Část 2: Cistanoside Of Cistanche Herba zmírňuje hypoxií vyvolané poškození mužské reprodukce prostřednictvím potlačení oxidačního stresu

Kontaktujte Tinutina.xiang@wecistanche.com

https://www.xjcistanche.com/news/part1-cistanoside-of-cistanche-herba-ameliorat-54370405.html

Kliknutím na odkaz získáte informace o části 1

Účinky Cis na reprodukci u potkanů ​​vyvolaných hypobarickou hypoxií.

K určení účinkůhypobarická hypoxiena samcích potkanů ​​jsme nejprve testovali morfologické změny varlat u potkanů ​​vyvolaných hypobarickou hypoxií. Výsledky barvení HE ukázaly, že v kontrolní skupině byly normální spermatogenní buňky v různých stádiích uspořádány uspořádaným způsobem od bazální membrány k lumenu a zralé spermie byly viditelné v lumen tubulu (obrázek 4A). Ve srovnání s kontrolami byly v modelové skupině pozorovány patologické změny testikulární tkáně, bazální membrána testikulárních epiteliálních buněk byla uspořádána volně, spermatogenní epitel byl extrémně tenký a hladina a počet zárodečných buněk byly výrazně sníženy (obrázek 4A). . Léčba Cis však pozoruhodně zlepšila histologii poškození varlat vyvolaného hypobarickou hypoxií in vivo (obrázek 4A). Změřili jsme také tělesnou hmotnost, hmotnost varlat, hmotnost nadvarlat a hmotnost semenné žlázy, což vedlo k výpočtu indexu reprodukčních orgánů (poměr reprodukční orgán/tělesná hmotnost). Jak je znázorněno na obrázku 4B-D, index reprodukčních orgánů (varlata, nadvarlata a semenná žláza) byl v modelové skupině výrazně nižší (P< 0.01)than="" in="" the="" control="" group.="" however,="" the="" effect="">hypobarická hypoxiena index reprodukčních orgánů krys byl zvrácen působením Cis (obrázek 4B-D).

Dále byla také měřena aktivita akrozomového enzymu a počet živých spermií samčích potkaních spermií, aby se objasnilo poškození funkce varlat. Jak je znázorněno na obrázku 4E, 4F, aktivita akrozomového enzymu a motilita spermií byly nižší v modelové skupině potkanů ​​než v kontrolní skupině (P< 0.01).="" however,="" compared="" with="" rats="" in="" the="" model="" group,="" acrosome="" enzyme="" activity="" was="" restored="" in="" rats="" treated="" with="" 8="" mg/kg/d="" cis="">< 0.05)(figure="" 4d).="" moreover,="" as="" shown="" in="" figure="" 4f,="" treatment="" with="" cis="" also="" enhanced="" the="" live="" sperm="" rate;="" the="" rats="" treated="" with="" 8="" mg/kg/d="" cis="" all="" showed="" a="" significantly="" increased="" live="" sperm="" rate(55.83="" ±=""><><><0.05; and=""><0.05 respectively)="" when="" compared="" with="" the="" model="" rats="" (43.83="">

Dohromady tyto výsledky naznačovaly, žehypobarický hypoxickýprostředí vedlo k morfologickým změnám varlat, úbytku hmotnosti reprodukčních orgánů a poškození funkce varlat u samců potkanů ​​a Cis mohl účinně chránit reprodukční orgány před poškozením vyvolaným hypoxií.

Účinky Cis na OS ve varlatech potkanů ​​vyvolaných hypobarickou hypoxií. Hladiny ROS a LPO ve varlatech krys byly měřeny za účelem analýzy účinků Cis na OS indukovaný hypobarickou hypoxií. Analýza ROS odhalila, že ve srovnání s kontrolní skupinou byly hladiny ROS ve varlatech v modelové skupině významně zvýšené (P < 0.01="" obrázek="" 5a).="" naopak,="" lpo="" byl="" dramaticky="" zvýšený="" ve="" varlatech="" (p="">< 0="" 0,01)="" za="" hypobarické="" hypoxie="" ve="" srovnání="" s="" normoxickými="" podmínkami="" (obrázek="" 5b).="" léčba="" cis="" však="" změnila="" výše="" uvedené="" změny="" (p="">< 0,05),="" ve="" kterých="" měl="" cis-b="" lepší="" účinky="" než="" ostatní="" cis="" (obrázek="" 5a,="" 5b).="" zdá="" se,="" že="" cis="" chrání="" varlata="" snížením="" os="" za="" hypobarických="" hypoxických="" podmínek="" in="">

Kromě toho byly provedeny analýzy apoptózy, aby se dále vyhodnotil mechanismus, kterým Cis chránil proti poškození varlat vyvolané hypobarickou hypoxií. Výsledky barvení TUNEL (obrázek 5C) ukázaly, že v modelové skupině com existovala významná apoptóza

rozdělen do kontrolní skupiny. Avšak po léčbě Cis (8 mg/kg/d) se objevilo méně apoptotických buněk (P < 0,05)="" (obrázek="" 5c).="" ukázala="" to="" i="" data="" western="">hypoxie a hypobarickéléčba vedla k aktivaci kaspázy{{0}} a PARP a zvýšenému poměru Bax/Bcl-2 v testikulární tkáni, což ukazuje na zvýšení apoptózy (obrázek 5D). Kromě toho různé typy léčby Cis významně snížily apoptózu v testikulární tkáni (obrázek 5D). Podobně analýza IHC testikulární tkáně ukázala podobné výsledky (doplňkový obrázek 1). Pro ověření mechanismu Cis-redukovaného OS spouštěného hypobarickou hypoxií jsme dále testovali aktivity GR, GPx a SOD v testikulární tkáni. Jak je znázorněno na obrázku 5E, ve srovnání s kontrolní skupinou léčba hypobarické hypoxie významně snížila aktivity GR, GPx a SOD (P < 0,01).="" léčba="" cis="" však="" obnovila="" enzymové="" aktivity="" (gr,="" gpx="" a="" sod)="" tkáně="" varlat="" u="" potkanů="" ​​léčených="" hypobarickou="" hypoxií="" (p="">< 0,05).="" závěrem="" se="" zdá,="" že="" cis="" chrání="" varlata="" aktivací="" silného="" endogenního="" obranného="" mechanismu="" antioxidačních="" enzymů="" za="" podmínek="" hypobarické="">

Diskuse

Ve vysokohorských oblastech,hypobarická hypoxieje známo, že ovlivňuje více systémů u lidí, včetně mužského reprodukčního systému [4, 20]. Nedávné experimentální výzkumy jsou zaměřeny na pochopení mechanismů jakhypobarická hypoxienarušuje mužský reprodukční systém. V této studii byl terapeutický účinek cis extraktu zCistanchesHerbana hypoxií vyvolané reprodukční poškození. Výsledky ukázaly, že Cis může chránit mužský reprodukční systém před hypoxickým poškozením snížením akumulace ROS a OS vyvolané hypoxií zvýšením aktivity endogenních antioxidačních enzymů.

ROS jsou volné radikály odvozené od kyslíku, které hrají zásadní roli v lidské fyziologii a patologii. Nízké dávky ROS jsou nezbytné pro kapacitu spermií, akrozomovou reakci a fúzi spermatozoa-oocyt [24, 25]. Nadměrná akumulace ROS však často vede k poškození zárodečných buněk a stromálních buněk, což má za následekmužská neplodnost[26]. ROS může peroxidací snadno poškodit buněčné membrány, nukleové kyseliny, proteiny, enzymy a další biologické makromolekuly. Navíc také vedou k potenciálnímu poškození buněk a DNA, když překročí antioxidační nosnou kapacitu. Nashromážděné důkazy podporují klíčovou roli ROS v patogenezi mužské fertility [27, 28]. Produkce ROS je regulována napětím kyslíku. V hypoxických podmínkách se snižuje dostupný kyslík v prostředí a zvyšuje se viskozita krve, čímž dochází k ovlivnění mnoha na kyslíku závislých metabolických procesů v organismu [29, 30]. Nižší atmosférický tlak ve vysokých nadmořských výškách však způsobuje špatný žilní návrat a pokles množství kyslíku transportovaného krevním řečištěm do všech buněk organismu, což dále zvyšuje hypoxii orgánů a buněk [29, 30]. Vystavení vysoké poloze tedy vede k řadě hypoxických fyziologických reakcí, včetně produkce a akumulace ROS, když poptávka po kyslíku převyšuje vaskulární zásobu. Jak bylo zmíněno dříve, akumulace ROS vede k řadě intracelulárních účinků, z nichž nejkritičtější je způsobit OS v buňkách.

OS označuje nerovnováhu mezi oxidačními a redukčními reakcemi, což vede k tvorbě přebytečných oxidantů nebo molekul, které přijímají elektron z jiného reaktantu, což zase produkuje ROS [31, 32]. OS je dobře známo, že může být spuštěn řadou endogenních a exogenních faktorů, včetně vystavení vysokým nadmořským výškám. Spermie jsou buňky, které jsou zvláště citlivé na OS vzhledem k jejich neadekvátním systémům opravy buněk a vysokému obsahu polynenasycených mastných kyselin v plazmatické membráně [33]. Testikulární a epididymální tkáně nejsou výjimkou, protože u kulatých spermatid u potkanů ​​vystavených hypoxii byla pozorována přítomnost těžké OS [4]. OS ovlivňuje stabilitu DNA, čímž ohrožuje integritu genetického materiálu gamet [34-36]. Bylo však potvrzeno, že vysoká úroveň poškození DNA u mužských gamet vede k aktivaci signalizace apoptózy, což má za následek snížení počtu spermií nadvarlete a zvýšení procenta defektních buněk [28, 37]. V této studii hypoxie významně snížila životaschopnost GC-1 buněk prostřednictvím indukce apoptózy a zástavy buněčného cyklu. Ještě důležitější je, že významně zvýšené hladiny ROS byly prokázány analýzou FCM po stimulaci hypoxie, se zvýšenou mírou apoptózy a vyšší aktivací poměru kaspázy-3, PARP a Bax/Bcl-2, což naznačuje, že ROS může aktivovat apoptóza aktivací kaspázové signální dráhy během hypoxií indukovaného poškození plodnosti. Současná zjištění prokázala, že hypoxie vedla k nadměrné akumulaci ROS, což způsobuje oxidační poškození reprodukčních buněk. Je tedy smysluplné identifikovat nové antioxidanty, které mohou sloužit jako účinný přístup ke zmírnění poškození plodnosti způsobené hypoxií. K ochraně před OS existuje v těle komplexní antioxidační systém složený převážně z enzymatických faktorů. Za fyziologických podmínek si obsah ROS a antioxidační systém udržuje určitou rovnováhu. Nadměrná produkce ROS však vyčerpává antioxidační systém spermií, což vede k OS, který způsobuje poškození DNA spermií a má za následek nižší plodnost a míru otěhotnění [23]. Aby bylo možné řešit nadprodukci ROS a související škodlivé účinky na buněčné úrovni v mužském reprodukčním systému, byly testovány různé antioxidační strategie [23]. V současné době je rozsáhlá literatura týkající se použití sloučenin s antioxidační aktivitou a zlepšení funkce spermií. Důležité je, že většina zpráv popisuje zlepšení parametrů spermií po perorálním podání antioxidantů, včetně zlepšení koncentrace a motility spermií nebo snížení poškození DNA [38]. Rostoucí počet urologů proto předepisuje perorální antioxidanty pro léčbu neplodnosti v důsledku problémů souvisejících s OS [39]. Mezi tyto antioxidanty patří především karnitiny, vitamíny, zinek, melatonin a přírodní sloučeniny [23, 40]. V současné době, s rozvojem technologie extrakce léčiv, se také uvažuje o rostoucím počtu extraktů TCM, které zmírňujímužská neplodnostprotože tyto antioxidanty mohou snižovat destruktivní účinky OS [41]. Yüce A. a kol. v roce 2013 uvedli, že skořice má příznivé účinky na oxidační a antioxidační rovnováhu ve varlatech a kvalitu spermií [42]. Zhang L a kol. ukázali, že kurkumin významně zlepšuje motilitu spermií u pacientů a snižuje H2O2 [43]. Kromě toho bylo prokázáno, že řada dalších rostlinných extraktů, jako je borůvka, krokus sativus, semena granátového jablka a zelený čaj, chrání reprodukční systém prostřednictvím antioxidačních mechanismů [27, 44-47].Cistanches Herbaje důležitý TCM, který má mimo jiné příznivý bezpečnostní profil a široké léčebné funkce pro léčbu neplodnosti [13]. Moderní farmakologické studie to ukázalyCistanches Herbamá různé aktivity, jako jsou antioxidační, protizánětlivé, hepatoprotektivní a anti-neuro degenerativní onemocnění [13, 48]. Proto extrakty, frakce nebo sloučeniny zCistanches Herbamohou mít potenciální antioxidační vlastnosti pro léčbu neplodnosti.

Mezi účinné látky v rostlinách, které zlepšují plodnost, patří různé chemické skupiny, jako jsou PhG, saponiny, kyslíkaté těkavé sloučeniny a alkaloidy [41]. Studie farmakologické aktivity PhGs prokázaly, že PhGs vykazují širokou škálu biologických aktivit, jako je antioxidace, antiradiační neuroprotekce a zvýšení sexuální funkce [49, 50]. Mezi těmito aktivitami postupně přitahuje pozornost antioxidace. Některé jednotlivé složky nebo frakce PhGs inhibují apoptózu zárodečných buněk indukovanou různými chemikáliemi a jejich antioxidační schopnosti in vitro byly také prokázány in vivo na několika zvířecích modelech [51, 52]. Tyto výsledky naznačují, že PhG by mohly být atraktivním kandidátem pro léčbumužská neplodnost. Cis je aktivní PhG, od kterého lze izolovatCistanches Herba. V této studii jsme zkoumali účinky Cis na buňky ošetřené hypoxií nebo potkaní model a zkoumali základní molekulární mechanismy. Cis vykazoval ochranné účinky na snížení životaschopnosti vyvolané hypoxií a zvýšení apoptózy v buňkách GC-1 a také vykazoval ochranný účinek na poškození vyvolané hypoxií v reprodukčním systému potkanů ​​in vivo. Byl pozorován významný pokles aktivit GR, GPx a SOD při hypoxii ve srovnání s normoxickými skupinami, zatímco specifické aktivity GR, GPx a SOD významně vzrostly u varlat nebo GC-1 buněk ošetřených Cis. Zdá se, že Cis chrání varlata a GC-1 buňky za hypoxických podmínek zvýšením aktivity antioxidačních enzymů.

Enzymové antioxidanty fungují hlavně tak, že vychytávají superoxidové anionty, čímž zabraňují peroxidaci lipidů a poškození DNA, aby se zabránilo neplodnosti. Enzymatické antioxidační mechanismy hrají zásadní roli v prevenci oxidačního poškození [23]. Enzymatický mechanismus proti OS zahrnuje lapače volných radikálů a enzymy závislé na glutathionu včetně GR, GPx a SOD [12]. Antioxidační enzymy jsou dobře známé jako nezbytné pro mužský reprodukční systém. V současné studii byl účinek snížené aktivity antioxidačních enzymů při hypobarické hypoxii provázen zvýšením ROS a LPO v modelové skupině, což je v souladu s předchozími zprávami [12]. Podání Cis však vedlo k obnovení aktivit antioxidačních enzymů v buňkách GC-1 a varlatech potkanů, což umožnilo vytvořit strategie pro podávání přípravku Cistanches Herba k prevenci poškození způsobeného hypobarickou hypoxií, jak bylo dříve navrženo. Ačkoli současné výsledky ukázaly, že léčba Cis částečně snížila hypoxií indukované poškození zárodečných buněk u potkanů, jsou zapotřebí další výzkumy k odhalení úplného obrazu jeho reprodukčních ochranných účinků. Například specifický mechanismus Cis ovlivňuje aktivitu antioxidačních enzymů. Kromě toho existuje otázka, zda by mohly být relevantní i nějaké další mechanismy, protože Cis pouze částečně obnovil reprodukční poškození způsobené hypoxií. Konečně je třeba zvážit, zda má Cis přímý účinek na podporu růstu na zárodečné buňky.

Závěry

Obecně, zjištění této studie zdůrazňují potenciál Cis jako antioxidantu pro léčbu hypoxií indukovaného mužského reprodukčního poškození. Cis může chránit před hypoxií indukovaným reprodukčním poškozením samců obnovením aktivity antioxidačních enzymů, snížením OS indukovaného ROS, současným zvýšením životaschopnosti buněk a snížením apoptózy. Důležité je, že všechny podtypy Cis (Cis-A, Cis-B, Cis-C a Cis-H) studované v této studii vykazovaly určitý ochranný účinek na reprodukční systém a nejvýraznější účinek vykazoval Cis-B. Proto spekulujeme, že Cis může být dobrým kandidátem na antioxidant pro léčbu hypoxií indukovaného mužského reprodukčního poškození, ačkoli přesný základní mechanismus vyžaduje další zkoumání.

Poděkování

Tato studie byla podpořena granty od National Natural Science Foundation of China (č. 81672535; 82002686) a od Čínské lidové osvobozenecké armády (Medical Science Researching Fund; č. 16QNP114). Zveřejnění střetu zájmů Žádné.

Reference

[1] Bracke A, Peeters K, Punjabi U, Hoogewijs D a Dewilde S. Hledání molekulárních mechanismů, které jsou základem mužské idiopatické neplodnosti. Reprod Biomed Online 2018; 36: 327-339.

[2] Agarwal A, Mulgund A, Hamada A a Chyatte MR. Jedinečný pohled na mužskou neplodnost po celém světě. Reprod Biol Endocrinol 2015; 13:37.

[3] Jankovič Veličkovič L a Stefanovič V. Hypoxie a spermatogeneze. Int Urol Nephrol 2014; 46: 887-894.

[4] Farias JG, Bustos-Obregon E, Orellana R, Bucarey JL, Quiroz E a Reyes JG. Účinky chronické hypobarické hypoxie na histologii varlat a oxidativní metabolismus kulatých spermatid. Andrologia 2005; 37: 47-52.

[5] Liao W, Cai M, Chen J, Huang J, Liu F, Jiang C a Gao Y. Hypobarická hypoxie způsobuje škodlivé účinky na spermatogenezi u krys. Reprodukce 2010; 139: 1031-1038.

[6] Paul C, Teng S a Saunders PT. Jediný, mírný, přechodný tepelný stres šourku způsobuje hypoxii a oxidační stres u varlat myší, což vyvolává smrt zárodečných buněk. Biol Reprod 2009; 80: 913-919.

[7] Gasco M, Rubio J, Chung A, Villegas L a Gonzales GF. Vliv expozice ve vysoké nadmořské výšce na spermatogenezi a počet spermií nadvarlete u samců potkanů. Andrologia 2003; 35: 368- 374.

[8] Zepeda AB, Figueroa CA, Calaf GM a Farias JG. Mužský reprodukční systém a antioxidanty při oxidativním stresu vyvolaném hypobarickou hypoxií. Andrologie 2014; 46: 1-8.

[9] Quindry J, Dumke C, Slivka D a Ruby B. Vliv extrémního cvičení ve vysoké nadmořské výšce na oxidační stres u lidí. J Physiol 2016; 594: 5093-5104.

[10] Otasevic V, Stancic A, Korac A, Jankovic A a Korac B. Reaktivní druhy kyslíku, dusíku a síry v lidské mužské plodnosti. Křižovatka buněčné signalizace a patologie. Biofaktory 2020; 46: 206-219.

[11] Bui AD, Sharma R, Henkel R a Agarwal A. Vliv reaktivních forem kyslíku na DNA spermií a jejich role v mužské neplodnosti. Andrologie 2018; 50: e13012.

[12] Bisht S, Faiq M, Tolahunase M a Dada R. Oxidační stres a mužská neplodnost. Nat Rev Urol 2017; 14: 470-485.

[13] Fu Z, Fan X, Wang X a Gao X. Cistanches Herba: přehled její chemie, farmakologie a farmakokinetických vlastností. J Ethnopharmacol 2018; 219: 233-247.

[14] Wang T, Chen C, Yang M, Deng B, Kirby GM a Zhang X. Etanolový extrakt Cistanche tubulosa zprostředkovává hladiny pohlavních hormonů u potkanů ​​indukcí testikulárních steroidogenních enzymů. Pharm Biol 2016; 54: 481-487.

[15] Wong HS a Ko KM. Herba Cistanches stimuluje buněčný glutathionový redoxní cyklus reaktivními formami kyslíku generovanými mitochondriální respirací v H9c2 kardiomyocytech. Pharm Biol 2013; 51: 64-73.

[16] Wang N, Ji S, Zhang H, Mei S, Qiao L a Jin X. Herba cistanches: anti-aging. Stárnutí Dis 2017; 8: 740-759.

[17] Gu C, Yang X a Huang L. Cistanches Herba: A Neuropharmacology Review. Front Pharmacol 2016; 7: 289.

[18] Yan Q, He B, Hao G, Liu Z, Tang J, Fu Q a Jiang CX. KLF9 zhoršuje ischemické poškození v kardiomyocytech prostřednictvím augmentace oxidačního stresu. Life Sci 2019; 233: 116641.

[19] Xu F, Guo G, Zhu W a Fan L. Funkční testy akrozomů lidských spermií předpovídají míru oplodnění in vitro: retrospektivní kohortová studie a metaanalýza. Reprod Biol Endocrinol 2018; 16:81.

[20] Farias JG, Puebla M, Acevedo A, Tapia PJ, Gutierrez E, Zepeda A, Calaf G, Juantok C a Reyes JG. Oxidační stres ve varlatech a epi didymis potkana při intermitentní hypobarické hypoxii: ochranná role suplementace askorbátu. J Androl 2010; 31: 314-321.

[21] Saleh RA, Agarwal A, Nada EA, El-Tonsy MH, Sharma RK, Meyer A, Nelson DR a Thomas AJ. Negativní účinky zvýšeného poškození DNA spermií ve vztahu k seminálnímu oxidačnímu stresu u mužů s idiopatickou a mužskou faktorovou neplodností. Fertil Steril 2003; 79 Dodatek 3: 1597-1605.

[22] Aitken RJ a Baker MA. Příčiny a důsledky apoptózy u spermií; podíly na neplodnosti a dopady na vývoj. Int J Dev Biol 2013; 57: 265-272.

[23] Martin-Hidalgo D, Bragado MJ, Batista AR, Oliveira PF a Alves MG. Antioxidanty a mužská plodnost: od molekulárních studií po klinické důkazy. Antioxidanty (Basilej) 2019; 8:89.

[24] Drevet JR. Antioxidační skupina glutathionperoxidázy a spermie: složitý příběh. Mol Cell Endocrinol 2006; 250: 70-79.

[25] Aitken RJ, Clarkson JS, Hargreave TB, Irvine DS a Wu FC. Analýza vztahu mezi vadnou funkcí spermií a tvorbou reaktivních forem kyslíku v případech oligozoospermie. J Androl 1989; 10: 214-220.

[26] Agarwal A, Sharma RK, Nallella KP, Thomas AJ, Jr., Alvarez JG a Sikka SC. Reaktivní formy kyslíku jako nezávislý marker mužské faktorové neplodnosti. Fertil Steril 2006; 86: 878- 885.

[27] Zepeda A, Aguayo LG, Fuentealba J, Figueroa C, Acevedo A, Salgado P, Calaf GM a Farias J. Výtažky z borůvek chrání varlata před hypobarickou hypoxií vyvolaným oxidativním stresem u potkanů. Oxid Med Cell Longev 2012; 2012: 975870.

[28] Yang S, Zhang W, Xuan LL, Han FF, Lv YL, Wan ZR, Liu H, Ren LL, Gong LL a Liu LH. Akebia Saponin D inhibuje tvorbu aterosklerózy u ApoE(-/-) myší tím, že zmírňuje apoptózu v endoteliálních buňkách indukovanou oxidativním stresem. Ateroskleróza 2019; 285: 23-30.

[29] Saxena DK. Vliv hypoxie přerušovanou expozicí nadmořské výšce na charakteristiky spermatu a morfologii varlat samců opic rhesus. Int J Biometeorol 1995; 38: 137- 140.

[30] Verratti V, Berardinelli F, Di Giulio C, Bosco G, Cacchio M, Pellicciotta M, Nicolai M, Martinotti S a Tenaglia R. Důkaz, že chronická hypoxie způsobuje reverzibilní poškození mužské plodnosti. Asian J Androl 2008; 10: 602-606.

[31] Henkel RR. Leukocyty a oxidační stres: dilema pro funkci spermií a mužskou plodnost. Asian J Androl 2011; 13: 43-52.

[32] Tremellen K. Oxidační stres a mužská neplodnost--klinický pohled. Aktualizace Hum Reprod 2008; 14: 243-258.

[33] Saradha B a Mathur PP. Indukce oxidačního stresu lindanem v nadvarleti dospělých samců potkanů. Environ Toxicol Pharmacol 2006; 22: 90-96.

[34] Aitken RJ a Roman SD. Antioxidační systémy a oxidační stres ve varlatech. Adv Exp Med Biol 2008; 636: 154-171.

[35] Wagner H, Cheng JW a Ko EY. Role reaktivních forem kyslíku v mužské neplodnosti: Aktualizovaný přehled literatury. Arab J Urol 2018; 16: 35-43.

[36] Agarwal A, Saleh RA a Bedaiwy MA. Úloha reaktivních forem kyslíku v patofyziologii lidské reprodukce. Fertil Steril 2003; 79: 829-843.

[37] Redza-Dutordoir M a Averill-Bates DA. Aktivace signálních drah apoptózy reaktivními formami kyslíku. Biochim Biophys Acta 2016; 1863: 2977-2992.

[38] Zengerling F a Schmidt S. [Antioxidanty pro mužskou subfertilitu]. Urologe A 2016; 55: 956- 959.

[39] Esteves SC a Agarwal A. Nové koncepty mužské neplodnosti. Int Braz J Urol 2011; 37: 5-15.

[40] Pisoschi AM a Pop A. Role antioxidantů v chemii oxidačního stresu: přehled. Eur J Med Chem 2015; 97: 55-74.

[41] Tahvilzadeh M, Hajimahmoodi M, Toliyat T, Karimi M a Rahimi R. Přístup založený na důkazech k léčivým rostlinám pro léčbu abnormalit spermií v tradiční perské medicíně. Andrologie 2016; 48: 860-879.

[42] Yuce A, Turk G, Ceribasi S, Sonmez M, Ciftci M a Guvenc M. Účinky oleje z kůry skořice (Cinnamomum zeylanicum) na antioxidační hodnoty varlat, apoptotické zárodečné buňky a kvalitu spermií. Andrologie 2013; 45: 248-255.

[43] Zhang L, Diao RY, Duan YG, Yi TH a Cai ZM. In vitro antioxidační účinek kurkuminu na kvalitu lidských spermií u leukocytospermie. Andrologie 2017; 49: e12760.

[44] Heidary M, Vahhabi S, Reza Nejadi J, Delfan B, Birjandi M, Kaviani H a Givrad S. Vliv šafránu na parametry spermatu neplodných mužů. Urol J 2008; 5: 255-259.

[45] Safarinejad MR, Shafiei N a Safarinejad S. Prospektivní dvojitě zaslepená randomizovaná placebem kontrolovaná studie účinku šafránu (Crocus sativus Linn.) na parametry spermatu a antioxidační kapacitu semenné plazmy u neplodných mužů s idiopatickou oligoastenoteratozoospermií. Phytother Res 2011; 25: 508-516.

[46] Kolahdooz M, Nasri S, Modarres SZ, Kianbakht S a Huseini HF. Účinky oleje ze semen Nigella sativa L. na abnormální kvalitu spermatu u neplodných mužů: randomizovaná, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná klinická studie. Fytomedicína 2014; 21: 901-905.

[47] Jiao N, Chen Y, Zhu Y, Wang W, Liu M, Ding W, Lv G, Lu J, Yu B a Xu H. Ochranné účinky katalpolu na poškození mužské reprodukce vyvolané diabetes mellitus prostřednictvím suprese AGE /RAGE/Nox4 signální cesta. Life Sci 2019; 116736.

[48] ​​Xiong Q, Kadota S, Tani T a Namba T. Antioxidační účinky fenylethanoidů z Cistanche deserticola. Biol Pharm Bull 1996; 19: 1580-1585.

[49] Shao SY, Feng ZM, Yang YN, Jiang JS a Zhang PC. Forsythenethosidy A a B: dva nové fenylethanoidové glykosidy s 15-členným kruhem z Forsythia suspensa. Org Biomol Chem 2017; 15: 7034-7039.

[50] Xue Z a Yang B. Fenylethanoidní glykosidy: pokroky ve výzkumu v jejich fytochemii, farmakologické aktivitě a farmakokinetice. Molekuly 2016; 21: 991.

[51] Chen W, Lin HR, Wei CM, Luo XH, Sun ML, Yang ZZ, Chen XY a Wang HB. Echinacosid, fenylethanoidní glykosid z Cistanche deserticola, prodlužuje životnost Caenorhabditis elegans a chrání je před toxicitou vyvolanou Abeta. Biogerontologie 2018; 19: 47-65.

[52] Xuan GD a Liu CQ. [Výzkum účinku fenylethanoidových glykosidů (PEG) z Cistanche deserticola na zpomalení stárnutí u starých myší vyvolané D-galaktózou]. Zhong Yao Cai 2008; 31: 1385-1388.