SLC37A2, Molekula související s fosforem se zvyšuje v buňkách hladkého svalstva v kalcifikované aortě Ⅱ
Feb 04, 2024
Výsledek
Hledejte kandidátní molekuly vfosfátem indukovaný kalcifikovanýAoSMC. K hledání molekul, jejichž exprese se zvyšuje v kalcifikovaných AoSMC, byla provedena analýza mikročipů DNA asi 26 000 genů pomocí kalcifikované AoSMC a nekalcifikované mRNA AoSMC. Obrázek 1 ukazuje HeatMap různých genů exprimovaných mezi AoSMC nekultivovanými s 2,6 mM a těmi, které byly kultivovány s 2,6 mM P po dobu 12 dnů. Celkem 3 066 genů vzrostlo více než dvojnásobně na kultivovaných vs nekultivovaných AoSMC. Geny se zvýšenou expresí byly molekuly související s tvorbou osteoblastů, jako je osteopontin, periostinový osteoblast-specifický faktor (POSTN), Wnt3, interleukin-6 (IL-6) afibroblastový růstový faktor23 (FGF23), stejně jako několik molekul v superrodině SLC (tabulka 1). Mezi těmito molekulami jsme se zaměřili na SLC37A2, u kterého se mRNA zvýšila asi 3,1krát na AoSMC kultivovaném s 2,6 mM P po dobu 12 dnů ve srovnání s AoSMCnot kultivovaným s 2,6 mM P. Bylo hlášeno, že SLC37A2 souvisí s regulací P, ale jeho podrobná funkce je neznámý účinek zánětu na expresi SLC37A2.Cévní kalcifikacebylo hlášeno, že je podporován zánětem, takže jsme zkoumali, zda je mRNA SLC37A2 ovlivněna zánětlivou reakcí. 24 hodin po léčbě LPS se IL-6 významně zvýšil ve srovnání s AoSMC, která nebyla léčena LPS (obr. 2A). Tyto výsledky byly také pozorovány 72 hodin po léčbě LPS. Mezi skupinami nebyly žádné významné rozdíly v expresi SLC37A2mRNA (obr. 2B).
KLIKNĚTE ZDE A ZÍSKEJTE PŘÍRODNÍ BIO EXTRAKT CISTANCHE S 25 % ECHINAKOSIDU A 9 % AKTEOSIDU PRO FUNKCI LEDVIN
Supporting Service Of Wecistanche-Největší vývozce cistanche v Číně:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
Nakupujte pro další specifikace Podrobnosti:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
Exprese SLC37A2 ve fosfátem indukované kalcifikované AoSMC. Abychom určili, zda se SLC37A2 podílí na kalcifikaci, zkoumali jsme expresi SLC37A2 mRNA na nekalcifikované a kalcifikované AoSMC (obr. 3). Kalcifikace byla pozorována u AoSMC kultivovaných s 2,6 mM P po dobu 6 dnů a pokročilejší kalcifikace byla pozorována u AoSMC kultivovaných s 2,6 mM P po dobu 12 dnů (obr. 3A). Runx2 mRNA významně vzrostla u kalcifikované AoSMC ve srovnání s nekalcifikovanou AoSMC (obr. 3B). 3C). Exprese proteinu SLC37A2 se významně zvýšila asi dvojnásobně v den 6 v kalcifikované AoSMC ve srovnání s nekalcifikovanou AoSMC (obr. 3D).
Exprese SLC37A2 u CKD modelu potkanů.
Abychom odhalili, zda se SLC37A2 podílí na vaskulární kalcifikaci in vivo, zkoumali jsme expresi mRNA SLC37A2 na cévách adeninem indukovaných CKD potkanů. Adeninem indukované CKD krysy byly vytvořeny podle protokolu znázorněného na obr. 4A. Tabulka 2 ukazuje tělesnou hmotnost a biochemická data v den utracení. Tělesná hmotnostadeninem indukované CKDu potkanů byl významně nižší ve srovnání s potkany bez CKD. Ve srovnání se skupinou bez CKD měly skupiny s CKD vyšší hladiny P a Cr v plazmě a nižší hladiny Ca v plazmě a 24-hodinové vylučování P, Ca a Cr močí. Dále byly tyto výsledky výraznější ve skupině s CKD-HP, jak bylo vidět v předchozích studiích.37,39) Renální funkce se tedy snížila ve skupině s CKD, zejména ve skupině s CKD-HP. Zkoumali jsme expresi mRNA v aortálních cévách CKD potkanů (obr. 4). Ačkoli nebyly žádné významné rozdíly v expresi Runx2 mRNA, transkripčního faktoru, který se pohybuje na počátku mechanismu vaskulární kalcifikace, mezi skupinami (obr. 4B) se exprese osteopontinové mRNA významně zvýšila ve skupině s CKD-HP ve srovnání se skupinou bez skupina CKD aSkupina CKD-LP(Obr. 4C). Exprese mRNA SLC37A2 byla také významně zvýšena ve skupině CK D-HP ve srovnání se skupinou bez CKD a skupinou CKD-LP (Obr. 4D). Protože u těchto potkanů byly velké individuální rozdíly, zkoumali jsme korelaci mezi osteopontinem a mRNA SLC37A2 a našli významnou korelaci mezi těmito molekulami (obr. 4E). Histologické vyšetření torakoabdominální aorty odhalilo mediální kalcifikaci pouze v aortě skupiny CKD-HP (obr. 5A). Abychom prozkoumali expresní místo SLC37A2 na aortě, provedli jsme imunobarvení aorty CKD-HPkrys. SLC37A2 byl silně exprimován v oblasti, kdevaskulární kalcifikacedošlo (obr. 5B).
Obr. 1. HeatMap různě exprimovaných genů mezi AoSMC nekultivovanými s 2,6 mM P a AoSMC kultivovanými s 2,6 mM P. Červená představuje geny s vysokou úrovní signálu a zelená představuje geny s nízkou úrovní signálu. AOSMC buňky hladkého svalstva aorty. Viz obrázek v online verzi.
Diskuse
Zkoumali jsme kandidátní molekuly související s P, které se podílejí na vaskulární kalcifikaci. Naše výsledky ukázaly, že SLC37A2 je jednou z molekul, které se zvyšujívaskulární kalcifikacein vitro a in vivo.
Rodina SLC37 patří do superrodiny SLC a zahrnuje proteiny: SLC37A 1-440) Rodina SLC37 obsahuje transmembránové proteiny v membráně endoplazmatického retikula a má sekvenci homologní s bakteriálním organofosfátovým antiporterem.(41) SLC37A4 je známější jakopřenašeč glukosy6-fosfátu.(2-44 Existuje však málo zpráv o SLC37A2 a podrobnosti o jeho funkci nejsou plně objasněny. SLC37A2, také známý jako SPX2, je hojně exprimován v myších makrofázích, slezině, brzlíku a bílé tukové tkáni (WAT ) geneticky obézních myších modelů a buněk podobných osteoklastům pocházejících z buněk Raw264.7.(45.6) Protein SLC37A2 transportuje jak výměny glukóza-6-fosfát/fosfát, tak fosfát/fosfát.(4) Nedávno zprávy prokázaly souvislost mezi SLC37A2 s onemocněním zvířat. (47-49) Vada SLC37A2 způsobujekraniomandibulární osteopatie(CMO), samoomezující proliferativní onemocnění kostí u plemen teriérů. (47) U skotu na mléko je homozygotní mutace SLC37A2 zodpovědná za embryonální smrt. (8.9) Navíc. SLC37A2 byl považován za cíl pro cílové geny vitaminu D. (so) Byl také zvažován potenciál cílového genu pro fosfor-Ser294 progesteronového receptoru v progresi rakoviny prsu (1) Bylo hlášeno, že zánět může způsobit i zhoršit vaskulární kalcifikaci. (2s26) Dále. SLC37A2 je hojně exprimován v makrofázích a WAT, které jsou ovlivněny infiltrací makrofágů. (s) Proto. uvažovali jsme, že SLC37A2 může být molekula exprimovaná během zánětu. Naše zjištění však neprokázala žádné zvýšení exprese SLC37A2 v AoSMC vystavených zánětlivé reakci, nezdá se, že by tato molekula byla přímo ovlivněna zánětlivou stimulací. SLC37A2 se může podílet na vaskulární kalcifikaci prostřednictvím jiného mechanismu než zánětu.
Bylo hlášeno, že SLC37A2 působí jako P-vázanýantiportér. (41) Kromě toho bylo hlášeno, že SLC37A2 je cílovým genem pro vitamin D a gen SLC37A2 obsahuje hlavní vazebné místo pro vitamin Dreceptor (ss2) Systematicky korelované změny v expresi genů SLC37A2 a cirkulujících forem vitaminu D. byl pozorován v lidských mononukleárních buňkách periferní krve. (50)Receptory vitaminu D se vážou na 1a, 25-dihydroxy vitamin D, který je metabolitem vitaminu D, a regulují genovou expresi. 25-dihydroxyvitamin D působí při absorpci Ca a P ve střevě, mobilizaci Ca v kosti a reabsorpci Cain v ledvinách. (3) Existuje zpráva, že u adeninem indukovaného CKD modelu potkanů bylo sérum la, 25-dihydroxyvitamin D, významně vyšší u potkanů s vysokým p dietou, s pokročilou vaskulární kalcifikací, ve srovnání s potkany s nízkou -p příjem stravy.39) SLC37A2 může souviset s regulací P prostřednictvím vitaminu D. Jsou zapotřebí další studie, aby se objasnilo, že vitamin D ovlivňuje expresi SLC37A2 in vitro a vivo.
Bylo prokázáno, že mechanismus vaskulární kalcifikace je podobný jako u tvorby kosti. Nedostatek SLC37A2 způsobený CMO je klinicky srovnatelný s lidskou dětskou kortikální hyperostózou, také známou jako Caffeyova choroba.7 Kromě toho existují zprávy, že SLC37A2 je exprimován v kostní dřeni a osteoklastech. Hytone et al. (7 předpokládali, že dysfunkce SLC37A2 by způsobil nerovnováhu ve funkci tvorby osteoblastické a osteoklastické kosti a v důsledku toho by vedl k hyperostóze.
Runx2 je nezbytný transkripční faktor pro vaskulární kalcifikaci. Uvádí se také, že Runx2 je osteoblastový diferenciační transkripční faktor exprimovaný ve vyvíjejících se epiteliálních buňkách prsu. (s435) Runx2 se zdá být nezbytný pro regulaci cílových genů pro fosfor-Ser294 progesteronu, které jsou spojeny s progresí rakoviny prsu. SLC37A2 je považován za kandidátní cílový gen pro fosfor-Ser294 progesteronový receptor. (s1) Proto se má za to, že Runx2 může regulovat SLC37A2 V této studii byla exprese mRNA SLC37A2 v aortě CkD potkanů korelována s mRNA osteopontinu, která se zaměřuje na gen Runx2.
