíku a sleziny.

V tomto článku prostřednictvím studia brzlíku, indexu orgánů sleziny, histopatologických změn, tloušťky kortikální brzlíku, tloušťky slezinných uzlin atd. odpovídá, že PGC má vliv na zlepšeníimunnífunkce perimenopauzálních modelových krys a zlepšení patologických změn brzlíku a sleziny.

5. Závěr

Každá dávka PGC mohla nejen působit proti poruše pohlavních hormonů (E2, T, FSH, LH) u perimenopauzálního syndromu, zvýšit hladiny pohlavních hormonů, ale také zlepšit nerovnováhu hladin androgenního receptoru (ER, AR), a také zlepšit těloimunnífunguje a koriguje osteoporózu, může zlepšit a obnovit orgánový index souvisejících organizací a zlepšit patologické změny dělohy, brzlíku a sleziny. Navíc ve srovnání s GC nemá PGC žádný významný rozdíl v horizontálně-vertikálním pohybu, orgánovém indexu, poruchách pohlavních hormonů atd. I při zlepšení hladiny E2 v séru se snížila hladina FSH v séru, zlepšila se úroveň exprese ER v děloze a hypotalamu a patologické změny souvisejících tkání, které jsou účinnější než GC, zejména PGC-HD a PGC-MD. To znamená, že PGC je regulováno endokrinními aimunnísystém jako celek nehraje pouze roli estrogenu, ale různými mechanismy zlepšuje symptomy a kvalitu života, poskytuje experimentální základ pro širokou škálu klinických aplikací pro DesertlivingCistanchebylinaa vývoj nových léků pro tradiční čínskou medicínu. V návaznosti na tuto studii se provádějí příslušné mechanismy, aby se objasnil konkrétní mechanismus účinkufenylethanoidglykosidyz neuroendokrinního -imunnísítě v léčbě perimenopauzálního syndromu.

Kromě toho tato studie ukázala, že PGC může zvýšit hladinu BGP v séru perimenopauzálních modelových potkanů ​​a má vliv na metabolismus kostí, což naznačuje, že PGC může mít lepší terapeutický účinek na osteoporózu způsobenou perimenopauzálním syndromem, relevantní výzkum že osteoporóza způsobená perimenopauzálním syndromem může být provedena v pozdější fázi a vyvinout nové aplikace. Tato studie poskytuje dobrý experimentální základ pro nové klinické použití PGC a poskytuje nové výzkumné nápady pro studium podobných léků.

Vyjádření autorského příspěvku

Mingan Miao a Xiumin Li navrhli a vedli experimenty, Mingsan Miao, Xiumin Li, Shuo Tian, ​​Ming Bai, Yanyi Wu a Zhenzhen Wei provedli experimenty a analyzovali naměřená data, Miao Mingsan a Xiumin Li učinili konečný závěr. Oba autoři rukopis recenzovali.

Poděkování

Národní základna mezinárodní spolupráce (2016–65); stipendista střední Číny (162101510003); Průlom ve vědě a technologii v provincii Henan (162102310181). Děkujeme panu Henrymu Ehrlichovi za přečtení a úpravu našeho rukopisu.

fenylethanoidglykosidyzCistancheBylinamáNeuroendokrinní-imunnífunkce

Odkazs

Alvarado-García, A., Hernández-Quijano, T., Hernández-Valencia, M., Negrín-Pérez, MC, Ríos-Castillo, B., Valencia-Pérez, GU, Vital-Reyes, VS, BasavilvazoRodríguez, MA, Torres-Arreola, LP, Ortiz-Luna, GF, Sánchez-Aguirre, F., Montaño-Uscanga, A., 2015. Diagnostika a léčba postmenopauzální a perinemopauzie. Med. Inst. Mex. Seguro Soc. 53, 214–225.
Brooks, HL, Pollow, DP, Hoyer, PB, 2016. Myší VCD model menopauzy a perimenopauzy pro studium pohlavních rozdílů u kardiovaskulárních onemocnění a metabolického syndromu. Fyziologie 31, 250–257.
Cao, S., Tian, ​​S., Bai, M., Liu, SY, Jia, JJ, Miao, MS, 2016. Účinky celkových glukosidů Curculigo orchioides v myším perimenopauze modelu související organizace a orgánů Morfologie. Bangladéš J. Pharmacol. 11, S72–S81.
Cai, X., Huang, H., Wang, L., 2007. Pokrok ve výzkumu klimakterických zvířecích modelů. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulas 13, 71–73.
Han, SH, Lu, JB, 2017. Vliv thymektomie na tělo a nové alternativní terapie. Chin J Cell Mol Immunol 12, 1722-1726.
Huang, C., Zhu, XF, Ye, P., 2007. Pokroky ve výzkumu na zvířatech v oblasti prevence a léčby klimakterického syndromu tradiční čínskou medicínou. Journal of Jiangxi University of TCM 19, 92–93.
Lobo, RA, Davis, SR, De Villiers, TJ, Gompel, A., Henderson, VW, Hodis, HN, Lumsden, MA, Mack, WJ, Shapiro, S., Baber, RJ, 2014. Prevence onemocnění po menopauze . Klimakterium 17, 540–556.
Li, H., Liu, GZ, 2011. Klinická studie léčby klimakterického syndromu gengniananovou kapslí. J. Shanxi Coll. Tradice. Brada. Med. 2, 34–35.

Li, Y., Song, YY, Zhang, HQ, 2010. Pokroky ve výzkumu chemických složek a léčivé aktivity cistanche. Brada. Wild Plant Res. 29, 7–11.

Liu, YL, Song, ZM, Ding, Y., 2010. Experimentální studie o vztahu mezi menopauzální depresí a hipokampem a kortexem 5-HTR1A mRNA. Lishizhen medicine and materia medica research 21, 1898–1900.

Li, RQ, Bai, M., Miao, MS, 2012. Charakteristika a perspektivy zvířecích modelů syndromu menopauzy. Čínský časopis čínské medicíny 27, 708–710.
Miao, MS, Guo, L., Wang, T., Wang, T., Cao, S., Liu, SY, Fang, XY, 2015. Účinky celkových glykosidů curculigo na potkaní model perimenopauzálního syndromu založený na teorii endokrinních hormonů. Základní Clin. Pharmacol. Toxicol. 117, 5–6.
Miao, MS, Tian, ​​S., Bai, M., Xin, WY, 2017a. Celkové glukosidy z oddenku Curculigo do myšího modelu perimenopauzálního období. Pak. J. Pharm. Sci. 30, 975-978.
Miao, MS, Tian, ​​S., Guo, L., Bai, M., Fang, XY, Liu, SY, 2017b. Účinek kurkuligosidu na myším modelu perimenopauzální deprese. Saudi J. Biol. Sci. 24, 1894–1902.
Miao, MS, Tian, ​​S., Xin, WY, Bai, M., 2018. Standard (návrh) pro přípravu modelu perimenopauzálního syndromu. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy 3, 996–1000.
Ou, Y., Zhang, YP, Xu, J., Kong, DM, 2011. Experimentální studie o účinku sloučeniny ligustrum lucidum na regulaci neuroendokrinních -imunnífunkce u starých myších samic. J. Guiyang Coll. Tradice. Brada. Med. 33, 18–19.
Perrone, G., Capri, O., Galoppi, P., Patacchioli, FR, Bevilacqua, E., De Stefano, MG, Brunelli, R., 2013. Symptomy menopauzy po přerušení dlouhodobé hormonální substituční terapie u žen do 60 let: 3-roční sledování. Gynecol. Obstet. Vyšetřování. 76, 38–43.
Peng, X., 2014. Nejnovější vývoj v tradiční čínské medicíně pro perimenopauzální syndrom. CJGMCM 29, 1118–1120.
Shi, HB, Miao, YB, Zhong, CL, Wang, W., 2007. Účinek granulí Fushun na neuroendokrinní systém u potkanů ​​s nedostatkem jinu v menopauze. Chinese Journal of Traditional Medical Science and Technology 14, 16–17.
Sun, YH, Jin, RM, 2005. Pokrok ve výzkumu vytváření zvířecích modelů ženského klimakterického syndromu. Lishizhen medicine and materia medica research 16, 570–573.
Tian, ​​S., Miao, MS, Bai, M., Wei, ZZ, 2017a.fenylethanoidglykosidyzcistanchena modelu menopauzálního syndromu u myší. Saudi Pharmaceut. J. 25, 537-547.
Tian, ​​S., Bai, M., Miao, MS, 2015. Klinické rysy ve zvířecích modelech na základě perimenopauzálního syndromu. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulas 21, 217–221.
Tian, ​​S., Cao, LH, Miao, MS, Bai, M., 2017b. Nová metoda pro hodnocení zvířecích modelů používaná v tradiční čínské medicíně na základě klinických charakteristik čínské a západní medicíny. Farmakologie a kliniky čínské Materia Medica 33, 165–169.
Wang, R., Fu, Q., Li, LF, Ma, SP, 2010. Účinek kapsle gengniananu na ovariektomii samic myší. Farmaceutický a klinický výzkum 18, 247–249.
Wang, T., Miao, MS, Li, Y., Li, M., Zhang, Y., Tian, ​​S., 2016. Vliv flavonoidů Monomorium na morfologii modelu myší s perimenopauzální depresí. Saudi Pharmacertical Journal 24, 322–328.
Wang, WJ, Yu, J., Li, DJ, Bu, SZ, 1999. Pozorování změn hladin slezinného ER, IL-2 a TNF u stárnoucích krysích samic. Chin J Endocrinol Metab 15, 225–228.
Xie, CX, 2003. Gruzínská kapsle byla použita k léčbě 100 případů klimakterického syndromu. Hunan Journal of tradiční čínské medicíny 6, 44.
Xun, CF, Wang, LZ, 2017. Korelace mezi hladinami estrogenů a změnami kostních metabolických markerů u perimenopauzálních žen. Péče o zdraví matek a dětí v Číně 32, 1229–1232.
Yu, LL, Kong, DM, Zhang, YP, 2010. Experimentální studie účinků kapsle gengnianyi na inkreční funkci u potkanů ​​po ovariektomii. Lishizhen medicína a materiální lékařský výzkum 21, 3131–3132.
Zhang, Y., Miao, MS, 2011. Studie běžně používané tradiční čínské medicíny tonizující ledvinový jang při léčbě klimakterického syndromu. Čínský časopis čínské medicíny 26, 1084–1087.
Zhao, W., Pan, YN, 2013. Pokrok ve výzkumu farmakologické aktivityfenylethanoidglykosidyv cistanche. Asijsko-pacifická tradiční medicína 9, 77–79.
Zhang, YP, Wang, XX, 2001. Účinek pilulky kunningan na reprodukční endokrinníimunnífunkce u pacientůsklimakterický syndrom. ITCM 18, 52–54.
Zhang, XP, Liu, ZP, Xiang, Q., Wang, W., Zhang, X., Li, N., 2010. Srovnávací studie dvou zvířecích modelů návalů horka u žen v menopauze. Zdravotní výzkum 39, 110–111.