2 Výsledky

2.1 Porovnání refrakční chyby a axiální délky mezi skupinami

Ve srovnání s normální skupinou byla refrakční chyba potkanů ​​ve skupině FDM, skupině Cistanche vzorce a skupině PIR významně snížena, zatímco axiální délka byla významně zvýšena (všechny P < 0,05). Ve srovnání se skupinou FDM byla refrakční chyba potkanů ​​ve skupině vzorce Cistanche a skupině PIR významně zvýšena a axiální délka byla významně snížena (všechny P < 0,05). Ve srovnání se skupinou s Cistanche vzorcem byla refrakční chyba potkanů ​​ve skupině PIR snížena a axiální délka byla zvýšena (vše P < 0,05) (tabulka 2).

Tabulka 2. Srovnání dioptrií a axiální délky mezi skupinami krys

Poznámka:Ve srovnání s normální skupinou, *P < 0,05; ve srovnání se skupinou FDM,P < 0,05; ve srovnání se skupinou krevních doplňků, aP < 0,05.

EXTRAKT Z BYLINKY CISTANCHE PRO ZLEPŠENÍ ZDRAVÍ LEDVIN

Zkontrolujte výpis

Supporting Service Of Wecistanche-Pro více podrobností o spolupráci
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
 

2.2 Barvení HE

V normální skupině byla struktura každé vrstvy sítnice jasná, buňky byly uspořádány jednotně a hustě a nebyly zde žádné abnormální morfologické změny. Ve skupině FDM byla sítnice ztenčená, gangliové buňky byly uspořádány volně a nepravidelně a objevily se vakuolární změny. Tloušťka sítnice u potkanů ​​ve skupině vzorce Cistanche a skupině PIR byla zvýšena, uspořádání buněk bylo v zásadě pravidelné, počet gangliových buněk byl zvýšený a buňky byly hustě uspořádány, s nejvýraznějším výkonem ve skupině vzorce Cistanche (obrázek 1).

A: Normální skupina; B: skupina FDM; C: Skupina přípravků pro výživu krve a ledviny; D: Skupina PIR. ① označuje vrstvu nervových vláken; ② označuje vnitřní plexiformní vrstvu; ③ označuje vrstvu cévnatky; ④ označuje vrstvu skléry.
Obrázek 1 HE barvení očí potkana v každé skupině (×400)

2.3 Porovnání hladin exprese TGF-β2 ve sklerální tkáni mezi skupinami

Hladiny exprese TGF-P2 ve sklerální tkáni krys v normální skupině, skupině FDM, skupině vzorce Cistanche a skupině PIR byly 133,59 ± 8,46, 96,28 ± 5,23, 124,56 ± 7,59 a 115,79 ± 6. Ve srovnání s normální skupinou byly hladiny exprese TGF-β2 ve sklerální tkáni potkanů ​​ve skupině FDM, skupině Cistanche vzorce a skupině PIR významně sníženy (všechny P < 0,05). Ve srovnání se skupinou FDM byly hladiny exprese TGF-β2 ve sklerální tkáni krys ve skupině vzorce Cistanche a skupině PIR významně zvýšeny (všechny P < 0,05). Ve srovnání se skupinou vzorce Cistanche byla hladina exprese TGF-β2 ve sklerální tkáni potkanů ​​ve skupině PIR snížena (P < 0,05) (obrázek 2).

A: Normální skupina; B: skupina FDM; C: Skupina přípravků pro výživu krve a ledviny; D: Skupina PIR. ① označuje vrstvu nervových vláken; ② označuje vnitřní plexiformní vrstvu; ③ označuje vrstvu cévnatky; ④ označuje vrstvu skléry.
Obrázek 2 Imunohistochemické barvení k detekci hladiny exprese TGF-β2 ve sklerální tkáni potkanů ​​v každé skupině (×400)

2.4 Porovnání hladin exprese proteinu AQP1 a CAV1 ve sklerální tkáni mezi skupinami

Ve srovnání s normální skupinou byly hladiny exprese proteinů AQP1 a CAV1 ve sklerální tkáni potkanů ​​ve skupině FDM, skupině Cistanche vzorce a skupině PIR významně sníženy (vše P < 0,05). Ve srovnání se skupinou FDM byly hladiny exprese proteinů AQP1 a CAV1 ve sklerální tkáni krys ve skupině vzorce Cistanche a skupině PIR významně zvýšeny (všechny P < 0,05). Ve srovnání se skupinou s přípravkem Cistanche byly hladiny exprese proteinů AQP1 a CAV1 ve sklerální tkáni potkanů ​​ve skupině PIR významně sníženy (všechny P < 0,05) (tabulka 3, obrázek 3).

Tabulka 3. Srovnání exprese AQP1 a CAV1 proteinu v retinální tkáni

Poznámka:Ve srovnání s normální skupinou, *P < 0,05; ve srovnání se skupinou FDM,P < 0,05; ve srovnání se skupinou krevních doplňků, aP < 0,05.

A: Normální skupina; B: skupina FDM; C: Skupina přípravků pro výživu krve a ledviny; D: Skupina PIR.
Obrázek 3. Western blot analýza exprese proteinu AQP1 a CAV1 ve sklerální tkáni krys v každé skupině.

2.5 Porovnání úrovní exprese GLAST a GLT-1 mRNA ve sklerální tkáni mezi skupinami

Ve srovnání s normální skupinou byly relativní hladiny exprese GLAST a GLT-1 mRNA ve sklerální tkáni krys ve skupině FDM, skupině vzorce Cistanche a skupině PIR významně zvýšeny (vše P < 0,05). Ve srovnání se skupinou FDM byly relativní hladiny exprese GLAST a GLT-1 mRNA ve sklerální tkáni krys ve skupině vzorce Cistanche a skupině PIR významně sníženy (vše P < 0,05). Ve srovnání se skupinou vzorce Cistanche byly relativní hladiny exprese GLAST a GLT-1 mRNA ve sklerální tkáni krys ve skupině PIR významně zvýšeny (všechny P < 0,05) (tabulka 4).

Tabulka 4. Relativní mRNA exprese GLAST a GLT-1 v retinální tkáni

Poznámka:Ve srovnání s normální skupinou, *P < 0,05; ve srovnání se skupinou FDM,P < 0,05; ve srovnání se skupinou krevních doplňků, aP < 0,05.

3 Diskuse

FDM vážně ovlivňuje zrakové funkce pacientů a kvalitu života. V teorii tradiční čínské medicíny (TCM) výskyt krátkozrakosti úzce souvisí s nedostatkem jinu jater a ledvin. Nedostatek krve v játrech vede k podvýživě očí a nedostatek ledvinové esence vede k nedostatečnému zásobení mozku kostní dření, což v konečném důsledku vede ke snížení vidění [5]. Na základě teorie TCM, že „játra se otevírají do očí a ledviny ukládají esenci k produkci dřeně“, metoda tonizace ledvin a výživy krve poskytla důležitou myšlenku pro léčbu krátkozrakosti.

Další podrobnosti o Cistanche pro zlepšení funkce ledvin

Cistanche, známý jako „pouštní ženšen“ a jeden z „devíti nesmrtelných léků“ v TCM, má za sebou více než 2000 letou historii lékařského použití. Je zapsán jako prvotřídní výživný léčivý materiál ve starých klasikách TCM a je vysoce respektován pro své účinky tonizace ledvin, doplňování esence, vyživování krve a zvlhčující sucho. Na rozdíl od mnoha jiných bylin TCM roste Cistanche výhradně v pouštích, hlavně parazituje na kořenech Tamarix ramosissima v oblastech jako Xinjiang, Vnitřní Mongolsko a Gansu v Číně. Toto jedinečné růstové prostředí mu dodává bohaté aktivní složky, včetně echinakosidu, verbascosidu a flavonoidů. Moderní vědecký výzkum potvrdil, že tyto aktivní složky mají silné antioxidační vlastnosti, mohou snižovat buněčnou apoptózu, podporovat buněčnou proliferaci, opravovat poškozené buňky a rozšiřovat krevní cévy – biologické aktivity, které jsou vysoce konzistentní s účinkem TCM „tonifikace ledvin a vyživující esence“ [16]. Kromě toho bylo prokázáno, že Cistanche zvyšuje imunitu tím, že podporuje proliferaci lymfocytů, odolává únavě zvýšením produkce jaterního glykogenu a má účinky proti stárnutí tím, že zachycuje volné radikály, což z něj činí slibnou přírodní složku pro vývoj zdravotnických produktů a léčiv [16].

Refrakční vada je indikátorem schopnosti oka zaostřit. U FDM může plynulé nastavování ohniskové vzdálenosti čočky a změny tvaru oční bulvy, aby bylo možné jasně vidět předměty, vést k růstu axiální délky, což dále zhoršuje krátkozrakost a vytváří začarovaný kruh [6–7]. Receptura obsahující Cistanche, s Cistanche tubulosa jako hlavní složkou, zdědila terapeutický princip TCM tonizace ledvin a vyživování krve. Aktivní složky Cistanche, jako je echinakosid a verbascosid, mohou zlepšit oční mikrocirkulaci, zlepšit zásobení sítnice živinami a zmírnit napětí ciliárního svalu, čímž snižují únavu zraku a regulují refrakční vadu [16]. Výsledky této studie ukazují, že receptura obsahující Cistanche může významně regulovat axiální délku, což může souviset s její schopností zlepšit periorbitální krevní oběh, snížit nitrooční tlak a podporovat opravu a regeneraci buněk sítnice a ciliárních svalů. Kromě toho, účinek Cistanche na podporu buněčné proliferace a opravy poškozených buněk může pomoci regulovat remodelaci sklerálních kolagenových vláken, a tím inhibovat abnormální expanzi oční bulvy [16].

Patogeneze FDM zahrnuje interakci různých růstových faktorů a cytokinů. Jako klíčový faktor TGF-β2 aktivuje downstream signální dráhy vazbou na buněčné povrchové receptory, podílí se na regulaci proliferace buněk rohovky a skléry, podporuje prodloužení osové délky, a tím zhoršuje progresi myopie [11]. Formule obsahující Cistanche uplatňuje svůj terapeutický účinek regulací hladiny exprese TGF-β2 v FDM. Jeho mechanismus může zahrnovat inhibici abnormální aktivace signální dráhy TGF-β2/Smad a snížení exprese proteinů souvisejících s remodelací extracelulární matrice, čímž se zpomalí ztenčení skléry a prodloužení axiální délky. Tento účinek pravděpodobně souvisí s antioxidačními a antifibrotickými aktivními složkami v Cistanche, jako jsou flavonoidy a echinakosid [16]. Předchozí studie TCM prokázaly, že tonizace ledvin a výživa krve může zlepšit stav krevního deficitu a ledvinového deficitu a vzájemná podpora dostatku krve a zdravých ledvin pomáhá udržovat normální fyziologické funkce lidského těla [12]. Kromě toho má receptura obsahující Cistanche také účinky na zlepšení zrakových funkcí, regulaci imunitních funkcí a oddálení prodloužení axiální délky, což dohromady poskytuje záruku pro léčbu FDM.

AQP1 je aquaporin exprimovaný v oku a podílí se na metabolismu a transportu nitroočních tekutin. U FDM může abnormální exprese AQP1 způsobit poruchy metabolismu nitroočních tekutin a ovlivnit tvar oční bulvy. Regulací hydratačního stavu a osmotického tlaku extracelulární matrix může AQP1 nepřímo aktivovat signalizaci TGF-β2, a tím regulovat systém MMPs/TIMPs a podílet se na degradaci sklerálního kolagenu a ztenčování skléry. Navíc, jako protein zapojený do intracelulární signalizace a vezikulárního transportu může abnormální exprese CAV1 souviset s poškozením buněk sítnice a dysfunkcí u FDM [13]. Výsledky této studie ukazují, že vzorec obsahující Cistanche může regulovat hladiny exprese AQP1 a CAV1 v očích FDM potkanů. Konkrétně může vzorec up-regulovat expresi AQP1, podporovat rovnováhu metabolismu nitroočních tekutin a zlepšit stav hydratace extracelulární matrice; současně reguluje expresi CAV1, zlepšuje transdukci intracelulárního signálu a vezikulární transport a snižuje dysfunkci buněk sítnice. Synergický účinek AQP1 a CAV1 může inhibovat abnormální aktivaci signální dráhy TGF-β2, a tím oddálit remodelaci sklerální extracelulární matrix a prodloužení axiální délky. Předchozí klinické studie také ukázaly, že pacienti s krátkozrakostí léčení přípravky tonizujícími ledviny a vyživujícími krev mají zlepšený zrak a stav očního pozadí, což je v souladu s výsledky této studie [14].

Abnormální transport vody je jedním z důležitých patologických mechanismů FDM, který může změnit obsah vody ve sklerální tkáni a zhoršit sklerální deformaci [15]. Aktivní složky v Cistanche, jako je echinacosid a verbascosid, mají silné biologické aktivity. Mohou zlepšit oční krevní oběh, podporovat normální metabolismus a funkční zotavení skléry [16]. Výsledky této studie ukazují, že po zásahu vzorcem obsahujícím Cistanche jsou hladiny exprese GLAST a GLT-1 ve sklerální tkáni významně sníženy. Možné důvody jsou následující: za prvé, ingredience v Cistanche zlepšují zásobování očního mikroprostředí kyslíkem a živinami zlepšením očního krevního oběhu, čímž poskytují dobré prostředí pro normální práci GLAST a GLT-1. Za druhé, vzorec obsahující Cistanche může přímo působit na GLAST a GLT-1, inhibovat uvolňování abnormálních neurotransmiterů regulací jejich aktivity a podporovat opětovné použití normálních neurotransmiterů. V tomto procesu může také snižovat oční zánětlivé reakce regulací oční imunitní funkce, čímž chrání strukturální integritu a funkční stabilitu transportérů.

4 Závěr

Formule obsahující Cistanche může účinně zlepšit refrakční stav FDM potkanů ​​a inhibovat nadměrný růst axiální délky. Jeho mechanismus účinku může být víceúčelový a vícecestný: na jedné straně tonizací ledvin a vyživováním krve (v souladu s teorií TCM) zlepšuje oční mikrocirkulaci a zásobování živinami a uvolňuje napětí ciliárních svalů; na druhé straně regulací exprese AQP1 a CAV1 obnovuje rovnováhu metabolismu nitrooční tekutiny a funkce sítnice, inhibuje abnormální aktivaci signální dráhy TGF-β2/Smad a snižuje degradaci extracelulární matrix, čímž oddaluje ztenčení skléry. Kromě toho může vzorec také udržovat homeostázu retinálních neurotransmiterů regulací funkce glutamátových transportérů, jako jsou GLAST a GLT-1, což naznačuje jeho potenciál zasahovat do FDM na více úrovních od molekul až po celé tělo.

Pro výzkumníky a vývojáře zabývající se vývojem bylinných produktů výsledky této studie zdůrazňují potenciál Cistanche jako přírodní složky pro intervenci krátkozrakosti. Jasné aktivní složky (echinakosid, verbascosid atd.), jednoznačné farmakologické účinky (podpora buněčné proliferace, antioxidant, regulace signálních drah) a dlouhá historie bezpečného používání v TCM z něj činí ideálního kandidáta pro vývoj funkčních potravin, doplňků zdraví nebo i farmaceutických přípravků pro prevenci a léčbu krátkozrakosti. Navíc Cistanche tubulosa s nejvyšším obsahem účinných látek mezi druhy Cistanche byla průmyslově vyráběna podniky jako Chengdu WeCistanche Bio-Tech. Co., Ltd., která poskytuje stabilní dodávky surovin a podporu kontroly kvality pro vývoj produktů [16].

Terapeutický účinek formule obsahující Cistanche je však ovlivněn různými faktory, jako jsou individuální rozdíly a délka medikace. I tato studie má určitá omezení a konkrétní mechanismy regulace vzorce je třeba dále ověřit. Budoucí výzkum se může zaměřit na optimalizaci lékové formy a dávkování přípravku Cistanche, zkoumání jeho kombinovaného použití s ​​dalšími přírodními složkami a provádění klinických zkoušek s cílem vyhodnotit jeho bezpečnost a účinnost u lidí, aby se podpořila transformace a aplikace přípravků na bázi Cistanche v oblasti prevence a léčby krátkozrakosti.

Reference

[1] LIN MY, LIN IT, WU YC, WANG I J. Postupný screening kandidátských léků pro kontrolu krátkozrakosti pomocí modelů krátkozrakosti zebrafish, myši a zlatého křečka syrského [J]. EBioMedicine, 2021, 65: 103263.

[2] LEE SY, NAM YK, KIM Y K. Charakterizace mRNA aquaporin1ab (Aqp1ab) v sekavci bahenním (Misgurnus mizolepis) vystaveném těžkým kovům a imunostimulačním stimulům [J]. Comp Biochem Physiol Part A Mol Integr Physiol, 2022, 270: 111226.

[3] ZHU X, WU X, YANG H, XU Q, ZHANG M, LIU X a kol. Upregulace LINC01003 zprostředkovaná m6A reguluje migraci buněk zacílením na signální dráhu CAV1/FAK u gliomu [J]. Biol Direct, 2023, 18(1): 27.

[4] ABED ZI, ARIANEJAD M, AZIZI Z. Exozomy odvozené z mezenchymálních kmenových buněk snižují hyperplazii u psoriázy indukcí transformujícího růstového faktoru β2 (TGF-β2) [J]. Mol Biol Rep, 2024, 51(1): 635.[5] YU Z F. Zkoumání úlohy a mechanismu akupunktury pro „regulaci jater a tonizující ledviny“ při prevenci a kontrole krátkozrakosti na základě mikrocirkulace fundu a technologie krevního kyslíku [D]. Chengdu: Univerzita tradiční čínské medicíny v Chengdu, 2022.[6] ZHU Y, BIAN JF, LU DQ, TO CH, LAM CS, LI KK, et al. Změna signalizace EIF2, glykolýza a sekrece dopaminu u krátkozrakosti bez formy v reakci na léčbu 1% atropinem: důkazy z interaktivní proteomiky iTRAQ-MS a SWATH-MS pomocí modelu morčete [J]. Front Pharmacol, 2022, 13: 814814.[7] SHU Z, CHEN K, WANG Q, WU H, ZHU Y, TIAN R, et al. Úloha retinálních dopaminových D1 receptorů v růstu oka a rozvoji myopie u myší [J]. J Neurosci, 2023, 43(48): 8231-8242.[8] HOU J M. Ochranný účinek receptury Yangxue Bushen na apoptózu sklerálních buněk u experimentální vysoké krátkozrakosti [D]. Xining: Univerzita Qinghai, 2015.[9] DIAO CX, GUO JG, WU QX, ZHANG H, WEN Y. Intervence čínské medicíny při remodelaci skléry: pokrok ve výzkumu dráhy TGF-β/BMP při zlepšení myopie [J]. New Chin Med, 2024, 56(17): 190-195.[10] LUO Y, GUO XQ, CHEN YX, CAO WX, KANG ZF, ZHUANG Z Y. Studie vlivu formule yangxue bushen na remodelaci skléry a TGF-β2 u morčat s formálně deprivační krátkozrakostí [J]. Chin J Ophthalmol, 2023, 33(10): 905-909.[11] HAN X, LI M, ZHAO J, ZHANG X, SUN B, XU H. Koncentrace hydroxyprolinu a související faktory u zachovaných stromálních lentikul rohovky odvozených z extrakce malé incize lentikuly [J]. Cornea, 2024, 43(10): 1285-1290.[12] YAO L. Výzkum účinku angelica sinensis na tloušťku cévnatky u morčat s formální deprivací a krátkozrakostí typu qi a nedostatku krve [D]. Shenyang: Univerzita tradiční čínské medicíny Liaoning, 2023.[13] REN YL, ZHANG XF, KONG L, TANG ZS, ZHANG L W. Exprese Caveolinu-1 v sítnici myší s akutní oční hypertenzí [J]. Rec Adv Ophthalmol, 2020, 40(5): 407-410.[14] LIN T, GAO J, WANG Y, KANG ZF, WU NL, ZHUANG ZY a kol. Vliv krve vyživujícího a ledviny tonizujícího odvaru na zrakové funkce pacientů s vysokou myopií [J]. China J Chin Ophthalmol, 2021, 31(4): 250-253, 259.[15] BURGOYNE C, WANG YX, JEOUNG J, HONG SU, GARDINER S, REYNAUD J, et al. OCT morfologie hlavice zrakového nervu u myopie II: sklerální vyklenutí perineurálního kanálu a tloušťka choroidey u vysoké myopie – teze americké oftalmologické společnosti [J]. Am J Ophthalmol, 2023, 252(1): 225-252.[16] Chengdu WeCistanche Bio-Tech. Co., Ltd. Cistanche pro onemocnění ledvin [EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 2022-08-01.