Kolik toho víte o chronickém onemocnění ledvin?
Mar 03, 2022
Kontakt: emily.li@wecistanche.com
Hodnocení albuminurie a jejího vztahu k krevnímu tlaku u psů s chronickým onemocněním ledvin
Angela Bacic1, Marcia M. Kogika1, et.al
Klíčová slovaalbuminurie, psí,chronické onemocnění ledvin, ELISA, hypertenze,funkce ledvin
PozadíMikroalbuminurie a hypertenze jsou již dlouho spojovány s chráněnou prognózou u lidských pacientů s řadou onemocnění. Ve veterinární medicíně se pro včasnou detekci používají testy na mikroalbuminuriipoškození ledvin, ale existuje jen málo informací o jeho spojení s vysokým krevním tlakem u psů schronické onemocnění ledvin(CKD). Cíl: Cílem této studie bylo zhodnotit albuminurii a její souvislost s arteriální hypertenzí u psů s CKD.
MetodyPoměr albumin:kreatinin (UAC) v moči, poměr protein:kreatinin (UPC) v moči a systolický krevní tlak byly stanoveny u 39 klinicky zdravých psů a 40 psů s CKD.
VýsledekUAC u psů s CKD (rozsah, {{0}}.002–7,99; medián, {{10}},38) byl statisticky odlišný od kontrolních psů (rozsah, 0.0005–0.01; medián, {{42} }.002). Mikroalbuminurie (UAC 0,03–0,3) a mikroalbuminurie (UAC 4 0,3) byly detekovány u 32,5 procenta a 50 procent psů s CKD. Šedesát procent (24/40) psů s CKD mělo systolický tlak Z180 mmHg; u těchto psů byl poměr UAC (rozmezí 0,006–7,99; medián 1,72) významně vyšší než u psů s CKD a systolickým tlakem 180 mmHg (rozmezí 0,002–4,83; medián 0,10). Z hypertenzních psů s CKD měli psi s UPC 41,0 obvykle makroalbuminurii, psi s UPC 0,5–1,0 měli obvykle mikroalbuminurii a psi s UPC 0,5 obvykle neměli albuminurii.
ZávěryPoměr UAC byl vyšší u hypertoniků než u normotenzních psů s CKD. Testy určené k detekci mikroalbuminurie mohou být užitečné pro hypertenzní psy s CKD a UPC 1.0 k detekci počátku a rozsahu albuminurie. Jakmile je makroalbuminurie zjevná, lze pro stejný účel použít samotný poměr UPC.
Cistanche léčí onemocnění ledvin
Úvod
Proteinurie je považována za nezávislý mediátor progresenemoc ledvin.1,2U potkanů s experimentálně vyvolanou proteinurií au lidí s přirozeně se vyskytující proteinuriíselhání ledvinvelikost proteinurie koreluje s rychlostí progreseselhání ledvin.3,4 V poslední době byla celková mortalita a počet uremických krizí spojeny s proteinurií u psů schronické onemocnění ledvin(CKD).5
Mikroalbuminurie je obecně definována jako subklinická albuminurie, tj. rychlost vylučování albuminu, která je abnormálně zvýšená, ale není detekovatelná standardními laboratorními postupy, jako je rutinní metoda pomocí měrky.6 To znamená, že rychlost vylučování albuminu je nad normální hladinou, ale pod obvyklou hladinou proteinurie. U lidí je mikroalbuminurie již dlouho uznávána jako prediktivní faktor pozdní klinické proteinurie a konečného stádia onemocnění ledvin6stejně jako rozvoj diabetické nefropatie.7Podobně může mikroalbuminurie předcházet proteinurii u psů s dědičnou nefropatií,8u psů infikovaných Dirofilaria immitis,9au měkkosrstých pšeničných teriérů geneticky predisponovaných k rozvoji glomerulárního onemocnění.10
Koexistence hypertenze a proteinurie již byla popsána u psů s hyperadrenokorticismem11–13a diabetes mellitus,14,15ale nebyly publikovány žádné zprávy o spojení systémového krevního tlaku se závažností proteinurie a/nebo albuminurie u psů s CKD. Whittemore a kol16zmínil, že u koček existuje významná souvislost mezi poměrem albumin:kreatinin (UAC) v moči, hypertenzí a azotemií a podobné výsledky by se daly očekávat u psů, ale studie tento závěr nepodpořila.
Je nezbytné nejen diagnostikovat albuminurii a/nebo proteinurii, ale také identifikovat a kontrolovat další faktory, které ji také zhoršují.17–19Systémová hypertenze, pravděpodobně sekundární u psů snemoc ledvin,20může mít za následek glomerulosklerózu, glomerulární atrofii a proliferativní glomerulitidu. Hypertenzní renální arteriolární léze mohou způsobit renální tubulární degeneraci a intersticiální fibrózu.21
Semikvantitativní testy (např. proužky) často podceňují proteinurii, protože psi s CKD mají obvykle zředěné vzorky moči. Na druhé straně poměr UAC vysoce koreluje s koncentrací albuminu v moči měřenou časovaným sběrem moči a koriguje variabilitu diurézy a koncentrace moči.22,23 U lidí je mikroalbuminurie definována jako 30–30}0 mg albuminu/g kreatininu, s poměrem UAC 0,03–0,3 mg/mg.24,25Cílem této studie tedy bylo určit prevalenci a velikost albuminurie u psů s CKD a zjistit, zda je hypertenze spojena se zvýšením vylučování albuminu. K dosažení tohoto cíle byla vyvinuta kvantitativní záchytná ELISA pro kvantifikaci albuminu ve vzorcích moči psů s CKD a pro hodnocení závažnosti albuminurie byl stanoven poměr UAC.
Cistanche ke zlepšenífunkce ledvin
Materiály a metody
Zvířata
Všechny postupy zahrnující použití zvířat byly schváleny Etickou komisí pro péči o zvířata a jejich používání na Fakultě veterinárního lékařství Univerzity Sa˜o Paulo (protokol č. 378/2003). Kontrolní skupinu tvořilo 39 klinicky zdravých normotenzních psů obou pohlaví (23 psů a 16 fen), ve věku 1–5 let a různých plemen. Skupina CKD zahrnovala 40 psů (20 psů a 20 fen), ve věku 2–18 let, a také různých plemen, s klinickou diagnózou CKD kategorizovanou jako stádia 3 nebo 4 podle klasifikace stagingového systému navržené organizací International Renal Interest Společnost.26 Kritéria pro zařazení psů do skupiny CKD byla: anamnéza a komplementární laboratorní nálezy kompatibilní s CKD, včetně neregenerativní anémie, izostenurie a chronické renální azotemie (sérová koncentrace kreatininu Z2,0 mg/dl po dobu 4 2 měsíců u hydratovaných psů), stejně jako žádné předchozí podávání antihypertenziv.
Krevní tlak
Systolický arteriální tlak byl měřen pomocí Dopplerova průtokového detektoru (Doppler Ultrasound Parks Medical Model 811B, Las Vegas, NV, USA). Šířka manžety byla zvolena na 30–40 procent obvodu končetiny v místě umístění. Pro tuto studii byla hypertenze považována za přítomnou, pokud byl průměr z alespoň 5 různých měření provedených za sebouZ180 mmHg.27 Psi byli před zákrokem umístěni a chováni v klidném prostředí u majitele. Stejný lékař provedl měření krevního tlaku u všech psů ve studii.
Analýza moči
Vzorky moči byly asepticky odebrány cystocentézou nebo uretrální katetrizací a podrobeny kompletní analýze moči, včetně mikroskopického hodnocení močového sedimentu. Zvířata, jejichž vzorky moči měly makroskopický důkaz hematurie a/nebo mikroskopický důkaz pyurie a bakteriurie, byla vyloučena. Alikvoty supernatantu moči byly zmraženy a skladovány při –201C po dobu až 1 roku pro následné stanovení poměru UAC.
Purifikace psího albuminu a imunizace králíků
Nejprve byl lyofilizovaný psí albumin (frakce V, #A9263, Sigma, St Louis, MO, USA) dále purifikován afinitní chromatografií na kolonách Blue Sepharose a Q-Sepharose (GE Biotech, Piscataway, NJ, USA). Následně byli 2 králíci imunizováni intramuskulárně s
purifikovaný albumin ve Freundově adjuvans ve čtrnáctidenních intervalech a IgG byl izolován ze séra.28
Elektroforéza a Western blotting purifikovaného psího albuminu
Western blotting byl proveden modifikací dříve popsaného protokolu.29 Stručně, neredukované vzorky moči od zdravého psa a psa s CKD, vzorek séra od zdravého psa a purifikovaný psí albumin byly podrobeny elektroforéze v 11% dodecylsulfát-polyakrylamidových gelech sodných.30Proteiny byly přeneseny na listy nitrocelulózové membrány (velikost pórů {{0}} 0,22 mm, Sigma) při 15 V po dobu 2 hodin za použití polosuchého přenosového blotovacího systému (BioRad, Hercules, CA, USA). Membrány byly opláchnuty promývacím pufrem (10 mM Tris, 150 mM NaCl, 0,1 procenta [obj./obj.] Tween 20, pH 7,5) a poté inkubovány s blokovacím roztokem (5 procent [obj. /v] studená voda rybí kůže želatina [Sigma G7765] rozpuštěná v promývacím pufru) po dobu 18 hodin při 41 °C. Membrány byly inkubovány s protilátkami rozpuštěnými v promývacím pufru obsahujícím 0,5 procenta (objem/objem) rybí želatiny po dobu 2 hodin při teplotě místnosti za míchání. Pro vyhodnocení specificity protilátek proti purifikovanému psímu albuminu byly membrány inkubovány s celkovým králičím IgG anti-psím albuminem. Po promytí byly proužky inkubovány s konjugátem kozí anti-králičí IgG-peroxidáza (Sigma A6154) po dobu 2 hodin při teplotě místnosti za míchání. Všechny protilátky a konjugáty byly zředěny v promývacím pufru obsahujícím 0,5 procenta (v/v) rybí želatiny. Reakce byla vyvinuta tak, jak bylo popsáno dříve.31
ELISA na psí albumin ve vzorcích moči
Pro měření albuminu ve vzorcích moči byly mikrotitrační destičky (Maxisorp-Nunc Immunoplate, Montreal, Kanada) potaženy přes noc při 41 °C roztokem 100 mg/ml králičího IgG proti psímu albuminu rozpuštěného v 0,1 M uhličitanový pufr (pH 9,6) a poté blokován 3% kaseinem rozpuštěným v uhličitanovém pufru. Šestibodové standardní křivky pro albumin byly zkonstruovány za použití purifikovaného psího albuminu, sériově naředěného (na koncentrace 250.0, 83,3, 27,8, 9,3, 3,1 a 1,0 ng/ml) při inkubaci pufr (0,05 procenta Tween 20 a 0,6 procenta rybí želatiny ve fyziologickém roztoku pufrovaném fosfátem, pH 7,4). Vzorky moči byly také vhodně zředěny (1:100, 1:300, 1:500, 1:1000, 1:10,000 a 1:50 000) v inkubačním pufru tak, aby reakce se vyskytují v lineárním rozsahu standardní křivky (1,03–250 ng/ml). Vzorky a standardy byly analyzovány trojmo. Stejná protilátka byla použita jako sekundární protilátka, ale byla konjugována s biotinem29,32 a použita v koncentraci 3,15 ng/ml, rozpuštěná v inkubačním pufru. Destičky byly poté inkubovány se 100 ng/ml konjugátu avidin-peroxidáza (Sigma A3151) a poté s čerstvým činidlem vyvolávajícím barvu, jak je popsáno jinde.33 Koncentrace albuminu v moči pro každý vzorek byla extrapolována ze standardní křivky a výsledky byly korigovány na počáteční ředění vzorku.
Cistanche proledvina
UAC a poměr bílkovin v moči: kreatininu (UPC).
Celková koncentrace bílkovin v moči (mg/dl) byla měřena pomocí testu Coomassie G{{0}}34; každý vzorek byl analyzován trojmo a hodnoty byly získány z 8-bodové standardní křivky (0.025, 0.075, {{16 }}.10, 0,50, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5 a 3,0 mg/ml). Koncentrace kreatininu v moči (mg/dl) byla stanovena pomocí testu kyseliny pikrové35 na automatickém klinickém chemickém analyzátoru (Liasys, AMS, Řím, Itálie) a byla provedena s kontrolami kvality (Precinorm Uplus a Precipath Uplus, Roche Diagnostics, Mannheim, Německo). UAC byla stanovena pomocí koncentrace albuminu (mg/dl) získané pomocí ELISA. Protože všechny analýzy byly uvedeny jako mg/dl, UAC a UPC byly vyjádřeny bez jednotek.
Statistická analýza
Gaussovo rozdělení bylo zkoumáno pomocí Kolmogorovova–Smirnovova testu. Poměry UPC a UAC nebyly normálně rozděleny, proto byl pro srovnání použit Mann-Whitney test. Pro statistickou analýzu byl použit softwarový balík SigmaStat 3.1 (Chicago, IL, USA). Rozdíly s P 0,05 byly považovány za statisticky významné.
Výsledek
Králičí IgG anti-psí albumin byl specifický pro purifikovaný psí albumin na základě Western blottingu (obrázek 1), protože ve všech drahách byl nalezen pouze 1 proteinový pás s relativní molekulovou hmotností podobnou psímu albuminu. Protokol ELISA používaný k měření koncentrace albuminu ve vzorcích moči byl extrémně citlivý, s detekčním limitem přibližně 0,5 ng/ml.
Poměr UPC u klinicky zdravých normotenzních psů (n {{0}}; rozsah, 0.04–0,29; medián, 0 .10) byla výrazně nižší (P o.{26}}{{30}}01) než u psů s CKD (n=40; rozsah, 0,13–25,08 ; medián, 1.{14}}). 65 procent (26/40) psů s CKD mělo UPC 4 1.0, 20 procent (8/40) mělo UPC mezi 0,5 a 1,0 a 15 procent (6/40) mělo UPC o 0,5 (tabulka 1). Většina (38/40, 95 procent) psů s CKD měla UPC poměr Z0,2.
Poměr UAC u klinicky zdravých psů (rozsah, {{0}}.0005–0.01; medián, 0,002) byl také významně nižší (P o,0001) než u psů s CKD (rozsah, 0,002–7,99; medián, 0,38) (obrázek 2). Poměr UAC se pohyboval od 0,03 do 0,3 (mikroalbuminurie) u 32,5 procenta (13/40) psů s CKD a byl 4 0,3 (makroalbuminurie) u 50 procent (20/40) psů s CKD (tabulka 1 ).
Hypertenze byla detekována u 24/40 (60 procent) psů s CKD. Psi s hypertenzí byli ve věku od 2 do 18 let (průměr plus -SD, 9,1 plus - 3,7 let), zatímco normotenzní psi byli ve věku od 2 do 12 let (7,9 plus - 3,3 roku ).
Vezmeme-li v úvahu mikroalbuminurii jako rozsah UAC definovaný pro člověka ({{0}}.03–0,3), byla mikroalbuminurie častěji detekována u normotenzních (7/16, 43,7 procenta) než u hypertoniků (6 /24, 25 procent ) psů s CKD. Makroalbuminurie byla naopak častěji pozorována u hypertoniků (15/24, 62,5 procenta) než u normotenzních (5/16, 31,3 procenta) psů s CKD. Žádná albuminurie nebyla pozorována u 3/24 (12,5 procenta) hypertoniků a u 4/16 (25,0 procenta) normotenzních psů s CKD (tabulka 1).
Poměr UAC u hypertenzních psů s CKD (n {{0}}; rozsah, {{10}}.006–7,99; medián, 1,72 ) byla významně vyšší (P =,0183) než u normotenzních psů s CKD (n=16; rozsah, 0,002–4,83; medián, 0,10) (obrázek 3). Hypertenze byla pozorována u 6/13 (46,1 procenta) mikroalbuminurických psů a u 15/20 (75 procent) makroalbuminurických psů s CKD psy. Nebyl pozorován žádný významný rozdíl (P =,062) v poměru UPC mezi hypertenzí (n=24; rozsah, 0,20–25,08; medián, 3,07) a normotenzí (n=16; rozsah, 0,13–4,70; medián, 1,10) psi s CKD.
Diskuse
Poměry UAC získané u klinicky zdravých psů pomocí naší techniky kvantitativního záchytu ELISA byly podobné jako u zdravých lidí36,37a kočky.38Velikost albuminurie u psů s CKD, jak byla hodnocena UAC, byla statisticky vyšší než u zdravých kontrolních psů. Vezmeme-li v úvahu, že psi s CKD byli klasifikováni jako psi ve stádiu 3 a 4 onemocnění, větší rozsah albuminurie v této skupině by mohl korelovat s rychlostí progrese onemocnění ledvin, jak bylo dříve prokázáno u potkanů a lidí.3,4
Polovina psů s CKD měla koncentrace albuminu v moči v makroalbuminurickém rozsahu, jak by se dalo očekávat, ale 32,5 procent psů s CKD bylo mikroalbuminurických a 17,5 procenta bylo normoalbuminurických. Proto by ve druhé skupině mohlo být použití rutinních metod pro detekci mikroalbuminurie určitým přínosem. Kromě toho by testy pro detekci mikroalbuminurie mohly být použity k monitorování léčby a sledování progrese onemocnění nejen u mikroalbuminurických, ale také u normoalbuminurických psů s CKD. Použití těchto testů u normoalbuminurických psů by mohlo lékařům pomoci rozpoznat časný nástup albuminurie a zavést adekvátní terapeutická opatření, jakmile je detekována; na druhé straně u mikroalbuminurických psů by bylo cílem přidat do léčebného režimu nová léčiva a/nebo zvýšit dávkování současných léčiv, aby se snížila velikost albuminurie, a tedy oddálila její progrese do makroalbuminurie.
The data reported herein that all dogs with CKD and macroalbuminuria also had a UPC>1.0 může naznačovat, že když se makroalbuminurie již projevila, lze hodnoty UPC použít pro účely uvedené výše, protože psi progredovali do zjevné proteinurie; bylo by zbytečné používat tak citlivé testy jako ELISA. Většina psů s CKD s poměrem UPC mezi 0,5 a 1.0 měla mikroalbuminurii a většina psů s UPC< 0.5="" were="" no="" albuminuria.="" these="" findings="" suggest="" that="" upc="" values="" between="" 0.5="" and="" 1.0="" reflect="" the="" presence="" of="" microalbuminuria.="" for="" upc=""><0.5, the="" specific measurement="" of="" albuminuria="" would="" be="" recommended to="" detect="" the="" initial="" development="" of="">
Hypertenze byla diagnostikována u 60 procent psů s CKD, což je nález v souladu s předchozími studiemi.20,39,40Vysoké procento (62,5 procenta) psů s hypertenzí mělo makroalbuminurické CKD. Vysoký systolický arteriální tlak byl přítomen u 46,1 procent psů s mikroalbuminurickým CKD. Protože proteinurie je spojena s větším rizikem rozvoje uremické krize, progrese CKD a úmrtí,5 léčba navržená ke snížení hypertenze by mohla zpomalit progresi selhání ledvin a prodloužit přežití u hypertenzních psů s CKD. Srovnání mezi hodnotami UAC u normotenzních a hypertenzních psů s CKD se ukázalo jako statisticky významné a prokázalo jak pravděpodobný vztah mezi těmito parametry, tak nepříznivé účinky, které by vysoký systolický arteriální tlak mohl mít na rozvoj albuminurie, podobně jako u lidé.41–43
Mohly by být vzneseny otázky týkající se rozdílů v hodnotách UAC mezi hypertenzními a normotenzními psy s CKD v této studii, protože by mohly být přičítány nerovnoměrnému rozdělení zvířat; všichni psi však byli ve stadiu 3 a 4 onemocnění a závažnost anémie a azotémie byla u obou skupin podobná, v souladu s pokročilými stádii onemocnění.
Současný nález mikroalbuminurie a hypertenze obecně vede v humánní medicíně k přijetí specifických terapeutických strategií. Použití inhibitorů angiotenzin-konvertujícího enzymu u lidí s diabetes mellitus 1. typu, hypertenzí a mikroalbuminurií může zmírnit progresivní průběh k masivní proteinurii.44Stejná léčba je přínosná i u mikroalbuminurických normotenzních diabetiků.45,46U hypertenzních potkanů se zbytkemledviny,léčba enalaprilem udržovala systémový krevní tlak na normálních hodnotách a dramaticky omezovala rozvoj proteinurie a glomerulárních lézí.47Naše zjištění naznačují, že testování mikroalbuminurie může být použito jako následný nástroj k hodnocení progrese onemocnění a stanovení terapeutických a preventivních přístupů u psích pacientů, zvláště když se mikroalbuminurie postupně zhoršuje v důsledku hypertenze.
Závěrem lze říci, že poměry UAC u hypertenzních psů s CKD v naší studii byly vyšší než u normotenzních psů, což naznačuje, že vysoký systolický tlak může být spojen se změnami v glomerulární struktuře. Testy určené k detekci mikroalbuminurie mohou být užitečné u hypertenzních psů s CKD a UPC 1.0 k detekci nástupu albuminurie nebo ke sledování dávkování antihypertenziv. Jakmile je makroalbuminurie zjevná, lze pro stejný účel použít samotný poměr UPC.
Cistanche pro zlepšenífunkce ledvin
Poděkování
Podpořeno grantem (#03/10,426-3) od Fundaca˜o de Amparo a` Pesquisa do Estado de Sa˜o Paulo – FAPESP.
Zveřejnění: Autoři uvedli, že nemají žádné přidružení ani finanční zapojení s žádnou organizací nebo subjektem s finančním zájmem nebo ve finanční soutěži s předmětem nebo materiály diskutovanými v tomto dokumentu.
Z: 'Hodnocení albuminurie a jejího vztahu k krevnímu tlaku u psů s chronickým onemocněním ledvinAngela Bacic1, Marcia M. Kogika1, et.al
-----Vet Clin Pathol39/2 (2010) 203–209 c 2010 Americká společnost pro veterinární klinickou patologii DOI:10.1111/j.{2}}X.2009.00207.x
Reference
1. Burton C, Harris KP. Role proteinurie v progresi chronického selhání ledvin. Am J Kidney Dis. 1996;27:765–775.
2. Remuzzi G. Nefropatická povaha proteinurie. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1999;8:655–663.
3. Praga M, Hernandez E, Montoyo C, a kol. Dlouhodobé příznivé účinky inhibice angiotenzin-konvertujícího enzymu u pacientů s nefrotickou proteinurií. Am J Kidney Dis. 1992;20:240–248.
4. Williams PS, Fass G, Bone JM. Renální patologie a proteinurie určují progresi neléčeného mírného/středně těžkého chronického selhání ledvin. QJ Med. 1988;67:343–354.
5. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA, et al. Hodnocení vztahu mezi počáteční proteinurií a mírou morbidity nebo úmrtím psů s přirozeně se vyskytujícím chronickým selháním ledvin. J Am Vet Med Assoc. 2005;226:393–400.
6. Viberti GC, Hill RD, Jarrett RJ a kol. Mikroalbuminurie jako prediktor klinické nefropatie u inzulin-dependentního diabetes mellitus. Lanceta. 1982;1: 1430–1432.
7. Mogensens CE, Christensen CK. Predikce diabetické nefropatie u pacientů závislých na inzulínu. N Engl J Med. 1984;311:89–93.
8. Lees GE, Jensen WA, Simpson DF a kol. Přetrvávající albuminurie předchází nástupu zjevné proteinurie u psů samců s X-vázanou hereditární nefropatií. J Vet Intern Med. 2002;16:353.
9. Grauer GF, Oberhauser EB, Basaraba RJ, et al. Vývoj mikroalbuminurie u psů s dirofilárií. J Vet Intern Med. 2002;16:352.
10. Vaden SL, Jensen WA, Longhofer SL, et al. Longitudinální studie mikroalbuminurie u měkkosrstých pšeničných teriérů. J Vet Intern Med. 2001;15:300.
11. Ortega TM, Feldman EC, Nelson RW a kol. Systémový arteriální krevní tlak a poměr protein/kreatinin v moči u psů s hyperadrenokorticismem. J Am Vet Med Assoc. 1996;209:1724–1729.
12. Cavalcante CZ, Kogika MM, Simo˜es DMN, et al. Mikroalbuminurie u psů s hyperadrenokorticismem a vztahem k krevnímu tlaku. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
13. Cavalcante CZ, Kogika MM, Santoro ML, et al. Hodnocení elektroforézy proteinů v moči a albuminurie u psů s hyperadrenokorticismem a vztah k systémovému arteriálnímu krevnímu tlaku. J Vet Intern Med. 2008;22:798–799.
14. Struble AL, Feldman EC, Nelson RW, et al. Systémová hypertenze a proteinurie u psů s diabetes mellitus. J Am Vet Med Assoc. 1998;213: 822–825.
15. Kogika MM, Cavalcante CZ, Simo˜es DMN, et al. Mikroalbuminurie u psů s diabetes mellitus. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
16. Whittemore JC, Miyoshi Z, Jensen WA, et al. Asociace mikroalbuminurie a poměru albuminu ke kreatininu v moči se systémovým onemocněním u koček. J Am Vet Med Assoc. 2007;230: 1165–1169.
17. Brown SA, Walton CL, Crawford P, Bakris GL. Dlouhodobé účinky antihypertenzních režimů na renální hemodynamiku a proteinurii. Kidney Int. 1993;43:1210–1218.
18. Hnědá SA, Finco DR, Hnědá CA. Hodnocení účinků inhibice angiotenzin-konvertujícího enzymu enalaprilem u psů s indukovanou chronickou renální insuficiencí. Am J Vet Res. 2003;64:321–327.
19. Grauer GF, Greco DS, Getzy DM, et al. Účinky enalaprilu versus placebo jako léčba psí idiopatické glomerulonefritidy. J Vet Intern Med. 2000;14:526–533.
20. Ross LA. Patofyziologie a léčba systémové hypertenze spojené srenální dysfunkce. In: Osborne CA, Finco DR, eds. Nefrologie a urologie psů a koček. Baltimore, MD: Lippincott Williams & Wilkins; 1995:392–399
21. Bartges JW, Willis AM, Polzin DJ. Hypertenze anemoc ledvin. Veterinář Clin North Am Small Anim Pract. 1996;26:1331–1345.
22. Bakker AJ. Detekce mikroalbuminurie. Analýza provozní charakteristiky přijímače upřednostňuje poměr albuminu ke kreatininu před koncentrací albuminu. Péče o diabetes. 1999;22:307–313.
23. Harvey JN, Hood K, Platts JK a kol. Predikce rychlosti vylučování albuminu z poměru albuminu ke kreatininu. Péče o diabetes. 1999;22:1597–1598.
24. Weir GC, Nathan DM, Singer DE. Standardy péče o diabetes. Péče o diabetes. 1994;17:1514–1522.
25. Sabharwal RK, Singh P, Arora MM, Somani BL, Ambade V. Incidence mikroalbuminurie u hypertoniků. Indián J Clin Biochem. 2008;23:71–75.
26. Polzin DJ, Osborne CA, Ross S. Chronické onemocnění ledvin. In: Ettinger SJ, Feldman E, eds. Učebnice veterinární vnitřní medicíny. 6. vyd. Philadelphia, PA: Saunders; 2005:1767–1785.
27. Brown S, Atkins C, Bagley R, a kol. Směrnice pro identifikaci, hodnocení a léčbu systémové hypertenze u psů a koček. J Vet Intern Med. 2007;21:542–558.
28. Mckinney MM, Parkinson A. Jednoduchý, nechromatografický postup k čištění imunoglobulinů ze séra a ascitové tekutiny. J Immunol Methods. 1987;96:271–278.
29. Harlow E, Lane D. Antibodies: A Laboratory Manuál. New York, NY: Cold Spring Harbor Laboratory; 1988: 471–510.
30. Laemli UK. Štěpení strukturních proteinů při sestavování hlavy bakteriofága T4. Příroda. 1970;227:80–685.
31. Pukac LA, Carter JE, Morrisonn KS, et al. Zesílení kolorimetrického signálu diaminobenzidinu při imunoblotu. Biotechnika. 1997;23:385–388.
32. Olovsson M, Larsson A. Biotinové značení kuřecích protilátek a jejich následné použití v ELISA a imunohistochemii. Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 1993;16:145–152.
33. Santoro ML, Barbaro KC, Flores da Rocha TR, et al. Simultánní izolace destičkového faktoru 4 a komplexu glykoproteinu IIb-IIIa z králičích krevních destiček a charakterizace specifických kuřecích protilátek pro jejich testování. J Immunol Methods. 2004;284:55–72.
34. Bradford MM. Rychlá a citlivá metoda pro kvantifikaci mikrogramových množství bílkovin využívající princip vazby protein-barvivo. Anal Biochem. 1976;72:248–254.
35. Lustgarden JA, Wenk RE. Jednoduchá, rychlá, kinetická metoda pro měření sérového kreatininu. Clin Chem. 1972;8:1419–1422.
36. Lima CSP, Bottini PV, Garlipp CR a kol. Přesnost poměru albuminu ke kreatininu v moči jako prediktor albuminurie u dospělých se srpkovitou anémií. J Clin Pathol. 2002;55:973–975.
37. Jefferson SA, Greene MA, Smith RF, a kol. Poměr albuminu a kreatininu v moči - odpověď na cvičení u diabetu. Arch Dis Child. 1985;60:305–310.
38. Syme HM, Markwell PJ, Pfeiffer D, a kol. Přežití koček s přirozeně se vyskytující chronickouselhání ledvinsouvisí se závažností proteinurie. J Vet Intern Med. 2006;20:528–535.
39. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA a kol. Souvislost mezi počátečním systolickým krevním tlakem a rizikem rozvoje uremické krize nebo úhynu u psů s chronickým selháním ledvin. J Am Vet Med Assoc. 2003;222: 322–329.
40. Cowgil L, Kallet A. Systémová hypertenze. In: Kirk R, ed. Současná veterinární terapie IX. Philadelphia, PA: WB Saunders; 1986:360–364.
41. Ruilope LM, Rodicio JL. Klinický význam proteinurie a mikroalbuminurie. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1993;2:962–967.
42. Ritchie CM, Mcknight JA, Hadden DR, et al. Prevalence hypertenze a albuminurie v diabetologické ambulanci fakultní nemocnice. Diabetes Res Clin Pract. 1995;27:69–76.
43. Campos-Pastor MM, Escobar-Jimenez F, Mezquita P a kol. Faktory spojené s mikroalbuminurií u diabetes mellitus 1. typu: průřezová studie. Diabetes Res Clin Pract. 2000;48:43–49.
44. Hermans MP, Birchard SM, Colin I, a kol. Dlouhodobé snížení mikroalbuminurie po 3 letech inhibice angiotenzin-konvertujícího enzymu perindoprilem u hypertenzních diabetiků léčených inzulínem. Am J Med. 1992;92 (Suppl 4B):102S–107S.
45. Mathiesen ER, Hommel E, Giese J, et al. Účinnost kaptoprilu při odkládání nefropatie u normotenzních pacientů s diabetem závislým na inzulínu s mikroalbuminurií. BMJ. 1993;303:81–87.
46. Marre M, Chatelier G, Leblanc I a kol. Prevence diabetické nefropatie enalaprilem u normotenzních diabetiků s mikroalbuminurií. BMJ. 1999;302:210–216.
47. Anderson S, Rennke HG, Brenner BM. Terapeutická výhoda inhibitorů konvertujícího enzymu při zastavení progresivníhonemoc ledvinspojené se systémovou hypertenzí u potkanů. J Clin Invest. 1986;77:1993–2000.
