Nové deriváty benzochinonu proti stárnutí ze stěny Onosma Bracteatum
May 17, 2022
Prosím kontaktujteoscar.xiao@wecistanche.comPro více informací
Abstraktní:Cílem této studie bylo prozkoumat molekuly proti stárnutí z Onosma bracteatum Wall, tradiční léčivé rostliny používané v unani a ájurvédském systému medicíny. Během izolace řízené biotestem byly z O. bracteatum izolovány dva známé benzochinony, allomicrophyllon(1) a ehretiguinon (2) spolu se třemi novými benzochinony označenými jako ehretichinony BD(3-5). Jejich struktury byly charakterizovány spektroskopickou analýzou prostřednictvím 1D a 2D NMR, MS spektroskopickou analýzou a porovnány se strukturami uvedenými v literatuře.sistanchePotenciál proti stárnutí izolovaných benzochinonů byl hodnocen pomocí testu životnosti kvasinek a výsledky ukázaly, že 1,2,4 a 5 významně prodloužily replikační životnost kvasinek K6001, což ukazuje, že tyto benzochinony získané z O. brakteátu mají schopnost být použit jako potenciální terapeutické činidlo proti nemocem souvisejícím s věkem.
klíčová slova:proti stárnutí; Onosma bracteatum; objasnění struktury; benzochinon; replikační životnost; K6001
1. Úvod
Stárnutí je přirozený proces vyznačující se progresivním zhoršováním fyziologických funkcí a zvyšováním úmrtnosti a je často doprovázen různými lidskými patologiemi, jako jsou kardiovaskulární onemocnění, cukrovka, mrtvice, rakovina a neurodegenerativní onemocnění (Parkinsonova a Alzheimerova choroba)[1]. Pokrok v oblasti veřejného zdraví, vzdělávání a medicíny nejen prodloužil očekávanou délku života, ale také zvýšil věk obyvatel. Podle Světové zdravotnické organizace (WHO) se populace lidí ve věku 60 let do roku 2050 zdvojnásobí [2]. Prodlužující se střední délka života také zvyšuje prevalenci nemocí souvisejících s věkem. Strategie pro objevování anti-aging molekul mají tedy velký význam [3]. Přírodní produkty byly od starověku důležitým zdrojem objevů drog a velké množství současných drog pochází z přírodních zdrojů. V našich předchozích studiích jsme uvedli mnoho přírodních sloučenin s vlastnostmi proti stárnutí pomocí replikačního biologického testu životnosti kvasinek K6001 [-6]. Tento test se často používá, protože kvasinky jsou levné a mají dobrou reprodukovatelnost ve srovnání s jinými stárnoucími modelovými organismy, jako jsou octomilky, myši a háďátka [7-10]. V roce 2004 Jarolim et al. popsali nový biotestovací systém s kvasinkovým kmenem K6001 pro zlepšení testu životnosti 11].Čistota proti stárnutíOnosma bracteatum Wall patří do čeledi Boraginaceae. V systému medicíny Unani je známý jako Gaozaban a na Středním východě jako ostřice. O. bracteatum se běžně používá jako tišící, alternativní, diuretikum, posilovač imunity a spasmolytikum a jako hlavní složka různých ajurvédských přípravků pro léčbu hypertenze, lepry, revmatismu a astmatu [12,13]. Farmakologické studie na O. bracteatum uvedly, že má antibakteriální, analgetické, antioxidační účinky a účinky na hojení ran [14-16]. Kromě toho má inhibiční aktivitu vůči acetylcholinesteráze a NADH oxidáze. Obsahuje také sacharidy, mastné kyseliny, flavonoidy, třísloviny, glykosidy a fenolické složky[12,15]. Cílem této studie bylo získat sloučeniny proti stárnutí z O. bracteatum pomocí replikativní biologické zkoušky životnosti kvasinek K6001.co je cistancheArti-stárnoucí sloučeniny (1, 2, 4 a 5) a neaktivní sloučenina 3 byly purifikovány z O. bracteatum sloupcovou chromatografií a poté charakterizovány spektroskopickou analýzou a porovnány s daty popsanými v dříve publikovaných zprávách (obrázek 1)?
2. Výsledky
2.1. Izolace
Vysušený rostlinný materiál O. bracteatum byl rozemlet na jednotný prášek a extrahován methanolem za získání surového extraktu. Surový extrakt byl poté rozdělen mezi ethylacetát a vodu. Po vyhodnocení biotestu vzorků ethylacetátu a vodné vrstvy byl vzorek aktivní ethylacetátové vrstvy podroben sérii chromatografie na silikagelu a ODS pod vedením systému biologického testu a nakonec byl purifikován pomocí HPLC za získání dvou známých (1 a 2) a tři nové (3-5)deriváty benzochinonu. Struktury známých benzochinonů byly identifikovány jako alomikrofylon (1,0.0043 procent suché hmotnosti)[17,18] a ehretichinon (2,0. 0013 procent)[19], zatímco struktury nových benzochinonů byly objasněny a pojmenovány jako ehretichinon B(3, 0,00023 procenta), ehretichinon C(4,00014 procenta) a ehretichinon D(5,0,00028 procenta)( Obrázek 1) spektroskopickou analýzou, včetně 1D a 2DNMR, HR-ESI-TOF-MS a srovnáním spektroskopických dat s údaji uvedenými v literatuře (viz doplňkové materiály).
Cistanche může proti stárnutí
2.2. Objasnění struktury1
Ehretichinon B (3) byl získán jako červený prášek a jeho molekulový vzorec (C2.H20Os) byl stanoven pomocí HR-ESI-TOF-MS. 'H NMR data (tabulka 1) ukázala přítomnost tří aromatických protonů na OH 6,53, 6,57 a 6,61, což odpovídá 1,2,4-trisubstituovanému benzenu; dva cis olefinické protony při 5y 6,85 a 6,52; dva trans olefinické protony při bH 6,18 a 5H 5,68; tři olefinové protony při H 5,13, 5,31 a 0H 5,64; dva methylenové protony při OH 2,52 a 0H 2,78; jedna oxygenovaná methylenová skupina na bH4,20; jeden methinový proton při bμ 3,83 a jedna methylová skupina při 8H 1,69. Data13C NMR (tabulka 2) ukázala přítomnost 22 uhlíkových signálů. Tyto signály byly připsány dvěma ketonovým skupinám (6c 195,4,193,1), a 1,2,4-trisubstituovanému benzenu (6c114,3,114,9,117,6,127,5,144,9 a 150,0), osmi olefinovým uhlíkům (26,12,218. ,131,9,134,0,138,7, 139,4 a 143,8), jeden okysličený kvartérní uhlík (c 80,6), jeden oxymethylen (6c 62,9), jeden kvartérní uhlík (6c 55,4), jeden methin (6c 39,3), jeden methylen (36,2) a jedna methylová skupina (6c 22,7).cistanche benefíciosSpektra 'H-1H COZY indikovala korelační signály mezi H-5 a H-6; H-7 a H-8; H-5'a H-6'; H-7'a H-8'. Na základě těchto signálů byl získán strukturní fragment 3, jak je znázorněno na obrázku 2. HMBC spektrum ukázalo následující hlavní'H-13C korelaci: H-3 k C-4; H-5 na C-1 a C-3;H-6 na C-1 a C-4;H-7 na C -1, C-3, C-9 a C-3';H-8 až C-11;H-11 až C -8, C-9 a C-10;H-5'na C-3';H-6''na C-2 'a C-4';H-7'na C-1', C-2', C-3'a C-9'; H-8'na C-9'a H-11'na C-9'a C-10', Na základě těchto signálů se struktura fragmentuje byly spojeny, aby se získala rovinná struktura 3, jak je popsáno na obrázku 2.
Cistanche Extract Anti Radiation
Relativní konfigurace 3 byla stanovena pomocí NOESY korelace a vazebných konstant. Vazební konstanta (s 6=10,5 Hz) indikovala cis konfiguraci protonů v poloze 5' a 6', zatímco velká vazebná konstanta (Jzg,=16,5 Hz) a NOESY korelace mezi H{ {7}}'/H-7'(obrázek 3) navrhl trans konfiguraci protonů na 7' a 8' v 3. Ve spektru NOESY korelace mezi H-11/H{{ 14}} potvrdil trans konfiguraci dvojné vazby a H-10/H-7'(obrázek 3) ukázal stejnou orientaci těchto protonů a zjistil, že je totožná s ehretichinonem (2)[ 19]. Kromě stejných korelací NOESY byly 'H NMR a 13C NMR 3 a ehretichinonu (2) v polohách 2', 3' a 7 a blízko těchto poloh identické, což také podporovalo identickou relativní konfiguraci 3 a ehretichinon (2). Při srovnání 3 a ehretichinonu (2) spektroskopická data naznačovala, že methylová skupina na C-11' v ehretichinonu (2) byla nahrazena CH2OH v 3. Zbývající struktura 3 byla shodná s ehretichinonem ( 2), jak je znázorněno na obrázku 1. Byla tedy určena struktura 3 a pojmenována ehretichinon B (obrázek 1).
Ehretichinon C(4) byl získán jako červený prášek. Molekulární vzorec 4(C22H20Os) byl stanoven pomocí HR-ESI-TOF-MS. Údaje 'H NMR a13C NMR 4 (tabulky 1 a 2) ukázaly, že 4 má mnoho podobností s ehretichinonem (2). Rozdíl mezi sloučeninami byl nahrazení CH3 (6H1,70, bc22,7) in2 CH2OH (6H4,05,6c 65,8) ve 4 v poloze 11, jak je znázorněno na obrázku 1. Rozdíl byl potvrzen korelací HMBC mezi H{ {30}} na C-11 a H-11 na C-8, C-9 a C-10, jak je znázorněno na obrázku 2. Mezitím ostatní korelace 'H-13C a korelace COSY byly totožné s 3. Korelační spektrum NOESY ukázalo, že relativní konfigurace 4 byla podobná konfiguraci ehretichinonu B (3) (obrázek 3). Tak byla určena struktura 4 a pojmenována ehretichinon C (obrázek 1).
Ehretichinon D(5) byl získán jako žlutý prášek. Molekulární vzorec 5(C, H2O) byl stanoven pomocí HR-ESI-TOF-MS. Údaje 'H NMR a 13C NMR údaje (tabulky 1 a 2) byly téměř totožné s údaji pro alomikrofylon (1) [17,18 ]. Srovnání 5 a alomikrofylonu (1) ukázalo, že CH3 (OH 1,16, δc 29,8) v poloze 10' v allomikrofylonu (1) byl nahrazen CH, OH (6H 3,41,6c69,7) v 5, což bylo dále potvrzeno HMBC korelace mezi pozicemi H-8'až C-10'; H-11'na C-10'a H-10' na C-8', jak je znázorněno na obrázku 2. Zbývající-13CHMBCand LH{{36 }} Bylo zjištěno, že korelace H COZY jsou podobné jako u ehretichinonu B (3) a ehretichinonu C (4) (obrázek 2). Bylo zjištěno, že relativní konfigurace 5, měřená spektrem NOESY, je podobná ehretichinonu B (3). Nicméně poloha 9' postranního řetězce, připojená na 2', je chirální centrum a je třeba stanovit metody pro takovou stereochemii a stereochemii polohy 9' je třeba objasnit. Tak byla určena struktura 5 a pojmenována ehretichinon D (obrázek 1). Allomicrophyllon (1) byl získán jako žlutý prášek. Molekulární vzorec 1(C2.H2O5) byl stanoven pomocí HR-ESI-TOF-MS a identifikován porovnáním MS,H NMR a13C NMR dat s literaturou [17,18]. Ehretichinon (2) byl získán jako červený prášek. Molekulární vzorec 2(C2H2Oa) byl stanoven pomocí HR-ESI-TOF-MS a identifikován na základě srovnání MS, 1H NMR a 13C NMR dat s údaji v literatuře [19].
Tento článek je převzat z Molecules 2019, 24, 1428; doi:10.3390/molecules24071428 www.mdpi.com/journal/molecules