Mohou být polyfenoly skutečně dobrou radioprotektivní strategií?

Pro více informací prosím kontaktujtetina.xiang@wecistanchecom

Abstraktní: V současné době je radioterapie jednou z nejúčinnějších strategií léčby rakoviny. Škodlivá toxicita vůči normálním buňkám však ukazuje na potřebu je selektivně chránit. Reaktivní formy kyslíku a dusíku posilujíionizující radiacecytotoxicita a sloučeniny schopné vychytávat tyto druhy nebo posilovat antioxidační enzymy (např. superoxiddismutáza, kataláza a glutathionperoxidáza) by měly být řádně prozkoumány. Antioxidační sloučeniny rostlinného původu, jako napřfenolyapolyfenoly, by mohla představovat cennou alternativu k syntetickým sloučeninám pro použití jako radioochranná činidla. Ve skutečnosti by jejich na dávce závislá antioxidační/prooxidační účinnost mohla poskytnout vysoký stupeň ochrany normálním tkáním s malou nebo žádnou ochranou pro nádorové buňky. Tento přehled poskytuje aktualizaci současných vědeckých poznatků o polyfenolech v čisté formě nebo ve forměrostlinné extraktys dobrými důkazy o jejich možném působení rádiové modulace. Až na několik výjimek jsou dosud dostupné fragmentární údaje většinou ze studií in vitro, které nenacházejí žádnou útěchu v preklinických a/nebo klinických studiích. Naopak, když jsou hlášeny předklinické studie, zejména pokud jde o biologickou aktivitu rostlinného extraktu, nebere se v úvahu jeho chemické složení, čímž se zamezuje jakékoli standardizaci a snižuje se reprodukovatelnost údajů.

Klíčová slova: ionizující radiace; radioprotekce; polyfenoly; flavonoidy; rostlinné extrakty

Kliknutím se dozvíte více o produktech s flavonoidy

1. Úvod

Život na Zemi se vyvinul v přítomnosti nepřetržitého vystaveníionizující záření (IR), jehož způsob účinku na biomolekulární úrovni je jedinečný mezi všemi známými mutagenními a karcinogenními agens [l]. To je způsobeno zvláštním vzorem ukládání energie doprovázejícím absorpci IR v mikro- a nanometrovém měřítku [2], který je ze své podstaty nehomogenní, což má za následek buď izolované nebo vysoce shlukované ionizační události. V důsledku toho mohou vytvářet velké množství lézí DNA různé závažnosti, od poškození báze a molekulárních příčných vazeb až po nejškodlivější jedno- a dvouvláknové zlomy (SSB a DSB, v tomto pořadí)[3]. Buněčná DNA byla vždy považována za cíl volby biologického účinku IR, protože je přítomna v jediné kopii, a proto jakékoli neopravené nebo nesprávně opravené poškození může mít relevantní důsledky, které ovlivňují integritu a stabilitu genomu v exponovaném buněčném potomstvu. Ve skutečnosti, kvůli všudypřítomné povaze expozice IR, buněčné systémy vyvinuly dobře organizované molekulární dráhy opravy DNA, vysoce specializované a diferencované, aby se vypořádaly s několika třídami nebo lézemi vyvolanými IR, mechanismus je souhrnně známý jako reakce na poškození DNA (DDR )[3]Schopnost opravy závisí na samotném rozsahu původně indukovaného poškození DNA, které je funkcí absorbované dávky záření, ale také na kvalitě záření, tj. hustotě ionizace podél drah záření.

Je zřejmé, že přirozeně se vyskytující záření na pozadí není jediným zdrojem vystavení člověka IR[4]. Přibližně ve stejné době, kdy byly objasněny zákony upravující proces přirozených radioaktivních rozpadů, se ukázalo, že IR může být uměle vytvořeno. Dopad, který měl objev rentgenového záření Wilhelmem Conradem Roentgenem v roce 1895 na mnoho aspektů lidského zdraví, dodnes doznívá, protože IR se široce používá jak v diagnostice, tak v léčbě nemocí [5]. Pokud jde o terapeutické použití IR, stejný účinek IR poškozující DNA, který jej klasifikuje jako nebezpečí pro lidské zdraví, je využíván jeho schopností vymýtit rakovinné buňky pomocí radioterapie. Díky rozsáhlému radiobiologickému výzkumu, který odhalil základní mechanismy, je mnoho známo o tom, jak IR přináší své biologické účinky. Za tímto účelem je užitečné klasifikovat IR jako nepřímé a přímé na základě způsobu uvolňování energie v (biologické) hmotě. Fotony, jako jsou rentgenové a -paprsky, a neutrony působí nepřímo a vyžadují dvoustupňovou akci, než způsobí jakékoli potenciálně biologicky významné poškození. Ve skutečnosti fotony interagují s elektrony obsahujícími atomový obal, čímž generují sekundární rychle se pohybující elektrony, které zase způsobují další ionizaci s emisí pomalejších elektronů; neutrony interagují s jádry procházejícího materiálu, což vede ke vzniku nabitých částic, jako jsou protony a těžší jádra [5]. Nabité částice místo toho ztrácejí energii přímo prostřednictvím Coulombových interakcí a vytvářejí výše uvedené ionizující stopy spolu s jejich hloubkou pronikání [5]. Biologické účinky související s IR, ať už způsobené přímým nebo nepřímým zářením, se také dělí na přímé a nepřímé. V prvním případě dochází k chemické alteraci biomolekul během fyzikálně-chemické fáze, která časově předchází vlastní biologické fázi. Místo toho jsou nepřímé, když jsou výsledkem produktů záření, jako jsou volné radikály generované radiolýzou vody. Nepřímo generované poškození DNA je jedinou formou poškození, jehož množství může být modulováno doprovodnými činidly, jako jsou antioxidační sloučeniny. Ve skutečnosti, když ionizující záření prochází vodou, vede k řadě iontových a excitovaných stavů, které se dále rozkládají nebo rekombinují za vzniku hydratovaných elektronů (e-ag) a reaktivních látek, včetně vodíkového radikálu (H), hydroxylového radikálu (OH). "), peroxid vodíku (H2O2), kyslík (O2), vodík (H2) a hydroperoxylový radikál (HO2") (obrázek 1) [6].

DNA DSB jsou všeobecně považovány za nejškodlivější léze vyvolané IR [7]. DDR může vést k aktivaci kontrolního bodu buněčného cyklu, tedy zpoždění/zastavení buněčného cyklu, ve snaze prodloužit čas na opravu. Bez ohledu na to, jaký mechanismus buňka používá, mohou neopravené/špatně opravené DSB vést k buněčné smrti prostřednictvím několika cest (např. mitotické selhání, apoptóza), které se typicky objevují při první mitóze po ozáření nebo po několika buněčných cyklech z expozice. To je cílem kurativní radioterapie. Selhání nesprávné obnovy DBS však může vést k přeuspořádání genetického materiálu (např. chromozomové aberace, mikrojádra), které, pokud jsou přenosné buněčným dělením, mohou způsobit pozdní projevy vedoucí k generalizované genomové nestabilitě, a tím ke zvýšení v riziku maligní transformace [8].

Konvenční radioterapie pomocí vysokoenergetických fotonových nebo elektronových paprsků je základem moderní léčby rakoviny, přičemž odhadem 50 procent pacientů s rakovinou ji dostává po celém světě samostatně nebo v kombinaci s jinými modalitami [9]. Ačkoli bylo dosaženo několika zlepšení v přesnosti podávání dávek, zmírnění toxicity nerakovinných normálních tkání zůstává zásadní důležitosti kvůli výše uvedenému sekundárnímu riziku rakoviny, které postihuje nevyhnutelně vystavené ohrožené normální tkáně a/nebo orgány. Vzhledem k tomu, že fotony jsou charakterizovány hlavně nepřímým způsobem působení, množství poškození, které produkují během fyzického stádia, může být modulováno během chemické fáze před fixací poškození a před nástupem biologicky řízené DDR. Modifikátory/protektory mohou být proto použity k selektivnímu přínosu pro normální tkáně a poskytující další minimální toxicitu [10]. V této souvislosti bylo popsáno několik sloučenin, ale pouze amifostin, S-fosfo derivát 2-[(3-aminopropyl)aminolethanthiolu, je schválen jako klinická radiační ochrana [11]. Jiné sloučeniny obsahující thioly, kromě nitroxidů s aktivitou podobnou superoxiddismutáze (SOD), analogů hormonů, antibiotik a fytochemikálií, byly zkoumány jako radioprotektory, zatímco imunomodulátory, probiotika a statiny jsou zkoumány jako zmírňující látky [12]. Specializované přírodní látky hrají klíčovou roli v preklinickém a klinickém výzkumu díky své antioxidační a protizánětlivé účinnosti, která je identifikuje jako slibné látky v oblasti radioprotekce a radiomitigace.

2. Radioprotekce: Cenný přístup k potlačení radiační expozice

Ačkoli je radioterapie jednou z nejúčinnějších strategií léčby rakoviny, odpověď normální tkáně je limitujícím faktorem pro celkovou dávku, kterou lze bezpečně podat k dosažení lokální kontroly nádoru, čímž se snižuje šance na vyléčení, zatímco akutní a chronické toxicity mohou vést k celkově špatné kvalitě života pacienta. Proto je aktivně požadována naléhavá potřeba ochrany normálních buněk. V této souvislosti pokračují technologická zlepšení v IR dodávání a přesnosti, zatímco radiomodulační činidla jsou považována za cennou alternativu ke snížení toxicity pro normální tkáně. Nejedná se tak o nový problém, takže výzkumný program IR Národního institutu pro rakovinu klasifikoval podle načasování administrace látky s IR ochrannými vlastnostmi do tří kategorií: (a) ochrana, (b) zmírnění a (c) terapeutické agenti [13]. Obdobně Evropská komise věnovala a nadále věnuje velkou pozornost radiační ochraně a obecně se zabývá novými poznatky výzkumu s potenciálními politickými a/nebo regulačními důsledky [14].

Radioprotektory a radiové mitigátory jsou cennými modulátory. Jejich dodání předchází nebo probíhá současně s podáním záření a je rychlé ke snížení nebo zlepšení toxicity normální tkáně. Posledně jmenované by mohly využívat terapeutické sloučeniny, pokud je prokázán nepříznivý účinek, působících po ozáření jako zmírnění nebo podpora [15].

Všechny tyto sloučeniny musí sdílet některé funkční vlastnosti, jako je schopnost přerušit nebo zpomalit nadprodukci reaktivních druhů, což může neomezeně udržovat IR poškození ovlivňující různé buněčné aktivity a signální dráhy. Reaktivní formy kyslíku a dusíku skutečně posilují IR cytotoxicitu. Působení proti nástupu podmínek oxidačního stresu zabraňuje strukturálnímu a funkčnímu narušení nukleových kyselin, proteinů a lipidů a řadě procesů (např. mitochondriální depolarizace), které nevratně vedou k buněčné smrti [16]. IR-indukovaná genomová nestabilita je hlavním cílem, který je třeba zahrnout, protože mutace, genová amplifikace a další cytogenetické přeuspořádání mohou být také po počátečním urážce [17]. Buňky adaptativně reagují na IR aktivací antioxidační obrany Nrf2-ARE |18[, která je tvořena enzymatickými a neenzymatickými sloučeninami a může být přínosem pro radioprotektory s cílem vyhnout se volným radikálům, odstranit toxické látky vyvolané IR a celkově zintenzivnit procesy oprav a obnovy [19]. Sloučeniny schopné vychytávat tyto druhy nebo posilovat antioxidační enzymy (např. superoxiddismutáza, kataláza a glutathionperoxidáza) by tedy měly být řádně prozkoumány. V této souvislosti thioly díky své schopnosti vychytávat hydroxylový radikál chrání DNA, která poskytuje, většinou v hypoxických podmínkách, škodlivé radikály DNA, pravděpodobně zodpovědné za radiační letalitu [10]. Dále bylo pozorováno, že thioly brání oxidaci membránových fosfolipidů a modulují obnovu buněk a stresové reakce. Cystein a cysteamin jsou sulfhydrylaminy a další aminothiolová analoga/deriváty se jeví jako radioprotektivní, ale jejich vedlejší účinky se nedoporučuje klinické použití, s výjimkou aminothiolamifostinu (WR-2721)[10]. Mezi hluboce studovanými druhy jsou také velmi zajímavé nitroxidy díky jejich schopnosti redoxního cyklu s jedním elektronem. Zejména bylo pozorováno, že tempol jako pleiotropní intracelulární antioxidant snižuje výskyt radiací indukovaných druhých malignit [20]. Ukázalo se také, že tempol(4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidin-N-oxyl) působí jako mimetikum SOD, zatímco radioprotektivní vlastnosti izoforem SOD( Cu, Zn SOD, Mn-SOD a extracelulární SOD) jsou zdůrazněny jako užitečná činidla pro jejich účinnost vychytávání O,-· v cytosolu, mitochondriích a extracelulárním prostoru a jejich katalyzovanou dismutaci na H2O2 a O. Další kategorie Radioprotektivní látky jsou cytokiny a růstové faktory, včetně IL-1, TNF-, G-CSF, GM-CSE a erytropoetin a inhibitory enzymu konvertujícího angiotenzin (obrázek 2). U těchto posledně jmenovaných sloučenin, rutinně předepisovaných k léčbě hypertenze, bylo pozorováno, že zlepšují vedlejší účinky záření v ledvinách, plicích a mozku a interferují s dráhou TGF, což by mohlo přispívat k fibróze vyvolané zářením [10]. Z těchto látek byl pro léčbu orální mukozitidy vyvolané chemoterapií a radioterapií nejprve schválen palifermin, rekombinantní N-terminální zkrácená forma keratinocytového růstového faktoru [21]. Byly také zkoumány inhibitory PUMA (p53 Up-regulated Modulator of Apoptosis) a radiací indukovaná apoptóza. Inhibitory PUMA (PUMAi) jsou navrženy tak, aby inhibovaly PUMA-dependentní a radiací indukovanou apoptózu a aby se vyhnuly nebo zmírnily střevní poškození a apoptózu vyvolanou zánětlivými cytokiny, ROS (reactive oxygen species) nebo terapií rakoviny [22].

Rostoucí zájem nacházejí také přírodní antioxidanty. Vitamíny (A, C a E), L-selenomethionin, N-acetylcystein, glutathion a koenzym Q-10 jsou považovány za účinné proti radiačnímu poškození [23], zatímco několik dietních fytochemikálií působí jako radioprotektory. normální buňky a radiosenzitizéry pro nádorové buňky ve fascinujícím scénáři. Melatonin, který je vylučován epifýzou v mozku z lymfocytů, sítnice a gastrointestinálního systému, je jednou z nejvíce studovaných přirozeně se vyskytujících sloučenin. Přímo vychytává druhy ROS, inhibuje enzymy tvořící ROS a aktivuje enzymy opravující DNA [24].

Neexistence škodlivé toxicity spolu s jejich znatelnými antioxidačními a imunostimulačními aktivitami činí ze specializovaných metabolitů rostlin nekonečný rezervoár radioprotektivních sloučenin.Polyfenolydíky své vnitřní antioxidační schopnosti jsou schopny snížit zánět, chránit imunitní i hematopoetický systém a zachovat DNA. Zejména,flavonoidyjako je rutin a baicalein, isoflavonoid genistein a stilben resveratrol představují sloučeniny striktně související s biosyntetickým hlediskem a jsou slibnými radioprotektivními kandidáty. Špatná biologická dostupnost těchto látek podněcuje nové formy podávání a fytochemický výzkum k objevu nových sloučenin z nadějných rostlinných extraktů. Aktualizace radioochranných přírodních molekul a zkoumání rostlinných extraktů obohacených o tyto složky jsou uvedeny níže.

3. Fenoly a polyfenoly: Jsou cennou radioprotektivní strategií?

Selhání syntetických sloučenin jako účinných radioprotektorů umožnilo výzkumníkům zaměřit se na přírodní látky a jejich radioprotektivní účinnost a několik rostlinných přípravků, které by mohly být levnější než syntetické, bylo testováno na jejich radioprotektivní aktivitu [25].

Vychytávání volných radikálů, protizánětlivé účinky, usnadnění reparační aktivity, regenerace hematopoetických buněk, to jsou hlavní mechanismy, které lze připsat přirozeným radioprotektorům (obrázek 2). Zejména, protože většina poškození IR v konvenčním radioterapii vzniká interakcí IR-indukovaných volných radikálů s biomolekulami, přírodní látky, jako je kurkumin, chlorogenové kyseliny a různé flavonoidy, jsou schopny ničit volné radikály nebo zabránit jejich vzniku. formace, by mohly sloužit jako radioprotektory [26]. Zdá se tedy, že použití radioprotektorů pro ochranu normální tkáně a radiosenzitizéru pro zesílení odpovědi rakovinné tkáně bylo inovativně maximalizováno v beztoxickém nutraceutickém přístupu založeném na polyfenolech. Tyto přírodní sloučeniny shrnují koncept ideálního ochránce, protože na základě jejich antioxidační/prooxidační účinnosti závislé na dávce by mohly poskytnout vysoký stupeň ochrany normálním tkáním s malou nebo žádnou ochranou nádorových buněk. Polyfenoly rostlinného původu navíc získaly velkou pozornost při dlouhodobém hledání skutečně nízkotoxických radiosenzibilizujících léků. Atraktivní dvousečný potenciál čistých polyfenolů nebo extraktů obohacených polyfenoly poskytl dobrý důkaz o jejich možném radiomodulačním účinku a duální schopnost polyfenolů působit jako radiosenzibilizační i radioprotektivní činidla by pravděpodobně měla preklinický význam a obecněji, mají významný vliv na prognózu nádorů refrakterních na radiační léčbu.

3.1. Flavonoidy: Dvojsečný meč v radioochraně

Za posledních dvacet let se zájem o radioprotektivaflavonoidyprobíhá. Tyto rostlinné metabolity, běžně biosyntetizované jako obranné sloučeniny proti UV záření a dalším environmentálním stresům prostřednictvím chalkonových prekurzorů, jsou strukturně charakterizovány 15-uhlíkovým skeletem, který se skládá ze dvou benzenových kruhů (A a B) spojených přes heterocyklický pyron C -kruhové atomy. Vysoký stupeň hydroxylace, substituce a polymerace je ve třídě flavonoidů, která se skládá ze sedmi podtříd: flavanony, dihydroflavonoly, flavonoly, flavony, flavandioly, antokyany a katechiny (obrázek 3). Isoflavonoidy z dobře oddělené podtřídy flavonoidů, protože tyto sloučeniny vykazovaly strukturní variantu, ve které se B-aromatický kruh nachází na uhlíku C3 (obrázek 3)[27l Výzkumy zaměřené na prozkoumání strukturních rysů zapojených do radioprotekce ukázaly, že některé flavonoidní sloučeniny (hlavně ty, které sdílejí ketoskupinu konjugovanou s aromatickými kruhy) by mohly být platnými činidly, protože ochrana souvisí s jejich schopností inhibovat procesy přenosu energie a stabilizovat redoxní procesy v ozářených buňkách [28].

Flavonoly se ukázaly jako nejcennější sloučeniny, ačkoli glykosylace na uhlíku C-3 ovlivňuje reaktivitu na základě identity sacharidové části. Ve skutečnosti bylo pozorováno, že flavonolové glukosidy snižují reaktivitu, když cukr tvoří dvě intramolekulární H-vazby. Kromě toho, na základě aglykonové substituce, je přítomno více fenolických funkcí, tím více je sloučenina aktivní[28]. Mezi flavonolovými sloučeninami je rutin (3,3'4',5,7-pentahydroxyflavon-3-rhamnoglukosid; obrázek 4), hojný v mučence, pohance, čaji a jablku, široce zkoumán pro svůj radioprotektivní účinek . Data testů na buněčných kulturách zdůraznila jeho schopnost chránit před radiací vyvolaným oxidačním poškozením DNA v buňkách (např. V79).

Denní suplementace rutinem, stejně jako jeho aglykon, jmenovitě kvercetin, snížila frekvenci mikronukleovaných retikulocytů v periferní krvi ozářených myší. Kombinací podofylotoxinu a rutinu ve formulaci G-003 byla zjištěna významná ochrana hematopoetického, gastrointestinálního a respiračního systému myší před letální dávkou záření [29-31]. Bylo prokázáno, že monoglukosyl rutin, ad hoc semisyntetizovaný k překonání nerozpustnosti kvercetinu a rutinu ve vodném médiu, je účinný vůči buňkám CHO10B2, protože je schopen zvýšit přežití buněk ošetřených IR v dávkách vyšších než 2 Gy [32]. In vitro analýza dvouřetězcových zlomů DNA, provedená na různých flavonoidních aglykonech a glykosidech, skutečně prokázala, že ačkoli deriváty kvercetinu redukovaly zlomy dvouřetězcové DNA při koncentraci rovné 10 μM, jejich nízká biologická dostupnost by mohla ovlivnit jejich účinnost in vivo. [33].

Ochrana před poškozením DNA v bílých krvinkách ozářených y 【34】, leukocytech 【35】 byla také zjištěna u kvercetinu a jeho obohacené přírodní matrice propolisu natolik, že bylo provedeno další zkoumání na zvířecích modelech. Zejména ochranný účinek vodného propolisového extraktu proti radiačnímu poškození střeva byl také prokázán u potkanů ​​vystavených dávce y-záření 8 Gy, schopné vyvolat střevní mukozitidu [36], zatímco methanolická frakce propolisu s vysokým obsahem obojí jednoduchéfenolyaflavonoidy, snížil celkový obsah karbonylu proteinu v buňkách HaCat ošetřených UV zářením [37].

Radioprotektivní účinek flavonů, jako je apigenin a baicalein, byl také hluboce zkoumán (obrázek 5). Apigenin, široce distribuovaný v listech a stoncích dietní zeleniny a ovoce, v závislosti na dávce indukoval mikrojádra v lidských lymfocytech léčených in vitro a také potlačoval nepříznivé účinky ionizujícího záření [38]. Zdá se, že sloučenina vykazuje imunostimulační účinek in vivo, čímž zmírňuje hematologické změny vyvolané zářením. Tento výsledek by mohl být způsoben jeho schopností spouštět endogenní antioxidační stav [39]. Nedávno bylo zjištěno, že apigenin, podávaný intraperitoneálně v dávce rovné 15 mg/kg tělesné hmotnosti, zpomaluje radiací vyvolané gastrointestinální poškození u celotělových ozářených myší švýcarských albínů. Zejména se zdá, že po předběžné léčbě apigeninem dochází k obnově architektury střevních krypt-klků a také k inhibici radiací indukované aktivace exprese NF-kB v gastrointestinální tkáni [40].

Naringin, flavanon-7-O-glykosid z Citrus species, také prokázal inhibiční účinek na zánět vyvolaný IR. Suprese NF-kB definovala změnu prozánětlivých faktorů. Kromě toho naringin posílil intracelulární obranné mechanismy prostřednictvím zachování endogenních antioxidantů [41]. Inhibiční aktivita na oxidační stres byla také spojena s uvolňováním zánětlivých cytokinů indukcí aktivace Nrf2, což je společný rys jiných flavonoidních sloučenin, jako je naringenin a epigalokatechin-3-O-galát (obrázek 6)[42]. Navíc, pokud jde o flavonové sloučeniny, baicalein (5,6,{13}}trihydroxyflavon), původně izolovaný ze sušených kořenů Scutellaria baicalensis a Scutellaria lateriflora, vyvolal pleiotropní aktivitu, která mu umožnila chránit lymfocyty myší sleziny před buněčnou smrtí vyvolanou IR díky své schopnosti potlačit MKP3 a aktivovat ERK. To je v souladu se zmírněním radiačního poškození hematopoetického poškození [43]. Nedávno baicalein, podávaný intraperitoneálně se 100 mg/kg myším C57BL/6J, znovu vyvážil IR-změněné střevní mikrobiální složení a zlepšil střevní strukturu. Snižoval expresi proapoptotických proteinů (např. p53, kaspáza-3, kaspáza{26}} a Bax) a také obnovoval IR-indukovanou hematopoetickou dysfunkci [44]. Baicalein byl popsán jako silný radioprotektor v koncentraci 5-50 μM 【45】 a má dopad na zánětlivou odpověď zprostředkovanou NF-kB [46.

Rostoucí důkazy naznačují potenciální přínos flavanolů ze zeleného čaje. Dřívější studie podpořily hypotézu antigenotoxické účinnosti v lidských lymfocytech [47] a celkovou prevenci proti poškození DNA způsobenému ultrafialovým zářením [48].

Epigallocatechin-3-O-gallát (obrázek 6), hlavní polyfenol v zeleném čaji, je díky své antioxidační aktivitě a účinnosti při zmírňování mnoha onemocnění souvisejících s oxidativním stresem velmi zajímavý. Podporoval radioprotektivní účinky závislé na Nrf{4}} a signalizaci Nrf2 a bylo zjištěno, že potlačuje IR-indukovanou apoptózu a ferroptózu, zmírňuje střevní poškození vyvolané celkovým ozářením těla u samců myší C57 BL/6J [49]. Radioprotekce EGCG byla studována pomocí modelu oxidačního poškození u 60Coy radiačních myší a získaná data prokázala schopnost sloučeniny zvyšovat aktivitu enzymatických antioxidantů, jako je superoxiddismutáza a glutathionperoxidáza, a také hladiny glutathionu [50]. .

Sójové isoflavony zmírňují poškození cév a zánět související s radioterapií rakoviny plic [51]. Genistein, hlavní sójový isoflavon s fytoestrogenovou aktivitou, má v radioterapii dvojí účinek; za prvé, může chránit L-02 buňky před poškozením zářením prostřednictvím inhibice apoptózy, zmírnění poškození DNA a chromozomové aberace, down-regulace GRP78 a up-regulace HERP, HUS1 a hHR23A při nízké koncentraci (1,5 μM). Za druhé, při vysoké koncentraci (20 μM) indikují radiosenzibilizační vlastnosti prostřednictvím podpory apoptózy a chromozomové aberace, poškození opravy DNA, up-regulace GRP78 a down-regulace HUS1, SIRT1, RAD17, RAD51 a RNF8 [ 52]. Nedávno bylo skutečně pozorováno, že genistein je schopen zvýšit radiosenzitivitu buněk hepatoblastomu indukcí G2/M zástavy a apoptózy [53]. Podávání genisteinu také prokázalo, že poskytuje ochranu proti akutnímu radiačnímu poškození v netoxických dávkách [54]. Několik důkazů podtrhuje genisteinem indukovanou radioprotekci u hematopoetického akutního radiačního poškození a byla také zkoumána schopnost této sloučeniny působit jako selektivní agonista estrogenového receptoru, protože se podílí na jejím radioprotektivním mechanismu účinku [55]. Up-regulace ER- a FOXL-2 genisteinem, s přidruženou downregulací exprese TGF-, byla implikována také ve zvrácení radioterapií vyvolaného předčasného ovariálního selhání [56]. Sójové isoflavony jsou celkově náchylné k modifikaci klinických odpovědí na RT a působí jak radiosenzibilizačním, tak radioprotektivním účinkem. V preklinických ortotopických modelech rakoviny prostaty, renálního karcinomu a nemalobuněčného karcinomu plic bylo pozorováno, že sójové isoflavony se zaměřovaly na signální dráhy přežití regulované radiací, jako jsou faktory opravy DNA a transkripční faktory, a nakonec dovedly rakovinné buňky k smrti [57] ].

Zájem o flavonoidy jako radiomodulátory také vedl ke screeningu vlastností semisyntetických léčiv, jako je flavopiridol (obrázek 5). Tato sloučenina, také známá jako alvo-cidib, je flavonový derivát, který vyvinula společnost Sanofi-Aventis, na bázi flavonoidu odvozeného z indické původní rostliny Dysoxylum binectariferum. Flavopiridol, strukturálně založený na flavonoidu (2-chlorofenyl-4-on) a alkaloidu (1-methylpiperazin)skupině, je inhibitor CDK, který vykazuje silnou inhibici CDK1,2,4,6 ,7, a 9. Bylo pozorováno, že sloučenina působí tak, že inhibuje a/nebo opravuje subletální poškození, stejně jako opravu dvouřetězcového zlomu DNA s následnou radiační terapií u maligních nádorů. Ve skutečnosti může zvýšit cytotoxický účinek záření v radiorezistentních nádorových buňkách prostřednictvím dysfunkce p53 nebo nadměrné exprese Bcl{14}} [58].

Snížení škodlivých účinků UV záření je důležitou otázkou, kterou je třeba sledovat, protože UVB (290-320 nm) by mohlo zničit integritu kůže a způsobit apoptózu epidermálních buněk, což by mohlo vést dokonce k rakovině kůže. Je tedy třeba prozkoumat radioprotektivní sloučeniny a antokyany se ukázaly jako cenní kandidáti. Zejména ochranný účinek kyanidin-3-O-glukosidu proti poškození lidských HaCa keratinocytů způsobenému UVB zářením, což je jeden ze škodlivých faktorů prospěšných pro lidskou pokožku. Antokyanin byl schopen snížit intracelulárně reaktivní formy kyslíku, stejně jako hladiny fosfo-p53 a fosfo-ATM/ATR a expresi antiapoptotického proteinového B-buněčného lymfomu 2 [59]. Bylo také prokázáno, že kyanidin-3-O-glukosid potlačil expresi COX{13}} interakcí se signálními cestami MAPK a Akt [60]. Nadměrné ultrafialové (UV) záření způsobuje četné formy poškození kůže. Zapouzdření kyanidin-3--O-glukosidu v nanočásticích chitosanu poskytlo důkaz o účinnosti formulace účinně snižovat poškození epidermis vyvolané UVB zářením prostřednictvím signální dráhy apoptózy zprostředkované p53- [61].

3.2.Ostatní fenoly a polyfenoly s radioprotektivní účinností

Neflavonoidní sloučeniny byly také analyzovány v čisté formě nebo ve směsi. Jednoduché fenoly, jako je vanilin, byly testovány na jejich radioprotektivní aktivitu.

Sloučenina 4-hydroxy-3-methoxybenzaldehyd, lépe známá jako vanilin, široce používaná jako potravinářské aroma, byla dříve zkoumána jako schopná působit proti poškození DNA vyvolanému zářením v plazmidu pBR322, periferní lidské a myší krevní leukocyty a lymfocyty sleziny. Pozitivní účinek byl připisován jeho schopnosti pohlcovat radikály a také modulaci opravy DNA [62]. Antioxidační síla vanilinu zahrnuje také jeho schopnost působit jako lipoperoxidant. Kromě toho sloučenina vykazuje antimutagenní účinky, protože je schopna inhibovat jednovláknové zlomy DNA indukované rentgenovým zářením a UV zářením, chromozomální zlomy a zesíťování DNA. Kromě toho, ačkoli bylo prokázáno, že také podporuje ligaci, opravu a replikaci DNA, jeho klinické použití je omezeno nízkou aktivitou in vivo. Toto zjištění podpořilo syntézu jeho derivátu VND3207, který se v preklinickém screeningu jevil jako radioprotektivní vůči poškození střeva vyvolanému zářením [63]. V tomto kontextu bylo pozorováno, že radioprotekce je způsobena také kromě antiradikálových vlastností sloučeniny modulací aktivovaných hladin p53 ve střevních epiteliálních buňkách. Nedávno Li et al. [64]ukázali, že léčba VND3207 může zvýšit expresi katalytické podjednotky DNA-dependentní proteinkinázy (DNA-PKcs) v lidských lymfoblastoidních buňkách s nebo bez ozáření. Také v tomto případě aktivita enzymu spočívala v opravě dvouřetězcového zlomu DNA.

Hydroxyskořicové kyseliny, které se běžně vyskytují v ovoci, zelenině a nápojích a které jsou strukturálně charakterizovány fenylpropanoidním skeletem pocházejícím z deaminace fenylalaninu a tyrosinu v rostlinách, by se mohly odrazit v radioprotekci. V nedávné době bylo zjištěno, že kyselina kávová zlepšuje předčasné stárnutí hematopoetických kmenových buněk díky své antioxidační kapacitě. Senescence je ve skutečnosti zprostředkována nadprodukcí ROS. Na druhé straně může kyselina kávová působit jako proapoptotické činidlo v buňkách rakoviny tlustého střeva [65]. Také se předpokládalo, že kyselina ferulová je účinná proti náhodnému nebo záměrnému vystavení ionizujícímu záření, a experimentovalo se, že oprava DNA probíhá rychleji u myší léčených kyselinou ferulovou [66].

Mezi hydroxycinnamoylovými deriváty bránila kyselina chlorogenová nestabilitě genomu vyvolané rentgenovým zářením v netumorogenních lidských krevních lymfocytech [67]. Kromě toho léčba tímto depsidem v dávce rovné 200 mg/kg hodinu před ozářením vysokými dávkami y-záření podpořila přežití zvířat[68]. Byla studována i radioprotektivní schopnost fenethylesterů kyseliny kávové, které jsou v propolisu hojně zastoupeny a jedná se o prevenci oxidativního a nitrosativního poškození vyvolaného zářením [69]. V jiné studii bylo zjištěno, že fenethylester kyseliny kávové působí jako radioprotektor i radiosenzitizér, což znamená, že může modulovat radiační odpověď sledováním různých mechanismů v závislosti na typu tkáně [70].

Kyselina rozmarinová, depsid kyseliny kávové a 3,4-dihydroxyfenyl mléčné kyseliny, při podávání v dávce 100 mg/kg podporovala obnovu buněk periferní krve u ozářených myší |71]. Jeho schopnost byla také porovnána se schopností vykazované kyselinou karnosovou a karnosolem, dvěma aromatickými diterpeny, vybavenými antioxidačními a antimikrobiálními vlastnostmi, stejně izolovanými z byliny rozmarýnu. Radioprotektivní účinky proti ozáření byly skutečně v pořadí kyselina karnosová > kyselina rozmarinová Větší nebo rovny karnosolu 【72】. Výzkum radioprotekce věnuje zvláštní pozornost kurkuminu, o jehož antioxidačních a protizánětlivých vlastnostech je dobře známo, že se zaměřuje na více signálních molekul [73].

Bylo prokázáno, že diferuloylmethan zmírňuje radiačně indukovanou plicní fibrózu [74]. Jeho účinek byl prostřednictvím up-regulace cytoprotektivní hem oxygenázy 1. Kromě toho, protože oxidační stres je zapojen do radiační neuronopatie, byla detekována inhibice radiací indukovaných reaktivních forem kyslíku v primárních buňkách myších plic. Preventivní výsledek kurkuminu byl také v pohárkových buňkách ilea [75 l a na délce života Drosophila melanogaster [76]. Inhibice transkripčního faktoru NF-KB je hlavním mechanismem účinku kurkuminu a účastní se také radiosenzibilizace na bázi kurkuminu [77].

Nedávné poznatky naznačují schopnost předběžné léčby kurkuminem zabránit oxidativnímu poškození kůže vyvolanému radioterapií prostřednictvím zvýšení CAT, SOD a GSH-Px[78]. Nízká biologická dostupnost kurkuminu v důsledku špatné absorpce, rychlého metabolismu a rychlé systémové eliminace [79] byla skutečně pečlivě zohledněna při zkoumání přístupů zaměřených na zachování jeho funkčnosti. V této souvislosti došlo k formulaci liposomů zapouzdřených s kurkuminem v nanoměřítku [80] nebo návrhu nanočástic na bázi kurkuminu konjugovaného s albuminem. Konkrétně bylo odhadováno zlepšení radioprotekce nanočástic na bázi konjugovaného albuminu v buňkách HHF-2 ozářených rentgenovým zářením, přičemž bylo zjištěno, že nanočástice s kurkuminem v koncentraci 50 ug/ml vyvolaly 2{14}}násobný nárůst buněk životaschopnost s ohledem na buňky, které podstoupily pouze rentgenové ozáření [81].

Tabulka 1 shrnuje literární údaje pro všechny fenolické a polyfenolické sloučeniny, které byly brány v úvahu ve výše uvedené diskusi, seřazené abecedně, s podrobnostmi o studovaném modelu (in vitro nebo in vivo), použité dávce a hlavním protektivním účinku (účincích).

4. Bioaktivní rostlinné extrakty v radioprotekci: stále nedoceněné téma

Rostlinné extraktymají nekonečná terapeutika, jako jsou protirakovinná, antioxidační, antimikrobiální, protizánětlivá a analgetická. Podle Světové zdravotnické organizace (WHO) asi 80 procent lidí na celém světě používá tradiční medicínu pro potřeby primární zdravotní péče [82]. V 91 zemích existuje téměř 20000 léčivých rostlin, které obsahují širokou škálu látek, které lze použít k různým terapeutickým účelům. U různých rostlinných extraktů bohatých na fenoly a polyfenoly a/nebo jiné specializované metabolity (např. karotenoidy, sloučeniny síry) byly zkoumány jejich radioprotektivní účinky a byly navrženy potenciální mechanismy účinku.

I když byla navržena slibná účinnost, literární údaje často postrádají podrobné analýzy chemického složení a standardizaci, což snižuje reprodukovatelnost údajů.

Aktivity vradiační ochranajak byly hodnoceny v extraktech získaných z léčivých rostlin, široce používaných v doplňkové a alternativní medicíně, nebo z potravinářských rostlin, jsou uvedeny níže. Alkoholový extrakt z rostliny Ageratum conyzoides byl schopen chránit mortalitu u myší vystavených 10 Gy záření. V souladu s tím byla dávka až 3 000 mg kg-I připisována netoxické koncentraci, což naznačuje, že radioprotekce poskytovaná Ageratum conyzoides může být částečně způsobena vychytáváním reaktivních forem kyslíku indukovaným ionizujícím zářením [83].

Výzkum extraktů z pěti léčivých rostlin včetně Adhatoda vasica, Amaranthus paniculatus, Brassica compestris, Mentha piperita a Spirulina fusiformis ukázal, že antioxidační kapacity těchto rostlinných extraktů mohou být zodpovědné za radioprotektivní kapacity [84]. Podle této studie hrají hlavní chemické složky klíčovou roli v radiační ochraně. Těmito sloučeninami byly vakcína, Version One, betain, vitamín C, -karoten a vasakin v Adhatoda wasica; proteiny, vitamíny (C a E), provitamin A a riboflavin v Amaranthus paniculatus; allyl isothiokyanát, glukosinoláty, indoly v Brassica compestris a proteiny, přírodní vitamíny (-karoten) a SOD ve Spirulina fusiformis.

V savčích buňkách bylo navrženo několik cest ochrany před ionizujícím zářením [85]. Tyto mechanismy zahrnují vychytávání volných radikálů prostřednictvím inhibice reaktivních forem kyslíku, stejně jako darování atomu vodíku [86,87]. Lze konstatovat, že fenolické sloučeniny mohou díky svým antioxidačním aktivitám působit jako lapače volných radikálů a podobně jako radioprotektory [84]. Nedávno se ukázalo, že vodný extrakt z kultivaru jihoitalské třešně, tvořený chlorogenovými kyselinami a flavonoidy spolu s jednoduchými sacharidy a polyoly, vykazuje radiomodulační chování proti buněčné linii neuroblastomu SH-SY5Y. Ve skutečnosti v nízkých dávkách působil jako radioprotektor, zatímco ve vysokých dávkách zesiloval cytotoxické účinky v důsledku radiační expozice [88].

List Olea europaea je bohatým zdrojem fenolů apolyfenoly, jehož radioprotektivní potenciál byl okrajově zkoumán při léčbě před UV zářením a po něm [89]. Byly zjištěny antiklastogenní a antiradikálové aktivity extraktu z olivových listů, které představovaly 24,5 procenta v oleuropeinu, 1,5 procenta v hydroxytyrosolu a téměř 3 procenta u flavonových-7-glukosidů a 1 procento u verbascosidu. Byly také stanoveny účinky čistého oleuropeinu na radiační odpověď u karcinomu nosohltanu [90]. Kyselina oleanolová a kyselina ursolová, dvě triterpenové kyseliny z plodů oliv a dalších dietních produktů, by mohly po ozáření inhibovat růst nádoru a modifikovat hematopoézní kmenové buňky (HSC) [91]. Navíc byla protinádorová aktivita prováděna souhrou kyseliny oleanolové a kyseliny ursolové, takže mohly částečně působit jako protirakovinné látky a navíc snižovat poškození hematopoetické tkáně po radioterapii [91,92]. Radioprotekce jablečnými polyfenoly byla také zkoumána prostřednictvím studií in vitro, jejichž cílem bylo objasnit schopnost polyfenolu vychytávat volné radikály [93].

Rheum palmatum L. a jeho hlavní sloučenina emodin (6-methyl-13,8-trihydroxyanthrachinon) byly radioprotektivní proti y-paprskům. Mechanismus účinku Emodinu je nějakým způsobem takový, že hladiny celkových thiolů, jako je glutathion a produkty peroxidace lipidů, byly sníženy. Dále měření antioxidačních enzymů jazyka, glutathionperoxidázy, glutathion-S-transferázy, -glutamyltransferázy a glukózo-6-fosfatázy odhalilo zlepšení hladin buněčných thiolů a antioxidačních enzymů v séru diabetických myší ozářených gama zářením s léčbou emodinem [94].

Etanolový extrakt z listů Adhatoda vasica L. Nees, známá rostlinná droga v ájurvédské a unani medicíně, vykázal výrazné snížení hladiny kyselé fosfatázy a naopak zvýšení hladiny alkalické fosfatázy. Předléčba Adha-toda také významně prokázala prevenci radiací indukovaného poškození chromozomů v buňkách kostní dřeně. Zůstává však nutností mechanistických studií pro jeho radioprotektivní účinky, stejně jako hlavní složky v jeho extraktu [95]. Extrakt z listu Adhatoda vasica byl také popsán pro ochrannou roli ve slezině švýcarských albínských myší vystavených 6 Gy záření Y [96].

Byla popsána radioprotektivní účinnost extraktu z listů Amaranthus paniculatus [97,98]. Orální podávání extraktů A. paniculatus v dávce 800 mg/kg tělesné hmotnosti myším švýcarským albínům po dobu 15 po sobě jdoucích dnů před expozicí gama záření ukázalo zvýšení endogenních kolonií sleziny a hmotnosti sleziny bez jakýchkoli vedlejších účinků nebo toxicity. Dalšími výsledky byla modulace glutathionu a také peroxidace lipidů [97].

Rodině Lamiaceae se přisuzuje radioprotektorová schopnost s mechanismy zahrnujícími především vychytávání volných radikálů, ochranu před poškozením DNA, snížení peroxidace lipidů a zvýšení hladin aktivity enzymů glutathionu, superoxiddismutázy, katalázy a alkalické fosfatázy [99]. Například Mentha piperita je rostlina patřící do této čeledi, která obsahuje eugenol, kyselinu kávovou, kyselinu rozmarinovou a -tokoferol, které hrají klíčovou roli v protirakovinných a radioprotektivních vlastnostech [84,100].

Byly popsány léčebné a farmakologické vlastnosti aromatických rostlin. Esenciální oleje se mimo jiné používají pro různé aspekty, jako je kosmetika, vůně, pesticidy a nápoje. Vzhledem k tomu, že esenciální oleje jsou známé svými antioxidačními aktivitami a vychytáváním volných radikálů, lze je také považovat za radioprotektory, Ageratum se domnívá, že prokázalo vychytávání DPPH radikálů, stejně jako svou radioprotektivní roli s dávkou 75 mg/kg pro 6-11 Gray on myši. Účinnými látkami v této rostlině jsou polyoxygenované flavonoidy, triterpeny (friedelin), steroly -sitosterol a stigmasterol a alkaloidy (glukosamin a echinát) [83].

Allium cepa, Alium station jsou dvě rostliny z čeledi Liliaceae, které mají antioxidační, antihypertenzní a antihyperglykemické účinky [101]. Alk(en)ylthiosulfáty z cibule a česneku výrazně snížily poškození buněk potkaního hepatomu H4IIE a buněk myšího lymfomu L5178Y ošetřených 10 Gy rentgenového záření [102].

Nedávno byla ověřena radioprotektivní účinnost hydroalkoholového extraktu Pterocarpus san-talinus, malého až středně velkého listnatého stromu patřícího do čeledi Fabaceae [103, na myších BALB/c vystavených Y-záření. Redoxní homeostáza narušená zářením se zlepšila po ošetření extraktem, k čemuž pravděpodobně došlo prostřednictvím upregulace Nrf2, HO-1 a GPX-1p. UHPLC-HRMS/MS analýza extraktu zvýraznila jeho rozmanitost v Santolině, mimo jiné fenoly a flavonoidní sloučeniny [104]. Kromě toho byl hydroalkoholový extrakt Pterocarpus santalinus (PSHE) netoxický a když s ním byly makrofágy RAW264.7 předem ošetřeny, byla pozorována významná inhibice LPS-indukovaných prozánětlivých cytokinů IL-6 a produkce TNF. Bylo zjištěno, že polyfenoly z léčivých rostlin, jako je Sanguisorba officinalis a Erigeron canadiens, jsou schopny snižovat oxidační stres vyvolaný ozářením v normálních lymfocytech pomocí mechanismů ROS a působí jako modifikátor záření pro normální buňky [105]. Extrakt z Lonicera caerulea var. edulis, bohatý na antokyany a intragastricky podávaný myším jednou denně, před celotělovým 5Coy zářením 5 Gy, účinně zpomalil hladiny malondialdehydu a zároveň zvýšil aktivity superoxiddismutázy a glutathionperoxidázy a obsah glutathion GSH v játrech [ 106].

5. Závěry

Během posledních dvou desetiletí byly sekundární metabolity v rostlinách široce považovány za jejich terapeutické vlastnosti jako radioprotektory. Nižší toxicita a cena přírodních produktů se skutečně jeví jako dva klíčové faktory, které tlačí výzkum k prohloubení porozumění mechanismu účinku těchto látek. V literatuře se tedy nachází několik studií zaměřených na jejich roli při působení proti poškození vyvolanému IR. Čisté sloučeniny nebo rostlinné extrakty vykazující aktivitu vychytávání volných radikálů, anti-lipoperoxidanty a redukční vlastnosti jsou převládajícím zájmem a jsou náchylné zasahovat do opravy DNA nebo do obnovy poškození chromozomů.

Zejména (poly)fenoly by mohly představovat cennou alternativu k syntetickým sloučeninám pro použití jako radioprotektivní činidla. Ve skutečnosti, na základě jejich antioxidační/prooxidační účinnosti závislé na dávce, by mohly poskytovat ochranu normálním buňkám, s malou nebo žádnou ochranou nádorových buněk odolných vůči radioterapii. Poskytují tedy dobrý důkaz o možném radiomodulačním působení.

Kromě toho, s ohledem na dietní povahu většiny zkoumaných matric, další velká výhoda by mohla vyplývat z vhodnosti perorálního podávání, které by mohlo být optimální během radioterapie. Až na několik výjimek však dosud dostupná data zůstávají fragmentární a jsou většinou výsledkem studií in vitro, které sice prohlubují chemické a biologické znalosti molekul, ale nenacházejí útěchu v preklinických a/nebo klinických studiích nebo preklinických studiích. u nichž se zejména při hodnocení bioaktivity rostlinného extraktu nepřihlíží k jeho chemickému složení.

Reference

1. Belli, M.; Indovina, L. Odezva živých organismů na prostředí s nízkou radiací a její důsledky v radiační ochraně. Přední. Veřejné zdraví 2020, 8, 601711. [CrossRef]

2. Goodhead, DT Posouzení úlohy mikrodozimetrie v radiobiologii. Radiat. Res. 1982, 91, 45. [CrossRef]

3. Jeggo, P.; Löbrich, M. Odpovědi na poškození DNA vyvolané zářením. Radiat. Prot. Dosim. 2006, 122, 124–127. [CrossRef] [PubMed]

4. Durante, M.; Manti, L. Lidská reakce na prostředí s vysokým pozadím záření na Zemi a ve vesmíru. Adv. Space Res. 2008, 42, 999–1007. [CrossRef]

5. Saha, GB Fyzika a radiobiologie nukleární medicíny; Springer Science & Business Media: Berlín, Heidelberg, Německo, 2012.

6. Varanda, EA; Tavares, DC Radioprotekce: Mechanismy a radioprotektivní látky včetně včelího jedu. J. Venom. Anim. Toxiny 1998, 4, 5–21. [CrossRef]

7. Lomax, ME; Folkes, LK; O'Neill, P. Biologické důsledky poškození DNA vyvolaného zářením: Význam pro radioterapii. Clin. Oncol. 2013, 25, 578–585. [CrossRef]

8. Manti, L.; Braselmann, H.; Calabrese, ML; Massa, R.; Pugliese, M.; Scampoli, P.; Signano, G.; Grossi, G. Účinky modulovaného mikrovlnného záření na frekvenci buněčného telefonu (1,95 GHz) na chromozomové aberace indukované rentgenovým zářením v lidských lymfocytech in vitro. Radiat. Res. 2008, 169, 575–583. [CrossRef]

9. Wong, K.; Delaney, praktický lékař; Barton, MB; Informace, PEKFC Optimální počet radioterapeutických frakcí pro rakovinu založený na důkazech: Užitečný nástroj pro odhad poptávky po radioterapii. Radiother. Oncol. 2015, 119, 145–149. [CrossRef]

10. Johnke, RM; Sattler, JA; Allison, RR Radioprotektivní látky pro radiační terapii: budoucí trendy. Budoucnost. Oncol. 2014, 10, 2345–2357. [CrossRef]

11. Andreassen, CN; Grau, C.; Lindegaard, JC Chemická radioprotekce: Kritický přehled amifostinu jako cytoprotektoru v radioterapii. Semin. Radiat. Oncol. 2003, 13, 62–72. [CrossRef]

12. Obrador, E.; Salvador, R.; Villaescusa, J.; Soriano, J.; Estrela, J.; Montoro, A. Radioprotekce a radiomitigace: Od lavice ke klinické praxi. Biomedicína 2020, 8, 461. [CrossRef]