Změny v hladinách fenylethanoidních glykosidů, antioxidační aktivitě a dalších kvalitativních vlastnostech v plátcích Cistanche Deserticola zpracováním v páře

Fang Peng, Jun Chen, Xia Wang, Changqing Xu, Tonguing Liu a Rong Xu

Institut vývoje léčivých rostlin, Čínská akademie lékařských věd, Peking Union Medical College; 151 Malianwa Road, Peking 100193, Čína

Plantáž bylin Ningxia Yongning Herb Cistanche; Yonghuang Road, Yinchuan 750100, Čína.

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

Abstraktní

Zkoumali jsme vliv doby napařování naCistanchedeserticola YC MA řezy analýzou hladin bioaktivních sloučenin, antioxidační aktivity a úbytku hmotnosti ve srovnání s čerstvými, přímo sušenými a blanšírovanými vzorky. Čerstvé vzorky měly extrémně nízké hladiny fenylethanoidových glykosidů a antioxidační aktivitu. Nižší úrovně úbytku hmotnosti a vyšší množství rozpustných cukrů, polysacharidů a zředěných extraktů rozpustných v ethanolu byly zjištěny, když byly plátky napařeny spíše než blanšírovány. Plátky napařené po dobu 5 a 7 minut obsahovaly významně (str<0.05) higher="" amounts="" of="" acteoside,="" isoacteoside,="" and="" 2′-acetylacteoside="" than="" directly="" oven-dried="" samples.="" however,="" soluble="" sugars="" and="" dilute="" ethanol-soluble="" extracts="" decreased="" gradually="" throughout="" the="" steaming="" process.="" the="" concentration="" of="" polysaccharides="" fluctuated="" during="" the="" steaming="" process.="" the="" steaming="" time="" had="" a="" consistent="" effect="" on="" antioxidant="" properties="" evaluated="" by="" oxygen="" radical="" absorbance="" capacity="" (orac),="" 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl="" free="" radical="" scavenging="" activity="" (dpph),="" and="" ferric="" reducing="" antioxidant="" property="" (frap),="" showing="" a="" significant="" increase="" and="" reaching="" 108.62,="" 23.08,="" and="" 11.68="" micromoles="" trolox="" per="" mass="" of="" fresh="" slice="" (μmol="" te/g="" fw),="" respectively.="" the="" present="" results="" suggest="" that="" fresh-cut="" c.="" deserticola="" can="" be="" subjected="" to="" approximately="" 5–7="" min="" of="" steaming="" to="" improve="" phenylethanoid="" glycoside="" levels="" and="" antioxidant="" activity,="" while="" still="" preserving="" the="" amounts="" of="" soluble="" sugars,="" polysaccharides,="" and="" dilute="" ethanol-soluble="" extracts.="" these="" results="" would="" help="" to="" improve="" the="" production="" process="" for="" fresh-cut="" chinese="" medicines="" and="" increase="" the="" understanding="" of="" their="" associated="" health="">

cistanchebělící účinek na pokožku až antioxidační

Klíčová slova: napařování;Cistanchedeserticola; fenylethanoidový glykosid; antioxidační aktivita; čerstvě řezané

CistanchedeserticolaYC MA (Orobanchaceae), běžně známý jako „Pouštní ženšen“, se již dlouho používá jako tonikum v Číně a Japonsku. Masité stonky jsou nakrájeny na plátky pro léčbu různých onemocnění, včetně impotence, ženské neplodnosti, pocitu chladu v bedrech a kolenou a geriatrické zácpy. V posledních letech několik studií odhalilo jeho účinnost na experimentálních modelech, které souvisejí s neurologickými poruchami, zejména Alzheimerovou chorobou a Parkinsonovou chorobou.1) Trh se zdravou výživou se o tento užitečný přírodní doplněk stravy stále více zajímá. Víno a čaj ze šťavnatých stonků jsou oblíbené zdravé potraviny, které zmírňují únavu a zlepšují učení a paměť. C. deserticola je bohatým zdrojem fenylethanoidních glykosidů, polysacharidů a rozpustných cukrů, které vykazují především antioxidační, 2,3) neuroprotektivní,4,5) hepatoprotektivní,6) imunitu posilující,7–9) laxativní,10) a antioxidační -stárnutí11) účinky, mezi nimiž je antioxidační aktivita považována za základ ostatních farmakologických účinků. Echinakosid a akteosid jsou reprezentativní markery pro kontrolu kvalityCistanchesHerbav čínském lékopisu (vydání z roku 2015), díky jejich převládajícímu množství, rodové specifičnosti a pozoruhodným biologickým aktivitám. Stanovení zředěných extraktů rozpustných v ethanolu je rovněž obsaženo v kontrole kvalityCistanchesHerba. Cistanosid A, isoacteosid a 2'-acetylacteosid byly také hlášeny jako hojné v C. deserticola. 12)

Rostoucí poptávka po C. deserticola značně podnítila její pěstování. C. deserticola patří k vytrvalé parazitické bylině, která roste především v suchých nebo polosuchých oblastech severozápadní Číny.13) Ihned po sklizni je nutné tyto vysoce cukernaté, těžké syrové stonky usušit, aby se zabránilo ztrátě obsahu živin a zkažení. Čerstvé stonky obvykle obsahují 75–85 procent vody a pro jejich uchování by hladina vody měla být snížena pod 10 procent. Ve většiněCistanche-producentské oblasti se celé čerstvé stonky umístí na otevřené pole po dobu asi 2 měsíců za účelem předběžného sušení. Vysušený materiál se pak převáží do továren, namočí se do vody, nakrájí se na plátky a znovu se suší. Zpoždění zpracování plátků může být způsobeno nedostatečně vzdělanými nebo špatně vybavenými zemědělci. Hlavním problémem je však nedostatek znalostí a technologií umožňujících efektivní výrobní proces.

Vysokotepelné ošetření se široce používá u zeleniny a ovoce a může inhibovat růst mikrobů a prodloužit trvanlivost.14–16) Může však také způsobit změny ve vzhledu a složení živin. Bylo prokázáno, že některé bioaktivní složky,17) a farmakologické aktivity, jako je antioxidační aktivita,18) se v léčivých bylinách po napařování zvyšují. Proto může vaření C. deserticola v páře zlepšit několik zdravotních přínosů. Použití vaření v páře nebo blanšírování u čerstvě nakrájené C. deserticola také zvyšuje množství echinakosidu a akteosidu.19,20) Nebylo však provedeno žádné podrobné zkoumání, které by porovnalo změny v bioaktivních sloučeninách a antioxidační aktivitě. čerstvě nakrájené C. deserticola během procesu vaření v páře. Cílem této studie proto bylo prozkoumat vliv doby vaření v páře (1, 3, 5, 7 min) na počet fenylethanoidových glykosidů, polysacharidů, rozpustných cukrů, zředěných extraktů rozpustných v ethanolu, úbytek hmotnosti a antioxidační vlastnosti v C Plátky deserticoly ve srovnání se třemi dalšími skupinami (čerstvé, přímo sušené v troubě, blanšírované).

cistanchemají účinky bělení pokožky aantioxidační

Experimentální

Chemikálie

Chemikálie analytické kvality: methanol, ethanol, D-glukóza, kyselina sírová, hydrogenfosforečnan draselný a monohydrát dihydrogenfosforečnanu draselného byly získány od společnosti Beijing Chemical Works (Peking, Čína). Kyselina mravenčí a fenol byly zakoupeny od Sinopharm Chemical Reagent Co. (Shanghai, Čína). Methanol čistoty pro HPLC byl zakoupen od Fisher Scientific (Toronto, Kanada). Deionizovaná voda byla získána pomocí systému Milli-Q (Millipore Corp., Bedford, MA, USA). 2,2-difenyl-1-pikrylhydrazyl (DPPH) poskytla společnost Alfa Aesar (Ward Hill, MA, USA) a 2,2′-azobis(2-amino-propan) dihydrochlorid (AAPH ) od Adamas-beta (Shanghai, Čína). 6-Methoxy-2,5,7,8-te-tramethylchroman-2-karboxylová kyselina (Trolox), 2,6-di-tercbutyl-p-kresol ( BHT) a fluorescein (sodná sůl) (FL) byly získány od TCI (Tokio, Japonsko) a souprava pro stanovení celkové antioxidační kapacity (T-AOC) od Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, Čína). Standardy pro akteosid (111530-200706) a echinakosid (111670-200503) byly zakoupeny od Národního institutu pro kontrolu potravin a léčiv (Peking, Čína). Standardy pro 2'-acetylakteosid, cistanosid A a isoakteosid byly prezentovány jako dar od Dr. Zhiguo Ma. Čistota každé referenční sloučeniny byla stanovena na více než 98 procent normalizací plochy píku detekované detektorem HPLC-diode array (DAD).

Ošetření materiálu a stanovení hubnutí

Vzorky byly odebrány na jaře 2014 na plantáži NingxiaCistanchesHerba (106.08 stupně N, 38,24 stupně E, 1124,2 m) v Číně a identifikovaný jedním z nás (prof. Jun Chen). Vzorek voucheru byl uložen v Institutu vývoje léčivých rostlin, Čínská akademie lékařských věd, Peking Union Medical College. Náhodně byly odebrány asi 3 kg stonků C. deserticola a opláchnuty čistou vodou. Části květenství byly odstraněny keramickým nožem a stonky byly nakrájeny na 3 mm plátky. Každý 10{{30}} g řezu byla změřena hmotnost (W0) jako replikát. Bylo hodnoceno sedm experimentálních ošetření se třemi replikáty na ošetření. Pro vaření v páře byly čtyři dávky plátků vloženy do vodní páry o teplotě 93 stupňů na 1, 3, 5 nebo 7 minut. Pro blanšírování bylo jedno ošetření vloženo do vody o teplotě 96 stupňů na 5 minut. Čerstvé a přímo v troubě sušené plátky byly další dvě ošetření uvedená v tomto experimentu. Ošetřené plátky byly zváženy (W1) a sušeny při 60 stupních v sušárně. Vysušené plátky byly poté znovu zváženy (W2), rozemlety a rozmělněny na prášek (65 mesh). Vzorkové prášky byly skladovány ve vakuových sáčcích při -20 stupních až do dne analýzy. Ztráta hmotnosti byla vypočtena následovně: úbytek hmotnosti po vysokotepelném ošetření ( procenta )=[(W0−W1)/ W0]×100, úbytek hmotnosti po sušení v troubě ( procenta )=[(W0 −W2)/W0]× 100, kde W0 je počáteční hmotnost a W1 a W2 jsou hmotnosti naměřené po vysokotepelném zpracování a sušení v peci.

Fenylethanoidní glykosidy a antioxidační vlastnosti

Extrakce vzorků

{{0}}.5-g práškový vzorek byl extrahován 25 ml 60% methanolového vodného roztoku pomocí ultrazvuku KQ-250DE (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Jiangsu, Čína) při 40 kHz, 200 W a 40 stupních po dobu 30 minut. Po extrakci byly ošetřené vzorky centrifugovány po dobu 10 minut při 4600 x g (TD5; Hunan Herexi Instrument & Equipment Co., Hunan, Čína). Supernatant byl filtrován přes filtr o velikosti pórů 0,{14}} um pro následné analýzy.

Stanovení fenylethanoidních glykosidů

Stanovení echinakosidu, cistanosidu A, akteosidu, isoakteosidu a 2'-acetylakteosidu ze vzorků C. deserticola bylo provedeno způsobem popsaným v Ma et al.21) s určitými modifikacemi. Analýza byla provedena pomocí přístroje 2695–2996 HPLC (Waters Corp., Milford, MA, USA) s ultrafialovou absorpcí monitorovanou při 330 nm. Separace byla provedena na koloně Merck Purospher® Star RP-C18 (250 mm x 4,6 mm, 5 um) provozované při 30 stupních. Mobilní fáze při průtoku 1 ml/min sestávala z rozpouštědla A (methanol) a rozpouštědla B ({{30}}.1% vodná kyselina mravenčí, v/v). Gradientová eluce probíhala následovně: 28 procent A (0–10 min), 28–38 procent A (10–30 min), 38 procent A (30–45 min) a injekční objem byl 10 ul. Smíšený roztok obsahující pět referenčních standardů byl připraven rozpuštěním referenčních standardů v 60% methanolu na konečnou koncentraci 0,20 mg/ml pro echinakosid, 0,21 mg/ml pro akteosid, 0,20 mg/ml pro 2'-acetylakteosid, 0,05 mg/ ml pro cistanosid A a 0,05 mg/ml pro isoakteosid. Roztok byl poté zředěn na sedm různých koncentrací, aby se vytvořily kalibrační křivky. Koncentrace fenylethanoidových glykosidů vzorků byla vyjádřena v g/kg čerstvé hmotnosti (FW).

Stanovení kyslíkové radikálové absorpční kapacity (ORAC)

Test ORAC byl proveden tak, jak je popsáno v Huang et al.22) s některými modifikacemi. Jako pozitivní kontrola byl použit syntetický antioxidant BHT. Stručně řečeno, 25 µl zředěných extraktů vzorků a 16 0 µL FL bylo smícháno v 96-jamkové mikrotitrační destičce. Směs byla inkubována při 37 stupních po dobu 15 minut, před přidáním 20 ul AAPH. Fluorescence byla monitorována pomocí 485 nm (excitace) a 520 nm (emise) v 3-min intervalech po dobu 72 minut pomocí Fluoroskan Ascent FL (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Jako referenční standard byl použit Trolox (2,5–50,0 µmol/L) a výsledky byly vyjádřeny v mikromolech Troloxu na hmotnost čerstvého plátku, µmol TE/g FW.

Stanovení 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl Free Radical Scavenging Activity (DPPH)

Test DPPH byl proveden tak, jak je popsáno v Goupy et al.23) s některými modifikacemi. Jako pozitivní kontrola byl použit syntetický antioxidant BHT. Stručně řečeno, 1 ml zředěného extraktu vzorku byl smíchán s 1 ml roztoku 0,2 mmol/l DPPH v methanolu. Roztoky byly udržovány ve tmě při 25 stupních po dobu 90 min, poté byla měřena absorbance při 517 nm. Jako referenční standard byl použit Trolox (4,0–119,5 µmol/L) a výsledky byly vyjádřeny jako mikromol Troloxu na hmotnost čerstvého plátku, µmol TE/g FW.

Stanovení vlastností antioxidantu redukujícího železo (FRAP)

Test FRAP byl proveden pomocí testovací soupravy T-AOC podle pokynů výrobce.

cistanchemají funkci bělení pokožky aantioxidační

Rozpustné cukry a polysacharidy

Příprava vzorků rozpustných cukrů

0.5-g práškový vzorek byl extrahován 25 ml 80% vodného roztoku ethanolu pomocí ultrazvuku KQ-250DE při 40 kHz, 150 W a 80 stupních po dobu 30 minut. První extrakční roztok byl zfiltrován a přenesen do 50-ml odměrné baňky. Sedimenty byly znovu extrahovány a filtrát byl spojen s prvním extrakčním roztokem v 50-ml odměrné baňce a naplněn po značku 80% vodným roztokem ethanolu. Poté byl 1 ml tohoto roztoku odpipetován do 10-ml skleněné zkumavky, aby se odpařil ethanol ve vroucí vodní lázni. K rozpuštění zbytku byla přidána destilovaná voda (5 ml), poté byla převedena do 100-ml odměrné baňky a naplněna po značku destilovanou vodou. Nakonec byly 2 ml tohoto zředěného roztoku použity pro stanovení rozpustných cukrů.

Příprava vzorků polysacharidů

Sedimenty z extrakce rozpustných cukrů byly vysušeny na vzduchu a extrahovány 25 ml destilované vody ultrazvukem KQ- 250DE při 40 kHz, 150 W a 80 stupních po dobu 30 minut. První extrakční roztok byl zfiltrován a přenesen do 50-ml odměrné baňky. Sedimenty byly znovu extrahovány a filtrát byl spojen s prvním extrakčním roztokem v 50-ml odměrné baňce a naplněn po značku destilovanou vodou. Poté byl tento 5-ml roztok odpipetován do 50-ml odměrné baňky a naplněn po značku destilovanou vodou. Nakonec byly 2 ml tohoto zředěného roztoku použity pro stanovení polysacharidů.

Stanovení rozpustných cukrů a polysacharidů

Stanovení rozpustných cukrů a polysacharidů bylo provedeno pomocí metody fenol-kyselina sírová, jak je popsáno Wangem et al.24) Jeden mililitr 6% roztoku fenolu byl přidán do 2 ml roztoku vzorku a dobře promíchán. Poté bylo rychle přidáno 5 ml koncentrované kyseliny sírové a třepáno po dobu 5 minut. Směs byla přenesena na 15 minut do vroucí vodní lázně a rychle ochlazena na teplotu místnosti pro ultrafialovou detekci. Absorpce ultrafialového záření byla monitorována při 490 nm ve spektrofotometru UV2550 (Shimadzu Co., Kyoto, Japonsko). Jako slepý pokus byla použita destilovaná voda. Referenční standardní bezvodá D-glukóza byla přesně zvážena a rozpuštěna v destilované vodě na konečnou koncentraci 0,10 mg/ml. Poté bylo 1, 2, 3, 4, 5, 6 a 7 ml zásobního roztoku odpipetováno do sedmi 10-ml odměrných baněk a naplněno po značku destilovanou vodou. Poté bylo použito sedm různých koncentrací standardních roztoků k sestavení kalibračních křivek.

Zředěné extrakty rozpustné v ethanolu

Vzorky (4.0 g) byly přesně zváženy, aby se určily jejich zředěné extrakty rozpustné v ethanolu, podle metody popsané v čínském lékopisu (vydání 2015).25 Práškový vzorek byl zvážen (W3) a extrahován pomocí 100 ml 50% vodného roztoku ethanolu v 250-ml kónické baňce s občasným protřepáním po dobu 6 hodin a ponecháno stát po dobu 18 hodin. Extrakční roztok se zfiltruje a 20 ml filtrátu se odpaří do sucha, suší se 3 hodiny při 105 °C a 30 minut se chladí v exsikátoru (silikagel). Nakonec bylo množství přesně zváženo (W4). Obsah zředěného extraktu rozpustného v ethanolu byl vyjádřen jako g/kg FW vzorku. Zředěné extrakty rozpustné v ethanolu byly vypočteny následovně: zředěné extrakty rozpustné v ethanolu (g/kg FW)=[(W4×5)/W3]×(100−W5)×10, kde W3 je počáteční hmotnost W4 je hmotnost naměřená po extrakci a W5 je hmotnostní ztráta po sušení v sušárně (v procentech).

Statistická analýza

K objasnění jakýchkoli rozdílů mezi léčebnými skupinami byla použita jednocestná ANOVA pomocí SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Rozdíly byly hodnoceny pomocí Duncanova testu s limitem významnosti 0,05. Data byla vyjádřena jako průměr ± standardní odchylka (SD) (n=3).

Výsledky a diskuse

Ztráta váhy

Hmotnost plátků C. deserticola přímo určuje jeho komerční hodnotu na trhu léčivých bylin. Jak je uvedeno v tabulce 1, úbytek hmotnosti C. deserticola byl analyzován po vysokotepelném zpracování a sušení v peci. Nižší úrovně úbytku hmotnosti byly zjištěny, když byly plátky přímo sušeny v troubě spíše než dušené nebo blanšírované. Blanšírované vzorky vykazovaly nejvyšší úrovně úbytku hmotnosti. Vzorky napařené v páře vykazovaly vyšší úrovně ztráty hmotnosti s delší dobou vaření v páře. Sedm minut vaření v páře, nejdelší doba, po kterou čerstvě nakrájené plátky držely tvar, se výrazně projevilo (str<0.05) higher="" levels="" of="" weight="" loss="" after="" oven-drying="" than="" 5="" min="" of="" steaming.="" since="" phenylethanoid="" glycosides="" had="" been="" detected="" in="" the="" hot="" water="" (data="" not="" shown),="" it="" suggested="" that="" blanching/steaming="" promoted="" more="" water-soluble="" compounds="" to="" be="" dissolved="" in="" the="" hot="" water.="" concerning="" weight="" loss="" after="" high-heat="" exposure,="" samples="" steamed="" for="" 1="" min="" exhibited="" extremely="" low="" weight="" loss.="" therefore,="" 1="" min="" of="" steaming="" was="" too="" short="" to="" make="" the="">Cistanchetkáň křehká, takže byla méně schopná uvolňovat bioaktivní sloučeniny (jako jsou fenylethanoidové glykosidy) během následné extrakční procedury ve srovnání se vzorky, které byly déle napařovány.

Fenylethanoidní glykosidy

Hladiny echinakosidu, cistanosidu A, akteosidu, isoakteosidu a 2'-acetylakteosidu v plátcích C. deserticola zpracovaných různými metodami jsou znázorněny na obr. 1. Vzorky napařené po dobu 7 minut obsahovaly 2,16 g/kg FW echinakosidu a {{6} },29 g/kg FW cistanosidu A, což je −140 a −6násobný nárůst, v tomto pořadí, ve srovnání s čerstvými plátky. Obsah fenylethanoidových glykosidů prudce vzrostl při ošetření čerstvých vzorků vysokým teplem a sušením, zejména akteosid, isoakteosid a 2'-acetylakteosid, zatímco v čerstvých vzorcích nebyly detekovány. Jedním z možných důvodů by mohla být degradace fenylethanoidových glykosidů peroxidázou a -glukosidázou.26) Tyto enzymy by byly inaktivovány ve vzorcích vysušených vysokou teplotou a sníženým obsahem vody, což by vedlo k zadržování vysokých hladin fenylethanoidních glykosidů v extraktech. Kromě toho jsou fenylethanoidní glykosidy fenolické sloučeniny, které by se syntetizovaly v čerstvých rostlinách v reakci na stres způsobený vysokou teplotou a ztrátou vlhkosti.27)

Uvádí se, že vaření v páře i blanšírování čerstvě nakrájené C. deserticola zvyšuje obsah echinakosidu a akteosidu.19,20) V této studii však blanšírování poskytlo významně (p<0.05) lower="" concentration="" of="" acteoside="" and="" cistanoside="" a="" than="" drying="" directly.="" regarding="" the="" total="" concentration="" of="" the="" five="" phenylethanoid="" glycosides,="" the="" blanched="" samples="" were="" still="" lower="" than="" the="" directly="" oven-dried="" ones="" (1.73,="" 2.35="" g/kg="" fw,="" respectively).="" slices="" steamed="" for="" 5="" and="" 7="" min="" contained="" significantly=""><0.05) higher="" amounts="" of="" acteoside,="" isoacteoside,="" and="" 2′-acetylacteoside="" than="" directly="" oven-dried="" samples.="" in="" general,="" the="" highest="" levels="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" were="" found="" in="" the="" steamed="" samples,="" suggesting="" that="" the="" above-mentioned="" pharmacological="" activities="" produced="" by="" phenylethanoid="" glycosides="" in="" c.="" deserticola="" slices="" may="" be="" enhanced="" by="" steaming="">

Dále jsme zjistili, že při stanovení obsahu fenylethanoidových glykosidů byla rozhodující doba vaření v páře. Echinakosid, cistanosid A, akteosid a isoakteosid vykazovaly podobný rostoucí trend během procesu napařování, který se prudce zvýšil (v 1, 3 min) a dosáhl svých maximálních hladin v 7 min. Během procesu napařování od 3 do 7 minut nebyly pozorovány žádné významné změny u čtyř výše uvedených fenylethanoidových glykosidů. Naopak 2'-acetyl-

akteosid se výrazně zvýšil (str<0.05) with="" processing="" time.="" notably,="" the="" levels="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" in="" slices="" steamed="" for="" 1="" min="" were="" significantly=""><0.05) lower="" than="" directly="" oven-dried="" slices,="" except="" isoacteoside.="" therefore,="" 1="" min="" steaming="" of="" 3-mm="" fresh-cut="" c.="" deserticola="" was="" not="" long="" enough="" to="" inactivate="" the="" above-mentioned="" enzymes.="" higher="" total="" levels="" of="" the="" five="" phenylethanoid="" glycosides="" were="" observed="" when="" the="" slices="" were="" steamed="" for="" 5="" and="" 7="" min="" (3.20,="" 3.52="" g/kg="" fw,="" respectively)="" rather="" than="" directly="" oven="" drying.="" steaming="" from="" 5="" to="" 7="" min="" more="" effectively="" promoted="" the="" extraction="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" from="" c.="" deserticola,="" leading="" to="" a="" higher="" level="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" in="" the="">

Antioxidační aktivita

Antioxidační vlastnosti řezů, jak byly testovány pomocí ORAC, DPPH a FRAP, jsou uvedeny na obr. 2. Jak se očekávalo, hodnoty ORAC vykazovaly mezi vzorky širokou variabilitu v rozmezí od 13,34 µmol TE/g FW v čerstvých vzorcích, na 108,62 umol TE/g FW při 7 minutách vaření v páře. Během procesu vaření v páře se hodnota ORAC 4-násobně zvýšila mezi 1 a 7 minutami vaření v páře. Podobné trendy byly pozorovány v obou testech DPPH a FRAP, ukazující rychlý nárůst během úpravy v páře. Přestože vzorky ošetřené párou měly zpočátku nižší antioxidační hodnoty (po 1 minutě), vykazovaly mnohem lepší zachování antioxidační kapacity během procesu. V případě blanšírování nebyly pozorovány žádné významné rozdíly v antioxidačních vlastnostech ve srovnání s přímým sušením v peci.

Antioxidační aktivita ORAC v surových stoncích nebo plátcích C. deserticola nebyla dříve popsána. Etanolové extrakty ze surových stonků C. deserticola však byly měřeny v testech DPPH a FRAP,28) vykazující vysokou antioxidační aktivitu, mírně nižší než 2(3)-t-butyl-4-hydroxyanisol (BHA) a vyšší než BHT. Navíc fenylethanoidové glykosidy izolované z C. deserticola vykazovaly silné vychytávání DPPH, mírně nižší než kyselina askorbová29) a vyšší než -tokoferol.2) C. deserticola může být potenciálním zdrojem přírodních antioxidantů, protože antioxidační vlastnosti izolovaných čistých sloučenin z C. deserticola byly vyšší než u některých syntetických antioxidantů. Jak je uvedeno v tabulce 2, BHT vykazoval významně (str<0.05) higher="" antioxidant="" properties="" than="" c.="" deserticola="" slices="" steamed="" for="" 7="" min.="" therefore,="" there="" is="" still="" a="" big="" gap="" between="" c.="" deserticola="" slices="" and="" synthetic="" antioxidants="" of="" equal="">

Stanovení DPPH využívá mechanismy přenosu atomů vodíku (HAT) i přenosu jednoho elektronu (SET), zatímco stanovení ORAC a FRAP se řídí principy reakcí HAT a SET.30) V této studii jsou obecné trendy antioxidační kapacity hodnocené třemi testy byly velmi podobné. Potvrdili jsme tedy, že sušené plátky C. deserticola (napařené, přímo sušené v troubě a blanšírované) měly významně (p<0.05) higher="" levels="" of="" antioxidant="" activity="" than="" fresh="" ones.="" furthermore,="" steaming="" for="" 5="" and="" 7="" min="" significantly=""><0.05) enhanced="" levels="" of="" antioxidant="" activity="" compared="" with="" directly="" oven="" drying="" and="" blanching.="" overall,="" our="" results="" showed="" that="" steaming="" of="" fresh-cut="" c.="" deserticola="" slices="" was="" effective="" in="" preserving="" phenylethanoid="" glycoside="" levels="" and="" antioxidant="">

Rozpustné cukry, polysacharidy a zředěné extrakty rozpustné v ethanolu

As shown in Fig. 3, levels of soluble sugars and polysaccharides exhibited the following descending order: fresh>directly oven-dried>steamed>blanšíroval. Blanšírované plátky měly velmi nízké hladiny rozpustných cukrů, polysacharidů a zředěného extraktu rozpustného v ethanolu, což dobře odpovídalo jejich vysokému úbytku hmotnosti. Čerstvé vzorky měly výrazně (str<0.05) higher="" content="" of="" soluble="" sugars="" (62.89="" g/kg="" fw)="" and="" polysaccharides="" (17.36="" g/kg="" fw)="" than="" the="" other="" samples,="" suggesting="" that="" heat="" treatment="" (oven="" drying,="" steaming,="" blanching)="" on="" fresh-cut="" samples="" would="" reduce="" the="" extraction="" of="" soluble="" sugars="" and="" polysaccharides.="" heat="" treatment="" inhibited="" the="" hydrolysis="" of="" phenylethanoid="" glycosides="" to="" release="" glucose,="" rhamnose,="" and="" so="" on.="" moreover,="" heat="" treatment,="" used="" as="" abiotic="" stress="" factors="" on="" fresh="" slices,="" gave="" rise="" to="" the="" synthesis="" of="" several="" phenylpropanoid="" compounds="" including="" phenylethanoid="" glycosides.27)="" particularly,="" sugars="" contained="" in="" the="" slices="" were="" dissolved="" in="" the="" hot="" water="" to="" different="" extents="" by="" steaming="" or="" blanching.="" thus,="" it="" is="" not="" surprising="" to="" see="" that="" the="" content="" of="" soluble="" sugars="" decreased="" by="" 23.88%="" in="" steaming="" and="" by="" 60.82%="" in="" blanching,="" while="" the="" content="" of="" polysaccharides="" decreased="" by="" 41.33%="" in="" steaming="" and="" by="" 53.83%="" in="" blanching,="" compared="" with="" fresh="" slices.="" it="" has="" been="" reported="" that="" the="" steaming="" process="" can="" increase="" reducing="" sugars="" and="" acidic="" polysaccharides="" in="" ginseng="" radix="" et="" rhizoma,18)="" and="" mono="" sugars,="" including="" galactose="" and="" glucose,="" in="" rehmanniae="" radix.17)="" however,="" the="" whole="" dried="" crude="" drugs="" studied="" in="" the="" above-mentioned="" literature="" were="" quite="" different="" from="" the="" fresh-cut="" slices="" used="" in="" the="" present="">

Nejvyšší obsah zředěných extraktů rozpustných v ethanolu měly plátky přímo sušené v sušárně (89,26 g/kg FW), zatímco blanšírované plátky měly nejnižší (47,60 g/kg FW). Ačkoli všechny zpracované plátky C. deserticola splňovaly standard čínského lékopisu (vydání z roku 2015), aby mohly být kvalifikovány jako Cistanches Herba, blanšírované plátky by přinesly méně zdravotních přínosů než vzorky přímo sušené v sušárně pro výraznou ztrátu zředěného ethanolu rozpustného extrakty. Pokud jde o proces vaření v páře, trend rozpustných cukrů byl velmi podobný trendu pozorovanému u zředěných extraktů rozpustných v ethanolu, postupně se snižoval bez výrazných změn pozorovaných od 3 do 7 minut. Koncentrace polysacharidů po celou dobu paření kolísala s mírným nárůstem. Je pozoruhodné, že 7 minut vaření v páře ukázalo dobré uchování polysacharidů, ale velkou ztrátu rozpustných cukrů, zatímco 5 minut vaření v páře ukázalo obráceně ve srovnání s přímým sušením v troubě.

Závěr

Poprvé jsme popsali vliv napařování na bioaktivní sloučeniny a antioxidační aktivitu v čerstvě řezané C. deserticola a poskytli důležité informace pro vývoj účinných postupů pro posklizňovou úpravu stonků C. deserticola. Čerstvé plátky vykazovaly nejhorší účinnost pro extrakci fenylethanoidních glykosidů a antioxidačních sloučenin, což ukazuje, že tyto látky byly náchylné k enzymatické degradaci. Naproti tomu vzorky připravené v páře měly nejvyšší hladiny fenylethanoidních glykosidů a antioxidační aktivity. Ačkoli blanšírování mírně zvýšilo obsah akteosidu, isoakteosidu a 2'-acetylakteosidu ve srovnání s přímým sušením v sušárně, hodnoty hmotnosti, rozpustných cukrů, polysacharidů a zředěných extraktů rozpustných v ethanolu se všechny dramaticky snížily. U procesu vaření v páře se hladiny fenylethanoidových glykosidů a polysacharidů v průběhu času mírně zvýšily. Výrazné napařování po dobu 5 a 7 minut (str<0.05) enhanced="" total="" levels="" of="" the="" five="" phenylethanoid="" glycosides="" than="" directly="" oven="" drying.="" however,="" the="" longer="" the="" steaming="" process,="" the="" greater="" the="" decrease="" in="" weight,="" soluble="" sugars,="" and="" dilute="" ethanol-soluble="" extracts.="" no="" significant="" decrease="" in="" soluble="" sugars="" was="" observed="" when="" slices="" were="" steamed="" from="" 1="" to="" 5="" min="" compared="" with="" directly="" oven-dried="" samples.="" the="" steaming="" time="" had="" a="" consistent="" effect="" on="" the="" antioxidant="" properties,="" with="" a="" significant="" increase="" evaluated="" by="" the="" dpph,="" orac,="" and="" frap="" assays.="" it="" was="" concluded="" that="" c.="" deserticola="" slices="" can="" be="" successfully="" treated="" with="" 5="" to="" 7="" min="" of="" steaming="" to="" improve="" the="" phenylethanoid="" glycoside="" levels="" and="" antioxidant="" activity,="" while="" preserving="" the="" amounts="" of="" soluble="" sugars,="" polysaccharides,="" and="" dilute="" ethanol-soluble="">

cistancheje inhibitor tyrosinázy, který můžeantioxidační

Poděkování

Tato práce byla podpořena projektem National Natural Science Foundation of China v rámci grantu č. U14032224 a 81102748 a byla také podpořena programem Key Technologies R & D Program of Ningxia v rámci grantu č. YKX-12. Velmi děkujeme Dr. Zhiguo Ma za předložení standardů a Yucheng Chang a Yuan Liu za sklizeň a sběr rostlinných materiálů na plantáži Ningxia of Cistanches Herba.

Konflikt zájmů

Autoři neprohlašují žádný střet zájmů.

Doplňkové materiály

Online verze tohoto článku obsahuje doplňkové materiály.

Reference

1) Wang T., Zhang XY, Xie WY, Am. J. Chin. Med., 40, 1123-1141 (2012).

2) Xiong Q., Kadota S., Tani T., Namba T., Biol. Pharm. Bull., 19, 1580-1585 (1996).

3) Sui ZF, Gu TM, Liu B., Peng SW, Zhao ZL, Li L., Shi DF, Yang RY, Carbohydr. Polym., 85, 75–79 (2011).

4) Luo L., Wu XC, Gao HJ, Lv SZ, Wang JH, Wang XW, Chin. Pharm., 24, 2122–2125 (2013).

5) Luo L., Tuerxun A., Wang XW, Chin. J. New Drugs Clin. Rem., 29, 115–118 (2010).

6) Xiong Q., Hase K., Tezuka Y., Tani T., Namba T., Kadota S., Planta Med., 64, 120–125 (1998).

7) Wang XY, Qi Y., Cai RL, Li XH, Yang MH, Shi Y., Acta Lab. Anim. Sci. Sin., 17, 424–427 (2009).

8) Dong Q., Yao J., Fang JN, Ding K., Carbohydr. Res., 342, 1343–1349 (2007).

9) Wang XY, Qi Y., Cai RL, Li XH, Yang MH, Shi Y., Chin. Pharmacol. Bull., 25, 787-790 (2009).

10) Gao JY, Jiang Y., Dai F., Han ZL, Liu HY, Bao Z., Zhang TM, Tu PF, Mod. Brada. Med., 17, 307-310, 314 (2015).

11) Xue DJ, Zhang M., Wu XH, Chen XD, Zhan YC, Chin. J. Chin. Mater. Med., 20, 687-689, 704 (1995).

12) Lu D., Zhang JY, Yang ZY, Liu HM, Li S., Wu BJ, Ma ZG, J. Sep. Sci., 36, 1945–1952 (2013).

13) Xu R., Chen J., Chen SL, Liu TN, Zhu WC, Xu J., Genet. Znovu kyselé. Crop Evol., 56, 137–142 (2009).

14) Ornelas-Paz Jde J., Yahia EM, J. Sci. Food Agric., 94, 1078–1083 (2014).

15) Yun Z., Gao HJ, Liu P., Liu SZ, Luo T., Jin S., Xu Q., Xu J., Cheng YJ, Deng XX, BMC Plant Biol., 13, 44 (2013).

16) Gorinstein S., Leontowicz H., Leontowicz M., Namiesnik J., Najman K., Drzewiecki J., Cvikrová M., Martincová O., Katrich E., Trakhtenberg S., J. Agric. Food Chem., 56, 4418-4426 (2008).

17) Chang WT, Choi YH, Van Der Heijden R., Lee MS, Lin MK, Kong HW, Kim HK, Verpoorte R., Hankemeier T., Van Der Greef J., Wang M., Chem. Pharm. Bull., 59, 546–552 (2011).

18) Jin Y., Kim YJ, Jeon JN, Wang C., Min JW, Noh HY, Yang DC, Plant Foods Hum. Nutr., 70, 141–145 (2015).

19) Lei L., Wang XY, patent KN 200810059282.7 (2009).

20) Tu PF, Qi XB, Jiang Y., Feng J., CN Patent 200410048303.7 (2005).

21) Ma ZG, Yang ZL, Li P., Li CH, J. Liquid Chromatogr. Relat. Technol., 31, 2838-2850 (2008).

22) Huang D., Ou BX, Hampsch-Woodill M., Flanagan JA, Prior RL, J. Agric. Food Chem., 50, 4437-4444 (2002).

23) Goupy P., Hugues M., Boivin P., Amiot MJ, J. Sci. Food Agric., 79, 1625–1634 (1999).

24) Wang LN, Chen J., Yang MH, Chen SL, Shi Y., Qi Y., Liu TN, Chin. Pharm., 18, 1620-1623 (2007).

25) „Komise čínského lékopisu, lékopis Čínské lidové republiky 2015“, svazek IV, China Medical Science Press, Peking, 2015, s. 202.

26) Tamura Y., Nishibe S., J. Agric. Food Chem., 50, 2514-2518 (2002).

27) Hossain MB, Barry-Ryan C., Martin-Diana AB, Brunton NP, Food Chem., 123, 85–91 (2010).

28) Chen BQ, Liu YX, Kang WY, Fine Chem., 27, 342–345 (2010).

29) Yang JH, Hu JP, Rena K., Du NS, J. Chin. Med. Mater., 32, 1067–1069 (2009).

30) Prior RL, Wu X., Schaich K., J. Agric. Food Chem., 53, 4290-4302 (2005).