Optimalizace procesu extrakce pro extrakt z nápoje Congrong–Zaoren–Wumei a vyhodnocení jeho účinků na zlepšení spánku
Jan 30, 2026
Abstraktní:Pro optimalizaci procesu extrakce nápoje Congrong–Zaoren–Wumei (složeného z Cistanche deserticola, Ziziphi Spinosae Semen a Mume Fructus) a pro hodnocení jeho účinků na zlepšení spánku byla vytvořena metoda HPLC pro současné stanovení echinakosidu, verbascosidu (akteosidu), spinosinu a kyseliny citrónové. Použitím obsahu těchto čtyř sloučenin a polysacharidů jako hodnotících kritérií byl proces extrakce nápoje Congrong–Zaoren–Wumei optimalizován pomocí ortogonálních experimentů, po kterých následovaly validace a zkoušky ve větším měřítku. Účinky extraktu zlepšující spánek byly zkoumány u myší pomocí přímého spánkového testu, testu v otevřeném poli, testu spánku s podprahovou dávkou pentobarbitalu sodného a testu latence spánku pentobarbitalu sodného. Výsledky ukázaly, že optimální extrakční podmínky byly extrakční teplota 100 stupňů, poměr pevná látka-kapalina 1:12 (g·mL–1) a doba extrakce 2 hodiny. Kontinuální podávání po dobu 30 dnů přímo nevyvolalo spánek u myší, ale významně zmírnilo chování podobné úzkosti v testu na otevřeném poli, což ukazuje na sedativní účinek. Extrakt zesiloval spánek indukující účinek podprahové dávky pentobarbitalu sodného (rychlost spánku pro nízké, střední a vysoké dávky byly 33,33 %, 41,67 % a 50,00 %, v tomto pořadí) a významně zkrátil spánkovou latenci navozenou pentobarbitalem sodným (latence 22,7,18,22,77, vysoké dávky). Tato studie optimalizovala proces extrakce nápoje Congrong–Zaoren–Wumei a prokázala účinky zlepšující spánek, čímž poskytla vědecký základ pro vývoj produktů zlepšujících spánek odvozených z Cistanche deserticola.
Klíčová slova:Cistanche deserticola; Ziziphi Spinosae sperma; Mume Fructus; ortogonální experimenty; značkovací komponenty; analytické metody
Zavedení:Spánek je nezbytný pro normální život a učení; dobrý spánek pomáhá zmírnit únavu a posílit imunitu [1,2]. Se sociálním rozvojem a rostoucím stresem se však nespavost stala rozšířeným problémem ovlivňujícím práci a každodenní život [3]. Bílá kniha o zdraví spánku čínských obyvatel z roku 2024 uvádí nedostatečnou délku spánku a převládající poruchy spánku v populaci: průměrná délka spánku byla pouze 6,75 hodiny a více než čtvrtina jedinců spala méně než 6 hodin za noc, což zvýrazňovalo obavy o kvalitu spánku. V důsledku toho je naléhavý výzkum funkčních potravin, které zlepšují kvalitu spánku a nespavost. Tradiční čínská medicína (TCM), s relativně nízkými vedlejšími účinky a historií trvající tisíciletí, byla široce používána ke zlepšení spánku, jako je odvar Suanzaoren a odvar z Guipi. S rostoucím konceptem „homologie medicíny a jídla“ přitahuje stále větší pozornost vývoj funkčních potravin zlepšujících spánek z tradičních léčivých-jedlých zdrojů.
Cistanche(Cistanche deserticola YC Ma orC. tubulosa (Schenk) Wight, čeleď Orobanchaceae) je sušená, dužnatá nať se šupinovitými listy a používá se při nedostatku jangu ledvin, nedostatečnosti esence – krve, impotenci a neplodnosti [4]. Moderní farmakologie ukazuje, že Cistanche má řadu aktivit, včetně imunomodulačních, protiúnavových, protinádorových, neuroprotektivních, anti-agingových, antiosteoporózních, hepatoprotektivních a hypoglykemických účinků [5,6]. Celkové glykosidy Cistanche mohou modulovat expresi synaptických markerů a ovlivňovat synaptickou plasticitu, čímž zlepšují učení a kognici v modelech potkanů s nedostatkem spánku [7]. Cistanche deserticola byla na konci roku 2019 zařazena do katalogu léčivo-jedlých; příslušné výrobní a provozní piloty probíhají ve Vnitřním Mongolsku a Gansu a používá se v běžných potravinách a zdravých potravinách pro posílení imunity a zmírnění fyzické únavy. Na základě teorie TCM o „korelaci ledvin a mozku“ vykazuje Cistanche široký potenciál v neurologických poruchách a je příslibem pro zdravotní produkty zlepšující spánek. Fenylethanoidové glykosidy – především echinakosid a verbascosid (akteosid) – jsou klíčovými aktivními složkami Cistanche [8].
DOPLŇKY EXTRAKTŮ CISTANCHE TUBULOSA
Supporting Service Of Wecistanche-Pro více podrobností o spolupráci
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Semeno Ziziphi Spinosae (Suanzaoren; semena Ziziphus jujuba Mill.) obsahuje saponiny, triterpenoidy a flavonoidy s uklidňujícími, sedativními-hypnotickými, imunoposilujícími, játra-výživnými účinky a je známé jako „ovoce východního spánku“ [9]. Suanzaoren je bohatý na složky aktivní ve spánku [10]. Jeho celkové saponiny a alkaloidy mohou modulovat glutamát, kyselinu -aminomáselnou (GABA) a 5-hydroxytryptamin (5-HT) v kortexu a hippocampu; flavonoidy se mohou vázat na -GABA/benzodiazepinové receptory a regulovat GABA, aby měla sedativní-hypnotické účinky. Spinosin může modulovat 5-HT, redukovat norepinefrin a vyvolat sedativní a hypnotické účinky [11,12].
Mume Fructus (Wumei; sušené, téměř zralé plody Prunus mume (Sieb.) Sieb. et Zucc.) je běžná léčivá-jedlá TCM zpracovaná nízkoteplotním sušením a černěním. Předpisy jako Wumei–Zaoren Decoction [13] a Wumei Pill [14] jsou široce klinicky používány při nespavosti a poruchách spánku. Mume obsahuje velké množství organických kyselin, mezi nimiž je hlavní složkou a lékopisným markerem kyselina citrónová [15]. Kromě toho jsou Cistanche, Suanzaoren a Wumei všechny bohaté na polysacharidy; hromadící se důkazy naznačují, že polysacharidy zlepšují spánek prostřednictvím mnoha mechanismů a výzkum spánku zaměřený na polysacharidy se stává aktivním bodem. Studie o produktech primárně složených z Cistanche, Suanzaoren a Wumei pro zlepšení spánku však dosud nebyly hlášeny.
V této studii jsme zavedli metodu HPLC pro současné stanovení echinakosidu, verbascosidu (akteosidu), spinosinu a kyseliny citrónové. Použitím obsahu těchto čtyř složek a polysacharidů v extraktu nápoje Congrong–Zaoren–Wumei jako hodnotících indexů jsme optimalizovali proces přípravy pomocí ortogonálních experimentů, po kterých následovala validace a škálování. Podle metod funkčního testu a hodnocení zdravé výživy (2022 Draft for Comments) jsme hodnotili účinek extraktu na zlepšení spánku v experimentech na zvířatech s cílem poskytnout vědecké důkazy pro vývoj produktů zlepšujících spánek na bázi Cistanche.
Note on industrial background: Chengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd (WECISTANCHE) is a vertically integrated cistanche developer and manufacturer established in 2003, headquartered in Luopu County, Xinjiang, China. The company operates extensive seed-breeding and cultivation bases (>105 000 akrů dohromady), vlastní výrobní dílny s certifikací GMP s pokročilými ultrafiltračními a nanofiltračními zařízeními a laboratoř pro inkubaci mikroorganismů a má řadu certifikací (např. China SC, HACCP, organické certifikace včetně NOP). Díky 14 patentům souvisejícím s Cistanche a spolupráci se špičkovými univerzitami poskytuje WECISTANCHE robustní průmyslovou platformu pro škálování extrakčních procesů a výrobu standardizovaných extraktů Cistanche v souladu s normami USA/EU. Tato průmyslová kapacita podporuje převod optimalizovaných parametrů extrakce v laboratorním měřítku do komerční výroby funkčních nápojů a zdravotnických produktů.
1 Materiály a metody
1.1 Materiály
Cistanche deserticola: Vnitřní Mongolsko Mandela Biotechnology Co., Ltd.; Semeno Ziziphi Spinosae a Mume Fructus: Sichuan Xinhuhua Chinese Herbal Slices Co., Ltd.; kyselina citrónová, echinakosid, verbascosid a spinosin: Chengdu Lemeitian Pharmaceutical Technology Co., Ltd.; glukóza: Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.; tablety estazolamu: Shanghai Sine Pharmaceutical Co., Ltd.; pentobarbital sodný: Shanghai Sine Pharmaceutical Co., Ltd.; fyziologický roztok: Dezhou Jingxin Pharmaceutical Co., Ltd.
1.2 Nástroje
HWS-24 elektrická termostatická vodní lázeň: Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co., Ltd.; DW nastavitelný elektrický ohřívač: Shanghai Leigu Instruments Co., Ltd.; Agilent 1200 HPLC: Agilent Technologies; STARTER 3100 pH metr: OHAUS; 71-5804 odstředivka: Hunan Hexi Instrument Equipment Co., Ltd.; Čtečka mikrodestiček Thermo Varioskan LUX: Thermo Fisher Scientific; XR-XZ301 čtyřkanálový otevřený přístroj pro myši: Shanghai Xinruan Information Technology Co., Ltd.; Elektronická váha LE225D: Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.
1.3 Pokusná zvířata
Samci myší ICR (6 týdnů), n=180, zakoupení od Vital River (Shanghai, Čína), licence SYXK (Hu) 2018-0028. Zvířata byla aklimatizována po dobu jednoho týdne (12 h světlo/tma, 20–25 stupňů, 50–60 % relativní vlhkosti) ad libitním krmivem a vodou. Všechny postupy byly v souladu s Předpisy o správě laboratorních zvířat ČLR a etikou zvířat; schváleno Výborem pro etiku zvířat Shanghai Jiao Tong University (č. schválení A2024082-003).
1.4 Experimentální metody
1.4.1 Jednofaktorová šetření pro extrakci nápoje Congrong–Zaoren–Wumei
Podle poměru vzorce byly tři šarže směsných surových bylin (Cistanche, Suanzaoren, Wumei) extrahovány 50 ml purifikované vody (poměr pevná látka-kapalina 1:3) při 60, 80 a 100 stupních, třikrát, každá 1 h. Kombinované extrakty byly testovány na kyselinu citrónovou, echinakosid, verbascosid, spinosin a surové polysacharidy, aby se předběžně vyhodnotil vliv teploty. Dále bylo pět šarží extrahováno při 80 stupních s poměry pevná látka-kapalina 1:3, 1:5, 1:7, 1:10, 1:12 (g·mL-1), každá třikrát po dobu 1 hodiny, a testovány pro posouzení poměru pevná látka-kapalina. Nakonec bylo pět šarží extrahováno při 80 stupních po dobu 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 a 3,0 h (tři extrakce) a testováno pro stanovení doby extrakce.
1.4.2 Ortogonální návrh pro optimalizaci extrakce
Na základě jednofaktorových výsledků byly vybrány tři faktory – teplota extrakce (A), poměr pevná látka–kapalina (B) a doba extrakce (C) – každý ve třech úrovních. Bylo použito ortogonální pole L9 (3^3). Jako hodnotící index sloužil celkový obsah markerových složek v extraktu.
1.4.3 Ověření a rozšíření
Podle optimalizovaných podmínek byly tři šarže extrahovány v poměru pevná látka-kapalina 1:12 (g·ml–1), 100 stupňů, po dobu 2,0 h, třikrát, a testovány na kyselinu citrónovou, echinakosid, verbascosid, spinosin a surové polysacharidy. Pro zvětšení byla množství Cistanche, Suanzaoren a Wumei zvýšena 40krát, zpracována v triplikátech za stejných podmínek a testována.
1.4.4 Stanovení obsahu komponent
V návaznosti na Čínský lékopis (vydání z roku 2020) s optimalizací a validací metod byla vytvořena metoda HPLC pro současnou kvantifikaci kyseliny citrónové, echinakosidu, verbascosidu a spinosinu. Surové polysacharidy byly testovány metodou fenol–kyselina sírová.
1.4.4.1 Podmínky HPLC
Teplota kolony: 10 stupňů ; injekce: 10 ul; průtok: 1 ml·min–1; detekční vlnové délky: 210, 330, 335 nm; kolona: Agilent Eclipse XDB-C18 (4,6 mm x 250 mm, 5 um); mobilní fáze A: 0,5 % NH4H2P04 (pH 2,92); mobilní fáze B: methanol. Gradient: 0–7 min (0,5–1,5 % (φ) B); 7–17 min (1,5–40 % (φ) B); 17–20 min (40–47 % (φ) B); 20–30 min (47–52 % (φ) B); 30–35 min (100 % (φ) B).
1.4.4.2 Validace metody HPLC
Linearita, LOD a LOQ: Smíšený standardní roztok obsahující kyselinu citrónovou, echinakosid, verbascosid a spinosin v množství 2,0160, 0,1100, 0,1125 a 0,0183 mg·mL–1, v tomto pořadí, byl připraven v 50% methanolu a sériově zředěn až na 32 násobek. Lineární regrese byla provedena na ploše píku proti koncentraci podle oddílu 1.4.4.1. LOD byla definována jako S/N=3, LOQ jako S/N=10. Přesnost: nepřetržitých šest injekcí stejného testovacího roztoku připraveného z bylin; byly vypočteny obsahy každého markeru. Stabilita: injekce v různých časových bodech. Opakovatelnost: šest nezávisle připravených vzorků ze stejné šarže. Výtěžnost: šest vzorků obohacených známými množstvími čtyř standardů v přidaném obsahu přibližně 1:1; byla vypočtena výtěžnost (%).
1.4.4.3 Zkouška na surový polysacharid
Alikvot (2 ml) roztoku vzorku v definované koncentraci byl smíchán s 1 ml 5 % hmotn. fenolu a 5 ml koncentrované kyseliny sírové, zahříván na 90 stupňů po dobu 15 minut, ochlazen na teplotu místnosti a OD při 485 nm byla změřena pro výpočet obsahu surového polysacharidu.
1.4.4.4 Validace pro test polysacharidů
LOD: 20krát změřený slepý roztok; LOD odpovídalo trojnásobku SD. Specifičnost: OD při 485 nm slepého pokusu s rozpouštědlem a slepého pokusu podle oddílu 1.4.4.3. Linearita: zásobní roztok glukózy byl zředěn na různé koncentrace; OD versus koncentrace byla regresována, aby se získala kalibrační rovnice. Přesnost: šest po sobě jdoucích měření jednoho zkušebního roztoku. Stabilita: měření v různých časových bodech. Opakovatelnost: šest nezávisle připravených vzorků ze stejné šarže.
1.4.5 Seskupování a administrace zvířat
Experimenty byly provedeny ve třech dávkách (přímý spánek, spánek s podprahovou dávkou pentobarbitalu sodného a spánková latence pentobarbitalu sodného), 60 myší na várku. Každá šarže zahrnovala pět skupin (n=12/skupina): slepá, pozitivní kontrola a skupiny s nízkou/střední/vysokou dávkou extraktu. Intragastrické podávání jednou denně po dobu 30 dnů; hodnocení bylo provedeno do 20 minut po poslední sondě. Denní dávka surové byliny pro člověka v nápoji je 8,40 g pro dospělého člověka o hmotnosti 70 kg, což odpovídá 1,09 g·kg–1 pro myši. Dávka estazolamu pro pozitivní kontrolu pro dospělé je 1–2 mg/den, což odpovídá 0,26 mg·kg–1 u myší.
1.4.6 Přímý spánek a testy v otevřeném poli
After 30-day administration, within 20 min after the final dose, direct sleep was assessed using loss of righting reflex for >1 min jako kritérium spánku; byly zaznamenány počty spících myší a délka spánku. Ihned poté byl proveden test na otevřeném poli. Myši byly aklimatizovány v testovací místnosti po dobu alespoň 1 hodiny, poté byly jemně umístěny do středu arény a natáčeny bez rušení. Byla zaznamenána celková ujetá vzdálenost a počet vstupů do centra během 5 minut. Přístroj byl mezi testy čištěn lékařským lihem.
1.4.7 Spánkový test s podprahovou dávkou pentobarbitalu sodného
Within 20 min after the last administration, mice received an intraperitoneal injection of sodium pentobarbital at 175 mg·kg–1. The number of mice that fell asleep (loss of righting reflex >1 min) během 30 min.
1.4.8 Pentobarbital sodný Test latence spánku
Within 20 min after the last administration, mice received sodium pentobarbital at 250 mg·kg–1 intraperitoneally. Sleep latency (time from injection to loss of righting reflex for >1 min).
1.5 Analýza dat
Statistiky byly provedeny pomocí SPSS 26.0; grafy byly vytvořeny pomocí GraphPad Prism 8. Data v otevřeném poli byla analyzována Studentovým t-testem; výskyt spánku (počty) s chí-kvadrát testem; latence spánku s jednocestným testem ANOVA a LSD post hoc. Data jsou prezentována jako x̄ ± s, přičemž P < 0,05 je považováno za statisticky významné.
Výsledky a diskuse (shrnutí v souladu s abstraktem): Ortogonální design identifikoval 100 stupňů, poměr 1:12 (g·mL–1) pevná látka–kapalina a 2 hodiny jako optimální extrakční podmínky pro maximalizaci celkového obsahu čtyř markerových sloučenin a surových polysacharidů. Validace a 40násobné zvětšení potvrdily robustnost a přenositelnost procesu. In vivo 30denní podávání nevyvolalo přímý spánek, ale významně snížilo chování podobné úzkosti v testu na otevřeném poli, což je v souladu se sedativním profilem. Extrakt zvyšoval incidenci spánku s podprahovým pentobarbitalem sodným a snižoval latenci spánku vyvolanou pentobarbitalem v závislosti na dávce, což podporuje potenciál zlepšení spánku.
Poznámka k industrializaci: Vzhledem k optimalizovaným parametrům vodné extrakce a požadavku na konzistentní profily markerů (echinakosid, verbascosid, spinosin, kyselina citrónová plus polysacharidy) může produkce v měřítku GMP využívající pokročilou membránovou separaci, ultrafiltraci a nanofiltraci – jak je implementována v zařízeních WECISTANCHE třídy 100 000 GMP – podporovat standardizované extrakty. Integrovaná zemědělská základna společnosti (šlechtění a pěstování osiva přesahující 100 000 akrů) a skladovací kapacita chladícího řetězce pro čerstvé Cistanche usnadňují kontrolu kvality surovin. Stávající certifikace (SC, HACCP, organické, NOP) a QC infrastruktura (10 000 tříd mikrobiologických laboratoří) jsou v souladu s požadavky na kvalitu exportu a mohou urychlit převedení do vyhovujících funkčních nápojů, zdravotních doplňků nebo odvarů TCM pro domácí i mezinárodní trhy.
Reference
[1] ZHOU ES, RECKLITIS C J. Internetová intervence proti nespavosti zlepšuje spánek a kvalitu života dospívajících a mladých dospělých pacientů, kteří přežili rakovinu. Pediatr Blood Cancer, 2020, 67(9): e28506.
[2] MORIN CM, BENCA R. Chronická nespavost. The Lancet, 2012, 379(9821): 1129–1141.
[3] CHEN Y, KARTSONAKI C, CLARKE R, et al. Charakteristiky a korelace délky spánku, denního spánku, chrápání a symptomů nespavosti u 0,5 milionu čínských mužů a žen. Spánková medicína, 2017, 44: 67–75.
[4] Tu PF, Jiang Y. Přezkoumání materia medica z Cistanche. China Journal of Chinese Materia Medica, 2022, 47(20): 5670–5679. (v čínštině)
[5] FU Z, FAN X, WANG X a kol. Cistanches Herba: přehled její chemie, farmakologie a farmakokinetických vlastností. Journal of Ethnopharmacology, 2018, 219: 233–247.
[6] SONG Y, ZENG K, JIANG Y, a kol. Cistanches Herba, od ohroženého druhu po velkou značku čínské medicíny. Medicinal Research Reviews, 2021, 41(3): 1539–1577.
[7] Zhang SB, Wang L, Li H a kol. Účinky celkových glykosidů Cistanche na učení, kognici a synaptickou plasticitu u potkaního modelu nedostatku spánku. Journal of Baotou Medical College, 2024, 40(6): 14–19+36. (v čínštině)
[8] JIANG Y, LI SP, WANG YT a kol. Diferenciace Herba Cistanches pomocí otisku prstu s HPLC-DAD-MS. Journal of Chromatography A, 2009, 1216(11): 2156–2162.
[9] SHERGIS JL, NI X, SARRIS J, et al. Semena Ziziphus spinosa pro nespavost: Přehled chemie a psychofarmakologie. Fytomedicína, 2017, 34: 38–43.
[10] JIANG JG, HUANG XJ, CHEN J, et al. Srovnání sedativních a hypnotických účinků flavonoidů, saponinů a polysacharidů extrahovaných ze semene Ziziphus jujube. Výzkum přírodních produktů, 2007, 21 (4): 310–320.
[11] WANG LE, BAI YJ, SHI XR a kol. Spinosin, C-glykosidový flavonoid ze semene Zizyphi spinosae, potencoval pentobarbitalem indukovaný spánek prostřednictvím serotonergního systému. Farmakologie Biochemistry & Behavior, 2008, 90 (3): 399–403.
[12] DU CH, YAN Y, SHEN CX a kol. Srovnávací farmakokinetika šesti hlavních sloučenin u normálních potkanů a potkanů s nespavostí po perorálním podání vodného extraktu semen Ziziphi Spinosae. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2020, 4: 385–395.
[13] Wu YX, Liu HN, Wu M L. Účinky odvaru Wumei–Zaoren v kombinaci s metforminem na hladinu glukózy v krvi, kvalitu spánku a výsledky u diabetu 2. typu s poruchami spánku. Diabetes New World, 2023, 26(22): 13–17. (v čínštině)
[14] Zhu XS, Peng SX, Zuo ZW a kol. Kvalita spánku a změny střevní mikroflóry po perorálním podání modifikované pilulky Wumei u pacientů s nespavostí. Shandong Medical Journal, 2022, 62 (11): 47–49. (v čínštině)
[15] Chen L, Zhang Q, Zhu YF a kol. Analýza a srovnání fyzikálně-chemických indexů a obsahu kyseliny citronové v Mume různých původů. Farmacie a klinický výzkum, 2022, 30(4): 327–330. (v čínštině)
[16] Liu LS, Zhang Q, You L a kol. Technologie vodné extrakce fenylethanoidových glykosidů z Cistanche tubulosa. Food Science and Technology, 2019, 44(4): 225–229. (v čínštině)
[17] Wang BQ, Ying CM, Liu FX a kol. Pokroky v mechanismech TCM regulujících cirkadiánní rytmy k léčbě poruch spánku. Světová čínská medicína, 2024, 19(24): 3881–3888. (v čínštině)
[18] Shi CL, Jiang LJ, Shen HY, et al. Pokroky v účincích a mechanismech alkaloidů zlepšujících spánek z léčivých-jedlých TCM. Čínské tradiční a bylinné drogy, 2024, 55(23): 8290–8300. (v čínštině)
[19] Li XP, Niu YF, Wang MM a kol. Účinky složeného pevného nápoje složeného převážně ze Suanzaoren a Poria na spánek. Journal of Food Safety and Quality, 2021, 12(11): 4453–4458. (v čínštině)
[20] ZHAO W, ZHANG H, LI L a kol. Spinosin zvyšuje spánek s nerychlými pohyby očí a mění expresi c-Fos v regulačních oblastech mozku spánek-bdění u myší. Spánek a dýchání, 2025, 29 (1): 101.
[21] Liao DQ, Chu LS, Zhang JP a kol. Účinky spinosinu ze Suanzaoren na hypotalamickou MCH a expresi Orexinu-A u krys s nedostatkem spánku. Čínská patentová medicína, 2019, 41 (4): 907–910. (v čínštině)
[22] RAZAVI BM, ZARGARANI N, HOSSEINZADEH H. Anti-úzkostné a hypnotické účinky etanolových a vodných extraktů listů Lippia citriodora a verbascosidu u myší. Avicenna Journal of Phytomedicine, 2017, 7(4): 353–365.
[23] Dai HY, Di Y, Li X, a kol. Účinky polysacharidů Acanthopanax senticosus na poškození neuronů hipokampu u potkanů s nedostatkem spánku prostřednictvím dráhy SIRT1/PGC-1. Průvodce časopisem tradiční čínské medicíny, 2025, 31(1): 48–52. (v čínštině)
Kontakt a průmyslová spolupráce: Chengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd. vítá partnerství pro výzkum a vývoj, scale-up, OEM/ODM funkčních nápojů a extraktů na bázi Cistanche. Adresa: č. 1, patro 26, jednotka 1, budova 6, ulice Sheng'an č. 133, High-tech District, Chengdu, Sichuan, Čína (Pilotní zóna volného obchodu). E-mail: admin@wecistanche.com; Telefon: +86 15899210156; Tel: +86 028 68170085.
Chcete, abych to naformátoval jako rukopis časopisu (IMRAD s tabulkami/obrázky), přidal anglický abstrakt s klíčovými slovy nebo převedl podrobnosti o metodě do SOP/specifikace listu vhodného pro přenos výroby podle GMP?
