Část 2: 3-Hydroxyfenyloctová kyselina: flavonoidní metabolit snižující krevní tlak

Pro více informací prosím kontaktujte:tina.xiang@wecistanche.com

Kliknutím na odkaz níže získáte část 1:https://www.xjcistanche.com/news/part1-3-kyselina-hydroxyfenyloctová-a-blood-pre{5}}.html

4. Diskuze

Screening různých fenolických metabolitůflavonoidyukázaly, že 4 z 22 byly silné vazodilatátory. V návaznosti na tyto výsledky,kardiovaskulárníúčinky 3-(3-hydroxyfenyl)propionové kyseliny, 34-dihydroxyfenyloctové kyseliny (DHPA) a 4-methylkatecholu byly potvrzeny in vivo a byly studovány možné mechanismy jejich působení ex vivo [14,15]. Další flavonoidní metabolit, 3-HPAA, byl dočasně vyloučen z dalšího zkoumání, protože nebyl schopen vyvolat úplnou relaxaci při počátečním screeningu krysí aorty. V této práci jsme se rozhodli rozšířit naše předchozí studie a zaměřit se také na 3-HPAA. Zaměřili jsme se na (1) potvrzení jeho vazodilatačního účinku jak in vivo u spontánně hypertenzních potkanů, tak ex vivo na jiném experimentálním modelu (prasečí koronární arteriální prstence) a (2) studium mechanismu tohoto účinku.

Kliknutím získáte další informace o produktu.

Vliv 3-HPAA na krevní tlak a srdeční frekvenci in vivo u SHR

Zatímco 3-HPAA byla v předchozím ex vivo screeningu [14] méně účinným vazodilatátorem, v rámci této práce bylo jasně potvrzeno, že je schopen snížitkrevní tlakin vivo u spontánně hypertenzních potkanů ​​po intravenózním podání. Při podání jako bolus se průměrný, systolický a diastolický krevní tlak snížil. Zcela neočekávaně byl významný účinek na diastolický krevní tlak pozorován již po velmi nízké dávce 10 ugs.kg-1. Rozsah této odpovědi byl relativně vysoký (přibližně 20 procent). S rostoucími dávkami 3-HPAA se účinek zvýšil jen mírně na přibližně 25 procent. Totéž platilo v případě systolického krevního tlaku, kdy došlo k výraznému poklesu (cca 15 procent) po dávce 100 ug.kg-I a maximální zjištěný pokles byl cca 25 procent. Mezi zvířaty existovala variabilita, která vedla k proměnlivým hodnotám; nicméně závislost účinku na dávce byla zřejmá. Naproti tomu po intravenózní bolusové aplikaci nebyly pozorovány žádné změny srdeční frekvence. To může znamenat, že srdce nebylo zapojeno do účinku snižujícího krevní tlak a účinek byl založen pouze na periferní relaxaci. Absence změn srdeční frekvence je důležitá také z bezpečnostního hlediska, protože zpětnovazební zvýšení srdeční frekvence způsobené sympatickým nervovým systémem, které následuje po výrazném poklesu arteriálního krevního tlaku, je klinicky nevhodné, jak bylo dobře popsáno u vápníku blokátor kanálů nifedipin [24].

V reálných situacích jsou střevní metabolity požitých flavonoidů kontinuálně absorbovány z GIT. Aby se to napodobilo, byly v jiné sadě experimentů podávány pomalé intravenózní infuze 3-HPAA různými rychlostmi. Analogicky k předchozí bolusové aplikaci byl pozorován pokles středního, systolického a diastolického krevního tlaku. Účinek byl závislý na dávce a významný účinek přinesly dávky 1 a 5 mg.kg-1·min-dosahující maximálně cca 50% pokles krevního tlaku. Opět nebyly pozorovány žádné významné změny srdeční frekvence během 5 minut trvající infuze ani během následujících 10 minut sledování zvířat.

Tento účinek na krevní tlak může mít skutečný dopad. Flavonoidy ze stravy se v tenkém střevě dosti špatně vstřebávají. Dostávají se do tlustého střeva a podléhají mikrobiálnímu metabolismu. Proces bakteriální degradace spočívá v redukci dvojné vazby v poloze 2,3- následované štěpením C-kruhu. Další krok závisí na přítomnosti nebo nepřítomnosti 3-hydroxylové skupiny. Flavony, které tento hydroxyl nemají, dávají vznik derivátům hydroxyfenylpropionové kyseliny, zatímco flavonoly s 3-hydroxylem dávají vznik derivátům hydroxyfenyloctových kyselin [25]. 3-HPAA však vzniká jako produkt štěpení prstenců pocházející z mikrobiálního katabolismu mnoha mateřských flavonoidů, nejen flavonolů, jako je např.kvercetin. Kromě toho důležitý metabolit s vazodilatační aktivitou, DHPA, dává po dehydroxylaci vznik 3-HPAA a v menší míře další vazorelaxační sloučenina, 3,4-kyselina dihydroxybenzoová/protokatechuová.{{3} }HPAA je dále katabolizována na vazoinaktivní kyselinu hippurovou a benzoovou (obrázek 1)[15,26]. Obecně platí, že malé metabolity flavonoidů vykazují vyšší plazmatické hladiny než jejich mateřské flavonoidy a mohou dosáhnout maximálních koncentrací obvykle v rozmezí 1 až 615 nM nebo v některých případech dokonce 42,9 uM [17]. Zdá se, že totéž platí pro 3-HPAA. Ve studiích na zvířatech vedlo podávání extraktu z bobulí Calafate (poskytujícího ~2,6 mg fenolických látek) žaludeční sondou pískomilům k maximálním plazmatickým koncentracím 3-HPAA cca. 300 nM po 4 hodinách [27]. Jiní autoři uvedli, že jediný 3-HPAA intravenózní bolus 2 a 4 mg. kg-Ito potkanů ​​vedlo k maximálním plazmatickým koncentracím přibližně 6 mg.l-1(~40 uM a 16 mg.l-1（~100 μM） 【28】. V naší studii byla maximální dávka intravenózně podaný bolus byl 10 mg.kg-1. Můžeme tedy odhadnout [28], že maximální dosažená plazmatická hladina by mohla být mezi 100 a 200 μM, což je 11-22krát více, než bylo fyziologicky zjištěno [17]. Důležité je, že významné účinky na diastolický krevní tlak byly pozorovány již při dávce 10 ug.kg-1, což by mohlo zhruba odpovídat dosažitelné koncentraci 100-200 nM. Analogicky platí pro podávání infuzí. Dávka 1 mg·kg-I.min- by mohla vést k plazmatické koncentraci zhruba 10 μM 【28】, což je v rozmezí celkových hladin produkovaných stravou [17]. dávku 5 mg.kg-.min-I by bylo obtížné dosáhnout stravou bohatou na polyfenoly a v tomto případě by se místo toho 3-HPAA mohla použít jako lék nebo doplněk. Extrapolace zvířete data lidem není snadné; tyto koncentrace jsou však u lidí dosažitelné po konzumaci stravy bohaté na flavonoidy a mohou být spojeny s účinkem na cévní systém[17]. Kinetická data o 3-HPAA jsou bohužel stále omezená. 8-týdenní placebem kontrolovaná dietní studie se 72 účastníky ukázala významné zvýšení plazmatických hladin 3-HPAA (z~180 na~250 nM) po konzumaci bobulí, což poskytlo přibližně 837 mg polyfenolů na den. Kromě toho došlo také ke zvýšení vylučování 3-HPAA močí o 87 procent [29]. Další studie odhalila 60 různých fenolických metabolitů v plazmě a moči u 10 dobrovolníků po konzumaci brusinkové šťávy obsahující 787 mg polyfenolů. 3-HPAA byla mezi metabolity stanovenými v plazmě a dosáhla maximální koncentrace ~600 nM přibližně po 10 hodinách [17]. Další kinetická studie s devíti zdravými mladými muži ukázala, že biologická dostupnost (poly)fenolů nezávisí pouze na přijatém množství. Množství 766 mg polyfenolů vedlo k maximálním plazmatickým koncentracím 3-HPAA ~260 nM, zatímco požití více než dvojnásobného množství vedlo k ještě nižším hladinám (~240 nM) [30]. Nicméně v obou případech dosáhly plazmatické koncentrace zhruba 250 nM.

Mechanismus vaskulárních účinků 3-HPAA studovaných ex vivo

Provedli jsme vyhledávání dat v databázi PubMed s klíčovým slovem „3-kyselina hydroxyfenyloctová“. Analýza 110 nalezených článků nám umožnila dojít k závěru, že údaje o farmakokinetice 3-HPAA jsou omezené a farmakodynamické studie naše nejlepší znalosti neexistují. Pouze jedna studie ukázala, že 3-HPAA snižuje hladiny proteinu COX-2 v buňkách rakoviny tlustého střeva, ale bez vlivu na produkci PGE2 [31].

Stejně jako v našich experimentech in vivo 3-HPAA snižoval krevní tlak v závislosti na dávce a neměl žádný vliv na srdeční frekvenci, předpokládali jsme, že mechanismus pozorovaných účinků by mohl spočívat v přímém působení 3-HPAA na vaskulatuře. Proto jsme provedli různé komplementární ex vivo experimenty, abychom prozkoumali mechanismus účinku. Vzhledem k tomu, že v České republice je zjevný apel na snížení používání laboratorních zvířat v souladu s 3R (Replacement, Reduction, and Refinement), zvolili jsme alternativní model spočívající v použití prasečích koronárních tepen z čerstvých srdcí, které byly získané z místních jatek. Tento model nebyl optimální. Za prvé, vazodilatace byla pozorována v mnohem vyšší koncentraci než v krysí aortě, a za druhé, tato koncentrace je zhruba 100krát vyšší než koncentrace dosažitelná dietou [17]. Bez ohledu na toto omezení nám toto nastavení umožnilo vidět rozdíly mezi experimentálními skupinami, a proto posloužilo dostatečně pro stanovení mechanismu účinku. Na druhou stranu výhodou bylo, že prasata a lidé zjevně sdílejí četné podobnosti týkající se kardiovaskulárního systému [32]. Bylo prokázáno, že 3-HPAA vyvolává ex vivo vazodilataci prasečích koronárních arterií závislou na dávce. Tento účinek byl alespoň částečně zprostředkován endotelem s účastí z endotelu odvozeného NO. Na rozdíl od NO jsme nepotvrdili účast endoteliálních M receptorů, COX, SKca a IKca kanálů, ani přímé účinky na Cay1.2 kanály hladkého svalstva (L-typ).

NO byl dříve označován jako relaxační faktor odvozený od endotelu a jeho role ve fyziologii cév je dobře známá. Stručně řečeno, po syntéze pomocí eNOS v endoteliálních buňkách NO difunduje do buněk hladkého svalstva cév, kde aktivuje rozpustnou guanylátcyklázu (sGC) a dráhu cGMP-PKG (obrázek 8). PKG zase aktivuje různé Kt kanály přítomné na hladkém svalu, jmenovitě kalciem aktivované (BKca) s velkou vodivostí, ATP-senzitivní (KATP), vnitřní usměrňovač (KIR) a napěťově řízené (Kv), čímž umožňuje přenos K plus iontů. To vede ke zvýšení negativního membránového potenciálu s následnou inhibicí napěťově řízených kalciových kanálů (hlavně typu L) a blokádou extracelulárního Ca2 plus influxu. Hladiny intracelulárního Ca2 plus jsou také regulovány aktivací SERCA buď pomocí PKG nebo přímo NO [33] a inhibicí kanálů IP3R. Nedostatek účinků zprostředkovaných NO souvisí s různými patologiemi. Snížená exprese a aktivita eNOS byla nalezena v aortách z SHR 34 a narušená produkce NO byla prokázána v buňkách endoteliálního a vaskulárního hladkého svalstva z mezenterických tepen a aorty geneticky modifikovaných hypertenzních potkanů ​​[35]. Ve studiích na lidech byla u pacientů s esenciální hypertenzí hlášena abnormální endoteliální funkce [36]. Endoteliální dysfunkce byla spojena se zhoršenou vaskulární biologickou dostupností NO[37], aniž by bylo specifikováno, zda je tento mechanismus založen na snížení syntézy, uvolňování nebo difúze NO. Nedávno předpokládané mechanismy také zahrnují zvýšení oxidačního stavu, který podporuje rozklad NO [38,39]. Výše popsané mechanismy tedy mohou přispívat k vazodilatačnímu účinku 3-HPAA (obrázek 8) a jeho potenciálním ochranným vaskulárním účinkům. Důležité je, že to může být důvodem velkých rozdílů mezi velmi vysokou citlivostí SHR na vazodilatační účinky 3-HPAA a nízkou citlivostí zdravých koronárních cév ze srdcí prasat, i když tato teorie musí být potvrzena v dalších studiích.

Pokud je to pravda, vyvstává otázka 3-HPAA-indukované NOsyntézy. Hodnota pKa 3-HPAA je 4, což znamená, že při fyziologickém pH je látka většinou ionizována. To brání pasivnímu transmembránovému transportu; přítomnost transportního systému však nebyla ověřena a nelze ji vyloučit. Aktivace eNOS je často spouštěna zvýšením cytosolického Ca2t. ​​V našich experimentech nebyla 3-HPAA vazodilatace závislá na aktivitě endoteliálních IKCa a SKCa kanálů. Protože oba tyto kanály jsou citlivé na Ca2 plus [40, předchozí zvýšení hladin cytoplazmatického Ca2 plus není pravděpodobné. Endoteliální M-receptory, což jsou GPCR spojené s DAG druhého posla plus IP,/PKC plus cytosolický Ca2 plus zvýšení, tedy nebyly zapojeny, protože jejich blokáda atropinem nemodifikovala vazodilataci způsobenou 3-HPAA . Toto pozorování spolu se skutečností, že nedošlo k žádným změnám srdeční frekvence u potkanů, naznačuje, že přímá cholinomimetická aktivita pro 3-HPAA je nepravděpodobná. Je třeba poznamenat, že existuje velká homologie v muskarinových receptorech popsaných u savců: M1 až Ms u potkanů ​​a M1 až M u prasat odhalily homologii větší než 90 procent s lidskými aminokyselinovými sekvencemi těchto receptorů [41]. V neposlední řadě mohou endoteliální vazodilataci kromě NO zprostředkovávat i další endoteliální produkty, mezi nimi mediátor z prostacyklinu s cyklooxygenázovou dráhou (PGI2). V případě 3-HPAA to není pravděpodobné, protože přítomnost indometacinu, blokátoru cyklooxygenázy, neměla žádný účinek.

Dříve jsme studovali další důležitý metabolit tlustého střeva, DHPA, na potkaní aortě ex vivo. Jeho vazodilatační účinek byl také částečně závislý na endotelu, ale se zapojením endoteliálních IKc.kanálů a COX, tedy závislý na kabeláži [15]. To by znamenalo, že vazodilatační metabolity flavonoidů v tlustém střevě mohou působit různými mechanismy účinku. V reálných podmínkách může přítomnost různých mechanismů a souhra několika metabolitů tlustého střeva usnadnit vazodilataci. Tato hypotéza je v souladu s naší in vivo studií na směsích metabolitů tlustého střeva [42]. Je zajímavé, že některé studie prokázaly, že původní flavonoid, kvercetin, je také vazoaktivní. Aktivuje eNOS a tento účinek je zprostředkován zvýšením cytosolického Ca2, následně aktivací Ca2 plus -aktivovaných K kanálů, hlavně SKca, a způsobuje hyperpolarizaci endoteliálních buněk [43,44]. Quercetin tedy působí jiným způsobem. Nicméně biologická dostupnost parentkvercetinje nízká [45,46], a proto její přímý vliv na vazodilataci pravděpodobně není rozhodující.

Výzkum publikovaný v tomto článku má několik omezení. Například prasečí koronární arterie není rezistentní céva, zatímco účinek na snížení arteriálního krevního tlaku je pravděpodobně spojen s dilatací rezistentních cév. Podání jednorázového bolusu nebo dokonce pomalé iv infuze nenapodobuje skutečný scénář expozice, ve kterém lidé požijí více dávek flavonoidů, zejména ve forměglykosidy, přes den. Plazmatický profil metabolitů se tedy může lišit. Důležité je, že požité flavonoidy nejsou metabolizovány na jeden, ale na směs metabolitů. Mnohé z nich mohou být vazoaktivní a souhra mezi nimi ovlivňuje výsledný efekt. Kromě toho ivaplikace neumožňuje posoudit úlohu střevní mikroflóry a variabilitu v produkci 3-HPAA a dalších metabolitů z mateřských flavonoidů. Budoucí studie by se měly pokusit řešit tyto problémy, aby lépe porozuměly bioaktivitě a mechanismu účinku 3-HPAA v kardiovaskulárním systému, včetně možné role NO.

5. Závěry

Údaje poskytly silný důkaz, žeflavonoidmetabolit, 3-HPAA, tvořený lidskou střevní mikroflórou, je vazoaktivní a snižuje krevní tlak. Kromě toho výsledky naznačují, že snížení krevního tlaku lze dosáhnout v dosažitelných koncentracích. Spolu s těmito zjištěními jsme prokázali, že hypotenzní účinek nebyl výsledkem přímého působení na srdce, ale byl pravděpodobněji založen na cévách. A konečně, 3-HPAA-indukovaná vazodilatace byla, alespoň částečně, zprostředkována endotelem, kde mohou hrát roli účinky závislé na NO.

Doplňkové materiály: Následující podpůrné informace lze stáhnout na adrese: https://www.mdpi.com/article/1{{10}}.339{{20}}/nul4020328/s1. Obrázek S1. Změny průměrného krevního tlaku po bolusovém podání 3-HPAA. Obrázek S2. Změny srdeční frekvence po iv bolusovém podání 3-HPAA. Obrázek S3. Účinek 3-infuzí HPAA (0,05, 0,25,1 a 5 mg.kg-1min-1) na systolický, diastolický a střední krevní tlak u spontánně hypertenzních potkanů. Obrázek S4. Vliv 3-infuzí HPAA (0,05, 0,25,1 a 5 mg.kg-1.min-l) na srdeční frekvenci u spontánně hypertenzních potkanů.

Reference

1. Světová zdravotnická organizace. Dostupné online: https://www.who.int/health-topics/cardiovascular-diseases#tab=tab_1 (vstup 10. listopadu 2021).

2. Viseren, FLJ; Mach, F.; Smulders, YM; Carballo, D.; Koskinas, KC; Bäck, M.; Benetos, A.; Biffifi, A.; Boavida, J.-M.; Capodanno, D.; a kol. 2021 Směrnice ESC o prevenci kardiovaskulárních onemocnění v klinické praxi: Vypracováno pracovní skupinou pro prevenci kardiovaskulárních onemocnění v klinické praxi se zástupci Evropské kardiologické společnosti a 12 lékařských společností se zvláštním přispěním Evropské asociace preventivní kardiologie (EAPC). Eur. Srdce J. 2021, 42, 3227–3337. [CrossRef]

3. Vasan, RS; Beiser, A.; Seshadri, S.; Larson, MG; Kannel, WB; D'Agostino, RB; Levy, D. Zbytkové celoživotní riziko rozvoje hypertenze u žen a mužů středního věku: The Framingham Heart Study. JAMA 2002, 287, 1003–1010. [CrossRef]

4. Whelton, SP; McEvoy, JW; Shaw, L.; Psatý, BM; Lima, JAC; Budoff, M.; Nasir, K.; Szklo, M.; Blumenthal, RS; Blaha, MJ Asociace normální hladiny systolického krevního tlaku s kardiovaskulárním onemocněním při absenci rizikových faktorů. JAMA Cardiol. 2020, 5, 1011–1018. [CrossRef]

5. Jepps, TA Odhalení složitosti iontových kanálů hladkého svalstva cév: Jemné doladění aktivity pomocí pomocných podjednotek. Pharmacol. Ther. 2017, 178, 57–66. [CrossRef]

6. Del Bo, C.; Bernardi, S.; Marino, M.; Porrini, M.; Tucci, M.; Guglielmetti, S.; Cherubini, A.; Carrieri, B.; Kirkup, B.; Kroon, P.; a kol. Systematický přehled příjmu polyfenolů a zdravotních výsledků: Existuje dostatek důkazů pro definování zdravého stravovacího režimu bohatého na polyfenoly? Živiny 2019, 11, 1355. [CrossRef]

7. Panche, AN; Diwan, AD; Chandra, SR Flavonoidy: Přehled. J. Nutr. Sci. 2016, 5, e47. [CrossRef]

8. Mládenka, P.; Zatloukalová, L.; Filipský, T.; Hrdina, R. Kardiovaskulární účinky flflavonoidů nejsou způsobeny pouze přímou antioxidační aktivitou. Volný Radic. Biol. Med. 2010, 49, 963–975. [CrossRef] [PubMed]

9. Cassidy, A.; Minihane, A.-M. Úloha metabolismu (a mikrobiomu) při definování klinické účinnosti dietních flavonoidů. Dopoledne. J. Clin. Nutr. 2016, 105, 10–22. [CrossRef]

10. Williamson, G.; Kay, CD; Crozier, A. Biologická dostupnost, transport a bioaktivita dietních flavonoidů: Přehled z historické perspektivy. Kompr. Rev. Food Sci. Jídlo Saf. 2018, 17, 1054–1112. [CrossRef] [PubMed]

11. Thilakarathna, SH; Rupasinghe, biologická dostupnost flavonoidů HPV a pokusy o zvýšení biologické dostupnosti. Živiny 2013, 5, 3367–3387. [CrossRef] [PubMed]

12. Griffiths, LA; Smith, GE Metabolismus myricetinu a příbuzných sloučenin u potkanů. Tvorba metabolitů in vivo a střevní mikroflórou in vitro. Biochem. J. 1972, 130, 141–151. [CrossRef]

13. Booth, AN; Listiny, F.; Jones, FT; Murray, CW Metabolický osud rutinu a kvercetinu v těle zvířat. J. Biol. Chem. 1956, 223, 251–257. [CrossRef]

14. Najmanová, I.; Pourová, J.; Vopršalová, M.; Pilaˇrová, V.; Semecký, V.; Nováková, L.; Mladˇenka, P. Flavonoidní metabolit 3-(3- hydroxyfenyl)propionová kyselina tvořená lidskou mikroflórou snižuje arteriální krevní tlak u potkanů. Mol. Nutr. Food Res. 2016, 60, 981–991. [CrossRef]

15. Pourová, J.; Najmanová, I.; Voprsalová, M.; Migkos, T.; Pilarová, V.; Applová, L.; Nováková, L.; Mladenka, P. Dva flavonoidní metabolity, 3,4-dihydroxyfenyloctová kyselina a 4-methylkatechol, uvolňují tepny ex vivo a snižují krevní tlak in vivo. Vascul. Pharmacol. 2018, 111, 36–43. [CrossRef]

16. Appeldoorn, MM; Vincken, J.-P.; Aura, A.-M.; Hollman, PCH; Gruppen, H. Prokyanidinové dimery jsou metabolizovány lidskou mikrobiotou s 2-(3,{5}}dihydroxyfenyl)octovou kyselinou a 5-(3,4-dihydroxyfenyl)- - valerolakton jako hlavní metabolity. J. Agric. Food Chem. 2009, 57, 1084–1092. [CrossRef]

17. Feliciano, RP; Boers, A.; Massacesi, L.; Istas, G.; Ventura, MR; Nunes Dos Santos, C.; Heiss, C.; Rodriguez-Mateos, A. Identifikace a kvantifikace nové plazmy a močových (poly)fenolů pocházejících z brusinek. Oblouk. Biochem. Biophys. 2016, 599, 31–41. [CrossRef]

18. Guadamuro, L.; Jiménez-Girón, AM; Delgado, S.; Flórez, AB; Suárez, A.; Martín-Álvarez, PJ; Bartolomé, B.; Moreno-Arribas, MV; Mayo, B. Profilování fenolických metabolitů ve stolici u žen v menopauze po dlouhodobé suplementaci isoflavonem. J. Agric. Food Chem. 2016, 64, 210–216. [CrossRef] [PubMed]

19. Olthof, MR; Hollman, PC; Buijsman, MN; van Amelsvoort, JM; Katan, MB kyselina chlorogenová, kvercetin-3-rutinosid a fenoly z černého čaje jsou u lidí extenzivně metabolizovány. J. Nutr. 2003, 133, 1806–1814. [CrossRef] [PubMed]

20. Serra, A.; Macia, A.; Romero, M.-P.; Anglés, N.; Morelló, J.-R.; Motilva, M.-J. Metabolické dráhy metabolismu prokyanidinů (monomerů a dimerů) a alkaloidů v tlustém střevě. Food Chem. 2011, 126, 1127–1137. [CrossRef] 21. Rechner, AR; Smith, MA; Kuhnle, G.; Gibson, GR; Debnam, ES; Srai, SK; Moore, KP; Rice-Evans, CA Metabolismus dietních polyfenolů v tlustém střevě: Vliv struktury na produkty mikrobiální fermentace. Volný Radic. Biol. Med. 2004, 36, 212–225. [CrossRef] [PubMed]

22. Serra, A.; Macia, A.; Romero, M.-P.; Regulant, J.; Ortega, N.; Motilva, M.-J. Metabolické dráhy střevního metabolismu flavonoidů (flavonoly, flavony a flavanony) a fenolových kyselin. Food Chem. 2012, 130, 383–393. [CrossRef]

23. Liu, C.; Vervoort, J.; Beekmann, K.; Baccaro, M.; Kamelia, L.; Wesseling, S.; Rietjens, IMCM Interindividuální rozdíly v lidské střevní mikrobiální konverzi (−)-epikatechinu na bioaktivní fenolické sloučeniny. J. Agric. Food Chem. 2020, 68, 14168–14181. [CrossRef] [PubMed]