Imunogenicita trimerní S-proteinové podjednotkové vakcíny (SCB-2019) s adjuvans SARS-CoV-2 u SARS-CoV-2-naivních a exponovaných jedinců ve fázi 2/3, dvojitě slepá, Randomizovaná studie

abstraktní

Pozadí: Hodnotili jsme imunogenicitu SCB-2019, kandidátní podjednotkové vakcíny obsahující prefuzní trimerní formu SARS-CoV-2 spike (S)-proteinu s adjuvans CpG-1018/alum. Metody: Fáze 2/3, dvojitě zaslepená, randomizovaná studie SPECTRA byla provedena v pěti zemích s účastníky ve věku 18 let, buď SARS-CoV-2-naivními nebo dříve exponovanými. Účastníci byli náhodně rozděleni tak, aby dostali dvě dávky SCB-2019 nebo placeba podané intramuskulárně s odstupem 21 dnů. Ve fázi 2 studie, ve dnech 1, 22 a 36, ​​byly měřeny neutralizační protilátky pomocí pseudovirových a divokých virových neutralizačních testů proti prototypu a variantám SARS-CoV-2 a ACE{{20} } protilátky vázající receptor a protilátky vázající SCB-2019 byly měřeny metodou ELISA. Imunita zprostředkovaná buňkami byla měřena intracelulárním cytokinovým barvením pomocí průtokové cytometrie. Výsledky: Mezi 24. březnem a 13. zářím 2021 bylo zapsáno 1 601 jedinců, kteří dostali alespoň jednu dávku vakcíny. Analýza imunogenicity byla provedena ve fázi 2 podskupiny 691 účastníků, včetně 428 dosud neléčených SARS-CoV (381 vakcín a 47 příjemců placeba) a 263 exponovaných SARS-CoV-2- (235 vakcín a 28 příjemců placeba ). U účastníků bez SARS-CoV{41}}naivních se GMT neutralizačních protilátek proti prototypovému viru zvýšily 2 týdny po druhé dávce (36. den) ve srovnání s výchozí hodnotou (224 oproti 12,7 IU/ml). Míra sérokonverze byla 82,5 %. U účastníků vystavených SARS-CoV-2-jedna dávka SCB-2019 zvýšila GMT neutralizačních protilátek 48{54}}krát (1276,1 IU/ml v den 22) ve srovnání s výchozí hodnotou. Míra sérokonverze byla 92,4 %. Zvýšení bylo marginální po druhé dávce. SCB-2019 také prokázal schopnost křížové neutralizace proti devíti variantám, včetně Omicron, u účastníků vystavených SARS-CoV-2-v den 36. SCB-2019 stimuloval Th1-objektivní buňky zprostředkovaná imunita vůči S-proteinu u naivních i exponovaných účastníků. Vakcína byla dobře snášena a ze studie nevyplynuly žádné bezpečnostní obavy. Závěry: Jedna dávka SCB-2019 byla imunogenní u jedinců exponovaných SARS-CoV{72}}, zatímco k vyvolání imunitní odpovědi u jedinců dosud neléčených SARS-CoV-2- byly zapotřebí dvě dávky. SCB-2019 vyvolal zkříženou neutralizační reakci proti vznikajícím variantám SARS-CoV-2 na hladinách protilátek spojených s klinickou ochranou, což podtrhuje jeho potenciál jako booster.

Výhody doplňku cistanche-jak posílit imunitní systém

1. Úvod

Posouzení účinnosti a imunogenicity vakcín proti COVID{0}} bylo původně zaměřeno na naivní populaci s těžkým akutním respiračním syndromem koronavirem 2 (SARS-CoV-2). Během pandemie se však celková séroprevalence rychle zvýšila v důsledku asymptomatické infekce SARS-CoV{5}} a onemocnění COVID{6}} a také očkování [1]. Proto je vyhodnocení imunogenicity a účinnosti vakcín COVID{8}} jak u jedinců dosud neléčených SARS-CoV, tak u jedinců exponovaných SARS-CoV{12}} zásadní pro pochopení velikosti imunitní odpovědi a rozdílů v křížová neutralizace nově vznikajících variant SARS-CoV-2. Společnost Clover Biopharmaceuticals vyvinula kandidáta na podjednotkovou vakcínu, SCB-2019, pomocí své inovativní technologie Trimer-TagTM [2]. SCB-2019 obsahuje spike (S) glykoprotein SARS-CoV{21}} (kmen Wuhan-Hu-1), v nativní prefuzní trimerní konformaci, s adjuvans agonistou Toll-like receptoru CpG-1018 a kamenec [3]. Účinnost, imunogenicita a bezpečnost vakcíny SCB-2019 byly hodnoceny v globální fázi 2/3 klinické studie (SPECTRA) s více než 30 účastníky000 studie z pěti zemí. U subjektů dosud neléčených SARS-CoV-2-prokázala vakcína 100% účinnost proti těžkému COVID-19 a hospitalizacím spojeným s COVID{37}}, 67% účinnost proti COVID-19 jakékoli závažnosti všechny kmeny a 79% účinnost proti převládající variantě Delta [4]. Protože přibližně polovina účastníků studie byla v minulosti vystavena SARS-CoV-2, studie také hodnotila účinnost, imunogenicitu a bezpečnost SCB-2019 v této populaci [5]. Kromě 83,2% ochrany poskytované předchozí expozicí SARS-CoV-2 měla jedna dávka vakcíny SCB{50}} účinnost 49,9 % proti COVID-19 jakékoli závažnosti, zatímco dvě dávky měly dodatečnou účinnost 64,2 % [5]. Kumulativní účinek očkovaných účastníků s důkazy o předchozí expozici SARS-CoV-2 byl 89,7 % po jedné dávce a 93,8 % po dvou dávkách [5]. Vakcína byla obecně dobře snášena u osob dosud neléčených SARS-CoV{65}}a dříve exponovaných jedinců. Četnost vyžádaných nežádoucích účinků byla podobná ve skupinách s vakcínou a placebem, s výjimkou vyšší míry krátkodobé, mírné až střední bolesti v místě vpichu hlášené ve skupině s vakcínou. Bylo hlášeno několik závažných nebo závažných nežádoucích účinků a nebyly vzneseny žádné obavy týkající se bezpečnosti [4,5]. Zde popisujeme výsledky imunogenicity vakcíny SCB{71}} u jedinců dosud neléčených SARS-CoV{73}} i exponovaných jedinců ze studie SPECTRA, včetně hladin zkříženě neutralizujících protilátek proti vícenásobnému SARS-CoV{{76} }} varianty, které cirkulovaly během a po období studie, stejně jako vakcínou indukovaná buňkami zprostředkovaná imunitní odpověď.

cistanche tubulosa-zlepšuje imunitní systém

2. Materiály a metody

2.1. Studovat design

Clover's SPECTRA je randomizovaná, placebem kontrolovaná studie fáze 2/3 prováděná u účastníků ve věku 12 let v pěti zemích (Belgie, Brazílie, Kolumbie, Filipíny a Jižní Afrika) [4]. Zde uvádíme analýzu dat o imunogenicitě získaných mezi 24. březnem 2021 a 13. zářím 2021 (bod uzamčení dat) u účastníků ve věku 18 let zařazených do fáze 2 části SPECTRA v Belgii, Kolumbii a na Filipínách. Soud byl dvojitě zaslepený; účastníci studie, zaměstnanci studijního centra zapojení do provádění a monitorování studie a laboratorní personál provádějící testování imunogenicity byli zaslepeni. Jedinci způsobilí k účasti v této studii byli zdraví jedinci nebo měli stabilní již existující zdravotní stav, byli ve věku 12 let a byli ochotni splnit požadavky a postupy studie. Úplná kritéria pro zařazení a vyloučení byla popsána dříve [4]. Hlavními vylučovacími kritérii bylo těhotenství; kojení; anamnéza závažné nežádoucí reakce nebo anafylaxe na kteroukoli složku vakcíny; jakýkoli chronický stav nebo terapie, která pravděpodobně ovlivní imunitní reakce; a předchozí obdržení jakékoli vakcíny proti koronaviru. Jedinci s anamnézou infekce SARS-CoV{16}} se mohli zapsat (s výjimkou COVID{18}} potvrzeného RTPCR při screeningu nebo během 14 dnů před zápisem). Primární a sekundární výsledky účinnosti a bezpečnosti studie SPECTRA byly popsány již dříve [4,5]. Imunogenicita SCB-2019 měla být hodnocena v podskupině účastníků fáze 2. Cílem průzkumné imunogenicity bylo posoudit buněčně zprostředkovanou imunitu (CMI) vyvolanou SCB-2019 u podskupiny dospělých účastníků a prozkoumat zkříženou neutralizaci nových vznikajících variant SARS-CoV-2 vzbuzujících obavy (VOC) protilátkami získanými ze dvou dávek očkování SCB-2019. Studie byla provedena na základě Helsinské deklarace, pokynů pro správnou klinickou praxi a místních předpisů. Protokol byl schválen všemi institucionálními kontrolními radami lokality a příslušnými národními orgány. Všichni účastníci poskytli před registrací písemný informovaný souhlas.

2.2. Vakcína

Vakcína SCB{{0}} byla dodána jako 720 lg SCB-2019 (Clover Biopharmaceuticals) v 1 ml (20 dávkách) injekčního roztoku. Adjuvans CpG-1018 (Dynavax Technologies) bylo poskytnuto v 2-ml lahvičce obsahující 12 mg/ml 22-mer fosfothioátového oligodeoxynukleotidu v Tris-pufrovaném fyziologickém roztoku (24 mg na lahvičku) a kamenec byl poskytnut jako lahvička obsahující 10 mg/ml hydroxidu hlinitého (Alhydrogel, Croda Health Care). Všechny složky vakcíny, kromě hydroxidu hlinitého, byly skladovány při 2–8 C a smíchány tak, aby každá dávka vakcíny obsahovala 30 lg SCB- 2019, 1,5 mg CpG-1018 a 0,75 mg kamence. Vakcína nebo placebo (0,9 % chlorid sodný) byly poté podány intramuskulární injekcí (0,5 ml na dávku) do deltového svalu nedominantní paže. Injekční stříkačky s vakcínou byly zakalené, aby se zabránilo odslepení, a podávání vakcíny bylo prováděno nezaslepeným dávkovacím týmem, který nebyl zapojen do žádného hodnocení studie. Všichni dospělí měli dostat dvě dávky vakcíny nebo placeba s odstupem 21 dní (ve dnech 1 a 22) podle randomizace stratifikované podle místa, věkové skupiny (18 až < 65 let věku vs. 65 let), nepřítomnosti/přítomnosti komorbidit spojených s vysokým rizikem těžkého onemocnění COVID-19 a se známou anamnézou onemocnění COVID-19.

cistanche tubulosa-zlepšuje imunitní systém

Kliknutím sem zobrazíte produkty Cistanche Enhance Immunity

【Požádejte o více】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2.3. Hodnocení humorálních imunitních odpovědí

Předchozí expozice viru SARS-CoV-2 byla u všech účastníků hodnocena na začátku (1. den) pomocí soupravy Roche Elecsys anti-SARS CoV-2 S k měření anti-S imunoglobulinů (Ig). Všichni účastníci byli také testováni na protilátky proti nukleokapsidovému (N)-proteinu pomocí soupravy Roche Elecsys anti-SARS-CoV-2 (anti-N test), složky, která není součástí vakcíny SCB-2019. Jedinci s pozitivním výsledkem testu anti-S ELISA nebo anti-N na začátku a jedinci s dokumentovanou anamnézou SARS-CoV-2 byli považováni za vystavené SARS-CoV{17}}. Humorální imunitní reakce vyvolané SCB-2019 u SARS-CoV- 2-naivních a exponovaných subjektů byly porovnány s placebem pomocí čtyř různých testů: SCB-2019-vazebná protilátka ELISA pro analýzu SCB{{22} }specifické protilátky; dva virové neutralizační testy (virus divokého typu a pseudovirus využívající úroveň biologické bezpečnosti 2-úroveň rekombinantní páteře VSV exprimující protein S ze SARS-CoV- 2 a zelený fluorescenční protein) k posouzení neutralizačních protilátek proti prototypu SARS- CoV-2 (Wuhan-Hu-1), stejně jako SARS CoV-2 Alpha (B.1.1.7), Beta (B1.351), Gamma (P.1) varianty Delta (B.1.617), Mu (B.1.621) a Omicron BA.1, BA.2, BA.4 a BA.5 (B.1.1.529); a ACE2-kompetitivní ELISA k analýze sérových ACE2 receptor-vazebných IgG protilátek. Podrobnosti o testech jsou uvedeny v doplňkových materiálech. Geometrické střední titry (GMT) pro virové neutralizační testy s prototypem SARS-CoV-2 a SCB-2019-vazebnou protilátkou ELISA byly vyjádřeny v IU/ml, zatímco GMT pro neutralizační testy proti variantám byly vyjádřeny v 1/ředění. 2.4. Hodnocení buněčně zprostředkovaných imunitních odpovědí CMI byla hodnocena u 150 dospělých účastníků (75 v rameni SCB{61}} a 75 v rameni s placebem) náhodně zařazených na vybraných místech (dvě v Belgii a jedno v Kolumbii), kteří byli schopni shromáždit a zpracovat vzorky mononukleárních buněk periferní krve (PBMC) před odesláním do testovací laboratoře. Plná krev (32 ml) byla odebrána na začátku (den 1) a 14 dní po druhé vakcinaci (den 36). Počet lymfocytů a intracelulární barvení cytokinů (ICS) PBMC byly analyzovány pomocí průtokové cytometrie k vyhodnocení CD4+/CD3+ T buněk exprimujících markery T-helper buněk typu 1 (interferon c [IFNc] , interleukin [IL]-2 a tumor nekrotizující faktor a [TNF a]), T-helper buňky typu 2 (IL-4, IL-5) a T-helper typ 17 buňky (IL-17) po in vitro stimulaci 15-merem (s 11 překrývajícími se aminokyselinami) peptidovými pooly zahrnujícími S1 a S2 podjednotky spike proteinu SARS-CoV-2.

2.5. Posouzení bezpečnosti

Podrobné údaje o reaktogenitě byly uvedeny dříve Bravo et al. [4]. Během celého období studie byly shromažďovány nevyžádané nežádoucí příhody lékařsky doprovázené nežádoucími příhodami, nežádoucí příhody zvláštního zájmu a závažné nežádoucí příhody. Podrobné údaje o bezpečnosti získané od všech dospělých účastníků, kteří dostali alespoň jednu dávku vakcíny SCB-2019 nebo placeba, jsou uváděny samostatně (Husain et al., rukopis v revizi).

2.6. Statistická analýza

Ve fázi 2 části studie SPECTRA bylo plánováno nábor celkem 1600 účastníků. Podskupina imunogenicity měla zahrnovat všech 800 subjektů v rameni SCB-2019 a 100 náhodně vybraných účastníků v rameni s placebem, kteří dostali alespoň jednu dávku studované vakcíny a měli k dispozici vzorky krve 36. den pro posouzení imunogenicity. Z ramene s placebem byla pro testování imunogenicity vybrána pouze podskupina účastníků, protože v této skupině nebylo očekáváno žádné zvýšení titrů protilátek. SARS CoV-2 naivní účastníci, kteří dostali dvě dávky a neměli žádné zásadní odchylky od protokolu, které by mohly ovlivnit imunogenicitu vakcíny, byli zahrnuti do sady Immunogenicity-per-protocol set (PPS). Analýza imunogenicity jedinců exponovaných SARS-CoV{10}} byla provedena na kohortě exponované sady pro úplnou analýzu imunogenity (FAS), která zahrnovala jedince, kteří dostali dvě dávky a byli vystaveni SARS-CoV-2 nebo měli anamnéza COVID-19 před očkováním. Endpointy imunogenicity zahrnovaly GMT, geometrický průměr násobku vzestupu (GMFR po vakcinaci k výchozí hodnotě), podíl účastníků se sérokonverzí a podíl účastníků s titrem protilátek nad spodním limitem kvantifikace (LLoQ). Geometrický průměr byl vypočten jako průměr titrů protilátek poté, co byla data log-transformována, s následným umocněním logaritmického průměru, aby byly výsledky prezentovány na původní stupnici. Dvoustranný 95% interval spolehlivosti (CI) byl získán logaritmickou transformací výsledků protilátek a vypočten na základě t-distribuce. GMFR byla vypočtena jako průměr rozdílu po logaritmicky transformovaných výsledcích (po vakcinaci mínus výchozí hodnota) a umocněním průměru; oboustranný 95% CI pro GMFR byl získán pomocí párové t-distribuce. Sérokonverze byla definována jako čtyřnásobek LLoQ pro séronegativní účastníky na začátku a jako 4-násobné zvýšení titru oproti hodnotě před vakcinací u séropozitivních účastníků. K výpočtu CI pro míru sérokonverze a podíl účastníků s titrem protilátek nad LLoQ byla použita metoda Clopper-Pearson. Chybějící data nebyla přičtena. Statistické analýzy byly provedeny pomocí softwaru SAS verze 9.4 (SAS Institute).

cistanche doplněk výhody-zvyšuje imunitu

3. Výsledky

3.1. Studijní populace

Do fáze 2 části studie SPECTRA bylo vyšetřeno celkem 1660 jedinců, z nichž 1601 bylo zařazeno (obr. 1). Mezi nimi bylo 808 účastníků randomizováno do ramene SCB-2019 a 793 do ramene s placebem. Všichni účastníci dostali alespoň jednu dávku vakcíny. Podskupina imunogenicity zahrnovala 759 účastníků v rameni SCB{8}} a 95 účastníků v rameni s placebem. Z toho 248 účastníků ve větvi s vakcínou a 32 účastníků ve větvi s placebem bylo séropozitivních na SARS-CoV-2. Celkem 143 účastníků ve větvi s vakcínou a 20 účastníků ve větvi s placebem mělo odchylky od protokolu (hlavně chybějící vzorky krve po vakcinaci, odchylky od očkování nebo schéma odběru krve) nebo nahlásili COVID potvrzený RT-PCR-19 před 36. dnem. Analýza SARS-CoV-2-naivních účastníků byla provedena ve skupině Immunogenicity-PPS, která zahrnovala 381 účastníků ve větvi SCB{25}} a 47 účastníků ve větvi s placebem. Analýza účastníků exponovaných SARs-CoV-2- byla provedena ve skupině Immunogenicity-FAS, která zahrnovala 235 účastníků ve větvi SCB{31}} a 28 účastníků ve větvi s placebem. Demografické charakteristiky byly podobné mezi rameny SCB{33}} a placebem v analyzované populaci naivní i exponované populace SARS-CoV-2- (tabulka 1). Více SARS-CoV-2-naivních účastníků byly ženy, ale více účastníků byli muži v placebové větvi kohorty vystavené SARS-CoV-2-. Střední věk účastníků na skupinu se pohyboval mezi 34,9 a 38,5 lety. Skupina naivních SARS-CoV-2- zahrnovala proporcionálně více účastníků z Belgie, kteří se identifikovali jako bílé, než exponovaná kohorta, která zahrnovala převážně účastníky z Filipín. Tento rozdíl byl způsoben vyšším počtem SARS-CoV-2-naivních účastníků rekrutovaných z Belgie než z Filipín [5]. V kohortě exponované SARS-CoV-2-mělo 7,2 % účastníků známou anamnézu COVID{54}} a 99,6 % účastníků bylo na začátku pozitivní na sérostatus SARS-CoV-2 .

Obr. 1. Vývojový diagram účastníka. Vývojový diagram účastníků zařazených do fáze 2 části fáze 2/3 studie SPECTRA. Účastníci zahrnutí do analýzy imunogenicity jsou zvýrazněni šedě. BL - základní linie; Ab - protilátky.

3.2. Humorální imunitní reakce vyvolané SCB-2019

U SARS-CoV-2-naivních účastníků (381 ve větvi SCB-2019 a 47 ve větvi s placebem) bylo po 2 týdnech pozorováno výrazné zvýšení GMT, měřeno testem neutralizace divokého typu viru. po druhé dávce SCB-2019 (36. den) ve srovnání s výchozí hodnotou (224 vs 12,7 IU/ml, v tomto pořadí) (tabulka 2). GMT se mezi výchozím stavem a 36. dnem u příjemců SCB-2019 zvýšil 17.{14}}krát (95 % CI: 15,1–2{{70}}.2). 36. den bylo procento příjemců SCB-2019, kteří sérokonvertovali, 82,5 % (179/217) a 96,8 % (213/220) příjemců SCB-2019 mělo titry nad LLoQ. Nebylo zjištěno žádné zvýšení GMT, míry sérokonverze nebo podílu účastníků s titry nad LLoQ v den 36 nad výchozí hodnotou u příjemců placeba. U účastníků dříve exponovaných SARS-CoV-2- (235 ve větvi SCB- 2019 a 28 ve větvi s placebem) se neutralizační protilátky zvýšily u příjemců SCB-2019 48,3krát 22. den (od 26,4 až 1276,1 IU/ml), 3 týdny po první dávce vakcíny. 36. den, 2 týdny po druhé dávce, GMT dosáhl 1831,4 IU/ml a zvýšil se 69{53}}krát ve srovnání s výchozí hodnotou (95 % CI: 55,9–85,8). Naproti tomu GMT ve dnech 1, 22 a 36 zůstaly v rozmezí od 32,7 do 58,3 IU/ml u příjemců placeba. Kromě toho 92,4 % (95 % CI: 86,0–96,5) účastníků exponovaných SARS-CoV-2- sérokonvertovalo v rameni SCB-2019, ve srovnání s 5,6 % (95 % CI: 0,1–27,3) v rameni s placebem. Většina účastníků exponovaných SARS CoV-2-měla titry nad LLoQ po očkování SCB-2019 (44,1 % v den 1, 97,5 % v den 22 a 100 % v den 36) ve srovnání s 38,9 % ( den 1) a 61,1 % (dny 22 a 36) v rameni s placebem. Podobná kinetika SARS-CoV{101}} specifických neutralizačních protilátek u příjemců SCB{102}} byla odhalena testováním pomocí pseudovirového neutralizačního testu. Kromě neutralizačních protilátek jsme také měřili celkovou vazbu SCB{103}} a protilátky vázající ACE{104}receptor pomocí testu ELISA vazby SCB{105}} a ACE{106}kompetitivní vazby. Výsledky těchto testů byly také v souladu s výsledky neutralizačních testů SARS-CoV{109}} divokého typu (doplňkové výsledky a tabulka S1). Dvě dávky SCB{111}} byly imunogenní u účastníků, kteří dosud nebyli SARS-CoV{113}}a jedna dávka SCB{114}} ukázala významnou imunitní odpověď u účastníků vystavených SARS-CoV{116}} . Zkříženě neutralizující imunitní reakce proti devíti variantám SARS-CoV-2 (Alpha, Beta, Gamma, Delta, Mu a Omicron BA.1, BA.2, BA.4 a BA.5) byly hodnoceny v SARS-CoV{125}}naivní a SARS-CoV-2-exponovaní účastníci po dvou dávkách vakcíny SCB{128}} (obr. 2). Schopnost zkřížené neutralizace SCB{131}} byla prokázána proti variantám Alfa, Beta, Gamma, Delta a Mu u účastníků naivních na SARS-CoV{133}}po druhé dávce vakcíny a ve větší míře u SARS- CoV{135}}exponovaní účastníci. Zatímco 36. den nebyly zjištěny žádné protilátky proti variantám Omicron BA.1 a BA.4 a nízké zkříženě neutralizující protilátky proti variantám Omicron BA.2 a BA.5 u účastníků bez SARS-CoV{142}}, vysoké titry zkříženě neutralizujících protilátek proti všem těmto variantám Omicron bylo zaznamenáno u účastníků exponovaných SARS-CoV-2-2 týdny po druhé dávce vakcíny (MN50 [1/ředění], 208 pro BA.1, 442 pro BA.2, 153 pro BA.4 a 984 pro BA.5). GMT neutralizačních protilátek proti všem variantám Omicron v této kohortě byl srovnatelný s GMT proti původnímu kmeni Wuhan-Hu{159}} pozorovaným u účastníků bez SARS-CoV{161}}naivních 36. den (MN50, 157).

3.3. Imunitní reakce zprostředkované buňkami vyvolané SCB-2019

Imunitní reakce zprostředkované buňkami byly měřeny pomocí ICS u podskupiny SARS-CoV-2-naivních a exponovaných účastníků (obr. 3). Celkově bylo do analýzy CMI zahrnuto 137 subjektů, 70 z ramene SCB-2019 a 67 z ramene s placebem. Zvýšení počtu buněk exprimujících cytokiny typu Th1- (tj. CD4+/CD{11}} T buněk produkujících IFNc, IL-2 nebo TNFa) bylo pozorováno mezi výchozím a 2 týdny po druhé dávce vakcíny (36. den) v CD4+/CD3+ T lymfocytech od SARS-CoV-2-naivních i exponovaných účastníků očkovaných SCB-2019, po stimulaci in vitro pomocí peptidových poolů z podjednotek S1 a S2 spike proteinu SARS-CoV-2. Velikost imunitní odpovědi byla vyšší u osob dříve exponovaných SARS-CoV-2-. Žádné zvýšení Th2 (CD4+/CD3 + T buněk produkujících IL-4 nebo IL-5) nebo Th17 (CD4+/CD{{33} } Byly pozorovány T buňky produkující IL-17) buněčné imunitní odpovědi (data nejsou uvedena), což naznačuje, že Th1-objektivní buňkami zprostředkovaná imunitní odpověď specifická pro SARS-CoV-2S- protein byl indukován po dvoudávkové vakcinaci SCB-2019. U příjemců placeba nemohla být detekována ani Th1 ani Th2 odpověď, jak se očekávalo.

Tabulka 1 Základní charakteristiky SARS-CoV-2-naivní a exponované populace

3.4. Celkový bezpečnostní profil SCB-2019

Podrobné údaje o bezpečnosti získané od všech 30 137 dospělých účastníků, kteří dostali alespoň jednu dávku SCB-2019 (N=15,070) nebo placeba (N=15,067) mezi 24. březnem 2021 a 01. prosince 2021 se vykazují samostatně (Husain et al., rukopis v revizi). SCB{11}} má přijatelný bezpečnostní profil. Celkově byly nevyžádané nežádoucí příhody, lékařsky sledované nežádoucí příhody, nežádoucí příhody zvláštního zájmu a závažné nežádoucí příhody hlášeny s podobnou frekvencí ve větvi s vakcínou a placebem během 6-měsíčního období sledování.

4. Diskuze

Všechny schválené vakcíny COVID{{0}} byly navrženy tak, aby vyvolaly neutralizační imunitní reakce proti spike proteinu SARS-CoV-2 kmene Wuhan a byly původně testovány na SARS-CoV-2-naivních Jednotlivci. Primární populace pro hodnocení ochranné účinnosti všech schválených vakcín proti COVID{5}} byli jedinci bez známek předchozí infekce SARS-CoV-2. Během pandemie však byla značná část jakékoli studované populace přirozeně primována kvůli asymptomatické nebo symptomatické infekci SARS-CoV-2. Systematický přehled a metaanalýza globální séroprevalence protilátek proti SARS-CoV-2 provedená v období od 01. ledna 2020 do 31. prosince 2020 odhadla celosvětovou séroprevalenci v celé populaci na 4,5 % [6]. V dubnu 2021 WHO vyhodnotila séroprevalenci SARS-CoV-2 celkově na 26 %, v rozmezí od 0,3 % v západním Pacifiku WHO do 57 % v zemích s vysokými příjmy v Americe [7]. Na základě nedávných dat amerického CDC se séroprevalence infekcí vyvolaných protilátek proti SARS-CoV-2 zvýšila z 33,5 % (95 % CI: 33,1–34,0) na 57,7 % (95 % CI: 57,1–58,3) u období od prosince 2021 do února 2022 [1]. V naší studii byla přibližně polovina účastníků vystavena SARS-CoV-2 v době zápisu [5]. Tento podíl se mezi zeměmi lišil, od 12,6 % v Belgii po 64,9 % na Filipínách [5]. Posouzení imunitní reakce vyvolané vakcínou a ochrany proti COVID-19 u osob dosud neléčených SARS-CoV{61}}a dříve exponovaných jedinců je nyní zásadní pro pochopení přínosu očkovacích kampaní a optimální strategie přeočkování. Zde uvedené výsledky byly získány ve fázi 2 části klinické studie fáze 2/3 Clover SPECTRA, která byla provedena za účelem vyhodnocení humorálních a buňkami zprostředkovaných imunitních odpovědí indukovaných SCB-2019 u SARS-CoV{{ 68}}naivní a exponovaní účastníci. Při měření pomocí SARS-CoV{70}} neutralizačních testů, SCB-SCB-2019-vazebné ELISA a ACE2-konkurenční ELISA jsme ukázali, že dvě dávky SCB-2019 byly imunogenní v -SARS-CoV-2-naivní účastníci. Navíc u účastníků vystavených SARS-CoV-2-jedna dávka SCB-2019 vyvolá rychlou a významnou imunitní odpověď, což je v souladu s předchozími pozorováními, že jedna dávka SARS-CoV{{82} } vakcína (mRNA nebo adenovirem vektorovaná) vyvolává silnou imunitní odpověď u jedinců dříve infikovaných SARS-CoV-2 [8–10]. Tyto výsledky podporují údaje o účinnosti získané ve studii. Po 2 týdnech po druhé vakcinaci pro všechny hodnocené VOC prokázala SCB-2019 100% účinnost proti těžkému COVID-19, 83,7% účinnost proti středně těžkému až těžkému onemocnění a 67,2% účinnost proti COVID-19 {97}} jakékoli závažnosti u SARS-CoV-2-naivních jedinců [4]. Po jediném očkování byla u účastníků exponovaných SARS-CoV{102}}přírůstková účinnost vakcíny proti všem VOC oproti přirozené infekci 49,9 % a po druhém očkování se zvýšila na 64,2 %. Imunitní odpověď proti nově vznikajícím VOC se zdála být nižší než reakce proti homolognímu prototypu viru Wuhan-Hu{108}}. Přestože jsou titry neutralizačních protilátek indukované SCB{109}} proti variantám Delta (45 IU/ml), Gamma (86 IU/ml) a Mu (37 IU/ml), i když jsou nízké, naivní subjekty byly spojeny s klinickou ochranou proti COVID{113}} jakékoli závažnosti (78,7 %, 91,8 %, respektive 58,6 %) [4]. Goldblatt a kol. použili populační přístup, aby definovali imunologický korelát ochrany pro vakcíny COVID{122}} na základě protilátek IgG proti špičce. Autoři navrhli ochranný práh 60 jednotek vazebných protilátek (BAU)/ml (95 % CI: 35–102), což naznačuje, že relativně nízké hladiny vazebných protilátek by mohly být dostatečné k ochraně před COVID-19 [11]. Prokázali také vysokou korelaci mezi vazebnými a neutralizačními protilátkami a klinickou ochranou proti symptomatické nemoci COVID{130}}. Goldblatt a kol. také hodnotili odpovědi pomocí ELISA u podskupiny naivních příjemců vakcíny SCB{131}} a nalezli srovnatelné koncentrace vazebných protilátek k vakcínám mRNA [12]. Tyto výsledky podporují naše pozorování významné účinnosti proti variantám obav u účastníků naivních SARS-CoV{134}}s relativně nízkými titry zkříženě neutralizujících protilátek, jak bylo měřeno v neutralizačních testech. U jedinců exponovaných SARS-CoV{137}}bylo dvoudávkové primární očkování SCB{139}} spojeno s významným zvýšením titrů protilátek proti všem testovaným VOC včetně Omicron BA.1 BA.2, BA.4 a BA.5. Varianta Omicron BA.1 obsahuje v celém svém genomu více než 59 mutací, přičemž více než 36 z nich se vyskytuje v proteinu S, včetně 15 mutací v oblasti vazby receptoru [13]. BA.1 se pak vyvinul do několika podvariant [14]. Přítomnost těchto mutací v oblastech přístupných protilátkám činí varianty Omicron výrazně odlišné od prototypu viru Wuhan-Hu{152}} a může vysvětlovat nízké titry křížové neutralizace u naivních účastníků SARS-CoV{154}}. Účastníci vystavení SARS-CoV{156}}dosáhli však vyšších křížových neutralizačních titrů proti variantám Omicron po podání dvou dávek SCB-2019 než účastníci, kteří nebyli SARS-CoV{159}}naivní. SCB{160}} tedy vyvolal silnou zkříženou neutralizační reakci proti všem devíti VOC na hladinách protilátek spojených s klinickou ochranou u účastníků s prokázanou předchozí infekcí SARS-CoV-2, což podtrhuje další hodnotu SCB{{ 164}} jako potenciální posilovací vakcína.

Tabulka 2 Neutralizační protilátky indukované SCB-2019.

Obr. 2. Křížová neutralizace nových vznikajících variant SARS-CoV-2 sérem vyvolaným vakcínou SCB-2019. Geometrické střední titry (GMT) zkříženě neutralizujících protilátek proti různým variantám SARS-CoV-2 jsou uvedeny ve vzorcích séra odebraných 1. a 36. den od SARS-CoV-2-naivního (nahoře) a exponovaného (dole) ) účastníci očkovaní SCB-2019, měřeno testem virové mikroneutralizace (VNA).

Neutralizační protilátky mohou bránit vstupu viru do hostitelských buněk a hrají ústřední roli v ochraně před infekcí [15]. Kromě toho byly navrženy virově specifické CD4+ T-buněčné imunitní odpovědi a CD8+ cytotoxické T-buněčné odpovědi ke snížení závažnosti onemocnění [16–22]. SCB-2019 indukoval nejen vysoké titry neutralizačních protilátek, ale také stimuloval Th1-zkreslené imunitní reakce zprostředkované buňkami u jedinců dosud neléčených SARS-CoV{12}} i exponovaných jedinců, což naznačuje, že tento rekombinantní SCB{{ 13}} vakcína, pokud je dodávána s adjuvans CpG-1018/alum, může vyvolat správnou imunitní odpověď B i T buněk na protein S a následně poskytnout ochranu před infekcí SARS-CoV-2. Buněčné imunitní odpovědi Th1 i Th2 byly konzistentní s odpověďmi uvedenými ve studii SCB-2019 fáze 1 a byly v souladu s odpověďmi vyvolanými jinými vakcínami COVID-19 [3,16,23–25]. Tato studie má několik omezení. Vzhledem k dostupnosti povolených vakcín proti COVID{26}} pro populaci s vysokým rizikem závažného onemocnění COVID-19 bylo do této studie zařazeno jen málo starších účastníků. Studovaná populace se skládá převážně z mladých dospělých. Dalším omezením je, že imunogenicita byla analyzována pouze do 14 dnů po druhé dávce vakcíny, a proto nehodnotí dlouhodobou perzistenci reakcí vyvolaných SCB-2019. Předchozí studie fáze 1 však ukázala, že 25–35 % pozorované maximální hodnoty neutralizačních a vazebných protilátek přetrvává po dobu až 6 měsíců po očkování SCB-2019 [26]. Posouzení dlouhodobého přetrvávání reakcí vyvolaných SCB- 2019 by bylo zajímavé, protože doba trvání ochrany poskytované schválenými vakcínami COVID-19 proti onemocnění způsobenému cirkulujícími variantami se zdá být omezená [ 27,28]. Tato studie neposkytuje srovnávací hodnocení imunogenicity SCB-2019 s jinými schválenými vakcínami COVID{43}}. Nedávná studie navíc ukázala, že titry protilátek vyvolané SCB-2019 proti původnímu prototypu Wuhan-Hu-1 a variantám Alpha jsou srovnatelné nebo lepší než titry vyvolané čtyřmi schválenými vakcínami COVID-19 [12].

Obr. 3. Buněčně zprostředkovaná imunita vakcíny SCB-2019. Imunita zprostředkovaná buňkami byla měřena intracelulárním barvením cytokinů a průtokovou cytometrií ve vzorcích séra od podskupiny účastníků očkovaných SCB-2019 (N=70) nebo placebem (N=67). Výsledky jsou geometrickým průměrem (GM) cytokinu exprimovaného v CD4+/CD3+ T buňkách (tj. IFNc+/CD4+/CD3+, IL{{12} }/CD4+/CD3+ a TNF a +/CD4+/CD3+) s 95% intervaly spolehlivosti (označeno černými čarami v horní části pruhů ). Horní panel, GM ve vzorcích odebraných 1. a 36. den od SARS-CoV-2-naivních a exponovaných účastníků očkovaných SCB-2019 nebo placebem. Spodní panel, GM ve vzorcích odebraných ve dnech 1 a 36 u účastníků očkovaných SCB-2019 nebo placebem (bez ohledu na historii expozice SARS-CoV-2), po stimulaci in vitro pomocí peptidových poolů zahrnujících S1 nebo S2 podjednotka spike proteinu SARS-CoV- 2.

5. Závěry

V této studii jsme ukázali, že rekombinantní vakcína s trimerním proteinem S s adjuvans SCB-2019 vyvolává silnou imunitní odpověď u jedinců dosud neléčených SARS-CoV-2- i dříve exponovaných jedinců, což koreluje s účinností vakcíny prokázanou proti SARS -CoV-2 dříve popsané. Jedna dávka SCB- 2019 byla imunogenní u jedinců exponovaných SARS-CoV-2-přirozeně primárně aktivovaným{7}}a u dříve exponovaných jedinců byla získána vyšší humorální imunitní odpověď než u jedinců bez SARS-CoV-2-naivní. SCB-2019 indukoval zkříženě reaktivní neutralizační protilátky proti několika nově vzniklým variantám SARS-CoV-2 a robustní Th1-objektivizovanou buňkami zprostředkovanou imunitní odpověď specifickou pro SARS-CoV{{17} } S protein a v souladu s ostatními vakcínami COVID{18}}.

cistanche tubulosa-zlepšuje imunitní systém

Reference

[1] Clarke KEN, M. JJ, Deng Y, Nycz E, Lee A, Iachan R, et al. Séroprevalence infekcí vyvolaných SARS-CoV-2 protilátek – Spojené státy americké, září 2021–únor 2022. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2022;71:606-8.

[2] Liu H, Su D, Zhang J, Ge S, Li Y, Wang F a kol. Zlepšení farmakokinetického profilu TRAIL prostřednictvím Trimer-Tag Zvyšuje jeho protinádorovou aktivitu in vivo. Sci Rep 2017;7(1):8953.

[3] Richmond P, Hatchuel L, Dong M, Ma B, Hu B, Smolenov I a kol. Bezpečnost a imunogenicita S-Trimeru (SCB-2019), proteinové podjednotkové vakcíny kandidáta na COVID-19 u zdravých dospělých: randomizovaná, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná studie fáze 1. Lancet 2021;397(10275):682–94.

[4] Bravo L, Smolenov I, Han HH, Li P, Hosain R, Rockhold F a kol. Účinnost adjuvované podjednotkové proteinové vakcíny COVID-19, SCB-2019: multicentrická, dvojitě zaslepená, randomizovaná, placebem kontrolovaná studie fáze 2 a 3. Lancet 2022;399(10323):461–72.

[5] Smolenov I, Han HH, Li P, Baccarini C, Verhoeven C, Rockhold F a kol. Vliv předchozí expozice SARS-CoV-2 a očkování S-Trimer (SCB-2019) COVID-19 na riziko reinfekce: randomizovaná, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná, zkušební fáze 2 a 3. Lancet Infect Dis 2022;22(7):990–1001.

[6] Bobrovitz N, Arora RK, Cao C, Boucher E, Liu M, Donnici C a kol. Globální séroprevalence protilátek SARS-CoV-2: Systematický přehled a metaanalýza. PLoS One 2021;16(6):e0252617.

[7] Světová zdravotnická organizace. Skutečný rozsah infekce SARS-CoV-2 prostřednictvím séroprevalenčních studií. 2022; Dostupné z: https://www.who.int/news/ item/03-02-2022-true-extent-of-sars-cov-2-infection-through seroprevalence-studies#::text{{12} }Klíčová%20zjištění%20od%20z%20meta,do%20infekce%20v%20to%20čase.

[8] Havervall S, Marking U, Greilert-Norin N, Ng H, Gordon M, Salomonsson AC, et al. Protilátkové reakce po jedné dávce vakcíny ChAdOx1 nCoV-19 u zdravotnických pracovníků dříve infikovaných SARS-CoV-2. EBioMedicine 2021;70:103523.

[9] Bradley T, Grundberg E, Selvarangan R, LeMaster C, Fraley E, Banerjee D a kol. Protilátkové odpovědi po jedné dávce vakcíny SARS-CoV-2 mRNA. N Engl J Med 2021;384(20):1959–61.

[10] Krammer F, Srivastava K, Alshammary H, Amoako AA, Awawda MH, Beach KF, et al. Protilátkové odpovědi u séropozitivních osob po jedné dávce vakcíny SARS CoV-2 mRNA. N Engl J Med 2021;384(14):1372–4.

[11] Goldblatt D, Fiore-Gartland A, Johnson M, Hunt A, Bengt C, Zavadska D, et al. Směrem k populační hranici ochrany pro vakcíny COVID-19. Vaccine 2022;40(2):306–15.

[12] Ambrosino D, Han HH, Hu B, Liang J, Clemens R, Johnson M a kol. Imunogenicita vakcíny SCB-2019 Coronavirus Disease 2019 ve srovnání se 4 schválenými vakcínami. J Infect Dis 2022;225(2):327–31.

[13] Světová zdravotnická organizace. Klasifikace Omicron (B.1.1.529): SARS-CoV-2 varianta obav. 2021; Dostupné z: https://www.who.int/news/item/ 26-11-2021-classification-of-omicron-(b.1.1.529)-sars-cov-2-varianta-of znepokojení.

[14] Shrestha LB, Foster C, Rawlinson W, Tedla N, Bull RA. Evoluce SARS CoV-2 omikronových variant BA.1 až BA.5: Důsledky pro imunitní únik a přenos. Rev Med Virol 2022:e2381.

[15] Taylor PC, Adams AC, Hufford MM, de la Torre I, Winthrop K, Gottlieb RL. Neutralizační monoklonální protilátky pro léčbu COVID-19. Nat Rev Immunol 2021;21(6):382–93.

[16] Sahin U, Muik A, Vogler I, Derhovanessian E, Kranz LM, Vormehr M, et al. Vakcína BNT162b2 indukuje u lidí neutralizační protilátky a polyspecifické T buňky. Příroda 2021;595(7868):572–7.

[17] Sette A, Crotty S. Adaptivní imunita vůči SARS-CoV-2 a COVID-19. Cell 2021;184(4):861–80.

[18] Ansari A, Arya R, Sachan S, Jha SN, Kalia A, Lall A, et al. Imunitní paměť u mírných pacientů s COVID{1}} a neexponovaných dárců odhaluje přetrvávající reakce T buněk po infekci SARS-CoV-2. Front Immunol 2021;12:636768.

[19] Dan JM, Mateus J, Kato Y, Hastie KM, Yu ED, Faliti CE a kol. Imunologická paměť na SARS-CoV-2 hodnocená po dobu až 8 měsíců po infekci. Science 2021;371(6529).

[20] Guo L, Wang G, Wang Y, Zhang Q, Ren L, Gu X a kol. SARS-CoV-2-specifické protilátky a reakce T-buněk 1 rok po infekci u lidí zotavených z COVID-19: longitudinální kohortová studie. Lanceta. Mikrob 2022;3:348–56.

[21] Moss P. Imunitní odpověď T buněk proti SARS-CoV-2. Nat Immunol 2022;23(2):186–93.

[22] Goldblatt D, Galit A, Crotty SH, Hane S, Plotkin S. Koreláty ochrany proti SARS CoV-2 infekci a nemoci Covid 19. 2022.

[23] Jackson LA, Anderson EJ, Rouphael NG, Roberts PC, Makhene M, Coler RN a kol. Vakcína mRNA proti SARS-CoV-2 - Předběžná zpráva. N Engl J Med 2020;383(20):1920–31.

[24] Keech C, Albert G, Cho I, Robertson A, Reed P, Neal S, et al. Fáze 1–2 studie nanočásticové vakcíny s rekombinantním Spike Protein-2 SARS-CoV. N Engl J Med 2020;383(24):2320–32.

[25] Solforosi L, Kuipers H, Jongeneelen M, Rosendahl Huber SK, van der Lubbe JEM, Dekking L a kol. Imunogenicita a účinnost jedné a dvou dávek Ad26. Vakcína COV2.S COVID u dospělých a starých NHP. J Exp Med 2021;218(7).

[26] Richmond PC, Hatchuel L, Pacciarini F, Hu B, Smolenov I, Li P, Liang P, Han HH, Liang J, Clemens R. Perzistence imunitních reakcí a křížově neutralizační aktivita s variantami obav po 2 dávkách Adjuvovaná vakcína SCB-2019 Coronavirus Disease 2019. J Infect Dis. 2021;224(10):1699–706. https://doi.org/10.1093/infdis/jiab447. PMID: 34480575; PMCID: PMC8499965.

[27] Pegu A, O'Connell SE, Schmidt SD, O'Dell S, Talana CA, Lai L a kol. Trvanlivost mRNA-1273 vakcínou indukovaných protilátek proti SARS-CoV-2 variantám. Science 2021;373(6561):1372–7.

[28] Milne G, Hames T, Scotton C, Gent N, Johnsen A, Anderson RM a kol. Vede infekce nebo očkování proti SARS-CoV-2 k trvalé imunitě? Lancet Respir Med 2021;9(12):1450–66.