Technologie přípravy granulí Wenyang Tongbian

Abstraktní:

ObjektivníStanovit a optimalizovat technologii přípravy granulí Wenyang Tongbian.

MetodyVodný odvar byl extrahován. Jako indexy byl použit obsah echinaceového glykosidu v monarchdrug a výtěžková sloučenina. K optimalizaci extrakce granulí Wenyang Tongbian byl použit ortogonální test L9 (34). Nejlepší tvarovací proces byl optimalizován na základě obtížnosti granulace, tvarovatelnosti a výtěžnosti částic. Výsledky Optimální extrakce zahrnovala přidání 10 násobku vody a extrakci 3krát, pokaždé 1 hodinu. Nejlepší proces tvorby: typ pomocné látky byl dextrin, poměr pomocných látek byl 1∶0,9 a nejlepší smáčedlo byl 85% ethanol. Závěr Proces extrakce a formování je stabilní a přiměřený, jednoduchý a proveditelný, s dobrou reprodukovatelností, což může poskytnout základ pro průmyslovou výrobu granulí Wenyang Tongbian.

Klíčová slova: Wenyang Tongbian granule; ortogonální test; extrakce; lití

NOVÁ BYLINNÁ FORMULE PRO LEDVINYNEDOSTATEK YANG

Podpůrná služba Wecistanche

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Zácpa s nedostatkem janguje běžné u starších lidí a žen. Léčebnou metodou by neměla být jednoduchá očista. Metodou Warming Yang lze dosáhnout dobrých výsledků [1]. Wenyang Tongbian Granule jsou nemocniční přípravek vyvinutý na základě klinických zkušeností profesora Lin Aizhena z provinční nemocnice tradiční čínské medicíny Hubei s léčbou funkční zácpy u starších osob. Skládá se z Cistanche deserticola, skořicové kůry, astragalus a Atractylodes macrocephala. Ve vzorci má Cistanche deserticola funkce tonizace jangu ledvin a prospěšné esenci a krvi a je hlavním lékem, který ohřívá jang; skořicová kůra má funkce prohřívání meridiánů a odblokování krevních cév, doplňování ohně a podpory jangu; astragalus má funkce zvedání jangu a doplňování qi, stahující boláky a podporující regeneraci tkání; a Atractylodes macrocephala má funkce posilování sleziny a doplňování qi, sušení vlhkosti a podpory diurézy.

Studie ukázaly, že fenylethanolové glykosidy jsou hlavními účinnými složkami Cistanche deserticola [2]. Mezi nimi jsou echinacosid a verbascosid charakteristické složky pro kontrolu kvality Cistanche deserticola, jak je specifikováno v čínském lékopisu. Liu Xianhong a kol. [3] dospěli prostřednictvím in vivo studií na lidech k závěru, že Cistanche deserticola je vhodná pro klinickou léčbu zácpy a může léčit jak symptomy, tak hlavní příčinu. Mezi hlavní chemické složky skořicové kůry patří těkavé oleje, polysacharidy, flavonoidy atd. Moderní farmakologické studie prokázaly, že skořicová kůra má farmakologické účinky, jako je vazodilatace, protižaludeční vředy a antibakteriální účinky [4]. Polysacharidy Astragalus, flavonoidy a astragalosid IV jsou hlavní chemické složky, které mají imunomodulační účinky [5]. Atractylodes macrocephala má účinky na posílení sleziny a regulaci poruch střevní flóry a může být klinicky použit k léčbě gastrointestinální dysfunkce [6]. Původní recept se používá hlavně v odvarech čínské medicíny, ale má nevýhody, jako je nepohodlí při odvaru, velké dávkování a nepohodlí při přenášení. Aby byl tento klinický zkušený recept široce používán v klinické praxi, byl vyvinut do granulí. Tento experiment používal jako indikátory výtěžnost pasty a obsah echinakosidu, hlavní účinné látky v hlavním léku, pokračoval v tradičním způsobu odvaru vody a používal ortogonální testovací metodu L9 (34) k optimalizaci množství přidané vody. , doba odvaru a doby odvaru v procesu extrakce pro získání nejlepšího extrakčního procesu. Současně byl zkoumán proces formování granulí, aby se určil stabilní a rozumný proces formování, který poskytuje reference pro pilotní výrobu, kontrolu kvality a klinickou aplikaci přípravku [7-8].

1 Přístroje a činidla

1.1 Nástroje

Aliance e2695vysoce výkonný kapalinový chromatograf, detektor diodového pole 2998 (Waters, USA), ES225SMDR 1/100,000 analytická váha (Precisa, Švýcarsko), UPT-11-10T ultračistý stroj na vodu (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), KQ-500VDE dvoufrekvenční CNC ultrazvukový čistič (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Zkušební léky

Plátky vína Cistanche(číslo šarže: 2322050113, vyrobeno ve Vnitřním Mongolsku), skořicové plátky (číslo šarže: 2323020103, vyrobeno v Guangxi), plátky astragalus (číslo šarže: 2323020105, vyrobeno v Gansu), Atractylodes macrocephala number1203 vyrobeno v 800203 kusech ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., všechny plátky jsou identifikovány jako autentické Chen Shuhe, hlavním lékárníkem InstitutuTradiční čínská medicínaprovinční nemocnice tradiční čínské medicíny Chu-pej a jsou kvalifikováni podle vydání z roku 2020čínština LékopisČást I). Referenční látka echinakosidu(číslo šarže: 111670-201907, čistota: 91,8 %, China Food and Drug Inspection Research).

Dextrin (číslo šarže: 230102), kukuřičný škrob (číslo šarže: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), sacharóza (číslo šarže: TF28221205), mikrokrystalická celulóza (číslo šarže: TF471211001), laktóza (šarže: TF471211001 TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 Metody a výsledky

2.1 Stanovení obsahu echinakosidu

2.1.1 Chromatografické podmínky: Jako chromatografická kolona byl použit Agilent 5 TC-C18 (250 nm x 4,6 mm, 5 um); jako mobilní fáze A byl použit methanol, jako mobilní fáze B byl použit 0,1% roztok kyseliny mravenčí, gradientová eluce (0-17 min, 26,5 %A; 17-20 min, 26,5 % —> 29,5 %A; 20-54 min,

29,5 % A, 54-55 min, 29,5 % → 26,5 % A; 55-60min, 26,5 %A); průtok 1.{11}} ml·min-1; teplota kolony 30 stupňů; detektor diodového pole, detekční vlnová délka 330 nm; injekční objem 10μL; teoretický počet pater vypočítaný na základě píku echinakosidu by neměl být menší než 3000[9].

2.1.2 Příprava referenčního roztoku

Vezměte přiměřené množství echinakosidu, přesně navažte 9,65 mg, vložte do odměrné baňky o objemu 25 ml, přidejte 50 %

methanol, aby se rozpustil a zředil po značku jako referenční zásobní roztok. Do 25ml odměrné baňky přesně napipetujte 1 ml zásobního roztoku echinakosidu, přidejte 50% methanol k naředění po značku, dobře protřepejte a připravte referenční roztok obsahující 14,17 ug na 1 ml [9].

2.1.3 Příprava zkušebního roztoku

Vezměte asi 0,5 g suchého pastového prášku, rozdrťte jej na prášek, přesně zvažte, vložte do hnědé kónické láhve se zátkou, přidejte přesně 50 ml 50% methanolu, pevně zazátkujte, dobře protřepejte, zvážíme, ošetříme ultrazvukem po dobu 40 min (výkon 250 W, frekvence 45 kHz), necháme vychladnout, znovu zvážíme, přidáme 50 % metanolu pro doplnění ztracené hmotnosti, dobře protřepeme, necháme odstát, odebereme supernatant, přefiltruje se a odebere se filtrát.

2.1.4 Příprava roztoku negativního vzorku

Vezměte asi 0,5 g prášku suché pasty vzorce bez vína Cistanche léčivých látek a připravte roztok negativního vzorku podle metody uvedené v „2.1.3“.

2.1.5 Test specifičnosti

Zkušební roztok, referenční roztok a roztok negativního vzorku přesně napipetujte a změřte podle chromatografických podmínek podle "2.1.1". Zaznamenejte chromatogram. Výsledky jsou znázorněny na obrázku 1. Neexistuje žádná interference s negativním vzorkem. Výsledky ukazují, že metoda má dobrou specificitu.

Obr. 1 Specifický chromatogram granulí Wenyang Tongbian

2.1.6 Šetření lineárních vztahů

Vezměte vhodné množství echinakosidu, přesně jej navažte na 10,11 mg, vložte do odměrné baňky o objemu 25 ml, přidejte 50% methanol pro zředění do série koncentrací referenčního roztoku a vstříkněte jej podle chromatografických podmínek podle „2.1. .1" k určení hodnoty plochy píku echinakosidu. Nakreslete standardní křivku s vstřikovaným množstvím referenčního echinakosidu jako horizontální osu (ug, X) a integrální hodnotou plochy píku jako vertikální osu (Y) a proveďte lineární regresi.

Regresní rovnice je Y=1,294×104X - 4,931×104, r=0,9997. Výsledky ukazují, že integrální hodnota plochy píku množství injektovaného echinakosidu je v dobrém lineárním vztahu mezi 1,4850 a 371,2392 ug.

2.1.7 Zkouška přesnosti

Přesně nasajte 10 μl referenčního roztoku (hmotnostní koncentrace 37,12 ug·mL－ 1) pod „2.1.6“, vstříkněte 6krát, zaznamenejte hodnotu plochy píku echinakosidu a vypočítejte hodnotu RSD na 1,1 %, což znamená že přístroj má dobrou přesnost.

2.1.8 Zkouška opakovatelnosti

Vezměte stejnou suchou pastu, rozdrťte ji na prášek, přesně odvažte 6 porcí, z nichž každá je asi 0,5 g, a vložte je do hnědé kónické láhve se zátkou. Extrahujte podle metody podle "2.1.3", určete obsah a vypočítejte. Výsledky ukazují, že průměrný obsah echinakosidu ve vzorku je 1,46 mg·g－ 1 a hodnota RSD je 2,7 %, což ukazuje, že opakovatelnost této metody je dobrá.

2.1.9 Zkouška stability

Vezměte stejný roztok vzorku, přesně odeberte 10 μl a vstříkněte jej během 0, 2, 4, 8, 12, 18 a 24 hodin, v daném pořadí. Hodnota RSD plochy píku je 0,71 %, což ukazuje, že roztok vzorku má dobrou stabilitu během 24 hodin.

2.1.10 Test obnovy vzorku

Přesně odvažte 6 porcí stejné šarže testovacích vzorků, každý 0,24 g, a vložte je do hnědé kónické láhve se zátkou. Podle hmotnostního poměru složek v testovaném vzorku 1:1 přesně přidejte 0,9 ml referenční látky echinacosidu (hmotnostní koncentrace je 371,24 ug·mL－ 1) pod "2.1.6". připraví se zkušební roztok podle metody podle "2.1.3", určí se chromatografická plocha píku echinakosidu a vypočte se obsah. Výsledky ukazují, že průměrná míra výtěžnosti echinakosidu je 101,09 % a hodnota RSD je 1,6 %.

2.2 Plán experimentu a indikátory hodnocení

Množství přidané vody (A), doba extrakce (B) a počet extrakcí (D) byly vybrány jako faktory, které měly být zkoumány. Byly nastaveny tři úrovně faktorů podle výsledků předchozího jednofaktorového šetření, viz tabulka 1. V experimentu byla použita ortogonální testovací tabulka L9 (34), viz tabulka 2. Test využíval výtěžnost pasty a obsah echinakosidu jako hodnotící indikátory pro zkoumání optimálního procesu extrakce vody.

Tab 1 Faktor a úroveň ortogonálního testu

2.2.1 Ortogonální test

Podle předpisového poměru odvažte 18 porcí každé léčivé příchuti, každá 55 g, a proveďte extrakci vodním odvarem podle ortogonálního schématu v tabulce 2. Každá skupina má 2 paralelní porce. Odvar se přefiltruje přes 80-síto, filtrát se spojí, ochladí, změří se objem odvaru, 50 ml se přesně odpipetuje do odpařovací misky, která se konstantně zváží a odpaří do sucha a suší se za sníženého tlaku při 60 stupních, aby se získal ortogonální experimentální vzorek suché pasty. Vypočítejte výtěžnost pasty (výtěžnost pasty=(hmotnost suché pasty × objem léčivé kapaliny) / (50 × hmotnost kusu odvaru) × 100 %). Podle chromatografických podmínek podle "2.1.1" a metody podle "2.1.3" bylo stanoveno extrakční množství echinakosidu v 9 skupinách ortogonálních testovacích extraktů. Množství extrahovaného echinakosidu=hmotnost suché pasty × obsah echinakosidu / hmotnost kusového odvaru vína Cistanche. Komplexní skóre=obsah echinakosidu ÷ maximální obsah × 0,5 × 100 % + výtěžek pasty ÷ maximální výtěžek pasty × 0,5 × 100 % [10]. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2.

Jak je uvedeno v tabulce 3, vezmeme-li jako hodnotící indikátory komplexní skóre výtěžku pasty a obsah echinakosidu, hodnota rozsahu R v tabulce ukazuje, že primární a sekundární účinky každého faktoru jsou D > B > A; výsledky analýzy rozptylu ukazují, že faktor D (doby odvaru) je statisticky významný (P < 0.05) a je zvolena hladina D3; faktor A (přídavek vody) a faktor B (doba odvaru) nejsou statisticky významné (P > 0,05). Vzhledem k tomu, že míra absorpce vody léčivých materiálů v tomto přípravku je relativně vysoká (155 %), a v kombinaci s faktory, jako jsou skutečné potřeby výroby, jsou optimální extrakční podmínky vybrány jako A2B1D3, to znamená přidání 10krát vody, odvar 3krát, pokaždé po dobu 1 hodiny.