Protiúnavové účinky dietních nukleotidů u myší

Meihong Xua,b, Rui Lianga,c, Yong Lia,ba Junbo Wanga,b

Meihong Xua,b,Rui Lianga,c, Yong Lia,b a Junbo Wanga,b

Pro více informací:ali.ma@wecistanche.com

ABSTRAKTNÍ

Jako stavební kameny nukleových kyselin jsou nukleotidy podmíněně esenciálními živinami, které vykazují mnohostranné aktivity. Cílem této studie bylo zhodnotitproti únavěúčinky dietních nukleotidů (NT) na myši a prozkoumat možný základní mechanismus. Myši byly náhodně rozděleny do čtyř experimentálních sad pro detekci různých indikátorů. Každá sada myší byla poté rozdělena do čtyř skupin: (i) jedna kontrolní skupina a (ii) tři skupiny NT, které byly krmeny stravou doplněnou o NT v koncentracích {{0}} procent, {{3} }.04 procenta, 0,16 procenta a 0,64 procenta (hmotn./hmotn.). NTS by mohla významně prodloužit dobu nuceného plavání, zvýšit aktivitu laktátdehydrogenázy a hladiny jaterního glykogenu a také zpomalit akumulaci dusíku močoviny v krvi a kyseliny mléčné v krvi u myší po 30 dnech léčby. NTS také výraznězlepšená únava-indukované změny biomarkerů oxidačního stresu a antioxidačních enzymů. Je pozoruhodné, že NT zvýšily mitochondriální energetické metabolické enzymové aktivity v kosterních svalech myší. Tyto výsledky naznačují, že NT působíúčinky proti únavě, což lze přičíst inhibici oxidačního stresu a zlepšení mitochondriální funkce v kosterních svalech. NTS by mohl být použit jako nový přírodní prostředek pro uvolnění cvičeníúnava.

Úvod

Únavaje pocit extrémní únavy, který může vyústit v širokou škálu fyzické a duševní neschopnosti, jako je nepozornost, rozptýlení a ospalost [1,2]. Tento stav vyplývá především z vyčerpání zdrojů energie, včetně akumulace konečných produktůúnava, porucha vnitřního prostředí těla a pokles hladiny glykémie a spotřeby jaterního glykogenu [3]. Únava není optimální zdravotní stav a může být spojena s různými nemocemi. Se zrychlujícím se životním tempem a nelítostnou sociální konkurencí,únavase stal běžně se vyskytujícím stavem. K určení bezpečné a účinné metody prevence únavy je tedy nutné úsilí, jako jsou nutriční intervence. Oxidační stres byl identifikován jako jeden z faktorů vedoucích k únavě [4]. Vysoká úroveň oxidačního stresu vede k nadměrné tvorbě reaktivních forem kyslíku (ROS). Tyto druhy jsou vysoce reaktivní molekuly, které způsobují peroxidaci lipidů v membránové struktuře a poškozují buněčnou strukturu. Uvolnění ROS by mohlo vést k peroxidaci lipidů v mitochondriální membráně. Bylo zjištěno, že poškozené mitochondrie snižují buněčné dýchání a tvorbu adenosintrifosfátu (ATP); patří také mezi primární příčiny únavy [5]. Intervence, které snižují oxidační poškození, mohou účinně zmírnit únavu, jak naznačují výsledky studie, že antioxidanty mají příznivé účinky na únavu [6,7].

Předchozí zjištění naznačují, že zotavení po cvičení je vyvolánoúnavavyžaduje opravu poškození, ke kterému v těle došlo, a/nebo urychluje eliminaci metabolických produktů, které se nahromadily během cvičení [8]. Nukleotidy v potravě (NT) mohou být absorbovány a využívány všemi orgány, které mohou těžit z exogenního přísunu pro úsporu energie a optimalizaci funkce orgánů. NTS má mnoho prospěšných funkcí, včetně protinádorové aktivity, imunitní modulace, ochranné schopnosti jater a normalizace metabolismu [9–12]. Kromě toho vykazují NT vynikající antioxidační vlastnosti a vlastnosti proti stárnutí, jak potvrdila naše předchozí studie [13]. Studie o účincích NT proti únavě však byly hlášeny jen zřídka. Proto byla tato studie navržena tak, aby vyhodnotilaproti únavěaktivitu NT a prozkoumat možný základní mechanismus u myší.

Materiály a metody Materiály a činidla

Bazální dieta (AIN{0}G dieta pro hlodavce) a dieta doplněná NT (bazální dieta doplněná o 0,4 g, 1,6 g a 6,4 g NT*kg-1 v tomto pořadí) byly vyrobeny HFK Bioscience Co. Ltd. (Peking, Čína). NTS poskytované společností Zhen-Ao Biotechnology Ltd. Co. (Dalian, Čína) byly odvozeny z RNA z pivovarských kvasnic. Obsah NT byl více než 99 procent. Tento produkt obsahoval 22,8 procenta 5ʹ-adenosinmonofosfátu (5ʹ-AMP), 26,6 procenta 5ʹ-cytidinmonofosfátu (5ʹ-CMP), 20,4 procenta 5ʹ-guanosinmonofosfátu (5ʹ-GMP) Na2 a 30,2 procenta 5ʹ-uridinmonofosfátu (5ʹ -UMP) Na2. Dietní ingredience byly důkladně promíchány ve směsi, vyrobeny do pelet a sušeny na vzduchu při teplotě místnosti. Testovací soupravy používané pro stanovení dusíku močoviny v krvi (BUN) a laktátdehydrogenázy (LDH) byly zakoupeny od Yingkexinchuang Science and Technology Ltd. (Macau, Čína). Detekční soupravy krevní kyseliny mléčné (BLA), jaterního glykogenu, superoxiddismutázy (SOD), glutathionperoxidázy (GSH Px), sukcinátdehydrogenázy (SDH), aktivity Na plus -K plus -ATPázy a Ca2 plus -Mg2 plus -ATPázy, a malondialdehyd (MDA) byly zakoupeny od Nanjing Jiancheng Biotechnology Institute (Nanjing, Čína). Všechna ostatní činidla použitá v této studii byla analytické kvality. Zvířata a léčba V této studii bylo po schválení Institucionálním výborem pro péči a použití zvířat Pekingské univerzity (kód etického schválení: LA2015081, únor 2015) použito celkem 160 samců myší ICR (ve věku 6–8 týdnů, 18–22 g ), které byly pořízeny z Centra vědy o zdraví zvířat, Pekingské univerzity.

Byli umístěni při 25 ± 1◦C, 50–60 procentech vlhkosti a udržovali se v cyklu světlo-tma 12 h:12 h, s volným přístupem ke standardní potravě a vodě. Všechna zvířata byla léčena podle Principů péče o laboratorní zvířata (publikace NIH č. 85–23, revidovaná v roce 1985) a pokynů Výboru pro výzkum zvířat Pekingské univerzity. Po aklimatizaci po dobu 1 týdne byly myši náhodně rozděleny do čtyř experimentálních sad (n=40). Každá sada myší byla poté rozdělena do čtyř skupin (n=10): kontrolní skupina a tři intervenční skupiny NT, které byly označeny jako skupina s nízkou dávkou (NTs-L), skupina se střední dávkou (NTs-M a skupina s vysokou dávkou (NTs-H). Kontrolní myši byly krmeny stravou pro hlodavce (Vital River Ltd. Co., Peking). Myši ve třech experimentálních skupinách byly krmeny 0,01 procenta, 0,16 procenta nebo 0,64 procenta (hmot./hmot.) NT v potravě. Dávky se vztahují k předchozí studii v naší laboratoři [11–13]. Experimentálním myším bylo podáváno žaludeční sondou po dobu 30 dnů a poté byly použity pro další experimenty. Test nuceného plavání Pro test nuceného plavání byly použity myši z experimentální sady 1. Test nuceného plavání byl proveden, jak bylo popsáno dříve [3]. Stručně řečeno, 30 minut po posledním ošetření byly myši jednotlivě umístěny do bazénu naplněného vodou (25 ± 1◦ C) do hloubky 30 cm s olověným pouzdrem (5 procent tělesné hmotnosti myši) připojeným k kořen ocasu každé myši.

Doba plavání byla zaznamenána okamžitě, když byla fyzická síla myši vyčerpána a nemohla vystoupit na hladinu déle než 10 sekund. Biochemický test Pro biochemický test byly použity myši z experimentální sady 2. Třicet minut po konečném perorálním podání byly myši nuceny plavat ve vodě o teplotě 30 °C po dobu 90 minut bez jakékoli zátěže. Po hodinovém odpočinku byl odebrán vzorek krve z očních bulv a kosterních svalů (quadriceps femoris obou zadních nohou) myší. Sérum bylo připraveno centrifugací při 2000 rpm při 4 °C po dobu 15 minut. Obsah BUN a aktivita LDH v séru byly měřeny automatickým biochemickým analyzátorem (Olympus Corporation, Tokio, Japonsko). Aktivita SOD, GSH Px, SDH, Na plus K plus -ATPáza, Ca2 plus -Mg2 plus -ATPáza a hladiny MDA v kosterních svalech byly stanoveny detekčními soupravami podle pokynů.

Stanovení kyseliny mléčné v krvi

Koncentrace BLA byly stanoveny u myší z experimentální sady 3. Třicet minut po konečném perorálním podání byly myši nuceny plavat ve vodě o teplotě 30◦C po dobu 10 min bez jakékoli zátěže. Krev byla odebrána ve třech časových bodech: na začátku, 0 minut po plavání a 20 minut po plavání. Množství 20 ul krve bylo pokaždé přesně odebráno z úhlové žíly myší skleněnou kapilárou a poté okamžitě přesunuto na dno 5ml centrifugační zkumavky, která byla předem spojena s 0,48 ml 1% roztoku fluoridu sodného. Skleněná kapilára byla několikrát propláchnuta supernatantem. Koncentrace BLA byly stanoveny podle postupů poskytnutých soupravami.

Vyšetření jaterního glykogenu

Myši z experimentální sady 4 byly použity ke zkoumání jaterního glykogenu. Třicet minut po posledním podání NT byly myši usmrceny a jejich játra byla okamžitě izolována a homogenizována na 10% roztok s normálním fyziologickým roztokem při 4 °C. Hladiny jaterního glykogenu byly stanoveny pomocí dostupných souprav.

Statistická analýza

Data byla vyjádřena jako průměr ± standardní odchylka (SD). Rozdíly mezi skupinami byly analyzovány jednocestným testem ANOVA následovaným Tukeyho post hoc testem nejmenších významných rozdílů, pokud byly odchylky stejné, nebo Tamhanovým T3 testem, pokud odchylky nebyly stejné. p < 0.05="" bylo="" považováno="" za="">

Výsledky Účinky NT na tělesnou hmotnost myší

Účinky NT na tělesnou hmotnost myší během experimentu jsou uvedeny v tabulce 1. Výsledky ukázaly, že mezi kontrolní skupinou a skupinou NT v experimentálním souboru 1, 2, 3 a 4 nebyly žádné statisticky významné rozdíly v tělesné hmotnosti.

Účinky NT v testu nuceného plavání

Účinky NT na dobu nuceného plavání myší ukazuje obrázek 1. Jak se očekávalo, ve srovnání s kontrolní skupinou byla doba nuceného plavání ve všech třech skupinách NTs delší a rozdíl byl statisticky významný u NTs-M a NTs-H (p < 0,05).="" obecně="" platí,="" že="" ve="" srovnání="" s="" kontrolní="" skupinou="" se="" doba="" nuceného="" plavání="" u="" nts-l,="" nts-m="" a="" nts-h="" zvýšila="" o="" 51,23="" procenta,="" 86,57="" procenta,="" respektive="" o="" 71,23="">

Účinky NT na laktátdehydrogenázu (LDH), dusík močoviny v krvi (BUN) a obsah jaterního glykogenu u myší

Jak ukazuje obrázek 1, ve srovnání s kontrolní skupinou byla aktivita LDH významně zvýšena u NTs-M (p < 0.05)="" a="" hladiny="" bun="" byly="" výrazně="" sníženy="" u="" všech="" tří="" nt-="" léčené="" skupiny="" (p="">< 0,05).="" hladiny="" jaterního="" glykogenu="" u="" myší="" se="" však="" zlepšily="" ve="" skupinách="" nt="" bez="" výrazných="" rozdílů="" ve="" srovnání="" s="" kontrolní="" skupinou="" (p=""> 0,05), což ukazuje, že NT neměly žádný vliv na hladiny glykogenu.

Účinky NT na hladiny kyseliny mléčné v krvi (BLA) u myší

Výsledky o účincích NT na BLA u myší v různých časových bodech jsou ukázány na obrázku 2. Mezi skupinami nebyly na počátku žádné významné rozdíly. Hladiny BLA 0 min po plavání byly ve srovnání s výchozí hodnotou ve všech skupinách pozoruhodně zvýšené (p < 0.05).="" podobně="" ve="" srovnání="" s="" výchozí="" hodnotou="" byly="" významné="" rozdíly="" mezi="" výchozí="" hodnotou="" a="" 2{{10}}="" min="" po="" plavání="" v="" kontrolní="" skupině="" a="" skupině="" nts-l="" (p="">< 0.{{17}="" }5).="" ve="" srovnání="" s="" kontrolní="" skupinou="" byly="" koncentrace="" bla="" v="" nts-m="" a="" nts-h="" významně="" sníženy="" 0="" minut="" po="" plavání="" (p="">< 0,05).="" 20="" minut="" po="" plavání="" byly="" koncentrace="" bla="" ve="" skupině="" nts-h="" významně="" sníženy="" (p="">< 0,05).="" po="" léčbě="" nts="" byla="" také="" snížena="" plocha="" pod="" křivkou="" bla="" (auc)="" ve="" srovnání="" s="" kontrolní="" skupinou="" (p="">< 0,05="" pro="" nts-m="" a="">

Účinky NT na parametry oxidačního stresu v kosterním svalstvu myší

Hladiny SOD, GSH-Px a MDA jsou uvedeny v tabulce 2 pro hodnocení úrovně oxidačního stresu v kosterních svalech myší. Po léčbě se aktivity SOD a GSH-Px ve skupinách NTs-M a NTs-H výrazně zlepšily ve srovnání s kontrolní skupinou (p < 0.05)="" .="" kromě="" toho="" byly="" hladiny="" mda="" v="" kosterním="" svalu="" významně="" oslabeny="" ve="" skupinách="" nt="" (p="">< 0,05)="" ve="" srovnání="" s="" kontrolní="">

Vliv NT na aktivity mitochondriálního energetického metabolického enzymu v kosterních svalech myší

Aktivita SDH, Na plus -K plus -ATPáza a Ca2 plus -Mg2 plus -ATPáza jsou uvedeny v tabulce 3 pro hodnocení hladiny enzymu metabolismu mitochondriální energie v kosterních svalech myší. Po léčbě se aktivita SDH a ​​Ca2 plus -Mg2 plus -ATPáza významně zlepšila u NTs-M (p < 0.05).="" podobně="" aktivita="" na="" plus="" -k="" plus="" -atpázy="" v="" kosterním="" svalu="" byla="" významně="" zvýšena="" ve="" skupinách="" nts-m="" a="" nts-h="" (p="">< 0,05)="" ve="" srovnání="" s="" kontrolní="" skupinou.="" diskuse="" díky="" své="" mnohostranné="" činnosti="" si="" nt="" získávají="" stále="" větší="" oblibu="" jako="" doplňky="" stravy.="" řada="" zpráv="" prokázala,="" že="" přidání="" nt="" do="" dietních="" přípravků="" zvyšuje="" produkci="" imunoglobulinů,="" zlepšuje="" odpověď="" na="" vakcíny,="" snižuje="" morbiditu="" a="" zvyšuje="" toleranci="" k="" dietním="" antigenům="" [12,14].="" naše="" předchozí="" studie="" zjistily,="" že="" nt="" nejsou="" toxické="" ani="" karcinogenní="" u="" potkanů="" ​​v="" koncentraci="" až="" 0,64="" procenta="" (tělesné="" hmotnosti)="" po="" celý="" jejich="" život="" a="" mohly="" by="" prodloužit="" životnost="" u="" sd="" potkanů="" ​​v="" závislosti="" na="" dávce="" [13].="" pokud="" je="" nám="" známo,="" tato="" studie="" je="" první,="" která="" uvádí,="" že="" suplementace="" nt="" ve="" stravě="" zlepšuje="" únavu.="" zjistili="" jsme="" také,="" že="" nt="" mohou="" zvýšit="" dobu="" nuceného="" plavání,="" aktivitu="" ldh="" a="" hladiny="" jaterního="" glykogenu="" a="" současně="" mohou="" nt="" snížit="" obsah="" bun="" a="" bla="" u="" myší.="" účinek="" proti="" únavě="" může="" být="" spojen="" s="" inhibicí="" oxidačního="" stresu="" a="" zlepšením="" mitochondriální="" aktivity.="" opakovaná="" a="" trvalá="" fyzická="" práce="" má="" za="" následek="" únavu,="" provokující="" systémové="" změny,="" včetně="" endokrinní,="" imunitní="" a="" metabolické="" dysfunkce="">

Použití testů nuceného plavání poskytuje uspokojivý experimentální model pro hodnocení protiúnavových aktivit u myší [16]. V této studii léčba NT prodloužila čas do vyčerpání myší, zejména u 0,16 procent a 0,64 procent skupin léčených NT, což ukazuje na protiúnavové účinky NT na myši . Pro další studium protiúnavových vlastností NT bylo měřeno několik biochemických markerů únavy, včetně BUN, LDH, BLA a jaterního glykogenu. BUN se tvoří v játrech jako metabolický produkt bílkovin a aminokyselin; je to jeden z krevních biochemických indexů souvisejících s únavou. Se zvýšeným cvičením se energie z katabolismu cukrů a tuků stává pro tělo nedostatečná; proteiny a aminokyseliny vykazují silnější katabolismus, aby kompenzovaly spotřebu energie, což způsobuje zvýšení BUN [17]. Pozoruhodná pozitivní korelace je pozorována mezi úrovní BUN a stupněm únavy [18]. Během dlouhodobého cvičení se v kosterních svalech vytváří a hromadí nadbytek kyseliny mléčné, což vede ke svalové únavě [19]. Proto lze BLA použít jako index únavy. Kromě toho je glykogen důležitým energetickým materiálem, který umožňuje pohyb a poskytuje dostatečnou energii pro svalovou kontrakci. Spotřeba energie snižuje glykogen; mezitím může zvýšení jaterního glykogenu zlepšit vytrvalost při cvičení [20].

V této studii mohou NT zvýšit aktivitu LDH a hladiny jaterního glykogenu, stejně jako snížit obsah BUN a BLA u myší. Vysoká spotřeba energie během intenzivního cvičení může způsobit nerovnováhu mezi oxidačním a antioxidačním systémem, což má za následek zvýšení ROS a snížení antioxidačních aktivit. Toto chování vede ke zvýšené produkci ROS. Oxidační stres se podílí jak na chronické únavě, tak na dalších poruchách souvisejících s únavou [21]. Extrémní fyzická zátěž by mohla vést k nadměrné tvorbě ROS v kosterním svalu, což má za následek periferní únavu [22,23]. SOD, aktivita GSH-Px a hladiny MDA, které obecně indikují kapacitu antioxidačního obranného systému, byly měřeny pro hodnocení antioxidační aktivity NT. SOD a GSH-Px jsou důležité enzymatické antioxidační systémy pro vychytávání volných radikálů a jejich metabolitů [24]. MDA je jedním z degradačních produktů peroxidace lipidů, důležitým ukazatelem pro hodnocení buněčného oxidačního stresu [25]. Studie ukázaly, že NT vykazují pozoruhodné antioxidační aktivity [11,13]. Naše výsledky naznačují, že protiúnavové účinky NT úzce souvisí s ochranou korpuskulární membrány zlepšením aktivit několika enzymů a prevencí oxidace lipidů. V této studii se mitochondriální funkce zlepšila v kosterních svalech myší po léčbě NT.

K udržení dlouhodobé fyzické aktivity je v myocytech vyžadována nepřetržitá tvorba ATP. Mitochondrie je důležitou intracelulární organelou v eukaryotických buňkách, která je hlavním místem oxidativní fosforylace a produkce ATP v savčích buňkách. Navíc mitochondrie hraje důležitou roli při oxidativním stresu [26]. V důsledku toho mitochondriální funkce v kosterních svalech přispívá k únavě vyvolané cvičením. V této studii byly měřeny aktivity SDH, Na plus -K plus -ATPázy a Ca2 plus -Mg2 plus -ATPázy za účelem vyhodnocení mitochondriální funkce. Energetický metabolismus zahrnuje anabolismus a katabolismus, na kterém se podílí mnoho biologických enzymů [27]. Na plus -K plus -ATPáza a Ca2 plus -Mg2 plus -ATPáza jsou dva hlavní enzymy degradující ATP, které mohou hydrolyzovat ATP a dodat přímou volnou energii [28]. Hraje důležitou roli při udržování fyziologických funkcí transportu materiálu, přeměny energie a přenosu informací [29]. Na plus -K plus -ATPáza a Ca2 plus -Mg2 plus -ATPáza patří mezi hlavní faktory odpovědné za únavu [30–32]. Kromě toho je SDH enzym omezující rychlost spojený s regulací glykolytické dráhy Krebsova cyklu a katalýzy syntézy ATP [27]. Aktivity těchto enzymů mohou být důležité v energetickém metabolismu v

kosterní sval při únavě. Za normálních podmínek jsou enzymatické aktivity regulovány tak, aby byla zachována rovnováha mezi anabolismem a katabolismem. Za podmínek únavy byly pozorovány nízké hladiny aktivity SDH, Na plus -K plus -ATPázy a Ca2 plus Mg2 plus -ATPázy v kosterním svalu. Toto zjištění ukázalo, že došlo k hydrolýze ATP, což znamená poškození mitochondrií, a že se ztratila rovnováha v důsledku snížených hladin Na plus -K plus - ATPázy a Ca2 plus -Mg2 plus -ATPázové aktivity. V této studii jsme však zjistili, že NT mohou zlepšit mitochondriální funkce v kosterních svalech myší zvýšením aktivit energetických metabolických enzymů, jako je SDH, Na plus -K plus -ATPáza a Ca2 plus -Mg2 plus -ATPáza. , čímž se potlačuje oxidační stres a generuje se více ATP pro doplnění energie [33,34].

Závěry

Naše kombinované výsledky poprvé ukázaly, že NT mají účinky proti únavě. NT by mohly zvýšit dobu nuceného plavání myší zvýšením aktivity LDH a hladin jaterního glykogenu a oddálením akumulace BUN a BLA. NT by také mohly zlepšit mitochondriální funkci a inhibovat oxidační stres v kosterních svalech myší, což může být akční cesta jejich účinků proti únavě. NT by mohly být použity jako nový přírodní prostředek pro zmírnění únavy ze cvičení. Je zapotřebí další výzkum in vitro, aby se prozkoumal přesný molekulární mechanismus, kterým NT hrají svou roli v účincích proti únavě.

Kliknutím na fotografii zobrazíte výhody a vedlejší účinky cistanche tubulosa při únavě

Reference

[1] Moriura T, Matsuda H, Kubo M. Farmakologická studie o Agkistrodon blomhofi OIE. V. protiúnavový účinek 50% ethanolového extraktu u krys ošetřených nuceným plaváním s akutní zátěží. Biol Pharm Bull.1996;19(1):62–66. 

[2] Kim KM, Yu KW, Kang DH a kol. Protistresové a protiúnavové účinky fermentovaných rýžových otrub. Biosci Biotechnol Biochem.2001;65(10):2294–2296. 

[3] Tan W1, Yu KQ, Liu YY a kol. Protiúnavová aktivita polysacharidů extrahovaných z Radix Rehmanniae Preparata. Int J Biol Macromol.2012;50(1):59–62. 

[4] Azizbeigi K, Stannard SR, Atashak S, et al. Antioxidační enzymy a adaptace oxidativního stresu na zátěžový trénink: srovnání vytrvalosti, odolnosti a souběžného tréninku u netrénovaných mužů. J Exerc Sci Fitness.2014;12(1):1–6. 

[5] Extáze KS, Roussel D, St-Pierre J, et al. Superoxid aktivuje mitochondriální uncoupling proteiny. Příroda.2002;415(6867):96–99. 

[6] Wang X, Xing R, Chen Z a kol. Účinek a mechanismus peptidů makrely (Pneumatophorus japonicus) proti únavě. Funkce jídla.2014;5(9):2113–2119. 

[7] Lee JS, Kim HG, Han JM a kol. Účinek myelofilu proti únavě v modelu myší s chronickým nuceným cvičením. Eur J Pharmacol.2015;764:100–108. 

[8] Chi A, Li H, Kang C, a kol. Protiúnavová aktivita nových polysacharidových konjugátů ze zeleného čaje Ziyang. Int J Biol Macromol.2015;80:566–572.

[9] Martinez-Puig D, Manzanilla EG, Morales J, et al. Nukleotidová suplementace snižuje výskyt průjmu u prasat předčasně odstavených. Livest Sci.2007;108:276–279. 

[10] Cai X, Bao L, Wang N a kol. Suplementace dietních nukleotidů a poškození jater u potkanů ​​léčených alkoholem: metabolomický výzkum. Molekuly.2016;21(4):435.

[11] Cai X, Bao L, Wang N, et al. Nukleotidy ve stravě chrání před alkoholickým poškozením jater tím, že zmírňují zánět a regulují střevní mikroflóru u potkanů. Funkce jídla.2016;7(6):2898–2908. 

[12] Xu M, Zhao M, Yang R, a kol. Vliv dietních nukleotidů na imunitní funkci u myší Balb/C. Int Immunopharmacol.2013;17(1):50–56. 

[13] Xu M, Liang R, Guo Q a kol. Nukleotidy v potravě prodlužují životnost potkanů ​​Sprague-Dawley. J Nutr Zdraví Stárnutí.2013;17(3):223–229. 

[14] Che L, Hu L, Liu Y, et al. Suplementace nukleotidů ve stravě zlepšuje vývoj střev a imunitní funkce novorozenců s omezením intrauterinního růstu na prasečím modelu. PLoS One.2016;11(6): e0157314. [15] Chaudhuri A, Behan PO. Únava u neurologických poruch. Lanceta.2004;363(9413):978–988. 

[16] You L, Ren J, Yang B a kol. Protiúnavové aktivity hydrolyzátů loach proteinů s různými antioxidačními aktivitami. J Agric Food Chem.2012;60(50):12324– 12331. 

[17] Li X, Zhang H, Xu H. Analýza chemických složek polysacharidů shiitake a jejich účinek proti únavě při vibracích. Int J Biol Macromol.2009;45 (4):377–380. 

[18] Huang WC, Chiu WC, Chuang HL, et al. Vliv suplementace kurkuminem na fyziologickou únavu a fyzickou výkonnost u myší. Živiny.2015;7(2):905–921. 

[19] Gibson H., Edwards RH. Svalové cvičení a únava. Sports Med.1985;2(2):120–132.

[20] Anand T, Phani Kumar G, Pandareesh MD, et al. Účinek bacosidového extraktu z Bacopa monniera na fyzickou únavu způsobenou nuceným plaváním. Phytother Res.2012;26(4):587–593.

[21] Barclay JK, Hansel M. Volné radikály mohou přispívat k oxidativní únavě kosterního svalstva. Může J Physiol Pharmacol.1991;69(2):279–284. 

[22] Allen DG, Lamb GD, Westerblad H. Únava kosterního svalstva: buněčné mechanismy. Physiol Rev.2008;88(1):287–332. 

[23] Westerblad H, Allen DG, Lännergren J. Svalová únava: hlavní příčinou je kyselina mléčná nebo anorganický fosfát? Novinky Physiol Sci.2002;17:17–21. 

[24] Elias RJ, Kellerby SS, Decker EA. Antioxidační aktivita proteinů a peptidů. Crit Rev Food Sci Nutr.2008;48 (5):430–441. 

[25] Bagis S, Tamer L, Sahin G, et al. Volné radikály a antioxidanty primárněfibromyalgie: porucha oxidativního stresu? Rheumatol Int.2005;25(3):188–190. 

[26] Sivitz WI, Yorek MA. Mitochondriální dysfunkce u diabetu: od molekulárních mechanismů k funkčnímu významu a terapeutickým příležitostem. Antioxidační redoxní signál.2010;12(4):537–577. 

[27] Kolling J, Scherer EB, Siebert C, a kol. Homocystein vyvolává energetickou nerovnováhu v kosterním svalstvu potkana: je kreatin ochráncem? Cell Biochem Funct.2013;31 (7):575–584. 

[28] Huang XP, Tan H, Chen BY a kol. Extrakt Astragalus zmírňuje poranění nervů po mozkové ischemii zlepšením energetického metabolismu a inhibicí apoptózy. Biol Pharm Bull.2012;35(4):449–454. 

[29] Scheiner-Bobis G. Sodíkové čerpadlo. Jeho molekulární vlastnosti a mechanika transportu iontů. Eur J Biochem.2002;269(10):2424–2433. 

[30] Leppik JA, Aughey RJ, Medved I, et al. Dlouhodobé cvičení až únava u lidí zhoršuje aktivitu Na plus -K plus -ATPázy kosterního svalstva, uvolňování Ca2 plus sarkoplazmatického retikula a vychytávání Ca2 plus. J Appl Physiol (1985).2004;97(4):1414–1423. 

[31] Chauhan VP, Tsiouris JA, Chauhan A, et al. Zvýšený oxidační stres a snížené aktivity Ca(2 plus)/Mg(2 plus)-ATPázy a Na(plus)/K(plus)-ATPázy v červených krvinkách zimního medvěda černého. Life Sci.2002;71(2):153–161. 

[32] Fraser SF, Li JL, Carey MF a kol. Únava snižuje maximální in vitro aktivitu Na(plus)-K(plus)-ATPázy kosterního svalstva u netrénovaných a trénovaných jedinců. J Appl Physiol (1985).2002;93(5):1650–1659. 

[33] Juel C. Oxidační stres (glutathionylace) a aktivita Na, K-ATPázy v kosterním svalu potkana. PLoS One.2014;9(10):e110514. 

[34] Srikanthan K, Shapiro JI, Sodhi K, Úloha signalizace Na/K-ATPázy v oxidativním stresu souvisejícím s obezitou a kardiovaskulárním onemocněním. Molekuly.201621(9):1172. pii: E1172.