Pohlavní rozdíly v plazmatických autoprotilátkách proti proteinům centrálního nervového systému u veteránů války v Zálivu versus zdravé a symptomatické kontroly
Mar 22, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Mohamed B. Abou-Donia 1,*, Maxine H. Krengel 2, Elizabeth S. Lapadula 1, Clara G. Zundel 2, Jessica LeClair 3, Joseph Massaro 3, Emily Quinn 3, Lisa A. Conboy 4, Efi Kokkotou 4, Daniel D. Nguyen 5, Maria Abreu 6,7, Nancy G. Klimas 6,7 a Kimberly Sullivan 5,*
1 Ústav farmakologie a biologie rakoviny, Duke University Medical Center, Durham, NC 27710, USA;
2 Neurologická klinika, Boston University School of Medicine, Boston, MA 02118, USA;
3 Ústav biostatistiky, Boston University School of Public Health, Boston, MA 02118, USA;
4 Department of Medicine, Harvard Medical School, Boston, MA 02115, USA;
5 Department of Environmental Health, Boston University School of Public Health, Boston, MA 02118, USA;
6 Dr. Kiran C. Patel College of Osteopathic Medicine, Institute for Neuroimmune Medicine, Nova Southeastern University, Fort Lauderdale, FL 33314, USA;
7 Department of Immunology, Miami VA Medical Center, Miami, FL 33125, USA
Abstraktní:
Veteráni z války v Zálivu (GW) v roce 1991 trpí nemocí války v Zálivu (GWI) téměř 30 let. Toto onemocnění zahrnuje více tělesných systémů, včetně centrálního nervového systému (CNS). Diagnostika a léčba GWI je obtížná, protože neexistuje objektivní diagnostický biomarker. Nedávno jsme informovali o nově vyvinutém krevním biomarkeru, který odlišuje GWI od zdravých kontrol GW a symptomatických kontrol se syndromem dráždivého tračníku (IBS) a myalgickou encefalomyelitidou/syndromem chronické únavy (ME/CFS). Tato studie byla navržena tak, aby porovnala hladiny těchto biomarkerů mezi muži a ženami s GWI, stejně jako pohlavně specifické účinky ve srovnání se zdravými GW veterány a symptomatickými kontrolami (IBS, ME/CFS). Výsledky ukázaly, že muži a ženy s GWI se liší ve 2 z 10 plazmatických autoprotilátek, přičemž muži vykazují významně zvýšené hladiny. Muži a ženy s GWI vykazovali významně odlišné hladiny autoprotilátek v 8 z 10 biomarkerů k neuronálním a gliovým proteinům v plazmě ve srovnání s kontrolami. Souhrnně řečeno, tato studie se zabývala užitečností použití plazmatických autoprotilátek proti proteinům CNS k rozlišení mezi muži a ženami veterány s GWI a jinými zdravými a symptomatickými kontrolními skupinami.
Klíčová slova: CNS autoprotilátka; nemoc z války v Zálivu; Rod; biomarkery; proteiny; myalgická encefalomyelitida/syndrom chronické únavy; syndromu dráždivého tračníku
1. Úvod
Veteráni války v Zálivu (GW) trpěli stavem známým jako nemoc z války v Zálivu (GWI), která postihuje více tělesných systémů, včetně centrálního nervového systému (CNS) [1–3]. Tento chronický stav postihuje přibližně 250000 veteránů GW včetně velké části ze 40000 žen, které byly nasazeny do války. GWI má překrývající se, ale odlišné příznaky od jiných poruch, které také postihují ženy, včetně myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu (ME/CFS) a syndromu dráždivého tračníku (IBS). Nedostatek objektivních diagnostických markerů minimalizoval schopnost kohezně diagnostikovat a léčit množství symptomů GWI. Nedávno jsme hodnotili kandidátní plazmatický biomarker pro GWI a ukázali jsme rozdíly u jedinců, kteří splňují kritéria pro GWI, oproti zdravým GW a kontrolám bez veteránů s IBS a CFS. Vzhledem k rozdílným symptomům GWI u mužů a žen bylo naším dalším cílem posoudit možné rozdíly v těchto plazmatických biomarkerech mezi pohlavími [4–8]. Určení, zda se autoprotilátky CNS liší mezi muži a ženami s GWI a jejich příslušnými kontrolami, pomůže dále zdokonalit jejich diagnostickou užitečnost jako plazmatických biomarkerů. Ženy, které sloužily v roce 1991 GW, hlásily četné zdravotní problémy, z nichž mnohé jsou specifické pro pohlaví. Některé studie naznačují zvýšený výskyt ženských zdravotních problémů a infekcí močového měchýře ve srovnání s veteránskými kontrolami z éry GW [9]. Ve Ft. Devens Cohort (FDC) GW veteránů, GW žen ve srovnání s neveteránskými kontrolami bylo zjištěno, že mají vyšší riziko diabetu, ale nižší riziko hypertenze ve srovnání s National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES) věk a pohlaví- odpovídající kohorta [8].
Naproti tomu muži s nasazením GW hlásili zvýšený výskyt sedmi chronických zdravotních stavů ve srovnání s muži NHANES včetně významně vyšší pravděpodobnosti hlášení hypertenze, vysokého cholesterolu, srdečního infarktu, cukrovky, mrtvice, artritidy a chronické bronchitidy [8]. Vzhledem k tomu, že tato studie ukázala, že muži GW byli vystaveni zvýšenému riziku zdravotních stavů, které jsou známými rizikovými faktory pro pozdější kardiovaskulární a cerebrovaskulární onemocnění (tj. hypertenze, vysoký cholesterol, diabetes), mohou muži GW vykazovat zvýšenou míru biomarkerů CNS ve srovnání s jejich ženami, veteránkami. protějšky. V nedávné studii využívající velkou kohortu biorepozitářů z éry GW (GWEBC) však ženy s nasazením GW významně častěji hlásily příznaky související s kognitivními, neurologickými problémy a problémy s náladou než ženy z éry GW [4]. Proto ženy GW mohou také vykazovat zvýšené biomarkery související s CNS ve srovnání s jinými kohortami žen. Navíc při srovnání nasazených GW veteránů mužů versus žen bylo zjištěno, že ženy GW veteránky mají více ambulantní a ústavní zdravotní péči 5 let po nasazení [10]. U žen GW bylo také zjištěno, že mají vyšší výskyt těžkých a středně těžkých případů GWI ve srovnání s jejich mužskými protějšky [5,11–13]. Za pozorované rozdíly mezi pohlavími v GWI a jednotlivých symptomech může odpovídat několik faktorů, včetně rozdílů mezi pohlavími v náchylnosti k expozici neurotoxickým látkám v divadle a/nebo vyšší expozici u mužského personálu. Již v roce 1996 jsme spekulovali, že chemické expozice v době GW byly urychlujícím faktorem GWI [14,15].
účinkyextrakt z cistanche tubulosa
V experimentálních studiích jsme prokázali, že kombinovaná expozice pesticidům a pyridostigmin bromidu (PB) způsobuje neurotoxické účinky, které interferují s funkcí neuronových a gliových buněk, což vede k dlouhodobým a potenciálně neurodegenerativním účinkům [14–16]. Neurodegenerace zahrnuje odumírání neuronových a gliových buněk a uvolnění jejich obsahu do oběhu přes porušenou hematoencefalickou bariéru (BBB), kterou lze následně detekovat prostřednictvím autoprotilátek CNS v plazmě [17]. Již dříve jsme ukázali změny BBB v našich zvířecích modelech expozice GWI [18]. Již dříve jsme také ukázali, že tyto plazmatické markery mohou být detekovány v nízkých hladinách u jedinců bez signifikantního onemocnění, ale zvyšují se u jedinců s větší symptomatologií [16,19]. CNS má dva typy buněk: neurony a podpůrné gliové buňky. Neuronální buňky obsahují několik cytoskeletálních proteinů, včetně tau a neurofilament [20,21]. Spolu s mikrotubuly vyrobenými z tubulinu tvoří páteř axonálního cytoskeletu. Tyto proteiny se podílejí na axonálním transportu základních živin, aminokyselin a organel dolů axonem [22]. Proteiny asociované s mikrotubuly, (MAP)-2 a tau, podporují polymeraci a stabilizaci mikrotubulů v axonech, neurofilamenty s příčnými můstky a mikrotubuly, které se navzájem spojují; to pomáhá udržovat cytoskelet pro axonální transport [23]. Tau proteiny jsou lokalizovány primárně v axonu v neuronálních buňkách. Podpůrné gliové buňky, oligodendrocyty v CNS a Schwannovy buňky v periferním nervovém systému (PNS), produkují myelinový bazický protein (MBP) a myelin-asociovaný glykoprotein (MAG), což jsou membránové proteolipidy [24]. Gliové astrocytární proteiny produkují gliální fibrilární kyselý protein (GFAP), složku cytoskeletu astroglie, která je vysoce specifická pro CNS a po poškození CNS se uvolňuje z astrocytu do extracelulárního prostoru [25]. Protein S100B vázající vápník je také uvolňován astrocytickými gliovými buňkami (obrázek 1).
Mnohé z těchto neuronálních cytoskeletálních a zejména gliových proteinů se nacházejí pouze v CNS a jejich autoprotilátky se nacházejí v periferní krvi, pokud tyto proteiny v určitém okamžiku prosákly přes BBB a imunitní systém na ně naváže autoprotilátkovou odpověď [18,26]. . Časový průběh tohoto porušení BBB mohl u těchto jedinců nastat někdy v minulosti, což mělo za následek únik těchto proteinů z neuronů a/nebo glií. Takže i když se S100B, marker současného kompromisu BBB, v naší předchozí studii u veteránů s GWI nelišil, neznamená to, že k porušení BBB někdy v minulosti nedošlo a způsobilo trvalé detekovatelné autoprotilátky proti těmto proteinům CNS v krvi. . Brain Sci. 2020, 10, x FOR PEER REVIEW 3 of 16, který je vysoce specifický pro CNS a po poranění CNS se uvolňuje z astrocytu do extracelulárního prostoru [25]. Protein S100B vázající vápník je také uvolňován astrocytickými gliovými buňkami (obrázek 1). Mnohé z těchto neuronálních cytoskeletálních a zejména gliových proteinů se nacházejí pouze v CNS a jejich autoprotilátky se nacházejí v periferní krvi, pokud tyto proteiny v určitém okamžiku prosákly přes BBB a imunitní systém na ně naváže autoprotilátkovou odpověď [18,26]. . Časový průběh tohoto porušení BBB mohl u těchto jedinců nastat někdy v minulosti, což mělo za následek únik těchto proteinů z neuronů a/nebo glií. Takže i když se S100B, marker současného kompromisu BBB, v naší předchozí studii u veteránů s GWI nelišil, neznamená to, že k porušení BBB někdy v minulosti nedošlo a způsobilo trvalé detekovatelné autoprotilátky proti těmto proteinům CNS v krvi. .
Tato studie zkoumá účinky pohlaví na přítomnost cirkulujících autoprotilátek třídy imunoglobulinu G (IgG) proti CNS-specifickým neuronovým a gliovým proteinům v plazmě GW veteránů s a bez GWI, stejně jako u symptomatických neveteránských kontrol (IBS, a ME/CFS). Konkrétně jsme předpokládali, že muži a ženy veteráni s GWI se budou navzájem lišit v distribuci proteinů autoprotilátek CNS a že muži a ženy GW budou mít vyšší hladiny proteinů autoprotilátek CNS než jiné symptomatické skupiny s chronickými onemocněními včetně IBS a ME/CFS . Kvůli expozici během války mohli mít všichni veteráni GW určitou úroveň kompromisu BBB, jak dokazují autoprotilátky CNS v plazmě, ale předpokládali jsme, že ti s GWI budou mít vyšší hladiny těchto krevních markerů.
2. Materiály a metody
2.1. Studijní populace
Metody jsou stejné jako v naší nedávno publikované studii [19]. Stručně řečeno, plazmu od veteránů GW poskytlo Konsorcium pro výzkum nemocí z války v Zálivu (GWIC), studie Dynamické modelování GWI z Nova Southeastern University, studie financovaná Kongresem řízeným lékařským výzkumným programem (CDMRP) Nadaci pro výzkum pro záležitosti veteránů na jižní Floridě. a Education, Inc., studie léčby akupunkturou a bioúložiště studie dráždivého tračníku na Harvardu/BIDMC. Schválení Institutional Review Board (IRB) bylo získáno od Boston University, Nova Southeastern University v Miami VAMC a Harvard University. Pro každé místo studie byly použity stejné standardní operační postupy pro flebotomii, separaci plazmy a alikvotování. Vzorky plazmy byly získány od subjektů nalačno a skladovány při -80 ◦C. Zůstaly zmrazené až do analýzy. Účastníci souhlasili se svými příslušnými studiemi za použití pokynů Mezinárodní konference harmonizace správné klinické praxe (ICH GCP). K určení případů GWI a kontrol byla použita Kansaská kritéria GWI [27]. Kansaská kritéria GWI vyžadují, aby veteráni GW podporovali symptomy v alespoň 3 ze 6 domén symptomů (únava, bolest, kognitivní/neurologická/nálada, gastrointestinální, respirační a kožní). Veteran kontroly zahrnovaly nasazené veterány z roku 1991 GW, kteří nesplňovali Kansas GWI nebo vylučovací kritéria. Kritéria vyloučení GWI v Kansasu vylučují jednotlivce, kteří hlásí, že jim byl diagnostikován jiný zdravotní stav, který by mohl vysvětlit jejich chronické zdravotní příznaky, včetně veteránů s anamnézou centrálního nervového systému nebo závažných psychiatrických poruch, které mohou ovlivnit kognitivní funkce (např. epilepsie, mrtvice, mozek nádor, roztroušená skleróza, Parkinsonova choroba, Alzheimerova choroba, schizofrenie). Vzorky plazmy ze symptomatických kontrol pocházely z předchozích studií jedinců s ME/CFS a IBS [28,29]. Případy ME/CFS byly stanoveny pomocí kritérií Centers for Disease Control and Prevention (CDC) z roku 1994 [28]. Účastníci IBS splnili kritéria Říma III [29]. Úplné kohorty byly popsány v předchozích pracích (GWIC, CFS, IBS, dílčí vzorek GWIC [16,30–33]).
2.2. Materiály
Zdroje proteinu byly také popsány dříve [19]: Tubulin (lidský rekombinantní, Prospec kat. č. PRO-982), Microtubule-Associated Protein 2 (MAP-2, lidský rekombinant, Origene, kat. č. TP316775, lidská rekombinantní), Tau-381 (lidská rekombinantní, Millipore kat. č. AG952), neurofilamentní protein (NFP, Prospec, kat. č. PRO-523), kalmodulin kináza II (lidská rekombinantní, CaMKII, Novus Biologicals, kat. č. H000000H15-P01), alfasynuklein (lidský rekombinantní, AnaSpec kat. č. AS-55555), myelinový základní protein (MBP, člověk, Fitzgerald kat. č. 30R- AM030), myelin-asociovaný glykoprotein (MAG, lidský rekombinantní, sinobiologická kat. 131-86 H02H), gliální vláknitý kyselý protein (GFAP, lidský, CalBiochem kat. č. 345996), protein S100B (lidský, Millipore kat. č. 30R -AS002). Kozí antihumánní IgG konjugovaný s křenovou peroxidázou a vylepšené chemiluminiscenční činidlo bylo získáno od Amersham Pharmacia Biotech (Piscataway, NJ, USA). Gely s dodecylsulfátem sodným (SDS), gradient 2–20 procent (8 × 8) a 15 mM tris-glycin byly získány od společnosti Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Všechny ostatní materiály byly zakoupeny od Amersham.
přínos extraktu z cistanche tubulosa
2.3. Etické prohlášení
Schválení pro použití uložených vzorků krve ze všech studijních míst pro tuto studii bylo získáno od Institucionálního revizního výboru pro klinická vyšetření Duke University Health System dne 10. 9. 2017 a od Institucionálního revizního výboru Boston University Medical Campus dne 19. 2018. Konkrétní součásti protokolu pro Duke University byly: ID protokolu: Pro00003202, Referenční ID: 335940, Hlavní řešitel: Mohamed Abou Donia, Název protokolu: 'Poranění nervového systému'. Konkrétní součásti protokolu pro Bostonskou univerzitu byly ID protokolu: H-34334, Referenční ID: 1288716, Hlavní řešitel: Kimberly Sullivan, Název protokolu: „Nové biomarkery autoprotilátek v séru a mozkomíšním moku u veteránů s válečnou nemocí v Zálivu“. Vzorky plazmy byly sdíleny z úložišť schválených IRB ze studií na Bostonské univerzitě (IRB č. H-32768), NOVA Southeastern University/Miami VA Medical Center (IRB č. 4987,76 a IRB č. 4987,75), Beth Israel Hospital/Harvard University ( IRB # 2011P-000124) a New England School of Acupuncture (IRB # 09-204).
2.4. Postupy
2.4.1. Plazmatické procedury
Všechna místa se řídila stejným protokolem: pro venepunkci, manipulaci s krví, separaci plazmy, alikvotování a skladování při -80 ◦C. Stejná flebotomie a vzorkový protokol byly distribuovány písemně na všechna místa a zahrnovaly hladovění před ranním odběrem krve. Všechny analyzované vzorky byly základní krevní vzorky odebrané před intervenční terapií. Vzorky použité v této studii nebyly předtím rozmraženy a byly bez hemolýzy vizuální kontrolou.
2.4.2. Western Blot Assay
V této studii byla použita analýza Western blot ke stanovení autoprotilátek proti specifickým proteinům ve vzorku plazmy případů GWI a zdravých a symptomatických kontrol podle pohlaví. Tento test umožnil stanovení autoprotilátek a souvisejících izoforem antigenu. Jak bylo popsáno dříve, každý vzorek plazmy byl analyzován trojmo [19]. Všechny proteiny byly naneseny v množství 10 ng/dráha kromě IgG, který byl nanesen jako 100 ng/dráha. Proteiny byly denaturovány a podrobeny elektroforéze na SDS-PAGE (gradient 4 procenta až 20 procent) zakoupené od Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Pro každý vzorek séra byl použit jeden gel. Proteiny byly přeneseny na polyvinylidenfluoridové (PVDF) membrány (Amersham). Nespecifická vazebná místa byla blokována Tris-pufrovaným fyziologickým roztokem Tween (TBST) (40 mM Tris (pH 7,6), 300 mM NaCl a 0,1 procenta Tween 20) obsahujícím 5 procent sušeného mléka bez tuku po dobu 1 hodiny při 22 °C. Membrány byly inkubovány se vzorky séra při ředění 1:100 v TBST se 3 procenty odtučněného sušeného mléka přes noc při 4 °C. Po pěti promytích v TBST byly membrány inkubovány s 1:2000 ředěním kozího anti-lidského IgG konjugovaného s křenovou peroxidázou (Amersham). Membrány byly vyvinuty zesílenou chemiluminiscencí za použití protokolu výrobce (Amersham) a záznamníku proměnného modelu Typhoon 8600 (GE Lifesciences, Marlborough, MA, USA). Intenzita signálu byla kvantifikována pomocí softwaru pro analýzu obrazu Bio-Rad verze 4.5 (Hercules, CA, USA). Všechny testy byly provedeny s výzkumníky zaslepenými ke kontrole případů a genderovému statusu vzorků.
2.4.3. Specifičnost plazmatických autoprotilátek
Již dříve jsme zjišťovali specifitu autoprotilátek v plazmě a séru provedením kompetičního testu peptid/antigen, při kterém byly sérum a plazma obohaceny o cílový protein nebo peptid [34]. Sérum z náhodných zdravých kontrol bylo smícháno s tau, MAP2 nebo MBP nebo bez nich. Proteinová směs byla centrifugována při 15, 000 otáčkách za minutu, aby se vyčerpaly veškeré imunitní komplexy. Supernatanty byly poté opatrně odstraněny a použity ve Western blotu. Specifika autoprotilátek proti všem testovaným proteinům byla potvrzena v následné studii [35].
2.5. Statistika
Shromážděná data jsou prezentována jako průměr ± SD pro spojité proměnné a počet a procento účastníků v každé kategorii pro kategorické proměnné. Demografické hodnoty subjektů byly porovnány s kontrolními skupinami pomocí Studentova t-testu kontinuálního a chí-kvadrát pro kategorické proměnné. Průměrné hodnoty autoprotilátek GWI mužů a žen byly porovnány pomocí analýzy kovariance (ANCOVA) s úpravou podle věku a rasy. Rasa byla použita dichotomicky (kavkazská nebo ne). Dále byly porovnány průměrné hodnoty GWI žen se zdravými ženami GW a poté opakovány pro GWI muže a GW zdravé muže. A konečně, průměrné hodnoty GWI žen byly porovnány s kombinovanými 3 kontrolními skupinami (GW kontroly, IBS, ME/CFS) pomocí ANCOVA s úpravou podle věku a rasy; tato analýza byla poté opakována pro muže. Dvoustranná p-hodnota < 0,05="" byla="" přijata="" jako="" statisticky="" významná="" pro="" všechny="" analýzy="" a="" analýzy="" nebyly="" upraveny="" pro="" vícenásobná="" srovnání.="" analýzy="" byly="" provedeny="" pomocí="" sas="" verze="" 9.4="" (sas="" institute="" inc.="" 2013.="" cary,="" nc,="">
přínos extraktu z cistanche tubulosa
2.6. Výpočty
Měření optické hustoty u případů a kontrol bylo vyděleno koncentrací sérového IgG; tato hodnota pro každý subjekt byla normalizována na kontroly a vyjádřena jako změna od zdravých kontrol. Proto jsou výsledky vyjádřeny jako průměrné hodnoty trojnásobného testu libovolných jednotek optické hustoty normalizovaných na optickou hustotu IgG ve srovnání se zdravými kontrolami.
2.7. CNS Autoprotilátkový index (CAI)
Tento index určuje celkový neurodegenerativní stav jedince na základě hladiny autoprotilátek v plazmě. Vypočítá se sečtením všech hodnot autoprotilátek pro každý nervový protein a následným dělením součtu počtem použitých autoprotilátek. Nakonec se hodnota vynásobí 10, aby se získalo snadné skóre CAI, jak bylo dříve uváděno pod dřívějším názvem index neurodegenerace [19].
3. Výsledky
3.1. Demografické údaje účastníků
Studijní vzorek zahrnoval celkem 171 veteránů s GWI (137 mužů, 34 žen), celkem 56 GW mužských zdravých kontrol a 4 GW žen veteránských zdravých kontrol, celkem 3 mužské a 32 žen IBS kontroly a celkem 5 mužů a 45 žen CFS symptomatických kontrol (tabulka 1). Některé ze skupin (Muži GWI versus ženy GWI a GWI versus všechny kombinované kontroly) se významně lišily ve věku a rase (bělošské nebo ne), takže všechny další analýzy kontrolovaly tyto demografické proměnné.
Tato studie uvádí výsledky použití našich nově vyvinutých neurodegenerativních biomarkerů v plazmě k rozlišení mužů a žen, kteří sloužili v GW 1990/1991 a vyvinuli příznaky GWI nebo zůstali zdraví. Kromě toho byly provedeny analýzy za účelem zjištění rozdílů mezi ženami s GWI oproti ženám GW a poté kombinovanou kontrolní skupinou žen (zdraví veteráni GW, IBS, ME/CFS) a mezi muži s GWI vs. GW zdravými muži a poté s kombinovanou kontrolní skupina mužů. Hladiny 10 cirkulujících autoprotilátek proti nervovým proteinům byly analyzovány v plazmě mužů a žen veteránů s GWI, zdravých mužů a žen GW a symptomatických mužů a žen s CFS a IBS, které byly použity jako kontroly.
3.2. Účinky pohlaví na hladiny autoprotilátek proti plazmatickým nervovým proteinům
3.2.1. Výsledky autoprotilátek analyzované podle pohlaví pro případy GWI a GW pouze zdravé
Tato studie zahrnovala 171 vzorků plazmy od veteránů s GWI, včetně 137 (80,2 procenta) mužů (průměrný věk 49.{5}}let) a 34 žen (19,9 procenta) (s průměrným věkem 46,9 let) (tabulka 1 ). Rozdíly mezi muži a ženami s ohledem na autoprotilátky v plazmě ve skupinách s GWI byly zjištěny tak, že muži s GWI vykazovali významně vyšší hladiny tubulinu a MAG ve srovnání s ženami veteránkami s GWI (tabulka 2, obrázek 2). Neexistovaly žádné protilátky, kde by ženy měly vyšší průměr než muži. Porovnali jsme také 56 GW zdravých mužů (průměrný věk 50,5 let) se 4 GW zdravých žen (průměrný věk 56,5 let). Ačkoli nám chyběla statistická síla, nebyly nalezeny žádné významné rozdíly mezi samčími a samičími zdravými kontrolami GW na žádné z autoprotilátek (data nejsou uvedena).
3.2.2. Výsledky autoprotilátek v plazmě mužů-veteránů s GWI versus zdravých veteránů a poté žen s GWI versus zdravých veteránek
Druhá analýza porovnávala mužské veterány s GWI (N=137) se zdravými muži GW (N=56) a ženy GWI (N=34) se zdravými ženami GW (N=4 ). Ve srovnání se zdravými muži měli muži s GWI významně vyšší hodnoty autoprotilátek pro 9 z 10 autoprotilátek s výjimkou S100B. Ve srovnání se zdravými ženami měly ženy s GWI významně vyšší hodnoty autoprotilátek pro 2 z 10 autoprotilátek, včetně GFAP a tubulinu (tabulka 3).
3.2.3. Výsledky autoprotilátek v plazmě mužů GWI veteránů versus všechny kontroly mužů a žen veteránů GWI versus všechny kontroly žen
Třetí analýza porovnávala mužské veterány s GWI (n {{0}}) a kombinovanou IBS, ME/CFS a zdravé kontrolní veterány GW (n=64) a veteránky s GWI (n=34) a kombinované IBS, ME/CFS a GW veteránky s kontrolou zdraví (n=81) (tabulka 4). Ve srovnání s výhradně mužskou kontrolou vykazovali muži s GWI významně vyšší (p < 0,01)="" průměrné="" hladiny="" 9="" z="" 10="" autoprotilátek="" proti="" nervovým="" proteinům="" (tubulin,="" tau,="" map-2,="" mbp,="" nfp,="" mag,="" camkii,="" -syn="" a="" gfap).="" u="" s100b="" nebyl="" pozorován="" žádný="" významný="" rozdíl.="" ženy="" veteránky="" s="" gwi="" vykazovaly="" významně="" zvýšené="" (p="">< 0,01)="" průměrné="" hladiny="" 8="" z="" 10="" autoprotilátek="" ve="" srovnání="" s="" kombinovanou="" ženskou="" kontrolní="" skupinou="" (ibs,="" me/cfs,="" zdravé="" kontrolní="" veteránky="" gw)="" včetně="" tubulinu,="" tau,="" map{{17}="" },="" mbp,="" mag,="" nfp,="" camkii="" a="" -syn="" (tabulka="">
3.2.4. Hodnoty CAI podle pohlaví u mužů a žen Případy GWI versus kontroly mužů a žen
Když byly všechny autoprotilátky zkombinovány do CAI skóre, muži s GWI měli nejvyšší hodnoty celkových kombinovaných autoprotilátek, jak ukazuje CAI skóre 41,1, a ženy s GWI vykazovaly CAI skóre 32,4. Tyto hodnoty se statisticky významně lišily podle ANCOVA, upraveno podle věku a rasy (p=0.007). Skóre CAI kontrolních mužů GW mělo průměr 21,4, což bylo statisticky nižší než u mužů GWI (p < 0.0001)="" (obrázek="" 3).="" skóre="" cai="" kontrolních="" žen="" s="" gw="" mělo="" průměrné="" skóre="" 12,0,="" což="" bylo="" statisticky="" nižší="" než="" u="" žen="" s="" gwi="" (p="">< 0,021).="" kombinovaná="" kontrolní="" skupina="" mužů="" měla="" průměrný="" cai="" 21,5,="" což="" bylo="" statisticky="" významně="" nižší="" než="" skupina="" mužů="" s="" gwi="" (p="">< 0,0001).="" navíc="" kombinovaná="" kontrolní="" skupina="" žen="" měla="" průměrný="" cai="" 18,7,="" což="" bylo="" také="" významně="" nižší="" než="" skupina="" žen="" s="" gwi="" (p="">< 0,0001).="" v="" této="" studii="" naše="" výsledky="" mužů="" i="" žen="" s="" gwi="" ukázaly,="" že="" jejich="" hodnoty="" cai="" byly="" vyšší="" než="" u="" 90="" procent="">
4. Diskuze
Tato studie, využívající naše dříve ověřené biomarkery autoprotilátek v plazmě CNS, ukazuje, že existoval rozdíl mezi muži a ženami veterány s GWI, přičemž mužští veteráni měli významně vyšší hladiny 2 z 10 autoprotilátek (tubulin, MAG), které souvisí s axonálními a funkce oligodendrocytů (obrázek 2). Při kombinaci všech autoprotilátek do CNS autoprotilátkového neurodegenerativního indexu (CAI) je významný
byl pozorován rozdíl mezi muži s GWI a ženami s GWI, takže muži s GWI měli celkově větší proteinovou zátěž autoprotilátkami a významně vyšší hodnotu CAI. Naše druhá sada analýz porovnávala muže veterány s GWI se zdravými kontrolami mužů GW a poté opakovala analýzy pro ženy veteránky s GWI ve srovnání se zdravými ženami GW. Naše další analýzy porovnávaly mužské veterány s GWI s výhradně mužskými kontrolami z naší předchozí studie (zdraví veteráni GW, neveteráni s IBS nebo ME/CFS) [19]. Poté jsme provedli stejné analýzy srovnávající ženy veteránky s GWI s kombinovanou kontrolní skupinou výhradně žen (neveteránky s IBS a ME/CFS). Výsledky ukázaly, že muži s GWI měli významně vyšší hladiny autoprotilátek pro 9 z 10 autoprotilátek ve srovnání s muži zdravými veterány GW nebo s kombinovanou mužskou kontrolní skupinou.
Ženy s GWI vykazovaly signifikantně vyšší hodnoty pro 2 z 10 autoprotilátek ve srovnání se zdravými veteránkami GW as 8 z 10 autoprotilátek ve srovnání s jejich příslušnou kombinovanou kontrolní skupinou žen (neveteránky s IBS a ME/CFS). Analýzy CAI porovnávající GWI muže s jejich mužskou kontrolní skupinou a GWI ženy s jejich příslušnou kontrolní skupinou také ukázaly významně vyšší hodnoty pro GWI muže a ženy, s dvojnásobnými hodnotami ve srovnání s příslušnými kontrolami. Tyto výsledky doplňují naše předchozí zjištění, která naznačovala, že použití hranice 30 nebo více ve skóre CAI by rozlišovalo mezi GWI a jinými chronickými poruchami. Tyto výsledky naznačují, že tato hranice odpovídá mužům i ženám veteránům s GWI. Ačkoli muži a ženy veteráni s GWI měli vyšší hladiny autoprotilátek než jejich příslušné kontrolní skupiny, lišili se od sebe pouze dvěma autoprotilátkovými proteiny CNS. Celkové kombinované skóre CAI však bylo významně vyšší u mužů s GWI. Tyto dva významně odlišné proteiny zahrnovaly tubulin a MAG, které souvisejí s fungováním axonů a oligodendrocytů, což bylo spojeno s historií mírných traumatických poranění mozku (mTBI) a expozice chemickým zbraním. Tyto výsledky korespondují s našimi předchozími studiemi, které prokázaly zvýšenou míru vystavení mTBI a chemickým zbraním během války, zejména u mužských veteránů s GWI [30,36,37].
Ve skutečnosti tato hypotéza vícenásobného zásahu naznačovala, že ti, kteří jsou vystaveni jak mTBI, tak chemickým zbraním, budou hlásit více chronických zdravotních symptomů, které mohou souviset s těmito axonálními a myelinovými patobiologickými markery. V souladu s tím Carney a kol. porovnávali bojové zkušenosti, pracovní a jiné služby související s vystavením a používáním zdravotní péče u veteránů GW a žen a hlásili podobné vojenské zkušenosti, ale s muži, kteří se častěji účastnili bojových činností. Nebyly však zjištěny žádné významné rozdíly mezi pohlavími v expozici rozpouštědlům/petrochemickým látkám, infekčním chorobám, neurotoxinům, tepelnému stresu, traumatu nebo radiaci [38]. Kromě toho se veteránky s GWI lišily od zdravých kontrol GW ve dvou markerech, včetně gliového markeru (GFAP) a neuronálního cytoskeletálního markeru (Tubulin). Tyto výsledky naznačují, že se zdá, že ženy s GWI vykazují více neuronálních cytoskeletálních a neurozánětlivých změn ve srovnání se zdravými kontrolami GW nebo ženami s IBS nebo ME/CFS. Muži veteráni s GWI se lišili od zdravých mužů GW vyššími hodnotami všech autoprotilátek kromě akutního gliálního BBB markeru S100B a hodnoty CAI, která byla dvojnásobná než u kontrol.
Když byly ženy s GWI srovnány s kombinovanou kontrolní skupinou, vykazovaly vyšší hladiny autoprotilátek na všech markerech kromě gliových markerů GFAP a S100B. Jejich hodnota CAI byla opět téměř dvakrát vyšší než u kombinovaných kontrol. Podobně jako v předchozí analýze se mužští veteráni s GWI nelišili od svých příslušných kontrol pro aktivaci glií a akutní marker BBB S100B. To naznačuje, že mužští veteráni GWI mohou vykazovat více chronickou aktivaci glií, poškození neuronů a neurozánět než jejich samčí kontrolní zdravé a symptomatické protějšky s IBS a ME/CFS, protože S100B je marker současného narušení BBB a GFAP je marker současného neurozánětu. [39,40]. GFAP je totiž vylučován aktivovanými astrocyty, což vede k neurozánětu [41–43]. S ohledem na integraci našich zjištění do širšího rozsahu výzkumu GW relevantního pro rozdíly mezi pohlavími se ukázalo, že existují rozdíly v imuno-zánětlivých markerech a v celkovém počtu zdravotních příznaků mezi muži a ženami, veterány GW [5,8,13] ,44–46]. Současná studie doplňuje literaturu v tom, že muži-veteránové GW mají vyšší celkové hodnoty autoprotilátek (jak je hodnoceno poměrem CAI) a že zjištění jsou v souladu s muži a ženami, u kterých se potenciálně vyskytuje zvýšený výskyt autoprotilátek v podobné míře, ale s menší zvýšení autoprotilátek u žen spojené s větší zátěží symptomů. Tyto výsledky naznačují, že je opodstatněná další studie citlivosti mezní hodnoty CAI 30 pro muže i ženy – veterány s GWI. Autoprotilátky proti neurálním proteinům kromě toho, že jsou krevními biomarkery, jsou také indikací neurodegenerace a mohou vysvětlovat mechanismy mozkových onemocnění a účinky stárnutí [26,47].
výhody extraktu z cistanche tubulosa
V současnosti jsou jedinými konzistentními rizikovými faktory pro GWI chemická expozice a anamnéza mTBI [30,36,37,48–51]. Mezi tyto chemikálie patří pyridostigmin bromid, pesticidy včetně insekticidů permethrin a lindan a také repelent proti hmyzu DEET (N, N-diethyl-m-toluamid), organofosfátové (OP) insekticidy a nervové plyny, sarin a cyklosarin, které jsou nyní o kterých je známo, že nepříznivě ovlivňují CNS nevýznamné nebo kombinované dávky [3,14,15,48,51–58]. Výzkumy mechanismů, kterými sloučeniny OP způsobují neurodegeneraci, prokázaly, že OP zvyšují aktivitu a expresi kalcium-kalmodulin kinázy II (CaMKII), která způsobuje hyperfosforylaci nervových proteinů, což vede k jejich agregaci a zpomalení axonálního transportu, což vede k smrti neuronových buněk. [51,59–62]. V souladu s tím je naše dřívější zjištění, že posádky leteckých společností, které byly vystaveny OP, si vytvořily autoimunitní protilátky proti nervovým proteinům [34]. Zvýšené autoprotilátky proti neuronálním proteinům, jako jsou Tau, NFP, MAG, MBP a GFAP, jsou v souladu se studií zobrazování mozku v jiné kohortě posádek leteckých společností, která prokázala sníženou mikrostrukturu mozkové bílé hmoty a mozkovou perfuzi, což může být potenciální příčinou kognitivních poruch a poruchy nálady hlášené posádkami letadel [63]. Význam tohoto zjištění spočívá v tom, že GFAP je marker aktivace astrocytů a astrocyty mohou přímo interagovat a omezovat mozkovou vaskulaturu včetně kapilár, které se podílejí na mozkové perfuzi a neurozánětu. Stížnosti na zdravotní symptomy hlášené veterány GW jsou v souladu s následky po expozici pesticidům, jako jsou organofosfáty, pyretroidy a DEET [51,64,65].
Zvýšené množství autoprotilátek proti neurofilamentům, tau, tubulinu a bazickým proteinům myelinu, které jsou biomarkery pro poruchy myelinu a neuronového cytoskeletu, včetně nestability mikrotubulů, axonální degenerace a změněného axonálního transportu, byly nalezeny v mnoha buněčných a zvířecích studiích modelů vyvolaných toxickými látkami. GWI [66–74]. Naše výsledky jsou v souladu s předchozími zprávami, které ukazují zvýšené množství různých autoprotilátek v menší a poté větší studii krevních vzorků GW veteránů [16,19,75–78]. Pokud je nám známo, toto je první studie, která hodnotí účinky těchto autoprotilátek na pohlaví u veteránů s GWI ve srovnání se zdravými a symptomatickými srovnávacími skupinami. Souhrnně lze konstatovat, že výsledky současného výzkumu vlivu pohlaví na krevní biomarkery ukázaly, že hladiny autoprotilátek byly významně vyšší u mužů i žen veteránů GW ve srovnání s kontrolami [19]. Když byl rozdíl mezi pohlavími, muži veteráni s GWI vykazovali vyšší hladiny autoprotilátek i celkové skóre CAI než ženy veteránky s GWI. To je v souladu se situací ve válečném dějišti, že ačkoli muži a ženy měli podobné vojenské zkušenosti, muži se častěji účastnili bojů a měli vyšší výskyt mTBI [30,36–38]. To neznamená, že ženy-veteránky nemají zvýšené hladiny jiných příznaků této multifaktoriální poruchy, ale spíše to, že se zdá, že veteráni mužského pohlaví vykazují větší rozdíly v autoprotilátkách CNS než ženy-veteránky, jak naznačují vyšší celkové hodnoty CAI.
Omezení
Jako většina studií měla i naše studie omezení. V některých analýzách jsme měli malé skupiny, což snižovalo naši schopnost vidět rozdíly mezi skupinami. To platilo zejména pro srovnání žen. Protože hlavním zaměřením této studie bylo posouzení GWI vs. symptomatické kontrolní skupiny, neměli jsme pro srovnání zdravou kontrolní skupinu bez veteránů, což by mohlo poskytnout více jasnosti výsledků, pokud by byla tato skupina zahrnuta. V této studii jsme použili Kansaská kritéria pro GWI, která měla vyloučit známé případy poruch včetně Alzheimerovy choroby (AD), Parkinsonovy choroby (PD) a dalších chronických onemocnění, které mohly být zodpovědné za jejich chronické symptomy [27]. V této studii jsme prokázali souvislosti mezi autoprotilátkami, zejména u veteránů GWI, ve srovnání se zdravými a symptomatickými kontrolami stratifikovanými podle pohlaví. Časový vztah mezi těmito stavy a produkcí autoprotilátek však zůstává nejasný. Je zapotřebí dalšího výzkumu, aby se zjistilo, zda se jedná o proteiny CNS založené na krvi z expozice před 30 lety, nebo zda existují probíhající změny CNS, které vyvolávají tyto autoprotilátkové proteiny. Další větší studie s ženami-veteránkami by také pomohly dále potvrdit patobiologický dopad GWI na ženy-veteránky. Hlavní předností naší studie je to, že představuje jak zdravé, tak symptomatické skupiny veteránů GW, stejně jako symptomatické neveteránské kontroly s ME/CFS nebo IBS. To naznačuje, že jak muži, tak ženy veteráni s GWI se liší nejen od svých zdravých kontrol veteránů GW, ale mají také větší rozdíly v CNS než jiné skupiny mužů a žen s chronickými multisymptomovými onemocněními. Kromě toho byly analýzy autoprotilátek CNS prováděny s laboratorním personálem, který nebyl obeznámen s případným stavem všech účastníků.
5. Závěry
Letos si připomínáme 30. výročí války v Perském zálivu v letech 1990/1991. Po většinu této doby chyběly diagnostické nástroje k přesné diagnostice poruchy, což bránilo jak přesné diagnóze, tak i tolik potřebné léčbě pro veterány. Naše laboratoř byla jednou z prvních, která navrhla a zdokumentovala, že GWI souvisí s chemickými expozicemi během války a že tyto expozice nepříznivě ovlivnily CNS. Kromě toho jsme zdokumentovali rozdíly v autoprotilátkách mezi GWI a GWhealthy a symptomatickými kontrolami. Tato studie dokumentuje, že u těchto skupin existuje sexuální efekt u mužů a žen s GWI, kteří vykazují vyšší hladiny autoprotilátek než jejich příslušné kontrolní skupiny, au mužských veteránů s GWI vykazující největší zátěž autoprotilátek. Po další validaci doufáme, že náš nově vyvinutý souhrnný skóre indexu neurodegenerace CNS autoprotilátek (CAI) 30 nebo více bude možné využít k vývoji objektivních diagnostických markerů GWI a ke srovnání účinnosti léčebných studií u mužů i žen veteránů GW.
Toto je náš produkt proti únavě! Pro více informací klikněte na obrázek!
Reference
1. Racgwi, R. Nemoc z války v Zálivu a zdraví válečných veteránů v Zálivu: doporučení pro výzkum; Americká vládní tiskárna: Washington, DC, USA, 2008.
2. Racgwi, R. Nemoc z války v Zálivu a zdraví válečných veteránů v Zálivu: Aktualizace výzkumu a doporučení, 2009–2013; Americká vládní tiskárna: Washington, DC, USA, 2014.
3. Bílá, RF; Steele, L.; O'Callaghan, JP; Sullivan, K.; Binns, JH; Golomb, BA; Bloom, FE; Bunkr, JA; Crawford, F.; Graves, JC; a kol. Nedávný výzkum nemocí války v Zálivu a dalších zdravotních problémů u veteránů války v Zálivu v roce 1991: Účinky vystavení toxickým látkám během nasazení. Cortex 2016, 74, 449–475. [CrossRef] [PubMed]
4. Sullivan, K.; Krengel, M.; Heboyan, V.; Schildroth, S.; Wilson, CC; Iobst, S.; Klímaš, N.; Coughlin, SS Prevalence a vzory symptomů mezi ženskými veteránkami z éry války v Zálivu z roku 1991: 25 let poté. J. Zdraví žen 2020, 29, 819–826. [CrossRef] [PubMed]
5. Heboyan, V.; Krengel, M.; Sullivan, K.; Iobst, S.; Klímaš, N.; Wilson, CC; Coughlin, SS Rozdíly mezi pohlavími u nemocí z války v Zálivu: Reanalýza dat ze studie leteckých sil CDC pomocí CDC a modifikovaných definic případů z Kansasu. J. Occup. Environ. Med. 2019, 61, 610–616. [CrossRef] [PubMed]
6. Coughlin, SS; Heboyan, V.; Sullivan, K.; Krengel, M.; Wilson, CC; Iobst, S.; Klimas, N. Kardiovaskulární onemocnění mezi veteránkami z éry války v Zálivu v roce 1991. J. Environ. Health Sci. 2019, 5, 24–25. [CrossRef] [PubMed]
7. Coughlin, SS; Krengel, M.; Sullivan, K.; Pierce, PF; Heboyan, V.; Wilson, CC Přehled epidemiologických studií zdraví žen veteránek války v Zálivu. J. Environ. Health Sci. 2017, 3. [CrossRef] [PubMed]
8. Zundel, CG; Krengel, MH; Heeren, T.; Yee, MK; Grasso, CM; Janulewicz Lloyd, PA; Coughlin, SS; Sullivan, K. Míra chronických zdravotních stavů u veteránů války v Zálivu v roce 1991 ve srovnání s obecnou populací. Int. J. Environ. Res. Veřejné zdraví 2019, 16, 949. [CrossRef] [PubMed]
9. Pierce, PF Monitorování zdraví žen veteránek války v Perském zálivu. Federální cena za ošetřovatelskou službu. Mil. Med. 2005, 170, 349–354. [CrossRef]
10. Pierce, PF; Antonakos, C.; Deroba, BA Využití zdravotní péče a spokojenost s genderově specifickými zdravotními problémy u vojenských žen. Mil. Med. 1999, 164, 98–102. [CrossRef]
11. Wolfe, J.; Proctor, SP; Erickson, DJ; Hu, H. Rizikové faktory pro multisymptomové onemocnění u veteránů americké armády z války v Perském zálivu. J. Occup. Environ. Med. 2002, 44, 271–281. [CrossRef]
12. Steele, L.; Sastre, A.; Jurkovič, MM; Cook, MR Komplexní faktory v etiologii nemoci z války v Zálivu: Válečné expozice a rizikové faktory v podskupinách veteránů. Environ. Zdravotní perspektiva. 2012, 120, 112–118. [CrossRef]
13. Dursa, EK; Barth, SK; Porter, BW; Schneiderman, AI Zdravotní stav žen a mužů z války v Zálivu a veteránů z éry Zálivu: Populační studie. Zdravotní problémy žen 2019, 29, S39–S46. [CrossRef] [PubMed]
14. Abou-Donia, MB; Wilmarth, KR; Abdel-Rahman, AA; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Zvýšená neurotoxicita po současné expozici pyridostigmin bromidu, DEET a chlorpyrifosu. Fundam. Appl. Toxicol. 1996, 34, 201–222. [CrossRef] [PubMed]
15. Abou-Donia, MB; Wilmarth, KR; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Neurotoxicita vyplývající ze současné expozice pyridostigmin bromidu, deet a permethrin: Důsledky chemických expozic války v Perském zálivu. J. Toxicol. Environ. Zdraví 1996, 48, 35–56. [CrossRef] [PubMed]
16. Abou-Donia, MB; Conboy, LA; Kokkotou, E.; Jacobson, E.; Elmasry, EM; Elkafrawy, P.; Neely, M.; Baskytara, CRD; Sullivan, K. Screening pro nové biomarkery centrálního nervového systému u veteránů s nemocí války v Zálivu. Neurotoxikol. Teratol. 2017, 61, 36–46. [CrossRef]
17. Bowyer, JF; Sarkar, S.; Burks, SM; Hess, JN; Tolani, S.; O'Callaghan, JP; Hanig, JP Mikrogliální aktivace a reakce na vaskulatuře, které jsou důsledkem akutní expozice LPS. Neurotoxikologie 2020, 77, 181–192. [CrossRef]
18. Abdel-Rahman, A.; Shetty, AK; Abou-Donia, MB Narušení hematoencefalické bariéry a smrt neuronových buněk v cingulárním kortexu, gyrus dentatus, thalamu a hypotalamu na krysím modelu syndromu války v Zálivu. Neurobiol. Dis. 2002, 10, 306–326. [CrossRef]
19. Abou-Donia, MB; Lapadula, ES; Krengel, MH; Quinn, E.; LeClair, J.; Massaro, J.; Conboy, LA; Kokkotou, E.; Abreu, M.; Klimas, NG; a kol. Použití plazmových autoprotilátek proti proteinům centrálního nervového systému k odlišení veteránů s nemocí z války v Zálivu od zdravých a symptomatických kontrol. Brain Sci. 2020, 10, 610. [CrossRef]
20. Lee, G.; Cowan, N.; Kirschner, M. Primární struktura a heterogenita tau proteinu z myšího mozku. Science 1988, 239, 285–288. [CrossRef]
21. Tagliaferro, P.; Ramos, AJ; Onaivi, ES; Evrard, SG; Lujilde, J.; Brusco, A. Neuronální cytoskelet a synaptické hustoty jsou změněny po chronické léčbě agonistou kanabinoidního receptoru WIN 55,212-2. Brain Res. 2006, 1085, 163–176. [CrossRef]
22. Laferrière, NB; MacRae, TH; Brown, syntéza a sestavení DL tubulinu v diferencujících neuronech. Biochem. Cell Biol. 1997, 75, 103–117. [CrossRef]
23. Hoshi, M.; Akiyama, T.; Shinohara, Y.; Miyata, Y.; Ogawara, H.; Nishida, E.; Sakai, H. Protein-kinas-C-katalyzovaná fosforylace mikrotubuly-vazebné domény proteinu 2 asociovaného s mikrotubuly inhibuje jeho schopnost indukovat polymeraci tubulinu. Eur. J. Biochem. 1988, 174, 225–230. [CrossRef] [PubMed]
24. Jauch, EC; Lindsell, C.; Broderick, J.; Fagan, SC; Tilley, BC; Levine, SR Asociace sériových biochemických markerů s akutní ischemickou cévní mozkovou příhodou: Studie mrtvice rekombinantního tkáňového aktivátoru plasminogenu Národního institutu neurologických poruch a cévní mozkové příhody. Mrtvice 2006, 37, 2508–2513. [CrossRef] [PubMed]
25. Kövesdi, E.; Lückl, J.; Bukovics, P.; Farkaš, O.; Pál, J.; Czeiter, E.; Szellár, D.; Dóczi, T.; Komoly, S.; Büki, A. Aktualizace proteinových biomarkerů u traumatického poranění mozku s důrazem na klinické použití u dospělých a pediatrie. Acta Neurochir. 2010, 152, 1–17. [CrossRef] [PubMed]
26. Mayne, K.; Bílá, JA; McMurran, CE; Rivera, FJ; de la Fuente, AG Stárnutí a neurodegenerativní onemocnění: Je adaptivní imunitní systém přítel nebo nepřítel? Přední. Stárnutí Neurosci. 2020, 12, 572090. [CrossRef] [PubMed]
27. Steele, L. Prevalence a vzorce onemocnění z války v Zálivu u veteránů z Kansasu: asociace symptomů s charakteristikami osoby, místa a doby vojenské služby. Dopoledne. J. Epidemiol. 2000, 152, 992–1002. [CrossRef] [PubMed]
28. Fukuda, K.; Straus, SE; Hickie, I.; Sharpe, MC; Dobbins, JG; Komaroff, A. Syndrom chronické únavy: Komplexní přístup k jeho definici a studiu. Mezinárodní studijní skupina pro chronický únavový syndrom. Ann. Internovat. Med. 1994, 121, 953-959. [CrossRef]
29. Longstreth, GF; Thompson, WG; Chey, WD; Houghton, LA; Mearin, F.; Spiller, RC Funkční poruchy střev. Gastroenterologie 2006, 130, 1480–1491. [CrossRef]
30. Janulewicz, P.; Krengel, M.; Quinn, E.; Heeren, T.; Toomey, R.; Killiany, R.; Zundel, C.; Ajama, J.; O'Callaghan, J.; Steele, L.; a kol. Hypotéza vícenásobného zásahu pro nemoc z války v Perském zálivu: Vlastní hlášení vystavení chemickým/biologickým zbraním a mírné traumatické poranění mozku. Brain Sci. 2018, 8, 198. [CrossRef]
31. Janulewicz, PA; Seth, RK; Carlson, JM; Ajama, J.; Quinn, E.; Heeren, T.; Klímaš, N.; Lasley, SM; Horner, RD; Sullivan, K.; a kol. Střevní mikrobiom u veteránů války v Zálivu: Předběžná zpráva. Int. J. Environ. Res. Veřejné zdraví 2019, 16, 751. [CrossRef]
32. Conboy, L.; St John, M.; Schnyer, R. Účinnost akupunktury v léčbě válečné nemoci v Zálivu. Contemp Clin. Pokusy 2012, 33, 557–562. [CrossRef]
33. Conboy, L.; Gerke, T.; Hsu, KY; St John, M.; Goldstein, M.; Schnyer, R. Efektivita individualizovaných akupunkturních protokolů v léčbě válečných nemocí v Zálivu: Pragmatická randomizovaná klinická studie. PLoS ONE 2016, 11, e0149161. [CrossRef]
34. Abou-Donia, MB; Abou-Donia, MM; Elmasry, EM; Monro, JA; Mulder, MFA Autoprotilátky proti proteinům specifickým pro nervový systém jsou zvýšené v séru členů letové posádky: Biomarkery pro poškození nervového systému. J. Toxicol. Environ. Zdraví A 2013, 76, 363–380. [CrossRef] [PubMed]
35. Abou-Donia, MB; Suliman, HB; Siniscalco, D.; Antonucci, N.; ElKafrawy, P. De novo Krevní biomarkery u autismu: Autoprotilátky proti neuronálním a gliovým proteinům. Chovej se. Sci. 2019, 9, 47. [CrossRef] [PubMed]
36. Ano, MK; seichepin, DR; Janulewicz, PA; Sullivan, KA; Proctor, SP; Krengel, MH Self-Reported Traumatické poškození mozku, zdraví a četnost chronických multisymptomových onemocnění u veteránů z 1990-1991 války v Zálivu. J. Head Trauma Rehabil. 2016, 31, 320–328. [CrossRef]
37. Ano, MK; Janulewicz, PA; seichepin, DR; Sullivan, KA; Proctor, SP; Krengel, MH Mnohočetná lehká traumatická poranění mozku jsou spojena se zvýšeným výskytem zdravotních příznaků a nemocí z války v Zálivu u kohorty 1990-1991 veteránů války v Zálivu. Brain Sci. 2017, 7, 79. [CrossRef]
38. Carney, CP; Sampson, TR; Voelker, M.; Woolson, R.; Thorne, P.; Doebbeling, BN Ženy ve válce v Zálivu: Bojové zkušenosti, expozice a následná zdravotní péče o nás. Mil. Med. 2003, 168, 654–661. [CrossRef]
39. Kapural, M.; Krizanac-Bengez, L.; Barnett, G.; Perl, J.; Masaryk, T.; Apollo, d.; Rasmussen, P.; Mayberg, MR; Janigro, D. Sérum S-100beta jako možný marker narušení hematoencefalické bariéry. Brain Res. 2002, 940, 102–104. [CrossRef]
40. Siracusa, R.; Fusco, R.; Cuzzocrea, S. Astrocyty: Role a funkce v mozkových patologiích. Přední. Pharm. 2019, 10, 1114. [CrossRef]
41. O'Callaghan, JP; Jensen, KF; Miller, DB Kvantitativní aspekty astrogliózy vyvolané léky a toxickými látkami. Neurochem. Int. 1995, 26, 115–124. [CrossRef]
42. Ing, LF; Ghirnikar, RS GFAP a astroglióza. Mozkový patol. 1994, 4, 229–237. [CrossRef]
43. Aurell, A.; Rosengren, LE; Karlsson, B.; Olsson, JE; Zborníková, V.; Haglid, KG Stanovení koncentrací S-100 a gliálních fibrilárních kyselých proteinů v mozkomíšním moku po mozkovém infarktu. Mrtvice 1991, 22, 1254–1258. [CrossRef] [PubMed]
44. Hnědá, MC; Sims, KJ; Gifford, EJ; Goldstein, KM; Johnson, MR; Williams, CD; Provenzale, D. Rozdíly založené na pohlaví mezi veterány války v Zálivu v letech 1990–1991: Demografie, životní styl chování a zdravotní stav. Women's Health Issues 2019, 29 (Suppl. 1), S47–S55. [CrossRef] [PubMed]
45. Craddock, TJ; Fritsch, P.; Rice, MA, Jr.; del Rosario, RM; Miller, DB; Fletcher, MA; Klimas, NG; Broderick, G. Role pro homeostatický pohon při udržování komplexních chronických onemocnění: Nemoc z války v Zálivu a syndrom chronické únavy. PLoS ONE 2014, 9, e84839. [CrossRef]
46. Smylie, AL; Broderick, G.; Fernandes, H.; Razdan, S.; Barnes, Z.; Collado, F.; Sol, C.; Fletcher, MA; Klimas, N. Srovnání pohlavně specifických imunitních signatur u nemocí z války v Zálivu a syndromu chronické únavy. BMC Immunol. 2013, 14, 1–14. [CrossRef] [PubMed]
47. Lobo, PI Role přirozených IgM autoprotilátek (IgM-NAA) a IgM anti-leukocytárních protilátek (IgM-ALA) v regulaci zánětu. Curr. Horní. Microbiol. Immunol. 2017, 408, 89–117.
48. Sullivan, K.; Krengel, M.; Bradford, W.; Stone, C.; Thompson, TA; Heeren, T.; White, RF Neuropsychologické fungování ve vojenských aplikátorech pesticidů z války v Zálivu: Účinky na rychlost zpracování informací, pozornost a vizuální paměť. Neurotoxikol. Teratol. 2018, 65, 1–13. [CrossRef]
49. Chao, LL; Rothind, JC; Cardenas, VA; Meyerhoff, DJ; Weiner, MW Účinky nízkoúrovňového vystavení sarinu a cyklosarinu během války v Perském zálivu v roce 1991 na mozkovou funkci a strukturu mozku u amerických veteránů. Neurotoxikologie 2010, 31, 493–501. [CrossRef]
50. Chao, LL; Abadjian, L.; Hlavín, J.; Meyerhoff, DJ; Weiner, MW Účinky nízké hladiny sarinu a cyklosarinu a nemoc z války v Zálivu na strukturu a funkci mozku: Studie na 4T. Neurotoxikologie 2011, 32, 814–822. [CrossRef]
51. Golomb, BA Inhibitory acetylcholinesterázy a nemoci z války v Zálivu. Proč. Natl. Akad. Sci. USA 2008, 105, 4295–4300. [CrossRef]
52. Michalovicz, LT; Kelly, KA; Sullivan, K.; O'Callaghan, JP Expozice inhibitoru acetylcholinesterázy jako iniciačního faktoru ve vývoji válečné nemoci v Zálivu, chronické neuroimunitní poruchy u nasazených veteránů. Neurofarmakologie 2020, 171, 108073. [CrossRef]
53. O'Callaghan, JP; Kelly, KA; skříňka, AR; Miller, DB; Lasley, SM Kortikosteron aktivuje neurozánětlivou odpověď na DFP u myší: Potenciální zvířecí model nemoci z války v Zálivu. J. Neurochem. 2015, 133, 708–721. [CrossRef] [PubMed]
54. Winkenwerder, W. Environmental Exposure Report: Pesticides Final Report, Ministerstvo obrany USA, Úřad zvláštního asistenta náměstka ministra obrany (personál a připravenost) pro nemoce z války v Zálivu, zdravotní připravenost a vojenské nasazení; Americká vládní tiskárna: Washington, DC, USA, 2003.
55. Cherry, N.; Creed, F.; Silman, A.; Dunn, G.; Baxter, D.; Smedley, J.; Taylor, S.; Macfarlane, GJ Zdraví a projevy válečných veteránů Spojeného království v Zálivu. Část II: Vztah zdraví k expozici. Obsadit. Environ. Med. 2001, 58, 299-306. [CrossRef] [PubMed]
56. Haley, RW; Kurt, TL Vlastní hlášení vystavení neurotoxickým chemickým kombinacím ve válce v Zálivu. Průřezová epidemiologická studie. JAMA 1997, 277, 231–237. [CrossRef] [PubMed]
57. Nisenbaum, R.; Barrett, DH; Reyes, M.; Reeves, stresory z nasazení WC a chronická multisymptomová nemoc mezi veterány války v Zálivu. J. Nerv. Ment. Dis. 2000, 188, 259–266. [CrossRef]
58. Sullivan, K.; Krengel, M.; Proctor, SP; Devine, S.; Heeren, T.; Bílá, RF kognitivní funkce u veteránů války v Zálivu hledajících léčbu: Užívání pyridostigmin bromidu a PTSD. J. Psychopathol. Chovej se. Posoudit. 2003, 25, 95–103. [CrossRef] 59. Patton, SE; O'Callaghan, JP; Miller, DB; Abou-Donia, MB Vliv orálního podávání tri-o-kresylfosfátu na in vitro fosforylaci membránových a cytosolických proteinů z kuřecího mozku. J. Neurochem. 1983, 41, 897-901. [CrossRef]
60. Lapadula, ES; Lapadula, DM; Abou-Donia, MB Biochemické změny v sedacím nervu slepic léčených tri-o-kresylfosfátem: Zvýšená fosforylace cytoskeletálních proteinů. Neurochem. Int. 1992, 20, 247–255. [CrossRef]
61. Abou-Donia, MB Účast cytoskeletálních proteinů v mechanismech opožděné neurotoxicity indukované organofosforovými estery. Clin. Exp. Pharm. Physiol. 1995, 22, 358-359. [CrossRef]
62. Torres-Altoro, MI; Mathur, BN; Drerup, JM; Thomas, R.; Lovinger, DM; O'Callaghan, JP; Bibb, JA Organofosfáty dysregulují dopaminovou signalizaci, glutamátergní neurotransmisi a indukují markery poškození neuronů ve striatu. J. Neurochem. 2011, 119, 303–313. [CrossRef]
63. Reneman, L.; Schagen, SB; Mulder, M.; Mutsaerts, HJ; Hageman, G.; de Ruiter, MB Kognitivní poškození a související ztráta bílé mikrostruktury mozku u členů posádky vystavených výparům motorového oleje. Brain Imaging Behav. 2016, 10, 437–444. [CrossRef]
64. Petras, JM Soman neurotoxicita. Fundam. Appl. Toxicol. 1981, 1, 242. [CrossRef]
65. Abdel-Rahman, AA; Shetty, AK; Abou-Donia, MB Akutní expozice sarinu zvyšuje permeabilitu hematoencefalické bariéry a vyvolává neuropatologické změny v mozku potkanů: Vztahy dávka-odpověď. Neuroscience 2002, 113, 721–741. [CrossRef]
66. Bělehrad, J.; De Pace, R.; Fields, RD Autofagie v myelinizační glii. J. Neurosci. 2020, 40, 256–266. [CrossRef] [PubMed]
67. Naughton, SX; Beck, WD; Wei, Z.; Qu, G.; Terry, AV, Jr. Multifunkční sloučeniny chlorid lithný a methylenová modř zeslabují negativní účinky diisopropylfluorfosfátu na axonální transport v kortikálních neuronech potkana. Toxikologie 2020, 431, 152379. [CrossRef]
68. Naughton, SX; Terry, AV, Jr. Neurotoxicita při akutní a opakované expozici organofosfátům. Toxikologie 2018, 408, 101–112. [CrossRef]
69. Naughton, SX; Hernandez, CM; Beck, WD; Poddar, I.; Yanasak, N.; Lin, P.-C.; Terry, AV, Jr. Opakované expozice diisopropylfluorfosfátu vedou ke strukturálním poruchám myelinizovaných axonů a přetrvávajícím poruchám axonálního transportu v mozcích krys. Toxikologie 2018, 406, 92–103. [CrossRef]
70. Gao, J.; Naughton, SX; Beck, WD; Hernandez, CM; Wu, G.; Wei, Z.; Yang, X.; Bartlett, MG; Terry, AV, Jr. Chlorpyrifos a chlorpyrifos oxon zhoršují transport membránově vázaných organel v kortikálních axonech potkana. Neurotoxikologie 2017, 62, 111–123. [CrossRef]
71. Qiang, L.; Rao, AN; Mostoslavský, G.; James, MF; Comfort, N.; Sullivan, K.; Baas, PW Přeprogramování buněk veteránů Války v Zálivu na neurony pro studium nemocí Války v Zálivu. Neurologie 2017, 88, 1968–1975. [CrossRef]
72. Hernandez, CM; Beck, WD; Naughton, SX; Poddar, I.; Adam, B.-L.; Yanasak, N.; Middleton, C.; Terry, AV, Jr. Opakovaná expozice chlorpyrifosu vede k prodlouženým poruchám axonálního transportu v mozku živých hlodavců. Neurotoxikologie 2015, 47, 17–26. [CrossRef]
73. Rao, AN; Patil, A.; Brodník, ZD; Qiang, L.; Španělsko, RA; Sullivan, KA; Černá, MM; Baas, PW Farmakologicky zvyšující se acetylace mikrotubulů koriguje stresem exacerbované účinky organofosfátů na neurony. Doprava 2017, 18, 433–441. [CrossRef]
74. Terry, AV, Jr. Funkční důsledky opakované expozice organofosfátům: Potenciální necholinergní mechanismy. Pharmacol. Ther. 2012, 134, 355–365. [CrossRef] [PubMed]
75. Joshi, U.; Pearson, A.; Evans, JE; Langlois, H.; Saltiel, N.; Ojo, J.; Klímaš, N.; Sullivan, K.; Keegan, AP; Oberlin, S.; a kol. Metabolit permetrinu je spojen s adaptivními imunitními reakcemi u nemoci z války v Zálivu. Chování mozku. Immun. 2019, 81, 545–559. [CrossRef] [PubMed]
76. Vojdani, A.; Thrasher, JD Buněčné a humorální imunitní abnormality u veteránů války v Zálivu. Environ. Zdravotní perspektiva. 2004, 112, 840–846. [CrossRef] [PubMed]
77. Skowera, A.; Stewart, E.; Davis, ET; Cleare, AJ; Unwin, C.; Hull, L.; Ismail, K.; Hossain, G.; Wessely, SC; Peakman, M. Antinukleární autoprotilátky (ANA) u pacientů s nemocí související s válkou v Perském zálivu a syndromem chronické únavy (CFS). Clin. Exp. Immunol. 2002, 129, 354–358. [CrossRef] [PubMed]
78. Hokama, Y.; Empey-Campora, C.; Hara, C.; Higa, N.; Siu, N.; Lau, R.; Kuribayashi, T.; Yabusaki, K. Fosfolipidy akutní fáze související s kardiolipinem mitochondrií v séru pacientů s chronickým únavovým syndromem (CFS), chronickou otravou ryb Ciguatera (CCFP) a dalšími nemocemi připisovanými chemikáliím, válce v Zálivu a mořským toxinům. J. Clin. Laboratoř. Anální. 2008, 22, 99–105.
