ČÁST Ⅱ:Zamlžovače pro karcinogenitu ledvin a tumor tubulů ledvin
Mar 13, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Gordon C Hard
Zahrnutí nádorů spontánního původu do konečného počtu nádorů:
Cílem provádění 2-ročních biologických zkoušek je určit dlouhodobou bezpečnost testovaného předmětu, zejména eliminovat možnost expozice člověka látkám s karcinogenním účinkem. Přitom je také důležité vyhnout se zahrnutí jakýchkoli novotvarů spontánního původu do konečného počtu nádorů, což by vedlo k nepřesnému počtu, protože by byly zahrnuty nádory nesouvisející s chemickou léčbou. V souladu s tím je pozornost věnována fenotypově výraznému nádoru u potkanů a predispozici k tvorbě cystických tubulů, s nimiž se autor setkal u CD-1 myší. Amfofilně-vakuolární nádor potkana: U potkanů dochází ke spontánnímuledvinové trubičkanádorkterá byla plně uznána až v posledních 20 letech. Tento novotvar má výraznou epiteliální morfologii umožňující jeho oddělení odledvinanovotvarykteré jsou indukovány renálními karcinogeny. Toto spontánníledvinové trubičkanádor, pojmenovaný amfofilně-vakuolární (AV) tumor, byl zjištěn v dlouhodobých studiích prováděných v USA, Evropě, Velké Británii a Japonsku. Vyskytuje se u potkanů různých kmenů včetně kmenů Fischer 344, Sprague-Dawley a Wistar9,10 a postihuje obě pohlaví. Autor se o tomto výrazném novotvaru poprvé dozvěděl v roce 1994 v 90-denních studiích toxicity11, ačkoli to bylo hlášeno i jinými skupinami12. Zpráva Thurmana et al12 byla nejvýznamnější, protože identifikovala, že tyto novotvary se mohou vyskytovat u sourozenců, což naznačuje, že tato proliferace může mít genetický základ.
Cistanche je dobrý na tumor ledvinových tubulů
Charakteristická morfologie zahrnuje dobře vyvinuté, často velké, epiteliální buňky s eozinofilním nebo amfofilním barvícím charakterem a cytoplazmatické vakuoly. Vakuoly mohou být intracelulární vakuoly nebo reprezentovat formaci mini lumen, kde obvod vakuoly přispívá několika sousedními buňkami. Jádra jsou často poměrně velká a mohou obsahovat hypertrofické jadérko. Nádory mohou být adenomy nebo karcinomy. Zdá se, že vznikají v kortexu z ložisek atypické hyperplazie. S růstem se karcinomy vyvíjejí jako dobře definované lalůčky nádorových buněk, často s centrální oblastí buněčné degenerace. Karcinomy vyčnívají zledvinapovrch a jejich nejširší část je v kůře. Typicky se nádor rozšiřuje zužujícím se klínovitým způsobem dolů do vnějších a vnitřních pruhů vnější dřeně. Občas se vyvinou bazofilní lalůčky, ale vyšetření celé oblasti nádoru obvykle odhalí charakteristický, barvící a částečně vakuolární charakter. Neexistuje žádný záznam o tom, že by tento nádorový fenotyp byl schopen metastázovat.
přínos cistanche: zlepšení funkce ledvin
Výskyt tohoto typu nádoru byl podrobně studován v archivuledvinovétkáňuloženo v archivu NTP9. Tento archiv obsahoval 150 dlouhodobých studií, ve kterých byly zaznamenány nádory ledvinových tubulů, což představovalo soubor asi 90 000 potkanů, převážně kmene Fischer 344. Z těchto krys bylo u 1012 diagnostikováno aledvinovétrubičkanádor. Histologické opětovné vyšetření každého z těchto nádorů ukázalo, že polovina studií s touto diagnózou (74) měla alespoň jeden nádor s AV fenotypem. Novotvar je tedy neobvyklý s přibližně 0,1% incidencí v 2-ročních studiích, ale vyskytuje se relativně často v přibližně 50 procentech dlouhodobých studií s diagnózouledvinové trubičkanádory. Žádná z lézí v tomto průzkumu 74 studií nemetastázovala. Většina studií s AV nádory měla jeden novotvar tohoto typu, ale počet AV nádorů ve studii kolísal od 1 do 5. Tato distribuce opět naznačovala, že jeden vrh ve studii mohl nést genetický defekt. Statistická analýza dat z tohoto histologického přehledu ukázala, že výrazný typ nádoru byl spontánní a nesouvisel s expozicí chemikáliím 9 Nádory tohoto odlišného fenotypu by proto neměly být zahrnutyledvinanádorpočty v biologických testech rakoviny, ale měly by být zaznamenávány samostatně.
Jediný karcinom u mužů s vysokou dávkou ve studii NTP kvercetinu byl nepochybný z hlediska AV fenotypu (obrázek 5), a tedy spontánního původu. Při shrnutí počtu neoplastických lézí souvisejících s kvercetinem, s vyloučením proliferativních ložisek CPN a AV lézí, došlo k mírnému nárůstu ložisek preneoplázie a adenomů, ale žádné karcinomy u samců potkanů s vysokou dávkou. Toto mírné zvýšení ložisek atypické hyperplazie tubulů a adenomů bylo spojeno s exacerbací CPN.
Obr. 5. Typický průřez karcinomem u mužů s vysokou dávkou ve studii kvercetinu. Nádor je charakterizován dobře definovanými lalůčky amfofilních a vakuolizovaných buněk s centrální degenerací. Je to nepochybně AV nádor, který by měl být vyloučen z počtu nádorů vyvolaných testovanou látkou. (S laskavým svolením a upraveno podle Hard et al, 2007, Food Chem Toxicol 45, 600-608).
Cystické tubuly v CD-1 myši:Při několika příležitostech se tento autor setkal u CD-1 myší s predispozicí k rozvoji solitární nebo sporadické cystickéledvinovétubulyv kortexu (Hard GC, nepublikovaná pozorování). Zdá se, že tato situace vede k rozvoji adenomů renálních tubulů a banálních karcinomů. Nádory jsou slabě bazofilní a zpočátku se nacházejí v kortexu, kde jsou umístěny sporadické cystické tubuly. V jedné studii byly v cystických tubulech mezistupně hyperplazie a časné tvorby adenomu, což poskytlo definitivní spojení mezi cystickým tubulem a neoplazií renálního tubulu. Výskyt cystických tubulů však nekoreloval s expozicí testovanému předmětu, ale objevil se spontánně ve všech skupinách, včetně kontrolních myší. Nádory byly nejrozšířenější u samců myší s vysokou dávkou, ale jednalo se o velmi vysokou dávku, která překračovala směrnice regulačních úřadů pro výběr vysokých dávek. Taková vysoká expozice by velmi pravděpodobně vedla k saturaci metabolických drah, což by vedlo k velmi odlišným metabolickým profilům od těch, které se vyskytují za reálných podmínek expozice, a tím k predisponování k biologickému stresu13,14,15. Kromě toho testovaný předmět neindukoval žádnou patologickou indikaci poškození renálních tubulárních buněk v jakémkoli časovém bodě, včetně expozic ve 4 týdnech, 52 týdnech a 104 týdnech. Nedošlo ani ke zvýšené mitotické odpovědiledvinovétubuly, ke kterému by došlo, kdyby došlo k nějaké chemicky vyvolané kompenzační aktivitě, která by nahradila chemicky poškozený epitel tubulů. Dospělo se k závěru, že novotvary renálních tubulů v této studii na myších byly způsobeny spontánním vývojem cystických tubulů s abnormální buněčnou výstelkou, pravděpodobně v důsledku genetické aberace. Tento případ představuje další příklad spontánního rozvoje tumorů renálních tubulů, který by neměl být připisován odpovědi na testovaný předmět.
extrakt z cistanche zlepšuje funkci ledvin
Karyomegalie:Výrazně zvětšené jádro v aledvinovétrubičkabuňka (obrázek 6), známá jako karyomegalie, byla dlouho považována za nepříznivý nález, který by mohl předpovědět vývojledvinovétrubičkanádorya identifikovat vyvolávající chemikálie jako potenciální renální karcinogeny16, 17, 18, 19, 20. Autor provedl v roce 2018 literární přehled o karyomegalii u laboratorních zvířat a lidí21. Bylo hlášeno, že nejméně 50 chemikálií/látek vyvolává tuto jadernou změnu u potkanů, ale u myší a jiných laboratorních zvířat je to mnohem méně častý jev21. Řada chemikálií, které vyvolávají tuto změnu u potkanů, nevyvolává stejný účinek u jiných druhů. U potkanů je zvláště účinná složka potravy lysinoalanin a mykotoxin ochratoxin A. Obě tyto sloučeniny byly testovány na jiných druzích laboratorních zvířat s negativními výsledky. Krmení nadměrně vysoké dávky lysinoalaninu, 10,{10}} ppm švýcarským myším, bylo nutné k vyvolání minimální reakce karyomegalie u tohoto druhu ve srovnání s 50 ppm u potkana 22. Přehled literatury ukazuje, že potkan má predispozici k rozvoji karyomegalie jako reakce na chemickou toxicitu21. Tento přehled literatury také ukázal, že karyomegalie v ledvinách potkana není spolehlivým prediktoremledvinovénádorrozvoj.
Obr. 6. Karyomegalie renálních tubulů je abnormálně zvětšené buněčné jádro tubulu. Doporučuje se, aby tato diagnóza byla vyhrazena pro jádra oktoploidní nebo vyšší. (S laskavým svolením a upraveno podle Hard et al, 2000, Toxicol Sci 53: 237-244).
Mírné zvýšení velikosti jádra ledvinových tubulů není omezeno na chemickou expozici, ale vyskytuje se také za určitých fyziologických podmínek. Již mnoho desetiletí je známo, že obecně se objem jádra zdvojnásobuje s každým zvýšením ploidní úrovně 23. Během buněčného cyklu dochází ve fázi syntézy DNA (S) ke změně ploidie z 2n na 4n, přetrvává do Fáze G2. Dochází také ke zvětšení velikosti jádra (až zdvojnásobení) u patologických stavů, jako je dočasná renální ischemie24 a po jednostranné nefrektomii25. Proto musí být práh pro diagnostiku karyomegalie renálních tubulů nastaven na úroveň ploidie, která odlišuje abnormální od normálního. Pro diagnostiku karyomegalie renálních tubulů se doporučuje, aby tato prahová hodnota byla alespoň 4x normální velikost jádra tubulu (oktoploidní).
Karyomegalie je v lidských ledvinách vzácná a občasné případy pozorované v renální biopsii nebo pitevní tkáni jsou od pacientů s genetickým onemocněním nazývaným karyomegatická intersticiální nefritida (KIN). Zhou a 43 spoluautorů26 ukázalo, že tento stav je způsoben autozomálně recesivní mutací genu FAN1, proteinu, který funguje při opravě intersticiálních příčných vazeb DNA v rámci dráhy reakce na poškození DNA Fanconiho anémie. Karyomegalie v lidských ledvinách byla také příležitostně pozorována u pacientů s HIV, kteří dostávali antivirotikum tenofovir, ale tato souvislost se zdá být nekonzistentní27. Ačkoli je potkan jedinečně predisponován k reakci na chemicky vyvolané toxické poškození karyomegalií renálních tubulů, karyomegalie renálních tubulů u krys není konzistentně spojena s rozvojem tumorů renálních tubulů nebo jejich prekurzorů21. Proto je karyomegalie v ledvinách potkana považována za nepřesný prediktor renálního karcinogenního potenciálu chemikálií.
cistanche flavonoidy protinádorové a protirakovinné
Reference
10. Thurman JD, Hailey JR, Turturro A a Gaylor DW. Spontánní karcinom ledvinových tubulů u sourozenců potkanů Fischer 344. Veterinář Pathol. 32: 419-422. 1995.
11. Hrabě JL a Goodman JI. Principy výběru dávky a extrapolace z biologického testu karcinogenu: dávka ovlivňuje mechanismus. Regul Toxicol Pharmacol. 21: 418-421. 1995.
12. Barton HA, Pastoor TP, Baetke K, Chambers JE, Diliberto J, Doerrer NG, Driver JH, Hastings CE, Iyengar S, Krieger R, Stahl B a Timchalk C. Získání a aplikace absorpce, distribuce, metabolismu, a údaje o vylučování (ADME) v hodnoceních chemické bezpečnosti v zemědělství. Crit rev Toxicol. 36: 9-35. 2006.
13. Autobus JS. "Dávka dělá jed": klíčové důsledky pro výzkum způsobu působení (mechanismus) v 21. toxikologickém paradigmatu. Aktuální Opin Toxicol. 3: 87-91. 2017.
14. Scheuer PJ. Histochemické změny v játrech potkana při otravě Senecio a thioacetamidem. J Pathol Bacteriol. 85: 507-516. 1963.
15. Payne BJ a Saunders LZ. Nefropatie těžkých kovů hlodavců. Veterinář Pathol. Dodatek 15: 51-87. 1978.
16. Dees JH a Kramer RA. Sekvenční morfologická analýza nefrotoxicity vyvolané u krys jednotlivými dávkami chlorozotocinu. Toxicol Pathol. 14: 213-230. 1986.
17. Luitjen M, Speksnijder EN, van Alphen N a 6 dalších. Fenacetin působí jako slabá genotoxická sloučenina přednostně v ledvinách Xpa myší s deficitem opravy DNA. Mutat Res. 596: 143-150. 2006.
18. NTP. Národní toxikologický program Atlas nenádorových lézí. Research Triangle Park, NC. Národní toxikologický program, NIEHS, NIH. 2015.
19. Tvrdý GC. Kritický přehled karyomegalie renálních tubulů v neklinických studiích hodnocení bezpečnosti a její význam pro hodnocení rizika pro člověka. Crit Rev Toxicol. 48: 575-595. 2018.
20. Feron VJ, van Beek l Slump P a Beems RB. Toxikologické aspekty alkalické úpravy potravinářských proteinů, In: Biochemical Aspects of New Protein Food. Symposium 3. 1978.
21. Spíše LJ. Význam velikosti jádra ve fyziologických a patologických procesech. Ergeb Allg Pathol Pathol Anat. 38: 127-198.1958.
22. Cain H, Fazekas S a Ross W. Studien über die Folgen einer vorübergerhenden experimentellen Nierenischämie III. Karyometrie a Häufigkeitsanalyse des "bunten Kemmusters" während der Regeneration. Vircows Arch Path Anat. 337: 53-64. 1963.
23. Schmeidt E. Zellkerngrösse und sogenannte kompensartorische Hypertrophie der Mäuseniere. Zeits Micr Anat Forsch. 57: 249-275. 1951.
24. Zhou W, Otto EA, Cluckey A a 41 dalších. Mutace Fan1 způsobují karyomegalickou intersticiální nefritidu, spojující chronické selhání ledvin s defektní opravou poškození DNA. Příroda Genet. 44: 910-915. 2012.
25. Karras A, Lafaurie M, Furco A, Bourgarit A, Droz D, Sereni D, Legendre C, Martinez F a Molina JM. Nefrotoxicita související s tenofovirem u pacientů infikovaných virem lidské imunodeficience: tři případy selhání ledvin, Fanconiho syndrom a nefrogenní diabetes insipidus. Clin Infect Dis. 36: 1070-1073. 2003.
