Proteomické a cytokinové analýzy rozlišují případy myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu od kontrol, část 3

Proč budeme unavení? Jak můžeme vyřešit problémy s únavou?

【Kontakt】E-mail: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501

Cistanche může působit jako prostředek proti únavě a posilovač vytrvalosti a experimentální studie ukázaly, že odvar z Cistanche tubulosa by mohl účinně chránit jaterní hepatocyty a endoteliální buňky poškozené u zátěžových plaveckých myší, regulovat expresi NOS3 a podporovat jaterní glykogen. syntézy, čímž působí proti únavě. Extrakt Cistanche tubulosa bohatý na fenylethanoidní glykosidy by mohl významně snížit hladinu kreatinkinázy, laktátdehydrogenázy a laktátu v séru a zvýšit hladiny hemoglobinu (HB) a glukózy u myší ICR, což by mohlo hrát roli proti únavě snížením poškození svalů. a oddálení obohacení kyselinou mléčnou pro skladování energie u myší. Compound Cistanche Tubulosa Tablets významně prodloužil čas plavání při zátěži, zvýšil rezervu jaterního glykogenu a snížil hladinu močoviny v séru po cvičení u myší, což prokázalo jeho účinek proti únavě. Odvar z Cistanchis může zlepšit vytrvalost a urychlit odstranění únavy u cvičících myší a může také snížit zvýšení sérové ​​kreatinkinázy po zátěžovém cvičení a udržet ultrastrukturu kosterního svalstva myší po cvičení normální, což naznačuje, že má účinky na zvýšení fyzické síly a proti únavě. Cistanchis také významně prodloužil dobu přežití myší otrávených dusitany a zvýšil toleranci vůči hypoxii a únavě.

Klikněte na Vždy unavený

Vyšší hladiny jiného proteinu spojeného s hemostázou, PROS1, korelují s horším zdravím u kontrol, ale nemají žádnou významnou souvislost s ME/CFS kohortou (obr. 7a). PROS1, také známý jako Protein S, je dobře známý regulátor hemostázy s důležitými antikoagulačními účinky [62]. Skutečnost, že nekoreluje se zdravím pacientů s ME/CFS, může odrážet narušenou kontrolu hemostázy u onemocnění.

Vyšší hladiny CETP, Cholesteryl Ester Transfer Protein, jsou spojeny se zvýšenou únavou na MFI-20 (obr. 7a). Tento protein řídí výměnu cholesterylesterů a triglyceridů mezi HDL a lipoproteiny s nízkou hustotou (LDL) a očekává se, že vyšší CETP povede k méně příznivému poměru LDL/HDL, který je spojen se srdečním onemocněním [63]. Bylo pozorováno, že imunitní buňky u pacientů s ME/CFS vykazují změněnou oxidaci mastných kyselin, což by mohlo souviset s rozdíly ve složení mastných kyselin v plazmě [64].

Vyšší hladiny SERPINA5 byly spojeny s lepším skóre na škálách SF-36 obecného zdraví a sociálního fungování (obr. 7b). SERPINA5 je secernovaný inhibitor serinových proteáz, jehož funkce nejsou zcela pochopeny [65]. Původně byl identifikován jako inhibitor antikoagulačního proteinu C aktivovaného proteázou [66]. I když tato skutečnost naznačuje, že vyšší SERPINA5 může zvýšit koagulaci, studie in vitro prokázala, že SERPINA5 může sloužit jako antikoagulant i prokoagulant v závislosti na přítomnosti trombomodulinu [67]. Krevní destičky obsahují SERPINA5 mRNA a mohou také přijímat protein z vnějšího prostředí [68]. Naše financování korelace zdravotního stavu ME/CFS s proteinem zapojeným do hemostázy může být relevantní pro nedávné nálezy aktivovaných krevních destiček a mikrosraženin u ME/CFS [69], stejně jako změněných profilů exprese genů krevních destiček [52]. Kromě toho byly varianty v genu SERPINA5 již dříve spojovány s ME/CFS [70].

Korelace s několika proteiny byly detekovány pomocí robustní lineární regrese, která nebyla nalezena pomocí Spearmanovy korelace (tabulka 3). CSF3, také známý jako faktor stimulující kolonie granulocytů, se ve skupině ME/CFS zvyšuje s věkem, ale v celé kohortě je s věkem nižší, což možná ukazuje na zánětlivý stav v kohortě pacientů. EV chemokin CXCL1, který přitahuje neutrofily do oblastí infekce nebo poranění, klesá s věkem v celé kohortě. Předpokládá se, že PFN1, profilin-1, který reguluje polymeraci aktinu, bude vyšší u mužů v celé kohortě, ale nižší u mužů s ME/CFS.

Použili jsme klasifikátory strojového učení k identifikaci proteinů, které rozlišují mezi případy a kontrolami. Dříve byl soubor proteomických dat podroben podobné analýze pomocí LASSO, Random Forest a XGBoost [14]. Sedm proteinů je společných pro 20 nejlepších seznamů všech tří metod strojového učení. Kromě EV IL2 to byly CAMP, IGLV1-47, CRTAC1, LRG1, IGF1 a TUBA1. Čtyři z nich byly také ve skupině 8 proteinů, které byly společné všem třem metodám v předchozí studii, která analyzovala pouze data proteomiky plazmy [14]. IGF1 a TUBA1ABC nebyly mezi 20 nejlepšími, když byla v předchozí studii zvažována celková kohorta. Ze sedmi běžných proteinů byly pouze EV IL2 a CAMP (Cathelicidin AntiMicrobial Protein) zvýšeny v případech oproti kontrolám a oba jsou prozánětlivé. Význam snížení ILGVI- 47 (Immunoglobulin Lambda Variable 1–47) v případech je obtížné předvídat, ale mohl by odrážet určitý neznámý genotypový účinek na náchylnost k ME/CFS. CRTAC1 (Cartilage Acidic Protein 1) je protein extracelulární matrix neznámé funkce, ale zlepšil růst dermálních fibroblastů in vitro, takže nižší hladiny by mohly být škodlivé. LRG1 (leucin bohatý alfa-2-glykoprotein 1) je vylučován z hepatocytů a neutrofilů a vyšší hladiny jsou spojeny s prospěšnými funkcemi (podporou hojení ran), ale také s řadou onemocnění; význam jeho snížení tedy není znám [71]. Nižší hladiny IGF1 (Insulin-like Growth Factor 1) jsou pravděpodobně pro zdraví nepříznivé vzhledem k jeho vlastnostem podporujícím růst a účinkům na metabolismus [72, 73]. Geny TUBA1A, TUBA1B a TUBA1C kódují tubulin, základní složku cytoskeletu [74]. Tubulinová signalizace je po chemoterapii narušena a předpokládá se, že hraje roli v neurokognitivní poruše, která často vzniká po léčbě [75].

IL2 umístěný v EV se nachází ve všech třech seznamech. IL2 byl jediným EV cytokinem, který rozlišoval případy a kontroly při q<0.05 (Fig. 3). In our prior pilot study of EV cytokines in 35 cases and 35 controls, we did not find any significant difference in IL2 between cohorts [25]. Other EV cytokines that featured in the top 20 are VEGF, NGFB, IL15, CXCL8, CXCL10, CCL5, and CCL7, although VEGF, IL15, and CXCL10 did not discriminate cases and controls at q<0.2, according to Wilcoxon tests  (Fig. 3). Plasma cytokines IL7, TNFα, IL12p70, and IL22 were included on one or two of the top 20 lists. While no significant differences in any plasma cytokines were detected following correction for multiple testing, before correction TNFα was increased in cases at p=0.016 [26]. Previously, Hornig et al. [41], who performed a larger study, with 298 cases and 348 controls, did not find significant differences between cases and controls for these cytokines. The cytokine profiling literature in ME/CFS has not resulted in consistent conclusions regarding altered cytokine levels between ME/CFS and controls.

Tato práce má určitá omezení. Za prvé, naše studie má malý vzorek, zejména vzhledem k heterogenitě příznaků onemocnění a při měření velkého počtu proměnných. Robustnost našich zjištění je třeba ověřit na rozmanitějších a větších kohortách.

Ačkoli ME/CFS má vyšší zátěž nemocí u žen [76] a v poslední době byl objeven rostoucí počet rozdílů mezi pohlavími v jeho patofyziologii [77, 78], nebyli jsme v naší studii schopni uvést rozčleněná data o pohlaví kvůli omezení velikosti vzorku. (8 a 9 mužů ve srovnání se 41 a 40 ženami pro kontrolní a ME/CFS populace, v daném pořadí). Statistická srovnání mezi pohlavími proto nebyla v naší současné studii proveditelná.

Tato studie zkoumala pouze periferní krev a neanalyzovala jiné kompartmenty, jako je cerebrospinální mok. Navzdory malé velikosti vzorku však byly ve studiích mozkomíšního moku identifikovány abnormality v proteinech pacientů s ME/CFS [9, 46, 79]. Budoucí proteomický výzkum periferní krve pacientů s ME/CFS by se měl snažit stanovit korelace s těmito zjištěními.

Zde bylo provedeno měření cytokinů v plazmě a EV pomocí různých multiplexních testů. Konkrétně 61-plex od společnosti Affymetrix byl použit k analýze cytokinů ve vzorcích plazmy, zatímco 48-plex od společnosti Biorad byl použit k měření obsahu cytokinů v EV.

Rozhodli jsme se pro precipitační metodu pro izolaci EV kvůli omezeným objemům vzorků (500 ul) a abychom umožnili analýzu kompletní populace EV. Použití precipitačního činidla ExoQuick má tendenci poskytovat nižší čistotu pro EV izolované frakce ve srovnání s jinými metodami, jako je ultracentrifugace a gelová vylučovací chromatografie. Budoucí studie porovnávající tyto metody v analýze cytokinů budou informativní, aby bylo zajištěno, že naše výsledky budou reprodukovatelné pomocí jiných metod izolace EV. Kromě toho nebyly EV rozděleny do různých frakcí podle velikosti nebo přítomnosti konkrétních povrchových molekul, aby bylo možné tyto frakce analyzovat samostatně. Určitě se objeví zřetelné vzory naznačující selektivní balení specifických proteinů do specifických EV.

Je třeba poznamenat, že korelace uvedené v této studii nenaznačují vztahy příčina-účinek a ke stanovení kauzality je zapotřebí další výzkum. Například protože strava subjektů nebyla v této studii kontrolována, nesrovnalosti v profilech cytokinů mezi různými skupinami mohly být připsány rozdílům v jejich stravě [80–82]. Nemůžeme tedy vyloučit možnost, že dietní faktory mohly ovlivnit naše výsledky.

Nakonec, protože tato studie použila průřezový přístup; zkoumání podélných změn v EV by vyžadovalo další průzkum. Jednorázový odběr vzorku navíc zabraňuje určení, zda souvislosti mezi symptomy a proteinovými profily v plazmě a EV pacientů s ME/CFS pramení z progrese onemocnění. Budoucí výzkum je zásadní pro zjištění, zda pacienti s ME/CFS konzistentně vykazují specifický cytokinový podpis a klasifikaci závažnosti onemocnění v průběhu času, nebo zda tyto faktory kolísají.

Závěry

Tato práce demonstruje důležitost shromažďování klinických dat k určení, zda konkrétní molekuly korelují se stavem subjektů, což umožňuje vyvodit o nich závěry, i když se jejich střední hodnoty mezi případy a kontrolami liší jen málo. Znovu jsme ukázali, že cytokinové/chemokinové signální sítě v oběhu jsou změněny mezi případy ME/CFS a kontrolami. Nakonec jsme identifikovali 20 proteinů, jejichž hladiny poskytovaly velmi vysokou citlivost a specificitu pro rozlišení ME/CFS a kontrolních vzorků. Lépe zvládnutelná podskupina 7 z 20 proteinů stále umožňuje značné oddělení pacientů od kontrol (AUROC=0.891, obr. 8). Tato zjištění čekají na potvrzení ve větším souboru dat, aby se určilo, zda mohou být klinicky užitečné pro diagnostiku nebo sledování odpovědi na léčbu.

Zkratky

ME/CFS Myalgická encefalomyelitida/chronický únavový syndrom

EVs Extracelulární vezikuly

Analýza sledování nanočástic NTA

PCA Analýza hlavních komponent

SF-36 Krátký formulář 36 zdravotního průzkumu

MFI-20 Multidimenzionální škála inventáře únavy

AUC Oblast pod křivkou

BMI Index tělesné hmotnosti

IBS Syndrom dráždivého tračníku

LASSO Operátor nejmenšího absolutního smrštění a výběru

FDR's False Discovery Rate

AUROC Oblast pod provozní charakteristikou přijímače

Poděkování

Tato práce využívala vybavení v Cornell NanoScale Science & Technology Facility (CNF), která je členem National Nanotechnology Coordinated Infrastructure NNCI), která je podporována National Science Foundation (Grant NNCI-2025233). Děkujeme odborníkům ME/CFS Drs. Lucindě Batemanové, Nancy Klimasové, Susan Levineové a Danielu Petersonovi za identifikaci subjektů a kontrol ME/CFS a odběr krve. Všem subjektům děkujeme za účast.

Autorské příspěvky

Designovaný výzkum (LG, MRH); provedené experimenty (JL, LG); analýza dat (JL, LG); psaní rukopisů (JL, LG, DR, MRH). MH a WIL zkontrolovali a upravili rukopis a poskytli soubory cytokinů a proteomických dat. JL provedl statistickou analýzu pod dohledem LG a DR. Společnost LG zkontrolovala analýzu JL a připravila rukopis. Pořadí autorů mezi spoluprvními autory bylo přiděleno podle množství práce. Všichni autoři přečetli a schválili konečný rukopis.

Financování

Děkujeme iniciativě Chronic Fatigue Initiative Hutchins Family Foundation za podporu sběru vzorků krve a dat z průzkumů od ME/CFS a kontrolních subjektů. Zde uvedená analýza dat byla financována NIH U54NS105541 středisku Cornell University ME/CFS.

Dostupnost dat a materiálů

Data pro extracelulární velikost vezikul, kvantifikaci a obsah cytokinů jsou k dispozici na vyžádání autorům. Proteomická data hmotnostní spektrometrie byla uložena do konsorcia ProteomeXchange Consortium prostřednictvím partnerského úložiště PRIDE s identifikátorem datové sady PXD016622.

Prohlášení

Etický souhlas a souhlas s účastí

Od všech účastníků byl získán písemný souhlas a všechny protokoly byly schváleny Institutional Review Board na Columbia University Irving Medical Center.

Souhlas se zveřejněním

Všichni autoři zkontrolovali a schválili konečnou verzi k odeslání.

Konkurenční zájmy

Autoři prohlašují, že nemají žádné konkurenční zájmy.

Podrobnosti o autorovi

1 Katedra molekulární biologie a genetiky, Cornell University, 323 Biotechnology Building, 526 Campus Road, Ithaca, NY 14853, USA. 2 Katedra statistiky a datové vědy, Cornell University, Ithaca, NY, USA. 3 Centrum pro infekce a imunitu, Columbia University Mailman School of Public Health, New York, NY, USA. 4 Department of Epidemiology, Columbia University Mailman School of Public Health, New York, NY, USA. 5 Ústav neurologie a patologie, College of Physicians and Surgeons, Columbia University, New York, NY, USA. 6 Škola operačního výzkumu a informačního inženýrství, Cornell University, Ithaca, NY, USA.

Reference

1. IoM C. Kromě myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu: předefinování nemoci. Washington: National Academies Press; 2015.

2. Chia JKS. Role enteroviru u chronického únavového syndromu. J Clin Pathol. 2005;11:1126.

3. O'Neal AJ, Hanson, MR. Enterovirová teorie etiologie onemocnění u myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu: kritický přehled. Přední Med. 2021;8:688486.

4. Hanson MR, Germain A. Dopis editorovi metabolitů. Metabolity. 2020;10(5):216.

5. Davis HE, Assaf GS, McCorkell L, Wei H, Low RJ, Re'em Y a kol. Charakterizace dlouhého COVID v mezinárodní kohortě: 7 měsíců symptomů a jejich dopadu. ECklinická medicína. 2021;38:101019.

6. Sukocheva OA, Maksoud R, Beeraka NM, Madhunapantula SV, Sinelnikov M, Nikolenko VN, et al. Analýza stavu po COVID{2}} a jeho překrývání s myalgickou encefalomyelitidou/chronickým únavovým syndromem. J Adv Res. 2022;40:179–96.

7. Giford EJ, Vahey J, Hauser ER, Sims KJ, Efrd JT, Dursa EK, et al. Nemoc z války v Perském zálivu v kohortě a biorepozitáři éry války v Zálivu: Kansas a centra pro definice kontroly nemocí. Life Sci. 2021;278:119454.

8. Baraniuk JN. Přehled jader ascendentní vzrušovací sítě středního mozku a důsledky pro myalgickou encefalomyelitidu/chronický únavový syndrom (ME/CFS), válečnou nemoc v Zálivu (GWI) a postexerční malátnost (PEM). Brain Sci. 2022; 12(2):132.

9. Baraniuk JN, Casado B, Maibach H, Clauw DJ, Pannell LK, Hess SS. Proteom v lidském mozkomíšním moku související se syndromem chronické únavy. BMC Neurol. 2005;5(1):1–19.

10. Schutzer SE, Angel TE, Liu T, Schepmoes AA, Clauss TR, Adkins JN, et al. Výrazné proteomy mozkomíšního moku odlišují lymskou boreliózu po léčbě od chronického únavového syndromu. PLoS ONE. 2011;6(2):e17287.

11. Germain A, Ruppert D, Levine SM, Hanson MR. Metabolické profilování kohorty myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu odhaluje poruchy metabolismu mastných kyselin a lipidů. Mol BioSyst. 2017;13(2):371–9.

12. Germain A, Ruppert D, Levine SM, Hanson MR. Prospektivní biomarkery z plazmatické metabolomiky myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu implikují redoxní nerovnováhu v symptomatologii onemocnění. Metabolity. 2018;8(4):90.

13. Nagy-Szakal D, Barupal DK, Lee B, Che X, Williams BL, Kahn EJ a kol. Pohledy na fenotyp myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu prostřednictvím komplexní metabolomiky. Sci Rep. 2018;8(1):10056.

14. Milivojevic M, Che X, Bateman L, Cheng A, Garcia BA, Hornig M, et al. Plazmatické proteomické profilování naznačuje souvislost mezi expanzí klonálních B buněk řízenou antigenem a ME/CFS. PLoS ONE. 2020;15(7):e0236148.

15. Fleshner M, Crane ČR. Exosomy, DAMP a miRNA: rysy stresové fyziologie a imunitní homeostázy. Trends Immunol. 2017;38(10):768–76.

16. Barnes BJ, Somerville CC. Modulace produkce cytokinů prostřednictvím vybraného balení a sekrece z extracelulárních vezikul. Front Immunol. 2020;11:1040.

17. Rajendran L, Honsho M, Zahn TR, Keller P, Geiger KD, Verkade P a kol. Při Alzheimerově chorobě se -amyloidní peptidy uvolňují ve spojení s exozomy. Proč Natl Acad Sci. 2006;103(30):11172–7.

18. Słomka A, Urban SK, Lukacs-Kornek V, Żekanowska E, Kornek M. Velké extracelulární vezikuly: našli jsme svatý grál zánětu? Front Immunol. 2018;9:2723.

19. Yoon YJ, Kim OY, Gho YS. Extracelulární vezikuly jako nově vznikající mezibuněčné komunikátory. BMB Rep. 2014;47(10):531.

20. Jung KH, Chu K, Lee ST, Park HK, Bahn JJ, Kim DH a kol. Cirkulující endoteliální mikročástice jako marker cerebrovaskulárního onemocnění. Ann Neurol Z J Am Neurol Assoc Child Neurol Soc. 2009;66(2):191–9.

21. König L, Kasimir-Bauer S, Bittner AK, Hofmann O, Wagner B, Santos Manvailer LF a kol. Zvýšené hladiny extracelulárních vezikul jsou spojeny se selháním terapie a progresí onemocnění u pacientek s rakovinou prsu podstupujících neoadjuvantní chemoterapii. Onkoimunologie. 2018;7(1):e1376153.

22. Lee CH, Im EJ, Moon PG, Baek MC. Objev diagnostického biomarkeru pro rakovinu tlustého střeva prostřednictvím proteomického profilování malých extracelulárních vezikul. BMC rakovina. 2018;18(1):1–11.

23. Castro-Marrero J, Serrano-Pertierra E, Oliveira-Rodríguez M, Zaragozá MC, Martínez-Martínez A, Blanco-López MC, et al. Cirkulující extracelulární vezikuly jako potenciální biomarkery u chronického únavového syndromu/myalgické encefalomyelitidy: explorativní pilotní studie. J Extracell vesicles. 2018;7(1):1453730.

24. Eguchi A, Fukuda S, Kuratsune H, Nojima J, Nakatomi Y, Watanabe Y, et al. Identifikace proteinů aktinové sítě, talinu-1 a flaminu-A, v cirkulujících extracelulárních váčcích jako krevní biomarkery pro lidskou myalgickou encefalomyelitidu/syndrom chronické únavy. Brain Behav Immun. 2020;84:106–14.

25. Giloteaux L, O'Neal A, Castro-Marrero J, Levine SM, Hanson MR. Cytokinové profilování extracelulárních vezikul izolovaných z plazmy u myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu: pilotní studie. J Transl Med. 2020;18(1):387.

26. Nagy-Szakal D, Williams BL, Mishra N, Che X, Lee B, Bateman L a kol. Fekální metagenomické profily u podskupin pacientů s myalgickou encefalomyelitidou/chronickým únavovým syndromem. Mikrobiom. 2017;5(1):44.

27. Klimas NG, Ironson G, Carter A, Balbin E, Bateman L, Felsenstein D, et al. Poznatky z klinické a laboratorní databáze vyvinuté pro objev patogenních mechanismů u myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu. Únava Biomed Health Behav. 2015;3:75–96.

28. Fukuda K, Straus SE, Hickie I, Sharpe MC, Dobbins JG, Komarof A. Syndrom chronické únavy: komplexní přístup k jeho definici a studiu. Mezinárodní studijní skupina pro chronický únavový syndrom. Ann Intern Med. 1994;121(12):953–9.

29. Carruthers BM, Jain AK, De Meirleir KL, Peterson DL, Klimas NG, Lerner AM, et al. Myalgická encefalomyelitida/chronický únavový syndrom: definice klinického pracovního případu, diagnostické a léčebné protokoly. J Chronický únavový syndrom. 2003;11:7–115.

30. Ware JE Jr, CD Sherbourne. The MOS 36-item short-form health survey (SF-36): I. Koncepční rámec a výběr položek. Med Care. 1992;30(6):473–83.

31. Smets EM, Garssen B, Bonke B, De Haes JC. Psychometrické vlastnosti vícerozměrného inventáře únavy (MFI) nástroje pro hodnocení únavy. J Psychosom Res. 1995;39(3):315–25.

32. Fitzgerald W, Freeman ML, Lederman MM, Vasilieva E, Romero R, Margolis L. Systém cytokinů enkapsulovaných v extracelulárních vezikulách. Sci Rep. 2018;8(1):8973.

33. Huber PJ. Robustní statistika. New York: John Wiley & Sons; 1981.

34. Huber PJ. Robustní odhad parametru umístění. Ann Math Stat. 1964;35:73–101.

35. Benjamini Y, Hochberg FH. Řízení míry falešných objevů: praktický a účinný přístup k vícenásobnému testování. JR Stat Soc. 1995;57(1):289–300.

36. Benjamini Y, Krieger AM, Yekutieli D. Adaptivní lineární postupné zvyšování, které řídí míru falešných objevů. Biometrika. 2006;3(3):491–507.

37. Breiman L. Náhodné lesy. Mach se učit. 2001;45:5–32.

38. Chen T, Guestrin C, redaktoři. XGBoost: škálovatelný systém posilování stromu. In: Sborník příspěvků z 22. mezinárodní konference ACM SIGKDD o objevování znalostí a data miningu KDD 16; 2016.

39. Tibshirani R. Regresní smršťování a selekce pomocí lasa. J Roy Stat Soc Ser B. 1996;58:267–88.

40. Yanez-Mo M, Siljander PR, Andreu Z, Zavec AB, Borras FE, Buzas EI a kol. Biologické vlastnosti extracelulárních vezikul a jejich fyziologické funkce. J Extracell vesicles. 2015;4:27066.

41. Hornig M, Montoya JG, Klimas NG, Levine S, Felsenstein D, Bateman L, et al. Zřetelné plazmatické imunitní signatury u ME/CFS jsou přítomny časně v průběhu onemocnění. Sci Adv. 2015;1(1):e1400121.

42. Castro-Marrero J, Serrano-Pertierra E, Oliveira-Rodriguez M, Zaragoza MC, Martinez-Martinez A, Blanco-Lopez MDC a kol. Cirkulující extracelulární vezikuly jako potenciální biomarkery u chronického únavového syndromu/myalgické encefalomyelitidy: explorativní pilotní studie. J Extracell vesicles. 2018;7(1):1453730.

43. Montoya JG, Holmes TH, Anderson JN, Maecker HT, Rosenberg-Hasson Y, Valencia IJ a kol. Cytokinový podpis spojený se závažností onemocnění u pacientů s chronickým únavovým syndromem. Proč Natl Acad Sci USA. 2017;114(34):E7150–8.

44. Jason LA, Gaglio CL, Furst J, Islam M, Sorenson M, Conroy KE a kol. Analýza cytokinové sítě v komunitním pediatrickém vzorku pacientů s myalgickou encefalomyelitidou/syndromem chronické únavy. Chronic Illn. 2022.

45. Strawbridge R, Sartor ML, Scott F, Cleare AJ. Zánětlivé proteiny se u chronického únavového syndromu mění – systematický přehled a metaanalýza. Neurosci Biobehav Rev. 2019;107:69–83.

46. ​​Hornig M, Gottschalk G, Peterson D, Knox K, Schultz A, Eddy M, et al. Analýza cytokinové sítě mozkomíšního moku u myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu. Mol psychiatrie. 2016;21(2):261–9.

47. Cheney PR, Dorman SE, Bell DS. Interleukin-2 a syndrom chronické únavy. Ann Intern Med. 1989;110(4):321.

48. Jason LA, Cotler J, Islam MF, Furst J, Sorenson M, Katz BZ. Analýza cytokinových sítí odhaluje další rozdíly mezi těmi, u kterých se po infekční mononukleóze rozvine myalgická encefalomyelitida/syndrom chronické únavy. Únava Biomed Health Behav. 2021;9(1):45–57.

49. Chen D, Dorling A. Kritické role trombinu u akutního a chronického zánětu. J Thromb Haemost. 2009;7(Suppl 1):122–6.

50. Hercus TR, Broughton SE, Ekert PG, Ramshaw HS, Perugini M, Grimbaldeston M, et al. Rodina receptorů GM-CSF: mechanismus aktivace a důsledky pro onemocnění. Růstové faktory. 2012;30(2):63–75.

51. Boyette LB, Macedo C, Hadi K, Elinof BD, Walters JT, Ramaswami B a kol. Fenotyp, funkce a diferenciační potenciál podskupin lidských monocytů. PLoS ONE. 2017;12(4):e0176460.

52. Ahmed F, Vu LT, Zhu H, Iu DSH, Fogarty EA, Kwak Y, et al. Jednobuněčná transkriptomika imunitního systému u ME/CFS na začátku a po provokaci symptomů. BioRXiv. 2022.

53. Deshmane SL, Kremlev S, Amini S, Sawaya BE. Monocytový chemoatraktant protein-1 (MCP-1): přehled. J Interferon Cytokine Res. 2009;29(6):313–26.

54. Stringer EA, Baker KS, Carroll IR, Montoya JG, Chu L, Maecker HT a kol. Denní fluktuace cytokinů, řízené leptinem, jsou spojeny se závažností únavy u chronického únavového syndromu: důkaz zánětlivé patologie. J Transl Med. 2013;11:93.

55. Vazirinejad R, Ahmadi Z, Kazemi Arababadi M, Hassanshahi G, Kennedy D. Biologické funkce, struktura a zdroje CXCL10 a jeho významná část v patofyziologii roztroušené sklerózy. NeuroImmunomodulace. 2014;21(6):322–30.

56. Villeda SA, Luo J, Mosher KI, Zou B, Britschgi M, Bieri G a kol. Stárnoucí systémové prostředí negativně reguluje neurogenezi a kognitivní funkce. Příroda. 2011;477(7362):90–4.

57. Patarca R, Klimas NG, Lugtendorf S, Antoni M, Fletcher MA. Dysregulovaná exprese tumor nekrotizujícího faktoru u chronického únavového syndromu: vzájemné vztahy s buněčnými zdroji a vzorce exprese rozpustných imunitních mediátorů. Clin Infect Dis. 1994;18(Suppl 1):S147–53.

58. Moss RB, Mercandetti A, Vojdani A. TNF-alfa a syndrom chronické únavy. J Clin Immunol. 1999;19(5):314–6.

59. Fruhbeck G, Catalan V, Ramirez B, Valenti V, Becerril S, Rodriguez A, et al. Sérové ​​hladiny IL-1 RA se zvyšují s obezitou a diabetem 2. typu o dysfunkci tukové tkáně a po bariatrické operaci se snižují souběžně s adipozitou. J Infamm Res. 2022;15:1331–45.

60. Luotola K. antagonista receptoru IL-1 (IL-1Ra) a řízení metabolických poruch. Živiny. 2022;14(16):3422.

61. Fletcher MA, Zeng XR, Barnes Z, Levis S, Klimas NG. Plazmatické cytokiny u žen s chronickým únavovým syndromem. J Transl Med. 2009;7:96.

62. Gierula M, Ahnstrom J. Antikoagulační protein S-Nové poznatky o interakcích a funkcích. J Thromb Haemost. 2020;18(11):2801–11.

63. Taheri H, Filion KB, Windle SB, Reynier P, Eisenberg MJ. Inhibitory proteinu přenosu cholesterylesteru a kardiovaskulární výsledky: systematický přehled a metaanalýza randomizovaných kontrolovaných studií. Kardiologie. 2020;145(4):236–50.

64. Maya J, Leddy S, Gottschalk C, Peterson D, Hanson MR. Změněná oxidace mastných kyselin v populacích lymfocytů myalgické encefalomyelitidy / syndromu chronické únavy. Int J Mol Med. 2023;24(3):2010.

65. Yang H, Geiger M. Cell penetrating SERPINA5 (ProteinC inhibitor, PCI): více otázek než odpovědí. Semin Cell Dev Biol. 2017;62:187–93.

66. Marlar RA, Grifn JH. Deficit inhibitoru proteinu C u kombinovaného deficitu faktoru V/VIII. J Clin Invest. 1980;66(5):1186–9.

67. Elisen MG, von dem Borne PA, Bouma BN, Meijers JC. Inhibitor proteinu C působí jako prokoagulant inhibicí trombomodulinem indukované aktivace proteinu C v lidské plazmě. Krev. 1998;91(5):1542–7.

68. Prendes MJ, Bielek E, Zechmeister-Machhart M, Vanyek-Zavadil E, Carroll VA, Breuss J, et al. Syntéza a ultrastrukturální lokalizace inhibitoru proteinu C v lidských krevních destičkách a megakaryocytech. Krev. 1999;94(4):1300–12.

69. Nunes JM, Kruger A, Proal A, Kell DB, Pretorius E. Výskyt hyperaktivovaných krevních destiček a fibrinoidních mikrosraženin u myalgické encefalomyelitidy/chronického únavového syndromu (ME/CFS). Léčiva. 2022;15(8):931.

70. Rajeevan MS, Dimulescu I, Murray J, Falkenberg VR, Unger ER. Genetické hodnocení imunitních a zánětlivých genů se syndromem chronické únavy zaměřené na dráhu. Hum Immunol. 2015;76(8):553–60.

71. Camilli C, Hoeh AE, De Rossi G, Moss SE, Greenwood J. LRG1: vznikající hráč v patogenezi onemocnění. J Biomed Sci. 2022;29(1):6.

72. Yakar S, Rosen CJ, Beamer WG, Acert-Bicknell CL, Wu Y, Liu JL a kol. Cirkulující hladiny IGF-1 přímo regulují růst a hustotu kostí. J Clin Invest. 2002;110(6):771–81.

73. Clemmons DR. Relativní role růstového hormonu a IGF-1 při kontrole citlivosti na inzulín. J Clin Invest. 2004;113(1):25–7.

74. Bittermann E, Abdelhamed Z, Liegel RP, Menke C, Timms A, Beier DR a kol. Diferenciální požadavky tubulinových genů ve vývoji předního mozku savců. PLoS Genet. 2019;15(8):e1008243.

75. Sordillo PP, Sordillo LA. Záhada mozku chemoterapie: kynureniny, tubulin a uvolňování biofotonů. Anticancer Res. 2020;40(3):1189–200.

76. Valdez AR, Hancock EE, Adebayo S, Kiernicki DJ, Proskauer D, Attewell JR, et al. Odhadování prevalence, demografie a nákladů ME/CFS pomocí rozsáhlých dat lékařských nároků a strojového učení. Přední Pediatr. 2019;6:412.

77. Germain A, Giloteaux L, Moore GE, Levine SM, Chia JK, Keller BA a kol. Plazmatická metabolomika odhaluje narušenou odpověď a zotavení po maximální zátěži u myalgické encefalomyelitidy/syndromu chronické únavy. JCI Insight. 2022.

78. Nkiliza A, Parks M, Cseresznye A, Oberlin S, Evans JE, Darcey T, et al. Pohlavně specifické profily plazmatických lipidů u pacientů s ME/CFS a jejich souvislost s bolestí, únavou a kognitivními symptomy. J Transl Med. 2021;19(1):1–15.

79. Peterson D, Brenu E, Gottschalk G, Ramos S, Nguyen T, Staines D a kol. Cytokiny v mozkomíšním moku pacientů s chronickým únavovým syndromem/myalgickou encefalomyelitidou. Mediat Infamm. 2015;2015:1–4.

80. Manning PJ, Sutherland WH, McGrath MM, De Jong SA, Walker RJ, Williams MJ. Postprandiální koncentrace cytokinů a složení jídla u obézních a štíhlých žen. Obezita. 2008;16(9):2046–52.

81. Netea SA, Janssen SA, Jaeger M, Jansen T, Jacobs L, Miller-Tomaszewska G, et al. Konzumace čokolády moduluje produkci cytokinů u zdravých jedinců. Cytokin. 2013;62(1):40–3.

82. Solis-Pereyra B, Aattouri N, Lemonnier D. Role potravy při stimulaci produkce cytokinů. Am J Clin Nutr. 1997;66(2):521S-S525.

Poznámka vydavatele

Springer Nature zůstává neutrální ohledně jurisdikčních nároků v publikovaných mapách a institucionálních přidruženích.

【Kontakt】E-mail: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501