Dlouhodobá deplece B buněk souvisí s regenerací funkce ledvin

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Susanne V. Fleig a kol

Abstraktní

Pozadí:Chronickýledvinachoroba(CKD) je běžný stav, který zvyšuje mortalitu a riziko kardiovaskulárních a jiných chorob bez ohledu na základní onemocnění ledvin. Chronický zánět podporuje renální fibrózu. Nedávno byly popsány renální B buněčné infiltráty u chronického onemocnění ledvin různých etiologií mimo autoimunitu.

Metody:Zde jsme zkoumali B buňky a indikátory tvorby terciární lymfoidní struktury v lidských renálních biopsiích. Renální funkce byla studována při dlouhodobé depleci B buněk u lidských pacientů s membranózní nefropatií a s CKD neznámého původu.

Výsledek:Cytokinové profily tvorby terciární lymfoidní struktury byly detekovány v lidském renálním intersticiu v rozmezíledvinanemocí. U lidské membranózní nefropatie byly evidentní komplexní struktury B-buněk konzistentní s tvorbou terciárních lymfoidních orgánů. Zde hustota B buněk významně nesouvisela se závažností proteinurie, ale s horší vylučovací renální funkcí. Odpovědi na proteinurii se většinou objevily během prvních 6 měsíců po vyčerpání B buněk. Naproti tomu obnova vylučováníledvinafunkcebyl pozorován až po 18 měsících nepřetržité terapie, což je v souladu se strukturálním procesem. Renální terciární lymfatické struktury byly také detekovány v nepřítomnosti autoimunitníchledvinachoroba. Abychom začali řešit, zda deplece B buněk může ovlivnit CKD v širší populaci, hodnotili jsmeledvinazábavacu neurologických pacientů s CKD (Chronickýledvinachoroba)neznámého původu. V této kohortě se eGFR významně zvýšil během 24 měsíců po depleci B buněk.

Závěr:Dlouhodobá deplece B buněk spojená s významným zlepšením vylučováníledvinafunkceu lidského CKD (Chronickýledvinachoroba). Kinetika a mechanismy agregace renálních B lymfocytů by měly být dále zkoumány, aby se stratifikoval dopad B lymfocytů a jejich agregátů jako terapeutických cílů.

KLÍČOVÁ SLOVA:rakovina, migrace buněk, játra/hepatocyty

Cistanche se může zlepšitfunkce ledvin

1 | ÚVOD

B buňky mohou přímo infiltrovat nelymfoidní orgány včetně ledvin. Přetrvávající zánět může indukovat organizované struktury, které obsahují T buňky a lymfatické cévy a odpovídají definici terciárních lymfoidních struktur (TLS).1,2 TLS se podobá složení a architektuře buněk lymfatických uzlin, ale jsou omezeny hostitelským orgánem a vytlačují orgánový parenchym. B-buňky jsou rekrutovány lokálním stromatem exprimovaným chemokinem CXCL13 (alternativní název: B buněčný atraktant 1).1–3 Ty zase vylučují lymfotoxiny včetně lymfotoxinu B(LTB),4 které podporují diferenciaci perivaskulárního stromatu směrem k lymfoidní tkáni, fibroblastickým retikulárním buňkám a folikulárním dendritickým buňkám buňky,5,6 a tím konsolidovat novou lymfoidní strukturu.7

V ledvinách byla TLS hlášena u řady autoimunitních onemocnění, včetně ANCA-asociované glomerulonefritidy, renálního systémového lupus erythematodes, membránové glomerulopatie a IgAnefritidy.8–12 Komplexní infiltrace B buněk se také vyskytovaly při aloimunitě, konkrétně rejekce transplantátu ledviny, a to jak u lidí, tak u myší. .13–16 V nedávné době byly renální TLS popsány v nepřítomnosti analloimunitního stimulu, například během dlouhodobého sledování myšího ischemicko-reperfuzního poškození1,16 a u těžké lidské pyelonefritidy.17

Terapeutická deplece B buněk je klinicky úspěšná v řadě protilátkami zprostředkovanýchledvinanemocívčetně rejekce renálního aloštěpu a glomerulární fritidy. Například u membranózní nefropatie, společné příčiny nefrotického syndromu, dosahuje vyčerpání B buněk rituximabem podobných remisí jako předchozí protokoly, jako je Ponticelliho režim a inhibitory kalcineurinu.18–20 Současné důkazy zahrnují několik kontrolovaných studií21,22 a řadu série případů. V současné době je za hlavní mechanismus účinku považována deplece autoorálních protilátek, a tím zrušení downstreamové imunitní aktivace a destrukce tkáně. Deplece B lymfocytů rituximabem také rozpouštěla ​​difúzní infiltráty B lymfocytů v aloštěpech lidské ledviny,14 zatímco krátkodobá deplece B lymfocytů byla zjevně neúčinná pro rozpuštění TLS, i když u velmi omezeného počtu pacientů.23 Naproti tomu TLS zmizela u myšího modelu SLE po dlouhodobém B terapie vyčerpávající buňky.24

Je možné, že difúzní infiltráty B buněk a TLS mohou narušit funkci orgánů i při absenci imunity zprostředkované protilátkami. Pokud se renální TLS tvoří inchronickyledvinachoroba(CKD) různé etiologie, by dlouhodobá deplece B buněk měla být přínosná i pro pacienty bez diagnózy renálního onemocnění zprostředkovaného protilátkami. Zde jsme studovali infiltraci B lymfocytů a markery tvorby TLS u lidské glomerulonefritidy a hodnotili vývojledvinafunkcepři dlouhodobé depleci B buněk u membranózní glomerulonefritidy a CKD neznámého původu.

2|MATERIÁLY A METODY

2,1|Studijní populace

Analýza dat byla provedena po schválení etickou radou (MHH 2018-8172 a 2019-8275) v souladu s Helsinskou deklarací. Na oddělení nefrologie byli pacienti s histologickou diagnózou membránové glomerulopatie identifikováni z elektronické evidence pomocí hospitalizačních účtovacích kódů „membranózní glomerulonefritida“ a „nefrotický syndrom z membránové nefropatie“ 2015–2019 a z evidence odborných nefrologických ambulancí. Nedostatek delšího sledování mezi respondenty byl způsoben nedávným zahájením léčby (n=6), ztrátou sledování (n=3), nedostatkem údajů o sledování za 18. měsíc (s dobrými odpověď ve 24. měsíci, n=1) a zahájení hemodialýzy (n=1). Alespoň jedno měření B buněk bylo provedeno u každého pacienta po depleci B buněk a ty byly negativní. Záznamy neurologického oddělení hannoverské lékařské fakulty byly vyšetřeny u pacientů léčených od roku 2012 s deplecí B buněk rituximabem po dobu 24 měsíců nebo déle. Pacienti s nálezy renální biopsie svědčícími pro vaskulitidu byli vyloučeni (n=2). Z 65 identifikovaných pacientů mělo 13 na začátku terapie odhadovanou rychlost glomerulární filtrace (eGFR) 70 ml/min/1,73 m2 nebo méně a byli zahrnuti do této analýzy.

Laboratorní hodnoty získané na Hannover MedicalSchool byly zaznamenávány před zahájením rituximabu a v indikovaných intervalech poté. eGFR byla vypočtena pomocí ChronicledvinyChorobaVzorec Epidemiology Collaboration (CKD‐EPI),25 proteinurie byly měřeny analýzou proužkem v neurologické kohortě a jako poměr protein/kreatinin ve vzorcích skvrnové moči u nefrologických pacientů.

Cistanche se může zlepšitfunkce ledvin

2,2|Analýza dat genového pole

Exprese tubulointersticiálního LTB a CXCL13 byla analyzována ve veřejných souborech dat z evropské kohorty cDNAbank, sítě pro studium nefrotického syndromu a konsorcia pro klinický výzkum vaskulitidy26 získaných v NCBI (GSE104948 a GSE104954).

2,3|Imunobarvení, konfokalalýza a kvantifikace B-buněčného infiltrátu u membranózní glomerulopatie

U všech dostupných biopsií a nefrektomického vzorku od pacienta s oxalózou bylo imunologické barvení 3 µm odvoskovaných a rehydratovaných parafínových řezů biopsie ledviny zalité pomocí anti-CD20 (1:50;klon L26; Agilent) prováděno po dobu 90 minut po teplem indukovaném získání epitopu s T-ethylendiamintetraoctovým pufrem (pH 9,0, Zytomed Systems), endogenní peroxidázovou aktivitou (3 procenta H2O2) a blokováním proteinů (Zytomed). Negativní kontroly s vynecháním primárních protilátek byly zahrnuty do všech protokolů barvení. K detekci byl použit polymerní systém křenové peroxidázy ZytoChem Plus (myš/králík; Zytomed) před 3,3ʹ‐diaminobenzidin chromogenem (Zytomed) a kontrastním barvením hemalem. Sklíčka Brightfield obarvená na CD20 byla naskenována při 40násobném původním zvětšení (Aperio CS2, LeicaMicrosystems). Imunobarvená oblast byla kvantifikována přístupem na bázi apixelů s interaktivně nastaveným prahem pomocí platformy pro analýzu obrazu s otevřeným zdrojovým kódem (QuPath, verze 0.1.2, https://qupath.github.io/).27 Stejný práh byl použit pro všechny sekce. Každý řez byl kontrolován pro stanovení kvality, prahu a správnosti anotace dvěma patology zaslepenými pro barvení, diagnózu a případ. Artefakty (např. tkáňové záhyby, chromogenní nepravidelnosti) byly z analýzy vyloučeny. Skupiny byly rozděleny podle hustot B buněk nad a pod mediánem na začátku terapie.

Vybrané vzorky byly obarveny pro konfokální zobrazování pomocí sekundární kozí antimyší-AF488 (Invitrogen) a Cy3-konjugované anti-SMA (1A3, Sigma). Bylo aplikováno nukleární kontrastní barvivo 4,6‐diamidino‐2‐fenylindol (DAPI, Invitrogen) a sklíčka byla upevněna v montážním médiu Immunoselectantifading (Dianova). Snímky byly získány pomocí konfokálního laserového mikroskopu Leica TCS SP8 a 20× multi-imerzního objektivu (Leica). Analýza byla provedena pomocí NIH ImageJ a GIMP (verze 2.8)

2,4|Statistika

Statistická analýza byla provedena pomocí Prism 8. Data jsou vyjádřena jako průměr ± SEM. Test na Gaussovu distribuci byl proveden pomocí D'Agostinova a Pearsonova testu. Dvě proměnné byly porovnány pomocí t‐testů nebo Kruskal–Wallistest pro nenormálně rozložené vzorky. Vícenásobná srovnání byla provedena pomocí jednocestné ANOVA s Dunnovým nebo Dunnettovým vícenásobným srovnávacím testem, jak je uvedeno. Multivariabilní regrese byla provedena pomocí SAS 9.4 (SAS Institute). hodnoty p menší než 0,05 byly považovány za významné, hodnoty p jsou označeny následovně:*p < 0,05,="" **p="">< 0,01,="" ***p=""><>

3|VÝSLEDEK

3,1|B buněčné infiltráty a mediátory organizace lymfoidní tkáně u onemocnění lidských ledvin

Imunobarvení na B buněčný marker CD20 a strukturní marker SMA bylo hodnoceno v biopsiích lidských ledvin s membránovou nefropatií (obrázek 1A). Po potvrzení dřívějších nálezů infiltrátů B buněk9,10 navíc odhalil organizované struktury, které odpovídají definici TLS.

Pro řešení širšího rozsahu renálních onemocnění byly mediátory tvorby TLS CXCL131,8 a lymfotoxin B (LTB)7,9 v renálním intersticiu analyzovány v souborech dat genové exprese ze 195 lidských biopsií (obrázek 1B, C26). Očekávaně se oba zvýšily u vysoce zánětlivých stavů, jako je srpkovitá glomerulonefritida, renální systémový lupus erythematodes a IgA nefropatie ve srovnání se zdravými ledvinami od žijících dárců orgánů. Kromě toho došlo také k významnému nárůstu chronických stavů včetně diabetické nefropatie a membranózní glomerulopatie.

Tato měření jsou v souladu s přítomností terciárních lymfoidních struktur u člověkaledvinachorobajmenovitě membranózní glomerulopatie.

3,2|Infiltráty B buněk u membranózní glomerulopatie jsou spojeny se sníženou funkcí vylučovacích ledvin

Abychom prozkoumali funkční význam infiltrátů B buněk v membránové nefropatii, hodnotili jsme jejich rozsah pomocí digitálně asistované obrazové analýzy (obrázek 2A, B). Pacienti byli rozděleni podle množství infiltrátu B buněk na začátku terapie deplecí B buněk. Proteinurie, hlavní projev membranózní glomerulopatie, se mezi skupinami významně nelišila (obrázek 2C), ani stadium membranózní glomerulopatie (2,1 ± 0,8 vs. 2,5 ± 0,7, p{{10 }} 0,3, Mann–Whitney test). Hojnější infiltráty B buněk v ledvinové tkáni jsou však spojeny s výrazně horším vylučovánímledvinafunkce(Obrázek 2D).

To naznačuje hypotézu, že infiltráty B buněk mohou být funkčně relevantní i mimo indukci proteinurie.

Cistanche se může zlepšitfunkce ledvin

3,3|Účinek dlouhodobé deplece B buněk na membránovou glomerulopatii

Dále jsme studovali funkční důsledky dlouhodobé deplece B-buněk v této kohortě membranózní nefropatie. V našem zařízení terciární péče bylo 35 pacientů s membranózní glomerulopatií léčeno s deplecí B buněk, byli sledováni nejméně 12 měsíců a počáteční hodnota GFR byla vyšší. 15 ml/min/1,73 m2 a byly zahrnuty do této analýzy. Podobně jako v předchozích zprávách 80 procent snížilo proteinurii o více než 25 procent během 12 měsíců po prvním podání rituximabu a byli klasifikováni jako respondéři podle definice studie MENTOR21 (tabulka 1). Pokles proteinurie u respondérů byl detekovatelný po 6 měsících deplece B buněk (obrázek 3A).

Pokud je akumulace B buněk patofyziologicky relevantní, dlouhodobá deplece by měla zlepšit eGFR nad rámec účinků na proteinurii. Vskutku,funkce ledvinkvantifikované pomocí eGFR se zlepšilo, ale dosáhlo významnosti až po 18 měsících (obrázek 3B). Dále jsme se zabývali klinickými faktory, které mohou ovlivnit obnovu funkce ledvin. Vysazení inhibitoru kalcineurinu může zlepšit eGFR a tato léčiva byla předepisována 54 procentům naší kohorty atvarózních časů před podáním rituximabu. Tato terapie však významně nesouvisela s obnovením vylučovací funkce ledvin (tabulka 2). Výrazné zpoždění zlepšení eGFR také hovoří proti hemodynamickým účinkům.

Předchozí imunosuprese a věk, jak při diagnóze, tak při první depleci B buněk, negativně souvisely s obnovou ledvin. Zlepšení eGFR významně nepřímo korelovalo s věkem v době diagnózy (obrázek 3C). Věk a předchozí terapie, ale ne doba od diagnózy do deplece B buněk, zůstaly významným faktorem v multivariabilní lineární regresní analýze (tabulka 3).

Tyto výsledky ukazují funkční zlepšení s dlouhodobou deplecí B buněk pro membránovou glomerulopatii u lidí.

3,4|Zlepšení funkce ledvin s dlouhodobou deplecí B buněk u CKD neznámého původu

Infiltráty B lymfocytů byly nalezeny u různých stavů ledvin kromě membránové nefropatie. Jako příklad není primárně zprostředkovaný protilátkamiledvina chorobaVe vzorku z nefrektomie od pacienta s oxalózou jsme detekovali velký terciární lymfoidní orgán včetně agerminálního centra (obrázek 4A). Pokud je to funkčně relevantní, jejich odstranění by mělo být přínosem nad rámec dobře definované autoimunitní choroby.

Abychom začali řešit tuto hypotézu, studovali jsme eGFR hospitalizované pacienty, kteří dostávali chronickou depleci B buněk pro neurologické stavy s eGFR 70 ml/min/1,73 m2 nebo méně. Co se týče metod, byli vyloučeni pacienti s formální diagnózou renálního onemocnění, konkrétně glomerulonefritidy. Klinické a laboratorní charakteristiky jsou uvedeny v tabulce 4. eGFR se významně zvýšilo po dvou letech léčby (obrázek 4B). Nárůst je velmi pravděpodobně dokonce podhodnocen kvůli zlepšení neurologických funkcí a svalové hmoty.

Tyto údaje naznačují, že chronická deplece B buněk by mohla mít příznivý účinek na CKD (Chronickýledvinachoroba)nezávislé na konkrétní patologické entitě.

Cistanche se může zlepšitfunkce ledvin

4|DISKUSE

Naše data ukazují zlepšení vledvinafunkces dlouhodobou deplecí B buněk. Vzhledem k tomu, že organizované infiltráty B buněk se vyvíjejí u řady renálních onemocnění různé etiologie, tyto výsledky podporují jejich další zkoumání jako terapeutických cílů mimo autoimunitní onemocnění.

U membranózní glomerulopatie jsme pozorovali zlepšení vylučováníledvinafunkcepo 18 měsících deplece B buněk. To souhlasí s dalšími zprávami.28–31 Zlepšení NoeGFR bylo hlášeno u účastníků studie MENTOR léčených rituximabem.21 Tito pacienti však prodělali poslední depleci B buněk v 6. měsíci studie. Podobné úvahy platí pro studii GEMRI TUX, která uvádí stabilní vylučovací renální funkci po 6 měsících22 a jednorázovou dávku rituximabu podanou ve studii STARMEN.32 To podtrhuje potřebu rozšířeného pozorování terapeutického úspěchu u membránové nefropatie po depleci B buněk. Naše data od pacientů s CKD (Chronickýledvinachoroba)neznámého původu navrhují, že se to může týkat i jiných forem onemocnění ledvin, jak naznačují myší experimentální modely.16 Souhlasí s významnou upregulací exprese genu TLS také u nehumánního RPGN, IgA nefropatie a diabetické nefropatie zjištěné v naší analýze. Lepší pochopení mechanismů tvorby TLS, včetně interakce s krevními cévami a orgánově specifických podnětů1,9,16, je zapotřebí k rozšíření terapeutických přístupů nad rámec deplece B buněk.

Terapeutické režimy u membranózní nefropatie se v posledních letech rychle vyvíjely.20,33 Míra odpovědi proteinurie v naší kohortě terciární péče odpovídá podobným zprávám28,29,34 a byla vyšší než u ostatních, kteří dostávali nižší dávky rituximabu.30,35 Ve shodě s předchozím Ve studiích není žádná klinická charakteristika spojena s proteinurií odpovědí na rituximab. Důležité je, že podobně jako většina36, ale ne všechny zprávy,35 nižší eGFR neovlivnil nepříznivě odpověď na proteinurii, ani na pokročilý věk.37 Naše současná analýza je omezena neúplným měřením PLA2R, které bylo spojeno s odpovědí proteinurie u membranózní glomerulonefritidy.22,35,38 Souběžná medikace včetně kortikosteroidů, které se také podávají s rituximabinfuzemi, mohla ovlivnit odpověď. Vysazení inhibitoru kalcineurinu může akutně zlepšit funkci ledvin, jak bylo popsáno u membranózní nefropatie ve studii MENTOR a dalších.21,31,39 Inhibitory kalcineurinu jsou součástí kombinovaných imunosupresivních přístupů také u těžké membránové nefropatie.31,32 Je známo, že podporují fibrózu ledvin.40,41 Je uklidňující, že nevylučovaly dlouhodobé zotavení ledvin u pacientů z našeho souboru. Souhrnně naše pozorování dále posilují důkazy o účinném snížení proteinurie a nízké míře nežádoucích účinků během deplece B buněk pro primární membránovou glomerulopatii.

Stárnutí nepříznivě ovlivnilo regeneraci ledvin v řadě experimentálních a klinických studií.42–44 Biologicky stárnuté ledviny musí zajistit dostatek buněčných dělení pro funkční regeneraci. Kromě toho bylo u glomerulárních onemocnění včetně membránové glomerulopatie popsáno zesílené stárnutí glomerulů.42,45 I když si nejsme vědomi, že by u membranózní glomerulopatie byla dříve hlášena negativní korelace mezi věkem a regenerací, naše údaje souhlasí s výsledky pacientů s nefrotickým syndromem způsobeným jiné etiologie včetně minimální změněné choroby a fokální a segmentální glomerulosklerózy.46 Zde bylo pozorováno zlepšení eGFR po 1 roce deplece B buněk výhradně u mladších pacientů, zejména dětí. Naše data argumentují věkově závislým faktorem v regeneraci po úspěšné terapii také u membranózní glomerulopatie. Naše kohorta respondentů zahrnovala pacienty ve věku 28–73 let při diagnóze a 33–77 let při první léčbě rituximabem, s prodlevou mezi diagnózou a deplecí B buněk 0–318 měsíců (průměr 77 měsíců). Tyto hodnoty jsou očekávaně silně korelované. Velké věkové rozmezí nám umožnilo začít zkoumat, zda zpoždění v terapii přispělo ke zlepšení zhoršené GFR. Naše údaje nenaznačují škodlivý účinek odložené terapie rituximabem.

Naše studie je také omezena skutečností, že bylo příliš málo pacientů s bioptickým materiálem pro barvení B buněk a dlouhodobé sledování pro kvantitativní souvislost s rozsahem odpovědi eGFR (n=7). Použili jsme počítačově podporovanou kvantifikaci celého preparátu, abychom získali maximální informace o množství B buněk v ledvině. Vzhledem k jejich rozptýlené povaze však ani kompletní bioptické jádro nemusí odrážet celkový rozsah. Pokroky v zobrazování a možná i antigen-specifické kontrastní látky by mohly v budoucnu poskytnout nové přístupy ke kvantifikaci a longitudinálnímu monitorování B buněčných infiltrátů u renálního onemocnění.

Stručně řečeno, naše data navrhují další zdůvodnění pro použití dlouhodobé deplece B buněk vledvinanemocínarušením lokálních struktur s dominancí B lymfocytů. K ověření tohoto přístupu jsou nezbytné rozšířené kontrolované studie včetně sériových histologických vyšetření. Naše výsledky mohou podpořit systematickou analýzu vývoje renálních funkcí v dalších kohortách.

PODĚKOVÁNÍ

Oceňujeme podporu přípravy dat genomického pole základní jednotky MHH a laserové mikroskopie základní jednotky, D. Kijas a E. Christians s imunobarvením. SvV byl podporován Deutsche Forschungsgemeinschaft.

AUTORSKÉ PŘÍSPĚVKY

Susanne V. Fleig, Christoph Schröder, Hermann Haller, Thomas Skripuletz a Sibylle von Vietinghoff navrhli výzkum. Data získali Susanne V. Fleig, Franz Felix Konen, ChristophSchröder, Jessica Schmitz, Stefan Gingele, Jan HinrichBräsen a Svjetlana Lovric. Data analyzovali Franz FelixKonen, Christoph Schröder, BMWS a Sibylle von Vietinghoff. Susanne V. Fleig, Franz FelixKonen, Christoph Schröder a Sibylle von Vietinghoff napsali rukopis s pomocí všech spoluautorů, všichni autoři rukopis přečetli a schválili.

Cistanche se může zlepšitfunkce ledvin

Od: „Dlouhodobá deplece B buněk souvisí s regenerací funkce ledvin“ odSusanne V. Fleig a kol

---Immun Inflamm Dis. 2021;9:1479–1488.

REFERENCE

1. Sato Y, Mii A, Hamazaki Y, a kol. Heterogenní fibroblasty jsou základem věkově závislých terciárních lymfoidních tkání vledvina. JCI Insight. 2016;1:87680.

2. Ruddle NH. Lymfatické cévy a terciární lymfoidní orgány. J Clin Invest. 2014;124:953‐959.

3. Legler DF, Loetscher M, Roos RS, Clark‐Lewis I, Baggiolini M, Moser B. chemokin přitahující B buňky 1, lidský CXC chemokin exprimovaný v lymfoidních tkáních, selektivně přitahuje B lymfocyty prostřednictvím BLR1/CXCR5. J Exp Med. 1998;187:655-660.

4. Dubey LK, Karempudi P, Luther SA, Ludewig B, Harris NL. Interakce mezi fibroblastickými retikulárními buňkami a B buňkami podporují lymfangiogenezi mezenterických lymfatických uzlin. Nat Commun. 2017;8:367.

5. Krautler NJ, Kana V, Kranich J, et al. Folikulární dendritické buňky vznikají z všudypřítomných perivaskulárních prekurzorů. Buňka. 2012; 150:194-206.

6. Kratz A, Campos‐Neto A, Hanson MS, Ruddle NH. Chronický zánět způsobený lymfotoxinem je lymfoidní neogeneze. J Exp Med. 1996;183:1461-1472.

7. Lee Y, Chin RK, Christiansen P, a kol. Nábor a aktivace naivních T buněk v ostrůvcích terciární lymfoidní strukturou závislou na receptoru lymfotoxinu. Imunita. 2006;25:499-509.

8. Segererovy S. B buňky a terciární lymfoidní orgány při zánětu ledvin.ledvinyInt. 2008;73:5‐7.

9. Seleznik G, Seeger H, Bauer J, et al. Receptor lymfotoxinu je potenciálním terapeutickým cílem při zánětu ledvin.ledvinyInt. 2016;89:113‐126.

10. Cohen CD, Calvaresi N, Armelloni S, et al. CD20-pozitivní infiltráty u lidské membranózní glomerulonefritidy. J Nephrol. 2005;18:328-333.

11. Brix SR, Noriega M, Herden EM, et al. Organizace lymfocytárních infiltrátů u ANCA-asociované glomerulonefritidy. Histopatologie. 2018;72:1093-1101.

12. Pei G, Zeng R, Han M, et al. Renální intersticiální infiltrace a neogeneze terciárních lymfoidních orgánů u IgA nefropatie. CJASN. 2014;9:255‐264.

13. Steines L, Poth H, Herrmann M, Schuster A, Banas B, Bergler T. B buněčný aktivační faktor (BAFF) je nezbytný pro vývoj intra-renálních terciárních lymfoidních orgánů při experimentální transplantaci ledvin u potkanů. IJMS. 2020;21:8045.

14. Steinmetz OM, Lange‐Hüsken F, Turner J‐E, et al. Rituximab odstraňuje intrarenální shluky B buněk u pacientů s rejekcí renálního vaskulárního aloštěpu. Transplantace. 2007;84:842-850.

15. Kreimann K, Jang M‐S, Rong S, et al. Ischemicko-reperfuzní poškození spouští uvolnění CXCL13 a nábor B-buněk po alogenníchledvinatransplantace. Front Immunol. 2020;11:1204.

16. Cippà PE, Liu J, Sun B, a kol. Následuje pozdní působení B lymfocytů při opravě dysfunkční tkáněledvinazranění a transplantace. Nat Commun. 2019;10:1157.

17. Sato Y, Boor P, Fukuma S, a kol. Vývojová stadia terciární lymfoidní tkáně odrážejí lokální poranění a zánět v myších a lidských ledvinách. Kidney Int. 2020;98:448-463.

18. Floege J, Barbour SJ, Cattran DC a kol., Účastníci konference. Management a léčba glomerulárních onemocnění (část 1): závěry z aledvinachoroba: Konference kontroverzí zlepšování globálních výsledků (KDIGO). Kidney Int.2019;95:268‐280.

19. Trivin‐Avillach C, Beck LH. Léčba membranózní nefropatie po MENTOR. Clin J Am Soc Nephrol. 2020;15:415‐417.

20. Rojas‐Rivera JE, Carriazo S, Ortiz A. Léčba idiopatické membránové nefropatie u dospělých: KDIGO cyklofosfamid a cyklosporin A jsou mimo, rituximab je novou normou. Clin Kidney J. 2019;12(5):629‐638.

21. Fervenza FC, Appel GB, Barbour SJ a kol. Rituximab nebo cyklosporin v léčbě membranózní nefropatie. N Engl J Med. 2019;381:36‐46.

22. Dahan K, Debiec H, Plaisier E, et al. Rituximab pro těžkou membranózní nefropatii: 6měsíční studie s prodlouženým sledováním. JASN. 2017;28:348‐358.

23. Thaunat O, Patey N, Gautreau C, a kol. Přežití B buněk v intragraftových terciárních lymfoidních orgánech po terapii rituximabem. Transplantace. 2008;85:1648-1653.

24. Chang A, Henderson SG, Brandt D, a kol. Imunitní reakce zprostředkované B buňkami in situ a tubulointersticiální zánět u lidské lupusové nefritidy. J Immunol 2011;186:1849-1860.

25. Inker LA, Schmid CH, Tighiouart H, et al, CKG-EPI Investigators. Odhad rychlosti glomerulární filtrace ze sérového kreatininu a cystatinu C. N Engl J Med. 2012;367:20‐29.

26. Grayson PC, Eddy S, Taroni JN a kol. Metabolické dráhy a imunometabolismus vzácněledvinanemocí. Ann Rheum Dis.2018;77(8):1226‐1233.

27. Bankhead P, Loughrey MB, Fernández JA, et al. QuPath: opensource software pro analýzu obrazu digitální patologie. Sci Rep.2017;7:16878.

28. Ruggenenti P, Cravedi P, Chianca A, et al. Rituximab u idiopatické membránové nefropatie. JASN. 2012;23:1416‐1425.

29. Fervenza FC, Abraham RS, Erickson SB a kol., Mayo NephrologyCollaborative Group. Léčba rituximabem u idiopatické membránové nefropatie: 2letá studie. CJASN. 2010;5:2188-2198.

30. Wang X, Cui Z, Zhang Y-M a kol. Rituximab pro nereagující idiopatickou membránovou nefropatii v čínské kohortě. Transplantace nefrolového číselníku. 2018;33(9):1558‐1563.

31. Waldman M, Beck LH, Braun M, Wilkins K, Balow JE, Austin HA. Membranózní nefropatie: pilotní studie nového režimu kombinujícího cyklosporin a rituximab. Kidney Int Rep. 2016;1:73‐84.

32. Fernández‐Juárez G, Rojas‐Rivera J, van de Logt A‐E a kol. Studie STARMEN ukazuje, že střídavá léčba kortikosteroidy a cyklofosfamidem je u primární membránové nefropatie lepší než sekvenční léčba takrolimem a rituximabem. Kidney Int. 2021;99:986-998.

33. Crickx E, Weill J‐C, Reynaud C‐A, Mahévas M. Anti‐CD20‐zprostředkovaná deplece B‐buněk u autoimunitních onemocnění: úspěchy, neúspěchy a perspektivy do budoucna. Kidney Int. 2020;97:885-893.

34. Fiorentino M, Tondolo F, Bruno F a kol. Léčba rituximabem u idiopatické membránové nefropatie. Clin Kidney J. 2016;9:788‐793.

35. Bagchi S, Subbiah AK, Bhowmik D, et al. Nízkodávková terapie rituximabem u rezistentní idiopatické membranózní nefropatie: zkušenost v jediném centru. Clin Kidney J. 2018;11:337‐341.

36. Keri KC, Blumenthal S, Kulkarni V, Beck L, Chongkrairatanakul T. Primární membránová nefropatie: komplexní přehled a historický pohled.Postgrad Med J. 2019;95(1119):23‐31.

37. Kim Y, Yoon HE, Chung BH a kol. Klinické výsledky a efekty léčby u starších pacientů s idiopatickou membránovou nefropatií. Korejský J Intern Med. 2019;34:1091-1099.

38. Ruggenenti P, Debiec H, Ruggiero B a kol. Titr protilátek proti receptoru fosfolipázy a2 předpovídá post-rituximabový výsledek membranózní nefropatie. J Am Soc Nephrol. 2015;26:2545‐2558.

39. Moroni G, Depetri F, Del Vecchio L, et al. Nízká dávka rituximabu je u pacientů s primární membranózní nefropatií málo účinná. Transplantace nefrolového číselníku. 2016: gfw251.

40. Naesens M, Kuypers DRJ, Sarwal M. Nefrotoxicita inhibitoru kalcineurinu. Clin J Am Soc Nephrol. 2009;4:481-508.

41. Kopp JB, Klotman PE. Buněčné a molekulární mechanismy nefrotoxicity cyklosporinu. J Am Soc Nephrol. 1990;1:162-179.

42. Docherty M‐H, O′Sullivan ED, Bonventre JV, Ferenbach DA. Buněčná senescence v ledvině. JASN. 2019;30:726‐736.

43. Glassock RJ, pravidlo AD. Stárnutí a ledviny: anatomie, fyziologie a důsledky pro definici chronickéledvinachoroba. Nephron. 2016;134(1):25‐29.

44. Schmitt R, Melk A. Molekulární mechanismy stárnutí ledvin. Kidney Int. 2017;92:569‐579.

45. Sis B, Tasanarong A, Khoshjou F, Dadras F, Solez K, Halloran PF. Zrychlená exprese inhibitoru buněčného cyklu spojeného se stárnutím p16INK4A v ledvinách s glomerulárním onemocněním. Kidney Int. 2007;71:218-226.

46. ​​Ruggenenti P, Ruggiero B, Cravedi P a kol. Rituximab u steroid-dependentního nebo často recidivujícího idiopatického nefrotického syndromu. JASN. 2014;25:850‐863.