Fytochemické profilování a antidiabetické nefropatické mechanismy vodního extraktu *Cistanche Tubulosa* na základě analýzy vztahu spektrálního účinku

Fytochemické profilování a mechanismy antidiabetické nefropatieCistanche tubulosaVodný extrakt založený na analýze vztahu spektrálního účinku

Abstraktní

Počet slov: 236 Diabetická nefropatie (DN) představuje jednu z nejzávažnějších mikrovaskulárních komplikací diabetes mellitus a je celosvětově primární příčinou konečného onemocnění ledvin. Přírodní rostlinné materiály z tradiční čínské medicíny (TCM) poskytují vícecílové terapeutické kandidáty pro zpomalení renální fibrózy a zmírnění poškození ledvin.Cistanche tubulosa, klasická tonická bylina „pouštního ženšenu“ zaznamenaná vShennong Bencao Jing, vykazuje zdokumentované renoprotektivní farmakologické vlastnosti. Tento přehled syntetizuje předklinické experimentální důkazy in vitro, které přijaly strategii vztahu spektrálního účinku pro screening bioaktivních složekCistanche tubulosavodný extrakt. UPLC‑Orbitrap‑MS/MS byl použit k charakterizaci komplexních chemických profilů sekvenčně eluovaných frakcí. K hodnocení cytoprotektivní aktivity byl použit model poškození lidských renálních tubulárních epiteliálních buněk HK‑2 indukovaný stavem s vysokým obsahem glukózy a vysokým obsahem tuku. Částečná regrese nejmenších čtverců a šedá korelační analýza identifikovaly kandidátní bioaktivní sloučeniny. Následné buněčné testy potvrdily, že kyselina 8-epideoxyloganová a kyselina geniposidová mohou zmírnit poškození buněk HK-2, upregulovat aktivitu antioxidačních enzymů, potlačit prozánětlivé mediátory a modulovat epiteliálně-mezenchymální přechod (EMT) inhibicí signální kaskády PI3K-Akt. Tento článek shrnuje fytochemické charakteristiky, in-vitro farmakologická pozorování a molekulární mechanismy, diskutuje o omezeních současného výzkumu a nabízí perspektivy pro další studiumCistanche tubulosaproti diabetické nefropatii.

Klíčová slova: Cistanche tubulosa; vodný extrakt; vztah spektrálního účinku; UPLC-Orbitrap-MS/MS; diabetická nefropatie; buňky HK-2; dráha PI3K-Akt; renální fibróza

1. Úvod

Globální prevalence diabetu mellitu stále roste v důsledku změn ve stravovacích zvyklostech, míry obezity a stárnutí populace; epidemiologické projekce naznačují, že do roku 2030 bude celosvětově více než 360 milionů diabetických pacientů [1]. Přibližně u 20 %–35 % lidí žijících s diabetem 2. typu se nakonec vyvine diabetická nefropatie, která podstatně zvyšuje riziko morbidity a mortality [2‑3]. Progresivní renální intersticiální fibróza způsobená oxidačním stresem, trvalým zánětem a tubulárním epiteliálně-mezenchymálním přechodem představuje centrální patologický znak DN. Současné klinické intervence nemohou zcela zvrátit pokročilou renální fibrózu, takže nová vícesložková terapeutická činidla získaná z přírodních rostlinných zdrojů přitahují rostoucí zájem výzkumu [4‑5].

Cistanche tubulosa(čeleď Orobanchaceae) je známá tonizující bylina v praxi TČM. Historické záznamy materia-medica naznačují, že její terapeutické indikace zahrnují nedostatek jangu ledvin, vyčerpání esence krve, lumbago, slabost kostí a šlach a také střevní suchou zácpu [6‑7]. Moderní fytochemické výzkumy to dokazujíCistanche tubulosaobsahuje bohaté fenylethanoidní glykosidy, iridoidní glykosidy, lignany, betain, aminokyseliny a sacharidy, které propůjčují antioxidační, anti-ageingové, reprodukčně-ochranné a nefroprotektivní bioaktivity [8‑9]. Předchozí farmakologické výzkumy této byliny se zaměřovaly převážně na fenylethanoid-glykosidové frakce; menší pozornost byla věnována ve vodě rozpustným složkám získaným z vodného odvaru, které odpovídají klinickým tradičním formám odvarových přípravků [10].

Vztah spektrálního účinku představuje výzkumnou strategii široce používanou pro studie komplexních extraktů TCM. Tento analytický pracovní postup spojuje chemický fingerprinting s vysokým rozlišením pomocí hmotnostní spektrometrie s daty z testů bioaktivity pomocí chemometrických algoritmů ke korelaci intenzit chromatografických píků s farmakologickými odečty, aby bylo možné lokalizovat kandidátní účinné látky z vícesložkových bylinných směsí [11]. Kombinace získávání otisků prstů pomocí UPLC-Orbitrap-MS/MS, vyhodnocení buněčného modelu poškození HK-2 s vysokým obsahem glukózy a vysokého tuku a vícerozměrné statistické modelování umožňuje výzkumníkům skrínovat potenciální anti-DN složky z komplexuCistanche tubulosavodného extraktu a dále ověřovat jejich cytoprotektivní mechanismy na molekulární úrovni [12].

Tento přehled reorganizuje publikované předklinické výsledky experimentů in vitro z existující literatury [12] a rozšiřuje kontextové pozadí o patogenezi DN aCistanche tubulosafytologie. Hlavní cíle jsou: (1) shrnout výsledky profilování chemických složek pro sekvenčně eluované frakceCistanche tubulosavodní extrakt; (2) zavést pracovní postup screeningu vztahu spektrálního účinku pro bioaktivní složky anti-DN; (3) interpretovat buněčně-molekulární mechanismy sloučenin olova kyseliny 8‑epideoxyloganové a kyseliny geniposidové proti poškození renálních tubulárních buněk; (4) poukázat na současná omezení studie a poskytnout výhled pro následný výzkum.

2. Přehled materiálů a experimentálního pracovního postupu (syntéza z publikovaných preklinických zpráv)

Poznámka: Všechna nezpracovaná experimentální data jsou získána z veřejně dostupné publikované literatury [12]; tento článek nereprodukuje žádné originální grafy z přístrojů ani fotografie vytvořené laboratoří. Úplné záznamy primárních experimentů mohou čtenáři vyhledat v citovaném zdroji.

2.1 Rostlinný materiál a příprava frakcí vodného extraktu

Rostlinný materiál:Cistanche tubulosadužnaté stonky byly sklizeny z uměle vypěstovaných populací v Hotanu v oblasti Xinjiang, taxonomicky ověřené specialisty na farmakologii rostlin [12]. Surové bylinkové plátky byly opakovaně odvařeny destilovanou vodou za podmínek vroucí vody. Spojené vodné filtráty byly vakuově zahuštěny do suché pasty surového vodného extraktu. Pro gradientovou eluci byla použita makroporézní pryskyřicová kolonová chromatografie AB‑8: postupně s použitím čisté vody, 20 %, 40 %, 60 %, 80 %, 95 % roztok ethanolu. Šest separátních eluátových frakcí (označených A-F) bylo shromážděno, zakoncentrováno a vysušeno na práškové vzorky [12]. Každá prášková frakce byla znovu rozpuštěna ve směsi methanol-voda pro následnou přípravu vzorku UPLC-Orbitrap-MS/MS.

2.2 Přístroje, činidla a zdroje buněk

Analytická platforma: Vanquish UHPLC spojená s hmotnostním spektrometrem Orbitrap Exploris 120 s vysokým rozlišením (Thermo Fisher Scientific). Použita chromatografická separace na analytické koloně Waters ACQUITY UPLC BEH C18 (2,1 mm x 100 mm, 1,7 um). Mezi další hlavní laboratorní vybavení patřila čtečka mikrodestiček MultiskanGO, buněčný inkubátor, nízkoteplotní vysokorychlostní centrifuga, inverzní optický mikroskop [12].

Lidská renální tubulární epiteliální epiteliální buněčná linie HK-2 byla zakoupena pro vytvoření modelu poškození ledvin in vitro, experimenty využívaly pasáže buněk mladších 30 generací. Referenční standardní sloučeniny: kyselina 8‑epideoxyloganová, kyselina geniposidová, pinoresinol, syringin, betain (čistota větší nebo rovna 98 %). Soupravy biologických testů obsahovaly reagencie testu MTT, SOD, biochemické detekční soupravy GSH‑Px; soupravy ELISA zaměřené na IL‑1, TNF‑, TGF‑; Primární protilátky Western blot včetně ‑SMA, kolagenu Ⅰ, E‑cadherinu, PI3K, p‑PI3K, Akt, p‑Akt [12].

2.3 Experimentální pracovní postup

1. Chemické snímání otisků prstů: UPLC-Orbitrap-MS/MS fungovala v režimu elektrosprejové ionizace s kladnými i zápornými ionty. Program gradientové eluce s použitím systému mobilní fáze kyselina mravenčí-acetonitril / kyselina mravenčí-voda. Porovnání spekter fragmentů MS/MS s referenčními standardy a publikovanými databázemi hmotnostních spekter bylo použito k charakterizaci fytochemických složek napříč šesti elučními frakcemi [12]. 2.Konstrukce modelu poranění in vitro: Buňky HK‑2 byly vystaveny kombinované vysoké dávce glukózy (30 mmol·L⁻¹ glukózy) plus palmitát, aby se simuloval fenotyp renálního tubulárního poškození s vysokým obsahem glukózy a vysokým obsahem tuku relevantní pro diabetickou nefropatii. Sériové testy s gradientem koncentrace určily optimální podmínky modelování: palmitát 700 μmol·L⁻¹ společně inkubovaný po dobu 24 hodin produkoval stabilní snížení životaschopnosti buněk [12]. 3.Screening aktivity frakce: Různé koncentrace šesti elučních frakcí (A-F) byly aplikovány na poškozené buňky HK-2. Test MTT měřil míru životaschopnosti buněčné proliferace za účelem vyhodnocení cytoprotektivní účinnosti každé frakce [12]. 4.Chemometrická analýza spektrálního efektu: Peak‑area data of chromatographic signals from each fraction and corresponding HK‑2 cell‑viability bio‑activity data were imported into SIMCA 14.1 and SPSSPRO platforms. Partial‑least‑squares regression calculated VIP values and regression coefficients; grey‑correlation‑analysis output correlation‑degree index. Compounds satisfying VIP > 1 and grey‑correlation‑index >0,7 bylo zařazeno do užšího výběru jako kandidátské bioaktivní složky proti DN [12]. 5.Ověřovací experimenty s jednou sloučeninou: Kandidátské čisté sloučeniny identifikované modelováním spektrálního účinku byly individuálně aplikovány na buňky HK-2 poškozené vysokým obsahem glukózy a vysokým obsahem tuku. Test MTT ověřil účinnost ochrany buněk. Biochemické soupravy detekovaly antioxidační indikátory SOD, GSH‑Px; ELISA kvantifikovala hladiny prozánětlivých faktorů (IL‑1, TNF‑, TGF‑). Western blot test detekoval markerový protein související s EMT a také hojnost exprese proteinu souvisejícího s dráhou PI3K-Akt [12].

2.4 Statistické zpracování

Data měření buněčného experimentu byla vyjádřena jako průměr ± standardní odchylka. Víceskupinová srovnání přijala jednocestnou ANOVA následovanou post-hoc testováním; P< 0.05 was considered statistically significant difference. Chemometric spectral‑effect‑modelling relied on SIMCA and online‑platform grey‑correlation‑analysis modules [12].

3. Syntéza experimentálních poznatků z publikované literatury

3.1 Fytochemická charakterizace frakcí sekvenční eluce

Prostřednictvím srovnání retenčního času, hmotnosti prekurzorových iontů a informací o fragmentech MS/MS s referenčními standardy a publikovanými spektrálními databázemi bylo předběžně identifikováno celkem 72 sdílených fytochemických složek v šestiCistanche tubulosaeluční frakce vodného extraktu [12]. Kategorie detekovaných sloučenin zahrnovaly iridoidní glykosidy, fenylethanoidní glykosidy, lignany, betain, aminokyseliny, fenolové kyseliny, deriváty sacharidů a další sekundární metabolity. Distribuce složek vykazovala zjevné rozdíly závislé na frakci: frakce eluovaná vodou (A) a frakce ethanolu s nízkou koncentrací (B, C) byly bohatší na vysoce polární ve vodě rozpustné molekuly včetně betainu, několika iridoidních glykosidů; Frakce eluované ethanolem s vyšší koncentrací akumulovaly lignany a fenylethanoid-glykosidy s relativně nižší polaritou [12].

3.2 Screening cytoprotektivní aktivity elučních frakcí na poraněných buňkách HK‑2

Léčba vysokým obsahem glukózy a vysokým obsahem tuků významně snížila míru přežití renálně-tubulárních epiteliálních buněk HK-2, čímž se úspěšně reprodukuje in vitro fenotyp poškození ledvinných buněk časného stadia diabetické nefropatie [12]. Mezi šesti frakcemi eluovanými gradientem, frakce A (voda-eluát), frakce B (20%-ethanolový eluát), frakce C (40%-ethanolový eluát) mohly výrazně zvýšit životaschopnost poškozených buněk HK-2, zatímco frakce D-F prokázaly velmi omezené ochranné účinky. 50 mg·L⁻¹ sloužily jako optimální intervenční koncentrace pro následný model spektrální relace2-

3.3 Výsledky chemometrického screeningu ve vztahu ke spektrálnímu účinku

Partial‑least‑squares regression and grey‑correlation‑analysis jointly screened eight candidate compounds which simultaneously satisfied VIP > 1 and grey‑correlation‑degree >0,7: kyselina 8‑epideoxyloganová, kyselina geniposidová, pinoresinol, betain, syringin, tubulosid A, akteosid, cistanosid E [12]. Tyto složky byly považovány za hlavní přispěvatele k anti-DN cytoprotektivní aktivitěCistanche tubulosafrakce vodného extraktu. Čtyři reprezentativní čisté látky (kyselina 8‑epideoxyloganová, kyselina geniposidová, pinoresinol, syringin) byly vybrány pro další testy jednosložkové buněčné validace [12].

3.4 Jednosložková cytoprotektivní validace

Výsledky MTT tomu nasvědčovalyKyselina 8‑epideoxyloganová a kyselina geniposidovávykazovaly výrazné ochranné účinky a obnovily životaschopnost buněk HK-2 poškozených vysokým obsahem glukózy a vysokým obsahem tuku, zatímco pinoresinol a syringin vykazovaly v testovacích koncentracích relativně slabou aktivitu [12]. Proto se tyto dvě iridoid-glykosidové molekuly staly klíčovými hlavními sloučeninami pro následný mechanistický průzkum.

Antioxidačně-biochemická detekce: ve srovnání s modelovou skupinou poranění léčba pomocí kyseliny 8‑epideoxyloganové nebo kyseliny geniposidové významně zvýšila hladinu aktivity antioxidačních enzymů SOD a GSH‑Px, zmírnila intracelulární zátěž oxidativního stresu vyvolanou stimulací s vysokým obsahem glukózy a vysokým obsahem tuku [12].

Měření zánětlivého faktoru ELISA: obě sloučeniny by mohly významně snížit hladinu sekrece prozánětlivých mediátorů IL-1, TNF- a TGF- uvolňovaných poškozenými renálně-tubulárními buňkami, čímž by se potlačila lokální zánětlivá odpověď spojená s progresí renální fibrózy [12].

Analýza exprese proteinů Western-blot: Stimulace s vysokým obsahem glukózy a vysokým obsahem tuku spustila typický fenomén epiteliálně-mezenchymálního přechodu (EMT) v buňkách HK-2: zvýšená exprese profibrotického marker-proteinu-SMA a kolagenu Ⅰ, mezitím se významně snížila abundance proteinu E-cadherinového markeru adherentního spojení. Po intervenci sloučeninou byla exprese -SMA a kolagenu Ⅰ snížena, exprese E-cadherinu se obnovila. Kromě toho se evidentně snížila hladina fosforylace klíčových proteinů signální dráhy PI3K‑Akt (p‑PI3K/PI3K, poměr p‑Akt/Akt) [12]. Tato pozorování ukázala, že kyselina 8-epideoxyloganová a kyselina geniposidová mohou omezit abnormální aktivaci signální kaskády PI3K-Akt. Inhibicí nadměrné aktivace PI3K-Akt dvě iridoidní glykosidové složky potlačily poškození oxidativním stresem, zánětlivou odezvu a proces EMT tubulárních buněk, aby se zmírnilo poškození renálních tubulárních buněk spojené s patologií diabetické nefropatie [12].

4. Diskuse

Patogeneze diabetické nefropatie představuje multifaktorový interaktivní patologický proces: hyperglykémie-lipotoxicita vyvolává výbuch oxidačního stresu, stimuluje silné uvolňování prozánětlivých cytokinů, řídí renální tubulární epiteliální-mezenchymální přechod, nakonec progredující do ireverzibilní renální intersticiální fibrózy [13-14]. Signální osa PI3K-Akt zaujímá centrální regulační pozici v tomto patologickém řetězci; trvalá nadměrná aktivace PI3K‑Akt podpoří EMT progresi renálních tubulárních epiteliálních buněk, urychlí ukládání extracelulární matrix a rozvoj fibrotických lézí [15‑16]. Farmakologické látky zacílené na dráhu PI3K‑Akt mají tedy slibnou hodnotu pro výzkum intervence DN.

Cistanche tubulosavodný odvar odpovídá tradičnímu režimu klinického podávání v praxi TCM, obsahuje bohaté ve vodě rozpustné aktivní složky. Předchozí farmakologické výzkumy věnovaly pozornost především lipofilním fenylethanoid-glykosidovým frakcím získaným alkoholovou extrakcí; biologické funkce iridoidních glykosidů a betainu obohacených vodním extraktem si zaslouží hlubší pozornost [17‑18]. Analytická strategie vztahu mezi spektrem a účinkem účinně zužuje kandidátské bioaktivní látky z komplexních vícesložkových bylinných extraktů bez zdlouhavého opakovaného izolačního čištění každé jednotlivé sloučeniny, čímž nabízí efektivní řešení pro moderní farmakologický výzkum vícesložkových přípravků TCM [19‑20].

Podle souhrnných výsledků preklinických experimentů in vitro se kyselina 8-epideoxyloganová a kyselina geniposidová (složky iridoidně-glykosidového typu oddělené odCistanche tubulosave vodě rozpustné frakce) by mohly chránit renální tubulární epiteliální buňky HK-2 před poškozením zprostředkovaným vysokým obsahem glukózy a vysokým obsahem tuku. Jejich cytoprotektivní mechanismus zahrnuje tři vzájemně propojené dimenze: posílení buněčné antioxidační obranné kapacity, omezení nadměrné sekrece prozánětlivých faktorů a potlačení progrese epiteliálního mezenchymálního přechodu řízeného PI3K-Akt, což společně zmírňuje patologické změny na buněčné úrovni napodobující rané stadium diabetické nefropatie [12]. To poskytuje nové předklinické důkazy na molekulární úrovni vysvětlující nefroprotektivní účinnostCistanche tubulosavodný extrakt. Mezitím modelování spektrálních efektů také ukázalo, že betain, pinoresinol lignanového typu a také několik dobře zdokumentovaných fenylethanoidových glykosidů mohou také přispívat k bioaktivitě anti-DN; synergické vícesložkové kombinované účinky by neměly být ignorovány v komplexních systémech bylinných extraktů [12].

Tento soubor existujících výzkumů stále nese pozoruhodná omezení: Za prvé, všechna mechanistická pozorování jsou odvozena z experimentů s buněčným modelem HK-2 in-vitro, u nichž chybí ověření in vivo zvířecího modelu. Systém buněčné kultury nemůže plně rekapitulovat integrovanou komplexitu patologie celoorganické diabetické nefropatie včetně glomerulárních lézí, renálních intercelulárních přeslechů a změn metabolické homeostázy in vivo. Za druhé, toto šetření se zaměřilo hlavně na dvě sloučeniny iridoid-glykosid olova; synergická interakce mezi více aktivními složkami v surovém vodném extraktu vyžaduje další průzkum. Za třetí, neexistuje žádný výzkum farmakokinetického chování kyseliny 8-epideoxyloganové a kyseliny geniposidové: biologická dostupnost, tkáňová distribuce a situace metabolické transformace po podání in vivo zůstávají neznámé. Za čtvrté, zatím nejsou k dispozici žádné důkazy z klinických studií na lidech a proveditelnost klinické transformace vyžaduje další posouzení.

Pro navazující výzkumné směry: zvířecí modely in-vivo diabetické-nefropatie (STZ-indukované diabetické-krysy/myší modely) lze použít k ověření in-vivo renoprotektivní účinnosti kyseliny 8-epideoxyloganové a kyseliny geniposidové, sledovat patologii ledvinové tkáně, hladinu proteinu v moči a biochemické variace v séru. Vícesložkové kombinované intervenční skupiny by měly být uspořádány tak, aby zkoumaly potenciální synergické účinky různých kategoriíCistanche tubulosasložky. Proveďte farmakokinetické studie k objasnění charakteristik absorpce, distribuce a metabolismu sloučenin olova. V pozdější fázi je zapotřebí dobře navržené předklinické hodnocení bezpečnosti a klinický výzkum před převedením těchto poznatků základního výzkumu do praktických terapeutických referencí.

Z širší perspektivy teorie TCM,Cistanche tubulosafunkce k tonizaci ledvin-jangu a doplnění esence-krev. Moderní farmakologické studie odhalily jeho ochranné účinky na reprodukční systém, kostní metabolismus a poškození ledvin. Různé typy chemických složek mohou odpovídat různým farmakologickým projevům této byliny TCM. Multi-omics kombinovaný analytický pracovní postup se vztahem ke spektrálnímu efektu bude sloužit jako výkonný nástroj pro dešifrování vícecílových farmakologických charakteristik klasických tonických bylin v budoucím výzkumu modernizace TCM.

5. Závěr

1. Fytochemické profilování založené na UPLC-Orbitrap-MS/MS detekuje 72 sdílených složek napříč postupně eluovanými frakcemiCistanche tubulosavodný extrakt, pokrývající iridoidní glykosidy, fenylethanoidní glykosidy, lignany a další ve vodě rozpustné složky. Eluční frakce vody a etanolu s nízkou koncentrací vykazují významnou cytoprotektivní aktivitu pro renální tubulární epiteliální buňky HK-2 poškozené vysokým obsahem glukózy a vysokým obsahem tuku. 2. Chemometrické modelování vztahu spektrálního účinku identifikuje osm kandidátských sloučenin aktivních proti DN. Mezi nimi dva iridoidní-glykosidy: kyselina 8-epideoxyloganová a kyselina geniposidová vykazují silné ochranné účinky na poškozené buňky HK-2 v testech validace jedné sloučeniny. 3. 8-epideoxyloganová kyselina a geniposidová kyselina mohou zvýšit SOD, GSH-Px antioxidační zánětlivou aktivitu mediátoru NF1, potlačit TIL-GF-GF uvolňují, modulují proteinové markery související s EMT a částečně uplatňují cytoprotektivní účinky inhibicí nadměrně aktivované signální dráhy PI3K-Akt. 4. Současné důkazy jsou omezeny na experimenty na buněčné úrovni in vitro. Pro urychlení translačního výzkumu těchto bioaktivních látek pocházejících zCistanche tubulosa.

Poděkování

Tento narativní přehled syntetizuje veřejně publikované preklinické experimentální zdroje. Gratitude goes to the original research team for completing the plant‑extraction, mass‑spectrometry and cellular‑molecular laboratory‑work.

Reference

[1] Carracher A M, Marathe PH, Close K L. Mezinárodní diabetologická federace 2017[J]. Journal of Diabetes, 2018, 10(5): 353‑356.

[2] Fakhruddin S, Alanazi W, Jackson K E. Diabetem indukované reaktivní formy kyslíku: Mechanismus jejich vzniku a role při poškození ledvin[J]. Journal of Diabetes Research, 2017, 2017: 8379327.

[3] Lavoz C, Rayego-Mateos S, Orejudo M, et al. Mohl by být IL‑17A novým terapeutickým cílem u diabetické nefropatie?[J]. Journal of Clinical Medicine, 2020, 9(1): 272.

[4] Tu P F, Jiang Y. Aktualizujte výzkum klasické literatury o Cistanches Herba[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2022, 47(20): 5670-5679.

[5] Xiang X J, Zhang PP, Ye Q Q a kol. Studie účinku Xiaoyu Xiezhuo Decoction při prevenci a léčbě renální fibrózy u myší s diabetickou nefropatií[J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2022, 39(4): 442‑449.

[6] Fu Z, Liu Y. Farmakologické pokroky roduCistanche: Recenze[J]. Fytoterapeutický výzkum, 2021, 35(8): 4234‑4252.

[7] Jiang Y, Wang Y-F. Tradiční použití, fytochemie a farmakologieCistanche tubulosa[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2020, 259: 112968.

[8] Ran Z, Ju B-W, Cao L, et al. Mikrobiome-metabolomická analýza odhaluje potenciální účinek verbascosidu na zmírnění kognitivního poškození u db/db myší[J]. Jídlo a funkce, 2023, 14(8): 3488-3508.

[9] Zhi Y-J, Zhen Y-Q, Tian W, et al. Pokrok ve výzkumu chemických složek a farmakologických účinkůCistanche deserticolaa prediktivní analýza ukazatelů kvality (Q-Marker)[J]. Čínské tradiční a bylinné drogy, 2021, 52(9): 2758-2767.

[10] Liu T-H, Ma C, Wang B-C a kol. Účinné složky a mechanismus vodného extraktu Cistanches Herba proti diabetické nefropatii na základě vztahu spektrální účinek[J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2024, 41(10): 1313-1323.

[11] Zhang Y, Li H-Y. Strategie výzkumu vztahu spektrálního efektu pro extrakty komplexu tradiční čínské medicíny[J]. Chinese Pharmaceutical Journal, 2022, 57(12): 969-975.

[12] Liu TH, Ma C, Wang BC, et al. Účinné složky a mechanismus vodného extraktu Cistanches Herba proti diabetické nefropatii na základě vztahu spektrální účinek[J]. Chin J Mod Appl Pharm, 2024, 41(10): 1313-1323.

[13] Xu Z, Xiang X, Su SL a kol. Multi-omická analýza odhaluje patogenezi diabetického onemocnění ledvin u myší db/db a léčebné mechanismy kombinace multi-bioaktivních sloučenin ze Salvia miltiorrhiza[J]. Frontiers in Pharmacology, 2022, 13: 987668. [14] Zhou R, Liao J, Cai D, et al. Nupr1 zprostředkovává renální fibrózu prostřednictvím aktivace fibroblastů a podpory epiteliálně-mezenchymálního přechodu[J]. FASEB Journal, 2021, 35(3): e21381.

[15] Dian M-J, Li J, Zhang X-L a kol. MST4 negativně reguluje EMT, invazi a metastázy HCC buněk inaktivací osy PI3K/AKT/Snail1[J]. Journal of Cancer, 2021, 12(15): 4463‑4477.

[16] Zhang B-B, Zeng M-N, Li B-K a kol. Arbutin zmírňuje akutní poškození ledvin vyvolané LPS inhibicí zánětu a apoptózy prostřednictvím dráhy PI3K‑Akt/Nrf2[J]. Fytomedicína, 2021, 82: 153466.

[17] Wu Y-Y, Zhang X-H. Iridoidní glykosidy z rodCistanche: Fytochemie a bioaktivity[J]. Natural Product Research, 2023, 37(14): 2311-2326.

[18] Cao L, Ju B-W, Ran Z a kol. Ochranné účinky fenylethanolových glykosidů herba cistanche na myši s cholestatickým onemocněním jater[J]. Čínský žurnál farmakovigilance, 2023, 20(3): 286-291.

[19] Wang L, Chen J-B. Průběh aplikace korelace spektra-účinek při screeningu bioaktivních látek tradiční čínské medicíny[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2023, 48(7): 1801–1808.

[20] Li M-X, Huang S-Q. Chemometricky asistovaný screening bioaktivních složek z rostlinných přípravků: minirecenze[J]. Journal of Separation Science, 2024, 47(6): 2300897.