Stárnutí kůže je složitý biologický jev v důsledku fyziologického poklesu

Prosím kontaktujteoscar.xiao@wecistanche.comPro více informací

Abstraktní:Cílem této studie bylo otestovat inhibiční účinek ovocných extraktů z Washingtonia filifera na enzymy související se stárnutím pokožky. Dužinové extrakty nevykazovaly významnou enzymovou inhibici, zatímco extrakty semen W. filifera vykazují antielastázové, antikolagenázové a antityrosinázové aktivity. Tyrosináza byla mírně inhibována, zatímco silnější účinek byl pozorován s ohledem na inhibici elastázy a kolagenázy. Alkoholové extrakty poskytovaly lepší výsledky než vodné extrakty. Mezi nimi methanolové extrakty vykazovaly významné inhibiční aktivity enzymů, přičemž hodnota IC5o pro elastázu a kolagenázu byla srovnatelná a dokonce lepší než u referenční sloučeniny. Způsob inhibice nejaktivnějších extraktů byl zkoumán analýzou Lineweaver-Burk plot. Extrakty ze semen W. filifera byly také zkoumány na svůj fotoprotektivní účinek pomocí Mansurovy rovnice a antioxidační aktivita extraktu W. filifera byla hodnocena v buňkách vystavených oxidačnímu stresu. Pro vyhodnocení bezpečnosti extraktu byl analyzován účinek na životaschopnost buněk lidských keratinocytů.ztracená říše cistancheMetanolový extrakt vykazoval nejlepší fotoprotektivní účinek a vykazoval antioxidační aktivitu v buněčném systému bez cytotoxického účinku. Celkové výsledky ukazují, že extrakty W. filifera jsou slibnými zdroji bioaktivních sloučenin, které by mohly být použity v kosmetických a farmaceutických přípravcích.

klíčová slova:inhibice enzymů; kolagenáza; elastázu; tyrosináza; rostlinné extrakty; semena; stárnutí kůže; Washingtonia filifera

Kliknutím sem se dozvíte více

1. Úvod

Stárnutí kůže je komplexní biologický jev v důsledku fyziologického poklesu kožních funkcí a několika vnějších faktorů prostředí, jako je UV záření, chemikálie a reaktivní formy kyslíku (ROS). Kůže je největší a nejexponovanější částí těla a vystavení slunečnímu UV záření představuje jeden z nejvýznamnějších vnějších faktorů vyvolávajících stres: stárnutí kůže způsobené světlem spojené s oxidačním stresem. ROS indukovaný UV zářením může iniciovat složité molekulární dráhy, včetně aktivace enzymů, které degradují proteiny extracelulární matrice (ECM) v dermis a mění integritu kůže [1]. Jednou z hlavních charakteristik stárnutí kůže je skutečně ztráta struktury ECM, která obsahuje četné proteiny, včetně kolagenu a elastinu, z nichž všechny hrají hlavní roli při zachování elasticity kůže [2]. Degradace ECM je způsobena především zvýšenou aktivitou proteolytických enzymů, jako je kolagenáza a elastáza. Inhibice těchto enzymatických aktivit přírodními rostlinnými sloučeninami by mohla být slibným přístupem k prevenci stárnutí pokožky [3]. Kolagenáza (EC 3.4.24.3) patří do rodiny matrixových metaloproteináz a za fyziologických podmínek může degradovat trojšroubovicovou oblast kolagenu.mikronizovaná purifikovaná flavonoidní frakce 1000 mg používáKolagen je vláknitá složka ECM a hlavní strukturální protein v lidské kůži, který poskytuje strukturální podporu pro kosti, šlachy, vazy a krevní cévy. Elastáza (EC3.4.21.36) je proteolytický enzym zapojený do fyziologické degradace elastinu, proteinu ECM odpovědného za elasticitu kůže. Zvýšení aktivity elastázy bylo zjištěno u několika onemocnění, například u lupénky, dermatitidy, zánětlivých procesů a předčasného stárnutí kůže, které jsou úzce spojeny s tvorbou vrásek[4].

Cistanche může proti stárnutí

Navíc jednou z hlavních změn spojených s vráskami u starších osob je výskyt hyperpigmentovaných skvrn, také známých jako senilní lentigo nebo stařecké skvrny. Jsou přímo spojeny s nerovnoměrnou pigmentací v důsledku aktivity jiného enzymu souvisejícího se stárnutím, nazývaného tyrosináza. Tyrosináza (EC 1.14.18.1) je enzym omezující rychlost metabolismu melaninu. Katalyzuje hydroxylaci L-tyrosinu na 3,4-dihydroxyfenylalanin (L-DOPA), následovanou oxidací L-DOPA na dopachinon. Oxidační polymerací derivátů dopachinonu vzniká melanin [5]. Syntéza melaninových pigmentů je fyziologický proces, který hraje klíčovou roli v prevenci poškození kůže způsobeného UV zářením tím, že absorbuje UV sluneční záření. Přes své výhody způsobuje nadměrná produkce nebo abnormální hromadění melaninu kožní problémy, jako jsou typické stařecké skvrny. Vzhledem k tomu, že kůže je nejviditelnějším orgánem těla, předčasný výskyt vrásek a hyperpigmentace může u některých lidí také způsobit emoční stres.

Inhibitory všech výše popsaných enzymů tak mohou představovat stále důležitější složky v kosmetice a lécích k prevenci stárnutí kůže [6]. Přírodní rostlinné produkty by mohly být slibným zdrojem bioaktivních sloučenin. Zvláště zajímavé pro aplikace proti stárnutí, extrakty mají mnoho prospěšných funkcí, jako je inhibice enzymů souvisejících se stárnutím a schopnost vychytávat volné radikály.

V naší předchozí práci jsme popsali antioxidační kapacitu a několik biologických aktivit extraktů semen W. filifera [7]. Washington filifera (Lindl.) H. Wendl., běžně známý jako kalifornská vějířová palma nebo pouštní vějířová palma, je stálezelená palma pocházející z jižní Kalifornie, Arizony, Mexika a pouštních oblastí.oteflavonoidTato palma s výškou 15-20 m neprodukuje datle, ale má sladké a chutné jedlé plody. Tyto bobule mají velmi velká, hnědá semena obklopená tenkou dužinou (obrázek 1). W. filifera byla studována například s ohledem na její použití jako potenciálního zdroje nových celulózových vláken [8] a nutriční hodnotu jejích plodů [9]; fenolické složení a antioxidační aktivita nadzemních částí byly také popsány [10]. V naší předchozí studii jsme uvedli dobrou antioxidační aktivitu W.puritans vitamín Cvýtažky ze semen filifera, které se zdály být zdrojem molekul fenolů a flavonoidů[7]. Stejné extrakty vykazovaly inhibiční účinek na enzymy xanthinoxidázy a cholinesterázy, které představují klíčové enzymy v léčbě dny, respektive Alzheimerovy choroby.

Cílem této práce bylo rozšířit charakteristiku této rostliny a zhodnotit potenciální využití jejích extraktů jako prostředku proti stárnutí. Výtažky z dužiny a semen byly proto zkoumány pro jejich inhibiční aktivity vůči aktivitě elastázy, kolagenázy a tyrosinázy, protože představují klíčové cílové enzymy pro prevenci a léčbu fotostárnutí kůže; Kromě toho byly extrakty W. filifera vykazující nejlepší slibné aktivity analyzovány na jejich in vitro cytotoxicitu, buněčnou antioxidační aktivitu a fotoprotektivní účinky.

2.Výsledky a diskuse

2.1. Inhibice enzymů

Výtažky z dužiny a semen W. filifera byly nejprve testovány v koncentraci 50 ug/ml.sistancheVšechny extrakty z buničiny nevykazovaly významnou enzymovou inhibici (data nejsou uvedena). Enzymové inhibiční aktivity extraktů semen byly vypočteny a vyjádřeny jako polovina maximální inhibiční koncentrace (také). Tabulka 1 ukazuje hodnoty IC50 získané z extraktů semen ve srovnání s hodnotami standardních inhibitorů, aby se vyhodnotila inhibiční síla vzorků. Jak bylo možné pozorovat, všechny extrakty slabě inhibují aktivitu tyrosinázy s hodnotami IC50 vyššími než u standardní kyseliny kojové. Byla pozorována lepší inhibice proti aktivitám elastázy a kolagenázy a nejlepší účinky měly ethanolové (EEG a EES) a metanolové (MEG a MES) extrakty. Inhibiční aktivita těchto vzorků proti elastáze byla podobná; hodnoty IC50 se pohybovaly od 10,75 do 19,75 ug/ml a byly srovnatelné s pozitivní kontrolou (kyselina oleanolová; ICso=11,75 ug/ml）).

Místo toho byla aktivita kolagenázy silně inhibována extrakty, které vykazovaly vyšší účinnost než standardní epigalokatechin galát, přičemž IC50 bylo až třikrát nižší než u pozitivní kontroly. Vzhledem k tomu, že extrakty byly směsí několika sloučenin, koncentrace jednotlivých aktivních molekul byla ještě nižší než hodnota IC50, takže extrakty byly ještě slibnějšími zdroji inhibičních sloučenin.

2.2. Kinetická analýza pomocí Lineweaver-Burk Plotu

Svou pozornost jsme zaměřili na ethanolové a metanolové extrakty, abychom prozkoumali způsob inhibice těchto enzymů, protože měly lepší účinek proti aktivitám elastázy a kolagenázy. Kinetika inhibice byla stanovena pomocí Lineweaver-Burk dvojitého recipročního grafu. Testy byly prováděny zvýšením koncentrace příslušného substrátu v nepřítomnosti a přítomnosti extraktů v různých koncentracích.

Tabulka 2 ukazuje, že EEG a EES působily jako nekompetitivní inhibitory proti elastáze. Ve skutečnosti kinetická analýza těchto extraktů vytvořila rodinu paralelních čar pro zvýšení koncentrace extraktu (obrázek 2A,B). Tato kiretická analýza ukazuje, že tyto extrakty se mohou vázat na komplex enzym-substrát. Rovnovážná konstanta (Krs) byla vypočtena z překreslení úseků (1/Vmax) proti koncentraci inhibitoru, což vedlo k hodnotě 3,91 a 8,89 ug/ml pro EEG a EES, v daném pořadí. Způsob inhibice methanolických extraktů skutečně odhalil, že tyto extrakty působí jako nekompetitivní inhibitor. Ve skutečnosti byla zvýšením koncentrace extraktů nalezena rodina přímých čar s různými sklony, které se všechny protínají na úsečce (obrázek 2C, D). Tato analýza ukazuje, že extrakty se mohou vázat nejen na komplex enzym-substrát, ale také na volný enzym. Rovnovážné konstanty pro vazbu s volným enzymem (Kj) a s komplexem enzym-substrát (Kis) byly získány buď ze směrnice (Km/Vmax) nebo hodnot 1/Vmax (úsečky y) vynesených proti koncentraci inhibitoru, respektive.Konečně, kinetické chování kolagenázy při různých koncentracích extraktů je ukázáno na obrázku 3A-D. Všechny extrakty působily jako nekompetitivní inhibitory s hodnotami Krs v rozmezí 7.58-13.04 ug/ml (tabulka 2).

V naší předchozí práci jsme analyzovali alkoholové extrakty semen W. filifera pomocí HPLC-DAD-ESI/MS. Zdůraznili jsme, že hlavní fenolické sloučeniny těchto extraktů se skládají z flavan-3-olu [7]. Mezi nimi byly prokyanidiny typu B hlavními sloučeninami v extraktech semen W. filifera. Pozitivní vztah mezi stupněm polymerace prokyanidinů a schopností prokyanidinů inhibovat elastázu byl pozorován v předchozí práci [11,12]. Navíc byla popsána inhibiční aktivita některých prokyanidinových sloučenin proti elastáze a kolagenáze [13,14]. Synergické působení těchto sloučenin by mohlo přispět k vysvětlení významné inhibice methanolického extraktu W. filifera proti oběma enzymům.

2.3. Sluneční ochranný faktor

Fotoprotektivní aktivita je velmi důležitá pro sloučeniny s možnou aplikací na kůži, proto jsme stanovili ochranný sluneční faktor (SP) našich extraktů. SPF označuje schopnost látky absorbovat UV paprsky a chránit pokožku před toxickými účinky, které takové záření vytváří. Rostlinná kosmetika má velký potenciál v pohlcování UV záření, protože rostlinné extrakty obsahují polyfenoly, jako jsou flavonoidy nebo karotenoidy. Tyto sloučeniny s aromatickými kruhy mohou absorbovat UV záření, a proto mohou působit jako sluneční filtr. Vzhledem k tomu, že alkoholové extrakty semen W. filifera obsahují fenolické a flavonoidní sloučeniny [7], byly hodnoceny fotoprotektivní účinky těchto extraktů. Jak je uvedeno v tabulce 3, všechny analyzované extrakty v koncentraci 100 ug/ml vykazovaly hodnoty SPF v rozmezí od 1,52 do 3,35. Bylo zjištěno, že nejlepší fotoochranné účinky mají extrakty methanolu. UV paprsky jsou zodpovědné za kožní onemocnění a spouštějí procesy, které mají za následek stárnutí pokožky, oxidační stres a tvorbu vrásek. Snížení absorpce tohoto záření tedy nepřímo zvyšuje antioxidační aktivity a inhibici enzymů souvisejících se stárnutím.

2.4. Životaschopnost buněk a intracelulární hladina ROS

Protože oxidační stres je klíčovým faktorem způsobujícím stárnutí a poškození související s věkem, zkoumali jsme také, zda extrakty W. filifera inhibují tvorbu ROS v buněčném systému indukovanou HO 2-. V předchozím článku jsme popsali antioxidační aktivity extraktů semen pomocí spektrofotometrické metody (ABTS assay)[7]. Ukázalo se, že vzorky jsou dobrým zdrojem fenolických sloučenin s antioxidačními vlastnostmi, přičemž nejlepší aktivitu vykazuje MEG. Protože tento extrakt měl nejlepší antioxidační aktivitu a také velký potenciál, s ohledem na inhibiční aktivity proti testovanému enzymu (cholinesteráza, xantinoxidáza a zde uvedené enzymy stárnutí), rozhodli jsme se potvrdit antioxidační kapacitu MEG na buněčném modelu.

Nejprve byly zkoumány účinky extraktu W. filifera na životaschopnost buněk v buňkách HaCaT. Buněčná linie HaCaT z imortalizovaných lidských keratinocytů byla široce používána jako model pro studium epidermální homeostázy [15]. Za účelem stanovení bezpečnosti tohoto extraktu byly buňky ošetřeny různými koncentracemi vzorku po dobu 24 hodin a vyšetřeny pomocí MTT testu. Výsledky ukazují, že extrakt nebyl cytotoxický v HaCaT buňkách a byl pozorován pouze malý pokles (životaschopnost 80 procent) při 100 ug/ml (obrázek 4). Protože životaschopnost nebyla ovlivněna do 50 ug/ml (životaschopnost 96 procent), rozhodli jsme se provést další buněčné experimenty s použitím až této koncentrace extraktu. Hodnotili jsme hladiny ROS v buňkách před a po oxidativním stresu a po léčbě MEG. Studie byla provedena s použitím 21,7'-dichlorfluorescein diacetátu (DCFH-DA), který snadno difunduje buněčnou membránou a je hydrolyzován endogenními esterázami na DCFH. Rychlé zvýšení DCF ukazuje na oxidaci DCFH intracelulárními ROS, jako je např. H2O2. Jak je znázorněno na obrázku 5, inkubace H2O2 významně zvýšila tvorbu ROS v HaCaT buňkách, ale ošetření extraktem bylo schopno inhibovat H2O2-indukovanou produkci ROS v závislosti na dávce. Tyto výsledky tedy potvrzují antioxidační testy a naznačují, že MEG může také snižovat tvorbu ROS v buňkách.

Metanolický extrakt analyzovaný v tomto článku vykazoval vysoké antioxidační vlastnosti. Fenolové složení tohoto extraktu sestávalo z flavan-3-olu a prokyanidiny typu B byly hlavními fenolickými sloučeninami [7]. Prokyanidiny, skupina polyfenolických bioflavonoidů, vykazují širokou škálu biologických, farmakologických a chemoprotektivních vlastností proti volným kyslíkovým radikálům [16,17]. Předchozí studie ukázala, že antiradikálová aktivita prokyanidinů je silná ve vysokých koncentracích[18]. Kromě toho jsou proanthokyanidinové extrakty účinnějšími lapači superoxidových radikálů než antioxidační vitamin C a Trolox [19].

3. Materiály a metody

3.1.Chemikálie

Všechna chemická činidla byla získána jako čisté komerční produkty od Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA), pokud není uvedeno jinak, a použity bez dalšího čištění.

3.2. Příprava vzorku rostliny

Plody W. filifera byly sbírány v Tunisku v oblastech Gabes (G) a Sousse (S) a rostlinné materiály byly připraveny podle výše popsaného postupu [7]. Dužnina a semena byly odděleně lyofilizovány a poté byly rostlinné materiály (25 g) extrahovány ve 100 ml vody (AE, vodný extrakt), ethanolu (E, ethanolový extrakt) nebo methanolu (ME, methanolový extrakt) po dobu 72 hodin při teplotě místnosti. teplotě za stálého míchání. Po filtraci a odstředění při 10,000 otáčkách za minutu byly vodné extrakty lyofilizovány, zatímco získané ethanolové a methanolové extrakty byly zahuštěny ve vakuu za použití rotační odparky pro další analýzu. Vysušené složky (1 mg/ml) byly před použitím rozpuštěny v DMSO.

3.3. Enzymatická inhibice

Výsledky všech níže popsaných testů byly vyjádřeny jako procento slepé kontroly. Koncentrace extraktů vedoucí k 50% inhibici enzymové aktivity (IC50) byly stanoveny interpolací křivek dávka-odpověď. Inhibiční model byl stanoven provedením testů při různých koncentracích substrátu a nepřítomnosti a přítomnosti extraktů při různých koncentracích. Kinetická data byla analyzována pomocí Lineweaver-Burk grafu. Data z testů aktivity byla zaznamenána spektrofotometrem Ultrospec 2100 (Biochrom Ltd., Cambridge, UK).

3.3.1. Test inhibice tyrosinázy

Inhibice aktivity tyrosinázy extrakty W. filifera byla stanovena pomocí 3,4-dihydroxyfenylalaninu (L-DOPA) jako substrátu [20]. Reakční směs obsahovala 25 mM fosfátový pufr (pH 6,8), houbovou tyrosinázu (100 U/ml, konečná koncentrace), s nebo bez roztoku rostlinného extraktu. Poté byla do směsi přidána L-DOPA (0,5 mM) a aktivita byla stanovena sledováním zvýšení absorbance při 492 nm, vyplývajícího z tvorby dopachromového produktu. Koncentrační rozsah extraktu použitý pro test inhibice tyrosinázy hub byl 0-0,3 mg/ml. V testech prováděných bez rostlinných extraktů byl k reakční směsi přidán DMSO jako slepá kontrola. Kyselina kojová byla použita jako pozitivní kontrola.

3.3.2. Test inhibice elastázy

Inhibice elastázy byla testována sledováním uvolňování p-nitroanilinu během štěpení substrátu N-succ-(Ala)3-nitroanilidu (SANA) působením enzymu metodou popsanou [21], s mírné úpravy. Test byl proveden v 0,1 M Tris-HCl pufru (pH 8.{10}}). Vepřová pankreatická elastáza (3,3 ug/ml) byla inkubována s extraktem nebo bez něj po dobu 20 minut a po inkulaci byl přidán substrát (1,6 mM) a aktivita enzymu byla monitorována při 410 nm. Kontrola byla provedena s DMSO, zatímco kyselina oleanolová byla použita jako pozitivní kontrola.

3.3.3. Test inhibice kolagenázy

Kolagenáza z Clostridium histolyticum byla připravena v tricinovém pufru {{0}}.05 M, pH 7,5, obsahujícím 0,4 M NaCl a 0,01 M CaClz, a inkubována (1 U /ml) s testovacími vzorky v různých koncentracích po dobu 15 min. K zahájení reakce byl poté přidán syntetický substrát N-(3-[2-Fury]]-akryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), připravený ve stejném pufrovacím roztoku ( s konečnou koncentrací 0,8 mM). Absorbance byla monitorována při 340 nm [21]. Kontrola byla provedena s DMSO, zatímco epigalokatechin galát byl použit jako pozitivní kontrola.

3.4. Stanovení ochranného slunečního faktoru in vitro

Ochranný sluneční faktor extraktů W. filifera byl stanoven metodou UV absorbance podle metodiky popsané Mansurem et al. (1986) [22]. Absorbance extraktů (0,1 mg/ml) byly měřeny v rozsahu 290-320 nm, s přírůstky 5 nm, a v každém bodě byla provedena tři stanovení. SPF byl vypočítán použitím Mansurovy rovnice: kde CF=korekční faktor(10); EE(A)= erytemogenní efekt záření o vlnové délce λ;I（）= spektrum sluneční intenzity; Abs（λ= spektrofotometrické hodnoty absorbance při vlnové délce λ. Hodnoty EE(A） × I(A）) jsou konstantní. Stanovili je Sayre et al. (1979)[23] a jsou uvedeny v tabulce 4.

3.5. Buněčné kultury a intracelulární hladiny ROS

Buněčná linie keratinocytů lidské kůže HaCaT byla kultivována v Dulbeccově modifikovaném Eagleově médiu (DMEM) obsahujícím 10 procent fetálního bovinního séra (FBS, Gibco, NY, USA) a 1 procento penicilinu/streptomycinu při 37 stupních, ve zvlhčené atmosféře, s 5 procenta CO2. Životaschopnost buněk byla zjištěna kolorimetrickým testem 3-(4)5-dimethylthiazol-2-yl)-2.5-difenyltetrazolium bromidu (MTT), as dříve popsané s drobnými úpravami [24]. Po 24 hodinách inkubace s MEG v různých koncentracích (0-100 ug/ml) byly buňky značeny roztokem MTT po dobu 3 hodin při 37 stupních. Výsledné fialové sraženiny formazanu byly rozpuštěny v DMSO a absorbance každé jamky byla stanovena při 560 nm za použití čtečky mikrodestiček s referencí 630 nm.

Buněčné hladiny ROS byly stanoveny metodou DCFH-DA [25]. Buňky HaCaT byly ošetřeny různými koncentracemi MEG (0-50 ug/ml) po dobu 24 hodin. Poté byly buňky inkubovány s DCFH-DA (10 uM) při 37 stupních po dobu 30 minut. Po inkubaci byl do jamek přidán 1 mM HzO2 a intenzita fluorescence DCF byla okamžitě měřena pomocí fluorescenční čtečky destiček při excitační vlnové délce 485 nm a emisní vlnové délce 530 nm, odečítání v intervalech 5 minut po dobu 50 min.

3.6. Analýza dat

Všechny experimenty byly provedeny v triplikátech a data byla vyjádřena jako průměr 士 standardní odchylka （SD）. Statistické rozdíly byly vyhodnoceny pomocí softwaru GraphPad Prism verze 8 (San Diego, CA, USA). Srovnání mezi skupinami bylo provedeno jednosměrnou analýzou rozptylu (ANOVA) následovanou Tukeyovým vícenásobným srovnávacím testem. Hodnota Ap nižší než 0,05 byla považována za statisticky významnou.

4. závěr

Na závěr poprvé uvádíme, že výtažky ze semen W. filifera jsou účinné při inhibici klíčových enzymů, které se podílejí na stárnutí pokožky. Přirozené neboli „vnitřní“ stárnutí je fyziologický jev, který se vyskytuje ve všech lidských tkáních jako důsledek plynutí času. Kůže je však také vystavena vnějším faktorům vyvolávajícím stres, které jsou hlavní příčinou předčasného stárnutí pokožky. „Vnější“ stárnutí souvisí především s poškozením pojivové tkáně kůže UV zářením. UV záření způsobuje oxidační stres, který je zodpovědný za aktivaci enzymů degradujících ECM, a za vznik vrásek a stařeckých skvrn. Tento rukopis uvádí důležitost, kterou by mohla mít semena W. filifera v tomto kontextu. Jak je znázorněno na obrázku 6, extrakty by mohly působit jako prevence předčasného stárnutí tím, že působí současně na několika frontách.

Za prvé, extrakty mohou působit na začátku procesu svými fotoprotektivními účinky, a tím snižovat absorpci UV záření. Poté prokázaly dobrý antioxidační účinek s methanolovým extraktem, který zabraňuje tvorbě ROS v buněčném systému, bez buněčné toxicity. Nakonec všechny extrakty, zejména methanolické vzorky, mohly inhibovat kolagenázu, elastázu a tyrosinázu (tyrosinázu v menší míře). Celkově získané výsledky ukazují, že W. filifera by mohla být zdrojem bioaktivních molekul a povzbudit další experimenty s cílem izolovat jednotlivé aktivní složky odpovědné za pozorované aktivity.

Tento článek je převzat z Plants 2021, 10, 151. https://doi.org/10.3390/plants10010151 https://www.mdpi.com/journal/plants