Účinky různých metod zpracování na vnitřní kvalitu a charaktery Cistanche
Sep 22, 2022
Cíl: Optimalizovat metody zpracování Cistanche Cistanche a studovat účinky různých metod zpracování na vnitřní kvalitu a vlastnosti Cistanche Cistanche.
Metody: Různé úpravy předsušení (nekrájené a nepařené, nekrájené a dušené 20 minut, čerstvé nakrájené, 5 minut dušené po čerstvých plátcích) a metody sušení (80, 70, 60, 50 stupňů sušení, přírodní Obsahechinakosid, verbascoside, cistanosid A, isoverbasin, 2'-acetylverbasosid, tuberosid Aapolysacharidve vzorcích Cistanche, které byly sušeny na slunci, ve stínu a lyofilizované, byly stanoveny a bylo použito komplexní skóre. Způsob zpracováníCistanchebyla optimalizována metodou, chuť vzorků byla stanovena technologií elektronického jazyka, textura vzorků byla nepřímo hodnocena rychlostí rehydratace a indexem tvrdosti a byla studována korelace mezi nimi a obsahem hlavních chemických složek.
VÝSLEDKY: Pro výběr nejlepší metody zpracování čerstvého Cistanche byla použita komplexní metoda bodování, vaření v páře po dobu 20 minut a následné sušení při 60 stupních. Korelační studie zjistila, že chuť, textura a další vlastnosti byly v různé míře korelovány s obsahem některých složek. .
Závěr: Aby bylo možné efektivně zajistit kvalituCistanche, je nutné zvolit vhodné způsoby zpracování pro zpracování v původu a charakterové informace jako chuť a textura mohou do určité míry odrážet obsah účinné látky v léčivém materiálu, což je vhodné pro rychlou identifikaci kvality léčivého materiálu.
Klíčová slovaCistanche; zpracování původu; fenylethanolové glykosidy (Phg); polysacharidy; elektronický jazyk; znaky
Volný, uvolnitVzorek prášku extraktu Cistanche
Cistancheje suchý šupinatý stonekCistanche DeserticolaYC Ma neboCistanche Tubulosa(Schenk) Wight, který má funkce povzbuzení jangu ledvin,vyživující esence a krev, zvlhčující střeva a projímadlo [1].
ZpracováníCistanchese praktikuje od starověku. V „Zhenglei Materia Medica“ je záznam „sbírání 5. května a sušení ve stínu“. Současné způsoby zpracování zahrnují sušení, solení a sklepení. Vzhledem k velkému objemuCistanche, vysoký obsah cukru a potíže se sušením, výše uvedený způsob je nejen časově náročný, pracný a snadno ovlivnitelný přírodními podmínkami, ale také postupem času a sekundárním zvlhčováním se účinné látky snadno ztrácejí, což má vliv na kvalitu léčivé materiály [2].
Aby byla zajištěna vysoká kvalita a jednotnost léčivých materiálůCistanche, je nutné optimalizovat způsoby zpracování jeho původu tak, aby byl standardizován a standardizován. Na základě zkušeností léčivých farmářů v oblasti produkce a výzkumných zpráv příbuzných vědců o metodách zpracováníCistanchev produkční oblasti v posledních letech [3-6] tento experiment použil dužnatý stonek čerstvého Cistanche jako výzkumný objekt ke zkoumání předsušení a metod sušení Cistanche pomocí několika indikátorů. K hodnocení kvalityCistanchea optimalizovat nejlepší způsob zpracování ve výrobní oblasti, má za cíl poskytnout základ pro standardizaci zpracování ve výrobní oblastiCistanchea poskytnout novou referenční metodu pro komplexní hodnocení a celkovou kontrolu kvality léčivého materiáluCistanche.
1 Nástroje a materiály
1.1 Nástroje
Vysoce výkonný kapalinový chromatograf Agilent 1260 (Agilent Company, USA); UV spektrofotometr UV6100S (Shanghai Meipuda Instrument Co., Ltd.); elektronický jazyk ASTREE II (Francie Alpha MOS Company); FA2004 analytická váha (Shanghai Sunny Hengping) Scientific Instrument Co., Ltd.); Analytická váha DV215CD (Ohaus Instrument Co., Ltd.); GY-4 digitální tvrdoměr (Yueqing Aidelberg Instrument Co., Ltd.); Ultrazvukový čistič SB-3200DTN (Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., Ltd.).
1.2 Materiály
Echinacea (šarže: Y29M10H84490), Verbasin (šarže: Y21A9H59554), Cistanosid A (šarže: P14N9F74960), Isorrascoside (šarže: Y12D8H50507), 2′-Acetyl: Acetyl P62V6N6 číslo, číslo P62F6 Ant6N6 (Lo3N6) látky byly zakoupeny od Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd., hmotnostní zlomek větší nebo rovný 98 procentům; Referenční látka D-bezvodá glukóza (číslo šarže: 110833-201707, Čínský národní institut pro kontrolu potravin a léčiv); acetonitril Je chromatografické čistoty; zbytek reagentů je analytické čistoty. ČerstvéCistanchepro experiment byl shromážděn zPěstování cistanchezákladna Hongkuisha Industrial Development Co., Ltd. z Vnitřního Mongolska AlxaCistancheSkupina v říjnu 2019. Sukulentní stonky se šupinatými listy. Sklizené čerstvéCistanchebyla rovnoměrně promíchána a náhodně rozdělena do skupin. Každá skupina vzorků byla nastavena tak, aby měla 3 replikáty. Způsoby úpravy vzorků jsou uvedeny v tabulce 1.
2 Metody a výsledky
2.1 Stanovení fenylethanolových glykosidů
2.1.1 Chromatografické podmínky: Byla použita kolona Agilent Eclipse XDB-C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm), mobilní fáze byla 0,1% roztok kyseliny mravenčí (A)-acetonitril (B), gradientová eluce (0 ~ 10 min, 9 procent ~ 15 procent B; 10 ~ 40 min, 15 procent ~ 26 procent B; 40 ~ 45 min, 26 procent ~ 9 procent B;
Průtok byl 1.0 ml/min; detekční vlnová délka byla 330 nm; teplota kolony byla 30 stupňů; injekční objem byl 10 μl a chromatogram je znázorněn na obrázku 1.
2.1.2 Příprava roztoku referenční látky: Přesně navážíme přiměřené množství echinakosidu, verbascosidu,cistanosid A, isoverbasin, 2'-acetylverbasin a tuberosid A a vložte jej do 5 ml V hnědé odměrné baňce rozpusťte v 50 procentech methanolu a zřeďte na objem, abyste připravili referenční roztok o koncentracích {{6} },809, {{10}},932, 0,185, 0,272, 0,582, respektive 0,068 mg/ml.
2.1.3 Příprava zkušebního roztoku: Vezměte 0,5 gCistanche Tubulosavzorek prášku (protlačený sítem č. 4), přesně jej zvážíte, umístíte do hnědé odměrné baňky, přesně přidáte 25 ml 50procentního methanolu, pevně uzavřete a zvážíte. Po ponoření na 30 minut, ultrazvuku (150 W, 40 kHz) po dobu 40 minut, nechte vychladnout a poté doplňte závaží, dobře protřepejte, nechte stát, odeberte supernatant a přefiltrujte přes 0,45 μm mikroporézní membránu.
2.2 Stanovení polysacharidů
2.2.1 Příprava roztoku referenční látky: vezměte 10,03 mg referenční látky D-anhydroglukózy, přesně zvažte, rozpusťte ve vodě a zřeďte na 100 ml, abyste získali roztok referenční látky o koncentraci 100,3 ug/ml.
2.2.2 Příprava zkušebního roztoku: odeberte 0,5 g prášku vzorku Cistanche Tubulosa (protlačený sítem č. 4), přesně jej zvažte, vložte do zazátkované kónické baňky, přidejte 25 ml 80 procenta ethanolu a sonikujte při 80 stupních. (150 W, 40 kHz) po dobu 30 minut, za horka přefiltrována a extrakce jednou opakována. Po odpaření zbytku na filtru do sucha bylo přidáno 25 ml vody a sonikováno po dobu 30 minut. , Přesně odeberte 1 ml roztoku a zřeďte jej na 10 ml.
2.2.3 Podmínky detekce: vezměte 2 ml zkušebního roztokuCistanche, přidejte 1 ml 6% fenolového činidla, dobře protřepejte, rychle přidejte 5 ml koncentrované kyseliny sírové, protřepávejte 5 minut, zahřívejte ve vroucí vodní lázni 15 minut, ochlaďte a umístěte na 482 stupňů. Absorbance byla měřena při nm. Jako slepou kontrolu použijte místo zkušebního roztoku vodu.
2.3 Zkouška lineárního vztahu Referenční roztok nařeďte v určitém poměru, aby se připravil směsný referenční roztok řady koncentrací, a měřte podle výše uvedené metody. Na vodorovné ose se vezme koncentrace referenčního roztoku a na svislé ose plocha píku nebo absorbance. Lineární regrese, výsledky jsou uvedeny v tabulce 2.
2.4 Metodické šetření
2.4.1 Zkouška přesnosti:
Přesně nakreslete každý referenční roztok a měřte jej nepřetržitě šestkrát podle metod uvedených v „2.1.1“ a „2.2.3“ a výpočtem získáte echinakosid, verbascosid,cistanosid A, isaveraside, 2′ RSD ploch píku -Acetyl Verbasosidu a tuberosidu A a absorbance glukózy byly 0,76 procenta, 0,53 procenta, 0,81 procenta, 0,25 procent, {{10}},44 procent, 0,62 procent, 0, . 49 procent, což znamená, že přesnost přístroje je dobrá.
2.4.2 Test opakovatelnosti:
Vezměte 6 kopií stejné dávkyCistanchepro zkoušení prášku přesně odvažte, připravte zkušební roztok podle metod uvedených v "2.1.3" "2.2.2" a stiskněte "2.1.1" "2.2". 2,3", vypočítané RSD echinakosidu, verbascosidu, cistanosidu A, isoverbasinu, 2'-acetylverbasosidu, tuberosidu A a polysacharidu byly 0,82 procenta, v tomto pořadí. , 1,47 procenta, 0,88 procenta , 1,53 procent , 0,55 procent , 0,44 procent , 1,13 procent , což znamená, že metoda má dobrou opakovatelnost.
2.4.3 Test stability:
Přesně nakreslete zkušební roztokCistanchepod položkou "2.1.3" a vstříkněte vzorky v 0, 2, 4, 8, 12 a 24 h podle chromatografických podmínek v položce "2.1.1" a vypočítejte šišky. RSD ploch píku chryzantémového glykosidu, verbascosidu, cistanosidu A, isoveraskosidu, 2'-acetylverbasosidu a tuberosidu A byly 0. 47 procent , 1, 12 procent , 0. 42 procent, {{20}}. 65, resp. procent , 0,57 procent , 0,47 procent , což znamená, že testovací roztok má dobrou stabilitu během 24 hodin; přesně absorbovat zkušební roztokCistanchepod "2.2.2" stiskněte "2.2.3" Podmínky detekce pod položkou byly měřeny při 0, 15, 30, 60, 120 a 240 minutách a RSD absorbance polysacharidu byla vypočtena jako 1,24 procenta, což ukazuje, že testovaný roztok byl stabilní během 240 minut.
2.4.4 Test obnovy vzorku:
Vezměte 6 dílůCistanchepro testování prášku se známým obsahem složek je každá část 0,25 g, přesně zváženo, přidat
Přidejte referenční roztok s obsahem každé složky ve vzorku, připravte zkušební roztok podle metod uvedených v „2.1.3“, „2.2.2“ a podle „2.1.1“ „2.2. položka 3" a vypočítaná pro získání Echinacey
24 procent , 1{{20}}2. 69 procent, 101. 13 procent , 101. 13 procent , 101. 13 procent , 101. 13 procent , 101. 102. 38 procent , 101. 27 procent , 99. 94 procent , 99. 23 procent , RSD bylo 0,2,18 procenta procent , 0. 86 procent , 1. 26 procent , 1. 13 procent , 0. 94 procent , 2. 34 procent , což znamená, že tyto dvě metody jsou přesné a spolehlivé.
2.5 Vliv různých metod zpracování na obsah aktivních složek v Cistanche Součet obsahů echinacosidu a verbascosidu vCistanchevzorků byl vyšší než 0,30 procent, což bylo v souladu s vydáním Čínského lékopisu z roku 2020 [1].
Studie zjistila, že celkové množství indexových složek v celých sušených léčivých materiálech bylo vyšší než v čerstvých plátcích a celkové množství indexových složek v napařeném vzorku RZ3 před sušením bylo nejvyšší. procent, což je více než 14násobek úrovně specifikované v lékopisu. Je vidět, že obsah účinných látek po napaření a zpracování léčivých materiálů v původu je vyšší. Porovnáním vlivu sušení na slunci, sušení ve stínu, sušení tryskáním a sušení mrazem na obsah účinných látek v nekrájené a dušené Cistanche Cistanche bylo zjištěno, že obsah echinakosidu ve vzorku RZ2 byl nejvyšší; Nejvyšší byly obsahy '-acetylverbasinu a tuberosidu A, obsahCistancheA ve vzorku RZ6 byl nejvyšší a obsah polysacharidu ve vzorku RZ5 byl nejvyšší, což naznačuje, že různé způsoby sušení měly různé účinky na obsah aktivních složek v Cistanche.Cistanche. Ke komplexnímu hodnocení jeho kvality je nutné použít více indikátorů.
Pro stanovení váhového koeficientu indexu hodnocení kvality byla použita metoda AHPCistanchea byly vypočteny váhové koeficienty sedmi indikátorů echinakosidu, verbascosidu, cistanosidu A, isoverbasin glykosidu, 2'-acetylverbazického glykosidu, piplosidu A a polysacharidu. 0.2668, 0.2668, 0.1626, 0.{{10}}958, 0.0958, 0,0561, 0,0561.
Podle důležitosti měřených složek vCistanche, the 7 indicators were divided into 4 levels, and the priority order of each indicator was determined: echinacoside=verbasicose glycosides>cistanoside A>isoverbasin glycosides=2′-acetyl group Verbasin>tuberosin A{{0}}polysacharid, čímž se zkonstruuje moment priority posouzení pro párové srovnání. Náhodný poměr konzistence CR je index pro měření, zda je získaný váhový koeficient přiměřený. V tomto experimentu CR= 0. 0066 < 0,10,="" což="" znamená,="" že="" matice="" priority="" úsudku="" pro="" párové="" srovnání="" indikátorů="" odpovídá="" testu="">
Koeficient je přiměřený a efektivní a lze jej použít pro komplexní hodnocení zpracovatelských metod v optimální výrobní oblastiCistanche [7].
Aby byla data jednotná, je třeba normalizovat hodnotící ukazatele, vzorec je yi=xi-xmin*xmax-xmin, kde yi je normalizovaná hodnota ukazatele, xi je skutečná hodnota indikátor a xmax a xmin jsou indikátory. Maximální a minimální hodnoty skupiny a vážené komplexní skóre se vypočítá podle vzorce K=y1×l1 plus y2×l2 plus …y6×l6 plus y7×l7, kde K je celková hodnota skóre , y1, y2…y6, y7 je výsledkem normalizace obsahů echinakosidu, verbascosidu, cistanosidu A, isoveraskosidu, 2'-acetylverbazického glykosidu, tuberosidu A a polysacharidu. Závaží. Z výsledků komplexního bodování vyplynulo, že celková kvalita byla nejlepší u vzorku RZ3, tedy celého čerstvéhoCistanchebyla napařena po dobu 20 minut a poté sušena při 60 stupních jako nejlepší způsob zpracování v původu. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 3.
