Terapeutický účinek Cistanche Deserticola na defekaci u modelu potkanů se senilní zácpou
Mar 27, 2022
Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang
Abstraktní
POZADÍ
Zácpa patří mezi chronická gastrointestinální funkční onemocnění. Vážně to ovlivňuje kvalitu života. Cistanche deserticola (C. deserticola) může léčit zácpu samozřejmě, ale její mechanismus nebyl objasněn. Předpokládali jsme, že jeho mechanismus zlepšuje střevní motilitu stimulací intersticiálních Cajalcells (ICC). Aktivace receptoru C-kit na povrchu ICC úzce souvisí s funkcí ICC a významnou roli v ní hrají signální dráhy faktoru kmenových buněk (SCF)/C-kit. Pro prozkoumání mechanismu, jakým C. deserticola léčí zácpu, se tato studie zaměřovala na vytvoření modelu zácpy u potkanů a prozkoumání role signální dráhy SCF/C-kit v léčbě.
CÍL
Prozkoumat signální dráhy SCF/C-kit v roli C. deserticola při léčbě zácpy na modelu zácpy na potkanech.
METODY
48 8-mostarých potkanů Sprague–Dawley bylo rozděleno do 4 skupin metodou náhodné váhy: normální skupina (n=12), modelová skupina (n=12), skupina C. deserticola (n=12) a skupina blokujících (n=12). Normální skupina dostala normální fyziologický roztok sondou; modelová skupina dostávala loperamid žaludeční sondou; blokující skupina dostávala loperamid a C. deserticola žaludeční sondou a STI571 byl injikován intraperitoneálně. Během léčby byla každých 10 dní zaznamenávána hmotnost, fekální granule a kvalita stolice. V den 20 po modelové indukci byly odstraněny tkáně tlustého střeva z každé skupiny. K pozorování patologických změn bylo použito barvení hematoxylinem a eosinem. Hladiny exprese genů SCF, C-kit a Aquaporin byly detekovány imunohistochemií, westernovým přenosem a kvantitativní polymerázovou řetězovou reakcí v reálném čase. Epiteliální mitochondrie tlustého střeva a pohárkové buňky byly pozorovány transmisní elektronovou mikroskopií.
VÝSLEDEK
Ve srovnání s normální skupinou, jak léčba postupovala, hmotnost krys v modelové a blokátorské skupině významně klesla, hmotnost stolice se snížila a kvalita stolice byla suchá (P < {{0}}.{{6}="" }5).="" c.="" deserticola="" zvrátila="" pokles="" tělesné="" hmotnosti="" a="" hmotnosti="" stolice="" a="" zlepšila="" kvalitu="" stolice.="" histopatologická="" analýza="" ukázala,="" že="" slizniční="" epitel="" tlustého="" střeva="" v="" modelové="" skupině="" byl="" neúplný="" a="" uspořádání="" žláz="" bylo="" nepravidelné="" nebo="" poškozené.="" léčba="" pomocí="" c.="" deserticola="" zlepšila="" integritu="" a="" kontinuitu="" epiteliálních="" buněk="" a="" pravidelné="" uspořádání="" žláz.="" blokující="" látky="" inhibovaly="" účinky="" c.="" deserticola="" imunohistochemie="" a="" kvantitativní="" polymerázová="" řetězová="" reakce="" v="" reálném="" čase="" ukázaly,="" že="" exprese="" scf="" a="" c-kitproteinu="" nebo="" genů="" v="" tkáni="" tlustého="" střeva="" modelové="" skupiny="" byla="" snížena="" (p="">< 0,05),="" zatímco="" léčba="" c.="" deserticola="" zvýšila="" expresi="" proteinu="" nebo="" genu="" (p="">< 0,05).="" western="" blotting="" ukázal,="" že="" exprese="" akvaporinu="" apq3="" byla="" zvýšena,="" zatímco="" exprese="" cx43="" v="" modelové="" skupině="" klesla.="" léčba="" pomocí="" c.="" deserticola="" inhibovala="" expresi="" apq3="" a="" podporovala="" expresi="" cx43.="" transmisní="" elektronová="" mikroskopie="" ukázala,="" že="" mitochondrie="" epitelu="" tlustého="" střeva="" v="" modelové="" skupině="" byly="" oteklé="" a="" neuspořádaně="" uspořádány="" a="" mikroklky="" byly="" řídké.="" stav="" byl="" lepší="" ve="" skupině="" c.="" deserticola.="" myši="" ošetřené="" blokátorem="" sti571="" potvrdily,="" že="" blokování="" dráhy="" scf/c-kit="" inhibovalo="" zlepšení="" zácpy="" c.="">
ZÁVĚR
C. deserticola zlepšila defekaci u potkanů se zácpou a důležitou roli v léčbě hrála signální dráha SCF/C-kit, která je klíčovým článkem funkce ICC.
klíčová slova:Cistanche deserticola; senilní zácpa; faktory kmenových buněk; C-kit
čerstvá cistanche surovina
ÚVOD
Senilní zácpa (SC) je jedno z běžných chronických funkčních onemocnění trávicího traktu u geriatrických pacientů, které vyvolává nebo zhoršuje cévní mozkové příhody a další onemocnění a vážně ovlivňuje kvalitu života starší populace[1,2]. Podle tradiční čínské medicíny je hlavní etiologie a patogeneze SC Vyžadují gastrointestinální horko, nedostatek jinu a jinu a zvlhčení střev[3,4], zatímco Cistanche deserticola (C. deserticola) může zahřívat ledviny a uvolnit střeva. zlepšení motility a léčba SC je jasná, ale její mechanismus nebyl objasněn[5,6]. Intersticiální Cajalcells (ICC) jsou zvláštním typem mezenchymálních buněk v gastrointestinálním traktu. Aktivace receptoru C-kit na povrchu ICC úzce souvisí s buněčnou proliferací, diferenciací a funkcí. ICC se účastní patogeneze mnoha gastrointestinálních motorických dysfunkcí [7,8]. Aktivace C-kitu závisí na vazbě jeho ligandového faktoru kmenových buněk (SCF)[9]. Prozkoumat účinek a mechanismus účinku C. deserticola na SC, tato studie si kladla za cíl vytvořit SC model u potkanů indukovaného byloperidolem, aby se prozkoumala úloha signální dráhy SCF/C-kit v léčbě zácpy C. deserticola.
MATERIÁLY A METODY
Experimentální materiály
Pokusná zvířata:Experimentálními zvířaty bylo 48 samců 8-mostarých potkanů Sprague Dawley o hmotnosti 500-550 g; vše zakoupeno od Changsha Tianqin BiotechnologyCo. Ltd. Krysy byly chovány ve zvířecí laboratoři Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd., kde jim bylo poskytnuto normální denní a noční světlo, jídlo a pití. Všechny postupy byly v souladu s pokyny pro řízení vydanými etickou komisí nemocnice pro tradiční čínskou medicínu Chongqing.
Primární činidla:Primární činidla zahrnovala loperamid (Sigma, St. Louis, MO, Spojené státy americké), C. deserticola od Hubei Jurui Traditional Chinese Medicine DecoctionCo. Ltd., STI571 od Chinese Selleck Co. Ltd., a SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), aquaporin 3 (AQP3) a -aktinové protilátky (Abcam, Cambridge, MA, Spojené státy americké), PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit a Premix Taq™ (Ex Taq™ verze 2.0) (Takara Co. Ltd., Japonsko).
Doplňky extraktu z bylin cistanche
Metody
Příprava SC modelu a seskupení:Aby se zabránilo vlivu matoucích faktorů, jako je tělesná hmotnost, na experimentální výsledky, byly krysy náhodně seskupeny metodou blokového náhodného seskupování. Čtyřicet osm krys bylo krmeno adaptivně po dobu 1 týdne a krysy byly očíslovány v pořadí podle hmotnosti od lehké po těžkou. Podle pořadí tělesné hmotnosti byly krysy rozděleny do 12 zón (hmotnost krys v každé zóně byla podobná), se 4 krysami v každé zóně. 12 zón bylo rozděleno do 4 skupin po 12 (normální, model, C. deserticola a blokátor). Krysám v modelové skupině byl podán žaludeční sondou loperamid (0.0625/100 g, 10 ml/kg). První dávka žaludeční sondou byla zdvojnásobena a lék byl podáván v 10:00 každý den, jednou denně po dobu 20 po sobě jdoucích dnů. Normální skupině bylo podáno stejné množství normálního fyziologického roztoku žaludeční sondou. Kromě toho byla modelová skupina léčena C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) sondou. Skupina blokátorů dostala C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) sondou a STI571 (25 mg/ml, 1 ml/kg) intraperitoneální injekcí. Během experimentu byla každých 10 dní zaznamenávána tělesná hmotnost, hmotnost stolice a stav stolice. U žádného z potkanů nedošlo k náhodnému úmrtí. O dvacet dní později byly krysy usmrceny a tkáň tlustého střeva byla odebrána pro vyšetření a konzervaci kapalným dusíkem. Zbývající části byly upevněny a zapuštěny.
Histopatologická analýza:Krysy hladovějící přes noc byly následující den anestetizovány intraperitoneální injekcí 7% chloralhydrátu (5 ml/kg). Břicho bylo otevřeno, aby se oddělila tkáň tlustého střeva, a bylo odstraněno 8-10 mm tlustého střeva. Střevní obsah byl odstraněn jemným třepáním v předem vychlazeném polybutylenukcinátu a fixován po dobu 24 hodin ve 4% fixačním roztoku paraformaldehydu. Bylo provedeno konvenční zalití parafínem. Tkáňové řezy (5 μm) byly odstraněny pro barvení hematoxylinem a eosinem a histopatologická morfologie byla pozorována pod mikroskopem.
Detekce exprese SCF a C-kitu imunohistochemickým barvením:Parafínové tkáně vyšetřené histopatologií výše byly nařezány, rehydratovány nařezaným xylenem odvoskovaným gradientem ethanolu, antigenem opraveným teplem a uzavřeny po dobu 1 hodiny kozím sérem při teplotě místnosti. SCF a primární protilátky C-kit byly přidány po kapkách a tkáně byly udržovány přes noc při 4 stupních. Po opláchnutí polybutylensukcinátem byla křenová peroxidáza nakapána, aby se označila sekundární protilátka, oplachována polybutylensukcinátem po dobu 5 minut, kapka 2,4-roztok chromogenu kyseliny diaminomáselné, znovu obarven hematoxylinem, reverzní gradientová dehydratace alkoholem, transparentní xylenem a neutrálním pryskyřicové těsnění. Mikroskopicky byla jádra purpurově modrá a produkty pozitivního výsledku byly hnědožluté nebo žluté částice.
Detekce exprese C-kit mRNA v tkáni tlustého střeva kvantitativní polymerázovou řetězovou reakcí v reálném čase (RT-qPCR):Zmrazená tkáň krysího tlustého střeva byla rozemleta v homogenizátoru a byl přidán 1 ml RNAiso Plus. Celková RNA tkáně tlustého střeva byla extrahována metodou chloroform/isopropanol a kvalita RNA byla detekována gelovou elektroforézou. Po identifikaci gelovým zobrazovačem Bio-Rad byl 1 ug RNA reverzně transkribován do cDNA pomocí soupravy Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit. Podle databáze NCBI Gene ID: 64030 byla nalezena oblast CDS genu C-kit a kombinována s NCBI Primer-Blast design Sekvence primeru, která byla syntetizována Sangon Biotech Co. Ltd, C-kit sekvence primeru sense řetězec 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', antisense řetězec 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT{{13}', - aktin sense řetězec 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', antisense řetězec 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. PCR amplifikace byla provedena na přístroji Bio-RadCFX90 Real-Time PCR. Podmínky pro PCR test byly počáteční denaturace při 95 stupních po dobu 5 minut, 30 cyklů při 95 stupních po 30 s, 60 stupních po 30 s a 72 stupních po 1 minutu s následnou konečnou extenzí při 72 stupních po dobu 10 minut. K analýze relativní genové exprese byl použit 2-ΔΔCt (ΔCt=hodnota Ct - -aktin Ctvalue).
Detekce hladiny proteinové exprese Cx43 a AQP3 v tkáni tlustého střeva metodou Western blotting:Byl odebrán asi 1 cm zmrazené tkáně tlustého střeva a lyžován silnou pyrolýzní kapalinou RIPA (100 μl). Tkáň byla 20krát homogenizována pomocí glasshomogenizeru a přenesena do 1,5ml centrifugační zkumavky. Supernatant byl extrahován po centrifugaci při 12 000 ot./min při 4 stupních po dobu 5 minut a koncentrace celkového proteinu v supernatantu byla stanovena metodou BCA. Odebrali jsme 25 ug denaturovaného proteinu, abychom provedli elektroforézu na dodecylsulfát-polyakrylamidovém gelu sodnou, a poté jsme proteiny v gelu přenesli na polyvinylidenfluoridemembránu při konstantním proudu 200 mA, poté jsme utěsnili kapalinou 5% odstředěného mléka po dobu 2 hodin při pokojové teplotě. Odpovídající primární protilátky byly zředěny uzavírací kapalinou, inkubovány při 4 stupních přes noc, poté byly promyty membránové rezistence a přidány druhé protilátky. Po přidání ECL kapaliny byly umístěny pod expozimetr pro test pomocí analýzy optické hustoty.
Transmisní elektronová mikroskopie:Vzali jsme asi 1 cm proximální tkáně tlustého střeva, fixovali jsme ji ve 2,5% glutaraldehydu po dobu 24 hodin, dehydratovali jsme ji odstupňovaným acetonem, vložili do Epon812 a na ultramikrotomu jsme nařezali 50 nm ultratenké řezy. Řezy byly obarveny acetátem oxidu uraničitého a barvicí kapalinou citrátem olovnatým při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Pozorovali jsme klky tlustého střeva, mitochondrie epiteliálních buněk a pohárkové buňky pod transmisním elektronovým mikroskopem Philips Tecnai-10.
Statistická analýza
Pro analýzu dat byl použit software SPSS 19.{1}} a pro vykreslení výsledků software GraphPad Prism8.4. Pro testování normality byl použit Shapiro-Wilkův test. Data s normální distribucí byla reprezentována průměrem ± SD. Chybové položky byly použity k reprezentaci průměru ± SD hemoglobinu po léčbě. Pro srovnání mezi dvěma skupinami byl použit studentův t-test. Analýza rozptylu byla použita pro srovnání mezi více skupinami. Metoda Student-Newman-Keuls byla použita pro srovnání mezi několika skupinami v párech a Dunnettův test byl použit k měření rozdílů mezi každou experimentální skupinou a kontrolní skupinou v sekvenci. Přidružená data byla měřena ve více časových bodech a opakovaná analýza dat měření rozptylu byla provedl. Pokud test sféricity ukázal P > 0.{{10}}5, byla použita opakovaná analýza rozptylu dat měření. Pokud P < 0,05,="" byla="" vzata="" rovnice="" zobecněného="" odhadu.="" data,="" která="" neodpovídala="" normální="" distribuci,="" byla="" reprezentována="" m="" (p25,="" p75)="" a="" pro="" srovnání="" mezi="" skupinami="" byl="" použit="" kruskal-wallisův="" h="" rank-sum="" test.="" χ2="" test="" byl="" použit="" k="" porovnání="" mezi="" skupinami,="" když="" data="" byla="" neuspořádaná="" data,="" a="" pearsonův="" χ2="" test="" byl="" použit,="" pokud="" podíl="" buněk="" s="" teoretickou="" frekvencí="">< 5="" byl="">< 20="" procent.="" pokud="" byl="" podíl="" buněk="" s="" teoretickou="" frekvencí="">< 5="" větší="" nebo="" roven="" 20="" procentům,="" byl="" použit="" fisherův="" přesný="" test.="" p="">< 0,05="" bylo="" použito="" k="" určení,="" že="" rozdíl="" byl="" statisticky="">
Obrázek 1 Histopatologické změny tlustého střeva.
VÝSLEDEK
Všeobecné podmínky
Jeden den po žaludeční sondě loperamidu ve srovnání s normální skupinou byla tělesná hmotnost a hmotnost stolice v modelové skupině významně snížena (P < {0}},05),="" ale="" nebyl="" zjištěn="" žádný="" významný="" rozdíl="" v="" kvalitě="" stolice="" skóre="" (p=""> 0,05). Léčba C. deserticolate v modelové skupině zpomalila pokles tělesné hmotnosti a hmotnosti stolice (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">
Histopatologie tlustého střeva
Barvení tkáně tlustého střeva potkanů hematoxylinem a eosinem je znázorněno na obrázku 1. V normální skupině byly střevní klky intaktní, střevní sliznice intaktní a kontinuální, buňky a žlázy byly uspořádány pravidelně. Sliznice a submukóza nebyly infiltrovány zánětlivými buňkami a struktura tkáně byla normální. V modelové skupině byly střevní klky a sliznice z velké části zničeny, místní klky byly uvolněny a volně uspořádány a část žlázové struktury zmizela. Ve skupině C. deserticola bylo histopatologické zabarvení menší než u modelové skupiny, ale v některých pohárkových buňkách došlo k nekróze. Po intraperitoneální injekci ve skupině blokátorů ve srovnání se skupinou C. deserticola stále docházelo k lokální ztrátě střevních klků a ke zlomenině a ztrátě střevní sliznice.
Obrázek 2 Exprese faktoru kmenových buněk a poměr relativní optické hustoty v tkáni tlustého střeva imunohistochemickou detekcí.
Detekce exprese faktoru kmenových buněk a proteinu C-kit imunohistochemickým barvením
Imunohistochemické barvení ukázalo, že SCF a C-kit byly exprimovány v tlustém střevě kontrolní skupiny. Ve srovnání s kontrolní skupinou byla exprese SCF a C-kitu v modelové skupině významně snížena (P < 0.05).="" ve="" srovnání="" s="" modelovou="" skupinou="" byla="" exprese="" scf="" a="" c-kitu="" ve="" skupině="" c.="" deserticola="" významně="" zvýšena="" (p="">< 0,05).="" mezi="" skupinami="" blokátorů="" a="" modelovými="" skupinami="" nebyl="" žádný="" rozdíl="" v="" expresi="" scf="" a="" c-kitu="" (p="">< 0,05,="" obrázky="" 2="" a="">
RT-qPCR
RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Tyto výsledky ukázaly, že exprese C-kitu upravená C. deserticola se podílela na zlepšení zácpy a blokátory inhibovaly účinnost C. deserticola.
výhody cistanche salsy
Western blotting
Western blotting ukázal, že protein AQP3 byl exprimován na nízké úrovni v normální kontrolní skupině, zatímco v modelové skupině byl významně zvýšen ve srovnání s kontrolní skupinou (obrázek 5) (P < 0.05)="" .="" exprese="" proteinu="" aqp3="" byla="" po="" léčbě="" c.="" deserticola="" snížena="" a="" inhibiční="" účinek="" c.="" deserticola="" na="" expresi="" aqp3="" byl="" inhibován="" léčbou="" blokátorem="" (p="">< 0,05).="" exprese="" cx43="" byla="" opačná="" než="" u="" aqp3.="" tyto="" výsledky="" naznačují,="" že="" farmakologického="" účinku="" c.="" deserticola="" na="" krysy="" s="" sc="" bylo="" dosaženo="" podporou="" exprese="" cx43="" a="" inhibicí="" exprese="" aqp3="" (obrázky="">
Transmisní elektronová mikroskopie
Po indukci loperamidem došlo v modelové skupině k otoku mitochondrií a autofagii v některých epiteliálních buňkách tlustého střeva. Počet a délka střevních mikroklků se snížila a objevila se pyknóza pohárkových buněk (obrázek 8). Po léčbě C. deserticola se zvýšil počet střevních mikroklků. Themicrovilli byly uspořádány úhledně a struktura byla kompletní. Kratší pohárkové buňky, nepravidelná morfologie mitochondrií a těžká pyknóza pohárkových buněk.
Obrázek 3 Exprese C-kitu a poměr relativní optické hustoty v tkáni tlustého střeva imunohistochemickou detekcí.
DISKUSE
Zácpa je běžná u starší populace a je jedním z běžných příznaků, které ovlivňují zdravotní stav a kvalitu života starších lidí[10,11]. Bai et al[12] věřili, že základní patogenezí SC byla dysfunkce převodní funkce tlustým střevem, senilní selhání těla, postupná ztráta funkcí jater a ledvin, nedostatek čchi a krve a ztráta tělesných tekutin. , což vedlo k suché stolici s následnou zácpou[13]. SC vyvíjí tlak na pacienty a jejich rodiny v mnoha aspektech a je důležité prozkoumat její patogenezi.
C. deserticola má funkce tonizujícího jangu ledvin, prospívá krvi a reguluje tělesnou imunitu[14]. C. deserticola a odvar z čínských bylin obsahující C. deserticola se široce používá při léčbě zácpy a klinický účinek je pozoruhodný. Du et al[15] zjistili na potkaním modelu deficitu Yang a zácpy, že C. deserticola zlepšila amplitudu kontrakce izolovaného tlustého střeva, posílila kontraktilitu střevního traktu a vrátila hladinu gastrointestinálních hormonů k normálu. Kromě toho vláknina C. deserticola, vedlejší produkt zpracování C. deserticola, zlepšuje schopnost zadržovat vodu ve výkalech a má výhodu nízké dávky a dobrého účinku na výživu střev a zlepšení defekace[16]. Naše studie zjistila, že léčba C. deserticola zlepšila fekální vlhkost a histopatologii tlustého střeva u potkanů se zácpou.
ICC se nacházejí v celém střevním traktu a hrají zásadní roli v nervové kontrole pohybu střev jako kardiostimulátory a přenos střevních nervů[17]. Proto-onkogen kódující receptorovou tyrozinkinázu, C-kit, je exprimován ICC a SCF je ligand C-kit[18]. Systém SCF/C-kit je zásadní pro vývoj ICC. Signální dráha SCF/C-kit byla analyzována během léčby pomalé přenosové zácpy u potkanů akupunkturou[19]. Elektroakupunktura v bodě Tianshu zvýšila počet ICC tlustého střeva u myší léčených ACK2-, zvýšila expresi proteinů SCF a C-kit a zvrátila fenotyp ICC. Předpis pro povzbuzení qi a sleziny může zvýšit expresi ICC v tkáni tlustého střeva a zvýšit expresi C-kitu a SCF mRNA, a tak zlepšit příznaky zácpy[20]. V naší studii imunohistochemie ukázala, že C. deserticola významně upregulovala expresi SCF a proteinu C-kit na potkaním modelu SC a RT-qPCR ukázala, že C. deserticola významně upregulovala expresi C-kitmRNA. Blokátor C-kitu inhiboval upregulaci SCF a exprese C-kitu indukovanou C. deserticola.
Obsah vody ve stolici a transport vody v tlustém střevě úzce souvisí s AQP, které hrají důležitou roli ve střevním metabolismu vody[21]. Ve studii na potkanech se zácpou s pomalým transportem odvar z defekace významně zlepšil příznaky zácpy regulací střevní absorpce vody prostřednictvím downregulace AQP3 a AQP4[22]. Na potkaním modelu funkční zácpy může být léčebný mechanismus orální tekutiny Xiaofu Tongjie pro funkční zácpu realizován regulací exprese vazoaktivního střevního polypeptidu a AQP3 v tlustém střevě[23]. Gapjunkce hrají zásadní roli při zprostředkování synchronní kontrakce buněk hladkého svalstva. Cx43 je nejdůležitější protein během tohoto procesu[24]. Ztráta exprese Cx43 může být částečně zodpovědná za motorickou dysfunkci hladkého svalstva[25]. Oprava struktury sítě střevního nervového systému u potkanů s pomalou tranzitní zácpou může zlepšit expresi Cx43 atd. a symptomy zácpy[26]. Tyto výsledky naznačují, že zvýšená exprese AQP3 snižuje obsah vody ve stolici, což vede k zácpě, což může být důležitý mechanismus zácpy. Exprese Cx43 může souviset s kontrakcí hladkého svalstva střev a snižovat výskyt zácpy. V naší studii western blotting ukázal, že exprese Cx43 byla zvýšena a exprese AQP3 byla inhibována léčbou C. deserticola, což vedlo ke zvýšené kontrakci hladkého svalstva a snížené absorpci vody, a léčba blokátorem tyto účinky zvrátila.
Pro více informací klikněte sem.
ZÁVĚR
Závěrem lze říci, že C. deserticola může inhibovat expresi AQP3 a podporovat expresi Cx43 prostřednictvím dráhy SCF/C-kit, čímž se zlepší zácpa vyvolaná byloperamin a sníží se poškození tkáně tlustého střeva u starých potkanů. Tato studie poskytla dobrý teoretický základ pro klinické použití C. deserticola.
