Endoteliální glykokalyx jako cíl ischemie a reperfuzního poškození při transplantaci ledvin – kam jsme se tak daleko dostali?

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Anila Duni¹, Vassilios Liakopoulos², Vasileios Koutlas³, Charalampos Pappas¹, Michalis Mitsis³ a Evangelia Dounousi^1,*

Abstraktní:

Poškození endoteliálního glykokalyxu v důsledku ischemie a/nebo reperfuzního poškození (IRI) poledvinatransplantacese dostal do centra pozornosti výzkumu kvůli potenciálním souvislostem s opožděnou funkcí štěpu, akutní rejekcí a také dlouhodobou dysfunkcí aloštěpu. Rozpad endoteliálního glykokalyxu vyvolaný IRI je klíčovou událostí, která vystavuje obnažené endoteliální buňky dalšímu zánětlivému a oxidativnímu poškození. Cílem našeho přehledu je předložit aktuálně dostupná data týkající sekomplexpropojení mezi uvolňováním složek glykokalyxu, jako je syndekan{0}}, hyaluronan, heparan sulfát a CD44, s aktivací složitých odpovědí imunitního systému, včetně toll-like receptorů, cytokinů a prozánětlivých transkripčních faktorů. Jsou také popsány důkazy o způsobech ochrany endoteliálního glykokalyxu a následně udržení endoteliální permeability a také nové nefroprotektivní molekuly, jako je sfingosin-1fosfát (S1P). Ačkoli pokroky v technologii umožňují vizualizaci a analýzu endoteliálního glykokalyxu, v současnosti dostupné důkazy jsou většinou experimentální. Pokračující pokrok v pochopení komplexního dopadu IRI na endoteliální glykokalyx otevírá novou éru výzkumu v oblastiorgántransplantacea klinické studie jsou pro budoucnost nanejvýš důležité.

klíčová slova: ledvinatransplantace; endoteliální glykokalyx; ischemické a/nebo reperfuzní poškození; zánět; imunitní reakce

Cistanche tubulosa zabraňuje onemocnění ledvin, kliknutím sem získáte vzorek

1. Úvod

ledvinytransplantace, léčba volby pro konečné stádiumledvinaOnemocnění je spojeno s výrazným zlepšením prognózy pacientů, včetně přežití, kardiovaskulárních výsledků a kvality života ve srovnání s dialýzou [1,2]. Navzdory udržitelným zlepšujícím se trendům týkajícím se dlouhodobého přežití ledvinových aloštěpů, míra chronické ztráty štěpu po prvním roce potransplantacezůstávají značné [3,4]. Kromě imunologických viníků, včetně neshody a senzibilizace lidského leukocytárního antigenu (HLA), typu dárce ledvin, dlouhodobé imunosuprese a také komorbidit, jako je arteriální hypertenze a dyslipidémie, velké studie naznačují, že na zvýšeném riziku onemocnění se podílejí perioperační faktory. dlouhodobé selhání aloštěpu [5–11]. Ischemické a/nebo reperfuzní poškození (IRI) v ledvináchtransplantaceje v popředí jako kritický rizikový faktor spojený nejen s časnými komplikacemi, jako je opožděná funkce štěpu při postischemické akutní tubulární nekróze, ale také s akutní rejekcí a dlouhodobou dysfunkcí aloštěpu [12]. IRI, alespoň do určité míry, je nevyhnutelný fenomén vyskytující se během transplantace ledvin. Ačkoli tento termín ve svém jádru označuje poruchu krevního partnera, existuje mnoho vzájemně se prolínajících patofyziologických drah, které jsou základem komplexních patologických a klinických důsledků této entity [13–15].

V literatuře je k dispozici mnoho informací o tomledvinaIRI, včetně četných experimentálních a klinických studií, které se pokoušejí objasnit složité mechanismy zapojené do její patogeneze, stejně jako její hlavní cíle, vaskulární endotel a renální tubulární epiteliální buňky. Mimo jiné, negativně nabitá gelovitá struktura bohatá na sacharidy známá jako endoteliální glykokalyx, která leží na rozhraní mezi krví a endotelem, se dostala do centra pozornosti rozsáhlého výzkumu kvůli své zásadní roli při udržování endoteliální homeostázy. . Glycocalyx by neměl být považován za pouhou směs proteoglykanů, glykoproteinů a glykolipidů. Hraje klíčovou modulační roli ve funkci endotelu, a to nejen díky svým biomechanickým vlastnostem, které regulují přenos smykového napětí do endotelu, ale také díky svému složení, které zahrnuje proteiny podílející se na uchycení a migraci buněk, růstové faktory, chemokiny, mediátory oxidační stres a koagulační faktory [16].

2. Cíle a metody

Cílem našeho přehledu je prezentovat aktuálně dostupná data týkající se komplexních vazeb mezi uvolňováním složek glykokalyx, jako je syndekan-1, hyaluronan, heparan sulfát a CD44, s aktivací složitých reakcí imunitního systému, včetně toll- jako jsou receptory, cytokiny a prozánětlivé transkripční faktory. Jsou také popsány důkazy o způsobech ochrany endoteliálního glykokalyxu a následně udržení endoteliální permeability a také nové nefroprotektivní molekuly, jako je sfingosin-1fosfát (S1P). V souladu s tím jsme v elektronických databázích včetně PubMed, Medline a Cochrane prohledali všechny publikace o pevných orgánech.transplantaceneboledvina/transplantace ledvin a ischemické a reperfuzní poškození a akutníledvinaporanění a endoteliální glykokalyx, syndekan, hyaluronan, heparan sulfát, CD44, do listopadu 2020. Zahrnuli jsme jak experimentální, tak původní klinické studie. Kromě toho jsme ručně prohledali reference každé relevantní studie a zkontrolovali články pro další publikaci.

3. IRI na první pohled

Ischemické a reperfuzní poškození představuje neměnnou a hlavní výzvu v perioperačním období vledvinatransplantace. Časová dráha událostí, které určují rozsah IRI v tomto prostředí, od mozkové smrti a související hyperaktivity sympatického nervového systému, po teplou ischemii po sevření ledvinových cév a studenou ischémii po zchlazení štěpu až po implantaci štěpu a reperfuzi, mají společnou jmenovatel, který je definován sníženým přísunem kyslíku a živin do renální tkáně [13]. Následný přechod na anaerobní glykolýzu nesplňuje energetické požadavky renálních buněk, což vede k úniku lysozomálních enzymů v důsledku narušení lysozomální membrány, inhibici aktivity Na plus/K plus/ATPázy a přetížení cytoplazmy vápníkem. 14,17–19]. Paradoxně samotný proces reperfuze v prostředí tohoto ischemického prostředí podněcuje tvorbu reaktivních forem kyslíku (ROS) a aktivaci intracelulárních proteolytických enzymů závislých na vápníku, čímž se udržuje další poškození [20,21]. Zjednodušený přístup popsaný výše je univerzální proces společný všem buňkám vystaveným ischemickému prostředí; zahrnuje však účast a integraci několika odlišných buněčných a molekulárních drah, včetně programů buněčné smrti, jako je autofagie, nekroptóza a apoptóza, aktivace prozánětlivé kaskády, endoteliální dysfunkce projevující se jako zvýšená exprese vazoaktivních a vaskulárních adhezivních molekul a zesílení oxidačního stresu [22–28].

Klíčovou roli v IRI hraje vrozený imunitní systém a specifická aktivace toll-like receptor (TLR)—4 na bílých krvinkách a také na endoteliálních a renálních tubulárních buňkách, což vede ke kaskádě zvýšené exprese prozánětlivých transkripčních faktorů , NF-kB a aktivátorový protein 1. Upregulace adhezních molekul, včetně intracelulární buněčné adhezní molekuly (ICAM-1), vaskulární buněčné adhezní molekuly VCAM-1 a E-selektinu, které usnadňují migraci a infiltraci leukocytů dále zesilují zánětlivou odpověď a aktivaci imunitního systému [15,29–31]. Bylo prokázáno, že aktivace TLR-4 podporuje uvolňování hlavních prozánětlivých cytokinů, jako je interleukin (IL)-6, IL-1, tumor nekrotizující faktor (TNF) a chemotaktické mediátory jako je makrofágový zánětlivý protein-2 (MIP-2) a protein chemoatraktantu monocytů-1 (MCP-1) [32]. Kromě toho existuje interakce mezi signalizací TRL a systémem komplementu v IRI s mitogenem aktivovanými proteinkinázami (MAPK), které slouží jako spojovací řetězce mezi těmito dvěma systémy [15,33]. Kromě toho, po rozpoznání buněčných úlomků uvolněných v prostředí buněčného poškození, takzvaných molekulárních vzorců spojených s nebezpečím (DAMP), TLR aktivují nejen zánětlivou reakci, jak je znázorněno výše, ale indukují dendritické buňky, aby provedly prezentaci antigenu. roli B- a T-lymfocytů adaptivního imunitního systému [34]. Při IRI rozpoznává renální TLR-4 kromě jiných endogenních ligandů molekuly extracelulární matrix a glykokalyx, jako je biglykan, hyaluronan a heparansulfát [35–37].

Reaktivní formy kyslíku jsou klíčovými složkami patogeneze IRI. Ischemická deregulace mitochondriální funkce s největší pravděpodobností způsobuje propuknutí uvolňování ROS v důsledku aktivace xantinoxidázy a nikotinamidadenindinukleotid fosfátu (NADPH) oxidázy po reperfuzi a reinstalaci správné tkáňové oxygenace. Vzniká nerovnováha mezi tvorbou ROS a reaktivních druhů dusíku (RNS) a reakcemi endogenního antioxidačního systému, což má za následek oxidační poškození a další aktivaci zánětu a také proapoptotické exprese mediátorů, čímž se udržuje začarovaný kruh [28,38–41] . Ukázalo se, že intracelulární metabolické vedlejší produkty nahromaděné během ischemické fáze, jako je sukcinát, dále narušují mitochondriální transport elektronů a indukují tvorbu superoxidu [42].

Faktory indukované hypoxií (HIF), HIF-1 a HIF-2, jsou transkripční faktory, které si získaly velkou pozornost díky své potenciálně prospěšné roli v IRI [15,43]. Von Hippel–Lindau a proteiny prolylhydroxylázové domény (PHD) jsou spojeny s degradací HIF za podmínek normoxie [43]. Na druhé straně je HIF stabilizován hypoxií, a tak reguluje adaptaci tkáně na takové podmínky prostřednictvím transkripce cílových genů, včetně těch, které jsou spojeny s glykolýzou, produkcí angiogenních faktorů, jako je VEGF, a produkcí erytropoetinu [43]. Je třeba poznamenat, že HIF-1 upreguluje expresi TLR4 v makrofázích v reakci na hypoxický stres, zatímco ROS zprostředkovává regulaci HIF-1 různými cestami, včetně inhibice propylhydroxyláz, posttranslační modifikace HIF{{11 }}protein procesem nitrosace a také nepřímo prostřednictvím zapojení miR-21, miR-210 a zánětlivých mediátorů [44,45].

Hlavním cílem IRI a souvisejících patogenních procesů je vaskulární endoteliální dysfunkce, projevující se otokem endoteliálních buněk, degradací endoteliálního cytoskeletu, ztrátou integrity endoteliální vrstvy a také degradací glykokalyx, což bude podrobněji rozvedeno následně [46,47]. Vrcholným jevem je přechod endotelu do mezenchymu (EndMT), během kterého endoteliální buňky vykazují fenotyp podobný mezenchymálním buňkám, což se projevuje zvýšeným sklonem ke zvýšené produkci extracelulární matrix a migračním vlastnostem [48,49].

4. Přehled endoteliálního glykokalyxu

Páteř endoteliální glykokalyx se skládá z proteoglykanů spolu s jejich polysacharidovými řetězci glykosaminoglykanů (GAG) a také glykoproteiny a glykolipidy [16,50]. Hlavními složkami GAG jsou heparan sulfát (HS) a chondroitin sulfát (HS), které jsou připojeny k proteoglykanům, zatímco kyselina hyaluronová (HA) se přímo váže na CD44, transmembránový glykoprotein. Rodina syndekanů (včetně syndekanu-1, syndekanu-2, syndekanu{5}} a syndekanu-4) představuje proteoglykany s jednou transmembránovou doménou, zatímco glypikan-1 je extracelulární glykosylfosfatidylinositolem (GPI) zakotvený HS glykoprotein [51]. Kromě toho jsou perlekan a biglykan rozpustné formy proteoglykanů, které sídlí v matrici glykokalyxu, aniž by byly připojeny k membráně endoteliálních buněk. Bylo prokázáno, že tloušťka a složení glykokalyx se liší mezi různými orgány, vaskulárními anatomickými místy a dokonce i uvnitř fenestrovaných a nefenestrovaných kapilárních řečišť, což zase může určovat heterogenní vlastnosti glykokalyx [16,52]. Vaskulární smykový stres a sfingosin-1-fosfát (S1P), fosfolipid, který se účastní signálních drah zprostředkovaných receptory spřaženými s G-proteinem, se zdají být významnými determinanty a regulátory struktury a funkce glykokalyx [53].

Kromě toho jsou glykoproteiny také považovány za základní funkční složky glykokalyxu, protože přispívají k jeho rozmanitým biologickým funkcím [51]. Mezi hlavní třídy glykoproteinů patří adhezní molekuly endoteliálních buněk a složky koagulačního a fibrinolýzního systému [51]. V souladu s tím E-selektin a P-selektin zprostředkovávají interakci mezi bílými krvinkami a endoteliálními buňkami, zatímco integriny zprostředkovávají interakci endotelu se složkami extracelulární matrix [54,55]. ICAM-1 a -2, stejně jako VCAM-1, patří do imunoglobulinové superrodiny transmembránových glykoproteinů, které slouží jako ligandy pro integriny na bílých krvinkách a krevních destičkách, čímž se účastní přenosu leukocytů, včetně náboru a extravazace do zanícených míst [51,56]. Receptor von Willebrandova faktoru či jinak glykoproteinový Ib-IX–V komplex a trombomodulin, trombinový kofaktor a přírodní antikoagulant představují mimo jiné membránově vázané proteiny endoteliálního glykokalyxu s regulační úlohou v koagulaci a fibrinolýze.

Kromě proteinů ukotvených v buněčné membráně existuje v mikroprostředí glykokalyx velké množství molekul různého původu (např. plazma, endoteliální buňky atd.). Mezi tyto rozpustné složky patří enzymy, které patří do obranného systému organismu proti ROS (superoxiddismutáze), interleukiny, fibroblastový růstový faktor (FGF) a transformující růstový faktor b (TGFb), LDL lipáza a členy koagulační kaskády jako je antitrombin III. a inhibitor faktoru tkáňové dráhy [51].

Vzhledem ke komplexnosti endoteliálního glykokalyxu je snadné pochopit jeho pleiotropní vlastnosti jako přenašeče vaskulárních smykových stresových sil do endoteliálních buněk, regulátoru vaskulární permeability, modulátoru zánětlivých reakcí a oxidačního stresu, stejně jako regulátoru hemostáze [51].

Experimentální údaje v literatuře naznačují, že endoteliální glykokalyx je významnou součástí glomerulární filtrační bariéry [16]. Síť negativně nabitých zbytků GAG a kyseliny sialové v glykoproteinech tedy nejen poskytuje nábojovou i velikostně selektivní bariéru, ale ukázalo se, že glomerulární endoteliální fenestrae jsou vyplněny HA, která brání albuminu procházet glomerulární kapilární stěnou. [52,57]. Endoteliální delece hyaluronansyntázy 2 (Has2) u myší je spojena s mesangiolýzou, glomerulární kapilární vzácností, glomerulosklerózou a albuminurií, což jsou nálezy s přímými důsledky v několika modelech onemocnění, včetně diabetické nefropatie [57].

Podobně se zdá, že myši s deficitem enzymu N-deacetyláza-N-sulfotransferáza (Ndst), který moduluje strukturu HS, jsou chráněny před influxem glomerulárních leukocytů v experimentálním modelu antiglomerulární nefritidy bazální membrány [58].

Dále se ukázalo, že HA, HS a glypikan-1 jsou nutné pro vazoaktivní odpověď endoteliálních buněk na smykové napětí a konkrétně prostřednictvím přenosu sil na aktinový cytoskelet a také prostřednictvím endoteliální syntázy oxidu dusnatého ( aktivace eNOS a tvorba oxidu dusnatého (NO) [53,59,60].

Je třeba poznamenat, že proces studia endoteliálního glykokalyxu ex vivo a in vitro je náročný úkol kvůli jeho křehkosti struktury a také technickým potížím při přípravě výsledků. Cirkulující markery endoteliální glykokalyxy mohou sloužit jako atraktivní alternativy, jak tomu je u patologického vylučování glykokalyx u různých modelů onemocnění [16].

5. Poškození IRI a glykokalyxu při transplantaci ledviny

Poškození endoteliálního glykokalyxu a související dysfunkce endotelu jako důsledek IRI je společné pro několik modelů onemocnění. V souladu s tím jsou jak generalizované ischemické stavy, ke kterým dochází při srdeční zástavě, tak různé typy šoku nebo lokální ischemie orgánů, jako je tomu při infarktu myokardu a revaskularizačních procedurách, charakterizovány přímým nebo nepřímým důkazem degradace endoteliálních glykokalyx [61]. Stejně tak ischemická akutníledvinaporanění (AKI) a IRI při transplantaci ledviny, které se projevuje opožděnou funkcí štěpu, sdílejí společné patofyziologické rysy, přičemž jedním z nich je poškození glykokalyx (obrázek 1).

5.1. IRI indukované vylučování renálního endoteliálního glykokalyxu

Dezintegrace glykokalyx indukovaná IRI je klíčovou událostí, která vystavuje obnažené endoteliální buňky dalšímu zánětlivému a oxidativnímu poškození. Důkazy naznačují, že vylučování glykokalyx je běžným jevem a koreluje s poraněním štěpu při transplantaci jater a plic [62–65]. Plazmatická hladina syndekanu-1 tedy významně stoupá po následující reperfuzi během ortotopické transplantace jater a navíc předpovídá superpozici AKI stadia 2 nebo 3 po transplantaci do 48 hodin po reperfuzi [62]. Podle nedávných údajů je poškození glykokalyx v lidských jaterních štěpech instalováno již během konzervace štěpu, jak naznačuje zvýšená hladina syndekanu- 1 ve výtocích z jaterních štěpů, která dále korelovala s výtokovými koncentracemi markerů poškození jater a také se zvýšeným rizikem rozvoje časné dysfunkce aloštěpu [63].

Podobně byly v perfuzátu lidských a prasečích plic podstupujících ex vivo plicní perfuzi detekovány zvýšené koncentrace endoteliálních produktů rozpadu glykokalyx, jako je syndekan-1, hyaluronan, heparan sulfát a CD44, což je nová technika, jejímž cílem je zlepšit štěp funkce při transplantaci plic [64]. Ukázalo se, že snížené hladiny hyaluronanu v periferní krvi dárců plic jsou nezávisle spojeny s pravděpodobností, že plíce budou přijatelné pro transplantaci, zatímco vysoké hladiny plazmatického syndekanu-1 u dárců i příjemců plic byly spojeny s primární dysfunkcí štěpu [ 65]. Experiment s autotransplantací plic u prasat odhalil snížené hladiny syndekanu-1 a heparansulfátu v plicní tkáni spolu se zvýšenými hladinami ve vzorcích plazmy po shlukování plicní tepny a následně po reperfuzi, které byly navíc doprovázeny aktivací neutrofilů a zvýšenou expresí adhezní molekuly [66].

Aktivace komplementové kaskády se přímo podílí na poškození renální tkáně při IRI způsobujícím aktivaci endotelu se zvýšenou expresí VCAM{0}} a náborem zánětlivých buněk [67–69]. V modelu IRI indukované v jednomledvinau myší vedla farmakologická blokáda C5 ke snížení renálního endoteliálního vylučování glykokalyx, což se projevilo zachovanou expresí renálního vaskulárního HS a sníženými hladinami cirkulujícího syndekanu-1 a hyaluronanu [69].

vledvinatransplantace, měření koncentrací syndekan{0}} a heparansulfátu 5 minut po reperfuzi ledvin z DCD prokázaly zvýšené hladiny v transplantované ledvinové žíle ve srovnání se systémovou arteriální cirkulací [70]. Je pozoruhodné, že funkce štěpu první den po transplantaci byla nepřímo spojena s renálním efluxem syndekanu-1 5 minut po reperfuzi.

Složky glykokalyxu jsou odštěpovány z povrchu endoteliálních buněk řadou matricových proteináz, známých jako "sheddázy". Matrixové metaloproteinázy (MMP) jsou velkou rodinou proteolytických endopeptidáz, které degradují kolagen a další proteiny extracelulární matrix, a tak vykonávají řadu základních fyziologických funkcí, od hojení ran po angiogenezi [71]. Existuje velké množství důkazů svědčících o MMP v akutním stavuledvinaporanění a fibrotickéledvinamodely onemocnění u nativních i transplantovaných ledvin [72–76]. Různé MMP byly identifikovány jako časné biomarkery těžké AKI, zatímco na druhé straně se předpokládá, že podporují regeneraci renálních tubulárních kanálků po AKI [73]. V experimentálním modelu IRI-asociované AKI indukované u myší se aktivity MMP- 2 a MMP-9 a také závažnost AKI zvětšovaly se zvyšující se dobou trvání ischemie. Navíc exprese MMP-2 v peritubulárních kapilárách vnější dřeně korelovala s apoptózou a nekrózou vnější dřeně [73]. Podobně vyšetření perfuzátu z lidských perfundovaných ledvin prokázalo významně vyšší hladiny MMP-2 a MMP-9 v perfuzátech od dárců dárcovství po cirkulačním stanovení smrti (DCDD) ve srovnání s dárci po mozkové smrti (DBD ) [77]. Dále je třeba poznamenat, že hladiny MMP-2 a MMP-9 byly přibližně dvojnásobné v ledvinách s DGF ve srovnání s ledvinami bez DGF [77]. Srovnatelné výsledky z plicních perfuzátů během ex vivo perfuzí lidských plic ukázaly silnou pozitivní korelaci mezi aktivitou MMP-2 a zvýšeným syndekanem-1 a koncentrátem hyaluronanu [65].

Zvýšená koncentrace MMP-9 v moči v prvním pooperačním dniledvinabylo prokázáno, že transplantace koreluje nejen s tubulární atrofií a fibrózou v renálních biopsiích provedených 3 a 12 měsíců po transplantaci, ale také s časnou i dlouhodobou dysfunkcí štěpu [78]. Navíc pacienti s DGF, který je přímým klinickým výsledkem IRI, vykazují v moči vyšší hladiny tkáňových inhibitorů matrix metaloproteinázy (TIMP)-1 a TIMP-2 [78].

Kromě degradace extracelulární matrix, endoteliálního glykokalyxu a kolagenové bazální membrány glomerulů typu IV se zdá, že MMP-9 má také přímé prozánětlivé vlastnosti prostřednictvím aktivace IL-8 a endotelový původ z epiteliálních buněk derivovaný neutrofily aktivující peptid (ENA) −78 [79].

Je třeba poznamenat, že bylo zjištěno, že vylučování syndekanů zprostředkované MMP přispívá k narušení endoteliálních glykokalyx, ke kterému dochází u různých jednotek, včetně diabetes mellitus a dalších prozánětlivých stavů [80,81]. Navíc bilaterální renální IRI u myší s deficitem syndekanu-1 ve srovnání s myší divokého typu bylo spojeno se zvýšeným počtem makrofágů a myofibroblastů a také s tubulárním poškozením [82]. Několik experimentálních dat navíc podporuje, že MMP-7 vylučování komplexů syndekan-1/CXCL1 z různých buněčných povrchů stimuluje aktivaci a migraci neutrofilů v různých tkáních [83].

GAG řetězce syndekanu-1 fungují jako vazebná místa pro hepatocytární růstový faktor (HGF) a zprostředkovávají interakci HGF s jeho specifickým receptorem, mezenchymálně-epiteliálním přechodovým faktorem (c-Met). Ukázalo se, že receptor HGF spolu s jeho downstream efektory, AKT a kinázou glykogensyntázy-3 (GSK-3), hrají renoprotektivní roli v AKI [81,84]. Farmakologická inhibice vylučování syndekanu-1 v prostředí IRI aktivuje fosforylaci signální dráhy c-Met/AKT/GSK-3, čímž dále podporuje důležitou roli syndekanu-1 jako koreceptoru pro HGF ke zmírnění apoptózy a zánětu u IRI [85]. Podání GM6001, inhibitoru sheddázy u myší s AKI indukovanou IRI, tedy zeslabilo stimulační účinek IRI na hladiny IL-6 a TNF mRNA a také inhibovalo uvolňování syndekan{15}} a apoptózu proximálních tubulárních buňky [85].

Vzhledem k tomu, že reaktivní formy kyslíku mají zásadní a společné postavení v patogenezi několika modelůledvinaonemocnění, bylo by přímočaré uznat jejich roli ve vzácnosti a degradaci mikrovaskulárního endoteliálního glykokalyxu indukovaného IRI [86–88]. Dostupné experimentální důkazy tedy naznačují, že ROS neovlivňují biosyntézu složek glykokalyxu, ale spíše přímo způsobují uvolňování heparansulfátu obsahujícího glykosaminoglykany. V souladu s tím bylo vystavení podmíněně imortalizovaných lidských endoteliálních buněk peroxidu vodíku spojeno se zvýšenými hladinami radioaktivně značených frakcí glykosaminoglykanů v buněčném supernatantu, jak bylo prokázáno kapalinovou chromatografií a imunofluorescenčními technikami [87]. Podobně je amplifikace oxidačního stresu spojena se stimulací exprese a aktivity MMP-2 a MMP-9, downregulací TIMP-1 a TIMP-3 a uvolňováním extracelulární doména syndekanu-1 z povrchu endoteliálních buněk [88].

Molekuly syndekanu a zejména syndekan-1 byly rozsáhle studovány v karcinogenezi pro své proangiogenní vlastnosti zprostředkované modulací signalizace VEGF-VEGFR-2 [89]. Imunofluorescenční barvení a koimunoprecipitační analýza glomerulárních kultur ukázala, že syndekan-1 se společně lokalizuje a interaguje s receptorem VEGFR (VEGFR)-2 v endoteliálních buňkách in vivo a in vitro, takže ve skutečnosti slouží jako e VEGFR koreceptor [90]. Zejména analýza westernovým přenosem zvířecích modelů s hypoxií indukovanou ischemickou AKI ukázala sníženou expresi syndekanu{11}} v glomerulárních endoteliálních buňkách, což bylo spojeno s aktivací kaspázou{12}} zprostředkované apoptózou endoteliálních buněk. Down-regulace syndekanu-1 v ischemických glomerulech zabránila klatrinem zprostředkované VEGF-dependentní endocytóze VEGFR-2 a v důsledku toho signalizaci VEGF, což vedlo k dysfunkci endoteliálních buněk a apoptóze [90]. VEGF signalizace, která je nezbytná pro ochranu mikrovaskulární strukturyledvinyje down-regulován při renálním IRI [91,92]. Nedávné důkazy z longitudinální studie příjemců transplantátu ledviny i zvířecích modelů ukázaly, že zvýšené hladiny rozpustné fms-like tyrosinkinázy 1 (sFlt-1), přirozeného cirkulujícího antagonisty VEGF, korelují se zmenšenou peritubulární kapilární oblastí po IRI stejně jako s vyšším rizikem opožděné funkce štěpu a rejekce štěpu, zhoršené funkce štěpu a úmrtí [93].

Vzhledem k tomu, že syndekan-1 vlastnost vázat růstové faktory a cytokiny, bylo by snadné pochopit současné důkazy spojující zvýšený epiteliální syndekan-1 v renálních aloštěpech s nižším intersticiálním zánětem, proteinurií a hladinami sérového kreatininu jako zlepšené přežití aloštěpu [83].

Přesto je třeba poznamenat, že dostupné důkazy týkající se zapojení složek glykokalyxu do patogeneze IRIledvinatransplantace zůstává kontroverzní a obecně není přímá. Nedávná data z biopsií ledvinového protokolu a také z experimentálního modelu transplantace ledvin u potkanů, kterým byly injikovány monoklonální potkaní anti-myší syndekan-1 protilátky, tedy naznačovaly velmi nízkou expresi syndekanu-1 ve vaskulárním endotelu. V souladu s tím autoři navrhují, že zvýšené hladiny plazmatického syndekanu-1 po poranění štěpu by měly být připsány upregulaci tubulárního syndekanu-1 a jeho částečnému štěpení sheddázami, jako jsou ADAM17 a MMP-9 [ 94]. Na druhé straně Lu a kol. pomocí imunohistochemické studie zjistil expresi syndekanu-1 hlavně v renální kortikomedulární junkci, která je nejzranitelnější zónou poškození IRI, a také na bazolaterální i luminální straně renálních tubulárních buněkledvinyz falešně operovaných a IRI myší. Přesto autoři poukazují na to, že navzdory absenci přímých důkazů spojujících syndekan-1 s renální endoteliální strukturou v jejich studii, je budoucí výzkum považován za nezbytný vzhledem k technickým potížím, kterým v současné době čelíme při vhodné studii glykokalyx, stejně jako důležité protektivní role endoteliální glykokalytické vrstvy u IRI [85]. Uznání, že cirkulující erytrocyty mohou přechodně pronikat endoteliálním glykokalyxem, což se odráží jako dynamický rozsah šířky sloupce erytrocytů, nám může umožnit nepřímo odhadnout rozměry glykokalyx. V souladu s tím, zobrazení v temném poli Microscan sidestream kortikální peritubulární mikrocirkulace lidských ledvinových štěpů odhalilo snížený dynamický rozsah šířky sloupce erytrocytů 5 minut po reperfuzi v ledvinách z DCD ve srovnání s ledvinami žijících dárců. Bylo by pro nás jednoduché interpretovat tuto skutečnost jako významnou ztrátu glykokalyxní vrstvy časně v průběhu renální ischemie a reperfuze po transplantaci ledviny [70].

5.2. Bližší kontrola heparan sulfátu a hyaluronanu

Předpokládá se, že HS části endoteliálního glykokalyxu mají klíčovou funkční pozici ve zdraví a nemoci, vzhledem k jejich potenciálu vázat velké množství proteinů, včetně endoteliální superoxiddismutázy a xanthinoxidázy, jakož i složek komplementové kaskády [95–98 ].

Bylo prokázáno, že heparansulfát obsahující proteoglykany renální endoteliální bazální membrány váže L-selektin a monocytový chemoatraktant protein (MCP)-1 a indukuje adhezi monocytů vledvinasouvisející IRI [99]. Podobně byla v biopsiích ledvinového štěpu bezprostředně po transplantaci identifikována zvýšená vazba MCP{1}} na proteoglykany HS náležející k bazálním membránám renálních peritubulárních kapilár [99]. Probíhající výzkum odhalí, zda HS části endoteliálního glykokalyxu vykazují podobné vlastnosti. Podobně nedostatek N-deacetylázy-N-sulfotransferázy-1 (Ndst1), enzymu modifikujícího HS, který katalyzuje konjugaci sulfátu na sacharidy, v ledvinovém aloštěpu koreloval se sníženou akutní rejekcí, nejpravděpodobněji díky interferenci s interakcí glykosaminoglykany a chemokiny [100]. Augmentovaná i nedostatečná sulfatace heparinových skupin v glykokalyxuledvinaštěpy byly spojeny s chronickou fibrózou a potenciálně zánětlivou degradací glykokalyx endoglykosidázou heparanázou [100,101].

Heparanáza je enzym, který štěpí glykosidickou vazbu v HS skupinách vázaných na glykokalyxové proteoglykany a také na ty, které se týkají proteinů extracelulární matrix [102]. Aktivita heparanázy je přísně regulována syndekanem-1 a naopak HS a heparanáza regulují vylučování syndekan-1 [103,104]. Má se za to, že heparanáza hraje klíčovou prozánětlivou a profibrotickou roli v různých chorobných procesech, včetně AKI a proteinurickéledvinaonemocnění, částečně v důsledku uvolnění řady růstových faktorů a cytokinů, které jsou normálně vázány na HS po jeho degradaci [105–107]. Heparanáza má tedy přímou roli v FGF-2 indukovaném EMT tubulárních buněk prostřednictvím syndekanem-1 zprostředkované fibroblastového růstového faktoru (FGF)-2 [106]. U příjemců renálního transplantátu jsou významně zvýšené hladiny heparanázy v moči spojeny s proteinurií i dysfunkcí štěpu [108]. Zvýšená exprese heparanázy nejen vaskulárním endotelem, ale také infiltrací CD4 plus a CD8 plus T buněk byla spojena s akutní buněčnou rejekcí u myších srdečních aloštěpů. Podobně zvýšené hladiny heparansulfátu v plazmě byly detekovány u příjemců transplantátu lidské ledviny před stanovením diagnózy odmítnutí renálního aloštěpu biopsií, což podporuje roli heparansulfátu jako časného markeru buněčné rejekce [109].

Imunofluorescenční barvení renální tkáně z myšího modelu, ve kterém byla IRI indukována bilaterálním sevřením renálních arterií, prokázalo upregulaci heparanázy v glomerulárních i tubulointersticiálních místech 72 hodin po reperfuzi [110]. Navíc u transgenních myší nadměrně exprimujících heparanázu, ale ne u myší divokého typu, IRI indukovala významnou up-regulaci markerů EMT, jako je alfa-aktin hladkého svalstva (-SMA) a vimentin [110]. Léčba inhibitorem heparanázy divokého typu (WT) a renálních tubulárních buněk umlčených heparanázou vystavených hypoxii a reoxygenaci neindukovala významné změny v expresi syndekanu-1. Nicméně je nutný další výzkum, aby se získal určitý a přímý důkaz týkající se souvislosti mezi upregulací heparanázy v prostředí IRI poledvinatransplantace, její produkty štěpení a klinické výsledky [110].

Experimentální důkazy naznačují, že heparanáza má klíčovou pozici v procesu náboru a aktivace makrofágů v reakci na IRI a konkrétně v profilu polarizace makrofágů M1 [111]. Makrofágy M1 exprimují prozánětlivé cytokiny jako IL-1b, IL-6 a TNF- a také indukují mechanismus EMT v renálních tubulárních buňkách. Kromě toho heparanáza zvyšuje expresi TLR v tubulárních epiteliálních buňkách, vaskulárních endoteliálních buňkách a v infiltrujících leukocytech během IRI ledvin, čímž vytváří pozitivní prozánětlivou zpětnou vazbu, která nakonec vede k apoptóze tubulárních buněk, imunitní aktivaci, odmítnutí štěpu a nakonec chronickému aloštěpu nefropatie [111]. Inhibice heparanázy in vivo i in vitro snižuje dráhy odezvy makrofágů M1 bez ovlivnění makrofágů M2 nebo exprese markerů M2, jako je argináza1 a makrofágový manózový receptor (MR). Markery M2 jsou spojeny s protizánětlivými a imunomodulačními reakcemi, stejně jako s podporou tkáňové opravy. To by se následně promítlo do zlepšených histologických obrazců a renálních funkcí, jak naznačují experimentální důkazy u myší podrobených IRI [111].

Podobně IRI indukuje dlouhodobou nadměrnou expresi heparanázy ledvinami po počátečním poškození, což je kompatibilní se vznikem chronické aloštěpové nefropatie uledvinatransplantace. Analýza genové exprese a imunofluorescenční barveníledvinatkáň z myší s jednostranně indukovanou renální IRI odhalila zesílenou expresi heparanázy v glomerulech a v intersticiálních buňkách dokonce 8 týdnů po výkonu unilaterálního sevření renální arterie [112]. To bylo spojeno se zvýšenou akumulací kolagenu, up-regulací MMP-2 a MMP-9, zvýšenou expresí genů TNF-, IL-1b a IL-6 jako vyšší nájemné a plazmatické hladiny malondialdehydu, produktu peroxidace lipidů [112]. Na druhou stranu podání Roneparstatu, inhibitoru heparanázy, všechny výše uvedené účinky zrušilo

Experimentální data ukazují, že IRI vledvinyje spojena se sníženou expresí endoteliálního NOS (eNOS) a současně se zvýšenou indukovatelnou NOS (iNOS) a expresí endotelinu{0}} renálním endotelem a zánětlivými buňkami [113–116]. Zdá se, že existuje úzký vztah mezi mediátory endoteliální dynamiky, jako je endotelin-1 a syntázy oxidu dusnatého (NOS) s heparanázou. V souladu s tím se zdá, že eNOS brání indukci heparanázy v modelu proteinuricledvinaonemocnění, zatímco inhibice heparanázy otupuje indukovatelnou produkci NOS (iNOS) a endotelinu-1 endotelem ledvin při IRI [113,114].

Jak již bylo popsáno dříve, hyaluronan je všudypřítomný glykosaminoglykan, který se netýká pouze extracelulární matrix, ale také endoteliálního glykokalyxu, i když tvoří méně než 20 procent jeho obsahu glykosaminoglykanů. Hyaluronan významně přispívá k tloušťce a zachování struktury endoteliálních glykokalyx. Reguluje mechanickou signální transdukci do endoteliálních buněk prostřednictvím spoluzprostředkované produkce NO a také endoteliální permeabilitu pro bílé krvinky a krevní destičky [117–119].

Zvířecí modely těžké renální IRI k jedinémuledvina, tedy simulující podmínky transplantace renálního aloštěpu, indikují sekvenční bifázickou indukci hyaluronansyntáz 1 a 2 v renální tkáni, která se projevuje přechodným zvýšením ukládání hyaluronanu o vysoké molekulové hmotnosti následované opožděnou akumulací hyaluronanových produktů nižší velikosti [120 ]. Zdá se, že fragmenty hyaluronanu s nízkou molekulovou hmotností se podílejí na zánětlivé kaskádě prostřednictvím aktivace toll-like receptoru -4 (TLR4) a -2 (TLR2), jakož i v genezi renální fibrózy [32,120]. Fragmenty hyaluronanu s nízkou molekulovou hmotností po interakci s CD44 hyaluronanovým receptorem způsobují zvýšenou tvorbu aktinových vláken v endoteliálních buňkách a narušení endoteliální bariéry, které je charakterizováno kapilárním balonováním, mesangiolýzou a ztrátou endoteliální fenestrace [117,121,122].

Inaktivace enzymu syntetizujícího hyaluronan, hyaluronan syntázy 2 v endoteliálních buňkách myší vedla k více než 50% ztrátě struktury glykokalyx ve srovnání s kontrolními myšmi, jak se odhaduje na základě pokrytí kationtovým feritinem, ačkoli zbytek složek glykokalyx nebyl ovlivněn [57]. .

Interakce hyaluronanu s jeho receptorem CD44 se podílí na patofyziologii IRI se stimulací náboru makrofágů indukcí exprese monocytárního chemoatraktantního proteinu-1 (MCP-1) ledvinovými tubulárními buňkami a také prostřednictvím podpora renální fibrózy prostřednictvím dráhy transformujícího růstového faktoru (TGF) [122–124]. U potkaních modelů IRI byla pozorována významná ektopická up-regulace exprese hyaluronansyntázy 2 kůrou ledvin spolu s akumulací kortikálního hyaluronanu až do desetinásobku jeho normálního množství [125].

I když je CD44 za normálních podmínek sotva exprimován v renální tkáni, je výrazně a rychle upregulován v infiltrujících bílých krvinkách, stejně jako v kapilárních endoteliálních buňkách a renálním tubulárním epitelu u postischemickýchledviny[126–129]. Dostupné experimentální důkazy ukazují, že adheze a migrace neutrofilů při IRI je zprostředkována interakcí membránově vázaných hyaluronanových skupin exprimovaných neutrofily s de novo exprimovaným CD44 na renálních endoteliálních buňkách [126].

Je třeba poznamenat, že existuje kontinuální prominentní exprese CD44 endoteliálními buňkami renálních aloštěpů jak za normálních podmínek, tak i při akutní rejekci, která jinak není u nativníchledviny[130]. Nedostatek hyaluronidáz, enzymů odpovědných za degradaci hyaluronanu, zhoršuje poškození ledvin v postischemickémledvina[131]. Farmakologická inhibice syntézy hyaluronanu při IRI je spojena s výrazným snížením obsahu hyaluronanu a exprese CD44 v renální tkáni, stejně jako zánětlivého infiltrátu v postischemické ledvině, což vede ke zlepšení renálních funkcí. [132]. Podobně nepřítomnost CD44 nebo jeho farmakologická inhibice vedou ke sníženému přílivu neutrofilů, atenuovanému poškození ledvin a zachování renálních funkcí po IRI [126].

Hyaluronanové části v endoteliálním glykokalyxu se také specificky vážou na Agiopoetin 1 prostřednictvím lektinového záhybu, což je vazba, která je nezbytným předpokladem pro vazbu Angiopoetinu 1 na glomerulární endotel přes jeho Tie2 receptor [57]. Angiopoetin 1 je angiogenní faktor vylučovaný množstvím buněk, včetně endoteliálních buněk, buněk hladkého svalstva cév a mezenchymálních buněk, které mají protizánětlivé i antiapoptotické vlastnosti. Po IRI se renální exprese Angiopoetinu1 začíná zvyšovat po 7 dnech a přetrvává po dobu nejméně 14 dnů po IRI, což naznačuje jeho roli v neoangiogenezi procesu opravy [133]. Experimentální modely renální IRI ukazují, že Angiopoetin{12}} podporuje mobilizaci a nábor endoteliálních progenitorových buněk vledviny, čímž se zmírňují účinky IRI [134]. Kromě toho podávání COMP-Ang1, upravené varianty angiopoetinu-1 myším s renálním IRI, snížilo infiltraci neutrofilů a makrofágů vledvinyzachovalou perfuzi renální tkáně a mikrovaskulární permeabilitu a také sníženou intersticiální fibrózu [135].

5.3. Nové poznatky: Sfingosin-1-Fosfátová signalizace v IRI a endoteliálním glykokalyxu

Sfingosin 1-fosfát (S1P) je sfingolipid s množstvím fyziologických rolí, zprostředkovaných hlavně interakcí s jeho pěti podtypy receptorů spojených s G-proteinem (S1PR1-S1PR5), které jsou rozdílně distribuovány ve specifických tkáně [136]. S1P působí jako intracelulární messenger regulující procesy, jako je buněčná proliferace a apoptóza, a také jako autokrinní a parakrinní činidlo. Hlavním nosičem S1P v plazmě je molekula HDL. Na pozadí IRI je S1P uvolňován řadou buněk, včetně krevních destiček, endoteliálních buněk a leukocytů, kde moduluje endoteliální permeabilitu a infiltraci imunitních buněk prostřednictvím svých signálních drah S1PR [15,136,137]. Ukázalo se, že samotný S1P a agonisté S1P hrají protektivní roli v různých modelech IRI, včetně IRI myokardu, plic a jater [138–140]. S1P uplatňuje své pleiotropní nefroprotektivní účinky vledvinaIRI prostřednictvím regulace endoteliální hemodynamiky, ochrany tubulárních epiteliálních buněk před apoptózou a především imunitní modulace [141–143]. Bylo prokázáno, že exprese S1PR v renálních endoteliálních buňkách vrcholí 3 hodiny po IRI [144]

Při ischemickém AKI vykazovaly myši s delecí endoteliálního S1P1R zvýšenou expresi prozánětlivých mediátorů, jako je ICAM-1, MCP-1 a TNF-, zhoršenou vaskulární permeabilitu a také závažnější vzory renální tubulární nekrózy a apoptózy ve srovnání s myšmi s normální expresí S1P [145,146]. Bylo navrženo, že ochranná role, kterou má endoteliální S1P1R proti ischemickému AKI, je alespoň částečně zprostředkována regulací exprese proteinu tepelného šoku (HSP) 27, který je dobře znám pro své cytoprotektivní funkce [145,146].

Existují podstatné důkazy podporující roli pro ochranu endoteliálního glykokalyx sfingolipidem S1P a následné udržení permeability endotelu, jakož i podporu obnovy glykokalyx po poranění [147,148]. Na modelu buněčné kultury endotelových buněk krysího tukového polštáře byl nejen potvrzen ochranný účinek plazmatických proteinů na strukturální stabilitu endoteliálního glykokalyxu, ale také bylo prokázáno, že tento účinek byl ve skutečnosti zprostředkován interakcí S1P vázanou na plazmatický protein s jeho receptorem S1P1 [147]. Aktivace a fosforylace receptoru S1P1 pomocí S1P tedy inhibuje aktivitu MMP-9 a MMP-13 pravděpodobně prostřednictvím drah závislých na Rac-1-. V důsledku toho je potlačeno uvolňování syndekan{15}} ektodomény, které se projevuje ztrátami chondroitinsulfátu a heparinsulfátu [147].

Je třeba poznamenat, že i v nepřítomnosti nosných proteinů S1P se zdá, že exogenní podávání S1P chrání glykokalyx před vylučováním [147]. Důkazy ze studií na buněčných kulturách dále naznačují, že sfingolipid S1P indukuje syntézu glykokalyxu prostřednictvím signální dráhy závislé na fosfatidylinositol -3 kináze (PI3K), a tak podporuje jeho zotavení po poranění. Signální osa PI3K-Akt je indukována několika mediátory v endoteliálních buňkách, včetně VEGF a S1P, a je klíčová pro regulaci aktivity eNOS i přežití a migraci endoteliálních buněk [149,150]. In vitro experimenty s degradací glykokalyx ukázaly, že exogenní podávání heparin sulfátu spolu s S1P obnovuje jak strukturu glykokalyx, tak mezerové spoje mezi endoteliálními buňkami [151].

Přidání sfingolipidu S1P do funkční krevní cévy vytvořené tkáňovým inženýrstvím zkonstruované lidskými endoteliálními buňkami a endoteliálními progenitorovými buňkami získanými z lidské pupečníkové krve na decelularizovaném skeletu lidské pupeční žíly vedlo ke zvýšené expresi syndekanu 1 na lidských endoteliálních buňkách, které byly doprovázeny oslabenými krevními destičkami adherence k endotelu [152]. Podobně endoteliální buňky lidské pupečníkové žíly vystavené šokovým podmínkám vykazovaly zvýšené vylučování syndekanu-1 a kyseliny hyaluronové, které se po podání plazmy obohacené sfingolipidem S1P snížilo [153].

Přesto se spojení mezi signalizací S1P a stavem glykokalyx během IRI opírá hlavně o experimentální data, která jsou někdy kontroverzní. Nedávné důkazy z krysího modelu srdeční IRI tedy ukázaly, že ačkoli IRI nepochybně zvýšilo uvolňování syndekanu-1 v koronárním výtoku, léčba S1P před rozvojem ischemie neměla žádný viditelný účinek na syndekan-1 vydání [154]. Přesto autoři studie naznačují, že koncentrace a načasování podávání S1P mohly ovlivnit výše uvedené výsledky.

6. Závěry

Endoteliální glykokalyx je jedinečné mikroprostředí a jeho integrita má klíčový význam pro funkci orgánů. Pokračující pokrok v pochopení komplexního dopadu IRI na endoteliální glykokalyx otevírá novou éru výzkumu v oblasti transplantace orgánů. Ačkoli nedávné pokroky v technologii umožňují vizualizaci endoteliálního glykokalyxu a propracovanou analýzu jeho složek, v současnosti dostupné důkazy se většinou opírají o experimentální data a ne vždy lze vyvodit jednoznačné závěry. Klinické studie hodnotící diagnostickou a prognostickou hodnotu markerů poškození endoteliálních glykokalyx buď v periferní cirkulaci nebo vledvinabiopsie aloštěpu jsou v budoucnu nanejvýš důležité. Kromě toho by budoucí výzkum měl vrhnout světlo na propletené patofyziologické dráhy, které jsou základem změn endoteliálního glykokalyxu v prostředíledvinatransplantace, což by bylo klíčové pro zkoumání potenciálních terapeutických cílů.

Příspěvky autora:AD, Přehled literatury, Psaní – Příprava původního návrhu, Recenze, úprava konečného rukopisu. VL, Návrh díla, Recenze literatury, Recenze, úprava konečného rukopisu. VK, Přehled literatury, Psaní – příprava původního návrhu. CP, Přehled literatury, Psaní – Recenze, úprava konečného rukopisu. MM, Koncepce práce – supervize, recenze, úprava konečného rukopisu. ED, Koncepce a design díla – Supervize – Kontrola, úprava konečného rukopisu. Všichni autoři schválili předloženou verzi rukopisu.

Financování:Tento přezkum neobdržel žádné externí financování.

Střet zájmů:Autoři neprohlašují žádný střet zájmů.

References

1. Schnuelle, P.; Lorenz, D.; Obchod, M.; Van Der Woude, FJ Vliv transplantace ledvin kadaverózních na přežití v konečném stadiu selhání ledvin: Důkaz pro snížení rizika mortality ve srovnání s hemodialýzou během dlouhodobého sledování. J. Am. Soc. Nephrol. 1998, 9, 2135.

2. Meier-Kriesche, HU; Shold, JD; Srinivas, TR; Reed, A.; Kaplan, B.ledvinytransplantace zastavuje progresi kardiovaskulárního onemocnění u pacientů s terminálním onemocněním ledvin. Dopoledne. J. Transplant. 2004, 4, 1662–1668.

3. Meier-Kriesche, HU; Shold, JD; Srinivas, TR; Kaplan, B. Nedostatek zlepšení přežití renálního aloštěpu navzdory výraznému poklesu míry akutní rejekce v poslední době. Dopoledne. J. Transplant. 2004, 4, 378–383.

4. Hart, A.; Smith, JM; Skeans, MA; Gustafson, SK; Wilk, AR; Robinson, A.; Wainright, JL; Haynes, ČR; Snyder, JJ; Kasiske, BL; a kol. Výroční zpráva OPTN/SRTR za rok 2016:ledviny. Dopoledne. J. Transplant. 2018, 18 (Suppl. 1), 18–113.

5. Humar, A.; Durand, B.; Gillingham, K.; Payne, WD; Sutherland, DE; Matas, AJ Žijící nepříbuzní dárci vledvinatransplantace: Lepší dlouhodobé výsledky než u ne-HLA-identických žijících příbuzných dárců? Transplantace 2000, 69, 1942–1945.

6. Redfield, RR; Scalea, JR; Zens, TJ; Mandelbrot, DA; Leverson, G.; Kaufman, DB; Djamali, A. Způsob senzibilizace a jeho vliv na výsledky aloštěpu u vysoce senzibilizovanýchledvinapříjemců transplantací. Nephrol. Vytáčení. Transplantace. 2016, 31, 1746–1753.

7. Tullius, SG; Volk, HD; Neuhaus, P. Transplantace orgánů od okrajových dárců. Transplantace 2001, 72, 1341–1349.

8. Giral, M.; Foucher, Y.; Karam, G.; Labrune, Y.; Kessler, M.; Hurault de Ligny, B.; Büchler, M.; Bayle, F.; Meyer, C.; Trehet, N.ledvinya inkompatibilita hmotnosti příjemce snižuje dlouhodobé přežití štěpu. J. Am. Soc. Nephrol. 2010, 21, 1022–1029.

9. Butler, JA; Roderick, P.; Mullee, M.; Mason, JC; Peveler, RC Frekvence a dopad nonadherence k imunosupresivům po transplantaci ledviny: Systematický přehled. Transplantace 2004, 77, 769–776.

10. Mange, KC; Cizman, B.; Joffe, M.; Feldman, HI Arteriální hypertenze a přežití renálního aloštěpu. JAMA. 2000, 283, 633-638.

11. Lu, CY; Penfield, JG; Kielar, ML; Vazquez, MA; Jeyarajah, DR Hypotéza: Je odmítnutí renálního aloštěpu zahájeno reakcí na zranění utrpěné během procesu transplantace?ledvinyInt. 1999, 55, 2157–2168.

12. Saat, TC; van den Akker, EK; IJzermans, JNM; Dor, FJMF; de Bruin, RWF Zlepšení výsledkuledvinatransplantace zlepšením renálního ischemicko-reperfuzního poškození: ztraceno v překladu? J. Transl. Med. 2016, 14, 20.

13. Ponticelli, C. Ischemicko-reperfuzní poranění: Hlavní protagonista vledvinatransplantace. Nephrol. Vytáčení. Transplantace. 2014, 29, 1134–1140.

14. Salvadori, M.; Rosso, G.; Bertoni, E. Aktualizace ischemicko-reperfuzního poškození vledvinatransplantace: Patogeneze a léčba. World J. Transplant. 2015, 5, 52–67.

15. Smith, SF; Hosgood, SA; Nicholson, ML Ischemicko-reperfuzní poškození při transplantaci ledvin: 3 klíčové signální dráhy v tubulárních epiteliálních buňkách.ledvinyInt. 2019, 95, 50–56.

16. Dane, MJC; van den Berg, BM; Lee, DH; Boels, MGS; Tiemeier, GS; Avramut, MC; van Zonneveld, AJ; van der Vlag, J.; Vink, H.; Rabelink, TJ Mikroskopický pohled na renální endoteliální glykokalyx. Dopoledne. J. Physiol Renální Physiol. 2015, 308, F956–F966.

17. Kako, K.; Kato, M.; Matsuoka, T.; Mustapha, A. Deprese membránově vázané aktivity Na plus -K plus -ATPázy indukované volnými radikály a ischemiíledvina. Dopoledne. J. Physiol. 1988, 254, C330-C337.

18. Kajiwara, I.; Kawamura, K.; Hiratsuka, Y.; Takebayashi, S. Vliv lapačů volných kyslíkových radikálů na snížení membránově vázané aktivity Na(plus)-K(plus)-ATPázy vyvolané ischemickým/reperfuzním poškozením u psaledvina. Nephron, 72, 637–643.

19. Yamashita, J.; Kita, S.; Iwamoto, T.; Ogata, M.; Takaoka, M.; Tazawa, N.; Nishikawa, M.; Wakimoto, K.; Shigekawa, M.; Komuro, I.; a kol. Útlum ischemií/reperfuzí indukovaného poškození ledvin u myší s deficitem Na plus/Ca2 plus výměníku. Pharmacol Exp. Ther. 2003, 304, 284–293.

20. Maenpaa, CJ; Hanba, BD; Van Why, SK; Johnson, CP; Nilakantan, V. Oxidantem zprostředkovaná apoptóza v proximálních tubulárních epiteliálních buňkách po vyčerpání a zotavení ATP. Volný Radic. Biol. Med. 2008, 44, 518–526.