Síťová farmakologie a experimentální validace sloučeniny na bázi cistanche při léčbě benigní hyperplazie prostaty prostřednictvím modulace dráhy PI3K/AKT
Jun 17, 2025
Abstraktní
Objektivní:
Chcete-li prozkoumatpreventivní a léčebné účinky směsných granulí na bázi Cistanchenabenigní hyperplazie prostaty (BPH)a objasnit základní mechanismy prostřednictvímpředpovědi síťové farmakologiev kombinaci sin vivo pokusy na zvířatech.
Bylinné pilulky na bázi cistanche s vysokými aktivními složkami
Přejít na produktový seznam Získejte více podrobností
Metody:
(1) Aktivní složkyzCistanche deserticolaa další podpůrné byliny byly vyšetřeny pomocídatabáze TCMSP, doplněné o dolování literatury. Cíle těchto fytochemikálií byly predikovány pomocíPubChem, Předpověď švýcarského cíleaComparative Toxicogenomics Database (CTD). Byly shromážděny cíle související s BPHGeneCards, CTD, DrugBankaDisGeNET. Identifikována analýza křižovatek125 potenciálních terapeutických cílůof Cistanche při léčbě BPH. Asíť protein-protein interakce (PPI).byla postavena pomocíSTRINGaAnalýzy obohacení dráhy GO a KEGGbyly provedeny prostřednictvímMetascape. Komplexnísíť "bylinná-sloučenina-cíl-cesta".byl vizualizován pomocíCytoscapea klíčové cíle byly ověřeny prostřednictvímmolekulární dokovánípomocíAutoDock Vina.
(2) Šedesát samců potkanů bylo náhodně rozděleno do šesti skupin: kontrola, model, pozitivní kontrola (Qianlie ShutongKapsle, 0,324 g/kg) a tři dávkové skupinySložené granule Cistanche(vysoká: 3,24 g/kg, střední: 1,62 g/kg, nízká: 0,81 g/kg). BPH byl vyvolánkastrace a injekce testosteron propionátu. Krysy dostávaly perorální léčbu denně po dobu 30 dnů. Byla vypočtena vlhká hmotnost prostaty a index. Hladiny v séruCOX-2, VEGFaPGE2byly měřeny pomocí ELISA.Histopatologické změnybyly pozorovány barvením HE aproteinová expresezAKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2aVEGFbyla hodnocena pomocí Western blotu.
Výsledky:
(1) Celkem260 složených cílů, 1 584 BPH související cílea125 překrývajících se terapeutických cílůbyly identifikovány. Zahrnuty klíčové cíleAKT1, TNF, TP53, IL1, EGFR, CASP3aPTGS2. To ukázaly analýzy obohaceníIL-17, HIF-1, TNFaSignální dráhy PI3K-AKThrát kritické role. Základní účinné látky jako napřluteolin, apigenin, jitrocelové glykosidy, mangiferinaisovitexinprokázaly silné vazebné afinity s cíli jakoAKT1, PTGS2, CASP3aIL6, s vazebnými energiemi menšími nebo rovnými –6 kcal/mol.
(2) Výsledky in vivo to ukázalyGranule Cistanche výrazně snížily hmotnost a index prostaty(P < 0,05 nebo P < 0,01), zlepšenožlázová strukturaa zmírnilepiteliální hyperplazie. Hladiny v séruCOX-2, PGE2aVEGFbyly výrazně sníženy. Vyjádřeníp-AKT1, p-PI3K, COX-2aVEGFve tkáni prostaty byl významně downregulován (P < 0,05 nebo P < 0,01).
Závěr:
Tato studie poskytuje předběžný důkazBylinná terapie založená na Cistanchevynakládápreventivní a léčebné účinky proti BPH, především prostřednictvím modulaceSignální dráha PI3K/AKT, inhibiceCOX-2 a PGE2a potlačeníProliferace prostatických buněk zprostředkovaná VEGF. Klíčové bioaktivní složky jakojitrocelové glykosidy, mangiferinaluteolinmohou sloužit jako hlavní farmakologické látky. Tato zjištění podporují potenciálExtrakt z cistanchejako apřírodní lék na zdraví prostaty.
klíčová slova:
Cistanche deserticola; extrakt z cistanche; benigní hyperplazie prostaty (BPH); síťová farmakologie; dráha PI3K/AKT; VEGF; COX-2; PGE2; zánět prostaty; přírodní lék na prostatu; bylinná léčba BPH; tradiční čínská medicína; fytoterapie; molekulární dokování; model krysy
Pozadí
Benigní hyperplazie prostaty (BPH)je častá urologická porucha u mužů středního a vyššího věku. Ve svých raných stádiích je BPH charakterizována frekvencí močení, naléhavostí, váhavostí a neúplným močením. S progresí onemocnění se mohou objevit závažnější příznaky, jako je hematurie, bolestivé močení, kameny v močovém měchýři a dokonce i renální dysfunkce [1–2]. Studie [3] prokázaly, že výskyt BPH se zvyšuje s věkem a postihuje více než 50 % mužů starších 50 let, což významně zhoršuje kvalitu života.
Současná léčba BPH zahrnuje předevšímfarmacie a chirurgické zákroky, což může vést kvedlejší účinky, komplikace a dlouhodobé následky[4–7]. Proto,Tradiční čínská medicína (TCM)formulace, které jsouklinicky účinný s méně vedlejšími účinkyzískaly stále větší pozornost jako alternativní terapie BPH.
Bylinné granule na bázi cistancheprokázaly protizánětlivé, diuretické a tkáňové ochranné účinky při močových stavech. Předchozí studie [9–10] ukázaly, že bylinné receptury jsou založeny především naCistanche deserticolavynaložitochranné účinkyproti BPH na zvířecích modelech. Předběžný výzkum naší skupiny [11] naznačuje, že tento vzorec může snížit zánět prostatyinhibice zánětlivých mediátorůjako napřCOX-2, PGE2, IL-6aTNF-. Odprostatitida je často komorbidní stav, který zhoršuje BPHCílem této studie je zhodnotitmechanismus účinku a terapeutický potenciálz aSměs na bázi cistanchepomocísíťová farmakologie a in vivo validacena krysím modelu BPH.
Podpůrná služba Wecistanche – kontaktujte nás a získejte velkoobchodní cenu
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
1. Materiály a metody
1.1 Pokusná zvířata
Centrum laboratorních zvířat Guangxi Medical University poskytlo celkem 70 samců SD potkanů stupně SPF (180–220 g) (licence: SCXK [Gui] 2020-0003). Zvířecí protokoly byly schváleny Institutional Animal Ethics Committee (číslo schválení: GXBGMP20220602). Potkani byli chováni ve standardních podmínkách s kontrolovanou teplotou (23 ± 2 stupně), vlhkostí (60 ± 5 %) a 12hodinovým cyklem světlo/tma.
1.2 Léky a činidla
Granule směsi Cistanche (zkušební formulace)
Pozitivní kontrola: Kapsle Qianlie Shutong (0,324 g/kg)
Injekce testosteronu propionátu (15 mg/kg)
Soupravy ELISA pro COX-2, PGE2, VEGF
Protilátky: anti-AKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, VEGF, GAPDH
Reagencie Western blot, gely SDS-PAGE a zobrazovací systémy
Všechna činidla byla zakoupena od spolehlivých domácích a mezinárodních dodavatelů
1.3 Vybavení
Analytická váha (přesnost 0,0001 g)
Invertovaný biologický mikroskop (Olympus IX73)
Čtečka mikrodestiček (Tecan M200)
Western blot systém (Bio-Rad)
Zobrazovací stanice (GE Imager 680)
1.4 Predikce cíle pro aktivní sloučeniny Cistanche
Aktivní složky zCistanche deserticolaa další doplňkové byliny byly získány zdatabáze TCMSP, filtrováno podleorální biologická dostupnost (OB větší nebo rovna 30 %)apodobnost s drogou (DL větší nebo rovno 0,18). Zahrnuty byly také v literatuře ověřené bioaktivní sloučeniny nesplňující tyto prahové hodnoty. Předpokládané cíle byly předpovězeny skrzPubChem, SwissTargetPredictionaCTD, využívající filtry pro vysokou absorpci GI a příznivé vlastnosti ADME.
1.5 Identifikace cílů souvisejících s BPH
"BPH" byl prohledán v několika databázích včetněDisGeNET, CTD, GeneCardsaDrugBankshromažďovat cíle související s nemocí. Pouze cíle se skóre relevance nad mediánem byly zachovány a duplikáty byly odstraněny, aby se získal vysoce spolehlivý cílový soubor BPH.
1.6 Průsečíková analýza pro potenciální terapeutické cíle
Tím, že se protneCistanche složené cílese známýmGeny související s BPH, identifikovali jsme potenciálanti-BPH terapeutické cíle, vizualizované přesVennovy diagramypomocí softwaru R.
1.7 Konstrukce sítě interakce protein-protein (PPI).
Potenciální cíle byly nahrány doSTRING v11.5databáze pro vybudování sítě PPI. Vizualizace a topologická analýza (stupeň centrality) byla provedena pomocíCytoscape 3.9.1.
1.8 Analýza obohacení GO a KEGG
Analýzy obohacení proGenová ontologie (GO)funkce aKEGG cestybyly provedeny pomocíMetascape, s významem stanoveným naP < 0,01.
1.9 Konstrukce sítě „Bylinná sloučenina-cílová cesta“.
Klíčové dráhy relevantní pro BPH byly vybrány z výsledků obohacení KEGG. Avícevrstvá síťpropojení bylin, aktivních sloučenin, cílů a cest bylo zkonstruováno v Cytoscape a klíčové uzly byly analyzovány pomocíAnalyzátor sítěplugin.
1.10 Ověření molekulárního dokování
Šest hlavních cílových proteinů (PTGS2, AR, CASP3, IL6, PTGS1, AKT1) a špičkové sloučeniny (luteolin, apigenin, isovitexin, mangiferin, jitrocelové glykosidy) byli vybráni promolekulární dokování. Proteinové krystalové struktury byly staženy zProteinová databanka RCSB(https://www.rcsb.org) a dokování bylo provedeno pomocíAutoDock Vina. Vazebné energie byly vizualizovány a analyzovány pomocíPyMOL.
1.11 Zvířecí model a seskupování
Po 7 dnech aklimatizace bylo 60 samců potkanů náhodně rozděleno do 6 skupin (n=10): kontrola, model, pozitivní kontrola a nízká, střední a vysoká dávkaCistanche složené skupiny(0,81, 1,62, 3,24 g/kg). BPH byla indukována přesorchiektomienásledujeinjekce testosteron propionátu(15 mg/kg) po dobu 28 dnů. Podávání léčiva začalo 29. den a pokračovalo po dobu 30 dnů.
1.12 Odběr vzorků
Po konečné léčbě byly krysy anestetizovány a krev byla odebrána z břišní aorty. Prostaty byly vypreparovány, zváženy aindex prostaty (mg/g)byla vypočtena. Vzorky byly skladovány při -80 stupních pro analýzu.
1.13 ELISA pro sérové zánětlivé markery
Hladiny v séruCOX-2, PGE2aVEGFbyly stanoveny pomocí souprav ELISA podle pokynů výrobce.
1.14 Histologická analýza (H&E barvení)
Prostatické tkáně byly fixovány, zality parafínem, nařezány a obarvenyhematoxylin a eosin (H&E). Patologické změny byly pozorovány pod světelným mikroskopem.
1.15 Western blotting
Hladiny exprese proteinůAKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2aVEGFbyly analyzovány podleWestern blot. Intenzita pásu byla kvantifikována pomocíImageJ, sGAPDHjako vnitřní kontrola.
1.16 Statistická analýza
Data byla analyzována pomocíSPSS 22.0. Výsledky jsou prezentovány jakoprůměr ± SD. Jednosměrná ANOVA aLSD-t testbyly použity pro skupinové srovnání, sP < 0,05považovány za statisticky významné.
