Výzkum optimalizace procesu extrakce na bázi UHPLC a ultrafiltrace pro extrakty cistanche
Apr 01, 2026
Zdrojový odkaz poskytnutý uživatelem:https://www.xjcistanche.com/news/hplc-for-simultaneous-determination-of-four-ph-77351688.html
Poznámka:Níže uvedený obsah je přeložen a redakčně optimalizován protovárny a malé dílnyzajímá se ooptimalizace procesu bylinného extraktu, při zachovánípůvodní technický význam a strukturapokud možno neporušený.
Abstraktní
Objektivní:Založit aMetoda vícesložkové kvantitativní analýzy UHPLCproCistanchea optimalizovatextrakční procesaultrafiltrační membránový separační proces.
Metody:Pro současnou kvantifikaci byla vyvinuta rychlá metoda UHPLCtři fenylethanoidní glykosidy (PhGs)vCistancheextrakční roztok. Proces extrakce byl optimalizován pomocí aBox-Behnkenův model povrchu odezvy. Pro ultrafiltraci,retenční rychlosti tří markerových sloučeninamembránový tokbyli vybráni jakokvalitníaúčinnostukazatelů, resp. TheKRITICKÁ metodabyla použita pro stanovení vah indikátorů, umožňujících komplexní vyhodnocení anortogonální ultrafiltrační experimenta byly vybrány optimální podmínky membránové separace.
Výsledky:Zavedená metoda UHPLC proCistancheextrakční roztok bylstabilní, rychlý a efektivní. Na základě analýzy povrchu odezvy a průmyslové proveditelnosti byl optimalizovaný extrakční proces určen jako:
"Extrahujte dvakrát pomocí 7násobného objemu rozpouštědla 60% ethanolu, pokaždé 80 minut."
Ukázalo to komplexní vyhodnocení ortogonálního experimentu ultrafiltracevelikost pórů membrányvýrazně ovlivnilo celkové skóre. Optimální ultrafiltrační separační proces byl:
"100 kDa membránový modul, 35 stupňů, 0,5 MPa."
Závěr:Tato studie stanovila aUHPLC vícesložková kvantitativní metodaa komplexně zhodnotilextrakční a ultrafiltrační separační procesyproCistanche. Analytická metoda a proces jsoustabilní a spolehlivý, poskytující praktický odkaz proscale-up a průmyslové aplikacezCistancheextrakce a membránová separace.
Klíčová slova: Cistanche; UHPLC; extrakce; ultrafiltrační membrána; separační proces; optimalizace procesu; fenylethanoidové glykosidy; kontrola kvality; jak vyrobit vysoce kvalitní extrakt.
Vývojový diagram výroby extraktu Cistanche Tubulosa (zdroj z wecistanche)
Supporting Service Of Wecistanche-Pro více podrobností o spolupráci
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
1. Pozadí (Proč je to důležité pro vytváření vysoce kvalitníchCistanchevýpis)
Cistanchemá dlouhou historii používání jako potravina a tradiční bylinný materiál v Číně, tradičně spojovaný s funkcemi jako „tonifikace ledvin-jang“ a „výživná esence a krev“. Mezi jeho bioaktivní složky patřífenylethanoidní glykosidy, iridoidní terpeny, lignany, polysacharidyatd. Mezi nimifenylethanoidové glykosidy (PhGs)jsou široce uznávány jako klíčové aktivní složky, včetně hlášených aktivitprotizánětlivé, protinádorové, antioxidační, proti stárnutí, zlepšení hustoty kostí a neuroprotekce.
Cistancheparazituje na kořenechHaloxylon(rostlina Chenopodiaceae) a je distribuována hlavně v Xinjiang, Gansu a dalších oblastech. S rozšířením pěstování se jeho využití vléčiva a doplňky stravyrychle rostla.
V moderní bylinné výrobě,vícesložkové hodnoceníse stále více používá pro kontrolu kvality napříč surovinami a extrakční/separační kroky. Nicméně, systematický výzkum hodnoceníCistancheextrakci a membránovou separaci pomocí více PhG markerů - zejména přesrychlé a účinné kvantitativní metody- byl poměrně omezený. Ve stejné době se membránová separace začala široce používat ve výrobě TCM a doplňkůvysoká přesnost separaceanízkouhlíkové, ekologické zpracovánía může zlepšit stabilitu kapalných přípravků.
Tato studie tedy:
vyvinul rychlou metodu UHPLC protři klíčové PhGsvCistancheextrakční roztok;
optimalizovaná extrakce pomocímetodologie reakčního povrchu;
hodnocena ultrafiltrace pomocíretence markeru + membránový tok, s objektivní vahou oKRITIKpodporující výběr procesů pro industrializaci.
2. Nástroje a materiály
2.1 Nástroje
Agilent 1290 Infinity II UHPLC(Agilent Technologies, USA)
Sloupec ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm × 2,1 mm, 1,8 μm; Waters, USA)
XS-105DU analytický zůstatek(Mettler Toledo)
BONA-GM-18 mikrofiltrační/ultrafiltrační/nanofiltrační membránová separační jednotka
TKF-18 ultrafiltrační membrány(50, 100, 200 kDa; Shandong Bona Biotechnology Co., Ltd.)
Klasický systém ultračisté vody PURELAB(ELGA, Spojené království)
Poznámka:1:echinakosid;2:verbascosid;3:isoakteosid
2.2 Materiály a činidla
Referenční normy (Národní instituty pro kontrolu potravin a léčiv, Čína):
Echinakosid (111670-201907, 91.8%)
Acteosid / Verbascoside (111530-202315, 97.6%)
Isoacteosid (112112-202401, 97.0%)
acetonitril, HPLC kvalita (Fisher Chemical, USA)
Voda:ultračisté vody
Cistanchekousky odvaru (číslo šarže . 250221) zakoupené od společnosti Henan Dali Pharmaceutical Co., Ltd.
Identifikován výzkumníkem Sun Daihua (Jingpai Chizhengtang Pharmaceutical Co., Ltd.)
Botanický původ:Cistanche tubulosa (Schenk) Wight
Ověřeno, aby vyhověloLékopis Čínské lidové republiky (vydání 2020)požadavky.
Tabulka 1. Linearita, korelační koeficient, lineární rozsah a LOQ tří složek
| Komponent | Regresní rovnice (Y=plocha píku, X=koncentrace) | korelační koeficient (R) | Lineární rozsah (µg·mL⁻¹) | LOQ (µg·mL⁻¹) |
|---|---|---|---|---|
| Echinakosid | Y = 1.873X + 49.049 | 0.9998 | 24.21–774.79 | 0.69 |
| Akteosid (verbascosid) | Y = 2.038X − 6.483 | 0.9996 | 15.96–510.64 | 0.46 |
| Isoacteosid | Y = 2.039X − 3.105 | 0.9999 | 5.00–159.86 | 0.52 |
Tabulka 2. Přesnost, opakovatelnost, stabilita a výsledky obnovení špiček (n=6)
| Komponent | Přesnost (RSD, %) | Opakovatelnost (RSD, %) | Stabilita (RSD, %) | Obnovení špičky (%) | RSD obnovy (%) |
|---|---|---|---|---|---|
| Echinakosid | 0.93 | 1.05 | 1.38 | 98.47 | 1.27 |
| Akteosid (verbascosid) | 0.86 | 1.39 | 1.54 | 101.35 | 1.04 |
| Isoacteosid | 0.62 | 0.89 | 1.07 | 99.58 | 0.93 |
Tabulka 3. Experimentální faktory a úrovně (Box–Behnken design)
| Úroveň | Faktor A: Koncentrace etanolu (%) | Faktor B: poměr rozpouštědla k materiálu (×) | Faktor C: Doba extrakce (min) |
|---|---|---|---|
| 1 | 50 | 6 | 30 |
| 2 | 60 | 7 | 60 |
| 3 | 70 | 8 | 90 |
Tabulka 4. Experimentální výsledky povrchu odezvy Box-Behnken
| Běh | A: Koncentrace etanolu (%) | B: poměr rozpouštědel (×) | C: Doba extrakce (min) | Y₁: Celkový výtěžek extrakce (%) |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 70 | 8 | 60 | 8.40 |
| 2 | 70 | 7 | 90 | 8.31 |
| 3 | 60 | 6 | 90 | 9.09 |
| 4 | 60 | 7 | 60 | 9.56 |
| 5 | 60 | 8 | 30 | 8.69 |
| 6 | 60 | 7 | 60 | 9.46 |
| 7 | 50 | 6 | 60 | 8.24 |
| 8 | 60 | 7 | 60 | 9.57 |
| 9 | 70 | 7 | 30 | 7.74 |
| 10 | 50 | 7 | 30 | 7.81 |
| 11 | 60 | 7 | 60 | 9.54 |
| 12 | 60 | 8 | 90 | 9.53 |
| 13 | 50 | 8 | 60 | 8.84 |
| 14 | 50 | 7 | 90 | 8.99 |
| 15 | 70 | 6 | 60 | 7.77 |
| 16 | 60 | 6 | 30 | 8.03 |
| 17 | 60 | 7 | 60 | 9.51 |
Tabulka 5. ANOVA pro model povrchu odezvy
| Zdroj | Součet čtverců | df | Střední čtverec | Hodnota F | Hodnota P | Význam |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Model | 7.76 | 9 | 0.8627 | 377.29 | < 0.0001 | **** |
| A | 0.3444 | 1 | 0.3444 | 150.65 | < 0.0001 | **** |
| B | 0.6786 | 1 | 0.6786 | 296.80 | < 0.0001 | **** |
| C | 1.6700 | 1 | 1.6700 | 728.35 | < 0.0001 | **** |
| AB | 0.0002 | 1 | 0.0002 | 0.0984 | 0.7629 | ns |
| AC | 0.0930 | 1 | 0.0930 | 40.69 | 0.0004 | *** |
| př.n.l | 0.0121 | 1 | 0.0121 | 5.29 | 0.0550 | ns |
| A² | 3.5600 | 1 | 3.5600 | 1555.28 | < 0.0001 | **** |
| B² | 0.3702 | 1 | 0.3702 | 161.89 | < 0.0001 | **** |
| C² | 0.6619 | 1 | 0.6619 | 289.51 | < 0.0001 | **** |
| Reziduální | 0.0160 | 7 | 0.0023 | - | - | - |
| Nedostatek kondice | 0.0081 | 3 | 0.0027 | 1.37 | 0.3712 | ns |
| Čistá chyba | 0.0079 | 4 | 0.0020 | - | - | - |
| Celkový | 7.78 | 16 | - | - | - | - |
3. Metody a výsledky
3.1 Stanovení vícesložkového obsahu (UHPLC)
3.1.1 Příprava smíšeného referenčního roztoku
Přesně odvažte vhodná množství echinakosidu, akteosidu (verbaskosidu) a isoakteosidových standardů a rozpusťte v methanolu, abyste připravili zásobní roztoky o koncentracích1936.980, 1702.144a799,280 ug·mL⁻1, resp. Přesně napipetujte1.00 mL, 0.50 mLa0.50 mLze tří zásobních roztoků do a5ml odměrná baňkazředí se na požadovaný objem methanolem a dobře se promíchá, aby se získal směsný referenční roztok.
Obrázek 3. Trojrozměrný diagram povrchu odezvy interakcí mezi různými faktory.
Obrázek 4. Účinky teploty (A), tlaku (B) a velikosti pórů (C) na separační účinnost ultrafiltrační membrány.
3.1.2 Příprava roztoku vzorku
Přesně napipetujte1.00 mLzCistancheextrahovat roztok nebo ultrafiltrovat do a10ml odměrná baňka, zřeďte na objem pomocí50% ethanol, dobře promíchejte, přefiltrujte a shromážděte následný filtrát jako testovací roztok.
3.1.3 Chromatografické podmínky
Sloupec:ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm × 2,1 mm, 1,8 μm)
Mobilní fáze:acetonitril (A) – 0,1% roztok kyseliny mravenčí (B)
Gradientová eluce:
0–5 min: 15 %–22 % A
5–7 min: 22 %–27 % A
7–10 min: 27 %–30 % A
Detekční vlnová délka:330 nm
Průtok:0,3 ml/min
Teplota kolony:30 stupňů
Objem vstřiku:1 μL
Vakuová nádrž (od Wecistanche)
Tabulka 6. Rozsahy jednofaktorových experimentů pro separaci ultrafiltrací
| Faktor | Úroveň 1 | Úroveň 2 | Úroveň 3 | Úroveň 4 | Úroveň 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| A: Teplota (stupně) | 20 | 25 | 30 | 35 | 40 |
| B: Tlak (MPa) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| C: MWCO (kDa) | 10 | 30 | 50 | 100 | 200 |
3.1.4 Specifičnost
Byly injikovány testovací roztoky (S1), směsný referenční roztok a slepý roztok (50% ethanol). Špičkové rozlišení pro každou komponentu bylo> 1.5a polotovar nevykazoval žádnou interferenci.
Tabulka 7. Faktory a úrovně pro ortogonální experiment
| Úroveň | A: Teplota (stupně) | B: Tlak (MPa) | C: MWCO (kDa) | D: Prázdný |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 30 | 0.3 | 50 | 1 |
| 2 | 35 | 0.4 | 100 | 2 |
| 3 | 40 | 0.5 | 200 | 3 |
3.1.5 Linearita a limit kvantifikace (LOQ)
Připravte směsný referenční roztok obsahující echinakosid, akteosid a isoakteosid at774.792, 510.643a159,856 ug·mL⁻1, respektive, pak zředit2×, 4×, 8×, 16×, 32×získat šest úrovní koncentrace. Za výše uvedených chromatografických podmínek použijte koncentraci (X) vs. plocha píku (Y) k sestavení kalibračních křivek. Korelační koeficienty (R) bylyVětší nebo rovno 0,9996, což ukazuje na vynikající linearitu. (Regresní rovnice, lineární rozsah a LOQ jsou uvedeny v původních tabulkách.)
Tabulka 8. Ortogonální experimentální design a výsledky pro ultrafiltrační membránovou separaci
Poznámka:Retenční rychlost WWW je uváděna pro tři analyty:
W1W_1W1 Echinakosid; W2W_2W2 Akteosid (verbascoside); W3W_3W3 Isoacteosid.
Membránový tok W4W_4W4 jednotka: [L⋅(m2⋅h)−1][ \\mathrm{L \\cdot (m^2 \\cdot h)^{-1}} ][L⋅(m2⋅h)−1]. Jednotka komplexního skóre Y2Y_2Y2: (%).
| Běh | A: Teplota (stupně) | B: Tlak (MPa) | C: MWCO (kDa) | D (prázdné) | W1W_1W1 (%) | W2W_2W2 (%) | W3W_3W3 (%) | W4W_4W4 [L⋅(m2⋅h)−1][L·(m²·h)⁻¹][L⋅(m2⋅h)−1] | Y2Y_2Y2 (%) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 30 | 0.3 | 50 | 1 | 3.49 | 1.12 | 0.36 | 2.05 | 39.88 |
| 2 | 30 | 0.4 | 100 | 2 | 5.72 | 1.62 | 0.50 | 11.14 | 67.71 |
| 3 | 30 | 0.5 | 200 | 3 | 1.59 | 0.61 | 0.20 | 32.14 | 52.85 |
| 4 | 35 | 0.3 | 100 | 3 | 6.65 | 1.89 | 0.62 | 9.38 | 76.48 |
| 5 | 35 | 0.4 | 200 | 1 | 1.65 | 0.63 | 0.21 | 25.00 | 46.27 |
| 6 | 35 | 0.5 | 50 | 2 | 3.36 | 1.08 | 0.35 | 3.04 | 39.64 |
| 7 | 40 | 0.3 | 200 | 2 | 1.74 | 0.68 | 0.22 | 26.79 | 49.36 |
| 8 | 40 | 0.4 | 50 | 3 | 3.23 | 1.04 | 0.33 | 2.96 | 37.94 |
| 9 | 40 | 0.5 | 100 | 1 | 5.52 |
Součty / rozsahy na úrovni faktorů (jak je znázorněno na obrázku):
| Statistický | A | B | C | D |
|---|---|---|---|---|
| k1k_1k1 | 53.48 | 55.24 | 39.15 | 52.39 |
| k2k_2k2 | 54.13 | 50.64 | 71.74 | 52.24 |
| k3k_3k3 | 52.78 | 54.51 | 49.49 | 55.76 |
| RRR | 1.35 | 4.60 | 32.59 | 3.52 |
Tabulka 9. Výsledky analýzy rozptylu (ANOVA).
| Faktor | DfD_fDf | Adj SS | Adj MS | F | P |
|---|---|---|---|---|---|
| A: Teplota | 2 | 2.75 | 1.37 | 0.12 | 0.90 |
| B: Tlak | 2 | 36.65 | 18.32 | 1.54 | 0.39 |
| C: MWCO | 2 | 1663.72 | 831.86 | 70.12 | 0.01 |
| D: Prázdný | 2 | 23.73 | 11.86 | - | - |
Tabulka 10. Výsledky ověření ortogonálního experimentu
| Běh | Retence echinakosidu (%) | Retence akteosidů (%) | Retence isoakteosidů (%) | Membránový tok [L⋅(m2⋅h)−1][L·(m²·h)⁻¹][L⋅(m2⋅h)−1] |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 94.85 | 92.54 | 91.04 | 10.42 |
| 2 | 94.71 | 93.03 | 92.54 | 10.04 |
| 3 | 94.71 | 92.54 | 91.04 | 10.61 |
| Střední | 94.76 | 92.70 | 91.54 | 10.36 |
| RSD (%) | 0.1 | 0.3 | 0.9 | 2.8 |
3.1.6 Přesnost, opakovatelnost, stabilita a zotavení
Validace metody byla provedena podle pokynů pro validaci analytických metod vČínský lékopis (2020)včetně přesnosti, opakovatelnosti,48hodinová stabilitaa zotavení hrotu. Výsledky ukázaly, že metoda je vhodná pro stanovení obsahuCistancheextrakční roztok.
3.2 Studie procesu extrakce (Jak extrahovat pro vysokou kvalitu a vysoký výnos)
3.2.1 Jednofaktorové experimenty
Každá použitá extrakce30 grozdrcenýCistanchesurovina. S použitím extrakčních výtěžků echinakosidu, akteosidu a isoakteosidu jako indikátorů hodnocení byly studovány následující faktory:
Koncentrace ethanolu:40%, 50%, 60%, 70%, 80%
Časy těžby:1, 2, 3, 4, 5
Poměr rozpouštědla k materiálu:5×, 6×, 7×, 8×, 9×
Doba extrakce:30, 60, 90, 120, 150 min
Při studiu jednoho faktoru byly ostatní fixovány (základ:60% ethanol, 7x rozpouštědlo, 3x, 1,5 h). Způsob extrakce:refluxní extrakce(vodní lázeň při80 stupňů). Každá podmínka byla provedena trojmo.
zjištění:
Celkový výtěžek extrakce tří markerů se zvýšil a poté se snížil s koncentrací ethanolu; rozdíly byly významné (P < 0,05).Nejlepší koncentrace etanolu: 60 %.
Poměr rozpouštědel, doby extrakce a čas vykazovaly podobné trendy: výtěžek se zvýšil a poté se ustálil. Po7x rozpouštědlo, 2 extrakcea1 h, rozdíly již nebyly významné.
S ohledem na náklady a efektivitu škálování je použitý design povrchu odezvy: etanol50–70%, rozpouštědlo6–8×, čas30–90 mins dobou extrakce nastavenou na2.
Zařízení na separaci membrán (od Wecistanche)
3.2.2 Návrh povrchu a výsledky Box–Behnken Response
Pro další optimalizaci byl použit Box-Behnkenův model povrchu odezvy. Proměnná odezvy bylacelkový výtěžek extrakce (Y1)ze tří fenylethanoidových glykosidů.
Proložená regresní rovnice byla:
Y1=9.53−0,21A+0.29B+0.46C+0.01AB−0,15AC−0,06BC−0,92A2−0,30B2−0,40C2Y1=9.53 - 0.21A + 0.29B + 0.46C + 0.01AC {}BC - 0.06BC - 0.92A^2 - 0.30B^2 - 0.40C^2Y1=9.53−0,21A+0.29B+0.46C+0.01AB−0,15AC−0,06BC−0,92A2−0,30B2−0,40C2
s R2=0.9979R^2=0.9979R2=0.9979.
ANOVA ukázala:
Model byl vysoce významný (P < 0,0001)
Nedostatek přizpůsobení nebyl významný (P=0.3712), což ukazuje na dobrou vhodnost modelu
Pořadí vlivu faktoru:C > B > A
A, B, C a kvadratické členy A2A^2A2, B2B^2B2, C2C^2C2 byly extrémně významné (P < 0,0001)
Termín interakceACbyl extrémně významný (P < 0,001)
Pomocí Design-Expert 12 byly předpovězené optimální podmínky:
Ethanol:58.41%
Poměr rozpouštědel:7.44×
Čas:77.26 min
S ohledem na pohodlí a cenu průmyslového ovládání byl konečný praktický stav upraven na:
60% ethanol, 7x rozpouštědlo, 80 min, dvakrát extrahováno.
3.2.3 Ověření procesu
Byly provedeny tři paralelní validační experimenty za zvolených optimálních podmínek. Průměrný celkový výtěžek extrakce byl9.66%, dobře odpovídá predikci modelu (relativní chyba0.11%). Extrakční výtěžky všech tří markerových sloučenin byly na vysoké úrovni, což ukazuje na dobrou shodu mezi předpokládanými a skutečnými výsledky.
3.3 Studie procesu separace ultrafiltrací (jak zlepšit čirost/stabilitu při zachování aktivních látek)
3.3.1 Příprava ultrafiltračního napájecího roztoku
Dvanáct kilogramů drcenéhoCistanchekousky odvaru byly extrahovány pomocí optimalizovaného extrakčního procesu výše a extraktový roztok byl použit jako ultrafiltrační nástřik. Naměřené koncentrace byly:
Echinakosid:6,99 mg.ml-1
Akteosid:2,01 mg.ml-1
Isoacteosid:0,67 mg.ml-1
3.3.2 Postup ultrafiltrace a indikátory hodnocení
Za každý běh,2 Lv membránové separační jednotce. Teplota a transmembránový tlak byly upraveny podle experimentálního návrhu. Po dosažení rovnováhy (0,2 l) byl membránový tok vypočten jako:
Flux=VtA\\text{Flux}=\\frac{V}{tA}Flux=tAV
kde VVV je objem permeátu, ttt je doba filtrace a AAA je účinná plocha membrány.
UHPLC byla použita ke kvantifikaci tří markerů v permeátu. Účinek ultrafiltrace byl hodnocen pomocí:
Míra retencekaždé aktivní složky
Uchování (%)=Obsah v ultrafiltrátuObsah ve zdroji×100%\\text{Uchování (\\%)}=\\frac{\\text{Obsah v ultrafiltrátu}}{\\text{Obsah ve zdroji}} \\times 100\\%Retention (%)=Obsah ve zdrojiObsah v ultrafiltrátu×10
Membránový tok(ukazatel účinnosti)
3.3.3 Jednofaktorové provedení
Teplota, tlak a MWCO (velikost pórů) byly studovány jako jednotlivé faktory s nastavenými základními podmínkami30 stupňů, 0,3 MPa, 50 kDa. Rozsahy vybrané pro ortogonální experiment byly určeny na základě jednofaktorových výsledků.
3.3.4 Jednofaktorová zjištění (praktický význam pro výrobu)
Teplota: retenční trendy byly podobné;35 stupňůposkytla nejlepší celkový účinek; tok má tendenci se zvyšovat s teplotou → zvoleno30, 35, 40 stupňů
Tlak: retence klesá s tlakem, ale průtok silně závisí na tlaku a určuje průchodnost → zvoleno0.3, 0.4, 0.5 MPa
MWCO: silně ovlivnilo retenci i tok.100 kDadosáhlnejvyšší retencepro tři značky, zatímco200 kDadal nižší retenci → vybráno50, 100, 200 kDa
Komplexní vyhodnocení a optimální podmínky ultrafiltrace
Protože se tok v různých podmínkách měnil silněji než retence, studie použila metoduKRITIKmetoda s dynamickým mechanismem přizpůsobení, aby se zabránilo převážení vysoce rozptýlených ukazatelů (toku). Na základě celkového hodnocení,velikost pórů membrányměl zásadní vliv na skóre.
Optimální proces ultrafiltrace:
100 kDa membránový modul, 35 stupňů, 0,5 MPa
Tento proces je popsán jako nízkouhlíkový a ekologický, svysoká retence aktivních markerůpři zohlednění účinnosti separace, díky čemuž je vhodný pro širší použití.
4. Diskuse (Implementační pokyny pro továrny a dílny)
4.1 Multi-marker QC je základem „vysoce kvalitního extraktu“
Pokud chcete vyrobit konzistentní vysoce kvalitní bylinný extrakt, potřebujete:
A metoda rychlého testukteré lze spouštět často (průběžná kontrola kvality)
Více aktivních značek(nejen jedna sloučenina)
Tato studie demonstruje 10minutovou UHPLC metodu pro tři klíčové PhG, která podporuje rutinní kontrolu šarží pro výrobu extraktu a membránové zpracování.
4.2 Extrakce: rovnováha mezi výnosem, náklady a škálovatelností
Optimalizované podmínky extrakce -60% ethanol, 7× rozpouštědlo, 80 min, 2 cykly- je průmyslově šetrný, protože:
Používá mírnou koncentraci etanolu (bezpečné a cenově výhodné)
Využívá poměr rozpouštědel a čas, které lze snadno standardizovat
Snižuje zbytečné cykly navíc, jakmile dojde k poklesu výnosu
4.3 Ultrafiltrace: zachovává aktivní složky a zároveň zlepšuje stabilitu
Ultrafiltrace se často používá ke zlepšení čirosti a stability kapalných extraktů (např. odstranění větších molekul/nečistot). Zvolená podmínka -100 kDa, 35 stupňů, 0,5 MPa- je navržen tak, aby:
Udržujte přijatelný tok pro propustnost výroby
Nabídněte proces, který lze standardizovat a škálovat
5. Praktická klíčová slova (SEO / GPT vhodné pro průmyslové weby)
jak vyrobit vysoce kvalitní extrakt
Cistancheoptimalizace těžby
UHPLC vícesložková kvantifikace
analýza fenylethanoidových glykosidů (PhGs).
echinakosid akteosid isoakteosid UHPLC
vývoj procesu bylinného extraktu
membránová filtrace pro bylinné extrakty
ultrafiltrace MWCO 100 kDa
povrch odezvy výtěžnosti Box–Behnken
kontrola kvality během procesu (IPQC) pro rostlinné extrakty
škálovatelný protokol extrakce ethanolem
zlepšit čirost a stabilitu tekutého bylinného extraktu
Reference
Liu X, Yang Z, Han M a kol. Bioaktivní složky, farmakologické vlastnosti a aplikaceCistanche deserticolaYC Ma: komplexní přehled.Živiny. 2025;17(9):1501.
Národní lékopisná komise.Lékopis Čínské lidové republiky, Vol. 1. Peking: China Medical Science and Technology Press; 2020.
Bi Cuicui, Liu Yinlu, Wei Fenfen a kol. Pokrok ve výzkumu hlavních chemických složek a biologických aktivitCistanche. Výzkum hodnocení léčiv. 2019;42(9):1896-1900.
Chen Changmao, Gazang Zhaxi, Wang Jie a kol. Pokrok ve výzkumu aktivních složek a farmakologických mechanismůCistanche. Tradiční čínské a bylinné drogy. 2025;56(12):4464-4477.
Liu Aoxue, Wan Feng, Hu Jiangxue a kol. Vztah mezi strukturou a aktivitou a mechanismy fenylethanoidních glykosidů podporujících neuroregeneraci na základě buněčných testů, síťové farmakologie a molekulárního dokování.Výzkum hodnocení léčiv. 2025;48(1):136-142.
Li J, Zou Z, Su X a kol.Cistanche deserticolazlepšuje osteoporózu vyvolanou ovariektomií hlavně regulací metabolismu lipidů: Poznatky ze sérové metabolomiky pomocí UPLC/Q-TOFMS.J Ethnopharmacol. 2024;322:117570.
Wen L, Hu J, Zhang J a kol. Fenylethanolové glykosidy z Herba Cistanche zlepšují mikroprostředí hypoxického nádoru a zesilují účinky oxaliplatiny prostřednictvím HIF-1 signální dráhy.Mol Med Rep. 2021;24(1):517.
Yao SQ, Xu ZP, Guo WX a kol. Neuroprotektivní účinekCistanche deserticolaGlykosidy v myším modelu Parkinsonovy choroby indukované MPTP zahrnují aktivaci Nrf2.J Toxicol Environ Health A. 2025;88(14):576-588.
Feng Duo, Duan Hao, Lü Yanni a kol. Aplikace zCistancheve zdravé výživě v Číně.Věda a technologie potravin. 2021;46(12):76-81.
Zhao Hongting, Xin Guoxiong, Guo Yuan. Pokrok ve výzkumu léčivé a jedlé homologní TCMCistanche. Tradiční čínské a bylinné drogy. 2025;56(9):3316-3329.
Mei Ju, Wu Tao, Li Qiang a kol. Změny kvality a zpracování složek skořice různého původu.Výzkum a vývoj přírodních produktů. 2024;36(3):377-387,399.
Meng Ran, Wu Zhe, Feng Wei a kol. Hodnocení kvality pampelišky na základě HPLC fingerprintingu, chemometrie a vícesložkové kvantifikace.Tradiční čínské a bylinné drogy. 2022;53(24):7887-7896.
Wu Xin, Wu Tao, Wang Bingqing a kol. Stanovení otisků prstů UPLC a kvantifikace šesti složek v lékořici různého původu.Tradiční čínské a bylinné drogy. 2025;56(7):2518-2526.
Li Yang, Bubi Ajiar·Hayirati, Qin Yadi a kol. Simultánní stanovení čtyř fenylethanoidních glykosidů vCistanchekousky odvaru aCistanche tubulosaextrakty pomocí HPLC.China Pharmaceuticals. 2022;31(6):77-80.
Ding Yanxia, Wang Xiaoqin, Zhang Ying. Stanovení šesti hlavních fenylethanoidových glykosidů vCistancheléčivých materiálů pomocí HPLC.Shizhen Guoyi Guoyao. 2020;31(4):813-816.
Dong Zhiguo, Zhou Rong, He Jinfeng a kol. Aplikace a perspektivy technologie membránové separace v zelené výrobě TCM.Tradiční čínské a bylinné drogy. 2024;55(12):4225-4234.
Li Yaxin, Liang Huizhen, Zhang Wensheng a kol. Pokrok ve výzkumu technologie zpracování zdravotního likéru.China Brewing. 2022;41(5):23-27.
Wang Yuetong, Liu Hongbo, Xu Sining a kol. Vliv ultrafiltrační membránové technologie na fyzikálně-chemické vlastnosti a antioxidační aktivitu vodních extraktů Astragalus.Moderní čínská medicína. 2024;26(4):695-701.
Huang Xiang, Guo Yehong, Jia Cunqin a kol. Studium procesu extrakce a způsobu sušeníCistanche. Tradiční čínské a bylinné drogy. 2019;50(15):3622-3630.
Ma Jincheng, Wang Xuxing, Li Qian a kol. Porovnání osmi chemických složek ve dvou původech založené na UPLCCistanchesyrové produkty a produkty zpracované vínem.Moderní čínská medicína. 2025;27(6):1040-1048.
