Účinky Cistanche Deserticola na akutní poranění plic u potkanů se sepsí
Mar 09, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
[Abstraktní]Cíl: Studovat účinekCistanche deserticolana akutníporanění plic(ALI) u potkanů se sepsí. Metody: Model sepse byl vytvořen podvazem slepého střeva a punkcí. Byla provedena histopatologická vyšetření a byly měřeny biologické markery ALI. Výsledky: Pod světelným mikroskopem ve skupině s fyziologickým roztokem došlo k otokuplicní meziprostor, velký počet erytrocytů a neutrofilů a plazmatický protein v alveolárních dutinách. Theplícevlhká/suchá hmotnost, rychlost neutrofilů a obsah proteinu v tekutině z plicní alveolární laváže, permeabilita plicních cév a permeabilita plicních alveol a MDA, SOD, stejně jako MPO, byly odpovídajícím způsobem významně zvýšeny. Ve skupině sCistanche deserticolaléčby byly tyto indexy ALI významně nižší než ve skupině s fyziologickým roztokem.
Závěr: Cistanche deserticolamá skvělé účinky na ALI u potkanů se sepsí. Terapeutický mechanismus je pravděpodobně prostřednictvím inhibice neutrofilů a oxidačních volných radikálů.
【Klíčová slova】Sepse; Akutní poškození plic; Cistanche deserticola
Sepse je klinicky naléhavé a kritické onemocnění a hledání účinných léčebných léků bylo vždy hlavním problémem v klinickém a základním výzkumu. Patogeneze sepse podle tradiční čínské medicíny je nedostatek spravedlnosti a bujnost zla. Útočná terapie zlého blahobytu těla je jedním z účinných léčebných opatření.Cistancheje tradiční tonikum čínské medicíny. Farmakologické studie potvrdily, že má ochranné funkce, jako je zvýšení rychlosti syntézy buněčné DNA a odolnost vůči volným radikálům. Autor experimentálně pozoruje účinekCistanche na poškození plicpři sepsi za účelem poskytnutí účinného průzkumu pro léčbu sepse.
Cistanche Echinacoside léčí plicní onemocnění
1 Materiál a metody
1. 1 ZvířeZdraví 40 krysích samců 5D o hmotnosti 200~250g, poskytnutých Experimentálním zvířecím centrem Huazhongské univerzity vědy a technologie, číslo kontroly kvality: TJLA—2008—1670 bylo náhodně rozděleno do 3 skupin: 8 skupin s normálním fyziologickým roztokem, Ig/ Bylo 12 krys v ml pastě z lilku a 12 ve skupině 5 g/mlCistancheskupina. Experimentálním zvířatům byly podávány odpovídající léky rutinní sondou po dobu 15 dnů, dvakrát denně (t.jCistancheextrakt z deserticoly poskytla přípravna tradiční čínské medicíny této nemocnice) a u pokusných zvířat byla použita dávka 200 mg/kg podle metody z literatury U] 12 minut po podvázání a perforaci slepého střeva. Sbírka exemplářů.
1.2 Histologické vyšetření plic potkana.Vezměte malé množství levého laloku zvířeteplícez každé skupiny to zafixujte 10% formaldehydem, řez zalijte parafínem a obarvte HE, pozorujte běžným optickým mikroskopem a na tomto základě odeberteplíceproblém vyrobit 1 mm3 za 25 Byl fixován v procentuálním roztoku glutaraldehydu, poté fixován v 1 procentním roztoku tetoxidu, dehydratován ethanolem a acetonem, zalit do Eponu 81, připraveny ultratenké řezy, obarveny uranem a olovem a pozorovány transmisním elektronem mikroskop.
1.3 Stanovení poměru mokré/suché hmotnosti plicního problému potkana, poměru počtu buněk v alveolární lavážní tekutině a hmotnostního poměru obsahu bílkovin.Další skupina krys podstoupila alveolární laváž po torakotomii a lavážní tekutina byla podrobena sčítání buněk a klasifikaci buněk pod mikroskopem. Pro stanovení obsahu bílkovin a výpočet se používá metoda Coomassie brilantní modřiplíceindex permeability (protein alveolární lavážní tekutiny/plazmatický protein, LPI).
1.4 Změny v plicní vaskulární permeabilitě (PVP) u potkanůPodle metody představené Zhou et al. (2), po podání zvířata v každé skupině podstoupila podvázání a perforaci slepého střeva a k otevření hrudníku a odstranění plic byla použita injekce do stehenní žíly 50 mg/kg lanthanu. Odstraňte okolní problémy, namočteplíceve formamidovém roztoku (množství formamidu je 20 mg/100 g tělesné hmotnosti), inkubujte v 45-50T inkubátoru po dobu 72 hodin, počkejte, až se vylouhují všechny pigmenty v problémech, vyjměte problémy, centrifugujte a odeberte supernatantu, použijte ultrafialový spektrofotometr k provedení kolorimetrie při 620 nm a vypočítejte obsah ethanolu podle standardní křivky pro stanovení změny PVP.
1.5 Stanovení malondialdehydu (MDA) u krysího plicního problémuKe stanovení aktivity MDA byla použita metoda thiobarbiturové kyseliny (TBA). Přidejte 4 ml 1,67 mol/l kyseliny sírové. 0.541 procent kyseliny fosfonové do 50 ml testovacího vzorku, dobře promíchejte, odstřeďujte při 3000 ot./min po dobu 10 minut a srážení zpracujte znovu, jak je uvedeno výše, poté přidejte 1 ml dvakrát destilované vody, 1 ml roztoku TBA, 95% bezvodý lázně po dobu 60 minut, extrakce 5 ml n-butanolu, tetraethoxypropan jako standard, konečná koncentrace lnmol/l, fluorescenční spektrofotometr při 532 nm pro měření absorbance.
1.6 Stanovení superoxiddismutázy (SOD) u problémů s plícemi krysPodle metody v literatuře [4] byla aktivita SOD stanovena metodou Huangpuyin oxidázy (souprava zakoupená od Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering).
1.7 Stanovení myeloperoxidázy (MPO) u potkanůplíceproblém.Vezměte plicní problém, abyste co nejvíce promyli zbytkovou krev v izotonickém fyziologickém roztoku a umístěte ji do fosfátového pufru obsahujícího {{0}},5 procenta cetyltrimethylbromidu (PH6.0) Připravte 5 procent homogenátu, a pracujte podle pokynů sady.
1.8 statistické metodyPoužijte statistický software SPSS a měřte data ve formě (x±s) pomocí t-testu a X2 testu.
Cistanche
2 výsledky
2.1 Porovnání poměru mokré/suché hmotnostiplíceproblémy, poměr počtu buněk a obsah bílkovin v alveolární lavážní tekutině v každé skupině jsou uvedeny v tabulce 1.plícepoměr mokré/suché hmotnosti ve skupině s fyziologickým roztokem byl významně vyšší než ve skupiněCistancheskupina (P<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistancheskupině byly významně nižší než ve skupině s fyziologickým roztokem (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">
Tabulka 1 Srovnání poměru vlhké/suché hmotnosti plicního problému a poměru počtu buněk a obsahu bílkovin v alveolární lavážní tekutině potkanů v každé skupině (X ± S)
Ve srovnání se skupinou s normálním fyziologickým roztokem P<0.><001. below="" is="" the="">
2.2 Porovnání morfologických změn plicních problémů potkanů v každé skupině. Obecný postřeh: Theplíceve skupině s fyziologickým roztokem byly výrazně zvětšené a tmavě červené, s různým stupněm překrvení a edému na povrchu a velkým počtem plicních infarktů na okraji; plíce vCistancheskupina byla světle červená s povrchem Mírná kongesce a edém, bez zjevného plicního infarktu. Pozorování světelným mikroskopem ukázalo, že ve skupině s fyziologickým roztokem došlo k alveolární a plicní intersticiální kongesci a edému, velkému počtu difuzních neutrofilních infiltrací v alveolární dutině, určité tvorbě abscesů a různému stupni atelektázy, nekrózy a kompenzačního emfyzému. , Trombus a podobná tvorba průhledné membrány. Výše uvedené léze ve skupině Cistanche byly významně redukovány. Ve skupině s fyziologickým roztokem alveolární epiteliální buňky nabobtnaly, lamelární tělíska se zjevně vyprázdnily, vytvořily se velké vakuoly, kapilární endoteliální buňky byly zduřelé, endoteliální buňky byly nepřetržitě poraněny, mezibuněčný prostor se rozšířil, kapiláry a bazální membrány alveolů byly uvolněné a rozšířené. Nepravidelné ztluštění, nerovnoměrná tloušťka. Ve skupině Cistanche nebyly buňky alveolárního epitelu zduřelé, vyprazdňování lamelárních tělísek bylo sníženo, počet vytvořených vakuol byl malý, spojení mezi endoteliálními buňkami kapilár se blížilo normálu a bazální membrána byla mírně uvolněná a nepravidelně ztluštělá. Ve srovnání se skupinou cistanche Ig/niL měla skupina 5g/ml cistanche menší rozsah morfologických změn plicního problému a stupeň poškození plic byl lehčí.
2.3 Srovnání LPI a PVP u potkanů v každé skupině je uvedeno v tabulce 2. LPI a PVP ve skupině s fyziologickým roztokem byly významně vyšší než u skupiny s Cistanche (PV0.05 nebo 0,01 ). LPI a PVP ve skupině Cistanche byly nižší, což mělo významný vztah mezi dávkou a účinkem.
2.4 Porovnání aktivity MDA.SOD.MPO vplíceProblémy krys v každé skupině jsou uvedeny v tabulce 3. Obsah MDA vplíceproblém skupiny s fyziologickým roztokem byl významně vyšší než u skupinyCistancheskupina, zatímco aktivita SOD a aktivita MPO u plicního problému ve skupině Cistanche byly významně zvýšeny (F<0.05 or="">
3 Diskuse
Mnohočetné orgánové selhání je hlavní příčinou ireverzibilního stavu a vysoké mortality v pozdní fázi sepse (5). Ochrana funkce orgánů má velký význam při snižování vysoké klinické mortality sepse. Plíce jsou prvním orgánem se selháním více orgánů. 1/3 pacientů se sepsí umírá na akutní poškození plic (ALI) a syndrom akutní respirační tísně (ARDS). Hlavním patofyziologickým mechanismem ALI je akumulace velkého počtu neutrofilů v plicním problému, který aktivuje a adheruje k vaskulárním endoteliálním buňkám. Současně se zvyšuje koncentrace redukovaného koenzymu II oxidázy, která přenáší jednotlivé elektrony, což způsobuje respirační výbuchy, generuje velké množství volných kyslíkových radikálů a způsobuje poškození a funkci buněčných membrán a membránových struktur prostřednictvím silné oxidace. Překážky⑹. Peroxid lipidů odráží změnu volných kyslíkových radikálů v problému a přímo souvisí se stupněm poškození plic (7). V enzymatickém a neenzymatickém antiradikálovém oxidačním systému těla udržuje aktivita SOD dobrou korelaci se stupněm poškození problému ⑺. Ve srovnání se skupinou s fyziologickým roztokem vykazovaly MDA a SOD aktivity skupiny Cistanche statisticky významné rozdíly. Cistanche má funkce posílení imunitní funkce, proti stárnutí a zvýšení rychlosti syntézy buněčné DNA. Experimentální výsledky ukázaly, že plicní koeficient, PLT, poměr neutrofilů v alveolární lavážní tekutině a permeabilita plicních cév u skupiny Cistanche byly významně sníženy, aktivita MDA plicního problému se snížila, SOD se významně zvýšila a aktivita MPO se snížila. Morfologické pozorování současně ukázalo, že stupeň poškození plicních problémů byl významně snížen, infiltrace neutrofilů byla snížena a skupina 5g/ml Cistanche měla menší poškození plic než skupina Ig/ml Cistanche a byla dobrá vztah dávka-účinek. To naznačuje, že Cistanche má významný ochranný účinek na ALI. Mechanismus může být: (1) Inhibice migrace zánětlivých buněk vplíceredukovat volné kyslíkové radikály produkované neutrofily a jinými aktivovanými buňkami tak, aby byl biofilm chráněn; (2) Podporovat syntézu nukleových kyselin a proteinů a chránit před poškozením plic Účinek; (3) Zvýšit imunitní funkci fagocytů a snížitplíceproblémové poškození způsobené endotoxinem. Experimentální výsledky poskytují experimentální základ pro léčbu akutního poškození plic při klinické sepsi posílením těla a posílením deficitu.
Reference
[1] Jin Huiming. Model sepse po ligaci a perforaci slepého střeva [J]. Chinese Journal of Pathophysiology "990, 6 (2): 126 ~ 127.
[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA a kol. Role faktoru aktivujícího destičky u akutního poškození plic spojeného s pankreatitidou u potkanů [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.
[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Experimentální metody moderní medicíny [M]. Peking: People's Medical Publishing House, 2007:508.
[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Moderní klinická biochemická laboratorní věda [M]. Peking: People's Military Medical Press, 2008: 896.
[5] Luo Zhengyao. Šokové studie [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.
[6]Xanthous CA, hala JB. Samsel RW. Endotoxin u lidských onemocnění, část 2Biologický účinek a klinické hodnocení antiendotoxinových teorií[J]