Účinky Ludwigia Octovalvis proti stárnutí na myši Drosophila Melanogaster a SAMP8, část 2

Chemické složení LOE

K identifikaci mechanismů, kterými LOE indukuje prodloužení životnosti much, bylo chemické složení LOE analyzováno pomocí GC-MS. V celkovém iontovém chromatogramu (obr. 4) bylo pozorováno sedmnáct hlavních píků, které byly identifikovány jako známé sloučeniny uvedené v tabulce 2.

Glykosid cistanche může také zvýšit aktivitu SOD v srdeční a jaterní tkáni a významně snížit obsah lipofuscinu a MDA v každé tkáni, účinně zachycovat různé reaktivní kyslíkové radikály (OH-, H₂O₂ atd.) a chránit před způsobeným poškozením DNA. OH-radikály. Cystanche fenylethanoidové glykosidy mají silnou schopnost vychytávání volných radikálů, vyšší redukční schopnost než vitamín C, zlepšují aktivitu SOD v suspenzi spermií, snižují obsah MDA a mají určitý ochranný účinek na funkci membrány spermií. Polysacharidy Cistanche mohou zvýšit aktivitu SOD a GSH-Px v erytrocytech a plicních tkáních experimentálně senescentních myší způsobených D-galaktózou, stejně jako snížit obsah MDA a kolagenu v plicích a plazmě a zvýšit obsah elastinu. dobrý čisticí účinek na DPPH, prodlužuje dobu hypoxie u senescentních myší, zlepšuje aktivitu SOD v séru a oddaluje fyziologickou degeneraci plic u experimentálně senescentních myší Experimenty prokázaly, že Cistanche má dobrou antioxidační schopnost s buněčnou morfologickou degenerací a má potenciál být lékem k prevenci a léčbě nemocí stárnutí kůže. Zároveň má echinakosid v Cistanche významnou schopnost vychytávat volné radikály DPPH a dokáže vychytávat reaktivní formy kyslíku, bránit volnými radikály indukované degradaci kolagenu a má také dobrý opravný účinek na poškození aniontů volnými radikály thyminu.

Klikněte na Sklad chemikálií Cistanche

【Další informace:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】

LOE zmírňuje akutní oxidační poškození

Protože oxidační stres je nejoblíbenější teorií pro vysvětlení toho, jak dochází ke stárnutí na molekulární úrovni, rozhodli jsme se prozkoumat aktivitu LOE pohlcovat radikály DPPH jako kritický indikátor jeho antioxidační kapacity. V našich testech měl LOE silnou aktivitu vychytávání radikálů DPPH (IC50 3,15 ug/ml), mezi aktivitou kyseliny askorbové (IC50 1,31 ug/ml) a resveratrolu ( IC50 7.86 ug/ml), které byly použity jako kontroly (obr. 5a). Avšak aktivity vychytávání DPPH radikálů dvou nejhojnějších sloučenin identifikovaných v LOE, - sitosterolu a skvalenu, byly detekovány pouze na minimálních úrovních (obr. 5a). Antioxidační kapacitu LOE lze přičíst jeho složení bohatému na antioxidanty, protože v našem přípravku LOE byl přítomen vysoký obsah polyfenolů (146,3 ± 3,1 mg ekvivalentu kyseliny gallové na g suché hmotnosti; tabulka 3) a flavonoidy byly hlavní složkou mezi polyfenoly (90,2±2,6 mg ekvivalentu rutinu na g sušiny).

Proto jsme dále testovali antioxidační vlastnosti LOE vystavením 10-denní samice CS mušek ošetřených LOE působením parakvatu (methyl viologen, chemikálie, o které je známo, že vytváří reaktivní formy kyslíku). Zjistili jsme, že mouchy, které dostávaly suplementaci LOE v potravě po dobu 10 dnů, vykazovaly zvýšenou odolnost vůči letalitě vyvolané paraquatem (obr. 5b). Tento výsledek byl dále potvrzen analýzou úrovní oxidačního poškození u much, které byly ošetřeny paraquatem po dobu 12 hodin. Jako indikátor oxidačního poškození jsme použili 4-hydroxynonenal (HNE), proteinový adukt generovaný z produktů oxidace lipidů. Ačkoli suplementace LOE neprokázala žádný účinek na bazální hladinu HNE u 10-denních much, významně snížila akumulaci HNE u much ošetřených 20 mM paraquatem (obr. 5c).

-Sitosterol je hlavní složkou LOE, která přispívá k prodloužení životnosti

Dále jsme zkoumali účinky -sitosterolu a skvalenu na životnost much. Je zajímavé, že - sitosterol indukoval prodloužení životnosti u samic mušek CS (obr. 6a) způsobem závislým na dávce. Tento účinek na dlouhověkost však nebyl pozorován u samic mušek CS, které dostávaly stejné dávky skvalenu (obr. 6b).

Ukázalo se, že dráha AMPK zprostředkovává prodloužení životnosti DR u C. elegans (Apfeld et al. 2004; Greer et al. 2007) i u much (Stenesen et al. 2013). Zkoumali jsme proto, zda LOE a -sitosterol mohou regulovat délku života modulací dráhy AMPK. Pomocí buněk Drosophila S2 jsme zjistili, že LOE a -sitosterol mohou významně zvýšit fosforylaci AMPK (obr. 6c). Podobná pozorování byla provedena, když byly buňky udržovány za podmínek DR (0,5x médium) (obr. 6c). Pokud měl AMPK hlavní roli v prodlužování délky života u much vyvolané -sitosterolem, ztráta AMPK by měla oslabit účinek -sitosterolu na dlouhověkost. Testovali jsme tuto hypotézu potlačením exprese AMPK, konkrétně v tukových tělech dospělých much (obr. S1). Tukové tělo drozofily je muší ekvivalent savčích jater a tukové tkáně a je odpovědné za metabolismus. Nadměrná exprese AMPK nebo knockdown v buňkách tukového těla byly spojeny se zvýšenou nebo sníženou životností much (Stenesen et al. 2013). Zkombinovali jsme alelu UAS-AMPK.RNAi s RU486- indukovatelným GeneSwitch GAL4 pro tukové tělo (S106-GAL4). Dospělé mouchy nesoucí vhodné genetické prvky byly náhodně rozděleny do potravin obsahujících RU486 (aktivační činidlo pro ovladače GeneSwitch-Gal4) a/nebo sitosterol. Zjistili jsme, že prodloužení životnosti vyvolané -sitosterolem nebylo pozorováno, když byla exprese AMPK sražena specificky v tukovém těle dospělých much (obr. 6d). Tyto údaje společně naznačují, že sitosterol odvozený od LOE může modulovat délku života, alespoň částečně, prostřednictvím aktivace AMPK v tukovém těle dospělých much.

Diskuse

Ovocné mušky mají relativně krátkou životnost, která se pohybuje od několika týdnů do několika měsíců, v závislosti na nutričních a jiných podmínkách prostředí. Například pozměněný příjem kalorií, podmínky páření a okolní teplota mohou významně změnit délku života mouchy (Bauer et al. 2004). V dobře definovaných podmínkách jsme byli schopni prokázat, že suplementace LOE může prodloužit životnost much bez zjevného negativního kompromisu.

Vývoj DR mimetik se stal nově vznikajícím oborem výzkumu proti stárnutí. 2-Deoxyglukóza, inhibitor glykolýzy (Lane et al. 1998), a metformin, který stimuluje AMPK (Anisimov et al. 2003), jsou dvě molekuly, které jsou v současnosti zkoumány jako mimetika DR. Nicméně dlouhodobé podávání 2- deoxyglukózy nebo metforminu může vyvolat nežádoucí vedlejší účinky, včetně srdečního selhání a laktátové acidózy, což z nich činí nepravděpodobné kandidáty pro použití jako mimetika DR (Ingram et al. 2004; Sinclair 2005). Mouchy, které dostávaly metformin, také nevykazovaly žádný příznivý účinek na prodloužení délky života (Slack et al. 2012). Alternativní možností tedy mohou být polyfenoly rostlinného původu, jako je resveratrol. Bylo prokázáno, že resveratrol prodlužuje životnost kvasinek, červů a much napodobováním DR cestou závislou na Sir{10}} (Wood et al. 2004). Přestože resveratrol neprodloužil životnost myší krmených ad libitum, zlepšil zdraví a přežití obézních myší krmených vysoce kalorickou stravou (Baur et al. 2006; Pearson et al. 2008). Tyto výsledky naznačují, že resveratrol může zvýšit odolnost vůči stresu vyvolanému vysokými kaloriemi, což je v souladu s výsledky pozorovanými ve studiích prokazujících, že resveratrol poskytuje buněčnou ochranu před stresy včetně oxidativního poškození (Araki et al. 2004) a gama záření (Howitz et al. 2003).

Naše data naznačují, že LOE může částečně působit jako DR mimetikum. Zjistili jsme, že LOE významně prodloužila životnost much krmených vysoce kalorickou stravou, ale nevykazovala žádný aditivní účinek v podmínkách DR (obr. 1). LOE také zmírnil kognitivní pokles související s věkem a udržoval jej na úrovni podobné úrovni pozorované u much v podmínkách DR. Ukázali jsme, že tyto účinky LOE podobné DR nebyly způsobeny nižší spotřebou potravy vyvolanou LOE (obr. 2 a 3). U much ošetřených LOE nebyly pozorovány ani další typické fyziologické změny spojené s DR, jako je snížená plodnost samic nebo zvýšená motorická aktivita (obr. 2). Bylo prokázáno, že DR zvyšuje mitochondriální aktivitu (Nisoli et al. 2005; Lopez-Lluch et al. 2006), ale zpomaluje nebo snižuje oxidační stres a poškození u much (Zheng et al. 2005), myší (Qiu et al. 2010 ), opice (Zainal et al. 2000) a ženy (Buchowski et al. 2012). Tento pozorovaný efekt byl navržen jako efekt "mitohormézy", hypotéza, že zvýšená mitochondriální aktivita a produkce ROS mohou spustit program vnitřní obrany, který má za následek zlepšenou odolnost vůči stresu a možná prodloužení životnosti (Schulz et al. 2007). Zjistili jsme, že LOE má silnou aktivitu vychytávání radikálů DPPH a že snižuje oxidační poškození a letalitu mušek vyvolané paraquatem (obr. 5), což dále podporuje naši hypotézu, že LOE může působit, alespoň částečně, jako mimetikum DR.

Naše chemické analýzy potvrdily, že LOE byl bohatým zdrojem antioxidantů, včetně polyfenolických sloučenin, fytosterolů a skvalenu (obr. 4 a tabulka 2). Bylo hlášeno, že -sitosterol může up-regulovat expresi proteinů a antioxidační aktivitu mangan superoxiddismutázy prostřednictvím estrogen/fosfatidylinositol 3-kinázy v makrofázích (Vivancos a Moreno 2005). Bylo také prokázáno, že suplementace skvalenem ve stravě zmírňuje oxidační poškození související s věkem a udržuje energetický stav jaterních mitochondrií u starých potkanů ​​(Buddhan et al. 2007). Ačkoli -sitosterol a skvalen byly dvě nejhojnější sloučeniny identifikované v LOE analýzami GC-MS, ani jedna nevykázala v našem testovacím systému zjevnou aktivitu vychytávání radikálů DPPH (obr. 5). Je možné, že antioxidační aktivity LOE by mohly zahrnovat lapače volných radikálů, jako jsou polyfenolické sloučeniny, zatímco sitosterol a skvalen by mohly působit jinými cestami, jak bylo diskutováno výše. Ukázalo se, že další tradiční a integrativní lékařské postupy, jako je R. rosea a C. longa, prodlužují životnost much prostřednictvím cest spojených s antioxidací a regulací známých genů souvisejících se stárnutím (Lee et al. 2010; Schriner et al. 2013, 2009). Rostlinné extrakty však obvykle obsahují mnoho sloučenin, které k identifikaci vyžadují systematické biochemické analýzy. Mechanistická interpretace je proto obtížná bez identifikace čisté sloučeniny. V této studii jsme identifikovali -sitosterol jako hlavní složku, která přispěla k aktivitě LOE prodlužující životnost. Naše data naznačují, že prodloužení životnosti vyvolané sitosterolem vyžaduje aktivaci AMPK v tukovém těle dospělých much. To je do značné míry v souladu s předchozími zprávami, které prokazují, že AMPK je hlavním senzorem živin a zprostředkovává prodloužení životnosti DR u C. elegans (Apfeld et al. 2004; Greer et al. 2007) a mouch (Stenesen et al. 2013).

Je žádoucí, aby intervence zaměřené na dlouhověkost nejen prodlužovaly délku života, ale také oddalovaly nástup a morbiditu nemocí souvisejících s věkem, to znamená, že prodlužovaly jak délku života, tak délku zdraví. Prekognitivní účinky LOE, které popisujeme u much a myší SAMP8, mohou být také velmi zajímavé pro oblast stárnutí. Ukázalo se, že myši SAMP8 vykazují deficity v uchovávání paměti související s věkem od 2 měsíců věku, když byly testovány na úkolech pasivního vyhýbání se (Miyamoto et al. 1986). V testu vyhýbání se šoku do nohou myši SAMP8 také vykazují významné zhoršení akvizice a zachování paměti od 6 do 9 měsíců věku ve srovnání s mladými myšmi SAMP8 (Flood a Morley 1993). Pomocí nového rozpoznávání objektů a úloh s bludištěm ve zvýšeném T jsme mohli pozorovat jasné nedostatky v uchovávání paměti u 3- a 8-měsíců starých myší SAMP8, ačkoli během období akvizice nebyly žádné rozdíly úkol vyvýšeného T bludiště (obr. 3). Tato pozorování jsou dalším důkazem toho, že myši SAMP8 vykazují časný nástup kognitivních deficitů souvisejících s věkem a že poškození se s věkem zhoršuje. Dlouhodobá léčba LOE (více než 5 měsíců) u myší SAMP8 však zmírnila věkem podmíněný pokles retence paměti bez ovlivnění fyzické aktivity, příjmu potravy, spotřeby vody nebo tělesné hmotnosti (obr. 3). U myší, které dostávaly 5měsíční léčbu LOE, jsme nepozorovali žádné vedlejší účinky (nepublikovaná pozorování). Tato zjištění jsou do značné míry v souladu s nedávnou zprávou prokazující, že opakované podávání L. octovalvis po dobu 28 dnů myším (800 mg/kg≈2 400 ug/den vs. 400 ug/den použité v naší studii) nezpůsobilo letalitu ani toxikologické účinky (Kadum Yakob et al. 2012).

Stručně řečeno, identifikovali jsme LOE jako nový zásah proti stárnutí, který je schopen prodloužit životnost much a zmírnit kognitivní pokles související s věkem jak u much, tak u myší SAMP8. GC-MS a další biochemické analýzy naznačují, že LOE může uplatňovat své účinky proti stárnutí zmírněním oxidačního poškození a aktivací drah souvisejících s AMPK.

Poděkování Rádi bychom poděkovali Chuan-Hao Lai a Hao-Wei Wangovi (Hsiehyu Biotech Company Ltd.) a Shang-Tse Lee (National Taiwan University) za jejich technickou pomoc. Rádi bychom poděkovali společnosti Fly Core na Tchaj-wanu za muškařské zásoby a činidla. Pei-Yu Wang je částečně podporován Národní vědeckou radou (NSC 98-2320-B-004-003-MY2 a NSC 100- 2311-B-002-017-MY3), Tchaj-wan.

Reference

1. Alcedo J, Kenyon C (2004) Regulace dlouhověkosti C. elegans specifickými chuťovými a čichovými neurony. Neuron 41(1):45–55

2. Anisimov V, Semenchenko A, Yashin A (2003) Inzulin a dlouhověkost: antidiabetické biguanidy jako geroprotektory. Biogerontology 4 (5): 297–307

3. Apfeld J, O'Connor G, McDonagh T, DiStefano PS, Curtis R (2004) AMP-aktivovaná proteinkináza AAK-2 spojuje energetické hladiny a signály podobné inzulínu s délkou života u C. elegans. Genes Dev 18(24):3004–3009

4. Araki T, Sasaki Y, Milbrandt J (2004) Zvýšená jaderná biosyntéza NAD a aktivace SIRT1 brání axonální degeneraci. Science 305(5686):1010–1013

5. Bauer JH, Goupil S, Garber GB, Helfand SL (2004) Zrychlený test pro identifikaci intervencí prodlužujících životnost u Drosophila melanogaster. Proč Natl Acad Sci USA 101(35):12980–12985

6. Baur JA, Pearson KJ, Price NL, Jamieson HA, Lerin C, Kalra A, Prabhu VV, Allard JS, Lopez-Lluch G, Lewis K, Pistell PJ, Poosala S, Becker KG, Boss O, Gwinn D, Wang M, Ramaswamy S, Fishbein KW, Spencer RG, Lakatta EG, Le Couteur D, Shaw RJ, Navas P, Puigserver P, Ingram DK, de Cabo R, Sinclair DA (2006) Resveratrol zlepšuje zdraví a přežití myší na vysoké úrovni kalorická dieta. Příroda 444(7117): 337–342

7. Bishop NA, Guarente L (2007) Dva neurony zprostředkovávají dlouhověkost vyvolanou dietou u C. elegans. Příroda 447(7144): 545–549

8. Bonkowski MS, Rocha JS, Masternak MM, Al Regaiey KA, Bartke A (2006) Cílené narušení receptoru růstového hormonu interferuje s prospěšnými účinky omezení kalorií. Proč Natl Acad Sci USA 103(20):7901–7905

9. Boyd O, Weng P, Sun X, Alberico T, Laslo M, Obenland DM, Kern B, Zou S (2011) Nektarinka podporuje dlouhověkost u Drosophila melanogaster. Free Radic Biol Med 50(11):1669–1678

10. Brand-Williams W, Cuvelier ME, Berset C (1995) Použití metody volných radikálů k hodnocení antioxidační aktivity. LWT Food Sci Technol 28(1):25–30

11. Buchowski MS, Hongu N, Acra S, Wang L, Warolin J, Roberts LJ II (2012) Vliv mírného kalorického omezení na oxidační stres u žen, randomizovaná studie. PLoS ONE 7(10):e47079

12. Buddhan S, Sivakumar R, Dhandapani N, Ganesan B, Anandan R (2007) Ochranný účinek potravinové skvalenové suplementace na mitochondriální funkci v játrech starých potkanů. Prostaglandiny Leukot Essent Fatty Acids 76(6):349–355

13. Chan YC, Hosoda K, Tsai CJ, Yamamoto S, Wang MF (2006) Příznivé účinky čaje na snížení kognitivních deficitů a morfologických změn mozku u myší s akcelerací stárnutí. J Nutr Sci Vitaminol (Tokio) 52(4):266–273

14. Chang CI, Kuo CC, Chang JY, Kuo YH (2004) Tři nové triterpeny oleananového typu z Ludwigia octovalvis s cytotoxickou aktivitou proti dvěma lidským rakovinným buněčným liniím. J Nat Prod 67(1):91-93

15. Chen CP, Lin CC, Namba T (1989) Screening tchajwanských surových léků na antibakteriální aktivitu proti Streptococcus mutans. J Ethnopharmacol 27(3):285–295

16. Choi JH, Kim D (2000) Účinky věku a dietního omezení na délku života a oxidační stres myší SAMP8 s poruchami učení a paměti. J Nutr Health Ageing 4(3):182–186

17. Chou HJ, Lai DM, Huang CW, McLennan IS, Wang HD, Wang PY (2013) BMP4 je periferně odvozený faktor pro motorické neurony a zeslabuje glutamátem indukovanou excitotoxicitu in vitro. PLoS ONE 8(3):e58441

18. Colman RJ, Anderson RM, Johnson SC, Kastman EK, Kosmatka KJ, Beasley TM, Allison DB, Cruzen C, Simmons HA, Kemnitz JW, Weindruch R (2009) Kalorická restrikce oddaluje nástup onemocnění a mortalitu u opic rhesus. Science 325(5937):201–204

19. Cruz-Morales SE, García-Saldívar NL, González-López MR, Castillo-Roberto G, Monroy J, Domínguez R (2008) Akutní restrikce zhoršuje paměť ve zvýšeném T-bludišti (ETM) a modifikuje serotonergní aktivitu v dorzolaterální striatum. Behav Brain Res 195 (1): 187–191

20. De-Mello N, Carobrez AP (2002) Zvýšené T-labyrint jako zvířecí model paměti: účinky skopolaminu. Behav Pharmacol 13(2):139–148

21. Flatt T, Min KJ, D'Alterio C, Villa-Cuesta E, Cumbers J, Lehmann R, Jones DL, Tatar M (2008) Drosophila zárodečná modulace inzulinové signalizace a délky života. Proč Natl Acad Sci USA 105(17):6368–6373

22. Flood JF, Morley JE (1992) Časný nástup věkem podmíněného poškození averzivního a apetitivního učení u myši SAM-P/8. J Gerontol 47(2): B52–B59

23. Flood JF, Morley JE (1993) Změny související s věkem v získávání a udržení otřesů nohou u myši s akcelerovanou stárnutím (SAM). Neurobiol Aging 14(2):153–157

24. Galleano M, Verstraeten SV, Oteiza PI, Fraga CG (2010) Antioxidační účinky flavonoidů: termodynamická a kinetická analýza. Arch Biochem Biophys 501 (1): 23–30

25. Greer EL, Dowlatshahi D, Banko MR, Villen J, Hoang K, Blanchard D, Gygi SP, Brunet A (2007) Cesta AMPKFOXO zprostředkovává dlouhověkost vyvolanou novou metodou dietního omezení u C. elegans. Curr Biol 17(19):1646–1656

26. Howitz KT, Bitterman KJ, Cohen HY, Lamming DW, Lavu S, Wood JG, Zipkin RE, Chung P, Kisielewski A, Zhang LL, Scherer B, Sinclair DA (2003) Malé molekulové aktivátory sirtuinů prodlužují životnost Saccharomyces cerevisiae. Nature 425(6954):191–196

27. Hubbard BP, Gomes AP, Dai H, Li J, Case AW, Considine T, Riera TV, Lee JE, SY E, Lamming DW, Pentelute BL, Schuman ER, Stevens LA, Ling AJY, Armor SM, Michan S, Zhao H, Jiang Y, Sweitzer SM, Blum CA, Disch JS, Ng PY, Howitz KT, Rolo AP, Hamuro Y, Moss J, Perni RB, Ellis JL, Vlasuk GP, Sinclair DA (2013) Důkaz pro společný mechanismus Regulace SIRT1 pomocí alosterických aktivátorů. Science 339(6124):1216–1219

28. Ingram DK, Anson RM, De Cabo R, Mamczarz J, Zhu MIN, Mattison J, Lane MA, Roth GS (2004) Vývoj mimetik s omezením kalorií jako strategie pro dlouhověkost. Ann NY Acad Sci 1019 (1): 412–423

29. Kadum Yakob H, Manaf Uyub A, Fariza Sulaiman S (2012) Toxikologické hodnocení 80procentního methanolového extraktu Ludwigia octovalvis (Jacq.) PH Havraních listů (Onagraceae) u myší BALB/c. J Ethnopharmacol 142(3):663–668

30. Kaeberlein M, Powers RW, Steffen KK, Westman EA, Hu D, Dang N, Kerr EO, ​​Kirkland KT, Fields S, Kennedy BK (2005) Regulace replikativní životnosti kvasinek pomocí TOR a Sch9 v reakci na živiny. Science 310(5751):1193–1196

31. Lane MA, Ingram DK, Roth GS (1998) 2-Krmení deoxy-D-glukózou u potkanů ​​napodobuje fyziologické účinky omezení kalorií. J Anti Aging Med 1(4):327–337

32. Lee KS, Lee BS, Semnani S, Avanesian A, Um CY, Jeon HJ, Seong KM, Yu K, Min KJ, Jafari M (2010) Kurkumin prodlužuje délku života, zlepšuje zdraví a moduluje projevy spojené s věkem geny stárnutí u Drosophila melanogaster. Omlazení Res 13(5):561–570

33. Lin SJ, Defossez PA, Guarente L (2000) Požadavek NAD a SIR2 pro prodloužení životnosti omezením kalorií u Saccharomyces cerevisiae. Science 289(5487):2126–2128

34. Lin SJ, Ford E, Haigis M, Liszt G, Guarente L (2004) Omezení kalorií prodlužuje životnost kvasinek snížením hladiny NADH. Genes Dev 18(1):12–16

35. Lopez-Lluch G, Hunt N, Jones B, Zhu M, Jamieson H, Hilmer S, Cascajo MV, Allard J, Ingram DK, Navas P, de Cabo R (2006) Omezení kalorií indukuje mitochondriální biogenezi a bioenergetickou účinnost. Proč Natl Acad Sci USA 103 (6): 1768–1773

36. Maia CSF, Ferreira VMM, Diniz JSV, Carneiro FP, de Sousa JB, da Costa ET, Tomaz C (2010) Akvizice vyhýbání se inhibici u dospělých potkanů ​​vystavených kombinaci etanolu a methylrtuti během vývoje centrálního nervového systému. Behav Brain Res 211 (2): 191–197

37. Mattison JA, Roth GS, Beasley TM, Tilmont EM, Handy AM, Herbert RL, Longo DL, Allison DB, Young JE, Bryant M, Barnard D, Ward WF, Qi W, Ingram DK, de Cabo R (2012) Vliv kalorického omezení na zdraví a přežití u opic rhesus ze studie NIA. Příroda 489(7415):318–321

38. Miyamoto M, Kiyota Y, Yamazaki N, Nagaoka A, Matsuo T, Nagawa Y, Takeda T (1986) Změny v učení a paměti související s věkem u myši s akcelerovanou stárnutím (SAM). Physiol Behav 38 (3): 399–406

39. Nisoli E, Tonello C, Cardile A, Cozzi V, Bracale R, Tedesco L, Falcone S, Valerio A, Cantoni O, Clementi E, Moncada S, Carruba MO (2005) Omezení kalorií podporuje mitochondriální biogenezi indukcí exprese eNOS. Science 310(5746):314–317

40. Pearson KJ, Baur JA, Lewis KN, Peshkin L, Price NL, Labinskyy N, Swindell WR, Kamara D, Minor RK, Perez E, Jamieson HA, Zhang Y, Dunn SR, Sharma K, Pleshko N, Woollett LA, Csiszar A, Ikeno Y, Le Couteur D, Elliott PJ, Becker KG, Navas P, Ingram DK, Wolf NS, Ungvari Z, Sinclair DA, de Cabo R (2008) Resveratrol oddaluje zhoršení související s věkem a napodobuje transkripční aspekty dietního omezení bez prodloužení životnosti. Cell Metab 8(2):157–168

41. Peng C, Chan HYE, Huang Y, Yu H, Chen ZY (2011) Jablečné polyfenoly prodlužují střední životnost Drosophila melanogaster. J Agric Food Chem 59(5):2097–2106

42. Qiu X, Brown K, Hirschey MD, Verdin E, Chen D (2010) Omezení kalorií snižuje oxidační stres aktivací SOD2 zprostředkovanou SIRT3-. Cell Metab 12(6):662–667

43. Santos P, Bittencourt AS, Schenberg LC, Carobrez AP (2006) Hodnocení úzkosti a paměťových účinků ligandů místa NMDA/glycin-B injikovaných do dorzální periakvaduktální šedé hmoty a colliculus superior potkanů ​​ve zvýšeném T-labyrintu. Neuropharmacology 51 (2): 203–212

44. Schriner SE, Abrahamyan A, Avanessian A, Bussel I, Maler S, Gazarian M, Holmbeck MA, Jafari M (2009) Snížené hladiny mitochondriálního superoxidu a zvýšená ochrana proti parakvatu u Drosophila melanogaster doplněné o Rhodiola rosea. Free Radic Res 43(9):836–843

45. Schriner SE, Lee K, Truong S, Salvadora KT, Maler S, Nam A, Lee T, Jafari M (2013) Prodloužení životnosti Drosophila Rhodiola rosea prostřednictvím mechanismu nezávislého na dietním omezení. PLoS ONE 8(5):e63886

46. ​​Schulz TJ, Zarse K, Voigt A, Urban N, Birringer M, Ristow M (2007) Omezení glukózy prodlužuje životnost Caenorhabditis elegans tím, že indukuje mitochondriální dýchání a zvyšuje oxidační stres. Cell Metab 6(4):280–293

47. Shih PH, Chan YC, Liao JW, Wang MF, Yen GC (2010) Antioxidační a kognitivní podpůrné účinky moruše bohaté na antokyany (Morus atropurpurea L.) na myši se zrychleným stárnutím a prevence Alzheimerovy choroby. J Nutr Biochem 21(7):598-605

48. Simons MJP, Koch W, Verhulst S (2013) Dietní omezení hlodavců snižuje míru stárnutí bez ovlivnění počáteční míry úmrtnosti – metaanalýza. Stárnoucí buňka 12(3):410–414

49. Sinclair DA (2005) Směrem k jednotné teorii kalorické restrikce a regulace dlouhověkosti. Mech Aging Dev 126(9):987–1002

50. Slack C, Foley A, Partridge L (2012) Aktivace AMPK domnělým mimetikem s omezením stravy metforminem je nedostatečná k prodloužení života u Drosophila. PLoS ONE 7(10):e47699

51. Slinkard K, Singleton VL (1977) Analýza celkových fenolů: automatizace a srovnání s manuálními metodami. Am J Enol Vitic 28 (1): 49–55

52. Soh JW, Marowsky N, Nichols TJ, Rahman AM, Miah T, Sarao P, Khasawneh R, Unnikrishnan A, Heydari AR, Silver RB, Arking R (2013) Kurkumin je raně působící induktor rozšířené funkce dlouhověkost u Drosophila. Exp Gerontol 48(2):229–239

53. Sohal RS, Buchan PB (1981) Vztah mezi fyzickou aktivitou a délkou života u dospělé mouchy domácí, Musca domestica. Exp Gerontol 16(2):157–162

54. Stenesen D, Suh JM, Seo J, Yu K, Lee KS, Kim JS, Min KJ, Graff JM (2013) Biosyntéza nukleotidů adenosinu a AMPK regulují délku života v dospělosti a zprostředkovávají přínos kalorického omezení u much na dlouhověkost. Cell Metab 17(1):101–112

55. Takahashi RN, Pamplona FA, Fernandes MS (2005) Kanabinoidní antagonista SR141716A usnadňuje získávání paměti a konsolidaci v myším zvýšeném T-bludišti. Neurosci Lett 380 (3): 270–275

56. Takeda T (2009) Senescence-accelerated mouse (SAM) se speciálními odkazy na modely neurodegenerace, myši SAMP8 a SAMP10. Neurochem Res 34(4):639-659

57. Valenzano DR, Terzibasi E, Genade T, Cattaneo A, Domenici L, Cellerino A (2006) Resveratrol prodlužuje životnost a zpomaluje nástup markerů souvisejících s věkem u obratlovců s krátkou životností. Curr Biol 16(3):296–300

58. Vivancos M, Moreno JJ (2005) Beta-sitosterol moduluje antioxidační enzymovou odpověď v makrofázích RAW 264.7. Free Radic Biol Med 39(1):91–97

59. Wang PY, Koishi K, McGeachie AB, Kimber M, MacLaughlin DT, Donahoe PK, McLennan IS (2005) Mullerian inhibiční látka působí jako faktor přežití motorických neuronů in vitro. Proč Natl Acad Sci USA 102(45):16421–16425

60. Wang PY, Neretti N, Whitaker R, Hosier S, Chang C, Lu D, Rogina B, Helfand SL (2009) Long-lived Indy a omezení kalorií se vzájemně ovlivňují a prodlužují životnost. Proč Natl Acad Sci USA 106(23):9262–9267

61. Weindruch R, Walford R (1982) Dietní omezení u myší začínajících ve věku 1 roku: vliv na délku života a spontánní výskyt rakoviny. Science 215(4538):1415–1418

62. Wood JG, Rogina B, Lavu S, Howitz K, Helfand SL, Tatar M, Sinclair D (2004) Sirtuinové aktivátory napodobují kalorickou restrikci a zpomalují stárnutí u metazoanů. Příroda 430(7000): 686–689

63. Wu Z, Liu SQ, Huang D (2013) Dietní omezení závisí na složení živin, aby se prodloužila chronologická délka života u pučících kvasinek Saccharomyces cerevisiae. PLoS ONE 8(5): e64448

64. Xiao B, Sanders MJ, Underwood E, Heath R, Mayer FV, Carmena D, Jing C, Walker PA, Eccleston JF, Haire LF, Saiu P, Howell SA, Aasland R, Martin SR, Carling D, Gamblin SJ ( 2011) Struktura savčí AMPK a její regulace pomocí ADP. Nature 472(7342):230–233

65. Zainal TA, Oberley TD, Allison DB, Szweda LI, Weindruch R (2000) Kalorické omezení opic rhesus snižuje oxidační poškození kosterního svalstva. FASEB J 14(12):1825–1836

66. Zheng J, Mutcherson R, Helfand SL (2005) Omezení kalorií oddaluje oxidační poškození lipidů u Drosophila melanogaster. Stárnoucí buňka 4(4):209–216

【Další informace:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】