Výsledky a diskuse: Jednofaktorová optimalizace, profilování těkavého aroma a metabolomika Cistanche Musalais

 

 

 

2 Výsledky a analýza

 

2.1 Jednofaktorové experimenty pro Cistanche Musalais

Jednofaktorové výsledky jsou znázorněny na obrázku 2. Rozpustné pevné látky primárně odrážejí celkové zbytkové cukry a další rozpustné látky zbývající po fermentaci. Čím vyšší je počáteční hladina cukru, tím vyšší jsou konečné zbytkové rozpustné pevné látky. Při stejné počáteční úrovni přidání cukru a Cistanche byly rozpustné pevné látky při 25 stupních mírně nižší než při 22 stupních a 28 stupních. Fermentační aktivita kvasinek je vyšší při 25 stupních, spotřebovává více cukrů; vzhledem k vysoké základní linii cukru však tato spotřeba nemusí významně snížit celkový objem, což vede pouze k malým rozdílům. Chybové úsečky se překrývaly mezi skupinami s přídavkem 3 %, 5 % a 7 % Cistanche bez významných rozdílů, což naznačuje, že úroveň přídavku Cistanche má zanedbatelný vliv na celkové rozpustné pevné látky, které jsou ovlivněny hlavně počátečním cukrem.

 

Cistanche-msalais

 

 

Podrobnosti nabídky Cistanche Musalais

Podpůrná služba Wecistanche-Největší vývozce cistanche v Číně:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

Obsah alkoholu je nejpřímějším ukazatelem účinnosti fermentace; ethanol je hlavním produktem fermentace kvasnicového cukru [10]. Skupina 32 stupňů Bx vykazovala významně vyšší obsah alkoholu než skupiny 26 stupňů Bx a 29 stupňů Bx, protože vyšší počáteční cukr dodává více fermentovatelného substrátu pro produkci více alkoholu. Pod 25 stupňů dosáhl obsah alkoholu vrcholu téměř ve všech počátečních kombinacích cukru a Cistanche, což je v souladu s LI et al. [11]. Příliš nízká teplota (22 stupňů) potlačuje kvasinky, zpomaluje nebo nedokončuje fermentaci; příliš vysoká (28 stupňů) může způsobit předčasný úbytek kvasinek nebo více vedlejších produktů, což také snižuje konečný výtěžek etanolu. Při 25 stupních dosáhl přídavek 7% Cistanche nejvyššího obsahu alkoholu, což naznačuje, že některé složky Cistanche mohou podporovat růst kvasinek a fermentační sílu.

Celková kyselost ovlivňuje pocit v ústech a stabilitu. Kyseliny pocházejí ze surovin a mikrobiálního metabolismu během fermentace. Nadměrná kyselost způsobuje ostré, octové tóny a měla by být kontrolována na nižších úrovních [12]. Celková kyselost při 22 stupních byla významně vyšší než při 25 stupních a 28 stupních, protože 22 stupňů je suboptimální pro bakterie mléčného kvašení (LAB). Nízké teploty silně inhibují růst a metabolismus LAB, takže jablečno-mléčná fermentace (MLF) je velmi pomalá, neúplná nebo dokonce vůbec nezahájená; v důsledku toho zůstává kyselina jablečná nepřeměněna, což zvyšuje naměřenou celkovou kyselost. Naproti tomu 25–28 stupňů je příznivý rozsah pro MLF. LAB jsou zde vysoce aktivní a mohou rychle a důkladně přeměnit kyselinu jablečnou na kyselinu mléčnou [13], což má za následek nižší celkovou kyselost. Účinky počátečního cukru a přidání Cistanche na celkovou kyselost byly celkově méně konzistentní; nicméně 25 stupňů se 7% přídavkem běžně poskytlo mírnou kyselost. Příliš nízká kyselost vede k plochému patru; příliš vysoká dává ostrost – nejlepší je moderování.

Celkové flavonoidy a celkové polyfenoly přímo měří funkční složky a antioxidační kapacitu, pocházející hlavně z přidané Cistanche. Hladina přidání Cistanche byla nejvlivnější: při většině počátečního cukru a teplot měla skupina 7 % nejvyšší obsah flavonoidů a polyfenolů, následovaná 5 % a 3 %. To ukazuje, že zvýšení Cistanche je nejúčinnějším způsobem, jak zlepšit funkčnost produktu. Výkon při 25 stupních byl pro tyto indexy lepší. Vyšší teplota (28 stupňů) může způsobit částečnou degradaci/oxidaci aktivních látek citlivých na teplo; nižší teplota (22 stupňů) může bránit úplné extrakci z matrice. Pro maximalizaci zdravotní hodnoty (celkové množství flavonoidů a polyfenolů) je přidání 7% Cistanche při mírné fermentaci při 25 stupních klíčem k ochraně a účinné extrakci těchto složek.

V souhrnu, optimální podmínky napříč ošetřeními byly: počáteční cukr 32 stupňů Bx, 25 stupňů fermentace a přidání 7 % Cistanche. To vyvažuje účinnost fermentace, kvalitu produktu a funkčnost. Tím se liší od ABUDUREHEMANA et al. [14]. TANG a kol. [15] našli základní funkční mikroby v tradičních Musalais včetně Blautia, Leuconostoc, Lactiplantibacillus, Rhodococcus a Thermoascus; Thermoascus řídí syntézu klíčových metabolitů (glycin, acetamid, monacolin K atd.). Otevřená fermentace s vysokým obsahem cukru zavádí více zdrojů uhlíku, aktivuje sekundární metabolismus a hladina cukru přímo ovlivňuje fenolické biosyntetické cesty (cesta šikimátu obohacená o KEGG). Wen Xiaoli [16] pozoroval, že fenylpropanoidní (shikimátové) dráhy podporují akumulaci fenolických prekurzorů. Prostředí s vysokým obsahem cukru (32 stupňů Bx) podporuje osmotolerantní kvasinky (např. Saccharomyces) a potlačuje kontaminanty. Zatímco tradiční Musalais se při syntéze fenolů spoléhá na Thermoascus [15], v Cistanche Musalais mohou kvasinky přímo využívat fenolické prekurzory z Cistanche k efektivní výrobě fenolických látek [17]. Proto jsou optimální podmínky 32 stupňů Bx, 25 stupňů a 7 % Cistanche. Podle nich byly rozpustné pevné látky (21,9 ± 1,1) %, alkohol (12,6 ± 0,6) % obj., celková kyselost (3,82 ± 0,19) g/l, celkové flavonoidy (0,80 ± 0,01) g/l a polyfenoly (0,60 ± 0,00) g/l.

2.2 Těkavé aromatické sloučeniny v Cistanche Musalais

Vylepšená online doplňková tabulka 1 uvádí reprezentativní složky aroma a relativní obsah v Cistanche Musalais vs. kontrolní Musalais. Celkem bylo identifikováno 38 aromatických sloučenin: 24 esterů, 6 alkoholů, 2 ketony, 2 aldehydy a další.

Estery jsou hlavními přispěvateli k ovocným a vínovým vůním, včetně ethylacetátu, isoamylacetátu a isoamylfenylacetátu. Ethylacetát (ovocný, sladký) byl mnohem vyšší ve skupině B (7 % Cistanche) na 6,418 % oproti skupině A (kontrola) na 2,417 %. Diethyloxalát (aromatický) byl detekován pouze ve skupině B (0,521 %). Estery vznikají z organických kyselin a alkoholů prostřednictvím esteráz [18]. Cistanche může dodávat látky, které podporují esterázovou aktivitu nebo enzymy účastnící se reakcí; jeho přídavek může podporovat růst kvasinek produkujících estery a zároveň potlačovat neesterové producenty. Ve srovnání s A, B ukazuje sedm nových esterů: 2-ethylhexylakrylát, ethylbenzoylformiát, ethylsalicylát, hexylvalerát, ethylmyristát, ethylpalmitoleát a ethyloleát. Ty pravděpodobně vznikly jako specifické mastné nebo aromatické kyseliny z Cistanche, které sloužily jako substráty pro mikrobiální esterifikaci. Některé aktivní složky (např. fenylethanoidové glykosidy, PhG) mohou být štěpeny na cukry a aglykony; aglykony jsou nestabilní a dále se mikrobiálně nebo neenzymaticky transformují na mastné kyseliny, které reagují s alkoholy za vzniku esterů [19]. Isoamyl fenylacetát je klíčovým zdrojem medových a květinových tónů s nízkým prahem; ethylpalmitát plus ethyloktanoát tvoří složené ovocno-mastné aroma [20]. Nízkomolekulární estery a aldehydy jsou kritickými sekundárními aromatickými produkty vznikajícími během fermentace [21] a zvyšují ovocnost Musalais.

Alkoholy jako isobutanol a isoamylalkohol jsou hlavními přispěvateli chuti. Ethanol, isoamylalkohol a isobutanol byly všechny nižší ve skupině B než A. Snížení ethanolu doprovázelo nárůst esterů, což ukazuje, že tok uhlíku se posunul od akumulace alkoholu k biosyntéze esterů – příznivý směr. Vyšší alkoholy pocházejí hlavně z katabolismu aminokyselin s rozvětveným řetězcem (valin, leucin, isoleucin) prostřednictvím Ehrlichovy dráhy [22]. Jejich snížení může naznačovat, že Cistanche potlačil přerůstání příbuzných kmenů nebo moduloval tok aminokyselin. Zatímco středně vyšší alkoholy mohou přidat aroma/tělo, mnohé mají nízké prahové hodnoty a některé chutnají hořce; isobutanol má silnou hořkost [23]. Nižší vyšší alkoholy v Cistanche Musalais tedy mohou zlepšit pohodlí při pití.

Aldehydy, ketony a další sloučeniny byly také detekovány, ale v nižší diverzitě a relativním množství. Skupina B vykazovala 2,5-dihydroxyacetofenon (sladký, květinový), nepřítomný v A, pravděpodobně vzniklý mikrobiální degradací Cistanche PhGs (např. echinakosid, akteosid).

GC–MS ukazuje, že přidání Cistanche významně změnilo profil těkavých látek. Ethylacetát (ovocný, sladký) a ethylpalmitát (ovocný-mastný) byly hlavními přispěvateli ke zvýšené ovocnosti s 6,42 % a 3,75 % v Cistanche Musalais oproti . 2.42 % a 1,18 % v tradičním. Isobutanol (hořký) klesl z 3,98 % na 2,11 %, čímž se snížila hořkost a zlepšila se rovnováha. Nové aromatické sloučeniny, jako je 2,5-dihydroxyacetofenon pravděpodobně pocházející z mikrobiální degradace PhGs, diverzifikují aroma. Celkově přidání Cistanche nasměrovalo fermentaci k produkci žádanějších aromatických esterů.

2.3 Metabolomika Cistanche Musalais

 

2.3.1 Netěkavé metabolity

UPLC–MS/MS s místní knihovnou a veřejnými databázemi identifikovalo 11 tříd sloučenin. Jak je znázorněno na obrázku 3-a, organické heterocykly byly nejhojnější (28,1 % identifikovaného obsahu), následovaly organické kyseliny a deriváty (18,6 %), lipidy a molekuly podobné lipidům (13,8 %), benzenoidy (12,3 %), organické sloučeniny kyslíku (9,6 %), benzylové sloučeniny a polyketidy (7,0 %) organické sloučeniny kaloidů, 2 % kaloidů a dusíkaté látky. (3,3 %), nukleosidy/nukleotidy a analogy (1,9 %) a další (0,8 %).

Organické heterocykly jsou důležité pro chuť vína; mezi složkami ovocného vína jsou klíčovými odoranty furany a pyraziny [24]. Pyraziny mají nízké prahové hodnoty a silný zápach; furany jsou nízkovroucí, vysoce těkavé lipofily kritické pro tvorbu chuti a potenciálně prospěšné pro zdraví [25]. Organické kyseliny a deriváty jsou pro víno nezbytné; jejich hladiny a typy silně ovlivňují chuť, barvu a stabilitu [26]. Organické kyseliny vznikají z cyklu trikarboxylových kyselin (TCA): glukóza tvoří pyruvát enzymaticky; pyruvát je pyruvátdehydrogenázou přeměněn na acetyl-CoA, poté na meziprodukty TCA (citrát, malát, sukcinát). Dále jsme detekovali trigonellin (hypolipidemický a hypoglykemický) a crocin (protirakovinné, protizánětlivé, antioxidační, hepatoprotektivní/choleretické a antidiabetické aktivity).

 

2.3.2 PCA a OPLS-DA pro netěkavé metabolity

Obrázek 3-b ukazuje skóre PCA pro kontrolu (A) a 7% Cistanche (B) na základě všech identifikovaných metabolitů. Dvě hlavní složky vysvětlily ~57,8 % celkového rozptylu (PC1 42.8%, PC2 15.2%), což naznačuje, že zachycují většinu původních informací a představují klíčové rysy mezi léčebnými postupy [27]. Vzorky seskupené do skupin; A a B se oddělily zřetelně, což ukazuje na významné metabolomické rozdíly v důsledku přidání Cistanche a dobré stability systému/spolehlivosti dat.

Obrázek 3-e ukazuje OPLS-DA další rozlišující skupiny a screening různých metabolitů. Všechny body spadaly do 95% intervalu spolehlivosti; A a B byly jasně odděleny, což ukazuje na podstatné rozdíly ve složení a množství netěkavých metabolitů. Proměnné a označení tříd byly rozděleny a navrženy pro rozlišení, což podporuje spolehlivost [28]. Obrázek 3-c ukazuje graf skóre PLS-DA, který zachází s identifikovanými netěkavými látkami jako se závislými proměnnými a s ošetřeními jako s nezávislými proměnnými, odhalující podobný vzorec jako PCA s těsnějším seskupením skupin. Při testování permutace (200krát) byly metriky modelu R2Y=1 a Q2=0.866; po 200 permutacích protínaly R2 a Q2 kladnou osu y s hodnotami na levé straně menší než na pravé straně, což ukazuje na platnost. V PLS-DA byly hodnoty VIP použity k rozlišení příspěvků metabolitů v rámci léčby [30]. Zatížení S-grafu identifikovalo rysy s velkými meziskupinovými rozdíly; větší vzdálenost znamená větší význam. OPLS-DA účinně rozlišil tato dvě vína a poskytl silný základ pro následnou selekci metabolitů.

 

2.3.3 Hierarchické shlukování klíčových diferenciálních metabolitů

Na základě OPLS-DA s VIP > 1 a P < 0,05 bylo identifikováno 230 rozdílných sloučenin: 125 upregulovaných a 64 downregulovaných. Kvůli velkému počtu bylo 50 nejlepších podle množství použito pro hierarchické shlukování. Tepelná mapa (obrázek 3-g) ukazuje každý řádek jako metabolit a každý sloupec jako vzorek [31]; červená znamená vyšší výraz, modrá nižší. Tři replikáty na skupinu vykazovaly podobné barvy, což ukazuje na dobrou reprodukovatelnost a konzistentní trendy. Obrázek 3-g naznačuje, že hroznová šťáva pod mikrobiálním působením produkuje aminokyseliny, glukózu, organické kyseliny, terpeny atd. Tang et al. [15] podrobně popsali přirozenou sukcesi mikrobiálních společenstev (např. Aspergillus, Gluconobacter, kvasinky) a odpovídající změny metabolitů během fermentace Musalais. Skupina A je v souladu s touto inherentní mikrobiální rovnováhou. Cistanche však není inertní; jeho bioaktivní látky (např. PhGs) mohou mít antimikrobiální účinky [32] a narušovat stávající rovnováhu. Izomery mogrosidu (např. izomery mogrolu), crocin B, andrografolid atd. byly vyšší v B (7 %) a nižší v A, pravděpodobně proto, že silná antioxidační kapacita Cistanche (bohatá na PhGs) poskytovala antioxidační prostředí, které snižovalo oxidační degradaci těchto molekul. L(+)-ornitin, L(+)-citrulin a vitamín B7 (biotin) byly nižší v B, ale vyšší v A, což naznačuje, že vnější faktor (Cistanche) narušil původní mikrobiální rovnováhu, potlačil určité funkční kmeny a změnil hlavní metabolické směry. To ukazuje na potenciální funkční výhody Cistanche Musalais ve srovnání s tradičními Musalais.

 

2.3.4 Funkční komponenty

Necílená metabolomika nejen objasnila mechanismy tvorby chuti, ale také identifikovala obohacené bioaktivní složky, které poskytují přímý chemický základ pro vývoj produktu. Trigonellin byl v experimentální skupině významně upregulován s prokázanými hypoglykemickými, hypolipidemickými a neuroprotektivními účinky [33]. Crocin, silný ve vodě rozpustný antioxidant, také významně vzrostl, známý pro protizánětlivé, anxiolytické a potenciální protirakovinné aktivity. Při optimálním procesu (7 % při 25 stupních) dosáhly celkové flavonoidy 0,80 g/l a celkové fenoly 0,60 g/l, což výrazně zvyšuje antioxidační kapacitu oproti tradičnímu produktu. Tato obohacení pocházejí z Cistanche (např. PhGs, polysacharidy) [4–5] a mohou také odrážet mikrobiální biotransformaci a obohacení během fermentace.

 

2.3.5 Sopečný graf klíčových diferenciálních metabolitů

Graf sopky vizualizuje změny v množství metabolitů. Za použití VIP většího nebo rovného 1 a P < 0,05 bylo identifikováno 230 různých sloučenin: 125 upregulovaných a 64 downregulovaných (obrázek 3-e). Na ose x je log2násobek změny a na ose y je -log10 P. Významně upregulované metabolity s FC větším nebo rovným 1 a P < 0,05 jsou červené; významně downregulované s FC Menší nebo rovno 1 a P < 0,05 jsou modré; nevýznamné jsou šedé. Prvních 20 s nejvýraznějšími změnami pod P < 0,05 a VIP > 1 je uvedeno v doplňkové tabulce 2. Největší upregulaci zaznamenal glykosidový derivát (Log2FC=2.60; FC=6.06), glykosid odvozený od fenylethanoidního glykosidu, což silně naznačuje přímý původ z charakteristických složek Cistanche. Cistanche je bohatý na PhG, jako je echinakosid a akteosid; během fermentace mohou tyto prototypy podléhat hydrolýze, přenosu glykosylu nebo přeskupení za vzniku takových nových glykosidových derivátů. Diferenciální metabolity zahrnovaly více aminokyselin a derivátů – např. (E)-N5-(1-aminoethyliden)-L-ornitin (Log2FC=1.76, nahoru), trigonelloxazolidin (Log2FC=1.80, nahoru) a ethylester methionin (Log2FC =) –1,46 konzistentní s T-1,46 [15], kteří poznamenali, že biosyntéza aminokyselin v prostředí s vysokým obsahem cukru podporuje tvorbu chuti. Přidání cistanche může poskytnout další dusík nebo prekurzory, nejen že zvýší tok aminokyselinovými drahami, ale směřuje ke specifickým konverzím, které poskytují výrazné aromatické sloučeniny odvozené od aminokyselin.

 

2.3.6 Obohacení dráhy KEGG

KEGG obohacení o klíčové diferenciální metabolity (obrázek 3-i) zvýraznilo 20 hlavních drah: ABC transportéry, biosyntéza aminokyselin, biosyntéza argininu, purinový metabolismus, biosyntéza aminoacyl-tRNA, metabolismus D-aminokyseliny, metabolismus tryptofanu, metabolismus argininu a prolinu, metabolické dráhy, metabolismus tropan/piperidin-aminokaloidů, metabolismus tropan/piperidin-aminokaloidů biosyntéza flavonoidů, metabolismus 2-oxokarboxylových kyselin, biosyntéza glukosinolátů, biosyntéza flavonů a flavonolů, metabolismus kofeinu, degradace lysinu, metabolismus alaninu/aspartátu/glutamátu, metabolismus pyrimidinu a metabolismus vitaminu B6. Barvy: modrá pro metabolismus; oranžová pro zpracování informací o životním prostředí; zelená pro zpracování genetické informace. Mezi nimi byly významné transportéry ABC, biosyntéza aminokyselin, biosyntéza argininu, metabolismus purinů, biosyntéza aminoacyl-tRNA a metabolismus D-aminokyselin s obohaceným počtem sloučenin 138, 128, 23, 101 a 52, v tomto pořadí. ABC transportéry zprostředkovávají jádrový transmembránový transport v mikrobiálních membránách, poháněný hydrolýzou ATP k přesunu substrátů (cukry, aminokyseliny, antibiotika), což přímo ovlivňuje získávání živin a adaptaci prostředí [34]. Gluconobacter účinně vychytává etanol a řídí octovou fermentaci prostřednictvím transportérů ABC [35]. Biosyntéza aminoacyl-tRNA je klíčovým krokem omezujícím rychlost translace. Metabolismus aminokyselin hraje zásadní roli při kvašení ovoce a vína; jeho produkty se mohou přeměnit na charakteristické aromatické sloučeniny, jako je geraniol, což z něj činí klíčovou cestu pro tvorbu aroma [36].

 

3 Závěry

Použití červených hroznů Hotan aCistancheOptimální proces pro Cistanche Musalais byl definován jako počáteční cukr 32 stupňů Bx, teplota fermentace 25 stupňů a přídavek 7 % Cistanche, čímž se získá alkohol (12,6 ± 0,6) % obj., celková kyselost (3,82 ± 0,19) g/L, celkové flavonoidy (0,80 ± 6,01 g/ls 0,80 ± 0,1 g/l) 0,00 g/l. GC–MS identifikovalo 38 aromatických sloučenin (24 esterů, 6 alkoholů, 2 ketony, 2 aldehydy, další). Ve srovnání s tradičním Musalais byly klíčové estery významně vyšší u Cistanche, např. ethylacetát (6,42 % vs. . 2.42 %) a ethylpalmitát (3,75 % vs Metabolomics identifikoval 230 významně odlišných metabolitů (VIP větší nebo rovno 1, P < 0,05): 125 upregulovaných (např. izomery mogrolu, crocin B) a 64 downregulovaných (např. L(+)-ornitin, L(+)-citrulin). Obohacení KEGG ukázalo primární shlukování v ABC transportérech a drahách biosyntézy aminokyselin. Funkční aktivní látky včetně trigonelinu, crocinu, flavonoidů a polyfenolů byly v Cistanche Musalais významně obohaceny, což naznačuje potenciální zdravotní přínosy; biosyntéza aminokyselin hraje důležitou roli při formování charakteristické chuti. Pro hlubší přiřazení klíčových odorantů by budoucí práce měla zahrnovat plynovou chromatografii – olfaktometrii (GC–O) ke stanovení pachové aktivity/příspěvku (např. FD faktory) hojných těkavých látek a cílenou kvantitativní MS (např. MRM) pro absolutní kvantifikaci trigonelinu, crocinu atd., aby bylo možné lépe vyhodnotit zdravotní hodnotu.

Původ externích spektrálních/metabolitových zdrojů použitých pro identifikaci metabolitů (podle databází uvedených v metodách 1.3.8.3):

Human Metabolome Database (HMDB 5.0): https://hmdb.ca/ – komplexní, volně dostupná databáze s 220 945 záznamy metabolitů včetně chemických, klinických a biochemických dat; podporuje vyhledávání textu, sekvence, struktury, MS a NMR; spojené s KEGG, PubChem, MetaCyc, ChEBI, PDB, UniProt a GenBank. Přidružené databáze: DrugBank, T3DB, SMPDB, FooDB.

LIPIDOVÉ MAPY: https://www.lipidmaps.org/ – bezplatný zdroj lipidomiky s otevřeným přístupem. LMSD nyní přesahuje 50 000 upravených lipidových struktur s podrobnou klasifikací, křížovými vazbami a původem; poskytuje analýzu MS, kreslení struktury, spektrální databáze, cesty a nástroje nomenklatury/klasifikace.

mzCloud – Advanced Mass Spectral Database: https://www.mzcloud.org/ – podporuje vyhledávání spektra, struktury, substruktury, stromu a m/z. Aktuální měřítko: 32 330 sloučenin, 51 002 stromů a 16 531 567 spekter (+ nárůst v roce 2024). Optimalizováno pro stolní prohlížeče Firefox/Chrome. Copyright © 2013–2025 HighChem LLC.

 

Reference

[18] Fan GS, Wu QH, Liu PX a kol. Pokrok ve výzkumu úlohy lipázy v syntéze esterů v Baijiu. Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology. 2021;21(1):351–360.
[19] Xue J, Wang YA, Jia XH a kol. Klasifikace a pokrok ve výzkumu fenylethanoidních glykosidů. Journal of Pharmaceutical Research. 2018;37(5):282–290.
[20] Liu CY, Zhao XQ, Kong LR, a kol. Vliv morušové pálenky na těkavé chuťové složky a kvalitu vzduchem sušených uzenin. Food Science. 2023;44(6):244–253.
[21] Ren YT, Qiao ML, Sun ZY a kol. Zákon tvorby vyšších alkoholů při fermentaci světlého Baijiu. Food and Fermentation Industries. 2023;49(4):38–44.
[22] Cao WY, Shu N, Yang YM a kol. Komplexní hodnocení devíti odrůd révy vinné na základě základních fyzikálních a chemických ukazatelů, barvy a těkavých látek. Výzkumná zpráva. 2023;13(2):121–144.
[23] Zhou R, Yuan Q, Jin XY a kol. Analýza aromatických složek silné omáčky s příchutí Baijiu. China Brewing. 2020;39(7):137–143.
[24] Luo Y, Kong LH, Xue RQ a kol. Hořkost v alkoholických nápojích: profily vnímání, složky a přispěvatelé. Trends in Food Science and Technology. 2020;96:222–232.
[25] Huang YH, Kao TH, Chen BH. Vývoj metody GC–MS/MS spojené s HS–SPME–arrow pro studium tvorby furanu a 10 derivátů v modelových systémech a komerčních potravinách. Food Chemistry. 2022;395:133572.
[26] Robles A, Fabjanowicz M, Chmiel T, et al. Stanovení a identifikace organických kyselin ve vzorcích vína: problémy a výzvy. TrAC Trends in Analytical Chemistry. 2019;120:115630.
[27] Shao SX, Xu MT, Lin YP a kol. Diferenciální analýza aromatických složek čaje Huangguanyin oolong z různých geografických původů pomocí elektronického nosu a HS–SPME–GC–MS. Food Science. 2023;44(4):232–239.
[28] Ni RJ, Zhan P, Tian HL. Účinky doby smažení na těkavé aromatické sloučeniny v oleji ze smažené papriky, jak byly analyzovány pomocí GC-IMS a multivariační statistiky. Food Science. 2022;43(6):279–286.
[29] Jin WG, Liu JX, Sun HY a kol. Charakterizace těkavých organických sloučenin oleje z obřího mloka falšovaného arašídovým olejem pomocí GC–IMS a chemometrie. Food Science. 2023;44(10):368–376.
[30] Zhang Y, Tong XY, Chen BJ a kol. HS–GC–IMS pro otisky prstů a variace chuti v oplodí Citrus reticulata během skladování s různou fermentací Aspergillus niger. Chemie potravin. 2023;18:100653.
[31] Lu YA, Liu SJ, Lin LM a kol. Diferenciální metabolity Prunella vulgaris v různých fázích na základě UPLC–MS/MS. China Journal of Chinese Materia Medica. 2024;49(10):2734–2744.
[32] Chen L, Jiang XQ, Yuan T a kol. Účinek a mechanismy čínské medicíny a jejích účinných látek při zvyšování antibakteriálních aktivit antibiotik: Přehled. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae. 2025;31(11):305–313.
[33] Yang SQ, Liu W, Song MR a kol. Účinky trigonelinu na invazi a migraci buněk renálního karcinomu prostřednictvím NF-κB/MMP-9 signalizace. Chinese Journal of Geriatrics. 2024;44(8):1998–2004.