Studie o optimální specifikaci kusů Herba Cistanches Fuju

Cistanche deserticola byla poprvé zaznamenána v Shennong's Herbal Classic. Má účinkyvyživující jang ledvin, doplnění esence a krve a zvlhčení střev azmírnění zácpy. V klinické praxi se používá jako atonikum čínské medicíny. Vydání lékopisu Čínské lidové republiky z roku 2020 (dále jen „Čínský lékopis“) stanoví, že Cistanche deserticola pochází ze sušených dužnatých stonků se šupinatými listy Cistanche deserticola nebo Cistanche tubulosa, rostlin z čeledi Orobanchaceae. Specifikace léčivých materiálů Cistanche deserticola jsou obvykle 2 až 8 cm v průměru a 3 až 15 cm na délku.

Podle „0213 Obecných pravidel pro zpracování“ čínského lékopisu se Cistanche deserticola během procesu zpracování formuje do nepravidelných silných plátků o tloušťce 2 až 4 mm. Většina řezaných plátků Cistanche deserticola jsou velké silné plátky o průměru 2 až 8 cm a tloušťce 2 až 4 mm [1].

PRODÁM KVALITNÍ EXTRAKT CISTANCHE TUBULOSA

Tento tradiční odvar je nerovnoměrný ve velikosti a má velký rozdíl v kvalitě. Při klinické úpravě je obtížné ji ovládat. Účinné složky se navíc při odvaru obtížně rovnoměrně rozpouštějí, což má za následek velký rozdíl v kvalitě každého odvaru.

Kromě toho relevantní studie uvádějí, že obsah chemického složení různých částí Cistanche deserticola je zcela odlišný a schopnost různých částí pohlcovat volné radikály 1,1-difenyl-2-trinitrofenylhydrazinu (DPPH) vitro se také liší [2], takže je obtížné zaručit klinickou účinnost tradičních plátků Cistanche deserticola. Mezi metodami ke zlepšení klinické účinnosti jsou plátky čínské medicíny druhem zděděných a inovativních plátků, které navazují na teorii tradiční čínské medicíny a metody zpracování tradiční čínské medicíny, vybírají vysoce kvalitní léčivé materiály ze zdroje a jsou zpracovány a zpracovány speciální funkce. Mají vysokou míru využití, jednotnou kvalitu, stabilní účinnost a snadno se upravují a připravují. Zachovávají si identifikační charakteristiky tradičních plátků.

Velikost plátků čínské medicíny je klasifikována hlavně podle léčivé části léčivého materiálu, charakteristik textury a klinické aplikace [3]. Například specifikace tradičních plátků jsou popsány jako "jako sójové boby", "jako ma fazole", "hrubý prášek" atd. [4].

Cistanche deserticola je speciální dužnatý stonkový léčivý materiál. Po vysušení je léčivý materiál velký a dlouhý. Je vhodné ji krájet na kousky nebo kostičky pomocí moderní technologie řezání, která může nejen zlepšit využití Cistanche deserticola a sjednotit její kvalitu, ale také zachovat identifikační znaky tradičních léčivých kusů. Tato studie využívá tradiční léčivé kousky Cistanche deserticola jako most a žvýká Cistanche deserticola na kousky a bloky různých specifikací. Nejlepší specifikace žvýkaných léčivých kousků Cistanche deserticola jsou optimalizovány na základě vlastností léčivého kusu, sypného úhlu, rychlosti odvaru a rychlosti přenosu verbascosidu a echinacosidu jako hodnotících indikátorů. Současně je porovnávána jednotnost a konzistence kvalitativních atributů tradičních léčivých kusů a žvýkaných léčivých kusů, aby byla poskytnuta reference pro výběr specifikací a zpracování a výrobu žvýkaných léčivých kusů Cistanche deserticola.

1 Materiál

1.1 Nástroje

Thermo U3000 HPLC; XBridge C18 (250,0 mm x 4,6 mm, 5 um) chromatografická kolona; CNC pístový řezač léků řady SQW (Kanghua Pharmaceutical Machinery Co., Ltd.); Řezací mlýn typu AM300S (Ant Source Scientific Instrument Co., Ltd.); Inteligentní ultrazvukový čistič typu DL-60J (Shanghai May Instrument Co., Ltd.); QM-Q5-elektrický parní hrnec typu H30DW (Changsha Quanmin Electric Co., Ltd.); MS204S typ jedna desetitisícové elektronické analytické váhy (Mettler Toledo); Jedna miliontá elektronická váha typu XPE26 (Mettler Toledo).

1.2 Testované léky

Referenční látka echinacosid (China Food and Drug Inspection Institute, číslo šarže 111670-201907, čistota 91,80 %), referenční látka verbascoside (China Food and Drug Inspection Institute, číslo šarže 111530-201914, čistota 95,2 %), methanol ( chromatografická čistota); Wahaha čištěná voda; ostatní činidla jsou analytické čistoty.

Léčivé materiály Cistanche deserticola byly shromážděny výzkumným týmem z Alxa, Vnitřní Mongolsko, Bayannur, Vnitřní Mongolsko a Jiuquan, Gansu, a byly identifikovány jako sušené masité stonky se šupinovými listy Cistanche deserticola profesorem Liu Shoujinem z Anhui University of Traditional Chinese Lék.

2 Metody

2.1 Způsob přípravy vzorku

Cistanche deserticola byla rozdělena na 7 porcí, každá o hmotnosti asi 500 g. Nečistoty byly odstraněny, plátky byly omyty a směs byla namočena. Plátky byly nakrájeny na tradiční plátky a plátky o tloušťce 2- až 4- mm. Plátky o tloušťce 2- až 4- mm byly nařezány na vlákna o šířce 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm a 4 mm × 4 mm a kostky s délkou stran 5 mm 8 mm, respektive 10 mm.

2.2 Stanovení hlavních složek

Podle čínského lékopisu byly jako indikátory pro stanovení použity dvě složky reprezentativních fenylethanolových glykosidů, verbascosid a echinacosid [1].

2.2.1 Chromatografické podmínky a zkouška vhodnosti systému

Jako plnivo byl použit oktadecylsilanem vázaný silikagel; methanol byl použit jako mobilní fáze A a 0,1% roztok kyseliny mravenčí byl použit jako mobilní fáze B. Gradientová eluce byla provedena podle požadavků v tabulce 1; detekční vlnová délka byla 330 nm. Počet teoretických pater vypočítaných na základě píku echinakosidu by neměl být menší než 3000. HPLC spektrum je znázorněno na obrázku 1.

2 Metody

2.1 Způsob přípravy vzorku

Medicinální materiál Cistanche deserticola byl rozdělen do 7 dávek, každá asi 500 g, a nečistoty byly odstraněny. Materiál byl omyt a navlhčen a poté nakrájen na tradiční plátky a plátky. Tradičními plátky byly převážně plátky o tloušťce 2-4 mm a nakrájené plátky byly nařezány na vlákna o šířce × tloušťce 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm a 4 mm × 4 mm a kostky s délky stran 5 mm, 8 mm a 10 mm.

2.2 Stanovení hlavních složek

Byl učiněn odkaz na Čínský lékopis a dvě složky, verbascosid a echinacosid, které byly reprezentativními složkami fenylethanolových glykosidů, byly použity jako indikátory pro stanovení [1].

2.2.1 Chromatografické podmínky a zkouška vhodnosti systému

Jako plnivo byl použit oktadecylsilanem vázaný silikagel; methanol byl použit jako mobilní fáze A a 0,1% roztok kyseliny mravenčí byl použit jako mobilní fáze B. Gradientová eluce byla provedena podle ustanovení v tabulce 1; detekční vlnová délka byla 330 nm. Teoretický počet pater vypočítaný na základě píku echinakosidu by neměl být menší než 3000. HPLC spektrum je znázorněno na obrázku 1.

Obrázek 1 HPLC chromatogramy referenčních a zkušebních vzorků echinakosidu a verbascosidu

2.2.2 Příprava referenčního roztoku

Odeberte vhodné množství referenčního echinakosidu a referenčního verbascosidu, přesně zvažte a přidejte 50% roztok methanolu, abyste vytvořili 1 ml směsného roztoku obsahujícího 0,2 mg echinakosidu a verbascosidu.

2.2.3 Příprava zkušebního roztoku

Odebereme asi 1 g prášku tohoto produktu (procedíme sítem č. 4), přesně zvážíme, dáme do 100ml hnědé odměrné baňky, přidáme přesně 50 ml 50% methanolového roztoku, zazátkujeme, dobře protřepeme, zvážíme, namočíme na 30 minut, ošetříme ultrazvukem na 40 minut (výkon: 250 W, frekvence: 35 kHz), necháme vychladnout, znovu zvážíme, přidáme 50% roztok metanolu pro doplnění ztracené hmotnosti, protřepeme dobře, nechte to stát, vezměte supernatant, přefiltrujte jej a odeberte filtrát, abyste jej získali.

2.2.4 Šetření lineárních vztahů

Přesně nasajte {{0}}.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 ml referenčního roztoku verbascosidu , umístěte do {{10}} ml odměrných baněk a přidejte methanol na váhu. Přesně nasajte 0,1, 0,2, 0,5, 1,0, 2,0 ml referenčního roztoku echinakosidu, vložte do 5 10ml odměrných baněk a přidejte 50 % methanolového roztoku na stupnici, změřte podle metody "2.2.1" a zaznamenejte odpovídající plochu píku.

2.2.5 Zkouška přesnosti

Přesně nasajte referenční roztoky verbascosidu a echinakosidu, vstřikujte 6krát nepřetržitě a změřte RSD ploch píku verbascosidu a echinakosidu.

2.2.6 Zkouška stability

Přesně nasajte stejný zkušební roztok a změřte jej podle metody "2.2.1". Změřte to jednou za 4 hodiny a testujte po dobu 24 hodin. Vypočítejte RSD plochy píku verbascosidu a echinakosidu.

2.2.7 Zkouška opakovatelnosti

Podle způsobu přípravy zkušebního roztoku připravte 6 zkušebních roztoků, změřte je podle metody "2.2.1" a vypočítejte jejich RSD podle plochy píku verbascosidu a echinakosidu.

2.2.8 Test obnovy vzorku

Přesně se zváží 6 zkušebních roztoků se známým obsahem verbascosidu a echinacosidu, přidá se 1 ml referenčního roztoku verbascosidu a referenčního roztoku echinakosidu, změří se podle metody "2.2.1" a vypočte se výtěžnost.

2.2.9 Stanovení sypného úhlu

Použijte metodu naklonění. Obdélníkovou krabičku naplňte léčivým materiálem do mírné míry volnosti a postupně krabičku naklánějte, dokud prášek nezačne vytékat. Úhel sklonu je úhlem klidu. Nechť výška úhlu sklonu je H a dno je L. Vzorec pro výpočet sypného úhlu θ je:

tanθ=H/L

2.2.10 Stanovení rychlosti odvaru

Vezměte 50 g plátků Cistanche deserticola, vložte do 1000 ml baňky s kulatým dnem, přidejte 10násobné množství vody, namočte 30 minut, vařte 45 minut, za horka přefiltrujte filtrační tkaninou 200 mesh, přidejte 8násobné množství vody ke zbytku, 30 min odvařovat, za horka přefiltrovat přes filtrační tkaninu 200 mesh, filtrát spojit; zakoncentrujte za sníženého tlaku (60 stupňů), abyste extrahovali, lyofilizovali, abyste získali lyofilizovaný prášek Cistanche deserticola, a vypočítejte rychlost odvaru podle následujícího vzorce [5]:

kde Y je rychlost odvaru; Wa je hmotnost lyofilizovaného prášku; Wb je hmotnost plátků.

2.2.11 Stanovení přenosové rychlosti

Podle chromatografických podmínek podle "2.1.1" byly stanoveny hmotnostní podíly verbascosidu a echinacosidu v plátcích a lyofilizovaném prášku Cistanche deserticola a rychlost přenosu byla vypočtena podle následujícího vzorce:

kde Z je přenosová rychlost; Wc je hmotnostní zlomek verbascosidu a echinakosidu v lyofilizovaném prášku; Wd je hmotnostní zlomek verbascosidu a echinacosidu v řezech.

2.2.12 Ukazatele pozorování

Byl zaznamenán výtěžek extraktu, celková přenosová rychlost verbascosidu a echinakosidu různých specifikací 㕮抽 plátků a tradičních plátků a rychlost odvaru, celková přenosová rychlost verbascosidu a echinakosidu byly hodnoceny metodou váženého bodování. Hmotnostní koeficient stanovení rychlosti odvaru byl {{0}},5 a váhový koeficient celkové přenosové rychlosti verbascosidu a echinakosidu byl 0,5.

3 Výsledky a analýza

3.1 Výsledky metodického šetření stanovení hlavních složek

Při použití chromatografických podmínek podle "2.2.1" byla chromatografická separace verbascosidu a echinakosidu větší než 1,5. Výsledky metodického šetření jsou uvedeny v tabulce 2. Tato metoda má dobrou přesnost, stabilitu, opakovatelnost, rychlost výtěžnosti a separační efekt a lze ji použít ke stanovení obsahu echinakosidu a verbascosidu v plátcích Cistanche deserticola a lyofilizovaném prášku.

Tabulka 3 Výsledky testů vlastností různých specifikací plátků Cistanche deserticola (Cistanche deserticola)

3.3 Analýza výsledků různých specifikací tradičních odvarových kusů a Yuzui odvarových kusů a výběr specifikací Yuzui

Z tabulky 4 je vidět, že úhly uložení různých velikostí žvýkaných kousků jsou nižší než úhly tradičních kousků. Čím menší je velikost žvýkaných kousků, tím menší je úhel odpočinku. 5mm krychle má nejmenší sypný úhel při 30 stupních, následuje 8mm krychle při 31,2 stupních a další specifikace jsou větší než 35 stupňů.

Ve srovnání s tradičními kousky, čím menší jsou kousky, tím vyšší je rychlost odvaru. Když je velikost 2 mm × 2 mm, je rychlost odvaru nejvyšší, 63,61 %, 2 mm × 4 mm, 60,33 %, následovaná kostkami 5 mm. U kusů je to 60,18 % a ostatní specifikace jsou nižší než 60 %. Když je velikost žvýkačky 8 mm kostek, je to v podstatě stejné jako tradiční kousky. U celkového obsahu verbascosidu a echinacey v kouscích odvaru, celkového obsahu verbascosidu a echinacey v lyofilizovaném prášku a rychlosti přenosu nebyl zjištěn žádný významný vzor.

Na rozdíl od snahy o vyšší rychlost suché pasty a odvarové množství účinných látek ve vařených a práškových odvarových kouscích [6] je princip dodržení rychlosti odvaru a přenosové rychlosti kousků Erzui konzistentní s principy tradičních kousků odvaru. K porovnání rychlosti odvaru a celkové rychlosti přenosu verbascosidu a echinacey mezi různými specifikacemi byla použita metoda váženého bodování. Výsledky ukázaly, že celkové skóre kusů o velikosti 8 mm kostky bylo v souladu s hodnocením tradičních kusů. Proto může být tato specifikace použita jako nejlepší specifikace pro kusy Cistanche deserticola nuzui.

3.4 Srovnávací analýza stejnoměrnosti kvality tradičních a 㕮嘴 plátků

Ze stejné šarže tradičních a 㕮嘴 plátků byly náhodně odebrány vzorky 7krát podle klinické úpravy 7 sad jako průběh léčby a byla porovnána vlhkost, rychlost odvaru, celkový obsah verbascosidu a echinacosidu a rychlost přenosu 7 plátků. . Jak je uvedeno v tabulce 5, hodnoty RSD vlhkosti, rychlosti odvaru, celkového obsahu verbascosidu a echinacosidu a přenosové rychlosti 7 tradičních plátků byly vyšší než hodnoty RSD plátků a hodnoty RSD plátků 㕮嘴 byly všechny méně než 2 %. Je vidět, že stejnoměrnost 8 mm krychlových kusů plátků Cistanche deserticola 㕮嘴 je lepší než u tradičních plátků.

3.5 Porovnání hodnocení konzistence kvality tradičních a 㕮嘴 řezů

Aby plátky 㕮嘴 mohly nést kvalitativní atributy plátků čínské medicíny, jako je bezpečnost a účinnost, byl standardní odvar připravený z tradičních plátků použit jako můstek pro hodnocení konzistence kvality plátků 㕮嘴 a tradičních plátků. Prostřednictvím výzkumu textů bylin, výzkumu literatury, výrobní oblasti a průzkumu trhu byla určena autentická výrobní oblast a hlavní výrobní oblast Cistanche deserticola a poté byly odebrány vzorky. V každé výrobní oblasti byly odebrány ne méně než 3 šarže vzorků a celkem bylo odebráno 15 šarží. Různé šarže Cistanche deserticola byly zpracovány na tradiční plátky a plátky 㕮 jiu a byl stanoven výtěžek plátků, rychlost odvaru a rychlost přenosu verbascosidu a echinacosidu.

Jak ukazuje tabulka 6, výtěžnost 15 šarží tradičních plátků byla mezi 95,1 % a 98.{5}} %, s průměrem 96,54 %, míra odvaru byla mezi 48,34 % a 61,88 %, s průměrem 55,93 % a přenosová rychlost byla mezi 43,5 % a 84,30 %, s průměrem 65,88 %. Výtěžnost 15 dávek odvařených plátků se pohybovala od 81,80 % do 97,70 %, s průměrem 91,40 %, rychlost odvaru se pohybovala od 52,20 % do 59,39 % s průměrem 58,46 % a rychlost přenosu od 60,5 % do 72,80 %, s průměrem 8,15 %. Je vidět, že kvalitativní vlastnosti 8mm krychlových kousků vařených plátků Cistanche deserticola jsou relativně konzistentní s vlastnostmi tradičních plátků.

3.4 Srovnávací analýza stejnoměrnosti kvality tradičních a 㕮嘴 plátků

Ze stejné šarže tradičních a 㕮嘴 plátků byly náhodně odebrány vzorky 7krát podle klinické úpravy 7 sad jako průběh léčby a byla porovnána vlhkost, rychlost odvaru, celkový obsah verbascosidu a echinacosidu a rychlost přenosu 7 plátků. . Jak je uvedeno v tabulce 5, hodnoty RSD vlhkosti, rychlosti odvaru, celkového obsahu verbascosidu a echinacosidu a přenosové rychlosti 7 tradičních plátků byly vyšší než hodnoty RSD plátků a hodnoty RSD plátků 㕮嘴 byly všechny méně než 2 %. Je vidět, že stejnoměrnost 8 mm krychlových kusů plátků Cistanche deserticola 㕮嘴 je lepší než u tradičních plátků.

3.5 Porovnání hodnocení konzistence kvality tradičních a 㕮嘴 řezů

Aby plátky 㕮嘴 mohly nést kvalitativní atributy plátků čínské medicíny, jako je bezpečnost a účinnost, byl standardní odvar připravený z tradičních plátků použit jako můstek pro hodnocení konzistence kvality plátků 㕮嘴 a tradičních plátků. Prostřednictvím výzkumu textů bylin, výzkumu literatury, výrobní oblasti a průzkumu trhu byla určena autentická výrobní oblast a hlavní výrobní oblast Cistanche deserticola a poté byly odebrány vzorky. V každé výrobní oblasti byly odebrány ne méně než 3 šarže vzorků a celkem bylo odebráno 15 šarží. Různé šarže Cistanche deserticola byly zpracovány na tradiční plátky a plátky 㕮 jiu a byl stanoven výtěžek plátků, rychlost odvaru a rychlost přenosu verbascosidu a echinacosidu.

Jak ukazuje tabulka 6, výtěžnost 15 šarží tradičních plátků byla mezi 95,1 % a 98.{5}} %, s průměrem 96,54 %, míra odvaru byla mezi 48,34 % a 61,88 %, s průměrem 55,93 % a přenosová rychlost byla mezi 43,5 % a 84,30 %, s průměrem 65,88 %. Výtěžnost 15 dávek odvařených plátků se pohybovala od 81,80 % do 97,70 %, s průměrem 91,40 %, rychlost odvaru se pohybovala od 52,20 % do 59,39 % s průměrem 58,46 % a rychlost přenosu od 60,5 % do 72,80 %, s průměrem 8,15 %. Je vidět, že kvalitativní vlastnosti 8mm krychlových kousků vařených plátků Cistanche deserticola jsou relativně konzistentní s vlastnostmi tradičních plátků.