Výsledky německé studie chronického onemocnění ledvin (GCKD) podporují asociaci relativní délky telomer s mortalitou u velké skupiny pacientů se středně závažným chronickým onemocněním ledvin
Mar 12, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger & et al.
Kidney International (2020) 98, 488–497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Copyright ª 2020, International Society of Nephrology. Vydalo Elsevier Inc. Toto je článek s otevřeným přístupem pod licencí CC BY
Je známo, že délka telomer je nepřímo spojena se stárnutím a byla navržena jako marker nemocí souvisejících se stárnutím. Opotřebování telomer může být urychleno oxidativním stresem a zánětem, které se běžně vyskytují u pacientů s chronickým onemocněním ledvin. Zde jsme zkoumali, zda relativní délka telomer souvisí s mortalitou u velké kohorty pacientů s chronickým onemocněním ledvin ve stádiu G3 a A1-3 nebo G1-2 se zjevnou proteinurií (A3) při zařazení. Relativní délka telomer byla kvantifikována v periferní krvi metodou kvantitativní PCR u 4 955 pacientů ze studie GCKD, probíhající prospektivní observační kohorty. K dispozici bylo kompletní čtyřleté sledování od 4 926 pacientů, u kterých jsme zaznamenali 354 úmrtí. Relativní délka telomer byla silným a nezávislým prediktorem mortality ze všech příčin. Každé snížení o 0,1 relativní jednotky délky telomer bylo vysoce spojeno se 14procentním zvýšeným rizikem úmrtí (poměr rizika 1,14 [95procentní interval spolehlivosti 1.{20}},22]) v upraveném modelu pro věk, pohlaví, výchozí eGFR, poměr albumin/kreatinin v moči, diabetes mellitus, prevalentní kardiovaskulární onemocnění, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, kouření, index tělesné hmotnosti, systolický a diastolický krevní tlak, C-reaktivní protein a sérový albumin. To se promítlo do o 75 procent vyššího rizika pro osoby s nejnižším výskytem ve srovnání s nejvyšším kvartilem relativní délky telomer. Tato asociace byla způsobena především 117 kardiovaskulárními úmrtími (1,20 [1.05-1,35]) a také 67 úmrtími v důsledku infekcí (1,27 [1.07-1,50]). Naše zjištění tedy podporují souvislost kratší délky telomer s mortalitou ze všech příčin, kardiovaskulární mortalitou a úmrtím v důsledku infekcí u pacientů se středně těžkým chronickým onemocněním ledvin.
KLÍČOVÁ SLOVA:chronické onemocnění ledvin; infekce; úmrtnost; relativní délka telomer
Chronické onemocnění ledvin(CKD) je komplexní onemocnění a jeho dědičnost se odhaduje na 30 až 70 procent.9–12 V minulých letech celogenomové asociační studie identifikovaly mnoho genetických lokusů spojených s funkcí ledvin a CKD.13–17
Indexové jednonukleotidové polymorfismy na identifikovaných lokusech však vysvětlují pouze malou část dědičnosti a další genetickí přispěvatelé mohou chybět. Dosud jen několik malých studií zkoumalo souvislost mezi TL a onemocněním ledvin. Některé studie zjistily, že krátká TL koreluje s poruchou funkce ledvin v běžné populaci,18,19 stejně jako u pacientů se srdečním selháním.20 Nedávno jsme popsali významně kratší relativní TL (RTL) u pacientů se středně těžkým CKD, kteří mají prevalenční kardiovaskulární onemocnění ( CVD),21 a také souvislost s trváním22 a progresí CKD.23 Pacienti, kteří dosáhli selhání ledvin léčení hemodialýzou, jsou popisováni jako pacienti se sníženou TL ve srovnání se zdravými kontrolami24–27 a snížená TL je nepřímo spojena s mortalitou. 28 U pacientů s ledvinami, kteří nejsou závislí na dialýze, bylo provedeno pouze několik výzkumů.21–23,29,30 Pokud je nám známo, současná studie je první prospektivní studií, která zkoumá souvislost mezi RTL leukocytů a příčinami mortality ve velkém kohorta CKD nezávislá na dialýze.
Přínos cistanche: zlepšení funkce ledvin
VÝSLEDEK
Základní charakteristiky studované populace
RTL byla kvantifikována v periferní krvi metodou kvantitativní polymerázové řetězové reakce u 4955 pacientů z Německa.Chronické onemocnění ledvinstudie. Bylo k dispozici kompletní {{0}}roční sledování od 4926 pacientů. Základní charakteristiky těchto 4926 pacientů podle kvartilů RTL jsou uvedeny v tabulce 1. RTL se pohybovaly od minima {{10}}},40 do maxima 2,31 (doplňkový obrázek S1 ), s průměrem ± SD 0,95 ±0,19 a mediánem 0,92 (1. kvartil ¼ 0,82; 3. kvartil ¼ 1 05). RTL negativně korelovala s věkem (r ¼ –{{3{32}}}},36, P < 0,001)="" a="" pozitivně="" korelovala="" s="" odhadovanou="" rychlostí="" glomerulární="" filtrace="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p="">< 0,001)="" a="" albuminem="" v="" moči–="" poměr="" kreatininu="" (r="" ¼="" 0,05,="" p="">< 0,001).="" když="" jsme="" upravili="" rtl="" na="" věk="" a="" pohlaví,="" již="" jsme="" nepozorovali="" významnou="" korelaci="" s="" egfr="" a="" poměrem="" albumin-kreatinin="" v="">
Prospektivní sledování a mortalita
Během střední doby sledování 4 roky (1483 dní) došlo k celkem 354 úmrtím. Příčiny úmrtí byly KVO včetně infarktu myokardu, ischemická choroba srdeční, náhlá srdeční smrt, městnavé srdeční selhání, plicní embolie, onemocnění srdečních chlopní a ischemická cévní mozková příhoda (117 pacientů, 33,1 procenta), infekce (67 pacientů, 18,9 procenta), neischemická cerebrovaskulární příčiny (9 pacientů, 2,5 procenta), onemocnění periferních cév (7 pacientů, 2.0 procenta), selhání ledvin (8 pacientů, 2,3 procenta), různé jiné příčiny (103 pacientů, 29,1 procenta) a neznámé příčiny ( 43 pacientů, 12,1 procenta).
Grafy kumulativní incidence ukazují, že incidence mortality ze všech příčin (obrázek 1a) se zvyšuje s kratší RTL, s nejvyšší incidencí s nejnižším kvartilem RTL. V kumulativních incidenčních funkčních křivkách kardiovaskulární (obrázek 1b) a infekční mortality (obrázek 1c) byl rozdíl mezi kvartily méně výrazný, ale pořadí kvartilů bylo stejné.
Obrázek 1|Kumulativní incidenční funkce pro (a) úmrtnost ze všech příčin, (b) úmrtnost na kardiovaskulární onemocnění (CVD) a (c) úmrtí v důsledku infekcí podle kvartilů (Q) relativní délky telomer (RTL). Q1 je kvartil zahrnující pacienty s nejkratší RTL.
Výsledky Coxových regresních modelů používajících různé úpravy jsou uvedeny v tabulce 2 a ukázaly významnou souvislost mezi kratší RTL a rizikem mortality ze všech příčin. Při průběžném hodnocení bylo každé snížení o 0,1 jednotek RTL spojeno s 16procentním zvýšeným rizikem úmrtí v modelu upraveném podle věku a pohlaví (poměr rizika [HR], 1,16; 95procentní interval spolehlivosti [CI], 1.{50}}8–1,24; P ¼ 1,7e-05). Asociace zůstala významná po rozšířené úpravě na eGFR, poměr albumin-kreatinin v moči, diabetes mellitus a prevalentní kardiovaskulární onemocnění (model 2: HR, 1,16; 95% CI, 1,08–1,24), jakož i další rizikové faktory KVO s nízkou hustotou lipoproteinový cholesterol, lipoproteinový cholesterol s vysokou hustotou, kouření, index tělesné hmotnosti, systolický krevní tlak, diastolický krevní tlak, C-reaktivní protein a sérový albumin na začátku (model 3: HR, 1,14; 95% CI, 1,06–1,22; P ¼ 3,5e-04). Nelineární P spline analýzy jsou uvedeny na obrázku 2 a odhalily téměř lineární asociaci RTL s mortalitou ze všech příčin. Pacienti s nejkratší RTL (1. kvartil) měli o 75 procent vyšší riziko mortality ze všech příčin ve srovnání s pacienty v kvartilu s nejdelší RTL (doplňková tabulka S1, plně upravený model: HR, 1,75; 95% CI, 1,22–2,50 P=0,0024).
Dále jsme analyzovali, co řídí spojení RTL s mortalitou ze všech příčin (tabulka 2). Vyhodnotili jsme 2 nejčastější specifické příčiny úmrtí a pozorovali jsme, že každý pokles o 0,1 jednotek RTL byl spojen s 20procentním zvýšeným rizikem úmrtí KVO v plně upraveném modelu (HR, 1,2 0; 95 procent CI, 1.{26}}5–1,35; P ¼ 0,0052). Snížená RTL byla také významně nepřímo spojena se smrtí v důsledku infekcí. Každý pokles RTL o 0,1 jednotky byl spojen s 1,{18}}krát vyšším rizikem úmrtí v důsledku infekcí (HR, 1,27; 95procentní CI, 1,07–1,50; P ¼ 0,0051). Při pohledu na odhady pro různé kvartily v doplňkové tabulce S1 se pro úmrtí v důsledku infekcí ukázalo, že odhady pro každý z kvartilů 1, 2 a 3 byly podobně zvýšené ve srovnání s odhady pro kvartil 4. Analýza s jinými příčinami smrti jako stejně jako neznámé příčiny smrti byly zjevně příliš heterogenní a neodhalily žádnou souvislost s RTL (data neuvedena).
Graf škálovaných Schoenfeldových reziduí a test na proporcionální předpoklady rizika nenaznačily žádné časově proměnlivé účinky pro RTL na žádný ze zkoumaných výsledků. Subdistribuce HR pro kardiovaskulární i infekční úmrtí, uvedené v doplňkové tabulce S2, jsou pouze mírně oslabené ve srovnání s HR se specifickými příčinami.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 v plně upravených modelech). Vzhledem k tomu, že jsme nedávno pozorovali asociaci ve tvaru písmene U mezi trváním CKD a RTL,22 provedli jsme analýzu citlivosti, která dodatečně upravila dobu trvání CKD na začátku, definovanou jako méně než 6 měsíců, mezi 6 měsíci a 5 lety a více než 5 let. Tato dodatečná úprava vedla pouze k okrajovým změnám HR získaných pro všechny 3 koncové body (doplňková tabulka S3).
Přínos cistanche: zlepšení funkce ledvin
DISKUSE
Výsledky této studie ukázaly významnou souvislost RTL s mortalitou ze všech příčin v kohortě CKD bez závislosti na dialýze. Kratší RTL byla spojena s vyšším rizikem mortality nezávisle na funkci ledvin a tradičních rizikových faktorech KVO. Tato asociace byla způsobena úmrtím v důsledku KVO a také úmrtím v důsledku infekcí.
Souvislost s úmrtností ze všech příčin
předchozí studie,5,6,31–35až na pár výjimek,36,37 prokázali negativní souvislost mezi RTL a mortalitou ze všech příčin v obecné populaci. Doposud největší studii (n ¼ 64 637) provedli Rode et al., s upravenou HR pro mortalitu 1,40 pro decil s nejkratší versus decil s nejdelší RTL.35V souladu s těmito výsledky naše studie prokázala s každým poklesem o 0,1 jednotek RTL o 14 procent vyšší riziko úmrtnosti ze všech příčin, což znamená o 75 procent vyšší riziko u lidí s nejnižšími hodnotami ve srovnání s nejvyššími kvartil RTL. Pokud je nám známo, pouze Carrero a spol.28zkoumali vztah mezi RTL a rizikem mortality u pacientů s CKD. Studovali 175 pacientů s terminálním onemocněním ledvin léčených hemodialýzou, z nichž 70 zemřelo během mediánu 31 měsíců pozorování. Autoři pozorovali, že TL nezávisle predikovala přežití pacientů po dodatečné úpravě věku, pohlaví a zánětu. Současná studie rozšiřuje tato pozorování na mnohem větší skupinu jedinců s CKD, kteří nevyžadují dialýzu.
Obrázek 2|Upravené nelineární splajny (a 95procentní pásma spolehlivosti) pro souvislost mezi rostoucí relativní délkou telomer (RTL) a poměrem rizik (HR) (a) mortality ze všech příčin, (b) kardiovaskulární smrti a (c) smrti v důsledku infekcí . HR se udává jako logaritmická stupnice na daních. Šedá čára: model úpravy 1 (upraveno podle věku a pohlaví). Blueline: model úpravy 3 (upraveno podle věku, pohlaví, odhadované [pokračování]
Souvislost s úmrtností na KVO
Žádné studie dosud nezkoumaly souvislost RTL s úmrtností na KVO u pacientů s CKD, ačkoli je to hlavní příčina úmrtí těchto pacientů. V závislosti na zkoumané etnické příslušnosti a na modelech úpravy dat některé, ale ne všechny studie v obecné populaci uváděly souvislost mezi nízkými výsledky RTL a CVD.33,38–41Silná podpora kauzální asociace přišla z Mendelovské randomizační studie, ve které bylo zjištěno, že genetické varianty spojené s kratší RTL jsou spojeny s ischemickou chorobou srdeční.40V této studii jsme identifikovali významnou souvislost RTL s kardiovaskulárními úmrtími, přičemž riziko bylo o 20 procent vyšší s každým poklesem RTL o 0,1 jednotky, neboli o 75 procent vyšší riziko u těch pacientů v kvartilu s nejkratší TL ve srovnání s kvartilem s nejdelšími TL. Toto zjištění je v souladu s naší dřívější zprávou o souvislosti s převládajícími kardiovaskulárními příhodami v této populaci pacientů: každé snížení RTL o 0,1 jednotky bylo významně spojeno s o 6 procent vyšší šancí na převládající KVO v modelu přizpůsobeném věku, pohlaví, aktuální kouření, hypertenze, cukrovka, lipoproteinový cholesterol s nízkou hustotou, s vysokou hustotou
lipoproteinový cholesterol, C-reaktivní protein, eGFR a index tělesné hmotnosti.21Prospektivní sledování u těchto pacientů v tomto šetření odhalilo, že zejména nejnižší kvartil RTL byl spojen s výrazně zvýšeným rizikem, zatímco ostatní 3 kvartily vykazovaly velmi podobné odhady (obrázek 1b).
Souvislost se smrtí v důsledku infekcí
Ačkoli experimentální důkazy podporují roli stárnutí buněk a krátké TL při zhoršené imunitní odpovědi, epidemiologické studie jsou řídké, zejména u pacientů s CKD. Helby a kol. provedli největší (n ¼ 75 309) prospektivní populační studii zkoumající RTL a riziko hospitalizace pro infekční onemocnění a riziko úmrtí souvisejícího s infekcí. Během 7 let sledování pozorovali vyšší riziko jakýchkoli infekcí v kvartilu s nejkratší ve srovnání s kvartilem s nejdelší RTL.42 Předchozí studie s menší velikostí vzorků uváděly protichůdné výsledky.32,43,44Naše zjištění u pacientů s CKD poprvé popisují souvislost mezi krátkou RTL a vyšším rizikem úmrtí v důsledku infekcí u této vysoce rizikové populace.
Přínos cistanche: zlepšení funkce ledvin
Potenciální mechanismus
Biologický mechanismus, který je základem vztahu mezi RTL a mortalitou, je stále nejasný. Asociace identifikovaná naší studií neobjasňuje, zda je zkrácení RTL kauzálně spojeno s kardiovaskulárním onemocněním a infekcemi. Nicméně celogenomová asociační studie následovaná analýzou skóre genetického rizika kombinující varianty olova na 7 genetických lokusech ukázala asociaci alel spojených s kratší RTL se zvýšeným rizikem onemocnění koronárních tepen. Toto zjištění poskytuje možnou podporu pro potenciální kauzální roli RTL v CVD.45,46Navíc buněčná senescence vyvolaná otěrem telomer by mohla být spouštěčem aterosklerózy i arteriosklerózy. Hromadění senescentních buněk v cévě přispívá k tvorbě aterosklerotického plátu a kalcifikacím média, což vede ke zvýšené arteriální tuhosti jako dominantnímu rysu uremického arteriálního onemocnění.47Většina studií měřila RTL v DNA z periferních leukocytů. Byla však prokázána úzká korelace mezi TL leukocytů a tkání stěny aorty.48Proto může stárnutí buněk ovlivnit endoteliální buňky, což vede k dysfunkci vaskulární stěny a podporuje adhezi imunitních buněk, což je primární událost u aterosklerózy. Kromě toho krátké telomery aktivují p53 a autofagii v srdečních progenitorových buňkách, čímž destabilizují rovnováhu klidu a proliferace směrem k diferenciaci a senescenci, což vede k vyčerpání srdečních progenitorových buněk.49Bylo prokázáno, že dysfunkce telomer vyvolává hlubokou p53-závislou represi hlavních regulátorů mitochondriální biogeneze a funkce, což vede k bioenergetickému kompromisu v důsledku narušené oxidativní fosforylace a tvorby adenosintrifosfátu.50,51
Existuje také několik vazeb mezi RTL a infekcemi. Ztráta telomer byla pozorována během diferenciace T buněk,52při chronických virových infekcích,53a s věkem.54Kromě toho byl krátký leukocytární TL popsán jako rizikový faktor u různých onemocnění souvisejících s imunitou55a diabetes.56Leukocytární kratší TL způsobuje stárnutí buněk, které je následováno snížením proliferační kapacity imunitních buněk. TL se může také podílet na poklesu imunitní funkce souvisejícím s věkem souvisejícím s nedostatečnou odpovědí na vakcíny a akutními infekcemi.57–59Potenciální roli TL při infekcích podporuje také nedávná celogenomová asociační studie v čínské populaci. Dorjee a kolegové pozorovali souvislost mezi alelou redukující TL a smrtí v důsledku respirační infekce.60RTL atrice může být silně spuštěna přítomností zvýšeného oxidačního stresu, což je běžný stav u CKD.61 Několik studií in vitro a in vivo ukázalo, že oxidační stres urychluje opotřebení telomer.62,63Telomery s vysokým obsahem guaninu jsou skutečně velmi náchylné k oxidativnímu poškození,64a zlomy jednovláknové DNA vyvolané oxidačním stresem by mohly být důležitým faktorem pro zkrácení telomer během replikace DNA.65
Přínos cistanche: zlepšení funkce ledvin
Silné stránky a omezení
Mezi silné stránky tohoto šetření patří velká velikost vzorku dobře definované populace s mediánem sledování 4 roky s téměř nulovými ztrátami při sledování, homogenita studované populace a centralizované hodnocení TL a ukazatelů výsledků. Zvláště měření RTL je nanejvýš důležité, protože standardizace mezi laboratořemi není snadné provést, a proto by měl být proces prováděn ve stejné laboratoři za přesně stejných podmínek, pokud jde o protokol, referenční gen, přístroj, personál66 a DNA. extrakční postup.67
Tato studie má určitá omezení. Nejprve byla měřena RTL v periferních leukocytech. Je známo, že rychlost progrese do stárnutí se mezi podskupinami lymfocytů liší. 59Bohužel nebyly k dispozici žádné údaje o složení krevních buněk v němčiněChronické onemocnění ledvinstudie a nebylo tedy možné tento aspekt prozkoumat. Znát RTL z různých typů ledvinových buněk by bylo zajímavé, ale není možné je získat ve velké epidemiologické studii, protože by to vyžadovalo tkáňový materiál z biopsií. Druhé omezení zahrnuje observační design studie, který neumožňuje objasnění kauzality nebo biologického mechanismu. Za třetí, studie zahrnovala především pacienty s CKD ve stadiu G3 nebo A3 a nálezy nemusí být zobecnitelné na jiná stadia CKD. Za čtvrté, souvislost s konkrétními příčinami smrti mohla být omezena statistickou silou, ale stále existovala pro 2 konkrétní hlavní příčiny smrti. A konečně, i když byly naše analýzy upraveny pro tradiční kardiovaskulární rizikové faktory a parametry funkce ledvin, nemůžeme vyloučit možnost zbytkového zmatení neznámými nebo neměřenými
proměnné. Bylo však velmi zajímavé vidět, že odhady RTL upravené podle věku a pohlaví pro různé výsledky byly velmi stabilní s další úpravou pro ostatní proměnné, což naznačuje, že RTL je relativně nezávislá na jiných proměnných, když jsou údaje upraveny o věk a pohlaví.
Závěry
Krátká relativní TL kvantifikovaná z leukocytů periferní krve byla nezávisle spojena s mortalitou ze všech příčin během 4 let sledování u pacientů se středně těžkým CKD. Tato asociace byla způsobena úmrtím v důsledku KVO a také úmrtím v důsledku infekcí.
Přínos cistanche: zlepšení funkce ledvin
METODY
Studijní populace
NěmecChronické onemocnění ledvin study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min na 1,73 m2 při přítomnosti zjevné proteinurie (stadium G1–G2, A3). Kritéria vyloučení byla nebělošská etnická příslušnost, transplantace solidních orgánů nebo kostní dřeně, aktivní malignita během 24 měsíců před screeningem, srdeční selhání stadia IV podle New York Heart Association a legální docházka nebo neschopnost poskytnout souhlas. Prezentované laboratorní parametry byly všechny měřeny z odebraných biologických vzorků v centrální laboratoři, jak bylo popsáno dříve.68 Informace o sociodemografických faktorech, lékařské a rodinné anamnéze, lécích a kvalitě života související se zdravím získal vyškolený personál prostřednictvím standardizovaných dotazníků. Prevalentní kardiovaskulární onemocnění na počátku studie bylo definováno jako anamnéza nefatálního infarktu myokardu, bypassu koronárních tepen, perkutánní transluminální koronární angioplastiky, cévní mozkové příhody a intervencí na karotických tepnách (karotická endarterektomie a/nebo karotická balónková angioplastika nebo implantace stentu).
Všichni účastníci poskytli písemný informovaný souhlas a studie byla schválena etickými komisemi všech zúčastněných institucí a zaregistrována v národním registru klinických studií (DRKS 00003971). Všechny metody byly prováděny v souladu se schválenými směrnicemi a Helsinskou deklarací. Data jsou shromažďována a spravována pomocí Askimed (https://www.askimed.com) jako cloudové webové platformy pro sběr a správu formulářů případových zpráv a laboratorních dat.
Klinické cíle během prospektivního sledování
Jak bylo nedávno popsáno, 69 pacientů je každoročně sledováno vyškoleným personálem, který střídá osobní návštěvy s návštěvami po telefonu. Během těchto návštěv jsou v rámci strukturovaného rozhovoru aktualizovány údaje o hospitalizacích, výsledných událostech a anamnéze. Veškeré zprávy o propuštění z nemocnice jsou shromažďovány od ošetřujících lékařů a/nebo nemocnic. Koncové body jsou z těchto zpráv průběžně abstrahovány vyškolenou a kontrolovanou komisí pro koncové body složenou ze 3 nezávislých lékařů podle předem specifikovaného katalogu koncových bodů. Informace o příčině úmrtí jsou převzaty z těchto zpráv a také z úmrtních listů shromážděných na matričních úřadech vždy, když je studijní personál informován o úmrtí účastníka studie.
Aktuální analýza zahrnuje všechny koncové body, ke kterým došlo do 4-ročního sledování. Pokud pacient vynechal 4-letou následnou návštěvu, zahrnuli jsme všechny koncové body do 4,5 roku po příslušné výchozí návštěvě. Doba cenzury byla proto buď 4-roční datum sledování, nebo 4,5 roku po výchozí hodnotě. Primárním výsledkem byla mortalita ze všech příčin. Aby bylo možné vyhodnotit, zda identifikované asociace lze připsat konkrétní příčině smrti, byly za sekundární výsledky považovány úmrtí z kardiovaskulárních příčin a infekční onemocnění. Skupina úmrtí na KVO zahrnovala infarkt myokardu, ischemickou chorobu srdeční, náhlou srdeční smrt, městnavé srdeční selhání, plicní embolii, onemocnění srdečních chlopní a ischemickou cévní mozkovou příhodu. Byly zaznamenány i další příčiny smrti, ale tyto podskupiny nebyly dostatečně velké, aby mohly provádět další analýzy specifické pro příčinu.
Měření RTL
Genomová DNA byla extrahována z plné krve v centrální laboratoři pomocí Chemagic Magnetic Separation Module I (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Německo). Současná analýza byla založena na 4926 pacientech, u kterých byla k dispozici měření RTL ve výchozích krevních vzorcích a údaje o mortalitě. RTL byla měřena ve čtyřech provedeních pomocí kvantitativního testu založeného na polymerázové řetězové reakci vyvinutého společností Cawthon70 a upraveného, jak bylo popsáno dříve. 71 vzorků DNA bylo analyzováno v 15-ml reakcích obsahujících 1x master mix Quantifast TM SYBR Green PCR (Qiagen, Hilden, Německo), 10 ng DNA, 1 mM telomerového primeru nebo 250 nm primeru provozního genu 36B4. Stanovili jsme relativní poměr počtu kopií repetice telomer (T) k počtu kopií genu jedné kopie (gen 36B4, kódující ribozomální fosfoprotein PO, lokalizovaný na chromozomu 12; S). Poměry T/S jsou úměrné jednotlivým RTL. Automatizace tohoto vysoce výkonného postupu vedla k velmi dobrým opatřením kontroly kvality s nízkým mezitestovým variačním koeficientem poměrů T/S. Komerčně dostupná DNA obsažená ve všech destičkách pro kvantitativní polymerázovou řetězovou reakci byla použita pro kontrolu provedení testu v průběhu celé studie. Interassay koeficient variace poměrů T/S tohoto vzorku analyzovaného ve 112 nezávislých experimentech byl 9,6 procenta před normalizací a snížil se na 4,0 procenta po normalizaci (doplňkový obrázek S2).
Statistická analýza
Porovnali jsme základní charakteristiky účastníků (tabulka 1) pomocí Kruskal-Wallisova testu pro spojité proměnné a chí-kvadrát testů pro kategorické proměnné. K odhadu kumulativní incidence různých příčin úmrtí, které zohledňují konkurenční riziko, byly použity kumulativní incidenční funkční křivky.72 Coxovy regresní modely proporcionálních rizik byly provedeny k vyhodnocení asociací RTL se 3 výsledky: (i) mortalita ze všech příčin, ( ii) úmrtí v důsledku CVD a (iii) úmrtí v důsledku infekcí. Pro oba cílové parametry specifické pro příčinu (ii a iii) byli pacienti cenzurováni, pokud k úmrtí došlo z jakékoli jiné příčiny. Kromě toho byly zkoumány souvislosti s těmito cílovými parametry specifickými pro konkrétní příčinu pomocí regrese přežití s konkurenčním rizikem, přičemž všechna úmrtí z jiných příčin byla považována za konkurenční události. Proto jak příčinově-specifické HR, tak pododdělení HR jsou hlášeny jako úmrtí v důsledku KVO nebo infekcí. Coxovy modely proporcionálních rizik byly přizpůsobeny pomocí 3 různých úrovní přizpůsobení: model 1 přizpůsobený věku a pohlaví; model 2 dodatečně upravený na výchozí eGFR, poměr albumin-kreatinin v moči, prevalenci CVD a diabetes; model 3 dále upravený pro tradiční rizikové faktory CVD, jako je cholesterol lipoproteinů s nízkou hustotou, cholesterol lipoproteinů s vysokou hustotou, index tělesné hmotnosti, kouření, systolický a diastolický krevní tlak, C-reaktivní protein a albumin. Výběr proměnných upravených pro různé modely byl založen na rozdílech v klinických charakteristikách mezi kvartily RTL uvedenými v tabulce 1. V regresních modelech byla RTL analyzována kontinuálně a jako kategorický prediktor (v kvartilech RTL). Vzhledem k tomu, že počáteční výsledky naznačovaly vyšší riziko, zejména u nízkých hodnot RTL, je (příčinně specifická) HR uváděna také pro kvartily 1, 2 a 3 ve srovnání s kvartilem 4 jako referenční (doplňková tabulka S1). Další následná analýza byla založena na vizuální kontrole P-spline pro odvození tvaru vztahu mezi RTL a rizikem mortality. K posouzení asociace mezi proměnnými studie jsme použili Spearmanův koeficient pořadové korelace. Všechny statistické analýzy byly provedeny pomocí R 3.3.2 (https://www.r-project.org); P-hodnoty<0.05 were="" considered="" statistically="">
REFERENCE
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS a kol. Vysoce konzervovaná repetitivní sekvence DNA, (TTAGGG)(n), přítomná na telomerách lidských chromozomů. Proč Natl Acad Sci US A. 1988;85:6622–6626.
2. Baird DM. Dynamika telomer v lidských buňkách. Biochimie. 2008;90:116–121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Telomery jako biomarkery stárnutí a nemocí souvisejících s věkem. Curr Mol Med. 2005;5:197–203.
4. Forero DA, González-Giraldo Y, López-Quintero C, et al. Délka telomer u Parkinsonovy choroby: metaanalýza. Exp Gerontol. 2016;75:53–55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B a kol. Délka telomer leukocytů a všechny příčiny, kardiovaskulární onemocnění a mortalita na rakovinu: výsledky z metaanalýzy dat jednotlivých účastníků ze 2 velkých prospektivních kohortových studií. Am J Epidemiol. 2017;185:1317–1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL a kol. Délka telomer a mortalita ze všech příčin: metaanalýza. Ageing Res Rev. 2018;48:11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Telomery a telomeráza ve zdraví ledvin. J Am Soc Nephrol. 2011;22:39–41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, et al. Existuje souvislost mezi zánětem, aktivitou telomerasy a stavem transkripce telomerasové reverzní transkriptázy při selhání ledvin? Cell Mol Biol Lett. 2015;20:222–236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R, et al. Genetická náchylnost k chronickému onemocnění ledvin – další kousky do skládačky dědičnosti. Přední Genet. 2019;10:453.
10. Satko SG, Freedman BI. Familiární shlukování onemocnění ledvin a související fenotypy. Med Clin North Am. 2005;89:447–456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, a kol. Celogenomové studie k identifikaci rizikových faktorů onemocnění ledvin se zaměřením na pacienty s diabetem. Transplantace nefrolového číselníku. 2015;30:iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Pohledy do onemocnění ledvin z celogenomových asociačních studií. Nat Rev Nephrol. 2016;12:549–562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, et al. Asociace lokusů souvisejících s eGFR identifikovaných pomocí GWAS s incidentem CKD a ESRD. PLoS Genet. 2011;7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM a kol. Genetická ložiska ovlivňující funkci ledvin a chronické onemocnění ledvin. Nat Genet. 2010;42:373–375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, et al. Nové lokusy spojené s funkcí ledvin a chronickým onemocněním ledvin. Nat Genet. 2010;42:376–384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M, et al. Genetické asociace na 53 lokusech zdůrazňují buněčné typy a biologické dráhy relevantní pro funkci ledvin. Nat Commun. 2016;7:10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M a kol. Katalog genetických lokusů spojených s funkcí ledvin z analýz milionu jedinců. Nat Genet. 2019;51:957–972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M a kol. Souvislost mezi funkcí ledvin a délkou telomer: studium srdce a duše. Am J Nephrol. 2012;36:405–411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH a kol. Krátká délka telomer je spojena s poškozením ledvin u japonských subjektů s kardiovaskulárním rizikem. PLoS One. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA a kol. Renální dysfunkce je spojena s kratší délkou telomer při srdečním selhání. Clin Res Cardiol. 2009;98:629–634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Asociace relativní délky telomer s kardiovaskulárním onemocněním ve velké kohortě chronického onemocnění ledvin: studie GCKD. Ateroskleróza. 2015;242:529–534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Mají telomery vyšší plasticitu, než se myslelo? Výsledky německé studie chronického onemocnění ledvin (GCKD) jako vysoce riziková populace. Exp Gerontol. 2015;72: 162–166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J, et al. Asociace relativní délky telomer s progresí chronického onemocnění ledvin ve dvou kohortách: modifikace účinku kouřením a diabetem. Sci Rep. 2015;5:1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, et al. Předčasné stárnutí cirkulujících T buněk u pacientů s terminálním onemocněním ledvin. Kidney Int. 2011;80:208–217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S, et al. Délka telomerického G-tailu a hospitalizace pro kardiovaskulární příhody u hemodialyzovaných pacientů. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:2117–2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S, et al. Stresem indukované předčasné stárnutí v mononukleárních buňkách od pacientů na dlouhodobé hemodialýze. Am J Kidney Dis. 2005;45:353–359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F, et al. Aktivita telomerázy je snížena v mononukleárních buňkách periferní krve hemodialyzovaných pacientů. Am J Nephrol. 2006;26:91–96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, et al. Opotřebování telomer je spojeno se zánětem, nízkými hladinami fetuinu-A a vysokou mortalitou u převažujících hemodialyzovaných pacientů. J Intern Med. 2008;263:302–312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A, et al. Opotřebování telomer, funkce ledvin a převládající chronické onemocnění ledvin ve Spojených státech. Oncotarget. 2017;8:80175–80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A, et al. Aktivita telomerázy u pacientů s chronickým onemocněním ledvin ve stádiu 2–5D. Nefrologie. 2017;37:592–597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E, et al. Asociace adipozity, délky telomer a mortality: údaje z NHANES 1999-2002. Int J Obes. 2018;42:198–204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, et al. Délka telomer leukocytů a mortalita ve studii kardiovaskulárního zdraví. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011;66A:421–429.
33. Needham BL, Rehkopf D. Délka a mortalita telomer leukocytů v National Health and Nutrition Examination Survey, 1999–2002. Epidemiologie. 2015;26:528–535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G, et al. Délka telomer a mortalita ve studii rizika a kardiovaskulárního zdraví v Ludwigshafenu. PLoS One. 2018;13:e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. Délka telomer leukocytů v periferní krvi a mortalita mezi 64 637 jednotlivci z obecné populace. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. Délka telomer leukocytů a mortalita u dospělých v USA: modifikace účinku chováním při fyzické aktivitě. J Sports Sci. 2018;36:213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U a kol. Délka telomer leukocytů a skóre rizika úmrtnosti na základě epigenetiky: souvislosti s mortalitou ze všech příčin u starších dospělých. Epigenetika. 2018;13:846–857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M, et al. Asociace mezi zkrácenou délkou telomer leukocytů a kardiometabolickými výsledky: systematický přehled a metaanalýza. Circ Cardiovasc Genet. 2015;8:82–90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S, a kol. Délka telomer leukocytů a riziko kardiovaskulárního onemocnění: systematický přehled a metaanalýza. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG a kol. Krátká délka telomer a
ischemická choroba srdeční: observační a genetické studie u 290 022 jedinců. Clin Chem. 2016;62:1140–1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M, et al. Délka telomer leukocytů a kardiovaskulární onemocnění u Afroameričanů: The Jackson Heart Study. Ateroskleróza. 2017;266:41–47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T a kol. Kratší délka telomer leukocytů je spojena s vyšším rizikem infekcí: prospektivní studie 75 309 jedinců z obecné populace. Hematologica.2017;102:1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E, a kol. Asociace mezi délkou telomer v krvi a úmrtností u lidí ve věku 60 let nebo starších. Lanceta. 2003;361:393–395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, et al. Asociace mezi délkou telomer, konkrétními příčinami smrti a roky zdravého života ve zdraví, stárnutí a složení těla: populační kohortová studie. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E, et al. Identifikace sedmi lokusů ovlivňujících střední délku telomer a jejich souvislost s onemocněním. Nat Genet. 2013;45:422–427.
46. Zhan Y, Hägg S. Délka telomer a riziko kardiovaskulárních onemocnění. Curr Opin Cardiol. 2019;34:270–274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D, a kol. Exprese CDKN2A/p16INK4a je spojena s vaskulární progerií u chronického onemocnění ledvin.
Stárnutí (Albany. NY). 2017;9:494–507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y, et al. Obsah telomer DNA krevních leukocytů předpovídá obsah vaskulární telomerové DNA u lidí s vaskulárním onemocněním a bez něj. Eur Heart J. 2008;29:2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J, et al. Krátké telomery indukují p53 a autofagii a modulují s věkem související změny v osudu srdečních progenitorových buněk. Kmenové buňky. 2018;36:868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, a kol. Transkripční koaktivátory PGC-la a PGC-lb řídí překrývající se programy potřebné pro perinatální zrání srdce. Genes Dev. 2008;22:1948–1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Telomery a mitochondrie ve stárnoucím srdci. Circ Res. 2012;110:1226–1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S, et al. Měření fluorescence telomer v podskupinách granulocytů a T lymfocytů ukazují na vysokou hodnotu.
