Kynureninová cesta – nové spojení mezi vrozenou a adaptivní imunitou u autoimunitních endokrinopatií, část 2

3.4. Kynureniny a složky přirozeného imunitního systému

IFN- a další Th1 cytokiny, jako je IL-1, TNF- a IL-2, mohou stimulovat aktivitu IDO1 [138]. Exprese dalších enzymů KP – KMO, KYNU a 3-HAAO – je také pod kontrolou IFN- [139]. Profesionální APC, jako jsou DC, monocyty a makrofágy, mohou exprimovat IDO1 po expozici IFN- [61,75] a za těchto podmínek mohou také exprimovat jiné enzymy KP. Bylo skutečně prokázáno, že všechny enzymy KP jsou exprimovány v makrofázích [140] a že tyto buňky mohou produkovat některé kynureniny, včetně AA, 3-HK, 3-HAA, PA a QUIN, po aktivaci [141].

Exprese QUIN byla pozorována v periferních monocytárních buňkách pacientů s Alzheimerovou chorobou [142]. Navíc monocytová kultura ošetřená IFN- a doplněná TRP produkovala KYN a 3-HKYN a neutrofily produkovaly také KYN [63]. Podobně byla prokázána exprese KP enzymů v DC derivovaných z lidských monocytů, které byly schopny zprostředkovat apoptózu Th buněk po stimulaci IFN- [143]. McIlroy a kol. [144] prokázali, že zrání DC vede k tvorbě KYN, 3-HKYN a 3-HAA. Celkově vzato mohou buňky patřící do vrozené imunity, zejména APC, přispívat k degradaci TRP a akumulaci kynureninů – metabolitů odvozených z TRP v blízkosti jiných buněk imunitního systému.

Bylo prokázáno, že metabolity KYN, zejména samotný KYN, potlačují aktivitu NK buněk a APC. Loughman a kol. [145] prokázali, že KYN, 3-HKYN a {{2}HAA zhoršovaly chemotaxi neutrofilů a přímo potlačovaly jejich transepiteliální migraci indukovanou UPEC. Kromě toho má katabolismus TRP prostřednictvím KP negativní dopad na životaschopnost buněk. Akumulace metabolitů odvozených od TRP je toxická pro NK buňky a TPH-1 buňky odvozené od monocytů a může vyvolat buněčnou smrt apoptózou [110,146]. Tyto účinky jsou alespoň částečně zprostředkovány KYN aktivací AhR, která je exprimována ve všech buňkách patřících do vrozeného imunitního systému.

Alzheimerova choroba je velmi časté neurologické onemocnění u starších osob, které může vést k nepříznivým důsledkům, jako je ztráta paměti a kognitivní pokles. V posledních letech stále více studií ukazuje, že imunita hraje důležitou roli při vzniku a rozvoji Alzheimerovy choroby.

Za prvé, imunita se přímo podílí na odstraňování proteinů spojených s Alzheimerovou chorobou z mozku. Za normálních okolností se čištění odpadků v mozku spoléhá hlavně na glymfatický systém. U pacientů s Alzheimerovou chorobou je však funkce lymfatického systému často narušena, takže imunitní buňky jsou odkázány na odstranění přebytečného amyloidu.

Za druhé, imunita může zpomalit progresi Alzheimerovy choroby snížením úrovně zánětu. Zánět je jedním z důvodů progrese mnoha neurologických onemocnění a Alzheimerova choroba není výjimkou. Studie zjistily, že určité složky imunitního systému mohou inhibovat výskyt zánětlivých reakcí, a tím zmírnit příznaky onemocnění.

Imunita navíc pomáhá zlepšovat paměť a kognitivní schopnosti. Imunitní molekuly také hrají důležitou roli v neuronální komunikaci v mozku. Několik studií ukázalo, že přítomnost některých imunitních buněk může usnadnit interakci mezi neurony, a tím zlepšit schopnost mozku učit se a pamatovat si.

Celkově hraje imunita při vzniku Alzheimerovy choroby zásadní roli. Kromě fyziologických reakcí hrají v posilování imunity pozitivní roli i psychicky pozitivní emoce. Abychom předcházeli a léčili Alzheimerovu chorobu, měli bychom si udržovat dobré imunitní zdraví a udržovat pozitivní přístup a optimismus v našich srdcích, abychom poskytli lepší podporu našemu tělu a mozku. Z tohoto pohledu musíme zlepšit imunitu. Cistanche může výrazně zlepšit imunitu, protože Cistanche je bohatá na různé antioxidační látky, jako je vitamín C, karotenoidy atd. Tyto složky dokážou vychytávat volné radikály a snižovat oxidační stres. Zlepšit odolnost imunitního systému.

Click cistanche tubulosa výhody

KYN může indukovat produkci intracelulárního IDO1 prostřednictvím pozitivní zpětnovazební smyčky, například KYN může zapojit AhR do cytosolu DC a interakce KYN-AhR vedla k amplifikaci exprese IDO1 [87] se současným potlačením stimulačních a ko -exprese stimulačních molekul v DC a také podporují produkci protizánětlivých cytokinů těmito buňkami [147]. Podobně bylo zjištěno, že KYNA také aktivuje AhR, ale odlišně od KYN. Interakce KYNA/AhR vedla k produkci prozánětlivého IL-6 [148]. KYNA je však také ligandem pro G protein-coupled receptor 35 (GPR35), který je exprimován v lidských monocytech, neutrofilech, DC, eosinofilech, NK buňkách a T buňkách. Interakce KYNA-GPR35 snižuje zánětlivou odpověď v monocytech a makrofázích indukovanou stimulací LPS a řídí uvolňování cytokinů v NK buňkách [149].

V souhrnu se zdá, že aktivace KP zprostředkovaná IDO1- v buňkách vrozené imunity by mohla příznivě přispět k omezení nadměrné zánětlivé reakce a chránit místní tkáň před poškozením zprostředkovaným zánětem.

3.5. IDO1, KYN Pathway Metabolites a složky adaptivního imunitního systému 3.5.1. Podmnožiny T buněk

T buňky se dělí na dva hlavní typy: cytotoxické T buňky a T pomocné buňky. T buňky exprimující molekulu CD4 (CD4 plus T buňky) jsou pomocné T (Th) buňky, zatímco T buňky exprimující molekulu CD8 (CD8 plus T buňky) jsou cytotoxické T buňky, které mohou přímo ničit maligní, infikované a senescentní buňky. 150]. Buňky jsou klíčové pro imunitní reakce během obrany hostitele proti škodlivým patogenům, ale mohou také hrát důležitou roli jako hnací síly zánětlivých a autoimunitních onemocnění [151]. V současné době lze Th buňky rozdělit do několika subpopulací: Th1, Th2, Th17, Th22, Th9, folikulární pomocné T buňky (Tfh) a Tregs, v závislosti na profilu cytokinů, které produkují [150,151]. Diferenciace každé podskupiny Th závisí na expresi specifických transkripčních faktorů: T-bet pro Th1 buňky, GATA-vazebný protein 3 (GATA3) pro Th2 buňky, sirotčí receptor-t související s receptorem kyseliny retinové (RORt) , AhR pro Th17 a Th22 buňky, B buněčný lymfom-6 (Bcl-6) pro Tfh buňky a Foxp3 pro Tregs [152]. Podskupiny Th buněk jsou definovány signaturami cytokinů, které exprimují, a jejich specializovanými efektorovými funkcemi.

Th1 buňky jsou definovány svou produkcí IL-2 a IFN-, ale také produkují několik cytokinů, včetně TNF-, lymfotoxinu a GM-CSF. Th1 buňky jsou zvláště účinné při aktivaci makrofágových mikrobicidních mechanismů proti intracelulárním patogenům. Podílejí se na zánětech zprostředkovaných buňkami a hypersenzitivních reakcích opožděného typu [150,152].

Th2 buňky jsou nejznámější pro produkci IL-4, IL-5 a IL-13, stejně jako IL-9 a IL-10. Tyto buňky hrají roli v eliminaci extracelulárních parazitů a podílejí se na alergiích a atopických onemocněních [150,153]. Jsou zodpovědné hlavně za humorální imunitu prostřednictvím aktivace B buněk, žírných buněk a produkce imunoglobulinu E. Bylo prokázáno, že exprese IL-4 in vivo může chránit autoreaktivní B buňky před apoptózou, zlepšit jejich přežití, a indukovat aktivaci autoreaktivních B buněk [154]. Na druhé straně mohou Th2 cytokiny zprostředkovat ochranu proti Th1-zánětu závislému nebo mohou přímo potlačit vývoj Th1/Th17 prostřednictvím IL-4/IL-13, v tomto pořadí [150].

Th17 buňky jsou hlavním zdrojem IL-17A (běžně označovaného jako IL-17) a IL-17F, ačkoli bylo prokázáno, že exprimují i ​​jiné buňky, včetně NK buněk a makrofágů IL-17. Rodina cytokinů IL-17 zahrnuje několik sloučenin, které se podílejí na ochraně povrchů sliznic proti extracelulárním patogenům. V současné době je známo šest členů rodiny IL-17, kteří jsou označeni písmeny od A do F [155]. IL-17A a IL-17F se podílejí na širokém spektru zánětlivých a autoimunitních onemocnění – po spojení s jejich receptory – IL-17RA a IL-17RC, oba cytokiny mohou indukovat sekreci prozánětlivých cytokinů, jako je IL-6, IL-1, IL-8, TNF- a chemokin CXCL1, což podporuje zánět tkáně, získávání neutrofilů, aktivaci vrozených imunitních buněk a posílení funkcí B buněk [156]. Signalizace IL{19}} navíc indukuje uvolňování dalších zánětlivých mediátorů, jako je intercelulární adhezní molekula 1 (ICAM{21}}), prostaglandin E2 a matrixové metaloproteinázy, které mohou iniciovat několik smyček pozitivní zpětné vazby, které dále zvyšují sekrece IL-17 způsobující chronický zánět a poškození tkáně [157]. Kromě IL-17 mohou buňky Th17 také vylučovat IL-21, IL-22, IL-25 a IL-26 (u lidí); nicméně většina patogenních funkcí Th17 buněk souvisí se sekrecí IL-17 [158]. Vzhledem k důležité úloze IL-17A a IL-17F při indukci zánětu tkáně se ukázalo, že buňky Th17 hrají klíčovou roli v etiopatogenezi mnoha autoimunitních onemocnění, u nichž byl Th1 původně považován dominantním faktorem. Funkce Th17 závisí na kombinacích cytokinů exprimovaných v lokálním prostředí a regulace diferenciace těchto buněk je zprostředkována komplexním cytokinem a transkripčním faktorem, což může mít za následek jak patologické, tak ochranné funkce těchto buněk u zánětlivých a autoimunitních onemocnění.

Bylo prokázáno, že Th17 buňky mohou produkovat protizánětlivý cytokin IL-10, když byly stimulovány IFN- nebo IFN- [159]. Naopak bylo prokázáno, že IL-23 snižuje expresi IL-10 ve vývoji buněk Th17, čímž indukuje prozánětlivou podskupinu Th17, která může produkovat IL-17 [160]. Th17 buňky dále vykazují vysokou plasticitu – mohou se diferencovat na jiné podskupiny T buněk v různých podmínkách, například zralé Th17 buňky mohou být transformovány IL-6 na Th1 buňky produkující IFN- [161].

Tregs hrají klíčovou roli v imunitní toleranci a kontrole autoimunity [162]. Tregy vyjadřují signaturní transkripční faktor – Foxp3 – který je důležitý pro jejich vývoj, diferenciaci a regulační funkce [163]. Foxp3 exprimující podskupiny Treg zahrnují jak přirozeně se vyskytující Tregs (nTregs) generované v brzlíku a indukované prostřednictvím postthymického zrání Tregs (iTregs), které se mohou dále diferencovat na Foxp3 plus buňky (Th3) a Foxp3− buňky, nazývané také Tr1 [164]. . K diferenciaci Th3 dochází především po perorálním požití exogenních antigenů a tyto buňky napomáhají sekreci IgA uvolňováním TGF- a vykazují supresivní vlastnosti vůči buňkám Th1 a Th2 [165]. Buňky Tr1, které jsou dominantním zdrojem IL-10 v imunitním systému, hrají důležitou roli v inhibici autoimunity a zánětu [166]. Imunosupresivní účinky IL-10 jsou zprostředkovány jeho vlivem na downregulaci exprese MHC-II a kostimulačních molekul: CD80, CD86 a CD28 na APC a zmírnění aktivovaných mastocyty, makrofágy a také snížení uvolňování jejich prozánětlivých cytokinů [167].

TGF- je produkován nTreg a Th3 buňkami; tento cytokin však může syntetizovat také mnoho imunitních a neimunitních buněk. TGF- je potřebný pro generování iTregs, protože indukce exprese Foxp3 řízená TGF- převádí naivní T buňky na Tregs. Tato pozitivní zpětná vazba mezi TGF- a Foxp3 hraje zásadní roli při udržování periferní tolerance a udržování Tregs [168]. In vivo bylo prokázáno, že Tregs produkující TGF potlačují autoimunitní reakce T buněk, inhibují produkci IL{10}} a zvyšují expresi Foxp3 v Th buňkách [169].

V současné době jsou Tregs uznávány jako důležité imunoregulátory u mnoha zánětlivých a autoimunitních onemocnění a buněčné terapie využívající tyto buňky v současné době procházejí klinickými zkouškami pro léčbu těchto patologií [170,171]. Je však třeba připomenout, že některé z cytokinů produkovaných Tregs, včetně IL-10 a TGF- , nemusí mít vždy protizánětlivý potenciál a za určitých podmínek mohou zvýšit funkci a aktivitu patogenních buněk. . Bylo prokázáno, že IL-10 může aktivovat B buňky, zvýšit jejich funkci jako APC a urychlit zrání B buněk do plazmatických buněk [172]. TGF- je také spojen s několika prozánětlivými účinky, jako je vývoj buněk Th17 produkujících IL-17-, které podporují zánět [158]. TGF- může generovat IL-9-produkující Th buňky, které podporují tkáňovou patologii. Jak TGF-, tak IL-10 zvyšují přežití CD8 plus T buněk a zvyšují jejich produkci IL-17 a IFN- [173,174]. Zdá se, že tento jev je pravděpodobně mechanismem, kterým imunitní systém udržuje rovnováhu.

3.5.2. IDO1, kynureniny a T buňky

Jak bylo uvedeno výše, indukce IDO1 v buňkách patřících do vrozené imunity vedla k depleci TRP a tvorbě KYN a jeho metabolitů (obrázek 2), které jsou důležitými regulátory adaptivní imunity [25], přispívající k dlouhé - přetrvávající imunotolerance několika odlišnými mechanismy (obrázek 3).

Jedna z dřívějších teorií předpokládá, že rozklad TRP potlačuje proliferaci T buněk podstatným snížením zdroje této aminokyseliny v lokálních tkáňových mikroprostředích. Předpokládá se, že T-buňky s deficitem TRP nemohou syntetizovat dostatečné množství proteinů pro proliferaci po prezentaci antigenu APC [175]. IDO1-závislá deplece TRP aktivuje senzor aminokyselin – GCN2K v CD4 plus T buňkách [176] – který řídí transkripční a translační programy spojující buněčný růst s dostupností aminokyselin [177]. Prostřednictvím aktivace GCN2K může IDO1 downregulovat enzymy účastnící se syntézy mastných kyselin v CD4 plus T buňkách [176]. Syntéza mastných kyselin je po aktivaci T buněk up-regulována a je nezbytná pro prevenci smrti proliferujících buněk [178].

IDO1-závislá aktivace GCN2K a snížení syntézy mastných kyselin tedy zhoršuje proliferaci a diferenciaci CD4 plus T buněk na efektorové buněčné linie. Fallarino a kol. [81] prokázali, že jak deplece TRP, tak i směs hlavních metabolitů TRP: KYN, 3-HKYN a 3-HAA mohou indukovat GCN2K-dependentní down-regulaci komplexu T buněčných receptorů (TCR) zeta -řetězec v CD8 plus T buňkách, což vedlo k poškození cytotoxické efektorové funkce těchto buněk. Zatímco CD4 plus CD25- T buňky za těchto podmínek byly převedeny na fenotyp Treg prostřednictvím procesu vyžadujícího GCN2K, snížení produkce IL-2 a zvýšení IL-10 a TGF- . Hladovění TRP prostřednictvím IDO1 nepůsobí pouze prostřednictvím inaktivace TCR, ale ve spojení s indukcí Fas zprostředkovává zástavu buněčného cyklu ve fázi střední G1, což vede k apoptóze T buněk, klonální anergii a inhibici antigen-specifických odpovědí T buněk [ 56].

Novější studie Eleftheriadise et al. [179] ukázali, že IDO1 prostřednictvím aktivace GCN2K snižuje hladinu zeta řetězce a cMyc komplexu TCR, což vede k redukci klíčových enzymů zapojených do aerobní glykolýzy a glutaminolýzy, které jsou nutné pro rychle proliferující aktivované T buňky. Uvedená studie používala systém izolovaných a aktivovaných T buněk bez APC bez KKYN a autoři prokázali, že přímá aktivace GCN2K pomocí TRP je dostatečná pro inhibici proliferace T buněk a že to může být vnitřní buněčný mechanismus pro kontrola proliferace. Navíc se ukázalo, že 3-HAA způsobuje imunitní supresi indukcí apoptózy v T buňkách prostřednictvím deplece glutathionu [80]. Hayashi a kol. [180] identifikovali další potenciální mechanismus působení 3-HAA, zahrnující inhibici 3-fosfoinositid-dependentní proteinkinázové signalizace v T buňkách, která vedla k apoptóze T buněk.

Ve většině uvedených studií byly imunosupresivní vlastnosti IDO1 hodnoceny v kultivačním médiu bez mastných kyselin. Když však byly do buněčných kultur přidány volné mastné kyseliny, IDO1 zvýšil oxidaci volných mastných kyselin, a přestože podporoval diferenciaci Tregs, neindukoval apoptózu ani neinhiboval proliferaci CD4 plus T buněk [181]. I když IDO1 snižuje glykolýzu a glutaminolýzu aktivací GCN2K, může zvýšit oxidaci volných mastných kyselin aktivací AhR, což poskytuje nezbytnou energii pro přežití a proliferaci CD4 plus T buněk [182]. Na rozdíl od předchozí hypotézy, že dráhy zprostředkované IDO1-potlačily funkci CD4 plus T buněk indukcí apoptózy, inhibicí proliferace a podporou diferenciace směrem k regulačnímu fenotypu T buněk, novější údaje odhalily, že v normálním prostředí obsahuje mastné kyseliny, nelze imunosupresivní účinek IDO1 přičítat snížení proliferace a přežití CD4 plus T buněk.

IDO1, kynureniny a rovnováha buněk Th1/Th2

Experimentální data ukázala, že IDO1 má důležité imunosupresivní vlastnosti zapojené do imunitní tolerance a Th1/Th2 regulace. Exprese IDO1 v DC způsobila potlačení proliferace lidských T-buněk a vytvořila lokální imunitní privilegia [75]. Aktivita IDO1 v pDC blokuje expanzi naivních CD4 plus a CD8 plus T buněk a tvorbu cytotoxických T lymfocytů (CTL) a Th1 buněk, přičemž má menší dopad na Th2 buňky [80]. Podobný mechanismus byl pozorován u lidských eozinofilů exprimujících IDO{12}}, které přednostně inhibovaly Th1 buňky, ale podporovaly Th2 buňky [62]. Kromě toho bylo u myších slezinných buněk po farmakologické inhibici IDO1 prokázáno snížení produkce Th1 cytokinů a zvýšení hladin Th2 cytokinů [183]. Tyto výsledky naznačují, že preferenční indukce apoptózy v Th1 buňkách, ale ne v Th2 buňkách, byla způsobena zvýšenou citlivostí Th1 buněk k IDO1-indukované produkci KYN nebo tvorbě následných metabolitů KP [184].

In vivo však studie astmatu vyvolaného ovalbuminem u myší poskytly protichůdné výsledky. Zvířata s nedostatkem IDO1-vykázala slabší Th2 odpovědi ve srovnání s kontrolami, kdy vyzývatelé s inhalovaným antigenem a jejich sérové ​​hladiny antigen-specifického IgE byly nižší, což ukazuje, že nedostatek IDO1-chránil před astmatem vyvolaným ovalbuminem [ 185]. Zatímco v jiném myším modelu astmatu používajícího stejnou senzibilizaci indukce exprese IDO1 inhibovala Th2-indukované astma [186]. Komplexní vysvětlení těchto protichůdných účinků provedli MacKenzie et al. [187], kteří zjistili, že během prezentace antigenů a patogenů DC pro T buňky se naivní Th buňky transformují na podskupiny Th1 a produkce INF vytváří Th1 dominantní mikroprostředí, které inhibuje diferenciaci Th2. Protože IFN- indukuje DC exprimovat IDO1, snížení hladiny TRP spojené se zvýšením kynureninů způsobí apoptózu Th1 buněk a vybrané přežití Th2 buněk, které působí jako regulační smyčka k omezení hyperaktivních reakcí Th1 buněk.

Nedávné důkazy naznačují, že imunomodulační vlastnosti IDO1 jsou z velké části způsobeny akumulací metabolitů KYN ve spojení s deplecí TRP [32]. Ukázalo se, že katabolity KP jsou důležitými biologickými mediátory při regulaci funkce Th1 a Th2 buněk, ačkoli Th2 buňky jsou méně citlivé na metabolity TRP [188]. Přidání exogenních metabolitů KYN KYN, 3-HAA, QA, 3-HKYN a PA do kultur T buněk ukázalo, že sloučeniny mohou inhibovat proliferaci a indukovat apoptózu aktivních T buněk při fyziologicky relevantnějších hladinách TRP než předchozí teorie „vyčerpání TRP“ by naznačovala [59,110,183,189]. HAA a QUIN indukovaly selektivní apoptózu in vitro myších Th1, ale ne Th2 buněk. Tento proces byl pozorován při relativně nízkých koncentracích těchto kynureninů, nevyžadoval interakce Fas/Fas ligand a byl spojen s aktivací kaspázy-8 a uvolněním cytochromu c z mitochondrií [80]. Orihara a kol. [190] prokázali, že QUIN byl schopen snížit produkci cytokinů Th1, tok Ca2 plus, proliferaci a přežití buněk podobných Th1- prostřednictvím zvýšené indukce buněčné smrti, zatímco buňky podobné Th2-byly ušetřeny, což vede ke zvýšené Th2-dominaci. Celkově vzato se zdá, že posun rovnováhy Th1/Th2 ve prospěch přežití Th2 buněk vyvolaný aktivací KP omezuje nekontrolovanou aktivaci adaptivní imunity.

Je třeba zdůraznit, že popsané účinky metabolitů KP na funkci a životaschopnost buněk adaptivního imunitního systému mohou být částečně zprostředkovány AhR, který je chybně exprimován v určitých podtypech T buněk, jako jsou naivní Th, Th17 a Treg buňky, zatímco plně diferencované Th1 buňky po aktivaci nedokážou up-regulovat AhR a nemohou být přímo modulovány ligací AhR [191]. Aktivovaný AhR potlačuje imunitní reakce za normálních podmínek, zatímco zvýšení aktivity AhR tyto reakce zesiluje [192]. Výsledky studií zkoumajících roli AhR v modulaci imunitní odpovědi se však někdy liší. Aktivace AhR environmentálními toxiny se liší od aktivace pozorované po stimulaci jejími přirozenými ligandy, například bylo prokázáno, že aktivace AhR T buněk dioxinem inhibuje imunitu generováním Tregs, zatímco imunitu zhoršila po aktivaci pomocí {{5} }formylindolo[3,2-b]karbazol (FICZ), endogenní ligand odvozený z TRP [193].

V souladu s touto teorií Ambrosio et al. [194] zjistili, že dioxinová léčba infekce Trypanosoma cruzi u myší vedla ke zvýšené smrti aktivovaných T buněk a zvýšenému počtu Treg produkujících TGF-. Slabý ligand AhR – 3-HKYN – byl také schopen indukovat Tregs a zlepšit nevyvážený poměr mezi aktivovanými T buňkami a Tregs během chronické fáze infekce, ale je pouze částečně účinný při kontrole parazitémie a není schopen vymýtit to. Navíc byl také pozorován negativní vliv silné aktivace AhR na rozvoj paměťových CD8 plus T buněk. Ligace AhR omezila diferenciaci CD8 plus paměťových T buněk, pravděpodobně nepřímou, na AhR závislou regulací DC, podobnou té, která byla pozorována u Th1 buněk [193].

IDO1, kynureniny a rovnováha buněk Tregs/Th17

IDO1 přispívá k imunitní regulaci tím, že napomáhá funkci Tregs efektoru. V myších pDC ošetřených TGF- může IDO1 vytvářet signalizaci pro dlouhodobou imunitní toleranci transformací CD4 plus T buněk na imunosupresivní Foxp3 plus Tregs [81,195], které naopak mohou indukovat expresi IDO1 v pDC a neutrofilech [83]. Funkčně neaktivní Tregs získaly silnou supresorovou aktivitu při společné kultivaci s pDC{10}}exprimujícími IDO. Stojí za zmínku, že IDO1-kompetentní pDC zabraňují reakci efektorových T buněk a podporují diferenciaci Tregs pouze tehdy, když místní podmínky nebo ošetření indukují pDC k expresi IDO1 a že signalizace GCN2K byla také klíčová pro aktivaci Tregs. Navíc tento proces aktivace Tregs závislý na IDO1/GCN2K byl omezen na MHC a bylo mu zabráněno blokádou CTLA4 [196]. Receptory B7 na IDO1-pozitivních DC se vážou na CTLA4 na Tregs, což způsobuje jejich proliferaci a blokáda CTLA4/B7 osy poškozuje enzymatickou aktivitu IDO1 a aktivaci Tregs, což naznačuje, že CTLA4 plus Tregs ligují B7 na pDC, aby se udržely Aktivita IDO1 v pDC [84]. Tregs aktivované IDO1 pozoruhodně upregulovaly expresi PD-L1 a PD-L2 na cílových DC a schopnost Tregs potlačit proliferaci T buněk byla zrušena protilátkami proti dráze PD-1/PD-L, ale nebyla závislá na IL-2, IL-10 nebo TGF-[196].

Aktivita IDO1 v pDC tedy podporuje de novo diferenciaci Treg od naivních CD4 plus prekurzorů a ke stejným výsledkům došlo, když byly naivní CD4 plus prekurzory kultivovány v médiu s nízkým TRP/vysokým kynureninem, což přímo implikuje katabolismus TRP v generaci Tregs [81]. Navíc se ukázalo, že exprese IDO1 blokuje konverzi Tregs na Th17 buňky aktivací dráhy GCN2K a supresí produkce IL-6 v pDC [82]. Tímto způsobem IDO1 nejen přímo potlačuje efektorové T buňky, ale také nepřímo může ovlivnit aktivitu supresoru Tregs týkající se buněk Th1, Th2 nebo Th17. Zdá se však, že inhibice odpovědi/proliferace T lymfocytů závisí na mikroprostředí, protože expozice Tregs prozánětlivému IL-6 přepíná zralé Tregs na fenotyp připomínající buňky Th17 [197]. Na druhé straně, KYN, který je výsledkem aktivace IDO1, podporoval per se expresi IDO1 prostřednictvím agonistického působení na AhR v DC [77,78,198], čímž se v těchto buňkách vytvořily účinky zprostředkované IDO posílené pozitivní smyčkou. Bylo popsáno, že aktivace AhR ligandem jak na T buňkách, tak na pDC přispívá k rozvoji Tregs a supresi Th17 [199,200]; nicméně bylo také prokázáno, že aktivuje IDO1 v DC [198], což naznačuje dopřednou smyčku v aktivaci AhR indukované KYN. V souladu s tím byla prokázána protektivní role aktivace IDO1 u experimentální autoimunitní encefalomyelitidy (EAE) u potkanů ​​[201] a exprese IDO1 v DC indukovaná podáváním estrogenu vedla k současné apoptóze T buněk spojené se supresí EAE a sníženou rychlostí relapsy během těhotenství [202]. Naproti tomu farmakologická blokáda IDO1 vedla ke zvýšeným odpovědím Th1 a Th17, snížení odpovědí Treg a celkové exacerbaci EAE [203].

KYNA byla také identifikována jako silný agonista AhR [148], nicméně studie přímo prokazující možný účinek KYNA zprostředkovaný AhR na modulaci osy Treg/Th17 chyběly. Zatímco bylo hlášeno, že KYNA snižuje expresi IL-17 v aktivovaných T buňkách a vyčerpává buňky Th17 jiným způsobem – působením na receptor 25 spřažený s G-proteinem (GPR35) na DC, což způsobuje supresi jejich IL. -23 produkce [204]. Bez ohledu na to, nedávná studie Engina a kol. [205] ukázali, že akumulace KYNA v důsledku nadměrné exprese IDO1 aktivací AhR indukuje signální dráhu AhR/IL-6/STAT3 a diferenciaci naivních CD4 plus T buněk směrem k Th17 buňkám. Zatímco inhibuje Tregs, což vede k nerovnováze Treg/Th17 a cytokinové bouři, která způsobuje fatální následky infekce SARS-CoV-2. Toto nové zjištění naznačuje, že KYNA může hrát opačnou roli než KYN při modulaci rovnováhy osy Treg/Th17. To je v souladu s předchozím pozorováním, že IDO1 hraje zásadní roli při přeměně Tregs na Th17 buňky blokováním produkce IL-6, která je pro tuto přeměnu potřebná. Fenotyp přeprogramovaných Tregs po blokování IDO1-byl popsán jako podobající se „multifunkčním T-helper buňkám“, které společně exprimují různé cytokiny, jako IL-2, IL-17, IL{{ 29}} a TNF-[206].

Ukázalo se, že další downstream metabolit KYN – 3-HAA – snižuje odpovědi Th1 a Th17 a zvyšuje odpověď Treg, částečně nepřímým působením DC. Podávání této sloučeniny vedlo ke zlepšení EAE u myší [203]. DC ošetřené 3-HAA in vitro snížily svou produkci IL-6 a zvýšily expresi TGF-. Navíc, když byly DC ošetřené 3-HAA kokultivovány s naivními CD4 plus T buňkami, byla stimulována generace Tregs [203]. Tyto výsledky ukázaly, že IDO1 generováním 3-HAA může zvýšit expresi TGF v DC a podporovat diferenciaci Tregs. Kromě toho terapie kyselinou N-(3,4,-dimethoxycinnamoyl)anthranilovou, perorálně aktivním derivátem analogu 3-HAA (tranilast), rovněž prokázala supresivní účinek u EAE, přičemž bylo pozorováno méně a mírnějších relapsů léčená zvířata [207].

Podobně kyselina cinnabarinová, méně známý endogenní metabolit KYN, byla schopna chránit před EAE posílením Tregs na úkor Th17 [208].

Stručně řečeno, jak KYN, tak jeho následné metabolity ovlivňují rovnováhu systému Th17/Tregs a posouvají tuto rovnováhu ve prospěch imunosupresivních Tregs.

3.6. Kynureniny a IL-2 signalizace

Paměťové CD4 plus T buňky jsou zásadní pro zajištění dlouhodobé imunitní ochrany a jejich vyčerpání je spojeno s přetrvávajícím zánětem. Přežití paměťových CD4 plus T-buněk závisí na signálech poskytovaných cytokiny -receptorových řetězců, jako je IL-2 [209]. Dagenais-Lussier a spolupracovníci [210] ukázali, že zvýšená produkce KYN koreluje s defektní signalizací IL-2 v paměťových CD4 plus T buňkách od subjektů infikovaných HIV, což vede k jejich apoptóze zprostředkované Fas. Ošetření paměťových CD4 plus T buněk fyziologickou koncentrací KYN (5 uM) in vitro inhibovalo IL-2 signalizaci prostřednictvím mechanismu souvisejícího s produkcí ROS [210].

Celkově zde prezentovaná data naznačují, že aktivace IDO1 může transformovat funkci APC a převést funkci lokálních T buněk z imunogenní na tolerogenní. Nicméně KP enzymy downstream od IDO1 mohou také iniciovat tolerogenezi DC nezávisle na deprivaci TRP. Parakrinní produkce kynureninů může být jedním z mechanismů, který používají IDO1-kompetentní buňky k přeměně DC postrádajících tento funkční enzym na tolerogenní fenotyp v prostředí bohatém na IFN- - [211]. Na druhou stranu některé studie identifikovaly IDO1-specifické CD4 plus a CD8 plus T buňky u zdravých lidí i pacientů s rakovinou, které jsou schopny odstranit buňky exprimující IDO1-, včetně IDO1- pozitivní DC a nádorové buňky. Tato imunitní odpověď proti IDO1 pravděpodobně představuje kontraregulační mechanismus, jehož cílem je omezit imunosupresi zprostředkovanou IDO{13}} za účelem posílení antigenně specifické imunitní odpovědi [212–214].

3.7. IDO1 a B buňky

Zatímco většina literatury se zaměřila na zkoumání supresivních účinků IDO1 souvisejících s T buňkami, několik studií hodnotí roli IDO1 v odpovědi B buněk. Primární funkcí B buněk je produkce protilátek. Bez ohledu na to byla identifikována subpopulace B buněk, které regulují imunitní reakce nezávisle na produkci protilátek [215]. Tyto buňky, nazývané regulační B lymfocyty (Bregs), byly objeveny na základě jejich schopnosti inhibovat efektorové imunitní procesy [216] prostřednictvím mechanismu založeného na IL-10-, který je zodpovědný za down-regulaci zánětu [217]. Kromě produkce IL-10 existují určité návrhy, že část tohoto imunosupresivního účinku Bregs je závislá na interakcích s jinými regulačními buněčnými liniemi; mohou potlačovat diferenciaci Th1 a Th17 a vykazovat přímý inhibiční účinek na prezentaci antigenu DC, zatímco indukují diferenciaci Tregs [218].

V roce 2009 Scott a kol. [219] pozorovali, že farmakologická inhibice aktivity IDO1 měla neočekávaný důsledek zlepšení symptomů artritidy v modelu revmatoidní artritidy u myší. Toto snížení symptomů artritidy bylo důsledkem snížené autoreaktivní odpovědi B buněk, což se projevilo jako snížené titry autoprotilátek, zatímco v procentech Tregs ani v hladinách cytokinů Th1/Th2/Th17 nebyl zjištěn žádný rozdíl. Naproti tomu cytokiny spojené se zánětem, jako je MCP-1, IL-6 a IL-10, byly u těchto myší sníženy. Tato studie prokázala, že IDO1 hraje aktivační roli při vytváření autoreaktivního profilu B buněk na počátku autoimunitní odpovědi, což ukazuje na jeho dříve nedoceněnou roli při stimulaci funkce B buněk. Toto zjištění naznačuje, že IDO1 není jednoduše imunosupresivní, ale spíše hraje komplexnější roli v modulaci zánětlivých reakcí, zejména řízených autoreaktivními B buňkami.

O rok později Vinay a spol. [220] prokázali existenci subpopulace myších B lymfocytů, ve kterých je IDO1/IDO2 indukován na úrovni mRNA po stimulaci imunoglobulinem CTLA-4, ale v této studii nebyla hodnocena ani proteinová exprese ani enzymatická aktivita. CTLA-4 je centrální inhibiční regulátor proliferace a expanze T buněk a CTLA-4 cesta přes ligaci na CD80 a CD86 na APC může zvýšit expresi Foxp3 indukovanou TGF- k indukci Tregs [221]. Navíc CTLA-4 zapojení B7 ligandů do DC prostřednictvím indukce IDO1 může zahrnovat udržení periferní tolerance [83]. Godin-Ethier a spolupracovníci [222] potvrdili, že jak geny IDO1/IDO2, tak protein IDO mohou být up-regulovány v lidských B lymfocytech v reakci na signály T buněk; nicméně hlásili pouze slabou/nepřítomnou enzymatickou aktivitu z těchto buněk exprimujících IDO, přičemž dospěli k závěru, že IDO nemusí být kontraregulačním mechanismem používaným B lymfocyty k down-regulaci imunitní odpovědi.

Na rozdíl od Godin-Ethier et al. [222], Nouël a spolupracovníci [65] odhalují novou regulační dráhu v B buňkách, zprostředkovanou osou TGF-/IDO1 v závislosti na CTLA-4-. Poprvé prokázali, že CTLA-4 indukované B-buňky mohou produkovat IDO1 a stát se účinnými indukovanými regulačními B buňkami (regs), které byly schopny generovat Tregs, Tr1 a Th3 buňky, když byly společně kultivovány s T buňkami, zatímco potlačují indukci Th1 buněk. Tito autoři také prokázali, že osa TGF/IDO1 hraje důležitou roli při zprostředkování trvalých regulačních funkcí v B buňkách, což naznačuje nové perspektivy pro budoucí management autoimunitních onemocnění [65]. Bylo také zjištěno, že IL-21 může indukovat Breg fenotyp v lidských B buňkách, který je spojen s expresí imunoregulačních molekul: granzymu B, IL-10 a IDO1, a že granzym B -závislá degradace zeta-řetězce komplexu TCR může potlačit proliferaci T-buněk [223]. Podobně mohou mezenchymální stromální buňky podporovat přežití a proliferaci Bregů a IDO1 se na tomto účinku částečně podílí [224]. Piper a kol. [225] identifikovali AhR jako relevantního přispěvatele k transkripční regulaci diferenciace a funkce Breg produkujících IL-10-. Ukázali, že u myší s nedostatkem AhR v Bregs se rozvine exacerbovaná artritida spojená s významným snížením IL-10-produkujících Bregs a také Tregs, a vykazují nárůst podskupin buněk Th1 a Th17 ve srovnání s myšmi, které mají Bregs dostatečné pro AhR .

Nedávné studie in vivo provedené na modelech autoimunity naznačují, že IDO2 může hrát odlišnou roli od IDO1 v autoimunitě zprostředkované B buňkami. Bylo ukázáno, že IDO2 může být prozánětlivá molekula přispívající k autoreaktivním reakcím B buněk. Tuto patogenní funkci IDO2 popsali Merlo a kolegové v KRN modelu autoimunitní artritidy [226] a artritidy indukované kolagenem [227]. Myši s knockoutovaným IDO2 vykazují snížený zánět kloubů, snížení autoreaktivních B lymfocytů a nižší hladiny patogenních autoprotilátek ve srovnání s myšmi divokého typu, což ukazuje na patogenní funkci IDO2 v autoimunitě zprostředkované autoprotilátkami [226]. Podání autoprotilátek specifických pro IDO{13}} zmírnilo artritidu ve dvou nezávislých preklinických modelech artritidy a snížilo autoreaktivní aktivaci T a B buněk [227]. Stejně tak formulace antiIDO2 3DNA zlepšuje artritidu v preklinickém modelu [228]. Nedávná studie tohoto týmu na myších s dvojitým knockoutem IDO1/IDO2 odhalila kontrastní role IDO1 a IDO2 v imunitě: IDO1 zprostředkovává supresivní účinky T buněk (pravděpodobně produkcí KYN), zatímco IDO2, který prakticky neprodukuje KYN, působí přímo v B buňky jako prozánětlivý mediátor autoimunitních procesů. Zdá se tedy, že IDO2 je dominantním hráčem v autoimunitě zprostředkované patogenními autoprotilátkami prostřednictvím mechanismu nezávislého na IDO [229].

4. Role aktivace IDO1 a KP u autoimunologických endokrinopatií

4.1. T1DM – autoimunitní onemocnění s nejasnou patofyziologií

T1DM je autoimunitní porucha, která je důsledkem rozpadu imunitní tolerance, která vede k selektivní destrukci -buněk ve slinivce břišní a poruchám sekrece inzulínu s následným závažným poškozením glykemické kontroly. V asymptomatické preklinické fázi probíhá příliv imunitních buněk do Langerhansových ostrůvků slinivky břišní a tento proces předchází hyperglykémii a propuknutí onemocnění. Okolnosti, které vedly k této imunitní změně, jsou však stále nedostatečně vysvětleny [3,9,230].

Klasickou hypotézou pro rozvoj T1DM bylo, že u jedinců s genetickou predispozicí vede aktivace imunitního systému (autoimunitní onemocnění zprostředkované T-buňkami) jedním nebo více spouštěči z okolního prostředí k destrukci pankreatických buněk [231]. Objev autoprotilátek pankreatických ostrůvků namířených proti různým autoantigenům [11] představoval silný argument, že proteiny a peptidy specifické pro buňky byly cíleny imunitním systémem [232]. V souladu s touto hypotézou se periferní imunitní regulace u pacientů s T1DM jeví jako defektní a rušivé přeslechy mezi buňkami adaptivní a vrozené imunity mohou urychlit nebo zpomalit vývoj T1DM [24]. Imunoterapie u subjektů s vysokým rizikem rozvoje T1DM však oddaluje progresi do zjevného onemocnění, ale nezabrání nástupu T1DM [233].

Údaje z nedávných studií poukázaly na roli -buněk jako klíčového přispěvatele k T1DM. Abnormální pankreatické buňky mohou ovlivnit normální funkci imunitního systému takovým způsobem, že bude muset tyto dysfunkční buňky vyčistit. Zdá se, že několik nedávno provedených studií tuto teorii podporuje, například menší objemy pankreatu u osob s rizikem T1DM [234]. Indukce stresu endoplazmatického retikula byla uznána jako hlavní faktor přispívající k dysfunkci -buněk v časném stadiu T1DM [235] a vedla k formulaci alternativní "-buňky centrické hypotézy" [236]. Podle této teorie, jakmile je buňka napadena, vytvoří se zánětlivé prostředí, které zřejmě podporuje uvolňování dalších prozánětlivých cytokinů a chemokinů buňkami, čímž přitahuje více imunitních buněk. V zánětlivém stavu vykazují buňky vyšší expozici molekulám lidského leukocytárního antigenu (HLA) třídy I, což vytváří další signalizaci pro reziduální cytotoxické CD8 plus T buňky, jejichž frekvence je v pankreatu u pacientů s T1DM zvýšená ve srovnání s těmi u zdravých kontrol [ 237].

Tregs, které mají důležitou roli při potlačování těchto autoreaktivních T buněk ve zdravých podmínkách, vykazují sníženou supresivní kapacitu u pacientů s T1DM [238], což naznačuje, že nedostatečná imunitní regulace může být důvodem zesílené autoimunitní reakce vyvíjené autoreaktivními T buňkami. Tato teorie je podpořena skutečností, že pacienti s rakovinou, léčení inhibitory imunitního kontrolního bodu pro zesílenou imunitní odpověď a sníženou imunosupresi, jsou vystaveni riziku rozvoje T1DM v důsledku ztráty imunitní regulace v kombinaci s aktivací imunitní odpovědi proti nádorové tkáni [239 ]. Novější studie Li et al. [240] zjistili, že -buňky se mohou aktivně podílet na vývoji T1DM. Za stresových podmínek produkují -buňky neoantigeny a mohou upregulovat expresi MHC I/II a kostimulačních molekul, které jsou normálně vystavovány profesionálními APC. Tato podskupina buněk podobných APC pracuje společně s pDC na buněčné úrovni, aby aktivovaly CD4 plus a CD8 plus T buňky a iniciovaly časné autoimunitní reakce vedoucí k rozvoji T1DM. Tento pohled podle teorie Roep et al. [236] přehodnotili klasickou hypotézu vývoje T1DM, která předpokládala, že -buňky jsou pouze pasivními účastníky během nástupu T1DM.

Kombinaci těchto obou teorií postulovali Peters et al. [241], kteří se domnívají, že T1DM je pravděpodobně výsledkem komplexní sítě dysfunkcí jak v -buňkách, tak v imunitním systému, s defekty jak vrozené, tak adaptivní imunity

4.2. IDO1 a T1DM

Přestože u různých autoimunitních onemocnění byl pozorován narušený metabolismus TRP zprostředkovaný IDO{0}} [28], v dostupné literatuře zatím není mnoho údajů o úloze IDO1 a aktivaci KP u autoimunologických endokrinopatií.

Ze známých endokrinopatií je T1DM autoimunitní onemocnění, u kterého je význam aktivace IDO1 poměrně dobře popsán. Obecně je IDO1 uznáván jako regulátor imunity – nejenže produkuje imunoregulační kynureniny, ale působí také jako molekula přenášející signál a podporuje imunotoleranci u patofyziologických stavů [242,243]. Nicméně zánětlivý stav, který charakterizuje preklinickou fázi T1DM, může ovlivnit expresi a aktivitu proteinu IDO1 a zhoršit jeho roli v imunitní toleranci ve slinivce břišní.\

Preklinické studie v oblasti T1DM jsou prováděny v různých experimentálních podmínkách na modelech neobézních diabetických (NOD) myší. Model byl popsán jako prototypový model autoimunitního diabetu, který se podobá průběhu T1DM u lidí [244]. Velká část myších samic obecně umírá na diabetes 1. typu, což odráží nástup těžké insulitidy ve věku kolem 4 týdnů, která je spojena s destrukcí pankreatických buněk zprostředkovanou T buňkami. Predispozice NOD myší k rozvoji autoimunity je důsledkem defektů v periferních i centrálních tolerančních mechanismech [245]. U těchto zvířat bylo popsáno několik abnormalit, jako je abnormální funkce APC [246], akumulace lymfocytů kolem Langerhansových ostrůvků [247] nebo tvorba a funkce Tregs na periferii [248]. Data získaná z tohoto spontánního modelu diabetu naznačují, že monocyty, makrofágy a pDC hrají klíčovou roli ve vývoji tohoto onemocnění [249].

Pomocí NOD myší během prediabetické fáze Grohmann et al. [250,251] pozorovali, že IFN- selhává při indukci tolerizačních vlastností v jejich DC. Tento účinek byl spojen s nízkou aktivitou IDO1 a zhoršeným katabolismem TRP přechodnou blokádou STAT1 dráhy intracelulární signalizace IFN-, způsobenou produkcí peroxydusitanu. Použití inhibitoru peroxynitritu obnovilo u těchto myší jak vhodný katabolismus TRP, tak toleranci. Objevily se první zprávy o experimentálním diabetu, spojovaném defektní imunotoleranci s narušeným katabolismem TRP.

Podobné pozorování provedl Fallarino a spolupracovníci [252], kteří použili CTLA-4, další induktor IDO1. Následně Hosseini-Tabatabaei et al. [253] tento jev objasnili a ukázali, že defektní metabolismus TRP lze přičíst zhoršené schopnosti IFN- indukovat expresi IDO1 v DC i fibroblastech těchto zvířat mechanismem souvisejícím s defektní fosforylací STAT1 v signální dráze IDO1. Ochranná role IDO1 při rozvoji autoimunitního diabetu byla potvrzena také na modelu diabetu indukovaném streptozocinem. Fallarino a kol. [254] identifikovali IDO1 jako kritický Toll-like receptor 9 (TLR9) downstream efektor při regulaci autoimunity. U diabetických zvířat byla progrese onemocnění doprovázena up-regulací IDO1 v pankreatických lymfatických uzlinách a byla exacerbována in vivo podáváním inhibitoru IDO1. Naopak signalizace prostřednictvím TLR9 indukuje expresi IDO1 ve slezinných DC a zmírňuje onemocnění v závislosti na IDO1-. U myší s deficitem TLR9- se však vyvinula závažná forma onemocnění doprovázená nedostatkem indukce IDO1 v pankreatických lymfatických uzlinách [254].

Ukázalo se, že manévry schopné zachovat adekvátní hladiny IDO1 u NOD myší obnovují autoantigenově specifickou tolerogenezi DC in vivo. Pallotta a kol. [255] prokázali, že up-regulace exprese IDO1 a enzymatické funkce v pDC myší NOD může obnovit jejich funkci, což má za následek sníženou produkci prozánětlivých cytokinů a potlačení prezentace autoantigenů buněk in vivo. Podávání proteazomového inhibitoru – bortezomibu – prediabetickým NOD myším způsobilo prevenci nástupu diabetu prostřednictvím mechanismu souvisejícího s obnovením exprese IDO1 v pDC z těchto zvířat a reinstalací imunitní tolerance vůči pankreatickému autoantigenu [256]. Stejně tak použití dermálních fibroblastů se stabilní expresí IDO1 jako buněčné terapie u NOD myší od Zhang et al. [257] vedl ke zvýšení plazmatických hladin KYN a měl ochranný vliv na buňky ostrůvků, které byly chráněny před toxicitou indukovanou jak autoreaktivními T buňkami, tak prozánětlivými cytokiny. Kromě toho úspěšně inhibovaly CD8 plus T buňky a Th17 buňky a také zvýšily Tregs v různých orgánech NOD myší. Injekce s vyšší dávkou fibroblastů exprimujících IDO{13}} dokázaly obnovit normoglykémii u vysokého procenta NOD myší. Transplantace ostrůvků exprimujících IDO{14}} navíc může prodloužit přežití štěpu ostrůvků a tato ochrana je připisována lokální modulaci katabolismu TRP [258,259].

Fallarino a kol. [260] implantovali peritoneálně Sertoliho buňky, které poskytují lokální imunologickou ochranu u NOD myší, a pozorovali prevenci a reverzi diabetu a normalizaci glykémie u těchto zvířat. Tento účinek byl spojen s obnovením systémové imunitní tolerance a byl závislý na účinném metabolismu TRP v xenoimplantátech, zvýšené sekreci TGF následované autoantigenně specifickou diferenciací Tregs a obnovení funkce buněk u diabetických příjemců. Podávání lidského choriového gonadotropinu, klíčového těhotenského hormonu NOD myším, inhibovalo aktivaci diabetogenních CD4 plus a CD8 plus T-buněk in vitro a progresi T1DM in vivo upregulací exprese IDO1 v DC [261]. V nedávné studii Lemos et al. [262] použili nanočástice DNA, které aktivují signální adaptérový stimulátor interferonových genů (STING) a prokázali, že taková léčba zvýšila aktivitu IDO1, která regulovala imunitu T buněk ve slezině, slinivce a pankreatických lymfatických uzlinách NOD myší. Kromě toho tato léčba oddálila nástup T1DM a snížila výskyt T1D, když byla podána před nástupem onemocnění. Tato studie také odhalila, že NOD myši mají STING polymorfismus, který může být částečně zodpovědný za nedostatečnou expresi interferonu a indukci IDO1.

Na druhé straně nové důkazy podporují, že destrukce -buněk způsobená autoimunitními reakcemi může být napravena signalizací AhR. V nedávném komplexním přehledu Yue et al. [263] popsali potenciální implikaci aktivace AhR v patogenezi T1DM a prezentovali její regulační mechanismy v různých typech imunitních buněk. Aktivace AhR svými ligandy nejen moduluje vývoj a funkčnost imunosupresivních buněk, ale také snižuje expresi prozánětlivých cytokinů, a tím tlumí autoimunitní reakce během vývoje T1DM. Myši NOD náchylné k T1DM však vykazují sníženou aktivitu AhR [264], což vytváří potřebu hledat nové, bezpečné sloučeniny, které by mohly aktivovat AhR a bojovat s autoimunitními reakcemi.

V souhrnu všechny tyto výsledky naznačují, že u T1DM-prone NOD myší je přítomna insuficience v ose IFN-/IDO1/AhR, takže pokusy o posílení této osy ve vhodných buňkách imunitního systému by mohly být jednou z cest prevence T1DM v tomto modelu prostřednictvím obnovení imunotolerance pankreatických autoantigenů.

K ochraně před nástupem T1DM byly použity účinné strategie imunologické suprese. Pro tento účel byly vyvinuty chimérické vakcíny, které spojují imunostimulační molekuly s autoantigeny, aby se zvýšila účinnost vakcíny. Vazba B-podjednotky cholerového toxinu na diabetes autoantigen proinzulin vytvořila fúzní protein, který byl schopen chránit před T1DM [265–267]. Perorální imunizace touto vakcínou účinně potlačila destrukci buněk a klinický diabetes u dospělých myší NOD [265,267]. Navíc vakcínou indukovaná exprese IDO1 v DC byla spojena s indukcí imunologické tolerance [266,268]. Srovnatelné výsledky získal tým Ghazariana et al. [269], kteří prokázali, že aktivace invariantních přirozených zabíječů T (iNKT) buněk v době infekce způsobené pankreatickým enterovirem – Coxsackievirem B4 – u podskupiny proinzulinových 2-deficientních NOD myší může zabránit rozvoji diabetu. Pozorovali, že během nástupu diabetu u těchto myší došlo k infiltraci pankreatických ostrůvků zánětlivými makrofágy, produkujícími vysoké hladiny prozánětlivých cytokinů (IL-6, IL-1, TNF- ), což bylo spojené s aktivací T buněk produkujících autoprotilátky proti ostrůvkům.

Ačkoli virová infekce sama o sobě urychlila rozvoj diabetu, přítomnost stimulovaných iNKT buněk během této doby způsobila, že infiltrované makrofágy exprimovaly několik supresivních enzymů, mezi nimiž IDO1 postačoval k inhibici odpovědi proti ostrůvkovým T lymfocytům a k prevenci T1DM. Tato studie naznačuje, že IFN-, silný aktivátor exprese IDO1, může hrát ochrannou nebo zhoubnou roli při rozvoji diabetu. Silné uvolňování IFN- brzy po virové infekci upreguluje expresi IDO1, aby se snížil zánět vyvolaný virem. Pokud jsou však v této době iNKT buňky neaktivní, produkce prozánětlivých cytokinů může zvýšit nábor a aktivaci patogenních T buněk, produkujících IFN-. Za těchto podmínek již není IDO1 v pankreatu exprimován a produkce IFN- povede k destrukci buněk [269].

Další strategií použitou k potlačení rozvoje T1DM byla modulace střevní mikroflóry. Dolpady a kol. [270] orálně podávali probiotika obohacené o Lactobacillaceae myším NOD a prokázali, že modifikace střevní mikroflóry inhibovala expresi IL-1, zatímco zvyšovala uvolňování IDO1 a IL-33 z inflammasomu. Tyto modifikace střevního mikroprostředí podpořily diferenciaci tolerogenních DC se současnou redukcí expanze Th1 a Th17 buněk ve střevní sliznici a v pankreatických lymfatických uzlinách. Tyto výsledky poukázaly na novou terapeutickou možnost použití probiotik pro kontraregulaci autoimunity a prevenci T1DM.

Pozorování provedená na zvířecích modelech byla potvrzena během klinických studií u pacientů s T1DM. U lidí je známo, že exprese a aktivita IDO1 vykazuje relativně velkou interindividuální variabilitu, často jako výsledek jednonukleotidových polymorfismů (SNP) v genu pro enzym, zejména za patologických podmínek [271,272]. Orabona a kol. [273] zjistili, že u dětí s T1DM byla exprese IDO1 a hladiny proteinu velmi nízké nebo chyběly v mononukleárních buňkách periferní krve (PBMC) jako odpověď na IFN-. Defekt IDO1 koreloval s vyšší expresí IL-6 receptoru a děti s SNP v IDO1 mají zvýšené riziko rozvoje T1DM. U pacientů s T1DM sdílejících takový společný haplotyp IDO1, inkubace PBMCs in vitro s tocilizumabem, humanizovanou protilátkou, která blokuje IL-6 receptor, zachránila aktivitu IDO1. Ve stejné studii léčba NOD myší tocilizumabem normalizovala glykémii prostřednictvím mechanismů závislých na IDO. Funkční SNP IDO1 byly tedy spojeny s defektním katabolismem TRP u lidského T1DM a terapeutický účinek tocilizumabu vyžadoval neporušenou expresi IDO1. Anquetil a kol. [274] také uvedli nedostatečnou expresi IDO1 v lidských buňkách pacientů s T1DM ve srovnání se zdravými kontrolami. Exprese IDO1 byla přítomna hlavně v buňkách produkujících inzulin a téměř chyběla u ostrůvků s deficitem inzulinu v lidské pankreatické tkáni, zejména u pacientů s mnohočetnými autoprotilátkami proti buňkám. Navíc byla během T1DM pozorována progresivní ztráta exprese IDO1 s významným poklesem IDO1 v době těsně před destrukcí buněk [274]. Zoso a kol. [275] popsali a charakterizovali populaci lidských MDSC, nazvaných fibrocytické MDSC, které transkripčně leží mezi DC, makrofágy a fibrocyty. Tato podskupina MDSC podporuje diferenciaci Tregs od naivních CD4 plus T buněk a indukuje normoglykémii v xenogenním myším modelu T1DM. K uplatnění jejich silné protolerogenní funkce vyžadují fibrocystické MDSC přímý kontakt s aktivovanými T buňkami, což vede k expresi a sekreci IDO1.

V monocytech a pDC pocházejících z periferní krve pacientů s T1DM Badal a spol. [276] pozorovali sníženou expresi IDO1, což svědčí o tom, že tyto buňky mají sníženou tolerogenní kapacitu ve srovnání s jejich normálními zdravými protějšky. Na rozdíl od toho pDC ze stejné skupiny T1DM vykazovaly významně vyšší frekvenci pDC exprimujících IFN- než zdravé kontroly, zatímco monocyty měly srovnatelnou frekvenci buněk exprimujících IFN- - jako kontroly. Zajímavé je, že po in vitro stimulaci vlastní DNA z mrtvých buněk a komplexy antimikrobiálního peptidu LL37 (DNA-LL37) vykazovaly monocyty i pDC od pacientů s T1DM vyšší expresi IFN-. Kromě toho byla poststimulační schopnost prezentace antigenu a kostimulační schopnost těchto buněk vyšší ve skupině T1DM než u kontrol a po společné kultivaci byly schopny aktivovat autologní CD4 plus T buňky a indukovat apoptózu kultivovaných buněk. Tyto výsledky podporují nepopiratelnou roli narušené rovnováhy mezi buňkami vrozeného imunitního systému, která může zahrnovat jak imunotoleranci expresí IDO1, tak za určitých okolností může být vychýlena směrem k prozánětlivému fenotypu expresí IFN-.

Vezmeme-li v úvahu všechna tato data ze zvířecích modelů a studií na lidech, zdá se, že obnovení imunoregulačních mechanismů IDO1 může být klinicky přínosné u pacientů s T1DM.

4.3. IDO1 a autoimunitní tyreoiditida

Hashimotova choroba a Gravesova choroba jsou nejběžnějšími a extrémně odlišnými formami autoimunitní tyreoiditidy, které vedou ke smrti nebo hyperfunkci tyreocytů [4]. Dosud existuje pouze několik studií, ve kterých byla zkoumána role IDO1 při vzniku těchto onemocnění.

U pacientů s GD byl poměr sérového KYN k TRP, stejně jako exprese IDO1 v B buňkách a DC, zvýšen ve srovnání se zdravými subjekty. CD4 plus T buňky odvozené od pacientů s GD mají zvýšenou expresi tryptofanyl-tRNA syntetázy (TTS) a jejich proliferace nebyla inhibována v přítomnosti DC exprimujících IDO1-. Naproti tomu CD4 plus T buňky pocházející ze zdravých kontrol měly nízkou expresi TTS a jejich proliferace byla za podobných podmínek inhibována [277]. Protože TTS může funkčně antagonizovat imunosupresi zprostředkovanou IDO1- tvorbou rezervoáru TRP, autoři došli k závěru, že zvýšená exprese TTS v CD4 plus T buňkách může zabránit imunosupresi zprostředkované IDO1-, spojující narušený metabolismus TRP se zapojeným patogenním mechanismem ve vývoji GD. V jiné studii však byl v séru pacientů s HT a GD detekován nižší poměr KYN k TRP a významné zvýšení hladin TRP ve srovnání s odpovídajícími kontrolami [278]. Pacienti, zejména pacienti s těžkým onemocněním, vykazují snížený počet periferních pDC a defektní expresi několika imunoregulačních molekul, včetně IDO1, těmito buňkami. Zatímco u těchto pacientů bylo v tkáni štítné žlázy detekováno více pDC a snížená exprese regulačních molekul. Tato data naznačují, že abnormální podíl a fenotyp pDC může přispívat k patogenezi autoimunitní tyreoiditidy.

Zajímavé je, že symptomy GD, podobně jako u jiných autoimunitních onemocnění, se během těhotenství významně zmírňují a znovu se objevují v poporodním období, protože syncytiotrofoblasty placenty mohou syntetizovat imunologicky aktivní molekuly, včetně IDO1, které potlačují imunitní reakce. Naproti tomu v těhotenství nedochází ke klinické změně HT, i když je třeba během těhotenství dávku levothyroxinu zvýšit, podobně u všech forem hypotyreózy [279].

Coppola a kol. [280] hodnotili in vitro schopnost lidských limbálních kmenových buněk podobných fibroblastům, imunoprivilegovaného fenotypu, vyvíjet imunomodulaci na PBMC od pacientek s HT a zdravých kontrol. Po expozici Th1 cytokinům tyto buňky exprimovaly různé cytokiny, včetně IDO1, přičemž si zachovaly svůj negativní fenotyp pro MHC třídy II a kostimulační molekuly. Během společné kultivace tyto buňky potlačily proliferaci ve zdravých aktivovaných PBMC, zatímco Th nerovnováha autoreaktivních T buněk od pacientů s HT byla plně obnovena. Tyto výsledky naznačují nepřiměřenou aktivaci autoreaktivních T lymfocytů v zánětlivém prostředí generovaném při HT a naznačují, že vytvoření tolerogenního prostředí může zvrátit progresi onemocnění.

Experimentální autoimunitní tyreoiditida (EAT) byla studována pomocí myši nazývané model NOD-H2h4, která se vyvíjí spontánně. Tato zvířata ztratila spontánní rozvoj diabetu, ale získala tyreoiditidu. Autoimunitní tyreoiditida u těchto myší je autoimunitní onemocnění zprostředkované T-buňkami, které ničí folikuly štítné žlázy [281].

Bylo prokázáno, že blokáda CTLA{0}} exacerbovala autoimunitní tyreoiditidu u NOD-H2h4 myší a indukovala silnou expresi IDO1 ve štítných žlázách myší a periferních APC. Kromě toho byla zesílená exprese IDO1 pozorována také ve štítné žláze pacientů s metastatickým melanomem, kteří byli léčeni CTLA-4 blokující protilátkou. Autoři interpretovali toto zvýšení IDO1 jako kontraregulační mechanismus, který chrání před nadměrným zánětem vyvolaným blokádou CTLA-4. Podobně se u myší NOD-H2h4 vyvinula oslabená forma tyreoiditidy, když jim byl injikován adenovirus exprimující IDO1 přímo do štítné žlázy po začátku suplementace jódem v pitné vodě. Lokální exprese této imunoregulační molekuly účinně chrání štítnou žlázu před autoimunitními atakami, ale neovlivňuje systémovou imunitu [282]. Nedávno Qiu a kol. [283] zdokumentovali roli expanze Tregs indukované IDO1-v utlumení experimentální autoimunitní tyreoiditidy u potkanů ​​zprostředkovaném Prunella vulgaris. Ukázali, že podávání této rostlinné sloučeniny vyvolalo expresi IDO1 mRNA a proteinu ve slezině a střevě, zvýšilo poměr KYN/TRP v séru a produkci IL-10 a TGF- a podpořilo expanzi slezinných Tregs. Je zajímavé, že hladiny mRNA IDO1 a poměr KYN/TRP byly srovnatelné mezi zdravými kontrolami a neléčenými potkany s EAT. Jak vysvětlili autoři, zvýšená exprese IDO1 byla kompenzačním mechanismem, kterým se potkani s EAT pokusili snížit samoaktivovanou imunitní odpověď na začátku onemocnění. Tyto kontraregulační mechanismy byly pravděpodobně vyčerpány během vývoje EAT, což vedlo ke snížení exprese IDO1 na úroveň detekovanou u zdravých zvířat.

Ve světle několika výše uvedených studií se zdá, že lokální exprese IDO1 by mohla účinně chránit štítnou žlázu před autoimunitními záchvaty. Tuto hypotézu podporuje studie provedená na tkáních karcinomů štítné žlázy a buněčných liniích karcinomu štítné žlázy [284]. Exprese genu IDO1 byla vyšší ve tkáni karcinomu štítné žlázy ve srovnání s normální štítnou žlázou a byla spojena s hustotou Foxp3 plus Tregs v mikroprostředí nádoru. IDO1 byl také exprimován v buněčných liniích lidského karcinomu štítné žlázy in vitro a v buněčné linii s nejvyšší expresí IDO1 byla zvýšená hladina KYN také detekována v buněčném kultivačním médiu, což ukazuje na funkční aktivitu IDO1. Společná kultivace této buněčné linie s aktivovanými T lymfocyty vedla k blokování proliferace lymfocytů, zatímco diferenciace Tregs byla zvýšena. Výše zmíněný imunoregulační účinek byl zprostředkován solubilním faktorem — KYN.

Podle našich nejlepších znalostí nejsou v dostupné literatuře zatím žádné údaje o významu IDO1-zprostředkované aktivace KP při vzniku a progresi jiných autoimunitních endokrinopatií, kromě studie Gupty et al. [285], prokazující reaktivitu IDO1 v pankreatických vývodech pacientů s autoimunitní pankreatitidou 2. typu.

5. Závěry a výhledy do budoucna

Autoimunitní onemocnění obvykle vyplývají ze ztráty autotolerance, která vede k tvorbě samovolně reagujících lymfocytů a produkci autoprotilátek, které způsobují poškození tkáně. IDO1-zprostředkovaná aktivace KP se ukázala jako důležitá při propojování vrozených a adaptivních imunitních procesů, jako je inhibice odpovědí T buněk na antigenní stimulaci, modulace funkcí APC, tvorba a udržování supresorové aktivity Treg a inhibice prozánětlivých produkci cytokinů. Manipulace osy IDO1/KYN/AhR se tedy zdá být slibnou strategií pro léčbu řady chronických autoimunitních onemocnění, včetně autoimunitních endokrinopatií. Ačkoli většina studií prokazujících vztah mezi změnami metabolismu TRP prostřednictvím KP a imunoregulací byla provedena in vitro nebo na experimentálních zvířecích modelech, několik shromážděných údajů naznačuje, že mohou být přeneseny na člověka. To otevírá zajímavé možnosti pro terapeutické aplikace induktorů IDO1 u stavů, kde selhávají mechanismy imunotolerance, jako jsou autoimunitní endokrinopatie. Samostatně nebo v kombinaci s jinými již existujícími terapiemi by tento přístup mohl vytvořit novou terapeutickou kombinaci, která bude zahrnovat několik aspektů patogenního procesu, poskytne úplnější ochranu a možnou prevenci nástupu onemocnění.

Příspěvky autora:

Konceptualizace, AK; psaní – příprava původního návrhu, AK; vizualizace, AK; psaní – recenze a úpravy, IK Všichni autoři si přečetli publikovanou verzi rukopisu a souhlasí s ní.

Financování:

Tento výzkum nezískal žádné externí financování.

Prohlášení institucionální revizní komise:

Nelze použít.

Prohlášení o informovaném souhlasu:

Nelze použít.

Prohlášení o dostupnosti dat:

Nelze použít.

Střet zájmů:

Autoři neprohlašují žádný střet zájmů.

Reference

1. Wang, L.; Wang, FS; Gershwin, ME Lidská autoimunitní onemocnění: Komplexní aktualizace. J. Intern. Med. 2015, 278, 369–395. [CrossRef]

2. Rose, NR Predikce a prevence autoimunitních onemocnění v 21. století: Přehled a náhled. Dopoledne. J. Epidemiol. 2016, 183, 403–406. [CrossRef] [PubMed]

3. Ruggeri, RM; Giuffrida, G.; Campennì, A. Autoimunitní endokrinní onemocnění. Min. Endocrinol. 2018, 43, 305–322.

4. Antonelli, A.; Ferrari, SM; Corrado, A.; Di Domenicantonio, A.; Fallahi, P. Autoimunitní poruchy štítné žlázy. Autoimunitní. Rev. 2015, 14, 174–180. [CrossRef]

5. Iddah, MA; Macharia, BN Autoimunitní poruchy štítné žlázy. ISRN Endocrinol. 2013, 2013, 509764. [CrossRef] [PubMed]

6. Smith, TJ; Hegedüs, L. Gravesova nemoc. N. Engl. J. Med. 2016, 375, 1552–1565. [CrossRef]

7. Vaidya, B.; Pearce, SH Diagnostika a léčba tyreotoxikózy. BMJ 2014, 349, g5128. [CrossRef] [PubMed]

8. Antonelli, A.; Fallahi, P.; Elia, G.; Ragusa, F.; Paparo, SR; Ruffilli, I.; Patrizio, A.; Gonnella, D.; Giusti, C.; Virili, C.; a kol. Gravesova choroba: Klinické projevy, imunitní patogeneze (cytokiny a chemokiny) a terapie. Nejlepší praxe. Res. Clin. Endocrinol. Metab. 2020, 34, 101388. [CrossRef] [PubMed]

9. Altobelli, E.; Petrocelli, R.; Verrotti, A.; Chiarelli, F.; Marziliano, C. Genetické a environmentální faktory ovlivňují vznik diabetes mellitus 1. typu. Pediatr. Diabetes 2016, 17, 559–566. [CrossRef]

10. Rogers, MAM; Kim, C.; Banerjee, T.; Lee, JM Výkyvy ve výskytu diabetu 1. typu ve Spojených státech od roku 2001 do roku 2015: Longitudinální studie. BMC Med. 2017, 15, 199. [CrossRef] [PubMed]

11. Krischer, JP; Lynch, KF; Schatz, DA; Ilonen, J.; Lernmark, Å.; Hagopian, WA; Rewers, MJ; Ona, JX; Simell, OG; Toppari, J.; a kol. 6-roční výskyt autoprotilátek souvisejících s diabetem u geneticky ohrožených dětí: Studie TEDDY. Diabetologie 2015, 58, 980–987. [CrossRef]

12. Ziegler, AG; Rewers, M.; Simell, O.; Simell, T.; Lempainen, J.; Steck, A.; Winkler, C.; Ilonen, J.; Veijola, R.; Knip, M.; a kol. Sérokonverze na mnohočetné ostrůvkové autoprotilátky a riziko progrese diabetu u dětí. JAMA 2013, 309, 2473–2479. [CrossRef]

13. Insel, RA; Dunne, JL; Atkinson, MA; Chiang, JL; Dabelea, D.; Gottlieb, PA; Greenbaum, CJ; Herold, KC; Krischer, JP; Lernmark, Å.; a kol. Staging presymptomatického diabetu 1. typu: Vědecké prohlášení JDRF, Endokrinní společnosti a Americké diabetické asociace. Diabetes Care 2015, 38, 1964–1974. [CrossRef]

14. Husebye, ES; Anderson, MS; Kämpe, O. Autoimunitní polyendokrinní syndromy. N. Engl. J. Med. 2018, 378, 1132–1141. [CrossRef]

15. Cutolo, M. Autoimunitní polyendokrinní syndromy. Autoimunitní. Rev. 2014, 13, 85–89. [CrossRef] [PubMed]

16. Ben-Skowronek, I.; Michalczyk, A.; Piekarski, R.; Wysocka-Łukasik, B.; Banecka, B. Polyglandulární autoimunitní syndromy III. typu u dětí s diabetes mellitus 1. typu. Ann. Agric. Environ. Med. 2013, 20, 140–146. [PubMed]

17. Betterle, C.; Presotto, F.; Furmaniak, J. Epidemiologie, patogeneze a diagnostika Addisonovy choroby u dospělých. J. Endocrinol. Vyšetřování. 2019, 42, 1407–1433. [CrossRef] [PubMed]

18. Hemmer, B.; Kerschensteiner, M.; Korn, T. Role vrozených a adaptivních imunitních odpovědí v průběhu roztroušené sklerózy. Lancet Neurol. 2015, 14, 406–419. [CrossRef]

19. Schön, MP Adaptivní a vrozená imunita u psoriázy a jiných zánětlivých poruch. Přední. Immunol. 2019, 10, 1764. [CrossRef]

20. Pan, L.; Lu, MP; Wang, JH; Xu, M.; Yang, SR Imunologická patogeneze a léčba systémového lupus erythematodes. Svět J. Pediatr. 2020, 16, 19–30. [CrossRef]

21. Gianchecchi, E.; Delfino, DV; Fierabracci, A. NK buňky u autoimunitních onemocnění: Spojení vrozených a adaptivních imunitních reakcí. Autoimunitní. Rev. 2018, 17, 142–154. [CrossRef]

22. Wahren-Herlenius, M.; Dörner, T. Imunopatogenní mechanismy systémového autoimunitního onemocnění. Lancet 2013, 382, ​​819–831. [CrossRef]

23. Ferrari, SM; Fallahi, P.; Elia, G.; Ragusa, F.; Ruffilli, I.; Paparo, SR; Antonelli, A. Autoimunitní poruchy štítné žlázy a rakovina. Semin. Cancer Biol. 2020, 64, 135–146. [CrossRef] [PubMed]

24. Slunce, L.; Xi, S.; On, G.; Li, Z.; Gang, X.; Sun, C.; Guo, W.; Wang, G. Dva k tangu: Dialog mezi adaptivní a vrozenou imunitou u diabetu 1. typu. J. Diabetes Res. 2020, 2020, 4106518. [CrossRef] [PubMed]

25. Routy, JP; Routy, B.; Graziani, GM; Mehraj, V. Kynureninová cesta je dvousečný meč v imunitně privilegovaných místech a rakovině: důsledky pro imunoterapii. Int. J. Tryptophan Res. 2016, 9, 67–77. [CrossRef] [PubMed]

26. González, A.; Varo, N.; Alegre, E.; Díaz, A.; Melero, I. Imunosuprese vedená kynureninovou cestou: Biochemický a patofyziologický přístup. Adv. Clin. Chem. 2008, 45, 155–197.

27. Sorgdrager, FJH; Naudé, PJW; Kema, IP; Nollen, EA; Deyn, PP Metabolismus tryptofanu při zánětech: Od biomarkeru k terapeutickému cíli. Přední. Immunol. 2019, 10, 2565. [CrossRef]

28. Mándi, Y.; Vécsei, L. Kynureninový systém a imunoregulace. J. Neural. Transm. 2012, 119, 197–209. [CrossRef]

29. Bo, L.; Guojun, T.; Li, G. Rozšířená neuroimunomodulační osa: sCD83-Indoleamin 2,3-dioxygenáza-kynureninová dráha a aktualizace kynureninové dráhy u neurologických onemocnění. Přední. Immunol. 2018, 9, 1363. [CrossRef]

30. Mondanelli, G.; Iacono, A.; Carvalho, A.; Orabona, C.; Volpi, C.; Pallotta, MT; Matino, D.; Esposito, S.; Grohmann, U. Metabolismus aminokyselin jako cíl léčiva u autoimunitních onemocnění. Autoimunitní. Rev. 2019, 18, 334–348. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com