ČÁST 2 Antioxidace a cytoprotekce akteosidu a jeho derivátů: Srovnání a mechanická chemie
Mar 08, 2022
Část 2 Jak antioxidant Cistanche Acteosid chrání buňky?
Klikněte zde pro část 1
Pro více informací prosím kontaktujte:Joanna.jia@wecistanche.com
Cistanche deserticola má mnoho účinků, klikněte sem a dozvíte se více
3. Diskuse
Je známo, že antioxidační působení přírodních fenolických sloučenin se účastní přenosu elektronů (ET) [18,19]. Některé testy na redukci kovů na bázi ET byly tedy široce používány k hodnocení antioxidačních hladin fenolických látek, jako jsou testy FRAP a CUPRAC. Pokyny pro stanovení FRAP musí být splněny při pH nižším než 3,6. Takové kyselé prostředí úspěšně potlačilo H plus ionizaci z fenolických látek; proto je test FRAP považován za pouhý ET proces [20,21]. Účinnostakteosida jeho derivátů v testu FRAP znamená, že když akteosid a jeho deriváty působí jako antioxidanty, mohou využít ET dráhu k uplatnění svého antioxidačního účinku.
Kromě toho jsme také provedli test CUPRAC v pufru o pH 7,4. Jak je vidět v Suppl. 1,akteosida jeho deriváty v závislosti na dávce zvyšovaly svou Cu2 plus-snížení procenta energie, což naznačuje, že by mohly zůstat ET potenciálem při fyziologickém pH. Jejich ET potenciály se však snížily v následujícím pořadí:akteosid> forsythosid B > poliumosid (tabulka 1). Tato dynamika jasně naznačuje, že apiosylová skupina ve forsythosidu B a rhamnosylová skupina v poliumosidu snižují ET potenciál.
Aby se ověřila možnost, že ET nastává během jejich procesů vychytávání radikálů, byl do studie zaveden volný radikál PTIO・ zaměřený na kyslík. Důkazy cyklické voltametrie odhalily, že PTIO・-scavenging pod pH 5.0 je jediná elektron-redoxní reakce. Pozorování, žeakteosida jeho deriváty by mohly účinně vychytávat radikál PTIO・ při pH 4,5, naznačuje možnost ET během jejich procesů vychytávání radikálů. Je zřejmé, že toto zjištění dále podporuje výše uvedené výsledky testů FRAP a CUPRAC a předchozí výsledky, že darující elektron (e) je znakem fenolických antioxidantů [23].
Při fyziologickém pH 7,4 však není PTIO・-scavenging esej pouze ET dráhou, ale zahrnuje také dráhu přenosu protonů (H plus). Během procesu bylo PTIO・ navrženo přijmout HPlusz fenolických látek k vytvoření píku produktu ([PTIO-H]Plus). Protože HPlus-přenos je vždy doprovázen ET v postupných nebo synchronních mechanismech [24], realistickým (či konečným) produktem je molekula [PTIO-H] [22]. PTIO・-scavenging při pH 7,4 (Suppl. 1) znamená, žeakteosida jeho deriváty mají také potenciál přenosu H plus. Hodnoty IC50 (tabulka 1) ukazují, že relativní HPlus-přenosové potenciály byly v sestupném pořadíakteosid>forsythosid B > poliumosid. Je zřejmé, že apiosylové a rhamnosylové skupiny také oslabily HPlus-přenosový potenciál během antioxidačního procesu.
Jak již bylo uvedeno, během antioxidačního procesu fenolických látek je ET obvykle doprovázen protonem (HPlus) přenos za vzniku několika antioxidačních mechanismů [24], jako je přenos atomu vodíku (HAT) [23,25-27], sekvenční přenos elektron-proton (SEPT) [26,27], sekvenční ztráta protonů u jednoho elektronu transfer (SPLET) [26] a proton-coupled elektron transfer (PCET) [24-26,28]. Například ABTS plus • -scavenging, což je reakce, které dominuje přenos jednoho elektronu (SET) [29], bylo nedávno také prokázáno, že je ovlivněna hladinami H plus [30]. ABTS plus • -scavenging je tedy vícecestný antioxidační test [21,31]. Skutečnost, žeakteosida jeho deriváty by mohly vychytávat ABTS plus ・ radikály naznačuje, že jejich antioxidační účinek může být také zprostředkován více cestami. Tato hypotéza je dále potvrzena důkazy z testu DPPH・-scavenging, což je reakce zahrnující mnohočetné cesty HAT, ET, SEPT a PCET [26,32]. Nicméně, kvantitativní analýza založená na IC50hodnoty (tabulka 1) odhalily, že v aspektech ABTS založených na více drahách plus --scavenging a DPPH*-scavenging,akteosidbyl lepší než jeho vhodný forsythosid B a rhamnosid poliumosid. Lze tedy odvodit, že apiolové a rhamnosylové části nakonec brání vícecestným potenciálům (zejména ET a HPlus-transfer) během procesu odstraňování volných radikálů.
Jak uvádějí autoři a další [14,26], během antioxidačního procesu může dojít i k RAF reakci. Pro ověření možnosti RAF však byly studovány tři fenylpropanoidní glykosidy spolu s kyselinou kávovou pomocí analýzy UPLC-ESI-Q—TOF-MS/MS. Bylo zjištěno, že kyselina kávová poskytuje dimerní produkt, zatímco tři fenylpropanoidní glykosidy neprodukují žádný pík produktu RAF. Toto zjištění jasně naznačuje, že tři fenylpropanoidní glykosidy nemohou podstoupit dráhu RAF, aby uplatnily svůj antioxidační účinek. Vzhledem k tomu, že tři fenylpropanoidní glykosidy lze považovat za estery kyseliny kávové (obrázek 1), takový rozdíl mezi kyselinou kávovou a estery kyseliny kávové také ukazuje, že velká část může bránit tvorbě RAF.
Dohromady, z hlediska zachycování volných radikálů,akteosida jeho deriváty mohou podléhat mnoha cestám, aby uplatnily svůj antioxidační účinek. Tyto antioxidační dráhy se přinejmenším účastní přenosu ET a H plus (ale ne RAF). Naše zjištění jsou částečně podpořena teoretickou studií, kteráakteosidby mohly vyvíjet antioxidační účinek prostřednictvím dráhy SPLET. V tomto procesu může akteosid nejprve deprotonovat (HPlus-přenos) za vzniku aniontu. Předpokládá se, že k deprotonaci dochází v katecholových skupinách se slabou kyselostí. Následně anion daroval elektrony za vzniku fenoxyradikálové formy [33]. Fenoxy radikály s pn konjugací jsou však do určité míry stabilní. V tomto ohledu je samozřejmě v budoucnu zapotřebí další experimentální práce.
Stojí za zmínku, že buněčný oxidační stres může také pocházet z přechodných kovů (zejména Fe2 plus). Fe2 plusiont však může transformovat H2O2z molekuly na nejškodlivější •OH radikály Fentonovou reakcí (Fe2plus plus H2O2 T Fe3plus plus ・OH plus OH-). Proto útlum Fe2plus úrovně mohou účinně inhibovat ・OH radikály k uvolnění buněčného oxidačního stresu. Chelátování železa přírodními fenolickými antioxidanty se nyní vyvinulo v účinnou terapii některých chorob z oxidativního stresu [34,35].
V této studii byly akteosid a jeho deriváty navrženy jako účinné Fe2 plus-chelátory změnami spektroskopie a barev roztoku (obrázek 2). Nicméně akteosid je při chelataci Fe horší než dva glukosidy2 plusa forsythosid B s apiosylovou skupinou je nižší než poliumosid s rhamnosylovou skupinou. Na základě srovnání jejich preferenčních konformací (obrázek 1 vpravo) se navrhuje, že apiosylová (nebo rhamnosylová) část může napomáhat hlavnímu ligandu (fenylpropanoidní skupině) při chelataci Fe.2 plus. Takový synergický efekt nepochybně posiluje Fe2 plus-chelatační schopnost a zvětšuje UV-vis vrcholy. Rhamnosyl je však ve svém Fe účinnější než apiosyl2 plus- chelatační schopnost. Rozdíl lze přičíst skutečnosti, že rhamnosyl se vyskytuje v exocyklické formě (tj. aL-rhamnopyranosyl), zatímco apiosyl je v pentacyklické formě (tj. pD-apiofuransyl). Je známo, že exocyklická forma je větší a stabilnější. Exocyklický rhamnosyl je tedy účinnější ve srovnání s pentacyklickým apiosylem ve svém Fe2 plus- chelatační schopnost.
Abychom otestovali, zda akteosid a jeho deriváty mohou vychytávat ROS, provedli jsme test autooxidace pyrogallolu. Jak je vidět v Suppl. 1, všechny by mohly účinně vychytávat - radikál, typický ROS vyskytující se v buňkách. Relativní bioaktivita se však snížila v pořadí poliumosid > forsythosid B >akteosid. Toto pořadí je také paralelní s pořadím cytoprotektivních účinků (tabulka 2). Toto zjištění ukazuje, že obecným účinkem rhamnosylové skupiny nebo apiosylové skupiny je zvýšení účinku vychytávání ROS nebo cytoprotektivních účinků.
4. Materiály a metody
4.1. Chemikálie a zvířata
Akteosid (číslo CAS: 61276-17-3, 97 procent), forsythosid B (číslo CAS: 81525-13-5, 97 procent) byly získány od BioBioPha (Kunming, Čína, Suppl. 3). Poliumosid (číslo CAS: 94079-81-9, 97 procent) izoloval náš tým z tradiční čínské bylinyCallicarpa periHT Chang (Suppl. 3). DPPH・,(±)-6-hydroxyl-2,5,7,8-tetramethlychroman-2-karboxylová kyselina (Trolox), 2,9-dimethyl{{ 9}},10-fenantrolin (neocuproin), 2,4,6-tripyridyltriazin (TPTZ) a pyrogallol byly zakoupeny od společnosti Sigma-Aldrich Shanghai Trading Co. (Shanghai, Čína). (NHq'ABTS [2,2'-azino-bis (3-ethylbenzen-thiazolin-6-diamonná sůl kyseliny sulfonové)] byla získána od Amresco Chemical Co. (Solon, OH, USA). PTIO・radikál byl zakoupen od TCI Development Co., Ltd. (Shanghai, Čína) Kyselina kávová byla zakoupena od Národního institutu pro kontrolu farmaceutických a biologických produktů (Peking, Čína) Dulbeccovo modifikované Eagleovo médium (DMEM), fetální hovězí sérum (FBS) a trypsin byly zakoupeny od Gibco (Grand Island, NY, USA) Testovací souprava AnnexinV/propidium jodid (PI) byla zakoupena od Invitrogen (Carlsbad, CA, USA).Všechna ostatní činidla byla analytické kvality.
Krysy Sprague-Dawley (SD) ve věku 4 týdnů byly získány z Animal Center of Guangzhou University of Chinese Medicine. Protokol tohoto experimentu byl proveden pod dohledem Institutional Animal Ethics Committee v Guangzhou University of Chinese (číslo schválení 20170306A).
4.2. Testy na redukci kovů (FRAP& CUPRAC)
Testy na redukci kovů zahrnují Fe3 plus-test na snížení výkonu a Cu2 plus- test na snížení výkonu. Fe3 plus-redukující test byl zaveden Benzie a Strainem a je formálně pojmenován FRAP [20]. Experimentální protokol tohoto testu byl popsán v předchozí zprávě [9]. Stručně řečeno, činidlo FRAP bylo připraveno čerstvě smícháním 10 mM TPTZ, 20 mM FeCl3,a {{0}}.25M acetátový pufr v poměru 1:1:10 při pH 3,6. Testovaný vzorek (x=4-20 1, 0,05 mg/ml) byl přidán do (20-x) 95% ethanolu a následně 80 RL činidla FRAP. Po 30-minutové inkubaci při teplotě okolí byla měřena absorbance při 595 nm pomocí čtečky mikrodestiček (Multikan FC, Thermo Scientific, Shanghai, Čína). Relativní redukční síla vzorku byla vypočtena pomocí následujícího vzorce:
kdemaxbyla maximální absorbance reakční směsi se vzorkem a Aminje minimální absorbance v testu. A je absorbance vzorku.
Cu2 plus-redukční síla může také charakterizovat hladinu antioxidantů, a proto se nazývá CUPRAC. Tento test byl proveden podle dříve publikované metody [36]. Stručně řečeno, 12 RL vodného roztoku CuSOq (10 mmol/l), 12 RL ethanolického roztoku neocuproinu (7,5 mmol/l) a (75 — x) RL CH3COONH4roztok pufru ({{0}},1 mol/l, pH 7,5) byly přidány do jamek s různými objemy vzorku (0,05 mg/ml, 4-20 |^L). Absorbance při 450 nm po 30 minutách byla měřena pomocí výše uvedené čtečky mikrodestiček. Relativní výkon CUPRAC byl vypočten pomocí vzorce pro FRAP. Amaxbyla maximální absorbance reakční směsi se vzorkem a Aminje minimální absorbance v testu. A je absorbance vzorku.
4.3. PTI0・-ScavengingAssay
Testy PTIO*-scavenging (při pH 4,5 nebo pH 7,4) byly provedeny na základě naší metody [16]. Stručně řečeno, roztok testovacího vzorku (x=0-20^L, 1 mg/ml pro pH 4,5 a {{10}},5 mg/ml pro pH 7,4) byl přidán do (20 — x) rL 95% ethanolu, následovaného 80 RL vodného roztoku PTIO*. Vodný roztok PTIO* byl připraven s použitím roztoku fosfátového másla (0,1 mM, pH 4,5 nebo pH 7,4). Směs byla udržována při 37 stupních po dobu 2 hodin a poté byla měřena absorbance při 560 nm pomocí výše zmíněné čtečky mikrodestiček. Procento inhibice PTIO* bylo vypočteno následovně:
kde stupeň A je absorbance kontroly bez vzorku a A je absorbance reakční směsi se vzorkem.
4.4. ABTSPlus*-Vyplachování a DPPH*-Uklízecí testy
ABTS*Plus-scavenging aktivita byla hodnocena podle metody [37]. ABTS plus * byl vyroben smícháním 0,2 ml diamonné soli ABTS (7,4 mmol/l) s 0,2 ml persíranu draselného (2,6 mmol/l). Směs byla ponechána ve tmě při pokojové teplotě po dobu 12 hodin, aby se umožnilo dokončení generování radikálů, před zředěním destilovanou vodou (v poměru přibližně 1:20) tak, aby její absorbance při 734 nm byla { {16}}.35 土 0.01 pomocí výše uvedené čtečky mikrodestiček. Pro stanovení vychytávací aktivity byl testovaný vzorek (x=4-20 RL, 0,05 mg/ml) přidán do (20 – x) RL destilované vody a následně 80 RL činidla ABTS plus * a absorbance při 734 nm bylo měřeno 3 minuty po počátečním promíchání s použitím destilované vody jako slepého pokusu.
Aktivita vychytávání radikálů DPPH* byla stanovena, jak bylo popsáno dříve [18]. Stručně, 75 RL roztoku DPPH* (0,1 rM) bylo smícháno s uvedenými koncentracemi vzorku (0,025 mg/ml, 5-25 RL) rozpuštěného v methanolu. Směs byla udržována při teplotě místnosti po dobu 30 minut a absorbance byla měřena při 519 nm pomocí výše uvedené čtečky mikrodestiček.
Procentní podíly aktivity ABTS plus •-scavenging a DPPH*-scavenging activity byly vypočteny na základě vzorce uvedeného v části 4.3.
4.5. UPLC—ESI—Q-TOF—MS/MS analýza PPH* Reakční produkty
Tato metoda byla založena na naší předchozí studii [25]. Methanolový roztok akteosidu byl smíchán s roztokem radikálů DPPH* v methanolu v molárním poměru 1:2 a výsledná směs byla inkubována po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Směs produktů byla poté přefiltrována přes 0.22-Rm filtr a analyzována pomocí systému UPLC vybaveného kolonou C18 (2.0 mm id x 100 mm, 1,6 Rm, Phenomenex, Torrance, CA, USA). Mobilní fáze byla použita pro eluci systému a sestávala ze směsi methanolu (fáze A) a vody (fáze B). Kolona byla eluována při průtoku 0,3 ml/min s následujícím gradientovým elučním programem: 0-10 min, 60-100 procent A; 10-15 min, 100 procent A. Objem nástřiku vzorku byl nastaven na 1 RL pro separaci různých složek. Analýza ESI-Q-TOF-MS/MS byla provedena pomocí Triple TOF 5600PlusHmotnostní spektrometr (AB SCIEX, Framingham, MA, USA) vybavený zdrojem ESI, který byl provozován v režimu negativní ionizace. Rozsah skenování byl nastaven na 100-2000 Da. Systém byl provozován s následujícími parametry: napětí iontového spreje, —4500 V; ohřívač iontového zdroje, 550 stupňů C; clonový plyn (CUR, N2), 30 psi; nebulizační plyn (GS1, vzduch), 50 psi; Plyn Tis (GS2, Vzduch), 50 psi. Deklastrační potenciál (DP) byl nastaven na —100 V, zatímco srážková energie (CE) byla nastavena na —40 V s rozptylem energie kolize (CES) 20 V. Produkty RAF
byly kvantifikovány extrakcí odpovídajícího molekulového vzorce z celkového iontového chromatogramu (Suppl. 2).
Výše uvedený experiment byl opakován s použitím forsythosidu B, pódiové strany a kyseliny kávové. Korespondencem/zpíky byly extrahovány z odpovídajícího molekulárního vzorce z celkového iontového chromatogramu (Suppl. 2).
4.6. UV-Vis-spektrální analýza Fe2 plus- Chelatační produkty
Fe2 plus-produkty chelatační reakce akteosidu-Fe2 plusbyly hodnoceny pomocí UV-Vis-spektroskopie [13]. Pro experiment byla 3 0}0 methanolického roztoku akteosidu (0,24 mM) přidána do 700 rl vodného roztoku FeCl? 4H20 (168 mM). Roztok byl poté důkladně promíchán. Následně byla výsledná směs skenována pomocí UV-Vis spektrofotometru po hodině (Unico 2600A, Shanghai, Čína) od 200-850 nm.
Výše uvedený experiment byl opakován s použitím forsythosidu B nebo strany pódia místo akteosidu.
4.7. Pyrogalolový autooxidační test pro superoxidový anion (•O2~) Čištění
Měření aktivity vychytávání superoxidového aniontu (・.{{0}}) bylo založeno na naší metodě [17]. Stručně, vzorek byl rozpuštěn v ethanolu na 1 mg/ml. Roztok vzorku (x rL) byl smíchán s Tris-HCl pufrem (980 - x rL, 0,05 M, pH 7,4) obsahujícím EDTA (1 mM). Když bylo přidáno 20 ul pyrogallolu (60 mM v 1 mM HC1), směs byla okamžitě třepána při teplotě místnosti. Absorbance směsi při 325 nm byla měřena (Unico 2100, Shanghai, Čína) proti Tris-HCl pufru jako slepému pokusu každých 30 s po dobu 5 minut. Schopnost vyplachování byla vypočtena následovně:
4.8. Cytoprotektivní účinek na oxidativně stresované bmMSC (test MTT)
BmMSC byly kultivovány podle našich předchozích zpráv [38] s mírnými úpravami. Stručně řečeno, kostní dřeň byla získána ze stehenní kosti a holenní kosti krysy. Vzorky dřeně byly zředěny DMEM (nízká hladina glukózy) obsahujícím 10 procento FBS. BmMSC byly připraveny gradientovou centrifugací při 900 g po dobu 30 minut při 1,073 g/ml Percoll. Připravené buňky byly odděleny působením 0,25 procenta trypsinu a převedeny do kultivačních baněk při 1 x 104/cm2. BmMSC v pasáži 3 byly hodnoceny na homogenitu kultivovaných buněk pomocí detekce CD44 pomocí MTT testu [39].
K hodnocení cytoprotektivního účinku akteosidu a jeho derivátů vůči bmMSC byl použit MTT test [40]. Model poranění byl vytvořen na základě předchozí studie [41]. Experimentální protokol je stručně znázorněn na obrázku 3.
4.9. Statistická analýza
Každý experiment v sekcích 4.2-4.4 a 4.7 byl proveden v triplikátech a experiment testu MTT byl proveden v pěti opakováních. Data byla zaznamenána jako průměr土SD (standardní odchylka). Křivky dávka-odpověď byly vyneseny pomocí profesionálního softwaru Origin 6.{2}} (OriginLab, Northampton, MA, USA). Hodnota IC50 byla definována jako konečná koncentrace 50procentní inhibice radikálů (relativní redukční síla) [42]. Statistická srovnání byla provedena jednocestnou ANOVA pro detekci významných rozdílů pomocí SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) pro Windows.p< 0.05 bylo považováno za statisticky významné.
5. Závěry
Tři přírodní fenylpropanoidní glykosidy, jmenovitě akteosid, forsythosid B a strana pódia, se mohou podílet na mnoha drahách antioxidačního působení, včetně přenosu ET, H plus; a Fe2 plus-chelatační, ale ne RAF. ET a HPlus-přenosové dráhy mohou být bráněny rhamnosylovou skupinou nebo apiosylovou skupinou; nicméně Fe2 plus-chelatační dráha může být zesílena cukernými zbytky (zejména rhamnosylová skupina). Obecným účinkem rhamnosylové skupiny nebo apiosylové skupiny je zvýšení schopnosti vychytávání ROS zapojených do více drah. Forsythosid B a poliumosid jsou tedy lepší než akteosid v cytoprotektivních účincích.
Doplňkové materiály:Doplňkové materiály jsou k dispozici online. 1. Křivky dávka-odpověď; 2. HPLC-MS spektra; 3. Analytické certifikáty akteosidu, forsytosidu B a poliumosidu.
Poděkování:Tato práce byla podpořena Čínskou národní vědeckou nadací (81573558, 81603269), Projektem vědy a technologie Guangdong (2017A050506043) a Nadací přírodních věd provincie Guangdong (2 017A030312009, 2015A01031044).
Příspěvky autora:Xian Li a Dongfeng Chen vymysleli a navrhli experimenty; Aichi Wu připravil poliumosid; Yulu Xie, Qian Guo a Penghui Xue provedli antioxidační experimenty; Ke Li a Wei Zhao provedli experimenty MTT; Hong Xie analyzoval data; Jiasong Guo provedl experiment na obrázku 2D; Xian Li napsal článek. Všichni autoři přečetli a schválili konečný rukopis.
Střet zájmů:Autoři neprohlašují žádný střet zájmů.
akteosidvcistanche
A zkratky
ABTS plus • radikál 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzo-thiazolin-6-sulfonová kyselina)
bmMSCs mezenchymální kmenové buňky pocházející z kostní dřeně
CUPRAC měďnatý snižující antioxidační kapacitu
dAMP 2'-deoxyadenosin-5'-monofosfátový radikál
DMEM Dulbeccovo modifikované Eagleovo médium
dGMP 2/-deoxyguanosin-5'-monofosfátový radikál
DPPHe 1,1-difenyl-2-pikrylhydrazinový radikál
přenos ET elektronů; FBS: Fetální hovězí sérum
FRAP železité ionty snižující antioxidační sílu;
HAT přenos atomu vodíku
MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyl
PCET přenos protonů spřažených elektronů
PTIOe 2-fenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazolin-1-oxyl3-oxidový radikál
Tvorba radikálového aduktu RAF
ROS reaktivní formy kyslíku
Transfer jádra somatických buněk SCNT
SEPT sekvenční přenos elektron-proton
SPLET sekvenční přenos protonů se ztrátou jednoho elektronu
TPTZ 2,4,6-tripyridyltriazin
Trolox (±)-6-hydroxyl-2,5,7,8-tetramethlychroman-2-karboxylová kyselina
Reference
1. Kubica, P.; Szopa, A.; Ekiert, H. Produkce verbascosidu a fenolových kyselin v biomase Verbena Officinalis L. (vervain) kultivované za různých podmínek in vitro. Nat. Prod. Res. 2017, 31, 1663-1668.
2. Lee, JH; Chun, JL; Kim, KJ; Kim, EY; Kim, DH; Lee, BM; Han, KW; Park, KS; Lee, KB; Kim, MK Účinek akteosidu jako buněčného ochránce na produkci klonovaného psa. PLoS ONE 2016,11, e0159330.
3. Wang, velitelství; Xu, YX; Yang, J.; Zhao, XY; Slunce, XB; Zhang, YP; Guo, JC; Zhu, CQ Acteoside chrání buňky lidského neuroblastomu SH-SY5Y před |3-amyloidem indukovaným poškozením buněk. Brain Res. 2009,1283,139-147.
4. Yang, JH; Yan, Y.; Liu, HB; Wang, JH; Hu, JP Ochranné účinky akteosidu proti poškození způsobenému rentgenovým zářením ve fibroblastech lidské kůže. Mol. Med. Rep. 2015, 12, 2301-2306.
5. Liu, CH; Liu, TS; Luo, CQ; Zhang, J.; Zeng, XY; Cui, L.; Xie, LJ Stanovení forsythiasidu B a poliumosidu různého původu a částí z Callicarpa kwangtungensis. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2013, 38, 3324-3326.
6. Jiang, WL; Tian, JW; Fu, FH; Zhu, HB; Hou, J. Neuroprotektivní účinnost a terapeutické okno forsythoside B: Ina Rat Model cerebrální ischemie a reperfuzního poškození. Eur. J. Pharmacol. 2010, 640, 75-81.
7. Pan, N.; Hori, H. Antioxidační účinek akteosidu a jeho analogů na peroxidaci lipidů. Redox Rep. 1996, 2, 149-154.
8. Zheng, RL; Shi, YM; Jia, ZJ; Zhao, CY; Zhang, Q.; Tan, XR Rychlá oprava DNA radikálů. Chem. Soc. Rev. 2010, 39, 2827-2834.
9. Li, XC; Mai, WQ; Chen, DF Chemická studie o ochranném účinku myricitrinu proti poškození DNA vyvolanému hydroxylem a antioxidačním mechanismu. J. Chin. Chem. Soc. 2014, 61, 383-390.
10. Shi, YM; Wang, WF; Huang, CY; Jia, ZJ; Yao, S.; Zheng, RL Rychlá oprava oxidačního poškození DNA fenylpropanoidovými glykosidy a jejich analogy. Mutageneze 2008, 23, 19-26.
11. Jiang, Q.; Li, XC; Tian, YG; Lin, QQ; Xie, H.; Lu, WB; Chi, YG; Chen, DF Lyofilizované vodné extrakty z Mori Fructus a Mori Ramulus Chrání mezenchymální kmenové buňky před poškozením ošetřeným eOH: Biotest a antioxidační mechanismus. Doplněk BMC. Alternativní. Med. 2017,17,242.
12. Wang, TT; Zeng, GC; Li, XC; Zeng, HP In vitro studie o antioxidačním a ochranném účinku 2-substituovaných-8-derivátů hydroxychinolinu proti H2O2-indukovanému oxidačnímu stresu v BMSC. Chem. Biol. Drug Des. 2010, 75, 214-222.
13. Liu, JJ; Li, XC; Lin, J.; Li, YR; Wang, TT; Jiang, Q.; Chen, DF Sarcandra Glabra (Caoshanhu) Chrání mezenchymální kmenové buňky před oxidačním stresem: Bioevaluace a mechanická chemie. Doplněk BMC. Alternativní. Med. 2016, 16, 423.
14. Li, XC; Han, L.; Li, YR; Zhang, J.; Chen, JM; Lu, WB; Zhao, XJ; Lai, YT; Chen, DF; Wei, G. Ochranný účinek sinapinu před poškozením mezenchymálních kmenových buněk vyvolaným hydroxylovými radikály a možnými mechanismy. Chem. Pharm. Býk. 2016, 64, 319-325.
15. Bertolo, A.; Capossela, S.; Frankl, G.; Baur, M.; Potzel, T.; Stoyanov, J. Oxidační stav předpovídá kvalitu lidských mezenchymálních kmenových buněk. Stem Cell Res. Ther. 2017, 8, 3.
16. Li, XC 2-fenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazolin-1-oxyl 3-oxid (PTIOe) Radical Scavenging: Nový a jednoduchý antioxidant Test In Vitro. J. Agric. Food Chem. 2017, 65, 6288-6297.
17. Li, X. Vylepšená metoda autooxidace pyrogalolu: Spolehlivý a levný test pohlcující superoxidy vhodný pro všechny antioxidanty. J. Agric. Food Chem. 2012, 60, 6418-6424.
18. Li, XC; Jiang, Q.; Wang, TT; Liu, JJ; Chen, DF Srovnání antioxidačních účinků kvercitrinu a isoquercitrinu: Pochopení role skupiny 6〃-OH. Molekuly 2016, 21,1246.
19. Leopoldini, M.; Marino, T.; Russo, N.; Toscano, M. Antioxidační vlastnosti fenolických sloučenin: H-atom versus mechanismus přenosu elektronů. J. Phys. Chem. A 2004,108, 4916^922.
20. Benzie, MFF; Strain, JJ The Ferric Reduction Ability of Plasma (FRAP) as a Measure of "Antioxidant Power": The FRAP assay. Anální. Biochem. 1996, 239, 70-76.
21. Gulcin, I. Antioxidační aktivita složek potravy: Přehled. Oblouk. Toxicol. 2012, 86, 345-391.
22. Goldstein, S.; Russo, A.; Samuni, A. Reakce PTIO a karboxy-PTIO s ・NO, ・NO2 a O2. J. Biol. Chem. 2003, 278, 50949-50955.
23. Li, X.; Han, WJ; Mai, WQ; Wang, L. Antioxidační aktivita a mechanismus tetrahydroamentoflavonu in vitro. Nat. Prod. Commun. 2013, 8, 787-789.
24. Zhang, HY; Wu, W.; Mo, YR Studie přenosu protonů vázaných elektronů (PCET) se čtyřmi explicitními diabatickými stavy na úrovni ab Initio. Počítat. teor. Chem. 2017, 1116, 50-58.
25. Lin, J.; Li, XC; Chen, L.; Lu, WZ; Chen, XW; Han, L.; Chen, DF Ochranný účinek proti poškození DNA vyvolanému hydroxylovými radikály a antioxidační mechanismus [6]-gingerolu: Chemická studie. Býk. Korean Chem. Soc. 2014, 35, 1633-1638.
26. Iuga, C.; Alvarez-Idaboy, JR; Russo, N. Antioxidační aktivita trans-resveratrolu vůči hydroxylovým a hydroperoxylovým radikálům: Studie kvantové chemické a výpočetní kinetiky. J. Org. Chem. 2012, 77, 3868-3877. [CrossRef] [PubMed]
27. Li, XC; Hu, QP; Jiang, SX; Li, F.; Lin, J.; Han, L.; Hong, YL; Lu, WB; Gao, YX; Chen, DF Flos Chrysanthemi Indici Chrání před poškozením DNA a MSC způsobeným hydroxylem prostřednictvím antioxidačního mechanismu. J. Saudi Chem. Soc. 2015, 19, 454-460.
28. Amic, A.; Markovič, Z.; Markovič, JMD; Štěpánič, V.; Lucic, B.; Amic, D. K vylepšené predikci schopnosti flavonoidů vychytávat volné radikály: Význam dvojitých PCET mechanismů. Food Chem. 2014, 152, 578-585.
29. Lee, CH; Yoon, JY UV Přímá fotolýza 2,2'-a-bis(3-ethylbenzothiazolin-6-sulfonátu) (ABTS) ve vodném roztoku: Kinetika a mechanismus. J. Photochem. Photobiol. A 2008, 197, 232-238.
30. Aliaga, C.; Lissi, EA Reaction of 2,2'-Azinobis(3-Ethylbenzothiazoline-6-sulfonová kyselina (ABTS) odvozené radikály s hydroperoxidy. Kinetika a mechanismus. Int. J. Chem. Kinet. 1998, 30, { {8}}.
31. Osman, AM; Wong, KKY; Fernyhough, A. ABTS Radical-Driven Oxidation of Polyphenols: Isolation and Structural Elucidation of Covalent addducts. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2006, 346, 321-329.
32. Osman, AM Multiple Pathways of the Reaction of 2,2-Difenyl-1-Picrylhydrazyl Radical (DPPHe) s (plus)-katechinem: Důkaz pro tvorbu kovalentního aduktu mezi DPPHe a oxidovanou formou polyfenolu. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2011, 412, 473-478.
33. Lopez-Munguia, A.; Hernandez-Romero, Y.; Pedraza-Chaverri, J.; Miranda-Molina, A.; Regla, I.; Martinez, A.; Castillo, E. Fenylpropanoidní glykosidové analogy: Enzymatická syntéza, antioxidační aktivita a teoretická studie jejich mechanismu zachycování volných radikálů. PLoS ONE 2011, 6, e20115.
34. Perron, NR; Brumaghim, JL Přehled antioxidačních mechanismů polyfenolových sloučenin souvisejících s vazbou železa. Cell Biochem. Biophys. 2009, 53, 75-100.
35. Devos, D.; Moreau, C.; Devedjian, JC; Kluza, J.; Perrault, M.; Laloux, C.; Jonneaux, A.; Ryckewaert, G.; Garcon, G.; Rouaix, N.; a kol. Zaměření na chelatovatelné železo jako terapeutickou modalitu u Parkinsonovy choroby. Antioxid. Redoxní signál. 2014, 21, 195-210.
36. Cekic, SD; Baskan, KS; Totem, E.; Apak, R. Test modifikované měďnaté antioxidační kapacity (CUPRAC) pro měření antioxidačních kapacit proteinů obsahujících thiol ve směsi s polyfenoly. Talanta 2009, 79, 344-351.
37. Li, XC; Chen, DF; Mai, Y.; Wen, B.; Wang, XZ Soulad mezi antioxidačními aktivitami in vitro a chemickými složkami Radix Astragali (Huangqi). Nat. Prod. Res. 2012, 26, 1050-1053.
38. Chen, DF; Li, XC; Xu, ZW; Liu, XB; Du, SH; Li, H.; Zhou, JH; Zeng, HP; Hua, ZC Kyselina hexadekanová z odvaru Buzhong Yiqi indukovala proliferaci mezenchymálních kmenových buněk kostní dřeně. J. Med. Jídlo 2010, 13, 967-975.
39. Li, X.; Liu, JJ; Lin, J.; Wang, TT; Huang, JY; Lin, YQ; Chen, DF Ochranné účinky dihydromyricetinu proti »OH-indukovanému poškození mezenchymálních kmenových buněk a mechanická chemie. Molekuly 2016,21, 604.
40. Wang, GR; Li, XC; Zeng, HP Synthesis, Antioxidační aktivita (E)-9-p-tolyl-3-2-(8-hydroxy-chinol- 2-yl)vinyl-karbazolu a (E){{8 }}(p-Anisyl)-3-2-(8-hydroxy-chinol-2-yl)vinyl-karbazol a jejich indukční proliferace mezenchymálních kmenových buněk. Acta Chim. Hřích. 2009, 67, 974-982.
41. Li, X.; Wei, G.; Wang, X.; Liu, D.; Deng, R.; Li, H.; Zhou, J.; Li, Y.; Zeng, H.; Chen, D. Targeting of the Shh Pathway by atractylenolides podporuje chondrogenní diferenciaci mezenchymálních kmenových buněk. Biol. Pharm. Býk. 2012, 35, 1328-1335.
42. Li, XC; Gao, YX; Li, F.; Liang, AF; Xu, ZM; Bai, Y.; Mai, WQ; Han, L.; Chen, DF Maclurin chrání před poškozením mezenchymálních kmenových buněk vyvolaným hydroxylovými radikály: Hodnocení antioxidantů a mechanistický náhled. Chem. Biol. Komunikujte. 2014, 219, 221-228.
Dostupnost vzorku: U autorů je k dispozici vzorek sloučeniny poliumosidu.
© 2018 od autorů. Držitel licence MDPI, Basilej, Švýcarsko. Tento článek je článek s otevřeným přístupem distribuovaný za podmínek licence Creative Commons Attribution (CC BY) (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
