Extrakty z etanolových listů Lantana Camara vykazují vlastnosti proti stárnutí u Drosophila Melanogaster: Studie míry přežití a délky života
Oct 17, 2022
Prosím kontaktujteoscar.xiao@wecistanche.comPro více informací
Abstraktní
V tomto článku jsme se zaměřili na prozkoumání aktivity etanolového extraktu z listů Lantana camara proti stárnutí u Drosophila melanogaster: přežití a dlouhověkost (délka života). Listy L.camara byly shromážděny a důkladně omyty od částic písku, vysušeny na vzduchu, rozemlety. a extrahují se macerační metodou za použití ethanolu jako rozpouštědla. Byl proveden fytochemický screening.{3} Dvacetosmidenní studie přežití a dlouhověkosti byly provedeny podáváním etanolového extraktu z listů L.camara v dávce 5, 10 a 20 mg/10 g octomilkám 1-3 dnů starým. Každá koncentrace byla čtyřikrát replikována s 50 vrtulemi. Byla také sledována rychlost vzcházení mladých vrtulí z vajíček vrtulí, kterým byly podávány extrakty z listů L.camara. Celkový výtěžek extrakce byl stanoven na 18 procent . Fytochemická analýza odhalila přítomnost alkaloidů, flavonoidů, fenolu, steroidů, srdečních glykosidů a uhlohydrátů.{18}}Hodinové LCso L. camara bylo také stanoveno jako 1135 mg/10 g diety. L.camara významně prodloužena (P<0.05)survival rate="" and="" extended=""><0.05)d.melanogaster life="" span="" compared="" with="" control.l.camara="" significantly="" increased=""><().05) emergence="" rate="" of="" young="" fruit="" flies="" from="" eggs="" laid="" by="" fruit="" flies="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="" leaves="" extracts.="" from="" the="" experimental="" results,it="" can="" be="" concluded="" that="" the="" ethanol="" extract="" of="" l.camara="" leaves="" extended="" the="" life="" span="" of="" d.melanogaster="" at="" these="" concentrations.="" due="" to="" similarities="" of="" conserved="" genes="" between="" humans="" and="" fruit="" flies,="" the="" use="" of="" l.camara="" ethanolic="" leaves="" extract="" at="" these="" concentrations="" is="" safe="" and="" may="" be="" recommended="" as="" herbal="" medicine="" in="">
klíčová slova:survival-rate,life span,168-hour LCso,anti-aging,L.camara
Úvod
Stárnutí je přirozený proces u všech živých věcí, ale jeho rychlost je ovlivněna nebezpečnými faktory životního prostředí, absorpcí a asimilací nebezpečných látek a nemocí [1]. Kůže je tkáň nejvíce postižená stárnutím u lidí; zvrásnění kůže je viditelné při přirozeném stárnutí[1]. Volné radikály jsou jedním z faktorů nástrojů a jejich dostupné náklady a údržba v laboratoři [3].D. melanogaster byl užitečný jako model při studiu stárnutí [1,2]. Studie délky života je životně důležitým měřítkem rychlosti stárnutí u drozofily kvůli rychlému generačnímu času a postmitotickým buňkám, které z tohoto druhu udělaly dobrý model pro výzkum stárnutí [4].
Lantana Camara také označovaná jako „španělská vlajka nebo západoindická Lantana“; a je někdy známý jako "Red Sage."L. Camara je „okrasný plevel“ s aromatickými listy, prange, modrými, červenými, žlutými a jasně červenými květy a tmavě modrými a černými plody (peckoviny)[5]. L. Camara zejména listy se používají jako protinádorové, antibakteriální, antihypertenzní činidlo, tonikum a expektorans, zatímco kořeny jsou známé pro léčbu revmatismu, kožních vyrážek a malárie [5-7]. Infuzní metoda extrakce listů a dalších částí je známá pro své protizánětlivé vlastnosti a přidává se do koupele jako antirevmatikum [6]. Odvar připravený z listů L. camara se většinou používá v bylinářství k hojení ran, léčbě horečky, kašli, chřipce, bolestem žaludku, malárii atd. [8].výhody cistanche salsyBylo také zaznamenáno, že může být použit k léčbě rakoviny, planých neštovic, spalničkového revmatismu a vředů [9]L. Camara také vykazuje následující aktivity, jako jsou antioxidační, antimykotické, antidiabetické, analgetické a protizánětlivé [8].
Existuje jen málo nebo žádné informace o anti-aging aktivitách L.cistanche růst penisuCamara. Tato práce si klade za cíl generovat vědecká data o účincích proti stárnutí této rostliny na modelu D. melanogaster. Zkoumali jsme vliv etanolového extraktu z listů L. camara na míru přežití a délku života ovocných mušek.
Materiály a metody Sběr a extrakce rostlin
Listy L. Camara byly v srpnu 2019 shromážděny z ubikací vyšších zaměstnanců Univerzity v Jos a opláchnuty, aby se odstranil písek a další částice pod tekoucí vodou z vodovodu. Listy byly sušeny na vzduchu při teplotě místnosti po dobu 7 dnů a poté byly rozmělněny na prášek pomocí hmoždíře a tloučku. Asi 110 g práškovaných listů L. Camara bylo extrahováno v ethanolu po dobu 72 hodin metodou macerace a dále zahuštěno do sucha pomocí vodní lázně (50 stupňů), jak popsal Alexander et al.[10]. Procento z celkového výtěžku bylo vypočítané pomocí níže uvedeného vzorce [11].
kde Wo=hmotnost počátečního vysušeného vzorku, Wi=hmotnost samotné nádoby a Wz=hmotnost extraktu a nádoby.
Cistanche může proti stárnutí
Fly Strain D. melanogaster Kmeny Harwich z Africa Center of Excellence byly vyšlechtěny a udržovány na jednoduché stravě připravené za použití 100 g kukuřičné mouky, 20 g pekařského droždí, 12 g agaru, 1 g methylparabenu v 5 ml etanolu a 1700 g ml vody. Teplota v laboratoři byla udržována na konstantní hodnotě 25 stupňů.
168-Hours Akutní toxicita extraktu z ethanolických listů L. Camara
Test akutní toxicity L. camara byl proveden podle metody popsané v Alexander et al. [10]. Od 1 do 3 dnů staré ovocné mušky byly anestetizovány, spočítány a vystaveny dietě 5, 10, 20, 50, 100, 250, 500 a 5 000 mg/10 g ve 2 replikátech, přičemž každá replika měla 30 dospělých much. Ovocné mušky se nechaly aklimatizovat po dobu 24 hodin. Úmrtnost byla hodnocena každých 24 hodin po dobu 7 po sobě jdoucích dnů.
28-studie denního přežití a délky života
Studie přežití a dlouhověkosti byly provedeny podle metody popsané v Abolaji et al. [12].cistanche tubulosa dávkování redditOd 1 do 3 dnů staré ovocné mušky byly anestetizovány na mírných ledových tříštích, spočítány a vystaveny 5, 10 a 20 mg/10 g dietě ve čtyřech provedeních, každá s 50 muškami. Ošetřované mušky byly převedeny do čerstvě připravené koncentrace (strava smíchaná s extraktem) v 3-denních intervalech. Míra úmrtnosti byla hodnocena každých 24 hodin po dobu 28 dnů jako u míry přežití a po celý život jako ve studii dlouhověkosti.
Míra vzniku
Dospělým octomilkám bylo podáváno 5, 10 a 20 mg/10 g stravy L. camara v triplikátech, přičemž každá lahvička obsahovala 50 mušek po dobu 7 dnů. Samci a samice ovocných mušek, po pěti, byli vytříděni, aby se pářili a kladli vajíčka na čerstvě připravenou stravu bez extraktu (listy L.camera) po dobu 24 hodin. Po uplynutí 24 hodin byly dospělé mouchy (rodiče) přeneseny a usmrceny, zatímco lahvičky (obsahující nově nakladená vajíčka) byly udržovány při konstantní teplotě 25 stupňů a pozorováno, zda se objevují mladé mouchy (potomky)[10].
Fytochemický screening L. Camara Ethanolic Leaf Extracts. Kvalitativní fytochemický screening byl proveden za použití standardního postupu popsaného v Software [13]. Etanolový extrakt z listů L. camara byl testován na přítomnost alkaloidů, fenolových kyselin, taninu, flavonoidů, saponinů, sacharidů, srdečních glykosidů, terpenoidů, antrochinonu a steroidů.
Statistická analýza
Data byla vyjádřena a prezentována jako průměr ± SEM (směrodatná chyba průměru), byla provedena jednosměrná analýza rozptylu míry vzcházení následovaná Tureckým posthoc testem. Křivky přežití a LCso byly analyzovány pomocí Log-rank (Mentel-Cox) a nelineární regrese; Dávka-odpověď-X je log (dávka), v tomto pořadí (statistický software Graphpad Prism verze 7.04). Výsledky byly považovány za statisticky významné u P<>
Výsledek
Celkový procentní výtěžek a fytochemikálie ethanolického listového extraktu L. Camara
Počáteční hmotnost materiálů L.camaraleaves byla 110, zatímco hmotnost extraktu po odstranění rozpouštědla (ethanolu) z extrakce byla 20 g. Procentní výtěžek byl vypočítán na 18 % hmotn./hmotn. Výsledek fytochemického screeningu etanolového extraktu z listů L.camara je uveden v tabulce 1.
168-hodin LCso etanolového extraktu z listů L. camara v D. melanogaster
Výsledek ukázal, že L.camara není smrtelná do 1000 mg/10g, ale mezi 100 a 500 mg/g se mortalita stala významnou (P<0.05) compared="" with="" the="" negative="" control.="" the="" mortality="" rate="" 28-day="" survival="" rate="" of="" d.="" melanogaster="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="">
The survival rate of fruit flies administered L. Camara ethanolic leaf extract ranged from 50 to 59%. The highest survival rate was recorded in 10 mg/10 g diet while the lowest survival rate was recorded in the negative control.L. camara increased non-significantly (P>0.05) míra přežití vrtulí při 5, 10 a 20 mg/10 g ve srovnání s negativní kontrolou, jak je znázorněno na obr. 2. Tento výsledek znamená, že L. Etanolové extrakty z listů Camara mohou mít určité ochranné účinky u D. melanogaster.
Dlouhověkost (životnost) podávaných ovocných mušek L. Camara Etanolické extrakty z listů
Délka života ovocných mušek, kterým byly podávány etanolové extrakty z listů L. Camara, výrazně přežila (P<0.05) the="" negatively="" controlled="" flies.l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts-treated="" flies="" lived="" up="" to="" 50days="" with33.5,33.6,and44.5%percentage="" increase="" at="" 5,10,and="" 20="" mg/10="" g="" diet="" respectively="" whereas="" the="" negatively="" controlled="" flies="" lived="" up="" to="" 39="" days="" as="" shown="" in="" fig.3.this="" result="" implies="" that="" l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts="" may="" have="" some="" anti-aging="" properties="" or="" activities="" in="" d.="">
Míra vzcházení mladých much z vajec
D. melanogaster podávaných etanolových listových extraktů L. camara Míra vzcházení mladých ovocných mušek z vajíček dospělých ovocných mušek, kterým byly podávány etanolové listové extrakty L. camara, se pohybovala od 91 do 100 procent. Nejvyšší rychlost vzcházení byla zaznamenána u stravy 20 mg/10 g, zatímco nejnižší rychlost vzcházení byla zaznamenána u negativní kontroly.cistanche แอ ม เว ย์The extracts,at 5,10,and 20mg/10 g diet increased emergence rate non-significantly (P>0.05).
Diskuse
Fenolové sloučeniny jsou sekundární metabolity, které jsou produkovány fenylpropanoidovou metabolizací Penrose fosfátu. Jsou také produkovány v kyselině šikimové rostlin [14]. Fenolové sloučeniny (flavonoidy, kyselina fenolová, taniny, srdeční glykosid, steroidy, saponiny a alkaloidy) vykazují anti-aging, protizánětlivé, antiproliferativní vlastnosti, antioxidační a-glykosidázu a inhibiční aktivitu a-amylázy [{{6 }}]. Bylo popsáno, že srdeční glykosid inhibuje čtyři geny nadměrně exprimovaných buněk rakoviny prostaty, včetně inhibitorů survivinu, inhibitoru apoptózy a transkripčních faktorů [17]. Fenolové sloučeniny jsou vysoce uznávány pro svůj léčebný a preventivní potenciál u některých chorobných stavů; Rakovina, cukrovka, kardiovaskulární onemocnění, obezita, bakterie a plísňové infekce [14-18].kolik cistanche vzítKvalitativní fytochemický screening etanolového extraktu listů L. Camara odhalil přítomnost alkaloidů, kyseliny fenolové, flavonoidů, srdečních glykosidů, sacharidů a steroidů, což souhlasí s [19]. Tyto sloučeniny mohou vést k fenoménu proti stárnutí u Drosophila buď samostatně, nebo v synergii.
D. melanogaster as a model is mostly appreciable in drug screening and toxicity studies due to the conserved genes and biochemical pathways between the species and humans. European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECVAM) has approved this species as an alternative model having met the standard for validation of the alternative model known as 3Rs: Reduction, Refinement, and Replacement of laboratory animal [20]. Our 168-hour also revealed that this plant leaves extract is safe for use since its LCso is 1135 mg/10 g diet in D. melanogaster which agrees with Pour and Sasidharan [21], who reported a high value for LCso of L. Camara in the Artemia salina model and no obvious acute toxicity in adult mice. It has been recorded that plants with a high value of LCso are less or non-toxic while plants with a low value of LCso are considered to be very toxic and shorten or reduce life expectancy [22]. The survival rate result further supported the claim that L. Camara ethanolic leaves extract is safe to use in folk medicine as it increased through the non-significantly (P>0.05) míra přežití ovocných mušek podávaných extrakty. Tento výsledek souhlasí s Pour a Sasidharan [21], kteří uvedli velmi nízkou in vivo toxicitu extraktu z listů L. Camara v modelu Artemia salina.
Vliv L. Camara na stárnutí byl zkoumán pomocí testu dlouhověkosti. Skupina ovocných mušek, kterým byl podáván etanolový extrakt z listů L. Camara, žila významně déle (P < 0.05)="" než="" mušky="" s="" negativní="" kontrolou.="" to="" znamená,="" že="" etanolový="" extrakt="" z="" listů="" l.="" camara="" je="" nejen="" bezpečný="" pro="" použití="" v="" lidovém="" léčitelství,="" ale="" prodlužuje="" přežití="" a="" prodlužuje="" životnost="" tím,="" že="" funguje="" způsobem="" proti="">
The emergence rate revealed that L. Camara ethanolic leaf extracts had no toxic effect on the emergence rate at the concentration tested in D.melanogaster as it increased the emergence rate of young flies with no significance(P>0.05) ve srovnání s negativní kontrolou.
Tento článek je převzat z doi: 10.1093/toxres/tfaa098 Advance Access Datum publikace: 12. ledna 2021 Paper
