Parametry extrakce a metody sušení Cistanche Deserticola

Cistanche je Cistanche deserticola YC Ma neboCistanche tubulosa (Schenk) Wightsuchý dužnatý stonek se šupinatými listy rostliny OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. Hlavní účinnou látkou Cistanche deserticola jsou fenylethanolové glykosidy [2-4]. Farmakologické studie prokázaly, že má funkceafrodiziakální, zlepšení imunityaposílení paměti[4-9].

V posledních letech se metodologie povrchu odezvy široce používá při extrakci tradiční čínské medicíny [{{0}}]. Metoda povrchu odezvy má základní výhody vysoké přesnosti detekce, menšího počtu požadovaných experimentů, přesné predikce funkčních modelů a schopnosti odrážet vztah mezi faktory a předpokládanými hodnotami [15-17]. Proto tento experiment používá jako hodnotu odpovědi komplexní skóre obsahu pěti fenylethanolových glykosidů a používá software Design-Expert 8.0.6.1 k návrhu experimentu, optimalizaci procesu extrakce Cistanche deserticola a poskytuje informace pro identifikaci a stanovení standardů kvalityCistanche poušť.

V současné době indexsložky echinaceaside a verbascosidejsou horkými výzkumnými tématy v technologii těžby a zpracováníCistanche poušť. Vydání čínského lékopisu z roku 2015 stanoví, že způsob zpracování Cistanche deserticola je „odstranění nečistot, omytí, navlhčení, nakrájení na silné plátky a vysušení“. [1], neexistují jasné předpisy o způsobu sušení. Proto tento experiment použil osm různých metod sušení, včetně sušení na slunci, sušení ve stínu, sušení v troubě (40, 60, 80, 100, 120 stupňů) a sušení vymrazováním, ke zpracování Cistanche deserticola [18], což poskytlo teoretický základ pro proces sušení Cistanche deserticola.

Na vedení.

EXTRAKT CISTANCHE S 30% ECHINCAOSIDE

1 Materiály a nástroje

Čerstvá Cistanche deserticola byla sklizena v říjnu 2018. Místo původu je Mitan Township, Minqin County, Baiyin, provincie Gansu. Docent Guo Yehong z Gansu Agricultural University jej identifikoval jako Cistanche deserticola YC Ma, dužnatý stonek s listy šupiny. Referenční látky echinaceaside (číslo šarže 82854-37-3, hmotnostní zlomek větší nebo roven 98 %), cistancheaside A (číslo šarže 93236-42-1, hmotnostní zlomek větší nebo roven 95 %), verbascosid (číslo šarže { {5}}, hmotnostní zlomek větší nebo roven 98 %), isomurabasin (číslo šarže 61303-13-7, hmotnostní zlomek větší nebo roven 98 %), 2'-acetyl verbascosid (číslo šarže 94492-24-7 hmotnostní podíl větší nebo rovný 95 %) byl zakoupen od Chengdu Pu. Feide Biotechnology Co., Ltd.; kyselina mravenčí a methanol jsou chromatografické čistoty, Merck Company of Germany; voda je čištěná voda a ostatní činidla jsou analytické čistoty.

kapalinový chromatograf Waters Acquity, detektor PDA, pracovní stanice pro chromatografii Empower a systém správy kvartérních rozpouštědel; Ultrazvuková čistička KQ-100E, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Společnost; analytické váhy AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; LyoQuest-85 mrazicí sušička, Telstar, Španělsko.

2 Metody a výsledky

2.1 Příprava referenčního roztoku

Přesně navažte odpovídající množstvíechinaceaside, cistancheosid A, verbascosid, isorbascosida referenční standardy 2'-acetyl verbascosidu a přidejte 70% methanolu, aby byly hmotnostní koncentrace 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 a 0,48 mg/ml směsného referenčního roztoku.

2.2 Chromatografické podmínky Cistanche deserticola

Waters Symmetry C18 (250 mm x 4,6 mm, 5 um); teplota kolony 30 stupně, objemový průtok 1,0 ml/min; mobilní fáze je methanol-0,1% vodný roztok kyseliny mravenčí, eluční gradient: 0~12 min, 29%~34% methanol; 12-40 min, 34 %-40 % methanolu; 30-35 min, 40 %-35 % methanolu; 35-40 min, 30% methanol;

1-echinakosid 2-cistanche A 3-verbaskosid 4-isoakteosid 5-2′-acetylakteosid

Obr. 1 HPLC smíšeného referenčního vzorku (A) a vzorku C. deserticola (B) Obr.

2.3 Příprava zkušebního roztoku

Přesně navažte 1 g sušeného prášku Cistanche deserticola do Erlenmeyerovy baňky (prošla sítem 65-), přidejte 50 ml 50% methanolu, zvažte hmotu, ultrazvukem při 40 kHz při 150 W, ochlaďte na pokojovou teplotu a vytvořte hmotu, abyste ji získali.

2.4 Zkoumání lineárního vztahu

Vezměte {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4 a 8 ml výše uvedeného směsného referenčního roztoku do 10 ml odměrné baňky a přidejte 70% methanolu po značku. Přesně odeberte 10 μL a změřte podle chromatografických podmínek „2.2“. Hmotnostní koncentrace je osa x (X) a plocha píku je ordináta (Y). Proveďte lineární regresi a regresní rovnice jsou: Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, lineární rozsah 10,4~832,0 ug/mL; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, lineární rozsah 6.3-504.0 ug/mL; Isomurabasin Y＝92 831 Glykosid Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, lineární rozsah 4,8~384,0 ug/ml.

2.5 Metodický přehled

2.5.1 Přesná kontrola

Vezměte 20 μl smíšeného referenčního roztoku v položce „2.1“ a vstřikujte 6krát kontinuálně, abyste změřili plochy píku echinaceasidu, cistancheasidu A, verbascosidu, isorebascosidu a 2'-acetylverbascosidu. RSD jsou 0,23 %, v tomto pořadí. , {{10}},71 %, 0,59 %, 0,41 %, 0,29 %, což znamená, že přístroj má dobrou přesnost.

2.5.2 Zkouška opakovatelnosti

Odebere se 6 dávek stejného vzorku Cistanche deserticola, připraví se zkušební roztok podle bodu "2.3", nastříkne se vzorek za chromatografických podmínek podle bodu "2.2" a změří se plocha píku. Výsledky Průměrné hmotnostní zlomky echinaceasidu, cistancheosidu A, verbascosidu, isorebascosidu a 2'-acetyl verbascosidu byly 1,83 %, 0,21 %, 2,34 %, 0,13 % a {{15 }},68 %, respektive RSD byly 1,32. %, 0,83 %, 1,24 %, 2,19 %,

0,78 %, což znamená, že metoda má dobrou opakovatelnost.

2.5.3 Zkouška stability

Stanovte stabilitu stejného testovacího roztoku (připraveného podle "2.3") při 0, 2, 4, 8, 12, 24 a 48 hodinách, abyste získali echinaceaside, cistancheosid A, verbascosid a isolebascosid. plocha píku 2'-acetyl verbascosidu, RSD byly 0,58 %, 0,21 %, 1,58 %, 1,46 %, 2,19 %, v tomto pořadí, což ukazuje, že testovaný roztok byl stabilní během 48 hodin.

2.5.4 Test obnovy vzorku

Odeberte 1 g 6 vzorků Cistanche deserticola se známým obsahem a přesně přidejte určité množství smíchaného referenčního roztoku (Echinaceaside 1.06 mg/ml, Cistancheoside A 0.86 mg /ml, verbascosid 2,17 mg/ml, isolebascosid 0,79 mg/ml, 2'-acetyl verbascosid 0,91 mg/ml), přidejte 70% methanol do objemu 50 ml a nastříkněte vzorky podle chromatografických podmínek v "2.2". Průměrné naměřené výtěžnosti jsou 101,52 %, 99,21 % a 102,62 %. , 98,62 %, 97,36 %, RSD jsou 1,64 %, 1,95 %, 0,87 %, 1,59 %, 1,13 %, v tomto pořadí a míra obnovy vzorku je dobrá.

Cistanche je známá tonická bylina, která dokáže vyživovat a chránit ledviny. V teorii tradiční čínské medicíny je Cistanche nejlepší bylinkou pro ledviny. Cistanche je bohatá na echinakosid, akteosid a flavonoidy. Tyto účinné složky v Cistanche mohou snížit apoptózu ledvinových buněk a zvýšit proliferaci ledvinových buněk. Proto je Cistanche přírodním doplňkem ledvin.