Studium histopatologie ledvin a fyziologických funkcí

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Ahmad Fauzi a kol

Abstraktní.

The purpose of this study was to analyze abnormal changes in kidney histology and physiology in acute kidney injury animal models with multiple doses of gentamicin. Induction of experimental animals was carried out on 20 rats (Rattus norvegicus) Wistar strain which was divided into 4 groups, group I was a negative control group, groups II, III, and IV are gentamicin-induced groups at doses of 30 mg/kg, 40 mg/kg, and 50 mg/kg, respectively. Kidney histopathology was stained with Hematoxylin Eosin (HE), while analysis of serum BUN and creatinine by spectrophotometric method. Data analysis for kidney histopathology was descriptive while BUN and Creatinine were statistically tested with one-way ANOVA. The results of this study showed there was kidney damage in all gentamicin-induced groups, which is necrosis in the contortions tubule and the Bowman's capsule compared to the negative control group. The group of rats with the higher doses of gentamicin showed a more severe level of histopathological changes, however, BUN and creatinine levels were not significantly different (p>0.05). Tato studie dochází k závěru, že indukce gentamicinem by mohla způsobit histopatologické změny ledvin, ale ne fyziologii ledvin.

klíčová slova:zvířecí model, antibiotikum, BUN, kreatinin, nefrotoxicita.

cistanche v hindštiněmůže zlepšit funkci ledvin

1. Úvod

Akutní poškození ledvin je onemocnění selhání ledvin nebo poškození ledvin, ke kterému dochází rychle během několika hodin nebo dnů. Příznaky, které se objevují při výskytu akutníchledvinazraněníjako jsou bolesti břicha, polyurie, oligurie a další(1). Toto onemocnění je většinou diagnostikováno měřením hladiny biomarkerů; jako je krevní močovinový dusík (BUN) a kreatinin. Tyto změny biomarkerů však často nepopisují skutečný stav ledvin. Stavy akutního poškození ledvin lze jasně vidět makroskopickým a mikroskopickým pozorováním ledviny.Poškozenýledvinymůže být charakterizován otokem kůry ledvin a také nekrózou buňky(2). Zatímco ke zvýšeným hladinám biomarkerů BUN a kreatininu v krvi dochází, když jsou ledviny poškozeny přibližně o 30 procent - 59 procent, doprovázené anémií a letargií(3). Je známo, že ledviny jsou schopny se regenerovat, ale s mírou poškození buněk až 50 procent bude obtížné obnovit normální fyziologické funkce. To přimělo mnoho výzkumníků zkoumat různé látky, které mají potenciální účinek způsobující nefrotoxicitu, aby se snížil výskyt tohoto onemocnění.

Kromě toho je také důležité studovat mechanismus akutního poškození ledvin pomocí zvířecích modelů. Zvířecí modely akutního poškození ledvin se vyskytují v důsledku poškození nefronu v ledvinách. V nefronu, který se skládá z glomerulu, Bowmanova pouzdra, tubulárního contortu nebo Henleova oblouku, dojde k nekróze buněk. Podle Halima (2014) vytvoření zvířecího modelu akutního poškození ledvin trvá přibližně jeden měsíc(4). Materiál, který lze použít k vyvolání poškození ledvin, je různý, jako jsou léky. Jedním z léků, které mohou způsobit poškození ledvin, jsou antibiotika(2). Antibiotika, která se často používají pro vytváření zvířecích modelů poškození ledvin, jsou gentamicinová antibiotika. Indukční dávky antibiotik ke stimulaci poškození ledvin se velmi liší. Byly široce publikovány různé studie nefrotoxického gentamicinu, například při nízkých dávkách 10 mg/kg tělesné hmotnosti v období měsíců(4), při vysokých dávkách 60 mg/kg tělesné hmotnosti během 10 dnů(5, 6), dávkách 100 mg/kg tělesné hmotnosti do 8 dnů (7).

V dnešní době se stále často používá injekce gentamicinu u zvířat, zatímco u lidí se od toho začalo upouštět. Bezpečná dávka, která se často používá u lidí, je 5-7 mg/kg BW(8), v následujícím roce klesne na 3-5 mg/kg BW(9). Je známo, že dávka gentamicinu, která je 10násobkem bezpečné dávky, způsobuje toxicitu u potkanů. Tato bezpečná změna dávky může také umožnit změny toxických dávek, proto si tato studie klade za cíl analyzovat histologické a fyziologické změny u potkanů ​​jako zvířecích modelů akutního poškození ledvin v důsledku injekce gentamicinu ve víceúrovňových dávkách od 30 mg/kg tělesné hmotnosti do 50 mg/ kg tělesné hmotnosti.

2. Materiál a metody

2.1. Zvířecí model

Dvacet samců krys kmene Wistar, získaných od de Wistar Bandung, bylo rozděleno do 4 skupin, skupina I byla kontrolovaná skupina s injekcí placeba, skupina II byla indukována dávkou gentamicinu 30 mg/kg tělesné hmotnosti, skupina III byla indukována dávkou gentamicinu 40 mg/kg tělesné hmotnosti a skupina IV byla indukována dávkou gentamicinu 50 mg/kg tělesné hmotnosti. Zvířata byla usmrcena 10. den. Histopatologické vyšetření bylo provedeno na ledvinové tkáni krys po eutanázii. Celé zvíře vyhovělo směrnicím vyhlášeným komisí pro ústavní péči o zvířata a jejich použití s ​​registračním číslem č. 954-KEP.

2.2. Injekce gentamicinu

Každý potkan dostával denně intramuskulární injekci (mezi semimembranózní a semitendinózní) gentamicin sulfátu (Genta{0}}®) po dobu 10 dnů v různých dávkách podle jejich skupiny.

2.3. Vyšetření preparátů pro histologii ledvin

Orgány ledvin byly vloženy do 10% pufrovaného formalínu pro přípravu preparátů pro histopatologii. Z ledviny se udělal histologický preparát přenosem tkáně do 70procentního alkoholu jako zastavení. Poté byla tkáň dehydratována víceúrovňovým alkoholem s koncentrací 70 procent po dobu 24 hodin, 80 procent ethanolu po dobu 2 hodin, 90 procent ethanolu, 95 procent a absolutním etanolem po dobu 20 minut. Poté byly orgány namočeny v xylolu I na 20 minut a xylolu II na 30 minut, aby byly orgány čisté. Poté přefiltrujte tkáň a vložte do parafínového bloku 56-58 C. Orgán ledviny se nařeže na tloušťku 5 mikronů pomocí rotačního mikrotomu. Každé opakování byly provedeny 4 řezy v intervalech po 10 řezech a umístěny na sklo předmětu, kterému byl podán 70% roztok alkoholu a poté obarven hematoxylinem-eosinem (HE) barvením(10).

2.4. Odběr krve u pokusných zvířat

Odběr krve na zvířecích modelech přes infraorbitální sinus pomocí mikrohematokritu, poté vložen do vakutaineru. Vytvořené sérum bylo vloženo do nekoagulační mikrozkumavky, aby bylo analyzováno na sérum BUN a kreatinin.

2.5. Měření hladiny BUN a kreatininu

Hladiny BUN a kreatininu byly vyšetřeny pomocí spektrofotometrie (ABX Pentra). Fyziologie ledvin byla vyhodnocena pomocí kolorimetrické Jaffe metody (Creatinin and Urea kits DiaSys diagnostic systems GmbH Germany) pro výpočet hladin močovinového dusíku v krvi (BUN) a kreatininu v séru.

2.6. Statistická analýza

Pozorování histopatologie ledvin pomocí elektronového mikroskopu pak byla analyzována deskriptivně. Data BUN a kreatininu byla analyzována kvantitativně pomocí programu Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, v20). Byl proveden jednosměrný test ANOVA, aby byly pozorovány významné rozdíly mezi skupinami (<0.05) and="" continued="" with="" the="" tukey="">

3. Výsledky a diskuse

3.1. Makroskopické změny v ledvině indukované gentamicinem

Krysy indukované gentamicinem vykazovaly klinické příznaky letargie, nečinnosti a makroskopie moči vykazovala mírně načervenalou barvu, ale výkaly byly normální, konzumace jídla a pití byla stále normální. Makroskopicky nebyla velikost ledvin u kontrolních a léčených potkanů ​​rozdílná, ale rozdíly se vyskytují mimo barvu renální sliznice v kontrolní skupině (obrázek la) a skupině s indukcí gentamicinu (obrázek 1b).

Obrázek 1. Ledviny u potkanů ​​s negativní kontrolou mají tvar fazole a mají načervenalou barvu jako normální ledviny (a), zatímco ledviny ve skupině s indukcí gentamicinu vypadají bledší (b)

3.2. Změny v renální histologii zvířecích modelů s indukcí gentamicinem.

Mikroskopické pozorování za použití 100x a 400x zvětšení ukázalo histopatologickou změnu ve skupině s indukcí gentamicinu. Zatímco kontrolní skupina, která nebyla indukována gentamicinem, nevykazovala žádné mikroskopické změny (obrázek 2). Sférický glomerulus se skládá z simplexních endoteliálních buněčných kapilár, Bowmanova pouzdra měla kulatý tvar se zjednodušenými dlaždicovými buňkami, proximální kontortové tubuly s kvádrovým simplex celulárním s mikroklky a distální kontortové tubuly se zaoblenou krychlovou buňkou bez mikroklků a dřeň se skládá Henleovy smyčky se zaoblenou jednoduchou dlaždicovou buňkou (11),

Obrázek 2. Histopatologie ledvin v negativní kontrolní skupině (barvení hematoxylinem-eosinem, 100x a 400x zvětšení). Glomerulus (šipka) je normální s kulatým tvarem a pevnou strukturou, proximální tubuly (šipka) s kvádrově kulatými buňkami a vilkami.

Mikroskopické snímky ledvin krys s injekcí gentamicinu 30 mg/kg tělesné hmotnosti (skupina I) byly pozorovány histopatologické změny ve srovnání s negativní kontrolní skupinou (obrázek 3). erodují glomerulární endoteliální buňky, dochází k nekróze Bowmanova pouzdra a Bowmanův prostor se stává tenčím. Stavem proximálních tubulárních buněk byla nekróza, což se projevuje deskvamací epiteliálních buněk kvádrového simplexu s cytoplazmou a mizejícími buněčnými jádry. Zánětlivé buňky v proximálním tubulu se nacházejí kolem tubulárních epiteliálních buněk charakterizovaných velkými černofialovými kulatými buňkami.

Obrázek 3. Histopatologie ledviny ledvin v léčebné skupině I s indukcí 30 mg/kg tělesné hmotnosti (barvení hematoxylinem-eosinem, 100x a 400x zvětšení). (šipka) Glomerulus vykazoval erozi endoteliálních buněk, (šipka) Bowmanova pouzdra vykazovala nekrózu a natahování, * Tubule contortus vykazoval nekrózu a spoustu zánětlivých buněk.

Histopatologické snímky krys, kterým byla injekčně podána dávka 40 mg/kg tělesné hmotnosti ve skupině II, ukazují závažnější stupeň poškození ve srovnání s kontrolní a léčebnou skupinou I (obrázek 4). glomeruly byly nekróza a eroze endoteliálních buněk, Bowmanův prostor se stal tenčím a jádro epiteliálních buněk v Bowmanově pouzdru bylo lýzou. Krychlové simplexní epiteliální buňky v proximálních kontortních tubulech vidí nekrózu a deskvamaci epiteliálních buněk dochází jak v cytoplazmě, tak v jádře. Zánětlivé buňky jsou často vidět kolem poškozených nefronů.

Obrázek 4. Histopatologie ledvin v léčebné skupině II Indukce 40 mg/kg tělesné hmotnosti (barvení hematoxylinem-eosinem, 100x a 400x zvětšení). Glomerulus (šipka) vykazoval deskvamaci endoteliálních buněk, bylo zjištěno, že Bowmanovo pouzdro (hrot šipky) nekrózu a Bowmanův prostor se roztahuje, Tubular Contortus (*) byly nekrózy a po nich následovaly zánětlivé buňky (kruh).

Jak se indukční dávky gentamicinu zvyšovaly, poškození ledvin bylo pozorováno jako závažnější, jak je znázorněno na mikroskopických snímcích krys, kterým byl ve skupině III injikován gentamicin 50 mg/kg tělesné hmotnosti (obrázek 5). K poškození došlo ve všech částech nefronu, tj. v glomerulu, Bowmanově pouzdru, proximálním tubulu a distálním tubulu. V glomerulu způsobuje nekróza v endoteliálních buňkách větší mezeru v oblasti Bowmanova prostoru, u Bowmanových pouzder byla pozorována nekróza v simplexní skvamózní buněčné stěně, proximální zkroucený tubulus a distální zkroucené tubuly byly pozorovány jako nekróza nebo byly označeny akutní tubulární nekrózou (ATN ), simplexní skvamózní buněčná stěna byla nekróza a ve své histologické struktuře se jeví deskvamovaná. V tubulárních řezech bylo vidět mnoho mononukleárních zánětlivých buněk v buňkách procházejících nekrózou.

Obrázek 5. Histopatologie ledvin ve skupině III indukce gentamicinu s 50 mg/kg tělesné hmotnosti (barvení hematoxylin-eozin, 100x a 400x zvětšení). Deskvamace endotelových buněk Glomerulus (šipka), Bowmanovo pouzdro (šipka) vykazovalo nekrózu a Bowmanovy prostory se stávají zřetelnými. Nekróza se vyskytuje na Tubular Contortus (*).

Podání vysokých dávek injekce gentamicinu může způsobit poškození struktury nefronu charakterizované nekrózou a deskvamací epiteliálních buněk v glomerulu, Bowmanově pouzdru a tubulárních, což ovlivní zhoršenou funkci ledvin glomerulární filtrace a reabsorpci a sekreci v tubulárních ledvinách. Hlavním aspektem nefrotoxicity gentamicinu je tubulární cytotoxicita. Zvířecí terapie gentamicinem může souviset s apoptózou(12) i nekrózou tubulárních epiteliálních buněk(13). Gentamicin způsobuje cytotoxicitu v buňkách, kde se může akumulovat. V ledvině jsou to obvykle proximální tubulární epiteliální buňky(14), zatímco distální tubulární buňky a sběrné kanálky jsou významně méně ovlivněny cytotoxickými účinky(15). Lék je poté transportován do lysozomu, Goldziho zařízení a endoplazmatického retikula(16). Gentamicin se váže na fosfolipidovou membránu, mění její funkci a způsobuje stav známý jako fosfolipidóza u lidí(17) a experimentálních zvířat(18). Lysozomální fosfolipidóza je způsobena poruchami fosfatidylinositolové signální dráhy(19), snížením obratu fosfolipidů a jejich akumulací v plazmatické membráně.

Fosfolipidóza přímo souvisí s toxicitou gentamicinu(20). Podobné změny však byly detekovány u jiných typů buněk vystavených gentamicinu, ale bez významného poškození a buněčné smrti. Když koncentrace gentamicinu v endozomech dosáhnou určité úrovně, membrána se naruší a její obsah včetně gentamicinu se uvolní do cytoplazmy(21). V cytoplazmě působí gentamicin na mitochondrie přímo i nepřímo(22) a aktivuje vnitřní apoptotickou dráhu, narušuje dýchací řetězec, snižuje syntézu ATP a způsobuje oxidační stres tvorbou superoxidových aniontů a hydroxylových radikálů(23) s následkem buněčné smrti. Je-li katepsin přítomen ve velkém množství, způsobuje masivní proteolýzu, která má za následek nekrózu, zejména nedostatek ATP. V endoplazmatickém retikulu gentamicin inhibuje syntézu proteinů, čímž narušuje přesnost translace a modifikaci posttranslačních proteinů(24). To má za následek stres endoplazmatického retikula a apoptotickou aktivaci kaspázou 12 a kalpainem(25).

Výsledky této studie jsou podobné výsledkům výzkumu, který provedl Lintong (2012). Podání gentamicinu laboratorním potkanům v dávce 10-20 mg/kg tělesné hmotnosti způsobilo charakteristické a výrazné změny v lysozomech proximálních tubulárních epiteliálních buněk(6). Tyto změny jsou tubulární dysfunkce; oddělení kartáčkového lemu a uvolnění lysozomálních enzymů; snížit reabsorpci bílkovin, vápníku, hořčíku, draslíku a glukózy; phos fosfolipidurie a vylučování odlitků. Podávání gentamicinu v dávkách nad 40 mg/kg tělesné hmotnosti rychle vyvolá nekrózu v kůře ledvin doprovázenou poruchou renální dysfunkce.

3.3. Žádné významné změny BUN a kreatininu ve skupině gentamicinu

One-way ANOVA results showed no significant difference between treatments (p>0.05). Tukeyův test proto nepokračoval. Průměrné hladiny BUN a kreatininu v krevním séru jsou uvedeny v tabulce 1.1.

Podle Johnsona (2014) se hladiny BUN u potkanů ​​pohybují od 10-21 mg/dl(26). Zatímco akutní poškození ledvin produkuje hladiny BUN 10krát vyšší, než jsou normální hladiny (27). Za normálních okolností je BUN výsledkem metabolismu bílkovin, ke kterému dochází v játrech. Tato látka bude vedena krevními cévami a vylučována močovým systémem v ledvinách, takže hladiny BUN v krevní cévě budou nalezeny v malém množství. Z průměrné hodnoty každé skupiny, která byla získána, se zdá, že mezi skupinami není žádný významný rozdíl, ale existuje tendence ke zvýšení v souladu se zvyšujícími se dávkami gentamicinu.

One-way ANOVA test results on creatinine samples showed no difference between treatments (p>{{0}}.05). Průměrná hodnota kontrolní skupiny a léčebné skupiny I byla stále v normálním rozmezí hladin kreatininu u bílých potkanů, což je 0.2 - 0.8(26). Současné standardní testy ke stanovení stavu funkce ledvin spočívaly v měření sérového kreatininu a produkce moči. Počáteční měření sérového kreatininu však nemusí odrážet rozsah poranění, protože akumulace kreatininu vždy zaostává za úrazovými událostmi (28). Zvýšení sérového kreatininu může indikovat poškození ledvin, ale má omezenou schopnost určit poškození v časných stádiích (29). Podle Nguyen & Devarajan (2008) se hladiny kreatininu začnou zvyšovat poté, co poškození ledvin dosáhne 50 procent (30), takže lze dojít k závěru, že pozorované poškození ledvin je stále pod 50 procenty.

4. Závěr

Na základě výsledků této studie lze dojít k závěru, že renální histopatologické změny v důsledku injekce gentamicinu po dobu 10 dnů se vyskytly u všech skupin gentamicinu, ale tato abnormalita se neprojevila na BUN a kreatininovém séru. Kvůli zpoždění biomarkeru v této studii jsme navrhli přidat další proměnnou pro pozorování akutního poškození ledvin.

5. Poděkování

Vděčné uznání patří ministerstvu výzkumu, technologie a vysokého školství za podporu financování prostřednictvím programu PUPT 2017 a za spolupráci při provádění tohoto výzkumu.

Reference

1. Alfonso AA, Mongan AE, Memah MF. Gambaran kadar kreatinin sérum pada pasien penyakit ginjal kronik stadium 5 non dialisis. Časopis e-Biomedik. 2016;4(1).

2. Chasani S. Antibiotika Nefrotoksik: Penggunaan pada Gangguan Fungsi Ginjal. J Laporan Penelitian. 2008.

3. K KZ. Chronické onemocnění ledvin. Los Angeles: Zdravotní systém Henryho Forda; 2011.

4. Halim H, Achadiyani A, Tjahjodjati T. Nigella sativa Infusion as an Antioxidant Agent Against Gentamicin-Induced Kidney Damaged u myší. Althea Medical Journal. 2014;1(2):90-3.

5. Padmini MP, Kumar JV. Histopatologická studie nefrotoxicity vyvolané gentamicinem u experimentálních albínských potkanů. IOSR J Dent Med Sci. 2012;1(1):14-7.

6. Lintong PM, Kairupan CF, Sondakh PL. Gambaran Mikroskopik Ginjal Tikus Wistar (Rattus norvegicus) Setelah Diinduksi Dengan Gentamisin. Jurnal Biomedik. 2012;4(3).

7. ATAMAN N, Mert H, Yildirim S, Mert NJAÜVFD. Vliv fukoidanu na změny některých biochemických parametrů nefrotoxicity vyvolané gentamicinem u potkanů. 2018;65(1):9-14.

8. Freeman CD, Nicolau D, Belliveau P, Nightingale C. Dávkování aminoglykosidů jednou denně: přehled a doporučení pro klinickou praxi. The Journal of antimikrobiální chemoterapie. 1997;39(6):677-86.

9. Gentamicin [Internet]. Datasheet Publikace. 2005.

10. Wulandari S. Ekstraksi Tumor Necrosis Fakcor (TNF-) a Gambaran Histopatologi Ginjal Pada Tikus (Rattus Norvegicus) Renální fibróza Pasca Induksi Streptokináza. Malang: University of Brawijaya; 2012.

11. Handani AR, Salim MN, Harris A, Budiman H. PENGARUH PEMBERIAN KACANG PANJANG (Vigna unguiculatTERHADAP STRUKTUR MIKROSKOPIS GINJAL MENCIT (Mus musculus) YANG DIINDUKSI ALOKSAN.1aria.15 Medika Ve

12. Li J, Li Qx, Xie Xf, Ao Y, Tie Cr, Song Rj. Diferenciální role dihydropyridinového kalciového antagonisty nifedipinu, nitrendipinu a amlodipinu na gentamicinem indukovanou renální tubulární toxicitu u potkanů. Evropský žurnál farmakologie. 2009;620(1-3):97-104.

13. Edwards JR, Diamantakos EA, Peuler JD, Lamar PC, Prozialeck WC. Nová metoda pro hodnocení buněčné nekrózy epiteliálních buněk proximálního tubulu v intaktní ledvině potkana pomocí ethidium homodimeru. J BMC fyziologie. 2007;7(1):1.

14. Verpooten GA, Giuliano RA, Verbist L, Eestermans G, De Broe ME. Dávkování jednou denně snižuje renální akumulaci gentamicinu a netilmicinu. J Klinická farmakologie Terapeutika. 1989;45(1):22-7.

15. Fujiwara K, Shin M, Matsunaga H, Saita T, Larsson LI. Světelná mikroskopická imunocytochemie pro gentamicin a jeho použití pro studium vychytávání léčiva v ledvinách. J Antimikrobiální látky Chemoterapie. 2009;53(8):3302-7.

16. Silverblatt F. Patogeneze nefrotoxicity cefalosporinů a aminoglykosidů: přehled současných koncepcí. J Recenze infekčních nemocí. 1982;4(Dodatek_2):S360-S5.

17. De Broe ME, Paulus GJ, Verpooten GA, Roels F, Buyssens N, Wedeen R, et al. Časné účinky gentamicinu, tobramycinu a amikacinu na lidské ledviny. J Ledviny mezinárodní. 1984;25(4):643-52.

18. Nonclercq D, Wrona S, Toubeau G, Zanen J, Heuson-Stiennon JA, Schaudies RP, et al. Tubulární poškození a regenerace v ledvinách potkana po akutní expozici gentamicinu: studie časového průběhu. J Selhání ledvin. 1992;14(4):507-21.

19. Ramsammy LS, Josepovitz C, Kaloyanides GJ. Gentamicin inhibuje agonistickou stimulaci fosfatidylinositolové kaskády v primárních kulturách králičích proximálních tubulárních buněk a v kůře ledvin potkana. J Journal of Pharmacology Experimental Therapeutics. 1988;247(3):989-96.

20. Kaloyanidy G. Interakce lék-fosfolipid: role v nefrotoxicitě aminoglykosidů. J Selhání ledvin. 1992;14(3):351-7.

21. Regec AL, Trump BF, Trifilis AL. Účinek gentamicinu na lysozomální systém kultivovaných lidských proximálních tubulárních buněk: Endocytotická aktivita, lysozomální pH a fragilita membrány. J Biochemická farmakologie. 1989;38(15):2527-34.

22. Morales AI, Detaille D, Prieto M, Puente A, Briones E, Arévalo M, et al. Metformin zabraňuje experimentální gentamicinem indukované nefropatii cestou závislou na mitochondriích. J Ledviny mezinárodní. 2010;77(10):861-9.

23. Cuzzocrea S, Mazzon E, Dugo L, Serraino I, Di Paola R, Britti D a kol. Role superoxidu v gentamicinem zprostředkované nefropatii u potkanů. Evropský žurnál farmakologie. 2002;450(1):67- 76.

24. Horibe T, Matsui H, Tanaka M, Nagai H, Yamaguchi Y, Kato K a kol. Gentamicin se váže na lektinové místo kalretikulinu a inhibuje jeho chaperonovou aktivitu. J Biochemical Biophysical Research Communications. 2004;323(1):281-7.

25. Peyrou M, Hanna PE, Cribb AE. Cisplatina, gentamicin a p-aminofenol indukují markery stresu endoplazmatického retikula v ledvinách potkana. J Toxikologické vědy. 2007;99(1):346-53.

26. Johnson D. Normal Lab values ​​2014.

27. Fauzi A, Salasia SIO, Titisari N. Neutrofilní gelatináza-asociovaný lipokalin (NGAL) jako potenciální biomarker pro časnou detekci akutního selhání ledvin. J Srovnávací klinická patologie. 2016;25(2):387-92.

28. Lameire N, Hoste EJCoicc. Úvahy o definici, klasifikaci a diagnostickém hodnocení akutního selhání ledvin. 2004;10(6):468-75.

29. Devarajan P. Vznikající biomarkery akutního poškození ledvin. Akutní poškození ledvin. 156: Karger Publishers; 2007. str. 203-12.

30. Nguyen MT, Devarajan PJPn. Biomarkery pro včasnou detekci akutního poškození ledvin. 2008;23(12):2151.