Extrakce, fyzikálně-chemické vlastnosti, anti-aging a antioxidační aktivity polysacharidů ze zbytků průmyslového konopí, část 2

2.8. Studie aktivity proti stárnutí

2.8.1. Životaschopnost buněk

K hodnocení toxicity testovaných vzorků se často používají in vitro experimenty s cytotoxicitou [37]. Účinky IHRPs na buněčnou životaschopnost HDF a HEK, což byly běžně používané epidermální buněčné linie, jsou zobrazeny na obrázku 5. IHRPs téměř neměly žádnou cytotoxicitu pro HDF a HEK. Kromě toho by IHRP mohly podporovat buněčnou proliferaci mezi 100 a 800 ug/ml. Aby se zajistilo, že životaschopnost buněk nebude ovlivněna koncentrací vzorku, zvolili jsme pro následující experimenty koncentrace IHRP pod 400 ug/ml.

Glykosid cistanche může také zvýšit aktivitu SOD v srdeční a jaterní tkáni a významně snížit obsah lipofuscinu a MDA v každé tkáni, účinně zachycovat různé reaktivní kyslíkové radikály (OH-, H₂O₂ atd.) a chránit před způsobeným poškozením DNA. OH-radikály. Cystanche fenylethanoidové glykosidy mají silnou schopnost vychytávání volných radikálů, vyšší redukční schopnost než vitamín C, zlepšují aktivitu SOD v suspenzi spermií, snižují obsah MDA a mají určitý ochranný účinek na funkci membrány spermií. Polysacharidy Cistanche mohou zvýšit aktivitu SOD a GSH-Px v erytrocytech a plicních tkáních experimentálně senescentních myší způsobených D-galaktózou, stejně jako snížit obsah MDA a kolagenu v plicích a plazmě a zvýšit obsah elastinu. dobrý čisticí účinek na DPPH, prodlužuje dobu hypoxie u senescentních myší, zlepšuje aktivitu SOD v séru a oddaluje fyziologickou degeneraci plic u experimentálně senescentních myší Experimenty prokázaly, že Cistanche má dobrou antioxidační schopnost s buněčnou morfologickou degenerací a má potenciál být lékem k prevenci a léčbě nemocí stárnutí kůže. Zároveň má echinakosid v Cistanche významnou schopnost vychytávat volné radikály DPPH a dokáže vychytávat reaktivní formy kyslíku, bránit volnými radikály indukované degradaci kolagenu a má také dobrý opravný účinek na poškození aniontů volnými radikály thyminu.

Klikněte na Cistanches Herba For Antioxidants

【Další informace:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】

2.8.2. Scratch Assay of HDF Cells

Scratch assay je in vitro metoda široce používaná k hodnocení příspěvku buněčných a molekulárních mechanismů k buněčné proliferaci a migraci [38]. Obrázky stavu hojení HDF škrábanců jsou uvedeny na obrázku 6. IHRP různých koncentrací byly všechny prospěšné pro hojení buněčných škrábanců ve srovnání s kontrolou. Navíc, když byla koncentrace IHRPs mezi 50 a 200 µg/ml, mohly IHRP významně podporovat hojení buněčných škrábanců. Míra hojení HDF škrábanců po 24 hodinách byla 64,51 ± 3,69 procenta (p < 0,01), 58,03 ± 3,90 procenta (p < 0,05) a 66,21 ± 6,60 procenta (p < 0,01), v tomto pořadí, když IHRPs koncentrace byla 50, 100 a 200 ug/ml, jak je uvedeno v tabulce 6. Kromě toho byl léčebný účinek IHRP velmi blízký účinku pozitivní kontroly TGF- (62,29 ± 4,69 procent, p < 0,01). Výsledky testu škrábanců ukázaly, že IHRPs by mohly urychlit hojení buněčných škrábanců a podporovat buněčnou proliferaci.

2.8.3. qRT-PCR analýza exprese genu HDF

Bylo provedeno několik studií s cílem vyhodnotit potenciál různých rostlin proti stárnutí [39,40]. Relativní kvantifikace genů proti stárnutí HDF je zobrazena na obrázku 7. Jak je znázorněno na obrázku, TGF-, Vc a HA byly použity jako pozitivní kontrola. Pořadí relativní kvantifikace AQP-3 bylo HA > TGF- > IHRPs > Vc. Pořadí relativní kvantifikace COL1A1 bylo TGF- > Vc > HA > IHRPs. Pořadí relativní kvantifikace COL3A1 bylo Vc > TGF- > HA > IHRPs. Pořadí relativní kvantifikace ELASTINu bylo TGF- > Vc > HA > IHRPs. Pořadí relativní kvantifikace MMP{15}} bylo IHRPs > HA > Vc > TGF-. Proto ve srovnání s pozitivní kontrolou neměly IHRP téměř žádný pozitivní účinek na expresi AQP-3, COL1A1, COL3A1 a ELASTIN. IHRP však významně podpořily expresi MMP-1. MMP-1 je primárně generován keratinocyty a používá se hlavně k rozkladu a fragmentaci kožních kolagenových vláken [41]. Stručně řečeno, IHRPs by mohly podporovat proliferaci HDF a expresi genů souvisejících se stárnutím, což ukazuje na potenciál IHRP proti stárnutí a regeneraci pokožky.

3. Materiály a metody

3.1. Materiály a činidla

IHR poskytla společnost Yunnan Hempmon Pharmaceuticals Co., Ltd. (Kunming, Čína). Fenol, -naftol, kyselina sírová, karbazol, Coomassie modř G-250, kyselina fosforečná, ethanol, chloroform a monosacharidová kontrola byly dodány společností Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. (Shanghai, Čína). Kyselina galakturonová, kyselina glukuronová, kyselina guluronová a arbutin byly zakoupeny od společnosti Sigma-Aldrich Co., Ltd. (St. Louis, MO, USA). Lidské dermální fibroblasty (HDF), lidské epidermální keratinocyty (HEK) a kompletní buněčné médium byly zakoupeny od Sciencell Co., Ltd. (Carlsbad, CA, USA). 12-jamkové destičky a 96-jamkové destičky byly nabízeny společností Corning Co., Ltd. (Corning, NY, USA). Souprava pro stanovení viability buněk CCK-8 byla zakoupena od společnosti DOJINDO Biology Co., Ltd. (Tokio, Japonsko) a další detekční soupravy byly nabízeny společností Takara Co., Ltd. (Takara, Japonsko).

3.2. Optimalizace extrakce IHRPs

3.2.1. Porovnání různých extrakčních metod

Perkolační extrakce: 10}0 g IHR bylo přidáno do 2000 ml deionizované vody. Extrakce byla prováděna s průtokem 150 ± 50 ml/h po 2 hodinách. Extrakce zahřátím: 100 g IHR bylo přidáno do 2000 ml deionizované vody. Extrakce byla prováděna při 98 °C po dobu 1 hodiny a proces byl dvakrát opakován. Ultrazvuková extrakce: 100 g IHR bylo rozpuštěno ve 2000 ml deionizované vody. Extrakce byla prováděna po dobu 0,5 hodiny při 60 °C a proces byl dvakrát opakován.

Filtráty byly zakoncentrovány za použití vakuové rotační odparky. Poté byl roztok vysušen vakuovou sušárnou. Pro výběr vhodné metody byl stanoven obsah polysacharidů.

3.2.2. Jednofaktorové experimenty

Pro extrakci IHRP bylo přidáno 100 g IHR do určitého množství deionizované vody. Teplota extrakce (40, 60, 80 a 98 ± 2 ◦C), poměr pevná látka-kapalina (1:6, 1:8, 1:10 a 1:15), doba extrakce (0,5, 1,0, 1,5 a 2 h), pH (3, 5, 7, 9 a 11) a několik po sobě jdoucích extrakcí (1, 2, 3, 4) byly studovány odděleně pro vyhodnocení vlivu jednotlivých faktorů na extrakci IHRPs.

3.2.3. Ortogonální experimentální design

Extrakční podmínky byly dále optimalizovány ortogonálním experimentálním designem. Jak je uvedeno v tabulce 7, čtyři vybrané proměnné byly teplota extrakce (60, 80 a 98 ± 2 ◦C), RS/L (1:6, 1:8 a 1:10), počet po sobě jdoucích extrakcí (1 , 2 a 3) a pH (4, 7 a 10). Ortogonální experimenty byly rozděleny do 9 skupin. Hmotnost polysacharidů byla považována za cíl pro odhad extrakčních podmínek.

3.3. Screen of IHRPs Alcohol Precipitation Conditions

Extrakční roztok byl získán za optimálních podmínek podle 3.2 a bylo přidáno 400 ml ethanolu. Experimenty byly prováděny na základě různých rychlostí přidávání alkoholu, způsobu míchání a rychlosti chlazení v tabulce 8. Sraženina byla získána po odstředění a sušení. Poté byla získána hmotnost a obsah polysacharidů pro stanovení vhodných podmínek srážení alkoholem.

3.4. Stanovení výtěžku polysacharidů a chemického složení IHRP

Obsah proteinu byl vypočten na základě Bradfordovy metody a jako standard byl použit bovinní sérový albumin (BSA) [42]. Celkový obsah cukru v IHRPs byl získán fenolsulfátovou metodou a glukóza byla použita jako standard [43]. Obsah kyseliny uronové byl získán metodou karbazol-kyselina sírová [44]. Výtěžek polysacharidu byl získán podle rovnice (1).

kde YP označuje výtěžek polysacharidu, mA označuje hmotnost IHRP a mB představuje hmotnost IHR použitou pro extrakci polysacharidu.

3.5. Purifikace IHRP

Nejprve bylo připraveno 100 g surových IHRP za optimálních podmínek stanovených v částech 3.2 a 3.3. Surové IHRP byly dále purifikovány různými metodami.

Adsorpce aktivního uhlí: 10 g surových IHRP bylo přidáno do 200 ml deionizované vody. Aktivní uhlí o hmotnosti 1 procenta, 2 procenta, 4 procenta a 8 procent IHRPs hmotnosti bylo smícháno s roztokem. Poté byl roztok míchán při 60 °C po dobu 1 hodiny a přefiltrován. Po promytí deionizovanou vodou byl filtrát zahuštěn a vysušen.

Membránová filtrace: 10 g surových IHRP bylo přidáno do 500 ml deionizované vody. Následně byl roztok nepřetržitě filtrován membránami s různými molekulovými hmotnostmi (30,000 Da, 10,000 Da, 1000 Da a 500 Da). Filtrát i retentát byly shromážděny a vysušeny. Nakonec byly získány IHRP s různými molekulovými hmotnostmi.

Savage metoda: 1 g surových IHRPs byl přidán do 100 ml deionizované vody. Poté byl roztok smíchán se Sevageovým činidlem (n-butanol:chloroform=1:5 (obj./obj.)). Směs byla míchána po dobu 15 minut a převedena do dělicí nálevky pro stratifikaci. Výše uvedený proces byl opakován 5krát. Následně byla organická fáze a vodná fáze obě vysušeny.

Sloupcová chromatografie: 10 g slabě bazické aniontoměničové pryskyřice bylo ponořeno do deionizované vody na 2 hodiny, poté naneseno do skleněné kolony (2 x 30 cm). 10 g surových IHRP bylo přidáno do 200 ml deionizované vody. Následně se roztok pomalu nechal projít vrstvou pryskyřice. Kolona se propláchne 100 ml 30% ethanolu. Eluent se koncentruje a suší.

3.6. Analýza složení monosacharidů

Test složení monosacharidů byl proveden podle předchozí metody s mírnými úpravami [45]; 5 mg IHRPs bylo hydrolyzováno 1 ml kyseliny trifluoroctové (TFA, 2 M) po dobu 6 hodin při 10}5 °C. Následně byl roztok vysušen pod dusíkovou atmosférou. Vysušený hydrolyzát byl přidán do 5 ml deionizované vody poté, co byla TFA odstraněna methanolem. Poté 0,5 ml 0,3M roztoku NaOH a 1 ml 0,5M 1-fenyl-3-methyl-5- k hydrolyzátu byl přidán methanolový roztok pyrazolonu (PMP). Získaný roztok byl udržován ve vodní lázni po dobu 2 hodin při 70 ◦C pro derivatizaci. Poté byl přidán roztok 0,5 ml HCl (0,3 M) pro neutralizaci. Roztok byl smíchán s 1 ml chloroformu pro HPLC analýzu. Jako reference bylo použito několik monosacharidů. Chromatografické podmínky: Mobilní fáze A (82 procent): 0,1 M roztok KH2P04. Mobilní fáze B (18 procent): acetonitril. Kolona: C18 (5 um, 4,6 x 250 mm). Objem nástřiku: 10 µL. Průtok: 1,0 ml/min. Detekční vlnová délka: 245 nm. Teplota kolony: 30 ◦C.

3.7. Infračervená spektroskopie s Fourierovou transformací (FT-IR)

Vzorky pro FT-IR analýzu byly připraveny smícháním 5 mg IHRP se 125 mg KBr. FT-IR spektra vzorků byla získána mezi 4000 a 500 cm-1.

3.8. Studie antioxidační aktivity

3.8.1. DPPH Radical Scavenging Activity

Aktivita IHRPs vychytávající volné radikály DPPH byla hodnocena na základě publikované metody s několika modifikacemi [46]. Stručně řečeno, 2 ml roztoku vzorku (0,2, 0,4, 0,6, 0,8 a 1.0 mg/ ml) byl smíchán s 2 ml roztoku DPPH (0,1 mM). Směs byla udržována po dobu 30 minut ve tmě a poté byla získána absorbance (Abs) při 517 nm. Rychlost vychytávání DPPH byla odhadnuta pomocí následující rovnice (Rovnice (2)) a byla spočítána 50procentní účinná koncentrace (EC50).

kde RSD představuje rychlost vychytávání volných radikálů, Ai označuje Abs reakčního systému (DPPH se vzorkem), Aj je Abs pozadí vzorku (rozpouštědlo se vzorkem) a A0 je Abs negativní kontroly (DPPH s rozpouštědlem).

3.8.2. ABTS Radical Scavenging Activity

Aktivita vychytávání ABTS IHRPs byla hodnocena na základě předchozí metody [47]. Stručně řečeno, roztok persíranu draselného (2,45 mM) byl míchán s roztokem ABTS (7 mM) ve tmě po dobu 12 hodin. Získaný roztok ABTS byl zředěn 50krát na Abs 0,70 ± 0.02 při 734 nm. Následně byl 1 ml roztoku vzorku (0,2, 0,4, 0,6, 0,8 a 1,0 mg/ml) přidán do 4 ml roztoku ABTS. Směs byla rychle třepána po dobu 1 minuty a umístěna ve tmě na 6 minut. Poté byla měřena Abs při 734 nm a jako pozitivní kontrola byla použita Vc. Míra zachycování ABTS byla vypočtena pomocí rovnice (2).

3.9. Studie aktivity proti stárnutí

3.9.1. Buněčná kultura

Lidské dermální fibroblasty (HDF) a lidské epidermální keratinocyty (HEK) byly zakoupeny od ScienCell Co., Ltd. Buňky byly kultivovány v médiu DMEM obsahujícím 10 procent FBS. Kultivační podmínky byly 37 ◦C s 5 procenty CO2.

3.9.2. Životaschopnost buněk

Pro stanovení cytotoxicity IHRP proti HDF a HEK buňkám byl proveden test Cell Counting Kit-8 (CCK{1}}). Buňky byly kultivovány v 96-jamkových destičkách s koncentrací 2 x 104 buněk/jamku po dobu 48 hodin. Poté bylo přidáno 100 ul čerstvého média obsahujícího vzorky a jamky byly inkubovány po dobu 24 hodin. Poté byl do jamek přidán roztok CCK-8 podle pokynů testovacích souprav a destička byla inkubována po dobu 2 hodin. Abs při 450 nm byly získány pro výpočet životaschopnosti buněk.

3.9.3. Scratch Assay

HDF byl kultivován při 37 ◦C s 5 procenty CO2. Poté byly buňky nasazeny do 12-jamkové destičky v koncentraci 1 x 105 buněk/jamku. Po inkubaci po dobu 48 hodin byl vytvořen škrábanec na buněčné vrstvě HDF jehlou injekční stříkačky. Buněčné fragmenty byly vyčištěny PBS a byly přidány vzorky s různými koncentracemi. Následně bylo po 24 hodinách pozorováno hojení škrábanců buněčné vrstvy, aby se vyhodnotil účinek IHRPs na proliferaci HDF. Získané snímky byly kvantifikovány softwarem Image J [48]. Transformující růstový faktor- (TGF-) byl použit jako pozitivní kontrola. Rychlost hojení byla vypočtena podle rovnice (3).

kde A1 představuje počáteční oblast škrábání a A2 se týká konečné oblasti škrábání.

3.9.4. Kvantitativní RT-PCR (qRT-PCR) analýza

Poté byly buňky naočkovány do 12-jamkových destiček s koncentrací 1 x 105 buněk/jamku. Po inkubaci po dobu 48 hodin byly vzorky smíchány a kultivovány dalších 24 hodin. Celková RNA byla extrahována a cDNA byla syntetizována. Analýzy qRT-PCR pro gen pro akvaporin (AQP-3), gen pro kolagen (COL1A1 a COL3A1), gen pro elastin (ELASTIN) a matricovou metaloproteinázu (MMP-1) byly provedeny v reálném čase PCR systém (Applied Biosystems Life Technologies, Inc., ABI StepOnePlus). Relativní kvantifikace byla provedena srovnávací metodou CT (metoda 2-∆∆Ct). Kyselina hyaluronová (HA), Vc a TGF- byly použity jako pozitivní kontrola.

3.10. Statistická analýza

Výsledky byly zobrazeny jako průměr ± SD (n {{0}}). Statistická významnost byla provedena pomocí ANOVA. Hodnoty p < 0,05 byly považovány za statisticky významné.

4. závěr

V této práci byla extrakce polysacharidů z IHR optimalizována jednofaktorovými experimenty a ortogonálním experimentálním designem. Optimální podmínky extrakce zahřívání byly teplota extrakce 98 ◦C, poměr pevná látka–kapalina 1:10, doba extrakce 1 h, počet po sobě jdoucích extrakcí 2 a pH 4. Extrakční poměr a obsah polysacharidů byl za daných podmínek 2{{40}}},12 procenta a 12,35 procenta. Kromě toho byly vhodnými podmínkami srážení alkoholem čerpání 2 l/h, kontinuální míchání a lázeň led-voda po dobu 4 hodin. Surové IHRP byly dále purifikovány sloupcovou chromatografií a obsahy polysacharid/protein v purifikovaných IHRP byly 34,44 procent a 1,61 procent. Monosacharidové složení IHRPs bylo: fukóza (1,33 procenta), arabinóza (19,60 procenta), rhamnóza (10,41 procenta), galaktóza (20,87 procenta), glukóza (27,42 procenta), xylóza (4,23 procenta), ribóza (3,12 procenta) kyselina (6,22 procenta), kyselina guluronová (0,28 procenta) a kyselina glukuronová (2,37 procenta). FT-IR prokázala polysacharidový skelet IHRP. Kromě toho hodnoty EC50 radikálů ABTS a DPPH byly 0,34 a 0,47 mg/ml, což ukazuje na velkou antioxidační aktivitu IHRP. IHRPs by také mohly podporovat buněčnou proliferaci HDF a HEK a hojení buněčných škrábanců. Kromě toho by IHRP mohly významně podporovat expresi MMP-1. Proto se předpokládá, že polysacharidy ze zbytků průmyslového konopí by mohly být vyvinuty jako potenciální antioxidační produkty a produkty proti stárnutí pro kosmetiku nebo funkční potraviny.

Příspěvky autora:TC, QZ a BZ navrhly experimenty. TC a HL (Hang Li) provedli experimenty a napsali počáteční návrh. TC, HL (Hang Li), HL (Hongning Lv), XL a ML analyzovaly data. MT, SH, QZ a BZ revidovali rukopis. Všichni autoři si přečetli publikovanou verzi rukopisu a souhlasí s ní.

Financování: Tento výzkum byl financován společností Yunnan Hempmon Pharmaceuticals Co., Ltd.

Prohlášení institucionální revizní komise:Nelze použít.

Prohlášení o informovaném souhlasu:Nelze použít.

Prohlášení o dostupnosti dat:Nelze použít.

Střet zájmů:Autoři neuvedli žádný střet zájmů.

Vzorová dostupnost:Vzorky sloučenin IHR a IHRP jsou dostupné od autorů.

Reference

1. Kumar, P.; Mahato, DK; Kamle, M.; Borah, R.; Sharma, B.; Pandhi, S.; Tripathi, V.; Yadav, HS; Devi, S.; Patil, U. Farmakologické vlastnosti, terapeutický potenciál a právní status Cannabis sativa L.: Přehled. Phytother. Res. 2021, 35, 6010–6029. [CrossRef] [PubMed]

2. Shoyama, Y.; Yagi, M.; Nishioka, I.; Yamauchi, T. Biosyntéza kanabinoidních kyselin. Fytochemie 1975, 14, 2189–2192. [CrossRef]

3. De Meijer, ED; Van der Kamp, H.; Van Eeuwijk, F. Charakterizace přístupů kanabisu o obsahu kanabinoidů o jiných rostlinných znacích. Euphytica 1992, 62, 187–200. [CrossRef]

4. Luca, SV; Roehrer, S.; Kleigrewe, K.; Minceva, M. Přístup pro současnou izolaci kanabidiolu a odstranění pesticidů z konopných extraktů pomocí kapalino-kapalinové chromatografie. Ind. Crop. Prod. 2020, 155, 112726. [CrossRef]

5. Bonini, SA; Premoli, M.; Tambaro, S.; Kumar, A.; Maccarinelli, G.; Memo, M.; Mastinu, A. Cannabis sativa: Komplexní etnofarmakologický přehled léčivé rostliny s dlouhou historií. J. Ethnopharmacol. 2018, 227, 300–315. [CrossRef] [PubMed]

6. Hartsel, JA; Eades, J.; Hickory, B.; Makriyannis, A. Cannabis sativa a konopí. In Nutraceuticals; Gupta, RC, Ed.; Academic Press: Boston, MA, USA, 2016; kapitola 53; s. 735–754.

7. Palmieri, S.; Mascini, M.; Oliva, E.; Viteritti, E.; Eugelio, F.; Fanti, F.; Compagnone, D.; Sergi, M. Profil kanabinoidů v Cannabis sativa L. Vzorky pomocí analýzy LC-MRM/IDA/EPI: Nový přístup ke klasifikaci kultivarů. J. Agric. Food Chem. 2022, 70, 3907–3916. [CrossRef]

8. Atalay, S.; Jarocka-Karpowicz, I.; Skrzydlewska, E. Antioxidační a protizánětlivé vlastnosti kanabidiolu. Antioxidanty 2020, 9, 21. [CrossRef]

9. Small, E. Evoluce a klasifikace Cannabis sativa (marihuana, konopí) o využití člověkem. Bot. Rev. 2015, 81, 189–294. [CrossRef]

10. Mazzara, E.; Carletti, R.; Petrelli, R.; Mustafa, AM; Caprioli, G.; Fiorini, D.; Scortichini, S.; Dall'Acqua, S.; Sut, S.; Nunez, S.; a kol. Zelená extrakce konopí (Cannabis sativa L.) pomocí mikrovlnné metody pro získání tří cenných frakcí (éterický olej, fenolické sloučeniny a kanabinoidy): Centrální studie optimalizace kompozitního designu. J. Sci. Food Agric. 2022, v tisku. [CrossRef]

11. Tan, MH; Chang, SL; Liu, JN; Li, H.; Xu, PW; Wang, PD; Wang, XD; Zhao, MX; Zhao, B.; Wang, LW; a kol. Fyzikálně chemické vlastnosti, antioxidační a antidiabetické aktivity polysacharidů ze semen Quinoa (Chenopodium quinoa Willd.). Molekuly 2020, 25, 3840. [CrossRef]

12. Zhai, FG; Liang, QC; Wu, YY; Liu, JQ; Liu, JW Polysacharid červeného ženšenu vykazuje protirakovinnou aktivitu prostřednictvím ferroptózy indukované downregulací GPX4. Pharm. Biol. 2022, 60, 909–914. [CrossRef]

13. Zhou, X.; Afzal, S.; Wohlmuth, H.; Munch, G.; Leach, D.; Low, M.; Li, CG Synergická protizánětlivá aktivita extraktů zázvoru a kurkumy při inhibici lipopolysacharidů a prozánětlivých mediátorů indukovaných interferonem-gama. Molekuly 2022, 27, 3877. [CrossRef] [PubMed]

14. Zou, YF; Li, CY; Fu, YP; Jiang, QX; Peng, X.; Li, LX; Píseň, X.; Zhao, XH; Li, YP; Chen, XF; a kol. Porovnání předběžné struktury a střevních protizánětlivých a antioxidačních aktivit polysacharidů z různých kořenových částí Angelica sinensis (Oliv.) Diels. J. Ethnopharmacol. 2022, 295, 115446. [CrossRef] [PubMed]

15. Huang, Z.; Zong, MH; Lou, WY Příprava, strukturní objasnění a imunomodulační aktivita polysacharidu z Millettia speciosa Champ. Ind. Crop. Prod. 2022, 182, 114889. [CrossRef]

16. Cao, WY; Wang, CX; Mayhesumu, X.; Pan, L.; Dang, Y.; Yili, A.; Abuduwaili, A.; Mansur, S. Isolation, Structural Elucidation, Antioxidant and Hypoglycemic Activity of Polysaccharides of Brassica rapa L. Molecules 2022, 27, 3002. [CrossRef] [PubMed]

17. Panggabean, JA; Adiguna, SP; Rahmawati, SI; Ahmadi, P.; Zainuddin, EN; Bayu, A.; Putra, MY Antivirové aktivity sulfátových polysacharidů na bázi řas. Molekuly 2022, 27, 1178. [CrossRef]

18. Baeva, E.; Bláha, R.; Lavrová, E.; Sushytskyi, L.; Copíková, J.; Jablonský, I.; Klouček, P.; Synytsya, A. Polysaccharides from Basidiocarps of Cultivating Mushroom Pleurotus ostreatus: Isolation and Structural Characterization. Molekuly 2019, 24, 2740. [CrossRef]

19. Xu, JQ; Zhang, JL; Sang, YM; Wei, YN; Chen, XY; Wang, YX; Xue, HK Polysaccharides from Medicine and Food Homology Materials: Přehled o jejich extrakci, čištění, struktuře a biologických aktivitách. Molekuly 2022, 27, 3215. [CrossRef]

20. Hausstveit, G.; Wold, JK Některé sacharidy s nízkou molekulovou hmotností přítomné v Cannabis sativa L. Carbohydr. Res. 1973, 29, 325–329. [CrossRef]

21. Hillestad, A.; Wold, JK; Paulsen, BS Strukturální studie ve vodě rozpustných glykoproteinů z Cannabis sativa L. Carbohydr. Res. 1977, 57, 135–144. [CrossRef]

22. Groce, JW; Jones, LA Obsah sacharidů a cyklitolu v konopí. J. Agric. Food Chem. 1973, 21, 211–214. [PubMed]

23. Wen, Z.-S.; Xue, R.; Du, M.; Tang, Z.; Xiang, X.-W.; Zheng, B.; Qu, Y.-L. Polysacharidy z konopných semen chrání buňky střevního epitelu před oxidativním stresem vyvolaným peroxidem vodíku. Int. J. Biol. Macromol. 2019, 135, 203–211. [PubMed]

24. Bao-yao, BY-gW; Jie, TJ-wL Extrakční izolace a čištění ve vodě rozpustných polysacharidů z konopného semene. Food Sci. Technol. 2004, 6, 157–161.

25. Guo, L.; Kong, N.; Zhang, X.; Ma, H. Multimode ultrazvuková extrakce polysacharidů z maca (Lepidium meyenii): Optimalizace, purifikace a in vitro imunoregulační aktivita. Ultrason. Sonochem. 2022, 88, 106062. [CrossRef]

26. Chi, YZ; Li, YP; Zhang, GL; Gao, YQ; Ano, H.; Gao, J.; Wang, P. Vliv extrakčních technik na vlastnosti polysacharidů z Enteromorpha prolifera a jejich použitelnost při chelataci železa. Carbohydr. Polym. 2018, 181, 616–623. [CrossRef] [PubMed]

27. Shi, MJ; Wei, X.; Xu, J.; Chen, BJ; Zhao, DY; Cui, S.; Zhou, T. Karboxymethylované degradované polysacharidy z Enteromorpha prolifera: Příprava a antioxidační aktivita in vitro. Food Chem. 2017, 215, 76–83.

28. Ren, CJ; Zhang, Y.; Cui, WZ; Lu, GB; Wang, YW; Gao, HJ; Huang, L.; Mu, ZM Polysacharidový extrakt z listů moruše zlepšuje jaterní metabolismus glukózy a signalizaci inzulínu u potkanů ​​s diabetem 2. typu vyvolaným dietou s vysokým obsahem tuku a streptozotocinem. Int. J. Biol. Macromol. 2015, 72, 951–959.

29. Wu, JW; Li, P.; Tao, DB; Zhao, HT; Slunce, RY; Ma, FM; Zhang, BQ Vliv procesu roztokové plazmy s peroxidem vodíku na degradaci a antioxidační aktivitu polysacharidu z Auricularia auricula. Int. J. Biol. Macromol. 2018, 117, 1299–1304.

30. Ventilátor, SH; Li, JN; Bai, BQ Purifikace, strukturální objasnění a in vivo aktivita zvyšující imunitu polysacharidů ze semen quinoa (Chenopodium quinoa Willd.). Biosci. Biotechnol. Biochem. 2019, 83, 2334–2344.

31. Slunce, YJ; Hou, ST; Song, S.; Zhang, B.; Ai, CQ; Chen, XF; Liu, N. Vliv kyselé, vodní a alkalické extrakce na strukturní vlastnosti, antioxidační aktivity polysacharidů Laminaria japonica. Int. J. Biol. Macromol. 2018, 112, 985–995.

32. Patel, MK; Tanna, B.; Mishra, A.; Jha, B. Fyzikálně chemická charakterizace, antioxidační a antiproliferační aktivity polysacharidu extrahovaného z listů psyllia (P. ovata). Int. J. Biol. Macromol. 2018, 118, 976–987. [PubMed]

33. Palmieri, S.; Fanti, F.; Oliva, E.; Viteritti, E.; Sergi, M.; Pepe, A.; Compagnone, D. Chemická charakterizace a hodnocení antioxidační aktivity z různých kultivarů Cannabis sativa L. z oblasti Abruzzo. Nat. Prod. Res. 2022, 1.–5. [CrossRef] [PubMed]

34. Li, H.; Zhao, Q.-S.; Chang, S.-L.; Chang, T.-R.; Tan, M.-H.; Zhao, B. Vývoj inkluzního komplexu cannabidiol full-spectrum oil/2,6-di-Omethyl- -cyklodextrin se zvýšenou rozpustností ve vodě, bioaktivitou a tepelnou stabilitou. J. Mol. Liq. 2022, 347, 118318.

35. Chen, L.; Yang, W.; Gao, C.; Liao, X.; Yang, J.; Yang, B. Komplexy kanabidiolu zprostředkované můstkovými dimery cyklodextrinů s vysokou solubilizací, in vitro antioxidační aktivitou a cytotoxicitou. J. Mol. Liq. 2022, 345, 117017.

36. Russo, C.; Lavorgna, M.; Nugnes, R.; Orlo, E.; Isidori, M. Srovnávací hodnocení antimikrobiálních, antiradikálových a cytotoxických aktivit kanabidiolu a jeho propylového analogu kanabidivarinu. Sci. Rep. 2021, 11, 22494.

37. Khatun, B.; Baishya, P.; Ramteke, A.; Maji, TK Studie komplexace strukturně modifikovaného kurkuminu s hydroxypropyl beta-cyklodextrinem a jeho vlivu na protirakovinnou aktivitu. New J. Chem. 2020, 44, 4887–4897.

38. Bobadilla, AVP; Arevalo, J.; Sarro, E.; Byrne, HM; Maini, PK; Carraro, T.; Balocco, S.; Meseguer, A.; Alarcon, T. Metoda kvantifikace buněčné migrace in vitro pro testy poškrábání. JR Soc. Rozhraní 2019, 16, 20180709. [CrossRef]

39. Salem, MA; Radwan, RA; Mostafa, ES; Alseekh, S.; Fernie, AR; Ezzat, SM Použití necíleného metabolomického přístupu založeného na UPLC/MS pro hodnocení antioxidační kapacity a potenciálu proti stárnutí vybraných bylin. RSC Adv. 2020, 10, 31511–31524.

40. Campa, M.; Baron, E. Anti-aging Effects of Select Botanicals: Vědecké důkazy a současné trendy. Kosmetika 2018, 5, 54.

41. Freitas-Rodriguez, S.; Folgueras, AR; Lopez-Otin, C. Role matricových metaloproteináz ve stárnutí: tkáňová remodelace a mimo ni. Biochim. Biophys. Acta Mol. Cell Res. 2017, 1864, 2015–2025.

42. Bradford, MM Rychlá a citlivá metoda pro kvantifikaci mikrogramových množství proteinu s využitím principu vazby proteinového barviva. Anální. Biochem. 1976, 72, 248–254. [PubMed]

43. Dubois, M.; Gilles, KA; Hamilton, JK; Rebers, PA; Smith, F. Kolorimetrická metoda pro stanovení cukrů a příbuzných látek. Anální. Chem. 1956, 28, 350–356. [CrossRef]

44. Bitter, T.; Muir, HM Modifikovaná karbazolová reakce kyseliny uronové. Anální. Biochem. 1962, 4, 330–334. [CrossRef]

45. Dai, J.; Wu, Y.; Chen, SW; Zhu, S.; Yin, HP; Wang, M.; Tang, JA Stanovení cukerného složení polysacharidů z Dunaliella salina modifikovanou RP-HPLC metodou předkolonové derivatizace s 1-fenyl-3-methyl-5-pyrazolonem. Carbohydr. Polym. 2010, 82, 629–635.

46. ​​Gao, J.; Zhang, T.; Jin, ZY; Xu, XM; Wang, JH; Zha, XQ; Chen, HQ Strukturní charakterizace, fyzikálně-chemické vlastnosti a antioxidační aktivita polysacharidu z Lilium lancifolium Thunb. Food Chem. 2015, 169, 430–438.

47. Xiao, H.; Fu, X.; Cao, C.; Li, C.; Chen, C.; Huang, Q. Sulfátová modifikace, charakterizace, antioxidační a hypoglykemické aktivity polysacharidů ze Sargassum pallidum. Int. J. Biol. Macromol. 2018, 121, 407–414.

48. Allaw, M.; Manconi, M.; Aroffu, M.; Marongiu, F.; Porceddu, M.; Bacchetta, G.; Usach, I.; Rached, RA; Rajha, HN; Maroun, RG; a kol. Extrakce, charakterizace a začlenění extraktu Hypericum Scruglii do ad hoc formulovaných fosfolipidových vezikulů určených pro léčbu kožních onemocnění spojených s oxidačním stresem. Farmacie 2020, 12, 1010.

【Další informace:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】