Pohlavní dimorfismus kortikosteroidní signalizace během vývoje ledvin

Abstraktní:Sexuální dimorfismus zahrnuje rozdíly mezi biologickými pohlavími, které přesahují sexuální charakteristiky. U savců byly prokázány rozdíly mezi pohlavími, pokud jde o různé biologické procesy, včetně krevního tlaku a predispozice k rozvoji hypertenze v rané dospělosti, což může záviset na časných příhodách během vývoje a v novorozeneckém období. Nedávné studie naznačují, že signální dráhy kortikosteroidů (zahrnující signální dráhy glukokortikoidů a mineralokortikoidů) mají během tohoto specifického časového okna odlišnou tkáňově specifickou expresi a regulaci v závislosti na pohlaví, zejména vledvina. Tento přehled nastiňuje důkazy pro genderově rozdílnou expresi a aktivaci signálních drah renálních kortikosteroidů u savčího plodu a novorozence, od myši po člověka, které mohou upřednostňovat signalizaci mineralokortikoidů u žen a signalizaci glukokortikoidů u mužů. Určení účinků takových rozdílů může vrhnout světlo na krátkodobé a dlouhodobé patofyziologické důsledky, zejména u mužů.

klíčová slova:aldosteron; kortizol; mineralokortikoidní a glukokortikoidní receptory; novorozenci;ledvina; rozvoj;sexuálnídimorfismus

Kontakt:ali.ma@wecistanche.com

Kliknutím na Maca ginseng cistanche mořský koník pro funkci ledvin

1. Úvod

Kortikosteroidy (minerální kortikosteroidy a glukokortikosteroidy) jsou klíčové hormony, které se podílejí na funkci mnoha tkání k udržení homeostázy. Jejich hlavní působení závisí na jejich vazbě na mineralokortikoidní a glukokortikoidní receptory (MR a GR, v tomto pořadí). Nedávné studie zdůraznily určité časové okno běhemledvinavývoj, který je dobře zachován mezi savci, kde kortikosteroidní signální dráhy mají specifický vzor exprese a regulace ve vztahu k adaptaci plodu a novorozence, přechod z vody do vzdušného prostředí. Tento přehled nejprve představí stručný popis mineralokortikoidních a glukokortikoidních signálních drah (od biosyntézy aldosteronu a kortizolu k mechanismům regulace a působení MR a GR) běhemledvinarozvoj. Zvláštní důraz bude kladen na nedávné studie zdůrazňující sexuálně dimorfní projevy, které mohou mít patofyziologický dopad, zejména u mužů/chlapců, kteří mají v novorozeneckém období zvýšené problémy s adaptací a jsou vystaveni vyššímu riziku rozvoje časné hypertenze později v životě.

2. Mineralokortikoidní signální dráha

2.1. Regulace syntézy aldosteronu

Aldosteron, steroidní hormon vylučovaný Zona Glomerulosa (ZG), vnější vrstvou kůry nadledvin, je životně důležitý pro udržení homeostázy tělesných tekutin a elektrolytů prostřednictvím retence sodíku, a tím řídí krevní tlak [1]. Protože nadledvinový ZG nemá kapacitu ukládat aldosteron, jakmile je vytvořen, je regulace jeho sekrece neoddělitelně spojena s aktivací transkripce a také s posttranskripčními modifikacemi steroidogenních enzymů. Akutní produkce aldosteronu je řízena časným regulačním krokem vychytávání cholesterolu a přeměnou na pregnenolon, která je zprostředkována zvýšenou expresí a fosforylací steroidogenního akutního regulačního proteinu, StAR (kódovaného genem STAR). Pozdní regulační krok kontrolující expresi enzymů biosyntézy, zejména CYP11B2 (aldosteronsyntáza, kódovaná genem CYP11B2), reguluje chronickou produkci aldosteronu [2]. Biosyntéza aldosteronu v ZG je fyziologicky regulována angiotensinem II (Ang II), draslíkem (K plus) a v menší míře adrenokortikotropním hormonem (ACTH). Další bioaktivní sloučeniny (serotonin, leptin, endotelin, oxid dusnatý, katecholaminy, atriální natriuretický peptid, neuropeptidová substance P) jsou uvolňovány adipocyty, žírnými buňkami, chromafinními buňkami nebo nervovými zakončeními umístěnými v blízkosti buněk ZG, které také stimulují sekreci aldosteronu [ 3,4]. Stimulace renin-angiotenzinového systému (RAS) je zahájena zvýšenou aktivitou sympatiku, sníženým perfuzním tlakem v renálních aferentních arteriolách nebo sníženým obsahem sodíku v macula densa renálních distálních tubulů, což vede k uvolnění reninu z juxtaglomerulárních buněk. . Poté renin převádí cirkulující angiotenzinogen produkovaný játry na angiotenzin I (Ang I), který je následně štěpen angiotensin-konvertujícím enzymem (ACE) za vzniku oktapeptidu Ang II. Vazba Ang II na jeho receptor AT1 (AT1R) spouští uvolňování vápníku z intracelulárních zásob, což je hlavní determinant sekrece aldosteronu [3]. Malé zvýšení extracelulárního K plus depolarizuje glomerulózní buňku a také zvyšuje přítok vápníku přes napěťově řízené vápníkové kanály, které stimulují transkripci CYP11B2 a StAR [5]. Konečně ACTH samotný stimuluje sekreci aldosteronu akutně a přechodně, ale v menší míře než Ang II a Kplus. ACTH vazba na jeho melanokortinový receptor 2 (MC2R) stimuluje expresi StAR prostřednictvím aktivace adenylátcyklázy [6]. Během vývoje dochází k produkci fetálního aldosteronu v definitivní zóně, která je protějškem ZG kůry nadledvin dospělých. Zatímco exprese StAR a dalších důležitých enzymů během těhotenství postupně stoupá [7], exprese CYP11B2 se objevuje až kolem 24. gestačního týdne (GW) [8]; poté se zvyšuje, aby při narození dosáhl podobných hladin jako u dospělých nadledvin [9]. Detekovatelné plazmatické koncentrace aldosteronu se nacházejí u nedonošených novorozenců již od 25 GW [10], ale produkce aldosteronu zůstává nízká až do 30 GW [9]. Koncentrace aldosteronu se poté zvyšuje až do termínu [10] ve vztahu k neosyntéze plodu [11]. Nebyl prokázán žádný sexuální dimorfismus týkající se plazmatických hladin aldosteronu u plodu nebo při narození [12].

2.2. Mineralokortikoidní receptor (MR)

2.2.1. Genové, transkripty a varianty proteinů

MR patří do superrodiny jaderných receptorů, které zprostředkovávají sodík-zadržovací účinek aldosteronu v distálním nefronu [13]. Tento transkripční faktor je kódován genem NR3C2, který se u lidí nachází v lokusu 4q31.1–4q31.2 [14,15] a kóduje protein 984 aminokyselin (≈107 kDa) [16], organizovaný do čtyř odlišných strukturní domény: N-terminální doména (NTD), DNA vazebná doména (DBD), pantová oblast a ligand-vazebná doména (LBD). Ukázalo se, že funkce MR jsou modulovány sestřihovými variantami, kterým chybí buď exon 6, nebo oba exony 5 a 6 [17,18]. Dvě hlavní varianty lidské MR, nazvané MRA a MRB, jsou generovány alternativními iniciačními místy translace z methioninu 1 a 15, v daném pořadí. Tyto varianty MR vykazují odlišné transaktivační kapacity in vitro [19].

2.2.2. Mechanismy regulace exprese a aktivity MR

Dva alternativní promotory řídí expresi genu NR3C2 [20], proximální promotor P1, který je transkripčně aktivní ve všech cílových tkáních MR, a distální promotor P2, který je slabší a transkripčně aktivní v centrálním nervovém systému během specifických vývojových stádií resp. fyziologické situace [21]. Zvláště zajímavé je, že exprese tohoto jaderného receptoru, který transkripčně reguluje rovnováhu vody a sodíku, je také řízena na post-transkripční úrovni osmotickým tónem, zejména v distálních částech nefronu, kde převládají velké variace extracelulární tonicity [22 ]. Hladiny transkriptu MR klesají při hypertonicitě po náboru proteinu vázajícího RNA (RBP) Tis11b (tetradekanoyl forbolacetátem indukovatelné sekvence 11b), který fyzicky interaguje s 30 -nepřeloženou oblastí (30 -UTR) MR transkriptu , čímž moduluje svůj obrat mRNA v reakci na osmotický stres [23]. Naopak, hladiny MR transkriptu se zvyšují při hypotonicitě díky náboru lidského antigenu R (HuR), dalšího RBP, který interaguje s MR 30 -UTR v cytoplazmě renálních buněk a stabilizuje a zvyšuje hladiny MR, čímž moduluje MR signalizace [24]. Hromadné důkazy nyní podtrhují klíčovou roli mikroRNA (miRNA), další třídy post-transkripčních regulátorů, při kontrole exprese MR v ledvinách [25,26]. Kromě těchto regulačních mechanismů jsou MR aktivita a signalizace také modulovány posttranslačními modifikacemi, jako je ubiquitylace, SUMOylace, fosforylace a acetylace [13,27].

3. Glukokortikoidní signální dráha

3.1. Glukokortikoidní hormony a osa hypotalamus-hypofýza-nadledviny

Glukokortikoidní hormony (kortizol a kortikosteron u hlodavců) jsou efektorové hormony osy hypotalamus–hypofýza–nadledviny (HPA) neuroendokrinního systému a jsou produkovány nadledvinovou Zona fasciculata (ZF). Jako u všech steroidních hormonů začíná syntéza kortizolu z cholesterolu a je kriticky závislá na proteinu StAR, který usnadňuje rychlý odtok cholesterolu do mitochondrií. Poté mitochondriální enzym, cytochrom P450scc, kódovaný genem CYP11A1, štěpí postranní řetězec cholesterolu na pregnenolon. Pregnenolon pasivně difunduje do endoplazmatického retikula a je přeměněn na progesteron pomocí 2–3 -hydroxysteroid dehydrogenázy/∆5-∆4 izomerázy (3 HSD2), která je kódována genem HSD3B2. Specifická exprese P450c17 (kódovaného genem CYP17A1) katalyzuje 17 -hydroxylaci progesteronu na 17OH progesteron (17OHP). Poté je 17OHP postupně přeměněn na 11-deoxykortizol a poté na kortizol mikrosomálním P450c21 a mitochondriálním P450c11 (kódovaným genem CYP11B1). U hlodavců ZF postrádá P450c17 a progesteron je 21- a 11 -hydroxylován za vzniku kortikosteronu místo kortizolu jako dominantního glukokortikoidu u těchto druhů [2]. Syntéza glukokortikoidů je rozdílně regulována v pre- a postnatálních nadledvinách. U dospělých je produkce glukokortikoidů kriticky řízena aktivitou osy HPA. Různé podněty, jako je stres, nemoc nebo cirkadiánní rytmus, aktivují uvolňování hormonu uvolňujícího kortikotropin (CRH) z hypotalamu, který stimuluje přední hypofýzu a uvolňuje ACTH. ACTH působí na MC2R v adrenálním ZF k indukci syntézy kortikosteroidů z cholesterolu. Cirkulující glukokortikoidy zase uplatňují zpětnovazební regulační účinek na hypotalamus a na hypofýzu, aby inhibovaly uvolňování CRH a ACTH [2]. Fetální nadledvinky jsou schopny steroidogeneze brzy po svém vzniku kolem 7. GW. Současně hypofýza začne produkovat ACTH. Sekrece kortizolu se zvyšuje na maximum při 8–9 GW; poté klesá až na 14 GW. Tato cyklická sekrece glukokortikoidů fetálními nadledvinami není pod kontrolou ACTH jako u dospělých [28]. Hladiny ACTH skutečně zůstávají během tohoto období konstantní a stimulují nadledvinky k produkci androgenů. Exprese 3 HSD2, která dosahuje vrcholu při 9 GW, poté klesá po většinu druhého trimestru, což vede ke snížení syntézy glukokortikoidů. Při 24 GW se obnovuje exprese 3 HSD2 a sekrece glukokortikoidů. Kortizol v týdnech před porodem prudce stoupá a hraje klíčovou roli v diferenciaci a funkčním vývoji několika orgánů, jako jsou plíce [29]. Předpokládá se, že sexuální dimorfismus v aktivitě osy HPA je přítomen v raném dětství. V metaanalýze se předpokládá, že bazální aktivita osy HPA je vyšší u chlapců před 8. rokem věku, jak bylo hodnoceno hladinami kortizolu ve slinách [30]. Po 8 letech se zdálo, že se tento trend obrátil, což naznačuje pohlavně specifický vývoj metabolismu kortizolu kolem puberty [31] a možný účinek programování v raném věku [32]. Při narození však nebyl pozorován žádný rozdíl mezi dívkami a chlapci, pokud jde o bazální plazmatické hladiny kortizolu [33]. Metabolismus kortizolu závisí na aktivitě jaterních reduktáz A-kruhu (5- a 5- -reduktázy) a izoenzymů 11beta-hydroxysteroiddehydrogenázy (11HSD). Enzym 11 HSD1 je exprimován hlavně v játrech a tukové tkáni a regeneruje kortizol ze své neaktivní sloučeniny kortizon. Enzym 11 HSD2 katalyzuje reverzní reakci v renálních epiteliálních buňkách (viz bod 4.2). V dospělosti bylo zjištěno, že ženy mají nižší míru vylučování metabolitů kortizolu močí ve srovnání s muži, což bylo přičítáno menší redukci A-kroužku [34]. Tento pohlavní rozdíl v metabolismu kortizolu začíná kolem puberty, ve věku 10–11 let [31,35], a přetrvává u starších subjektů, což naznačuje, že regulační mechanismy jsou částečně nezávislé na gonadálních steroidech [36].

3.2. Glukokortikoidní receptor

3.2.1. Genové, transkripty a varianty proteinů

GR je zakládajícím členem superrodiny jaderných receptorů. Tento transkripční faktor, podobný MR, obsahuje 4 hlavní domény, NTD, DBD, LBD a pantovou oblast (HR) mezi DBD a LBD [37]. Je kódován genem NR3C1 umístěným na chromozomu 5 (5q31) u lidí. Gen NR3C1 obsahuje nejméně 10 exonů [38]. Alternativní sestřih exonu 9 produkuje dvě hlavní varianty proteinu, GR , což je aktivní varianta závislá na ligandu, a GR , což je varianta nezávislá na ligandu s dominantně-negativním účinkem [39]. GR je protein o délce 777 aminokyselin [40]. GR protein obsahuje místa pro posttranslační modifikace, jako je SUMOylace nebo fosforylace, které ovlivňují jeho transaktivační kapacity. 3.2.2. Mechanismy regulace exprese a aktivity GR GR je přítomen prakticky ve všech buňkách, ale citlivost na glukokortikoidy je závislá na tkáni a částečně zprostředkována regulací exprese GR. Tato regulace je zprostředkována na transkripční úrovni dvěma hlavními mechanismy: alternativním sestřihem 1. exonu a variabilitou délky N-terminální domény. První a netranslatovaný exon obsahuje devět sestřihových donorových míst dobře zachovaných mezi druhy, odpovídajících sestřihovým recipientním místům na exonu 2 [41], každé pod kontrolou specifického promotoru. Tato variabilita vede k alternativním izoformám mRNA, které se liší ve svých 50 -UTR oblastech. Exprese těchto izoforem mRNA je tkáňově specifická. 2. exon obsahuje osm různých startovacích kodonů, kódujících osm variant GR (GR-A, GR-B, GR-C1, GR-C2, GR-C3, GR-D1, GR-D2 a GR-D3) . Tyto varianty mají stejnou afinitu k ligandu, ale liší se pouze v transaktivačních kapacitách a cílových genech<10% of="" them="" common="" to="" all="" variants="" [42].="" 4.="" mechanism="" of="" corticosteroids="" action="" in="" renal="" principal="" cells="" 4.1.="" subcellular="" distribution="" in="" renal="" principal="" cells,="" corticosteroid="" hormones="" enter="" by="" passive="" diffusion="" and="" bind="" their="" respective="" receptor:="" aldosterone="" to="" the="" mr="" and="" cortisol="" (or="" corticosterone)="" to="" the="" gr.="" in="" the="" absence="" of="" ligands,="" corticosteroid="" receptors="" are="" associated="" with="" chaperone="" proteins="" [43–46],="" which="" protect="" receptors="" from="" degradation="" and="" maintain="" a="" conformation="" suitable="" for="" binding="" to="" ligands.="" thereafter,="" the="" binding="" of="" either="" ligand="" induces="" the="" dissociation="" of="" these="" chaperone="" proteins="" and="" conformational="" changes="" of="" mr="" and="" gr.="" 4.2.="" mineralocorticoid="" selectivity="" given="" the="" homology="" existing="" between="" the="" structure="" of="" aldosterone="" and="" cortisol/="" corticosterone,="" the="" high="" homology="" between="" mr="" and="" gr="" (their="" dbd="" and="" lbd="" have="" 94%="" and="" 57%="" homology,="" respectively="" [47]),="" and="" similar="" affinity="" of="" both="" receptors="" for="" glucocorticoid="" hormones,="" mr="" would="" be="" expected="" to="" be="" permanently="" occupied="" by="" glucocorticoid="">

Plazmatické koncentrace kortizolu jsou skutečně až 100 až 1000krát vyšší než koncentrace aldosteronu u savců. Ilegální obsazení MR glukokortikoidními hormony je však omezeno v hlavních buňkách ledvin a dalších epiteliálních buňkách působením 11 HSD2 [48–50]. Tento enzym oxiduje alkoholovou funkci nesenou uhlíkem 11 glukokortikoidních hormonů na ketonovou funkci, čímž vzniká 11 dehydrogenovaných derivátů (kortizon u lidí a 11-dehydrokortikosteron u hlodavců), které mají malou nebo žádnou afinitu k MR, nebo dokonce k GR [48]. 11 HSD2 tedy umožňuje aldosteronu selektivně působit na MR v epiteliálních buňkách, aby specificky uplatnil své biologické účinky na reabsorpci sodíku (obrázek 1). Kromě toho může MR také rozlišovat mezi aldosteronem a kortizolem, protože rychlost disociace je u glukokortikoidů mnohem rychlejší než u aldosteronu. K odlišným interakcím mezi NTD a LBD dochází, protože komplex aldosteron–MR přijímá strukturní konformaci, která se poněkud liší od konformace komplexu glukokortikoid–MR [51]. Nakonec se ukázalo, že povaha ligandu může také modifikovat cykličnost interakce mezi komplexem ligand-receptor s prvky citlivými na DNA [52].

4.3. Závaznost promotéra a nábor koregulátorů

Jakmile je komplex aldosteron–MR v jádře, váže se většinou jako homodimery na prvky reakce na mineralokortikoidy (MRE) umístěné v regulačních oblastech cílových genů MR [53]. Poté MR interaguje cyklickým, sekvenčním a/nebo kombinatorickým způsobem [52] s koregulátory transkripce [54] a některými bazálními transkripčními faktory nebo složkami mechanismu, aby se zvýšila aktivace transkripce a usnadnila se remodelace chromatinu zahrnující acetylaci/methylaci histonů. [53]. Je zajímavé, že Le Billan et al. použili buňky HK GFP-MR, linii lidských ledvinových buněk, která postrádá 11 HSD2, k dešifrování příslušného příspěvku MR/GR a aldosteronu/kortizolu v signalizaci renálních kortikosteroidů. Tito autoři poskytli důkazy, že MR a GR dynamicky a cyklicky interagují na stejném cílovém promotoru genu periodického cirkadiánního proteinu 1 (PER1) ve specifickém a odlišném transkripčním podpisu vazbou jako homo- nebo heterodimery [52]. V jádře může GR také vázat specifické sekvence zvané Glucocorticoid Response Elements (GREs). V každém typu buněk GR váže různé GRE. Vazba na GRE aktivuje nábor komplexů remodelujících chromatin a koregulátorů, jako je koaktivátor steroidních receptorů-1 (SRC-1), který umožňuje tvorbu komplexu iniciace transkripce. Byly také hlášeny negativní GRE (nGRE), které jsou zodpovědné za trans-represi cílových genů. Vazba na nGRE zabraňuje dimerizaci a umožňuje nábor korepresorů, jako jsou NCoR nebo SMRT [55]. GR může také zprostředkovat trans-represi cílových genů tetheringem, jak je popsáno pro MR [53] prostřednictvím interakcí s jinými transkripčními faktory, jako je NF-κB nebo AP-1 bez přímé vazby na DNA [56].

4.4. Cílové geny MR a GR

V nefronu citlivém na aldosteron se MR podílí na kontrole solné rovnováhy stimulací exprese iontových transportérů, jako je epiteliální Na plus kanál (ENaC) [57] a Na plus, K plus -ATPázová pumpa [58]. Tyto transportéry umožňují transepiteliální reabsorpci sodíku z lumen do intersticia. Aldosteron také stimuluje prostřednictvím aktivace MR časnou expresi séra a kinázy 1 regulované glukokortikoidy (SGK1) [59], která fosforyluje ubikvitin ligázu Nedd4-2, která zase řídí získávání ENaC z apikální membrány . V ledvinách byly také identifikovány další cílové geny, včetně serin/threonin kinázy bez lysin K kinázy (KS-WNK1) [60], N-myc down-regulovaného genu 2 (NDRG2) [61], glukokortikoidů- Induced Leucine Zipper protein (GILZ) [62], který také hraje klíčovou roli během časné fáze aldosteronových odpovědí [13] (obrázek 1). Nedávno bylo prokázáno, že aldosteron reguluje rytmicitu renální reabsorpce sodíku stimulací časné exprese genu PER1 [63]. Bylo také publikováno, že MR se může nepřímo vázat na rozpoznávací motivy pro jiné transkripční faktory (FOX, EGR1, AP1, PAX5) prostřednictvím mechanismů tetheringu, jak je uvedeno pro GR, a tak umožňuje modulaci exprese cílových genů [53]. V ledvinách dospělých, protože exprese 11 HSD2 je vysoká, se za bazálních podmínek neočekává žádný větší účinek GR signalizace [64].

Důležité je, že naše skupina nedávno identifikovala specifické časové okno během vývoje ledvin, během něhož je tato MR signalizace neúčinná kvůli down-regulaci exprese MR [65]. Vzhledem k tomu, že renální 11 HSD2 není exprimován během tohoto specifického perinatálního období, GR signalizace by měla být funkční v hlavních renálních buňkách s hladinami kortizolu v plazmě detekovatelnými ve fyziologických množstvích u novorozenců podobným hladinám u dospělých [66]. V tomto kontextu GR pravděpodobně aktivuje specifické renální cílové geny a také společné cílové geny s geny MR včetně SGK1 nebo GILZ. GR a MR-specifické cílové geny v hlavních renálních buňkách jsou shrnuty v tabulce 1.

Obrázek 1. Mineralokortikoidní a glukokortikoidní signalizace v hlavních renálních buňkách. Kortikosteroidní hormony vstupují pasivní difúzí a vážou svůj příslušný receptor: aldosteron na MR a kortizol/kortikosteron na GR. V nepřítomnosti ligandů jsou kortikosteroidní receptory spojeny s chaperonovými proteiny. Poté vazba kteréhokoli ligandu indukuje disociaci těchto chaperonových proteinů a konformační změny MR a GR. V jádře se komplex aldosteron/MR váže většinou jako homodimery na prvky reakce na mineralokortikoidy (MRE). Poté MR interaguje cyklickým, sekvenčním a/nebo kombinatorickým způsobem s transkripčními koregulátory a některými bazálními transkripčními faktory nebo složkami mechanismu pro zvýšení transkripce cílových genů, včetně epiteliálního Na plus kanálu (ENaC), Na plus , K plus -ATPase pumpa. Aldosteron také stimuluje časnou expresi sérové ​​a glukokortikoidy regulované kinázy 1 (SGK1), serin/threonin kinázy bez lysin K kinázy (KS-WNK1), N-myc down-regulovaného genu 2 (NDRG2) a glukokortikoidu -Indukovaný protein leucinového zipu (GILZ). Nedávno bylo prokázáno, že aldosteron stimuluje časnou expresi genu PER1, který patří do rodiny genů cirkadiánních hodin. Bylo také uvedeno, že MR se může nepřímo vázat na rozpoznávací motivy pro jiné transkripční faktory (FOX, EGR1, AP1, PAX5) prostřednictvím mechanismů tetheringu. V hlavních renálních buňkách převádí 11 HSD2 glukortikoidní hormony na kortizon nebo 11-dehydrokortikosteron, které mají malou nebo žádnou afinitu k MR nebo dokonce ke GR. 11 HSD2 tedy umožňuje aldosteronu selektivně působit na MR, aby specificky uplatnil své biologické účinky na reabsorpci sodíku. Navíc GR není nebo je aktivovaný slabě.MR: Mineralokortikoidní receptor; GR: glukokortikoidní receptor; MRE: Mineralocorticoid ResponseElement; GILZ: Glukokortikoidy indukovaný leucinový zip; ENaC: Epiteliální Na plus kanál; Sgk 1: sérem a glukokortikoidy regulovaná kináza 1; KS-WNK1: Bez lysin K kinázy; NDRG2: N-mycDown-regulovaný gen 2; PER 1: perioda hodinového genu 1; TM: Přepisovací stroje.

5. Pohlavní dimorfismus kortikosteroidní signalizace kromě ledvin

Několik studií poskytlo důkazy pro genderově rozdílnou expresi a aktivaci MR a GR. Ukázalo se například, že opakovaná prenatální léčba glukokortikoidy programuje funkci HPA pohlavně specifickým způsobem a tyto změny byly spojeny s modifikací exprese MR a GR v mozku a hypofýze dospělých [68]. Během vývoje stejní autoři pozorovali snížení GR mRNA v paraventrikulárním jádře, snížení MR mRNA a MR proteinu v hipokampu a zvýšení GR mRNA a GR proteinu v hipokampu. U morčat glukokortikoidy podávané matce snižovaly plazmatické koncentrace ACTH a kortizolu plodu a významně ovlivňovaly expresi hipokampálního MR proteinu, přičemž tento účinek byl největší u samců. Pohlavní rozdíly ve vzoru exprese GR a MR během vývoje mohou naznačovat různá okna zranitelnosti vůči prenatální expozici glukokortikoidům v životě plodu [69]. Ukázalo se také, že tyto kortikosteroidní receptory hrají klíčovou roli v modulaci stresové reakce v mozku krys. Po omezovacím stresu byl skutečně popsán příspěvek pohlaví a buněčného prostředí určitých oblastí mozku k expresi MR a GR [70]. Kromě toho stejná skupina pozorovala, že samice potkanů ​​vykazovaly odlišný mechanismus regulace poměru GR/MR v hipokampu po chronickém stresu, zatímco samice hypotalamu byly náchylnější než samci ke změně exprese kortikosteroidních receptorů v reakci na omezovací stres. Několik dalších studií také uvádělo genderové rozdíly v expresi a aktivaci MR v srdci [71–73]. Podobně se ukázalo, že glukokortikoidy uplatňují svůj účinek, zejména protizánětlivý, sexuálně dimorfním způsobem [74,75]. Kromě toho mohou estrogeny antagonizovat GR-indukci genu GILZ [76]. Zda by regulační mechanismy zapojené do exprese MR a GR nebo jejich koregulátorů mohly přispět ke vzniku sexuálního dimorfismu, je třeba ještě prozkoumat. Konečně, pokud je nám známo, pouze jedna studie zaznamenala sexuální dimorfismus pro expresi kortikosteroidních receptorů v ledvinách [77].

6. Genderové rozdíly ve vývoji ledvin a organogenezi

Organogeneze ledvin je komplexní proces zahrnující tři po sobě jdoucí struktury, z nichž pouze poslední, metanefros, dá definitivní ledvinu [78]. Metanefros se vyvíjí z kaudálních nefrotomů počínaje 5. GW a jeho zrání pokračuje až do konce prvního roku postnatálního života u lidí [65], s paralelním dozráváním nefronů a různých částí sběrných kanálků [79 ]. Renální ontogeneze začíná interakcí mezi mezenchymálními buňkami metanefros, které dají budoucí nefrogenní struktury, a ureterálním pupenem, epiteliální strukturou vyvinutou z Wolffova vývodu, ze kterého se postupnými dichotomiemi vyvine ledvinný sběrný systém. klasická větvená morfogeneze [80]. Každá větev z ureterálního pupenu je uzavřena metanefrickými buňkami, což jsou progenitorové kmenové buňky, které jsou schopné diferenciace na všechny typy buněk tvořících glomeruly a nefrony [81]. Tyto diferenciační mechanismy jsou možné díky dialogu mezi těmito dvěma strukturami a následné expresi různých signálních drah [82,83], z nichž některé jsou epigeneticky regulovány [84], a tudíž potenciálně ovlivněny nežádoucími účinky vyskytujícími se během těhotenství. Konkrétně Ang II, působící na AT1R, zprostředkovává růst a proliferaci renálních tubulů a větvenou morfogenezi [85]. Naproti tomu AT2 receptor (AT2R) ve fetální ledvině má antiproliferativní účinky v adrenomedulárních intersticiálních buňkách a působí tak, že zprostředkovává apoptózu [86]. Všechny tyto procesy mají zásadní význam pro stanovení konečného počtu nefronů na ledvinu, který přímo koreluje s funkcí ledvin v dospělosti. Nefrogeneze je v podstatě prenatální [87], mezi 5. a 36. GW, ale konkrétněji mezi 17. a 32. GW, což vede k celkovému počtu nefronů u lidí mezi 300, 000 a 1,1 milionu [88]. Ze studií provedených na pitvách nebo ledvinách dárců je známo, že při měření ledvin v dospělosti existuje sexuální dimorfismus, a to jak v absolutních hodnotách, tak v relativních hodnotách ve vztahu k tělesnému povrchu, přičemž u mužů jsou hodnoty významně vyšší [89,90 ]. To znamená, že počet celkových nefronů by mohl být vyšší u samců než u samic, i když to u lidského druhu nebylo formálně prokázáno. Je zajímavé, že tento sexuální dimorfismus vzniká časně během nefrogeneze, protože při ultrazvukovém měření byly zjištěny rozdíly v objemu ledvin u plodu během třetího trimestru těhotenství a také u kojenců do 4 let [91–93]. Na druhé straně nebyl v novorozeneckém období zjištěn žádný sexuální dimorfismus z hlediska počtu nefronů [94], ale tato data byla sotva studována na velmi malých kohortách. Renální ontogeneze u myši je relativně podobná lidskému druhu, s posloupností tří struktur, pronefros od 8. dne gestace (E8), mesonefros od E9 a metanefros od E11. Hlavní rozdíl je v tom, že u myších druhů nefrogeneze pokračuje postnatálně až do konce prvního týdne života. Navíc sexuální dimorfismus v objemu ledvin u myší v novorozeneckém období neexistuje [95], což pravděpodobně souvisí s tímto zpožděním v získávání nových nefronů. Objevuje se však významně, současně s histologickými strukturálními změnami, počínaje 50. dnem života, tj. po nástupu puberty u myší [95]. Přímý účinek testosteronu na objem ledvin byl prokázán na myších modelech mladých kastrovaných samců sekundárně vystavených testosteronu nebo vehikulu [96]. Trofický účinek testosteronu na vývoj orgánů, včetně ledvin, byl prokázán i v klinických studiích na lidech [97]. Sexuální dimorfismus v renální organogenezi již ve třetím trimestru u lidského druhu by tedy mohl souviset se sekrecí testosteronu u plodů mužského pohlaví in utero [98]. Studie prenatální expozice testosteronu ukázaly, že vyvíjející se ledvina je citlivá na testosteron [99], ale jeho důsledky pro vývoj ledvin za fyziologických podmínek u plodu, stejně jako molekulární interakce mezi androgenní signální dráhou a dalšími signálními cestami, které se účastní nefrogeneze, je třeba dále prokázat.

7. Zvláštnosti signalizace mineralokortikoidů a glukokortikoidů během vývoje ledvin

Ledviny jsou důležité pro tkáňové cíle signálních drah kortikosteroidů a hrají klíčovou roli v novorozeneckém období. Lidští novorozenci mají během prvních měsíců života poruchu reabsorpce sodíku a vody, což souvisí s částečnou tubulární rezistencí na aldosteron [65] doprovázenou vysokou plazmatickou hladinou aldosteronu během prvních měsíců života s progresivní normalizací na hodnoty u dospělých [10]. Naše skupina prokázala, že tato přechodná a částečná rezistence na aldosteron u donošených zdravých novorozenců souvisí s nízkou tubulární expresí MR při narození, zatímco MR je přechodně exprimována v ledvinách plodu mezi 14. a 24. GW [65]. Perinatální down-regulace renální exprese MR není specifická pro ledviny, protože se také nachází v jiných mineralokortikoidních cílových tkáních, jako je srdce a mozek, v rozporu s plícemi, kde je exprese MR udržována při narození [100]. Je zajímavé, že tato dočasná a tkáňově specifická exprese mineralokortikoidní signalizace se nachází jak u myší, tak u lidí, což prokazuje dobře zachovaný mechanismus, který může mít zásadní roli v adaptaci z vodního života in utero na pozemský život [65]. Tato variace v expresi MR nesouvisí s vysokou sekrecí aldosteronu při narození, protože aldosteron syntáza, knockout myši, vykazují stejnou neonatální down-regulaci renální MR exprese [101]. Nicméně všichni ostatní hráči mineralokortikoidní signální dráhy sledují stejný bifázický vzor exprese, jako je 11 HSD2 nebo ENaC [65]. Je zajímavé, že down-regulace 11 HSD2 v ledvinách se nenachází v placentě, kde je jeho exprese vysoká během prenatálního období, aby byl plod chráněn před nadměrnou impregnací mateřskými glukokortikoidy [66]. I když je mineralokortikoidní signální dráha během perinatálního období down-regulována, exprese GR je detekována v renálních tubulárních buňkách a plazmatické hladiny kortizolu jsou detekovatelné ve fyziologickém množství u novorozenců [66]. Vzhledem k tomu, že 11 HSD2 není detekováno, je renální glukokortikoidní dráha aktivována a nemůže být regulována, což podporuje myšlenku rovnováhy mezi mineralokortikoidními a glukokortikoidními signálními cestami během tohoto specifického období vývoje (obrázek 2). Abychom to shrnuli, mineralokortikoidní a glukokortikoidní signální dráhy jsou během fetálního života přísně regulovány a vykazují cyklická období vysoké a nízké aktivace v závislosti na vývojové fázi. Mineralokortikoidní signalizace přechodně klesá kolem perinatálního období, zatímco sekrece glukokortikoidů je nízká mezi 14 a 24 GW a exponenciálně se zvyšuje před narozením. Cyklická impregnace u mineralokortikoidů a glukokortikoidů se zdá být součástí procesu adaptace na mimoděložní život.

8. Sexuální dimorfismus v rovnováze mezi renálním mineralokortikoidem a glukokortikoidní signalizací

Několik nereprodukčních biologických procesů má sexuální dimorfní regulaci. Krevní tlak je jedním z nejznámějších, s rozdílem přibližně 15 mmHg mezi systolickým krevním tlakem u mužů a žen před menopauzou [102]. Tento vyšší systolický krevní tlak u samců je zachován u všech savců, což naznačuje dobře zachované regulační mechanismy [103]. U dospělých byl přímý účinek testosteronu na hladiny krevního tlaku prokázán na mnoha zvířecích modelech s kastrací a experimenty se substitucí testosteronu [104], zatímco ovariektomie neměla žádný vliv na krevní tlak u samic potkanů ​​[105]. Je známo, že pohlavní steroidy ovlivňují aktivitu RAS u dospělých: testosteron podporuje působení Ang II prostřednictvím AT1R, zatímco estrogen snižuje poměr AT1R/AT2R, což vyvolává odlišnou vnímavost k Ang II [103]. Naše skupina pozorovala pohlavně a orgánově specifickou regulaci cílových genů kortikosteroidní signální dráhy u dospělých myší spolu s vyšší expresí renálního 11 HSD2 u samic myší, což podporuje selektivitu aldosteronu pro jeho receptor [77]. Tato zvýšená aktivace mineralokortikoidní dráhy u žen nezvyšuje krevní tlak, ale mohla by být zaměřena na jemnější regulaci vylučování draslíku distálními tubuly, což je adaptivní mechanismus optimalizovaný pro mateřsko-fetální homeostázu během těhotenství [106]. Zvláště zajímavé jsou Zheng a kol. uvedli, že účinky aldosteronu na plazmatický K plus byly zesíleny u žen ve srovnání s muži. Tito autoři prokázali, že oba estrogenové receptory (ER a ER ) přispěly k estrogenem indukovanému poklesu plazmatické vazby K plus a AT1R u samic potkanů ​​po ovariektomii [107]. Údaje o vyvíjejícím se plodu a novorozenci jsou méně rozsáhlé. Zatímco u plodů mužského a ženského pohlaví během vývoje nebo při narození nebyl zaznamenán žádný rozdíl v expresi genů CYP11B1 a CYP11B2 nebo v koncentracích steroidů aldosteronu a kortizolu/kortikosteronu, byla prokázána exprese MR a 11 HSD2 podle pohlaví [77]. Naše skupina zaznamenala sexuální dimorfismus v renální expresi MR a jeho cílových genů během perinatálního období s vrcholem exprese MR, GR a mRNA cílových genů v 17,5 dnech gestace u samic myší, ale ne u samců. Tato data jsou v souladu s předchozí studií Codona et al., která ukazuje větší aktivitu 11 HSD2 v ledvinách ženského plodu v 15. dni gestace [108]. Zdá se, že u myší nerovnováha mezi signálními cestami MR a GR v ledvinách během prenatálního období podporuje signalizaci mineralokortikoidů u samic. To by mohlo poskytnout adaptační výhodu pro ženy, zejména v plicích, umožňující resorpci plicní tekutiny při porodu zvýšenou expresí ENaC [100]. Expresní profil nalezený u mužů by tedy mohl být interpretován jako nepříznivý a mohl by korelovat s vyšší morbiditou u chlapců při narození, zejména pokud jde o respirační adaptaci [101]. Navíc to naznačuje, že glukokortikoidní signální dráha může být přednostně aktivována u mužů, kteří pak mohou být náchylní k patologickému vývojovému programování po vystavení stresu nebo glukokortikoidům během těhotenství.

9. Důsledky v patofyziologii

Vzhledem k nerovnováze mezi glukokortikoidními a mineralokortikoidními signálními cestami mezi muži a ženami během perinatálního období je možné, že to může mít dopad za určitých patofyziologických podmínek s vyšší náchylností k rozvoji dlouhodobých následků u mužů. Hypotéza „Vývojového původu zdraví a nemoci“ způsobila oživení zájmu o pochopení faktorů regulujících vývoj plodu. Různé prenatální poruchy se mohou podílet na nástupu onemocnění v dospělosti, včetně kardiovaskulárních a renálních onemocnění. Naši hypotézu potvrzuje existence genderového rozdílu ve výskytu kardiovaskulárních onemocnění, jako je vysoký krevní tlak a srdeční selhání [109,110], což může být důsledek časných perinatálních příhod [111].

Omezení růstu plodu

U lidí způsobuje nadbytek glukokortikoidů u matky omezení růstu plodu a vyšší riziko hypertenze v pozdějším věku [112,113]. Studie (přehled v [114]) využívající zvířecí modely (modely ovcí, myší a potkanů) omezení růstu plodu, jako je expozice matky glukokortikoidům, omezení kalorií nebo bílkovin u matky a uteroplacentární insuficience, vedoucí buď ke snížení 11 HSD2 placentárních exprese nebo přímá nadměrná expozice plodu glukokortikoidům [115] (možná indukující nadměrnou aktivaci renální glukokortikoidní signální dráhy) identifikovaly změny ve vývoji ledvin jako společný rys. Je zajímavé, že v mnoha zvířecích modelech vývojového programování existuje sexuální dimorfismus mezi muži a ženami v načasování nástupu a závažnosti následků onemocnění. Ve skutečnosti stejná prenatální urážka neovlivňuje muže a ženy vždy podobně nebo ve stejné míře [114]. Tvorba nízkého množství nefronů může mít za následek zhoršenou funkci ledvin a následně může přispět k onemocnění. Na těchto zvířecích modelech se vyvinula programovaná hypertenze částečně v důsledku změněného vývoje ledvin, což má za následek trvalé snížení počtu nefronů u potomků [116]. U lidí počet nefronů koreluje s porodní hmotností, s odhadovaným přírůstkem přibližně 237 426 nefronů na kilogram další porodní hmotnosti, ale je výraznější u mužů [117], což může vést k rozdílnému vývojovému programování hypertenze mezi samci a samice. Důležité je, že období nefrogeneze se u jednotlivých druhů liší, přičemž lidé a ovce dokončí tvorbu nefronů před narozením, zatímco hlodavci pokračují v tomto vývojovém procesu po narození [116]. To znamená, že jak prenatální, tak postnatální prostředí může ovlivnit vybavení nefronů u myši. Kromě vybavení nefrony byly v těchto modelech demonstrovány modifikace v expresi různých hráčů na signálních drahách kortikosteroidů [114], které nejsou vždy spojeny se snížením počtu nefronů, což naznačuje, že do vývojového programování jsou zapojeny jiné mechanismy. vysokého krevního tlaku [118]. AT1R a AT2R, které jsou exprimovány v ledvinách časně během gestace, mají sexuálně dimorfní změněnou expresi na zvířecích modelech nadměrné fetální impregnace glukokortikoidy, což obvykle vede ke zvýšené expresi AT1R u mužů v závislosti na načasování prenatálního poškození [114] ]. Předběžné výsledky z naší skupiny také naznačují sníženou expresi renální MR exprese při perinatální nadměrné expozici glukokortikoidům s rozvojem časné hypertenze, zejména u mužů.

• Předčasnost

Předčasný porod je spojen se zvýšeným rizikem mortality a morbidity [119]. Studie u předčasně narozených dětí prokázaly, že muži mají vyšší riziko morbidit včetně syndromu respirační tísně, sepse s pozdním nástupem, bronchopulmonální dysplazie a intraventrikulárního krvácení než ženy [120] a dlouhodobých neurologických následků [121]. Kromě toho mají bývalí předčasně narozené děti vyšší riziko rozvoje časné hypertenze v dospělosti [122], zejména u předčasně narozených chlapců [123]. Tyto rozdíly mezi pohlavími nejsou spojeny s variabilitou funkce osy HPA [33], ale mohou souviset s vyšší senzitivitou k podávání prenatálních kortikosteroidů u chlapců [124]. Na modelu nedonošenosti vyvolané lipopolysacharidy, vytvořeném naší skupinou, jsme pozorovali, že u bývalých předčasně narozených mužů se v dospělosti vyvine významná hypertenze [125]. Tato hypertenze je spojena s časnými změnami v expresi různých hráčů kortikosteroidní signální dráhy během novorozeneckého období. Předčasně narozené myši skutečně vykazovaly velmi silnou orgánově specifickou renální aktivaci exprese cílových genů kortikosteroidů (ENac, Sgk1 a Girlz), což kontrastuje s významným poklesem exprese MR v ledvinách. To naznačuje aktivaci GR glukokortikoidy, které mohou programovat renální funkční nebo molekulární změny vedoucí k hypertenzi v dospělosti. Vývojové programování hypertenze bylo popsáno Barkerem et al. [126] a vyvolané mechanismy byly hlavně nefronové vybavení vedoucí ke kompenzační hyperfiltraci existujících nefronů s glomerulosklerózou a proteinurií v dospělosti [127]. Jen málo studií prokázalo sexuální dimorfismus u této redukce nefronu vyvolané nedonošením u lidí, ale u myší nebyly prokázány žádné rozdíly [128]. V našem modelu se u dříve předčasně narozených myších samců vyvinula hypertenze nezávisle na snížení počtu nefronů v dospělosti, což naznačuje další zahrnuté patofyziologické mechanismy. Kromě toho studie na lidech naznačila, že programování hypertenze by se mohlo přenést na děti bývalých předčasně narozených dětí; malá velikost vzorku však neumožňovala rozlišit sexuální dimorfismus [129]. V našem myším modelu jsme identifikovali přenos dysregulace krevního tlaku na následující generace od předčasně narozených novorozenců až po třetí generaci. Je zajímavé, že tato vaskulární anomálie byla přenášena pouze u mužů ve druhé a třetí generaci, což je spojeno s významným zvýšením exprese cílového genu kortikosteroidů Girlz a globální hypometylací jeho promotoru [125]. Tato studie ukazuje, že predispozice k arteriální hypertenzi by mohla být u mužů epigeneticky naprogramována událostmi vyskytujícími se během perinatálního období u předchozích generací prostřednictvím sexuálně dimorfní nepříznivé aktivace kortikosteroidní signální dráhy.

• Přechodné

Pseudo-hypoaldosteronismus Během časného postnatálního období může být renální dysbalance mineralokortikoidů a glukokortikoidů ohrožena také infekcí močových cest. V případě infekce horních močových cest (pyelonefritida) se základní uropatií nebo bez ní se skutečně může objevit přechodný, nefyziologický pseudohypoaldosteronismus [130]. To má za následek hyponatrémii, hyperkalémii, metabolickou acidózu a těžkou dehydrataci s velkou ztrátou sodíku močí, což vyžaduje suplementaci sodíku v akutní fázi. Přechodný pseudohypoaldosteronismus se vyznačuje tím, že se vyskytuje hlavně u kojenců mladších 3 měsíců, ve vztahu k nízké renální expresi MR v tomto období vývoje [65] a v 88 procentech případů u mužů [130]. Patofyziologie může souviset se zánětem (prostřednictvím aktivace NF-κB faktoru), který dále snižuje expresi a aktivaci MR [131]. Protože exprese MR je u mužů v perinatálním období nižší [77], zdají se být citlivější na pokles její exprese. Navíc vzestup sekrece glukokortikoidů vyvolaný zánětem může vyvolat nadměrnou aktivaci renálního GR u mužů (kteří mají nižší hladiny 11 HSD2) a vyvolat alternativní nežádoucí účinky. Celkově lze říci, že časné perinatální příhody, které zpochybní signální dráhy renálních kortikosteroidů, mohou vyvolat krátkodobé a dlouhodobé následky v závislosti na pohlaví. Obrázek 3 shrnuje takovou nerovnováhu renálních kortikosteroidů mezi biologickými pohlavími a související poruchy v průběhu vývoje.

10. Závěry

Stručně řečeno, tento přehled byl zaměřen na prokázání existence časového okna během vývoje ledvin se specifickou a časovou nerovnováhou v aktivaci glukokortikoidní a mineralokortikoidní signalizace spolu se sexuální dimorfní regulací. Zdá se, že tato pohlavně diferencovaná exprese a aktivace signálních drah renálních kortikosteroidů u savčího plodu a novorozence, konzervovaná mezi druhy, upřednostňuje signalizaci mineralokortikoidů u žen a signalizaci glukokortikoidů u mužů. Tyto rozdíly mohou vyplývat z přímých nebo nepřímých účinků pohlavních steroidů; ve hře jsou však pravděpodobně další mechanismy. Rozluštění takových regulačních mechanismů může vrhnout světlo na krátkodobé a dlouhodobé patofyziologické důsledky, výrazně pro muže, a přispět ke zlepšení prevence a zvládání pohlavně dimorfních onemocnění, jako je časná hypertenze.

1 Université Paris-Saclay, Inserm, Physiologie et Physiopathologie Endocriniennes, CEDEX,94276 Le Kremlin-Bicêtre, Francie; margaux.laulhe@universite-paris-saclay.fr (ML);laurence.dumeige@aphp.fr (LD); thi-an.vu@universite-paris-saclay.fr (TAV);imene.hani@universite-paris-saclay.fr (IH); eric.pussard@aphp.fr (EP);marc.lombes@universite-paris-saclay.fr (ML); say.viengchareun@universite-paris-saclay.fr (SV)

2 Oddělení dětské endokrinologie, Hôpital Universitaire Robert Debre, Francie & Université de Paris, 75019 Paříž, Francie

3 Service de Génétique Moléculaire, Pharmacogénétique et Hormonologie, Hôpital de Bicêtre, Assistance Publique-Hôpitaux de Paris, 94275 Le Kremlin-Bicêtre, Francie

Reference

1. Seccia, TM; Caroccia, B.; Gomez-Sanchez, EP; Gomez-Sanchez, CE; Rossi, praktický lékař Biologie normální zona glomerulosa a adenom produkující aldosteron: patologické důsledky. Endokr. Rev. 2018, 39, 1029–1056.

2. Miller, WL Steroidogenesis: Nezodpovězené otázky. Trendy Endocrinol. Metab. 2017, 28, 771–793.

3. Lefebvre, H.; Duparc, C.; Naccache, A.; Lopez, A.-G.; Castanet, M.; Louiset, E. Parakrinní regulace sekrece aldosteronu ve fyziologických a patofyziologických stavech. Vitam. Horm. 2019, 109, 303–339.

4. Wils, J.; Duparc, C.; Cailleux, A.-F.; Lopez, A.-G.; Guiheneuf, C.; Boutelet, I.; Boyer, H.-G.; Dubessy, C.; Cherifi, S.; Cauliez, B.; a kol. Neuropeptidová látka P reguluje sekreci aldosteronu v lidských nadledvinách. Nat. Commun. 2020, 11, 2673.

5. MacKenzie, SM; van Kralingen, JC; Davies, E. Regulace sekrece aldosteronu. Vitam. Horm. 2019, 109, 241–263.

6. Clark, BJ ACTH Action on Star Biology. Přední. Neurosci. 2016, 10, 547.

7. Melau, C.; Nielsen, JE; Frederiksen, H.; Kilcoyne, K.; Perlman, S.; Lundvall, L.; Langhoff Thuesen, L.; Juul Hare, K.; Andersson, A.-M.; Mitchell, RT; a kol. Charakterizace lidské adrenální steroidogeneze během fetálního vývoje. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2019, 104, 1802–1812.

8. Naccache, A.; Louiset, E.; Duparc, C.; Laquerriere, A.; Patrier, S.; Renouf, S.; Gomez-Sanchez, CE; Mukai, K.; Lefebvre, H.; Castanet, M. Časová a prostorová distribuce žírných buněk a steroidogenních enzymů v lidské fetální nadledvince. Mol. Buňka. Endocrinol. 2016, 434, 69–80.

9. Johnston, ZC; Bellingham, M.; Filis, P.; Soffientini, U.; Hough, D.; Bhattacharya, S.; Simard, M.; Hammond, GL; Král, P.; O'Shaughnessy, PJ; a kol. Lidské fetální nadledviny produkují kortizol, ale nedetekovatelný aldosteron během druhého trimestru. BMC Med. 2018, 16, 23.

10. Martinerie, L.; Pussard, E.; Yousef, N.; Cosson, C.; Lema, I.; Husseini, K.; Mur, S.; Lombes, M.; Boileau, P. Aldosteron-signaling Defect zhoršuje plýtvání sodíkem u velmi předčasně narozených novorozenců: Studie Premaldo. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2015, 100, 4074–4081.

11. Ishimoto, H.; Jaffe, RB Vývoj a funkce lidské fetální kůry nadledvin: Klíčová složka ve feto-placentární jednotce. Endokr. Rev. 2011, 32, 317–355.

12. Abdel Mohsen, AH; Taha, G.; Kamel, BA; Maksood, MA Hodnocení vylučování aldosteronu u kojenců s velmi nízkou porodní hmotností. Saudi J. Kidney Dis. Transpl. 2016, 27, 726–732.

13. Viengchareun, S.; Le Menuet, D.; Martinerie, L.; Munier, M.; Pascual-Le Tallec, L.; Lombes, M. Mineralokortikoidní receptor: Pohledy do jeho molekulární a (pato)fyziologické biologie. Nucl. Recept. Signál. 2007, 5, e012.

14. Ventilátor, YS; Eddy, RL; Byers, MG; Haley, LL; Henry, WM; Nowak, NJ; Ukazuje, TB Gen lidského mineralokortikoidního receptoru (MLR) se nachází na chromozomu 4 v Q31.2. Cytogenet. Cell Genet. 1989, 52, 83–84.

15. Morrison, N.; Harrap, SB; Ariza, JL; Boyd, E.; Connor, JM Regionální chromozomální přiřazení genu lidského mineralokortikoidního receptoru k 4q31.1. Hučení. Genet. 1990, 85, 130–132.

16. Zennaro, MC; Keightley, MC; Kotelevtsev, Y.; Conway, GS; Soubrier, F.; Fuller, PJ Genomová struktura lidského mineralokortikoidního receptoru a identifikace exprimovaných izoforem. J. Biol. Chem. 1995, 270, 21016–21020.

17. Lema, I.; Amazit, L.; Lambert, K.; Fagart, J.; Blanchard, A.; Lombes, M.; Corradi, N.; Viengchareun, S. HuR-závislá editace nové varianty sestřihu mineralokortikoidních receptorů odhaluje osmoregulační smyčku pro homeostázu sodíku. Sci. Rep. 2017, 7, 4835.

18. Zennaro, MC; Souque, A.; Viengchareun, S.; Poisson, E.; Lombes, M. Nová lidská MR sestřihová varianta je ligand-nezávislý transaktivátor modulující účinek kortikosteroidu. Mol. Endocrinol. 2001, 15, 1586–1598.

19. Pascual-Le Tallec, L.; Demange, C.; Lombes, M. Proteinové formy lidského mineralokortikoidního receptoru A a B produkované alternativními překladovými místy zobrazují různé transkripční aktivity. Eur. J. Endocrinol. 2004, 150, 585–590.

20. Zennaro, MC; Le Menuet, D.; Lombes, M. Charakterizace genu 5/-regulační oblasti lidského mineralokortikoidního receptoru: Důkaz pro diferenciální hormonální regulaci dvou alternativních promotorů prostřednictvím neklasických mechanismů. Mol. Endocrinol. 1996, 10, 1549–1560.