Kontakt: emily.li@wecistanche.com

Vliv polysacharidů Cistanche Desertica na funkce učení a paměti a ultrastrukturu mozkových neuronů u experimentálních stárnoucích myší

SUN Yun a kol

ABSTRAKT CílPozorovat účinkyCistanchedeserticapolysacharidy(CDP) nafunkce učení a pamětia cerebrální ultrastruktura u experimentálních stárnoucích myší. Metody: CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)bylo podáváno intragastricky 50 nebo 100 mg/kg denně po dobu 64 po sobě jdoucích dnů experimentálním myším s modelem stárnutí indukovaným D-galaktózou.funkce učení a pamětiPočet myší byl odhadnut pomocí step-down testu a Y-bludiště testu; organely mozkové tkáně a cerebrální ultrastruktura byly pozorovány transmisním elektronovým mikroskopem a fyzická síla byla stanovena plaveckým testem. Výsledky: CDP by samozřejmě mohl zlepšitfunkce učení a paměti(FV0. 01) a prodlužte dobu plavání (P<0. 05),="" de­crease="" the="" number="" of="" lipofuscins="" and="" slow="" down="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" in=""><0.05), and="" improve="" the="" degeneration="" of="" cerebral="" ultra-structure="" in="" aging="" mice.="" qmdusion:="" cdp="">(Cistanchedeserticapolysacharidy)mohl zlepšit zhoršenou fyziologickou funkci a zmírnit mozkové morfologické změny u experimentálních stárnoucích myší.

KLÍČOVÁ SLOVAstárnutí,funkce učení a paměti, Cistanche desertica polysacharidy, ultrastruktura, D-galaktóza

Cistanchedesertica, rostlinný lék, kterému tleskáme jako „ženšen z pouště“, má zvláštní účinek na posílení kostí a dřeně a prodlužuje délku života a jeho účinek proti stárnutí byl potvrzen moderními farmakologickými studiemi“). Přirozený proces stárnutí začíná učením a degradace paměti, po které následovaly degenerativní změny biologických a morfologických struktur.Cistanchedeserticapolysacharidy(CDP) nafunkce učení a pamětia fyzickou sílu, stejně jako ultrastrukturu mozkových tkání. Výsledky byly hlášeny následovně.

Cistanche má mnoho funkcí. Klikněte sem a dozvíte se více

METODY

Zvíře

Myši ICR, 2 měsíce staré, z čirého skla, polovina samců a polovina samic, vážící 20 až 22 g, byly zakoupeny od Experimental Animal Center of Yangzhou University (certifikace č. 98002). V každé komoře bylo chováno deset myší a všechna zvířata měla volný přístup k potravě a vodě.

Reagencie

D-galaktóza, zakoupená od Shanghai No. 2 Pharmaceutical Factory, byla smíchána s normálním fyziologickým roztokem na 5 g/l a uložena v chladničce při 4 stupních. CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)poskytl Nanjing Institute of Wild Plant, s použitím destilované vody k jejímu složení na 2,5 g/l a 5, 0 g/l. Sada Step-down a zařízení Y-bludiště byly produkty společnosti Shanghai Haodun Medical Apparatus Company.

Duplikace modelu stárnutí a experimentální návrh1,3,

ICR myši byly náhodně rozděleny do 4 skupin: kontrolní skupina (normální myši), skupina s modelem stárnutí; vysoká dávka CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)skupině a nízkou dávkou CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)skupina, 55 myší v každé skupině. Pro kontrolní skupinu 10 ml – kg-1. d_1 normální fyziologický roztok byl injikován subkutánně každé myši. Co se týče ostatních skupin, 50 mg. kg-1 - d_1 D-galaktóza byla podkožně injikována každému zvířeti po dobu 42 dnů, aby se duplikoval model stárnutí. Od začátku duplikace bylo každému zvířeti ze skupiny stárnoucích modelů intragastricky podáno 20 ml – kg-1 - d-1 normálního fyziologického roztoku a 50 mg • kg-1 • d{{16 }}a 100 mg – kg-1 - d-1 CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)byly každé myši podávány intragastricky v nízké dávce CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)skupina (Léčebná skupina I) a vysoká dávka CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)skupině (Léčebná skupina U) po dobu 64 dnů.

Šest hodin po poslední medikaci bylo pro testování odebráno 30 myší z každé skupinyfunkce učení a pamětipostupným testem a testem Y-bludiště, 15 pro každý test. Plavecký test pro hodnocení fyzické tolerance myší byl proveden 2 hodiny po poslední medikaci s 15 myšmi z každé skupiny. Kromě toho bylo na konci experimentu usmrceno 10 myší z kontrolní skupiny, modelové skupiny a léčebné skupiny H pro histomorfologické vyšetření.

Snižovací test ⑷

Myši byly umístěny do reakční komory, aby se adaptovaly na prostředí na 3 minuty, poté byl trénink zahájen připojením elektřiny do komory. Myš byla v bezpečí, když byla na plošině, ale když skočila na dno komory (chyba), elektrická stimulace 36 V přinutila myš skočit zpět na plošinu. Trénink probíhal 5 minut, byl zaznamenán kumulativní počet chybných časů během 5 minut. Formální test byl proveden o 24 hodin později, aby se otestovala schopnost myši hledat bezpečnou oblast pro únik z elektrické stimulace. Myš byla položena na plošinu a byl zaznamenán latentní čas před první chybou (doba pobytu na plošině) a kumulativní počet dob ​​chybování během 5 minut.

Test Y-bludiště

Y-bludiště je bludiště se třemi radiálně uspořádanými komorami se dnem vyrobeným z měděných tyčí a ústícími do sebe. Nahoře je umístěna lampa a ke spodní části každé komory je připojen elektrický zdroj. Lampa se rozsvítí, když se přeruší elektrický obvod, a pak je komora pro zvíře bezpečnou oblastí. Naopak, když je elektrický obvod pod napětím, zatemněná komora se stává oblastí elektrické stimulace, která způsobí elektrické poškození zvířete. Myš byla nejprve umístěna do Y-bludiště na 2 minuty, aby se adaptovala na prostředí, poté byl připojen okruh (36-40 V) v komoře, ve které myš zůstala, aby byla myš nucena uniknout do bezpečné oblasti. Trénink byl opakován 15krát, aby se upevnila paměť bezpečné oblasti v myši závislé na světle. Poté byl zaznamenán počet správných a nesprávných časů 10 testů pro odhad správné míry.

Zkouška plavání (1)

Myš byla umístěna do nádoby, která byla 28 cm vysoká a naplněná vodou o teplotě 15 stupňů a plavala ve vodě, dokud se nevyčerpala a neutopila. Doba od vložení do vody do ponoření se počítala jako doba plavání, která byla použita k vyhodnocení fyzické tolerance myši.

Příprava vzorku histomorfologického hodnocení ⑶

Deset myší odebraných z kontrolní skupiny, stárnoucí modelové skupiny a léčebné skupiny II, v tomto pořadí, bylo dekapitováno a každé myši byla vyjmuta mozková kůra levého mozku, která byla dvakrát fixována 4 procenty glutarové a 1 procentem osminové kyseliny, dehydratovaná gradientem acetonem, zalité Eponem 812, obarvené barvením Pb-U. Hlavní organely byly pozorovány pod transmisním elektronovým mikroskopem (TEM, Hitachi H-300, Japonsko).

Statistická analýza

Data byla vyjádřena jako x plus s. Statistická srovnání výsledků byla provedena párovým t-testem.

VÝSLEDEK

Účinky CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)o funkcích učení a paměti

Ukázal to sestupný testfunkce učení a pamětiPočet stárnoucích myší poklesl výrazněji ve srovnání s kontrolní skupinou, což se projevilo zkrácením doby latence a zvýšením kumulativních časů chyb. Doba latence se prodloužila a kumulativní doby chybování se snížily v léčebné skupině I a U; byl zjištěn významný rozdíl ve srovnání s modelovou skupinou stárnutí. Výsledky ukázaly, že CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)mohl evidentně zlepšitfunkce učení a paměti. Viz tabulka 1.

Výsledky testu Y-bludiště byly podobné jako u step-down testu, který ukázal, že míra správné bezpečnostní paměti byla u stárnoucích myší snížena. Významný rozdíl existoval, když byly léčebné skupiny I a H srovnány s modelovou skupinou, což naznačuje míru správné bezpečnostní paměti zvýšené po CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)léčba.

Účinek CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)o fyzické toleranci

Doba plavání u stárnoucích myší byla významně zkrácena ve srovnání s kontrolní skupinou. Ukázalo se, že pouze vysoká dávka CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)by mohly výrazně prodloužit dobu plavání, a tak mít funkci proti únavě. Viz tabulka 2.

Účinek CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)o organelách v mozkových neuronech

Pod elektronovým mikroskopem bylo pozorováno 10 neuronů z každého vzorku a byl změřen počet organel⑷. Výsledky ukázaly, že hladiny lipofuscinu a lysozomu se zvýšily v neuronech, počet mitochondrií a Golgiho komplexu se snížil ve skupině modelů stárnutí. Tato dvě kritéria byla do určité míry obnovena po velké dávce CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)léčba. Viz tabulka 3.

Účinek CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)na ultrastrukturu mozkové tkáně

Bylo prokázáno, že mitochondriální crista se rozpadá a řídce distribuuje s vakuolární degenerací. Počet těl NissP se snížil a objevila se degranulace v několika drsném povrchu endoplazmatického retikula, granule glykogenu se zmenšily, Golgiho váček se zploštilkomplex mírně dilatovaný, se sníženým počtem synapsí a sníženým počtem synaptických vezikul v presynaptické složce. Viz obr. 1.

Obr. 1 Mitochondrie nabobtnaly a jejich synapse zmizela v neuronech. Skupiny modelů stárnutí 10,000

Degenerativní změny se po CDP mírně zmírnily(Cistanchedeserticapolysacharidy)léčba se zjevně zvýšenými nukleopóry, tělísky a procesy NissPs a sníženým lipofuscinem. Viz obr. 2 a 3.

Obr. 2 Nisslova těla neuronů se znovu objevila a stále lze vidět určité množství lipofuscinu. Léčebná skupina II, X 10, 000

Obr. 3 Jaderný pór se zvětšil a v neuronech je vidět jadérko, cytoplazma je bohatá. Léčebná skupina K, X 10, 000

DISKUSE

The mechanism of E>-galaktóza při navozování stárnutí je založena na teorii volných radikálů stárnutí. V důsledku toho by D-galaktóza mohla zvýšit obsah volných radikálů v organismech a zhoršit funkce organel prostřednictvím poškození oxidací. Mitochondrie jako "energetická továrna" buněk mohou v dýchacím procesu produkovat spoustu volných radikálů a tyto volné radikály by mohly být snadno napadeny. Mitochondrie stárnoucího organismu jsou snadno poškozeny volnými radikály, poškození nebylo možné opravit kvůli nedostatku opravné kapacity.) a bylo by stále více prohlubováno až do konečné smrti. Lipofuscin je důležitou známkou stárnutí, jeho tvorba úzce souvisí s poškozením volnými radikály, proto se často používá jako kritérium při hodnocení úrovně stárnutí.

Výsledky této studie ukázaly, že CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)ve vysokých dávkách by mohly zvýšit fyzickou toleranci u stárnoucích myší a zlepšit jejichfunkce učení a pamětia zmírnit úroveň poškození mozkové ultrastruktury. Všechny tyto výsledky jsou ve shodě s naším předchozím výzkumem (1,2) a ukázaly, že CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)může prodloužit životnost, jeho účinek proti stárnutí může souviset s jeho antioxidační schopností a účinky pohlcování volných radikálů⑵ pro stabilizaci membránového systému a udržení stabilního intracelulárního prostředí.

Z: „Vliv polysacharidů Cistanche Desertica na funkce učení a paměti a ultrastrukturu mozkových neuronů u experimentálních stárnoucích myší“ od SUN Yun a kol.

---CJIM2001;7(4) =288--292

REFERENCE

1. SUN Y, LIN AP, ZHANG HQ. Výzkum Sin-ťianguCistanchedeserticana antioxidační poškození způsobené volnými radikály. China J Chinese Material Medica 1994; 19 (7): 433.

2. SUN Y, WANG DJ, SHEN SQ a kol. Pozorování Sin-ťianguCistanche deserticana hepatocytech a mozkové kůře stárnoucích myší transmisním elektronovým mikroskopem. Tradiční čínský výzkum drog 1997;8(1) * 30.

3. GONG GQ, XU FB. Studie modelu stárnutí u myší. J China Pharmaceutical University 1991;22(2):101.

4. LI YK. Experimentální metodologie čínských bylin ve farmakologii. Shanghai: Science and Technology Publishing House 1991: 172.

5. ZENG ZH, ZHANG ZY. Oxidační poškození mitochondriální DNA a stárnutí volnými radikály. Progr Biochem and Biophys 1995; 22 (5): 430.